tóm tắt luận án tiến sĩ nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính sinh học của 3 loài cây thuộc họ thầu dầu (euphorbiaceae) ở việt nam

Trong khuôn khổ của dự án Pháp - Việt Nghiên cứu hóa thực vật thảm thực vật Việt Nam, 3 loài cây thuộc họ Thầu dầu Euphorbiaceae của Việt Nam là cây Cách hoa đông dương Cleistanthus indo

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM

VIỆN HÓA HỌC -o0o -

TRỊNH THỊ THANH VÂN

NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC

VÀ HOẠT TÍNH SINH HỌC CỦA 3 LOÀI CÂY THUỘC HỌ THẦU DẦU (EUPHORBIACEAE) Ở VIỆT NAM

Chuyên ngành: Hóa hữu cơ

Mã số: 62.44.27.01

TÓM TẮT LUẬN ÁN TIẾN SĨ HÓA HỌC

HÀ NỘI - 2011

Công trình được hoàn thành tại: Phòng Tổng hợp hữu cơ, Viện Hóa sinh biển,

Viện Khoa học và Công nghệ Việt Nam

CÁC CÔNG TRÌNH CÔNG BỐ LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN ÁN

1 Trinh Thi Thanh Van, PhamVan Cuong, Francoise Gueritte, Marc Litaudon

and NguyenVan Hung, “New β-sitosterol derivative from Cleistanthus

indochinensis (Euphorbiaceae)”, International Science conference on “Chemistry for development and integration”, 12-14 September 2008, Hanoi VAST-

Proceeding, Publishing hause for scienceand technology, pp 266-271

2 Trịnh Thị Thanh Vân, Phạm Văn Cường, Đoàn Thi Mai Hương, Marc

Litaudon, Nguyễn Văn Hùng (2009) “Nghiên cứu thành phần hóa học cây Săng

bù (Macaranga kurzii – Euphorbiaceae)”, Tạp chí Hóa học, 47(4A), tr 488 – 491

3 Trịnh Thị Thanh Vân, Phạm Văn Cường, Đoàn Thi Mai Hương, Marc

Litaudon, Nguyễn Văn Hùng (2009) “Nghiên cứu thành phần hóa học cây Săng

bù (Macaranga kurzii – Euphorbiaceae)”, Tạp chí Hóa học, 47(6B), tr 198 – 202

4 Trịnh Thị Thanh Vân, Nguyễn Thùy Linh, Phạm Văn Cường, Đoàn Thi Mai

Hương, Marc Litaudon, Nguyễn Văn Hùng, Châu Văn Minh (2010) “Nghiên cứu

phân lập các chất flavonoit từ quả cây Bạch đàn nam “Macaranga taranius”, Tạp

chí Hóa học, 48(4B), tr 418-423

5 Châu Văn Minh, Nguyễn Văn Hùng, Phạm Văn Cường, Đoàn Thi Mai Hương,

Nguyễn Thị Minh Hằng, Trịnh Thị Thanh Vân, Nguyễn Thùy Linh, Marc

Litaudon, Đào Đình Cường (2010) “Một số kết quả tiêu biểu về nghiên cứu thành

phần hóa học chi Cleistanthus và chi Macaranga họ Thầu dầu, Hội nghị Khoa học

kỷ niệm 35 năm Viện Khoa học và Công nghệ Việt nam, tr 109 – 114

6 Van Trinh Thi Thanh, Van Cuong Pham, Hung Huy Nguyen, Huong Doan

Thi Mai, Hang Nguyen Thi Minh, Van Hung Nguyen, Marc Litaudon, Francoise Gueritte ang Van Minh Chau (2011) “Cleistanone: A triterpenoid from

Cleistanthus indochinensis with a new carbon skeleton”, , Eur J Org Chem., pp

4108-4111

7 Van Trinh Thi Thanh, Van Cuong Pham, Huong Doan Thi Mai, Hang

Nguyen Thi Minh, Van Hung Nguyen, Marc Litaudon, Francoise Gueritte and Van Minh Chau, “Cleistantoxin from fruits of and synthesis of its derivatives”,

Tetrahedron letters (đã chấp nhận đăng)

I GIỚI THIỆU LUẬN ÁN

1 Đặt vấn đề

Họ Thầu dầu (danh pháp khoa học là Euphorbiaceae) hay còn gọi là họ Đại kích

là một họ lớn của thực vật có hoa với 240 chi và khoảng 6000 loài

Trong khuôn khổ của dự án Pháp - Việt (Nghiên cứu hóa thực vật thảm thực vật Việt Nam), 3 loài cây thuộc họ Thầu dầu (Euphorbiaceae) của Việt Nam là cây Cách

hoa đông dương (Cleistanthus indochiensis), cây Săng bù (Macaranga kurzii) và cây Bạch đàn nam (Macaranga tanarius) đã được thu hái, định tên và thử sơ bộ hoạt tính gây

độc tế bào trên dòng tế bào KB tại Viện Hóa học các hợp chất thiên nhiên (CNRS - Cộng hòa Pháp) Kết quả cho thấy, dịch chiết etylaxetat của lá và quả cây Cách hoa đông dương, quả cây Bạch đàn nam, lá cây Săng bù ức chế tương ứng 30 %, 94 %, 62,7 % và 21,6 % sự phát triển của tế bào ung thư KB ở 1µg/ml Vì vậy, 3 loài thực vật trên được lựa chọn làm đối tượng nghiên cứu của luận án

2 Nhiệm vụ của luận án

1 Thu hái mẫu thực vật, xác định tên khoa học của chúng và xử lý mẫu

2 Điều chế các cặn chiết từ các mẫu thực vật

3 Phân tách các cặn chiết và thử hoạt tính sinh học các phân đoạn phân lập được

4 Xác định cấu trúc của các hợp chất phân lập được

5 Bán tổng hợp một số chất phân lập được nhằm tạo ra các chất có hoạt tính tốt hơn hoặc có giá trị sử dụng cao hơn

6 Cuối cùng là khảo sát hoạt tính sinh học của các chất phân lập cũng như chất tổng hợp được để làm cơ sở khoa học định hướng cho các chất này

3 Ý nghĩa khoa học và những đóng góp mới của luận án

3.1 Ý nghĩa khoa học

- Luận án đã đóng góp những hiểu biết mới về thành phần hóa học của các

loài Cách hoa đông dương (Cleistanthus indochiensis), cây Săng bù (Macaranga kurzii) và cây Bạch đàn nam (Macaranga tanarius) của Việt

Nam

- Ứng dụng phương pháp mới trong nghiên cứu cấu trúc tinh thể của hợp chất hữu cơ

3.2 Những đóng góp mới của luận án

Luận án là công trình đầu tiên hoàn thành được các nghiên cứu sau:

1 Lần đầu tiên lá và quả loài Cách hoa đông dương (Cleistanthus

indochiensis), lá Săng bù (Macaranga kurzii) và quả cây Bạch đàn nam

(Macaranga tanarius) của Việt Nam được nghiên cứu về thành phần hóa

học và thử hoạt tính sinh học (ở đây là hoạt tính gây độc tế bào và hoạt tính

ức chế enzym acetylcholinesterase)

2 Bốn hợp chất mới là cleistanone, cis-p-cumaroyl epifriedelanol, cumaroyl-β-sitosterol, trans-p-cumaroyl epifriedelanol và 9 hợp chất đã biết

trans-p-được phân lập từ lá loài Cách hoa đông dương Đáng chú ý là hợp chất cleistanone có khung triterpenoid mới, cấu trúc của hợp chất này đã được khẳng định bằng phương pháp nhiễu xạ tia X

3 Từ quả loài Cách hoa đông dương, 11 hợp chất cũng đã phân lập và xác định cấu trúc, trong đó có 9 hợp chất mới, là các hợp chất được đặt tên là cleistantoxin, demethoxycleistantoxin, podocleistantoxin, cleindoside A, cleindoside B, cleindoside C, cleindoside D, cleindoside E, cleindoside F

4 Từ nguyên liệu đầu là hợp chất cleistantoxin, 8 dẫn xuất amide đã được tổng hợp với việc tạo liên kết C-C thay vì liên kết C-O và sự biến đổi vòng lacton, đây là các hợp chất mới

5 4 hợp chất có cấu trúc mới được đặt tên là macakurzin A, macakurzin B, macakurzin C, macakurzin D , và 13 hợp chất đã biết được phân lập và xác định cấu trúc từ lá cây Săng bù

6 3 hợp chất mới là macatanarin A, macatanarin B, macatanarin C và 5 hợp chất đã biết được phân lập từ quả cây Bạch đàn nam

7 Các hợp chất phân lập và bán tổng hợp được thử hoạt tính gây độc tế bào trên dòng

tế bào KB, Trong đó đặc biệt hợp chất cleitantoxin là hợp chất chính trong

quả cây Cách hoa đông dương cho hoạt tính ức chế rất mạnh trên 4 dòng tế bào ung thư thử nghiệm là KB, MCF7, MCF7R và HT29 với các giá trị IC50trong khoảng 14 – 36 nM Đặc biệt hợp chất này ức chế chọn lọc dòng tế bào ung thư vú kháng thuốc (MCF7R: IC50 14 nM) khi so sánh với dòng ung thư vú thường (MCF7: IC50 36 nM)

Ngoài ra, luận án còn có phần phụ lục 210 trang gồm các phổ của các hợp chất phân lập được

II NỘI DUNG LUẬN ÁN ĐẶT VẤN ĐỀ

Phần đặt vấn đề cập đến ý nghĩa khoa học, tính thực tiễn, đối tượng và nhiệm vụ nghiên cứu của luận án

CHƯƠNG I: TỔNG QUAN

Giới thiệu sơ lược về thực vật học của họ Thầu dầu (Euphorbiaceae) và 2 chi liên

quan đến luận án là chi Cách hoa (Cleistanthus) và chi Mã rạng (Macaranga)

Tổng hợp các tài liệu quốc tế nghiên cứu về hóa học và hoạt tính sinh học của các

loài Cleistanthus và Macaranga

Giới thiệu về thực vật học và tổng hợp các nghiên cứu về hóa học và hoạt tính sinh

học của 3 loài cây nghien cứu là Cách hoa đông dương (Cleistanthus indochiensis), Săng bù (Macaranga kurzii) và cây Bạch đàn nam (Macaranga tanarius)

CHƯƠNG II: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

2.1 Mẫu thực vật

Mẫu lá và quả loài Cách hoa đông dương (Cleistanthus indochinensis) được thu

hái tại huyện Quỳ Châu, tỉnh Nghệ An, vào tháng 5 năm 2003

Mẫu lá cây Săng bù (Macaranga kurzii) được thu hái tại huyện Trạm Tấu, tỉnh

Yên Bái ngày 06 tháng 3 năm 2001

Quả cây Bạch đàn nam (M.tanarius) được thu hái tại Á Lưới, tỉnh Thừa Thiên

Huế ngày 22 tháng 5 năm 2005

Cả 3 loài trên được Ths Nguyễn Quốc Bình (Bảo tàng thiên nhiên - Viện KH &

CN Việt Nam) định tên Mẫu tiêu bản được lưu giữ tại phòng Thực vật - Viện Sinh thái và Tài nguyên Sinh vật - Viện KH & CN Việt Nam

2.2 Phương pháp xử lý và chiết mẫu

Các mẫu thực vật sau khi thu hái đều được xử lý theo một quy trình như sau:

Mẫu thực vật sau khi thu hái được thái nhỏ, phơi trong bóng râm và sấy khô ở nhiệt độ 45-500C, sau đó được nghiền nhỏ Bột mẫu khô được ngâm chiết với

CH2Cl2 (hoặc EtOAc), sau đó là với MeOH Dịch chiết sau đó được cất loại dung môi dưới áp suất thấp để nhận được các cặn chiết thô tương ứng

2.3 Các phương pháp phân tích, phân tách các hỗn hợp và phân lập các hợp chất

Để phân tích và phân tách các phần chiết của cây cũng như phân lập các hợp chất

đã sử dụng các phương pháp sắc kí như: sắc ký lớp mỏng (TLC, dùng để khảo sát), sắc ký cột thường (CC) và sắc ký cột nhanh với pha tĩnh là silica gel (Merck) và Sephadex LH-20 và dung môi rửa giải là hỗn hợp các dung môi thường dùng như n-hexan, diclometan, etylaxetat, axeton và metanol

2.4 Các phương pháp xác định cấu trúc của các hợp chất phân lập được

Cấu trúc của các hợp chất được xác định bằng sự kết hợp của các dữ kiện thu được từ các phương pháp phổ như: quang phổ hồng ngoại (FT-IR), phổ khối va chạm electron (EI-MS), phổ khối phân giải cao (HRMS) và các phương pháp phổ cộng hưởng từ hạt nhân gồm phổ một chiều (1

H NMR, 13C NMR và DEPT) và phổ 2 chiều

(COSY, HSQC, HMBC và NOESY) Trong một số trường hợp có sử dụng phương pháp nhiễu xạ tia X đơn tinh thể để khẳng định lại cấu trúc của hợp chất

2.5 Phương pháp thử hoạt tính gây độc tế bào

Hoạt tính gây độc tế bào được tiến hành tại Viện hóa học các hợp chất thiên nhiên (CH-Pháp) và tại Viện Hóa học – Viện Khoa học và Công nghệ Việt nam

CHƯƠNG III: THỰC NGHIỆM

Chương này đã mô tả chi tiết các quá trình:

Xử lý các mẫu thực vật của 3 loài Cách hoa đông dương (Cleistanthus

indochiensis), Săng bù (Macaranga kurzii) và cây Bạch đàn nam (Macaranga tanarius)

Quy trình tổng hợp các dẫn xuất amide từ hợp chất Cleistantoxin (CLQF11)

Hằng số vật lí và dữ kiện phổ của các hợp chất phân lập được từ các 3 loài cây

được nghiên cứu và các dẫn xuất amide bán tổng hợp được

3.1 Lá cây Cách hoa đông dương (Cleistanthus indochinensis)

Từ lá cây Cách hoa đông dương (C.indochinensis) 13 hợp chất đã được phân lập

và xác định cấu trúc là: squalen (CLF2.1), epifriedelanol (CLF3.1), lupeol

(CLF3.14), cleistanone (CLF3.20), cis-p-cumaroyl epifriedelanol (CLF4.6),

trans-p-cumaroyl-β-sitosterol (CLF6.3), trans-p-cumaroyl epifriedelanol (CLF6.4), axit

4-hydroxy cinamic (CLFM4.1), sequoiaflavon (CLFM4.5.1), axit galic (CLFM8.1), amentoflavon (CLFM8.1.1), 3-O-metylellagic-4’-α-rhamnopyranoside (CLFM10.3) và

axit ellagic (CLFM10.6) Trong đó có 4 hợp chất mới là cleistanone (CLF3.20), cumaroyl epifriedelanol (CLF4.6), trans-p-cumaroyl-β-sitosterol (CLF6.3), trans-p-

cis-p-cumaroyl epifriedelanol (CLF6.4)

Quá trình phân lập các hợp chất từ lá cây Cách hoa đông dương được trình bày trong hình sau:

Dữ liệu phổ của các chất mới phân lập được như sau:

- Ngâm chiết MeOH (5 lần x 24 h)

- Cất loại dung môi

n-hexan: EtOAc, gradient

- Hòa n-hx: ax 2,5:7,5

Sephadex MeOH

H-NMR (500 MHz, CDCl3)  (ppm): 1,41 ( m, 1H, H-1); 1,36 (m 1H, H-1); 1,48 (

m, 1H, H-2); 1,95 (m, 1H, H-2); 4,95 (s, 1H, H-3); 1,56 (m, 1H, H-4); 1,75 (m, 1H, H-6); 0,94 (m, 1H, H-6); 1,37 (m, 1H, H-7); 1,35 (m, 1H, H-7); 1,28 (m, 1H, H-8); 0,91 (m, 1H, H-10); 1,30 (m, 1H, H-11); 1,49 (m, 1H, H-11); 1,27 (m, 1H, H-12); 1,47 (m, 1H, H-12); 1,31 (m, 1H, H-15); 1,46 (m, 1H, H-15); 1,55 (m, 1H, H-16); 1,33 (m, 1H,H-16); 1,38 (m, 1H, H-18); 1,14 (m, 1H, H-19); 1,21 (m, 1H, H-19); 1,50( m, 1H, H-21); 1,32 (m, 1H, H-21); 0,92 (m, 1H, H-22); 1,48 (m, 1H, H-22); 0,83 (d, J=7; 3H, H-23); 0,90 (s, 3H, H-24); 0,81 (s, 3H, H-25); 1,00 (s, 3H, H-26); 0,996 (s, 3H, H-27); 0,992 (s, 3H, H-28); 0,95 (s, 3H, H-29); 1,17 (s, 3H, H-30); 7,63 (d, J=8,5; 2H, H-2’, H-6’); 6,78 (d, J=8,5; 2H, H-3’, H-5’); 6,82 (d, J=13; 1H, H-7’); 5,83 (d, J=13; 1H, H-8’)

13

C-NMR (125 MHz, CDCl3)  (ppm): 11,4 23); 15,8 24); 16,5 1); 17,8 7); 18,2 (C-25); 18,6 (C-26); 20,1 (C-27); 28,2 (C-20); ); 30,1 (C-17); 30,7 (C-15); 31,8 (C-30); 32,2 (C-28); 32,2 (C-11); 32,5 (C-2); 33,0 (C-12); 35,0 (C-29); 35,5 (C-19); 35,7 (C-21); 36,2 (C-16); 37,2 (C-9); 38,0 (C-5); 38,5 (C-13); 39,4 (C-22); 39,8 (C-14); 41,8 (C-6); 43,0 (C-4); 48,4 (C-18); 53,3 (C-8); 61,2 (C-10); 74,6 (C-3); 115,1 (C-3’; C-5’); 118,4 (C-8’); 127,9 (C-1’); 132,3 (C-2’; C-6’); 142,4 (C-7’); 156,7 (C-4’); 166,4 (C-9’)

13

C-NMR (125 MHz, CDCl3)  (ppm): 37,0 (C-1); 27,9 (C-2); 74,2 (C-3); 38,3 (C-4); 139,7 (C-5); 122,7 (C-6); 31,9 (C-7); 31,9 (C-8); 50,1 (C-9); 36,6 (C-10); 21,1 (C-11); 39,8 (C-12); 42,3 (C-13); 56,7 (C-14); 24,3 (C-15); 28,3 (C-16); 56,1 (C-17); 11,9 (C-18); 19,3 (C-19); 36,2 (C-20); 18,8 (C-21); 34,0 (C-22); 26,2 (C-23); 45,9 (C-24); 29,2 (C-25); 19,8 (C-26); 19,1 (C-27); 23,1(C-28); 12,0 (C-29); 127,1 (C-1’);

C-NMR (125 MHz, CDCl3)  (ppm): 16,4 (C-1); 32,3 (C- 2); 74,6(C-3); 42,8 (C-4); 37,9 (C-5); 41,6 (C-6); 17,7 (C-7); 53,1(C-8); 37,1(C-9); 61,0 (C-10); 32,2 (C- 11); 32,8 (C-12); 38,4 (C-13); 39,6 (C- 14); 30,6 (C- 15); 36,0 (C-16); 30,0 (C-17); 48,3 (C-18); 35,3 (C-19); 28,1 (C-20); 35,5(C-21); 39,2(C-22); 11,3 (C-23); 16,0 (C-24); 18,2 (C-25); 18,6 (C-26); 20,1 (C-27); 32,0 (C-28); 34,9 (C-29); 31,7 (C-30); 126,5 (C-1’); 129,9 (C-2’, C-6’); 115,7 (C-3’, C-5’); 158,8 (C-4’); 144,2 (C-7’); 118,5 (C-8’); 167,5 (C-9’)

C-NMR (125 MHz, CDCl3)  (ppm): 13,1(C-28); 17,1(C-27); 17,2(C-26); 21,6(C-11); 23,4(C-29); 23,6(C-30); 23,7(C-25); 24,2(C-16); 25,1(C-24); 27,9(C-15); 28,9(C-21); 30,4(C-12); 32,1(C-18); 32,3(C-13); 34,4 (C-2); 35,8(C-22); 36,9(C-10); 39,8(C-8); 40,4(C-14); 41,9(C-7); 42,3 (C-1); 44,1(C-23); 49,0 (C-4); 49,8(C-17); 51,5(C-9); 56,7(C-5); 69,7(C-6); 106,6(C-20); 159,4(C-19); 216,7 (C-3)

3.2 Quả cây Cách hoa đông dương (Cleistanthus indochinensis)

Từ quả loài Cách hoa đông dương (C indochinensis), 11 hợp chất đã phân lập và

xác định cấu trúc, trong đó có 9 hợp chất mới, là các hợp chất cleistantoxin

(CLQF11), demethoxycleistantoxin (CLQF12.3), podocleistantoxin (CLQF15.3), cleindoside A(CLQF17.1), cleindoside B (CLQF16), cleindoside C (CLQF17.2), cleindoside D (CLQFM4.4), cleindoside E (CLQFM4.5), cleindoside F (CLQFM4.3), và hai hợp chất đã biết là axit gallic (CLQFM2) và amentoflavon (CLQFM7) đã phân lập được từ bộ phận lá Quá trình phân lập các hợp chất từ quả

cây Cách hoa đông dương được trình bày trong sơ đồ sau:

- Ngâm chiết MeOH (5 lần x 24 h)

- Cất loại dung môi

n-hexan: Axeton, gradient

Rửa = MeOH

Sephadex MeOH

Sephadex MeOH Rửa =Ax

Các hợp chất mới là thành phần chính của quả, đều có khung cơ sở là aryl tetralin lignan và các dẫn xuất glycoside của chúng Điều này hoàn toàn trùng khớp với các

nghiên cứu trước đây về các loài Cleistanthus, vì thành phần hóa học chính của các loài Cleistanthus là các hợp chất aryl tetralin lignan

Dữ liệu phổ của các chất mới phân lập được:

Cleistantoxin (CLQF11)

Chất bột màu vàng nhạt, điểm nóng chảy 195-196 oC; Độ quay cực [α]D32

-148 (c,

0,5; CHCl3); Phổ khối lượng ESI-MS có m/z ở [M+Na]+ 421, phổ khối phân giải cao

HRESI-MS: m/z 381,0929 [M-H2O+H]+ tương ứng với CTPT là C21H18O8 (theo tính toán lý thuyết [M-H2O+H]+ có m/z =381,0974); Phổ IR ν max (cm-1): 3565, 3466, 2931,

1773, 1617, 1483, 1297, 1230, 1142, 1047; UV (CHCl3) λ max nm (log ε): 207,3

(3,39); 240,0 (4,18); 286,7 (3,83)

1

H-NMR (CDCl3, 500 MHz)  (ppm): 6,22 (s, 1H, H-3); 4,99 (d, J=9,0; 1H, H-7); 2,84 (dddd , J=9,0; 9,0; 10,5; 15,0, 1H, H-8); 4,02 (dd, J= 9,0; 10,5 ; 1H, H-9); 4,59 (dd, J=9,0; 9,0; 1H, H-9); 5,88 (d, J=1,5, 1H, H-10); 5,91 (d, J=1,5, 1H, H-10); 6,72 (d, J=1,5; 1H, H-2’); 6,66 (d, J=8,0; 1H, H-5’); 6,64 (dd, J=1,5; 8,0; 1H, H-6’); 4,47 (d, J=4,5; 1H, H-7’); 2,71 (dd, J=4,5; 15,0; 1H, H-8’); 5,86 (d, J=1,3; 1H, H-10’); 5,87 (d, J=1,3; 1H, H-10’); 4,12 (s, 3H, - OMe)

13

C-NMR (125 MHz, CDCl3)  (ppm):124,7 (C-1); 132,9 (C-2); 104,1(C-3); 149,4 (C-4); 134,9 (C-5); 141,5 (C-6); 70,4 (C-7); 38,7 (C-8); 71,8 (C-9); 101,2 (C-10); 133,0 (C-1’); 111,1 (C-2’); 147,2 (C-3’); 146,5 (C-4’); 107,6 (C-5’); 124,1 (C-6’); 43,9 (C-7’); 44,6 (C-8’); 174,2 (C-9’); 100,9 (C-10’); 59,8 (C-OCH3)

Demethoxycleistantoxin: CLQF12.3

Chất bột màu trắng, điểm nóng chảy 259-260 oC; Độ quay cực [α]D32

+14,0 (c, 0,5;

CHCl3) Phổ khối lượng ESI-MS: m/z ở [M+Na]+ 391, phổ khối phân giải cao

HRESI-MS: m/z 391,0793 [M+Na]+ tương ứng với CTPT là C20H16O7 (theo tính toán lý thuyết [M+Na]+ có m/z =391,0794); Phổ IR ν max (cm-1): 3494, 3444, 1750, 1624, 1479,

1444, 1253, 1179, 1036; Phổ UV (CHCl3) λ max nm (log ε): 215,4 (3,38); 240,4 (4,11);

290,5 (4,05)

1

H-NMR (CDCl3, 500 MHz)  (ppm): 6,11 (s, 1H, H-3); 6,99 (s, 1H, H-6); 4,26 (d, J= 10,0, 1H, H-7); 2,47 (m, 1H, H-8); 4,28 (br d, J=9,5; 1H, H-9); 4,49 (dd, J=1,0; 9,5; 1H, H-9); 5,75 (d, J=1,5; 1H, H-10); 5,76 (d, J=1,5; 1H, H-10); 6,57 (d, J=1,5; 1H, H-2’); 6,68 (d, J=8,0; 1H, H-5’); 6,62 (dd, J=1,5; 8,0; 1H, H-6’); 3,83 (d, J=6,2; 1H, H-7’); 3,00 (dd, J=6,2; 14,0; 1H, H-8’); 5,82 (br s, 1H, H-10’); 5,83 (br s, 1H, H-10’)

13

C-NMR (125 MHz, CDCl3)  (ppm):133,4 (C-1); 130,7 (C-2); 108,3 (C-3); 146,4 (C-4); 146,4 (C-5); 104,4 (C-6); 67,7 (C-7); 42,5 (C-); 69,6 (C-9); 100,7 (C-10);

137,0 (C-1’); 108,8 (C-2’); 146,5 (C-3’); 147,9 (C-4’); 108,2 (C-5’); 122,1 (C-6’); 43,1 (C-7’); 45,4 (C-8’); 178,6 (C-9’); 100,9 (C-10’)

Podocleistantoxin: CLQF15.3

Chất bột màu trắng, điểm nóng chảy 225-226 oC; Độ quay cực [α]D30

-44,4 (c, 0,225;

CHCl3); Phổ khối lượng ESI-MS: m/z [M+Na]+ 421; phổ khối phân giải cao

HRESI-MS: m/z 399,1052 [M+H]+ tương ứng với CTPT là C21H18O8 (theo tính toán lý thuyết [M+H]+ có m/z =399,1080); Phổ IR ν max (cm-1):3447, 2923, 1753, 1621, 1483, 1377,

1242, 1084, 1040; Phổ UV (CHCl3) λmax nm (log ε): 212,3 (3,40); 240,0 (4,23); 286,7

(3,82)

1

H-NMR (CDCl3, 500 MHz)  (ppm): 6,20 (s, 1H,H-3); 5,81(br d, J=5,0 ; 1H, H-7) ; 3,13 (m, 1H, H-8); 3,62 (br dd, J=8,0; 10,5; 1H, H-9); 3,71 (br dd, J=7,5; 10,5; 1H, H-9); 5,92 (d, J=1,0; 1H, H-10); 5,93 (d , J=1,0; 1H, H-10); 6,49 (br s, 1H, H-2’); 6,73 (d, J=9,0; 1H; H-5’); 6,56 (br d, J=9,0; 1H, H-6’); 4,24 (d, J=4,5; 1H, H-7’); 2,94 (ddd, J=1,0; 4,5; 4,5; 1H, H-8’); 5,93 (br s, 1H, H-10’); 4,04 (s, 3H, H-OMe)

13

C-NMR (125 MHz, CDCl3)  (ppm):119,7 1); 131,6 2); 104,4 3); 150,1 4); 135,2 (C-5); 140,5 (C-6); 72,1 (C-7); 46,6 (C-8); 59,4 (C-9); 101,3 (C-10); 135,2 (C-1’ ); 109,8 (C-2’); 147,7 (C-3’); 147,0 (C-4’); 108,2 (C-5’); 122,7 (C-6’); 43,2 (C-7’); 47,2 (C-8’); 175,7 (C-9’); 101,1 (C-10’); 60,3 (C-OCH3)

(C-Cleindoside A: CLQF17.1

Chất bột màu trắng, điểm nóng chảy 261-262 oC; Độ quay cực [α]D

30

- 188 (c, 0,5; MeOH); Phổ khối lượng ESI-MS: m/z 583 [M+Na]+; phổ khối phân giải cao HRESI-

MS (negative): m/z 559,1416 [M-H]- tương ứng với CTPT là C27H28O13 (theo tính toán lý thuyết [M-H]- có m/z =559,1452); Phổ IR ν max (cm-1): 3419, 2932, 1772, 1619,

1475, 1235, 1073, 1035; Phổ UV (MeOH) λmax nm (log ε): 222,7 (4,37); 286,7 (3,82)

1

H-NMR (CDCl3, 500 MHz)  (ppm): 6,26 (s, 1H, H-3); 5,28 (d, J= 8,5; 1H, H-7); 3,04 (m, 1H, H-8); 4,07 (dd, J= 8,2; 8,2; 1H, H-9); 4,64 (dd, J= 8,2; 8,2; 1H, H-9); 5,89 (s, 1H, H-10); 5,93 (s, 1H, H-10); 3,99 (s, 3H, -OCH3); 6,65*(1H, H-2’); 6,69* (1H, H-5’); 6,65* (1H, H-6’); 4,45 (d, J= 4,0; 1H, H-7’); 2,70 (dd, J= 4,0; 15,0; 1H, H-8’); 5,83 (s, 1H, H-9’); 5,84 (s 1H, H-9’); 4,34 (d, J= 7,5; 1H, H-1”); 3,28 (dd, J= 7,5; 8,5; 1H, H-2”); 3,39 (dd, J= 8,5; 8,5; 1H, H-3”); 3,41 (dd, J= 8,5; 8,5; 1H, H-4”); 3,18 (m, 1H, H-5”); 3,67 (m, 1H, H-6”)

13

C-NMR (125 MHz, CDCl3)  (ppm):122,0 (C-1); 135,3 (C-2); 104,8 (C-3); 149,9 (C-4); 136,8 (C-5); 142,1 (C-6); 75,2 (C-7); 38,4 (C-8); 72,0 (C-9); 101,5 (C-10); 59,9 (C- OMe); 132,8 (C-1’); 107,6 (C-2’); 147.3 (C-3’); 146,6 (C-4’); 110,7 (C-5’); 123,8 (C-6’); 44,0 (C-7’); 45,5 (C-8’); 174,2 (C-9’); 100,9 (C-10’); 99,4 (C-1”); 73,5 (C-2”); 76,3 (C-3”); 69,8 (C-4”); 76,0 (C-5”); 61,5 (C-6”)

Cleindoside B: CLQF16

Chất bột màu trắng, điểm nóng chảy 265-266 0C; Độ quay cực [α]D30

-196 (c, 0,5; MeOH); Phổ khối lượng ESI-MS: m/z 625 [M+Na]+; Phổ khối phân giải cao HRESI-

MS: m/z 625,15337 [M+Na]+ tương ứng với CTPT là C29H30O14 (theo tính toán lý thuyết [M+Na]+ có m/z =625,1533); Phổ IR ν max (cm-1): 3427, 2925, 1775, 1740,

1615, 1479, 1373, 1236, 1077, 1035; Phổ UV (MeOH) λmax nm (log ε): 212,2 (3,59);

239,8 (4,19); 287,5 (3,82)

1

H-NMR (CDCl3, 500 MHz)  (ppm): 6,34 (s, 1H, H-3); 5,27 (d, J= 10,5; 1H, H-7); 3,20 (m, 1H, H-8); 4,06 (dd, J= 1,5; 8,0; 1H, H-9); 4,65 (dd, J= 8,0; 8,0; 1H, H-9); 5,99 (d, J= 1,0; 1H, H-10); 5,98 (d, J=1,0; 1H, H-10); 4,07 (s, 3H, -OMe); 6,65 (d, J= 1,5; 1H, H-2’); 6,73 (d, 8,0; 1H, H-5’); 6,76 (d , J=1,5; 8,0; 1H, H-6’); 4,54 (d, J= 4,5; 1H, H-7’); 2,68 (dd, J= 4,5; 14,5; 1H, H-8’); 5,92 (s, 2H, H-10’); 4,38 (d, J= 7,5; 1H, H-1”); 3,39 (m, 1H, H-2”); 3,53 (dd, J= 8,5; 8,5; 1H, H-3”); 3,35 (dd, J= 8,5; 8,5; 1h, H-4”); 3,38 (m, 1H, H-5”); 4,16 (dd, J= 7,0; 11,0; 1H, H-6”); 4,27 (dd, J= 2,0; 11,0; 1H, H-6”); 1,65 (s, 3H, H-7”)

13

C-NMR (125 MHz, CDCl3)  (ppm): 121,7 (C-1); 136,1 (C-2); 105,5 (C-3); 150,4 (C-4); 137,1 (C-5); 142,0 (C-6); 77,0 (C-7); 37,6 (C-8); 72,0 (C-9); 101,8 (C-10); 60,2 (C -OMe); 133,1(C-1’); 110,8 (C-2’); 147,6 (C-3’); 147,0 (C-4’); 108,0 (C-5’); 124,1 (C-6’); 44,4 (C-7’); 45,6 (C-8’); 174,0 (C-9’); 101,3 (C-10’); 98,1 (C-1” ); 73,4 (C-2”); 76,7 (C-3”); 70,2 (C-4”); 74,2 (C-5”); 63,3 (C-6”); 20,1 (C-7”); 171,1 (C-8”)

Cleindoside C: CLQF17.2

Chất bột màu trắng, điểm nóng chảy 261-262 oC; Độ quay cực [α]D

30

-50 (c, 0,3; MeOH); Phổ khối lượng ESI-MS: m/z 553 [M+Na]+; Phổ HRESI-MS: m/z 553,1323

[M+Na]+ tương ứng với CTPT là C26H26O12 (theo tính toán lý thuyết [M+Na]+ có m/z

=553,1322); Phổ IR ν max (cm-1): 3444, 2910, 1773, 1626, 1491, 1244, 1382, 1080, 1034; Phổ UV (MeOH) λmax nm (log ε): 215,4 (4,32); 287,5 (3,98)

1

H-NMR (DMSO–d 6, 500 MHz)  (ppm): 6,50 (s, 1H,H-3); 7,04 (s, 1H, H-6); 5,02 (d, J= 3,5; 1H, H-7); 2,85 (dddd, J= 3,5; 8,5; 9,0; 14,5; 1H, H-8); 4,32 (dd, J= 8,5; 8,5; 1H, H-9); 4,36 (dd, J= 8,5; 9,0; 1H, H-9); 6,01 (s, 1H, H-10); 6,02 (s, 1H, H-10); 6,54 (d, J= 1,5; 1H, H-2’); 6,75 (d, J= 8,0; 1H, H-5’); 6,37 (dd, J= 1,5; 8,0; 1H, H-6’); 4,52 (d, J= 5,5; 1H, H-7’); 3,39 (dd, J= 5,5; 14,5; 1H, H-8’); 5,94 (s, 1H, H-10’); 5,95 (s, 1H, H-10’); 4,25 (d, J= 8,0; 1H, H-1”); 3,01 (ddd, J= 4,0; 8,0; 8,0; 1H, H-2”); 3,11(m, 1H, H-3”); 3,03 (ddd, J= 4,0; 8,0; 9,0; 1H, H-4”); 3,12 (m, 1H, H-5”); 3,46 (dd, J= 6,0; 11,0; 1H, H-6”); 3,76 (dd, J= 6,0; 11,0; 1H, H-6”); 4,97 (d, J= 4,0; 1H, OH-2); 4,89 (m, 1H, - OH-3); 4,89 (m, 1H, - OH-4); 4,63 (D, J=6,0; 1H, OH-6)

13

C-NMR (DMSO–d 6, 125 MHz)  (ppm): 128,2 (C-1); 133,0 (C-2); 109,9 (C-3);

146,1* (C-4); 147,8* (C-5); 110,2 (C-6); 70,4 (C-7); 37,2 (C-8); 67,8 (C-9); 101,3 (C-10); 134,3 (C-1’); 110,8 (C-2’); 145,9 (C-3’); 146,6 (C-4’); 107,4 (C-5’); 123,5 (C-6’); 42,6 (C-7’); 40,1 (C-8’); 174,8 (C-9’); 100,8 (C-10’); 99,8 (C-1”); 73,6 (C-2”); 76,6 (C-3”); 70,4 (C-4”); 77,0 (C-5”); 61,3 (C-6”)

Cleindoside F: CLQFM4.3

Chất bột màu trắng, điểm nóng chảy 261-262 oC; Độ quay cực [α]D30

-50 (c, 0,3; MeOH); Phổ HRESI-MS: m/z 523,1251 [M+Na]+ tương ứng với CTPT là C25H24O11(theo tính toán lý thuyết [M+Na]+ có m/z =523,1216); Phổ IR ν max (cm -1): 3463,

2899, 1725, 1636, 1598, 1508, 1359, 1207, 1074, 1036

1

H-NMR (DMSO–d 6, 500 MHz)  (ppm): 6,39 (s, 1H, H-3); 6,94 (s, 1H, H-6); 2,69 (dd, J= 6,5; 15,0; 1H, H-7); 2,71 (dd, J= 15,0; 15,0; 1H, H-7); 3,31 (m, 1H, H-8); 3,97 (dd, J= 8,5; 8,5; 1H, H-9); 4,64 (dd, J= 8,5; 8,5; 1H, H-9); 5,99 (d, J= 1,0, 1H, H-10); 6,00 (d, J= 1,0; 1H, H-10); 7,11 (d, J= 1,5; 1H, H-2’); 6,86 (d, J= 8,0; 1H, H-5’); 6,74 (dd, J= 1,5; 8,0; 1H, H-6’); 4,67 (d, J= 8,0; 1H, H-1”); 3,33 (dd, J= 8,0; 8,0; 1H, H-2”); 3,28 (m, 1H, H-3”); 3,24 (m, 1H, H-4”); 3,21 (m, 1H, H-5”); 3,48 (m, 1H, H-6”); 3,64 (m, 1H, H-6”)

13

C-NMR (DMSO–d 6, 125 MHz)  (ppm): 131,1 (C-1); 129,3 (C-2); 108,0 (C-3);

147,9* (C-4); 145,9* (C-5); 108,4 (C-6); 32,0 (C-7); 35,0 (C-8 ); 70,2 (C-9); 125,3 (C-10 ); 125,3 (C-1’); 119,9 (C-2’); 144,4 (C-3’); 147,2 (C-4’); 115,1 (C-5’); 124,6 (C-6’); 145,4 (C-7’); 120,0 (C-8’); 167,5 (C-9’); 103,0 (C-1”); 73,2 (C-2”); 75,9 (C-3”); 69,8 (C-4”); 76,9 (C-5”); 60,6 (C-6”)

Cleisindoside D: CLQFM4.4

Chất bột màu vàng, điểm nóng chảy 248-249 oC; Độ quay cực [α]D

30

-52 (c, 1,0; MeOH); Phổ khối lượng ESI-MS: m/z 685 [M+Na]+; Phổ HRESI-MS: m/z 685,1745

[M+Na]+ tương ứng với CTPT là C31H34O16 (theo tính toán lý thuyết [M+Na]+ có m/z

=685,1745); Phổ IR ν max (cm-1): 3421, 2929, 1764, 1624, 1490, 1244, 1039; Phổ UV (MeOH) λmax nm (log ε): 215,0 (4,36); 238,0 (3,96); 288,8 (3,96)

1

H-NMR (CDCl3, 500 MHz)  (ppm): 6,48 (s, 1H, H-3); 7,09(s, 1H, H-6); 5,10 (d, J= 3,5; 1H, H-7);3,02 (dddd 3,5; 8,2; 10,5; 14,3; 1H, H-8); 4,38 (dd, J= 8,2; 8,2; 1H, H-9); 4,52 (dd, J= 8,2; 10,5; 1H, H-9); 5,96 (d, J=1,0; 1H, H-10); 5,97 (d, J=1,0; 1H, H-10); 6,57 (d, J= 1,5; 1H, H-2’); 6,67 (d, J= 8,0; 1H, H-5’); 6,48 (dd, J= 1,5; 8,0; 1H, H-6’); 4,56 (d, J= 5,7; 1H, H-7’); 3,53 (dd, J=5,7; 14,3; 1H, H-8’); 5,88 (d, J=1,0; 1H; H-10’); 5,89 (d, J=1,0; 1H, H-10’); 4,48 (d, J= 8,0; 1H, H-1”); 3,24 (dd, J=8,0; 9,0; 1H, H-2”); 3,35 (dd, J=9,0; 9,0; 1H,H-3”); 3,29 (dd, J= 9,0; 9,0; 1H, H-4”); 3,47 (ddd, J= 2,0; 7,0; 9,0, 1H, H-5”); 3,63 (dd, J= 7,0; 11,5; 1H, H-6”); 4,10 (dd, J= 2,0; 11,5, 1H, H-6’’) ; 5,07 (d, J= 2,7; 1H, H-1’’’); 3,98 (d, J= 2,7; 1H, H-2’’’) ; 3,83 (d, J= 10,0; 1H, H-4’’’); 4,05 (d, J= 10,0; 1H, H-4’’’); 3,62 (m, 1H, H-5’’’)

13

C-NMR (125 MHz, CDCl3)  (ppm):134,6 (C-1); 129,8 (C-2); 111,2 (C-3); 150,0 (C-4); 148,3 (C-5); 111,2 (C-6); 73,2 (C-7); 39,1 (C-8); 69,9 (C-9); 102,8 (C-10); 135,4 (C-1’); 112,0 (C-2’); 148,6 (C-3’); 147,9 (C-4’); 108,4 (C-5’); 125,0 (C-6’); 44,7 (C-7’); 42,1 (C-8’); 177,7 (C-9’); 102,3 (C-10’); 101,8 (C-1”); 75,1 (C-2”); 78,0 (C-3”); 72,0 (C-4”); 76,9 (C-5”); 69,3 (C-6”); 111,1 (C-1”’); 78,3 (C-2”’); 80,5 (C-3”’); 75,0 (C-4”’); 65,6 (C-5”’)

Cleisindoside E: CLQFM4.5

Chất bột màu vàng, điểm nóng chảy 278-279 oC; Phổ khối lượng ESI-MS: m/z 685

[M+Na]+; Phổ HRESI-MS: m/z 685,1744 [M+Na]+ tương ứng với CTPT là C31H34O16(theo tính toán lý thuyết [M+Na]+ có m/z =685,1745); Phổ IR ν max (cm-1):3418, 2916,

1752, 1624, 1487, 1234, 1036

1

H-NMR (DMSO–d 6, 500 MHz)  (ppm): 6,49 (s, 1H, H-3); 7,08 (s, 1H, H-6); 4,98 (d, J= 3,0; 1H, H-7); 2,83 (m 1H, H-8); 4,31 (dd, J= 8,0; 8,0; 1H, H-9); 4,38 (dd, J= 8,0; 8,0; 1H, H-9); 6,01 (br s, 1H, H-10); 6,02(br s, 1H, H-10); 6,54 (d, J=1,5; 1H, H-2’); 6,75 (d, J=8,0; 1H, H-5’); 6,38 (dd, J=1,5; 8,0; 1H, H-6’); 4,51 (d, J= 5,5; 1H, H-7’); 3,35 (dd, J=5,5; 14,5; 1H, H-8’); 5,94 (br s, 1H, H-10’); 5,95 (br s, 1H, H-10’); 4,33 (d, J=8,0; 1H, H-1”); 3,00 (m, 1H, H-3”); 3,13 (dd, J= 9,0; 9,0; 1H, H-3”); 3,02 (m, 1H, H-4”); 3,32 (m, 1H, H-5”); 3,51 (dd, J= 8,0; 11,0; 1H, H-6”); 4,05 (br

d, J=11,01H, H-6”); 4,19 (d, J=7,5; 1H, H-1”’); 3,01( m, 1H; H-2”’); 3,11 (dd, J= 9,0; 9,0; 1H, H-3”’); 3,31 (m, 1H, H-4”’); 3,05 (dd, J= 11,5; 11,5; 1H, H-5”’); 3,73 (dd, J= 5,5; 11,5; 1H, H-5’”)

13

C-NMR (DMSO–d 6, 125 MHz)  (ppm): 126,8 (C-1); 132,8(C-2); 109,7 (C-3);

147,7* (C-4); 146,2* (C-5); 110,3 (C-6); 71,0 (C-7); 37,1 (C-8); 67,9 (C-9); 101,2 (C-10); 134,2 (C-1’); 110,7 (C-2’); 146,6 (C-3’); 145,9 (C-4’); 107,4 (C-5’); 123,5 (C-6’); 42,5 (C-7’); 40,2 (C-8’); 174,7 (C-9’); 100,8 (C-10’); 100,3 (C-1”); 73,4 (C-2”); 76,5 (C-3”); 70,5 (C-4”); 75,2 (C-5”); 69,4 (C-6”); 104,4 (C-1”’); 73,4 (C-2”’); 76,6 (C-3”’); 69,5 (C-4”’); 65,6 (C-5”’)

3.3 Lá cây Săng bù (Macaranga kurzii)

Từ lá loài Săng bù (M kurzii) 17 hợp chất đã được phân lập và xác định cấu trúc

hóa học Trong đó 4 hợp chất có cấu trúc mới được đặt tên là macakurzin A

(MKF9.5), macakurzin B (MKF8.3), macakurzin C (MKF11.5.3), macakurzin D

(MKF11.4.1) và 13 hợp chất đã biết là dimetoxy-cis-stilben (MKF2.1), dimetoxy-trans-stilben (MKF8.1), β-amyrin (MKF8.4), 5,7-dihydroxy-6-prenyl-

3,5-flavanone (MKF9.4), glabranin (MKF9.7), izalpinin (MKF9), glepidotin A (MKF10), 8-prenyl-galangin (MKF11.4), flavastin B (MKF11.5.1), galangin (MKF11.5.2), axit 3,4-dihydroxy benzoic (MKFM1.1), axit gallic (MKFM 1.2) và luteolin-7-O-glucopyranoside (MKFM2)

Từ kết quả trên cho thấy các hợp chất khung stilben và các hợp chất flavonoid mà

ở đây là các prenyl flavonoid là thành phần chính của lá cây Săng bù, kết quả này cũng trùng hợp với các tài liệu đã được công bố về thành phần hóa học của các loài

Macaranga

Quá trình phân lập các hợp chất từ lá cây Săng bù được trình bày trong sơ đồ sau

đây:

Hằng số vật lý và dữ liệu phổ của các chất mới phân lập được:

Macakurzin A (MKF9.5)

Tinh thể hình kim màu trắng, điểm nóng chảy 157-158 oC; Phổ khối ESI-MS: m/z

335 ([M-H]-); Phổ IR ν max (cm-1): 3312, 3029, 1610, 1499, 1424, 1387, 1278, 1147; Phổ UV (MeOH) λmax nm (log ε): 218,1 (372); 250,7 (3,62); 310,4 (3,82)

1

H-NMR (CDCl3, 500 MHz)  (ppm): 7,31 (d, J=16,0; 1H, H -α); 7,21 (d, J= 16,0, 1H, H-β); 6,93 (d, J= 2,0; 1H, H-4); 7,01 (d, J= 2,0; 1H, H-6); 7,55 (d, J= 7,5; 2H, H-2’; H-6’); 7,40 (t, J=7,5; 2H, H-3’, H-5’); 7,30 (t, J=7,5; 1H, H-4’); 6,94 (d, J=2,0; 1H, H-7’); 7,58 (d, J=2,0; 1H, H-8’); 4,83 (s, 1H, OH)

Lá cây Săng bù (M kurzii) 100 g

- Cất loại dung môi

Cặn EtOAc 100,8 g