LÝ SINH ĐẠI CƯƠNG - MỘT SỐ ỨNG DỤNG TRONG NÔNG - SINH - Y HỌC ppsx

437 MỘT SỐ ỨNG DỤNG TRONG NÔNG –SINH- Y HỌC 438 1. Điện di (Electrophoresis) a) Nguyên lý: Dựa trên những tính chất hóa lý của biopolymer như sau:  Có phân tử lượng khác nhau  Mang điện tích nhất định đặc trưng.  Khi pH của môi trường thay đổi thì điện tích nầy cũng thay đổi theo. 439 Sự thay đổi nầy của các biopolymer khác nhau không như nhau . Do đó có thể chọn pH thích hợp để điện tích của biopolymer cần tách có điện tích khác nhau nhiều nhất. Dưới tác động của điện trường chúng sẽ chuyển động trên các giá (giấy hoặc gel) Vận tốc nầy không những tùy thuộc vào điện tích mà còn vào kích thước biopolymer và mao quản (capillar) của giá. Kết quả chúng sẽ được phân đoạn theo loại trên giá 440 b) Các loại điện di:  Macroelectrophoresis: - Điện di trên giấy (paper Electrophoresis) - Điện di trên thạch (Gel Electrophoresis) Mô phỏng quá trình điện di như sau: (Demo 1: Electrophoresis ) Standar # 1 beta-Galactosidase Standar # 2 Ovalbumin Standar # 3 Carbonic Anhydrasae Standar # 4 Troise Phophate Isomerase Standar # 5 Myoglobin Standar # 6 Lysozyme 441 Unknown# 1 Aconitase 82512 Unknown# 2 Conconavalin A 25556 Unknown# 3 Glucose Oxydase 63058 Unknown# 4 Neuraminidase 43505 Unknown# 5 Phosphorylase b 26527 Unknown# 6 Pyruvate Kinase 56773 Unknown# 7 Ribonuclease A 13673 Unknown# 8 Chymotrypsinogen 23564 Unknown# 9 p-Hydroxybensoate43939 Unknown# 10 Ribonuclease H 16638 442 Thí dụ về tách các protein khác nhau: Thường sử dụng SDS-PAGE : (SDS: Sodium Dodecyl Sulfate ) (PAGE : PolyAcrylamide Gel Electrophoresis) Phương pháp nầy gồm 2 phần: SDS và PAGE - Phần SDS Nhiệm vụ của phần nầy là phá vỡ (denaturation) các cấu trúc từ bậc 2 trở lên của Protein 443 Chúng đều tích điện âm Trước khi phá vỡ cấu trúc,các nhóm kỵ nước giấu vào trong, nhóm háo nước hướng ra ngoài Sau khi SDS thì Protein chỉ còn cấu trúc bậc nhất 444 - Phần PAGE Polymer hóa Acrylamide thành Gel Các lỗ có đường kính khác nhau 445 Dưới tác độâng của diện trường, các Protein chuyển về Anod Tuy nhiên do kích thước khác nhau nên tốc độ dịch chuyển của chúng cũng khác nhau 446 Kết quả chúng sẽ bị tách theo phân tử lượng của chúng . 437 MỘT SỐ ỨNG DỤNG TRONG NÔNG SINH- Y HỌC 438 1. Điện di (Electrophoresis) a) Nguyên lý: Dựa trên những tính chất hóa lý của biopolymer như sau:  Có phân tử lượng. nhau: Thường sử dụng SDS-PAGE : (SDS: Sodium Dodecyl Sulfate ) (PAGE : PolyAcrylamide Gel Electrophoresis) Phương pháp n y gồm 2 phần: SDS và PAGE - Phần SDS Nhiệm vụ của phần n y là phá vỡ (denaturation). 451 Capillary có :Þ 2 0-7 0 µm, dài 0, 5-1 m Điện thế : 2 0-3 0 kV 452 Bộ phận cảm ứng (Detector) nằm gần phía Anode Nó đa dạng: UV, fluorecence, electrochemistry . . . Nó ghi nhận các phân đọan ngay trong