Hoá nghiệm nước tiểu Hiện nay, trong Thú y hoá nghiệm nước tiểu ngoài việc sử dụng các phương pháp cổ điển người ta còn sử dụng giấy Test và máy xét nghiệm nước tiểu hình 3.14.. Các xét
Trang 1Tỷ trọng nước tiểu của gia súc
Ngựa 1,025 - 1,055
Dê, cừu 1,015 - 1,065
Chó 1,020 - 1,050 mèo 1,020 - 1,040
Tỷ trọng nước tiểu tăng có nghĩa là nước tiểu đặc: do thiếu nước vì gia súc ra nhiều
mồ hôi, nôn mửa, viêm thận cấp, suy tim và viêm thẩm xuất
Nước tiểu loãng là tỷ trọng giảm: do thức ăn nhiều nước, viêm thận mạn tính, xeton huyết ở bò, hấp thu dịch thẩm xuất
b Hoá nghiệm nước tiểu
Hiện nay, trong Thú y hoá nghiệm nước tiểu ngoài việc sử dụng các phương pháp cổ điển người ta còn sử dụng giấy Test và máy xét nghiệm nước tiểu (hình 3.14)
* Abumin niệu (Albuminuria)
Gọi albumin niệu là do thói quen, thật
ra phải gọi là protein niệu (proteinuria) vì nếu có albumin trong nước tiểu thì có cả globulin
Các xét nghiệm albumin trong nước tiểu đều dựa trên nguyên tắc protein sẽ kết tủa khi gặp nhiệt độ cao, axit hoặc kim loại nặng
Nước tiểu kiểm nghiệm phải trong suốt Nếu đục phải lọc, nếu kiềm phải toan hoá, nhất là nước tiểu ngựa
Các xét nghiệm định tính:
- Đun sôi: Trong 1 ống nghiệm có 5ml nước tiểu, 2 - 3 giọt axit acetic 10%, lắc đều
và đun từ từ trên ngọn lửa đèn cồn Nếu nước tiểu đục, cho thêm 1 - 2 giọt axit nitric 25%, không mất đục - phản ứng dương tính Độ mẫn cảm của phương pháp 1/30.000 - 1/40.000
Chú ý: khi toan hoá nước tiểu theo liều lượng trên Nếu toan hóa quá nhiều axit,
protein sẽ bị hoà tan, kết quả xét nghiệm sẽ sai
Căn cứ độ đục theo phương pháp đun sôi để tính lượng protein trong nước tiểu:
Hình 3.14 Máy xét nghiệm nước tiểu
Trang 2Ký hiệu Hàm lượng protein trong nước tiểu Phản ứng trong ống nghiệm
++++ Rất nhiều 0,5 - 1,0 Kết tủa thành cục, cao khoảng1/2 cột
- Phương pháp dùng axit nitric (phương pháp Heller)
Trong ống nghiệm: 3 - 5ml axit nitric 50% và theo thành ống cho tiếp 2 - 3ml nước tiểu kiểm nghiệm (đã toan hoá) Nếu vòng tiếp xúc vẫn đục trắng (phản ứng dương tính) Trường hợp lượng protein ít, vòng đục xuất hiện sau 2 - 3 phút Độ nhạy của
phương pháp: 0,033%
- Phương pháp dùng axit sunphosalicilic 20% (axit sunfosalicilic) - phương pháp Rock - Williame)
Trong ống nghiệm: 5ml nước tiểu rồi nhỏ thêm 10 giọt axit sunphosalicilic 20%
Nước tiểu vẩn đục như mây, có thể kết tủa: phản ứng dương tính)
Nếu là albumo (albumone) với axit sunphosalicilic 20% cũng cho kết tủa nhưng đun
sôi thì hết, để nguội lại xuất hiện
Độ nhạy của phương pháp: 1/60.000 Phương pháp này dùng phổ biến trong lâm sàng, đặc biệt khi kiểm nghiệm nước tiểu kiềm tính
- Phương pháp dùng cồn
Trong ống nghiệm 5ml nước tiểu, rồi nhẹ nhàng theo thành ống nghiệm cho 1 lớp
cồn Nếu vòng tiếp xúc cho kết tủa trắng thì phản ứng dương tính
Ý nghĩa chẩn đoán:
Trong nước tiểu gia súc không có protein, các phương pháp tìm albumin đều cho
kết quả âm tính Nếu có albumin niệu là triệu chứng cần chú ý
Albumin niệu từ thận do cơ năng siêu lọc của thận bị rối loạn, protein trong máu
theo nước tiểu ra ngoài - gọi là albumin niệu thật
Albumin niệu thật sinh lý: do lao động quá sức, thời gian chửa, do quá lạnh, có lúc
do ăn quá nhiều protein,…loại albumin này xuất hiện thời gian ngắn, trong nước tiểu
không có cặn bệnh lý
Albumin niệu thật do bệnh: viêm thận cấp tính trong hàng loạt các bệnh truyền nhiễm, các trường hợp trúng độc, bỏng nặng, một số bệnh nội khoa nặng,…Do thận có tổn thương, protein niệu theo nước tiểu ra ngoài Đặc điểm loại albumin niệu này là
trong nước tiểu có cặn bệnh lý và có bệnh cảnh tương ứng
Trang 3Albumin niệu ngoài thận - Albumin niệu giả: do viêm bể thận, viêm bàng quang,
viêm niệu đạo
Để phân biệt albumin niệu thật với albumin niệu giả cần xét nghiệm cặn nước tiểu
và kết hợp với bệnh cảnh
Bệnh lan tràn từ thận đến bể thận, bàng quang gây albumin niệu thì gọi là albumin
niệu hỗn hợp
Trong lâm sàng albumin niệu thường là triệu chứng thận tổn thương Nhưng chú ý
là số lượng albumin trong nước tiểu không tỷ lệ thuận với mức độ bệnh ở thận
* Xét nghiệm hồng cầu và huyết sắc tố (Hemoglobin) trong nước tiểu
Các xét nghiệm dưới đây đều cho kết quả phản ứng dương tính khi trong nước tiểu
có hồng cầu, huyết sắc tố hoặc sắc tố của cơ thể (mioglobin)
- Phương pháp dùng thuốc thử Benzilin (phương pháp Adler)
Trong một ống nghiệm: một ít bột benzilin bằng hạt kê và 2ml axit acetic đặc, lắc cho đều Thêm vào 2ml H2O2 3%, lắc đều Rồi cho nước tiểu kiểm nghiệm vào từ từ theo thành ống Vòng tiếp xúc xuất hiện màu xanh - phản ứng dương tính
Nếu máu trong nước tiểu ít, có thể làm theo cách sau để dễ nhận kết quả:
Trong 1 ống nghiệm: 10ml nước tiểu đun sôi để phá vỡ men oxy hoá, thêm 10 giọt axit acetic để toan hoá nước tiểu Cho 3ml ete etylic lắc đều rồi để yên để ete nổi lên trên Hút lấy phần ete trong có phần huyết sắc tố để làm phản ứng benzilin theo các bước như trên Độ nhạy của phản ứng: 1/40.000
- Phương pháp dùng thuốc thử Pyramidon
Trong ống nghiệm: 0,5ml axit acetic đặc, 2ml nước tiểu, lắc đều; thêm vào 2ml pyramidon 5% (trong cồn) và 0,5ml H2O2 3% Hỗn hợp biến thành màu tím - phản ứng dương tính
- Phương pháp dùng Phenolphtalein (phương pháp Collo)
Trong ống nghiệm: 3ml nước tiểu và 3ml thuốc thử Phenolphtalein, trộn đều rồi thêm 1ml H2O2 5% Vòng tiếp xúc đỏ tím - phản ứng dương tính
Thuốc thử: 1 Phenolphtalein 2 g
Ý nghĩa chẩn đoán:
Trong nước tiểu có hồng cầu gọi là huyết niệu (Hematuria), có huyết sắc tố - huyết sắc tố niệu (Hemoglobinuria) và có Mioglobin - Mioglobinuria Trong chẩn đoán
thường chú ý hai dạng đầu
Trang 4Huyết niệu xuất hiện khi ở thận hoặc bể thận, ống thận, bàng quang, niệu đạo tổn
thương, xuất huyết
Huyết niệu do thận: vỡ thận, viêm thận cấp tính Nhiều bệnh truyền nhiễm gây xuất huyết: nhiệt thán, dịch tả trâu bò, dịch tả lợn, phó thương hàn Huyết niệu do thận thì
nước tiểu sẫm, cặn có nhiều cục máu, có tế bào thượng bì thận
Huyết niệu do bể thận: sỏi bể thận, giun thận, viêm bể thận xuất huyết
Huyết niệu do bàng quang: viêm bàng quang, sỏi bàng quang, loét niệu đạo, viêm
niệu đạo chảy máu, Để chẩn đoán phân biệt cần xét nghiệm cặn nước tiểu
Để phân biệt các trường hợp xuất huyết ở đường tiết niệu bằng cách: hứng 3 cốc nước tiểu ở 3 thời điểm Nước tiểu giai đoạn đầu, giai đoạn giữa và giai đoạn cuối của quá trình đi tiểu, quan sát màu sắc của 3 cốc
- Nếu màu của cốc đầu đậm - do xuất huyết ở niệu đạo
- Cốc sau đậm - xuất huyết ở bàng quang
- Nếu cả 3 cốc có màu đỏ như nhau thì xuất huyết ở thận hoặc bể thận
Huyết sắc tố niệu là do hồng cầu vỡ quá nhiều trong cơ thể và đi ra ngoài theo nước tiểu
Phân biệt huyết niệu và huyết sắc tố niệu:
Mắt thường
Để lắng Kiểm kính Lọc nhiều lần
Đục Hồng cầu lắng Hồng cầu nguyên vẹn Mất màu
Trong suốt Không có Hồng cầu vỡ từng mảng Không mất màu
* Xét nghiệm đường trong nước tiểu:
- Phương pháp Heines
Nguyên tắc: nếu có đường sẽ khử Cu++ thành Cu+ trong Cu2O kết tủa màu gạch hay màu vàng đậm
Phương pháp này có độ nhậy cao và thích hợp để kiểm nghiệm nước tiểu gia súc nhất là nước tiểu ngựa
Thuốc thử Heines:
1 Hoà 13,3g CuSO4 tinh khiết trong 400ml nước cất
2 Hoà 50g KOH trong 400ml nước cất
3 15ml glyxelin tinh khiết trong 200ml nước cất
Trộn 1 với 2, quấy đều rồi đổ 3 vào, lắc đều đựng trong chai nút mài sử dụng lâu dài
Xét nghiệm: Cho vào ống nghiệm 3ml thuốc thử Heines, đun sôi, rồi nhỏ 10 giọt nước tiểu kiểm nghiệm Nếu có tủa màu đỏ gạch: phản ứng dương tính
Trang 5- Phương pháp Nylander
Nguyên tắc: trong môi trường kiềm Sous nitras bismuth bị đường khử oxy để thành oxy bismuth hoặc bismuth kết tủa màu nâu hoặc màu đen
Thuốc thử: 1 Sous nitras bismuth 2,0 g
2 Kali - natri tartrat 4,0g
3 Kali hydroxyt (KOH) 100ml
Hoà tan lọc qua giấy lọc, bảo quản trong chai thuỷ tinh màu
Xét nghiệm: Cho vào ống nghiệm 3 - 5ml nước tiểu kiểm nghiệm, thêm 1 - 2ml
nước tiểu Nylander, đun sôi Hỗn dịch biến thành màu nâu đen (phản ứng dương tính)
Chú ý: nếu nước tiểu có nhiều indican và các sắc tố khác, lúc đun cũng có kết tủa
màu đen Vì vậy, trước khi kiểm nghiệm cho ít HCl 25% và bột xương lắc đều lọc và loại đi Nước tiểu có nhiều nhầy (muxin) cũng có thể cho phản ứng dương tính giả
- Phương pháp Benedict
Phương pháp này giống như phương pháp Heines nhưng có ưu điểm là axit uric
Muối urat và các cặn hữu cơ không có khả năng khử oxy trong thuốc thử Benedict
Phương pháp Benedict được sử dụng rộng rãi
Trong thuốc thử Benedict:
1) 173g Natri xitrat (Na2C6H5O7.11H2O) và 90g Natri carbonat khan (hoặc 180g Natri carbonat kết tinh) trong 600ml nước cất, đun nhẹ, lắc cho tan, lọc hết cặn rồi cho thêm nước cất đến 850ml
2) 17,3g CuSO4.5H2O trong 100ml nước cất, lắc cho tan rồi cho thêm nước cất đến 150ml
Trộn dung dịch 1 với dung dịch 2, lắc đều
Xét nghiệm: Trong 1 ống nghiệm gồm 1,5ml thuốc thử Benedict và 3 giọt nước tiểu kiểm nghiệm Lắc đều và đun nóng trong 2 phút Kết tủa màu gạch cua: phản ứng dương tính
Có thể dựa vào kết quả phản ứng với thuốc thử Benedict để tính lượng đường trong nước tiểu
