BÁO CÁO SINH HÓA BUỔI 5

_Cho vào mỗi bình tam giác: 1g dầu thực vật và 10mL dung môi hỗn hợp 1 đã trung hòa, lắc cho dầu tan hoàn toàn.. _Cho vào mỗi bình tam giác 3 giọt thuốc thử phenolphthalein 1% trong cồn

TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG THƯƠNG TP HỒ CHÍ MIN H

KHOA SINH HỌC VÀ MÔI TRƯỜNG

BÁO CÁO THỰC HÀNH MÔN SINH HÓA

Bài 5 LIPIT

Thí nghiệm 1: Chỉ số acid (X(acid))

Tiến trình:

_Lấy 3 erlenmeyer 100 mL, đánh số từ 1 đến 3

_Cho vào mỗi bình tam giác: 1g dầu thực vật và 10mL dung môi hỗn hợp 1 đã trung hòa, lắc cho dầu tan hoàn toàn

_Cho vào mỗi bình tam giác 3 giọt thuốc thử phenolphthalein 1% trong cồn 96o

_Chuẩn độ (dùng microburette) bằng dung dịch KOH 0,1N/cồn 96o cho đến khi dung dịch xuất hiện màu hồng bền trong 30 giây

Kết quả:

Bình tam

Bình 1 Xuất hiện màu hồng chậm nhất (23mL) Bình 2 Xuất hiện màu hồng (16mL) Bình 3 Xuất hiện màu hồng nhanh nhất

(3.5mL) Tính chỉ số acid:

X(acid) = V × f ×5.611 m =

(23+16+3.5)

Giải thích:

_Dung dịch xuất hiện màu hồng do

lượng KOH cần thiết để trung hòa

lượng acid béo tự do có trong 1g chất

béo

_Với qua thí nghiệm trên, chỉ số acid đạt 79.489mg.

Thí nghiệm 2: Chỉ số xà phòng (X(savon))

Tiến trình:

_Lấy 2 erlenmeyer đánh số 1 và 2 Erlenmeyer số 1 là mẫu trắng, erlenmeyer số 2 là mẫu thí nghiệm

_Thêm vào mỗi bình tam giác 15mL KOH 0.5N/ cồn 96o ( lấy bằng burette để đảm bảo độ chính xác)

_Đậy kín bình tam giác bằng nút cao su có gắn ống ngưng Đun sôi tất cả các bình tam giác trên nồi cách thủy trong 50 phút, vừa đun vừa phải luôn lắc mẫu Sự xà phòng hóa kết thúc khi dung dịch trong bình trở nên trong suốt

_Lấy ra, tháo ống sinh hàn và để nguội

_Thêm vào mỗi bình tam giác 15mL nước cất và 3 giọt thuốc thử phenolphtalein 1% trong cồn, lắc đều, dung dịch có màu hồng

_Sau đó nhanh chóng chuẩn độ bằng HCl 0,5N cho đến khi dung dịch mất màu hồng

Kết quả:

Tính chỉ số savon:

X(savon) = (V K − V T)× f1× 28.055× f2

Hình 1: Sau khi chuẩn độ

Hình 2.2: Sau khi chuẩn độ

Giải thích:

_Phản ứng xà phòng hóa là quá trình thủy phân este trong môi trường kiềm, tạo thành glixerol

và hỗn hợp muối của các axit béo

_Sau khi nhỏ phenolphtalein dung dịch chuyển sang màu hồng do phenolphtalein hóa hồng trong môi trường kiềm (với pH < 12)

_Sau khi chuẩn độ bằng HCl  lượng axit trong dung dịch tăng  dung dịch mất màu hồng là do phenolphtalein không phản ứng với môi trường axit

Thí nghiệm 3: Chỉ số ester (X (ester))

Kết quả: Chỉ số ester được tính gián tiếp như sau:

X(ester) = X(savon) – X(acid) = 81.359 – 79.489 = 1.87(mg)

Thí nghiệm 4: Chỉ số iode (X (iode))

Bình 2

Hình 2.1: Sau khi thêm phenolphtalein

Tiến trình:

_Lấy 6 bình tam giác 100mL có nút mài, chia làm 3 nhóm, mỗi nhóm 2 bình

 Bình số 1: 1ml nước cất (mẫu kiểm chứng)

 Bình số 2: 1g dầu (mẫu thí nghiệm)

_Thêm vào mỗi bình 10mL cồn 96o và 10mL I2 0.1N

_Nhanh chóng đậy nút bình tam giác bằng nút nhám có tẩm qua dung dịch KI 10% để tránh tình trạng thăng hoa của Iode

_Để yên trong tối 1 giờ

_Sau đó chuẩn độ bằng Na2S2O3 0.1N đến khi dung dịch có màu vàng nhạt

_Thêm vào mỗi bình tam giác 10 giọt tinh bột 1%, tiếp tục chuẩn độ đến khi dung dịch mất màu xanh

Hình 4.2: Bình 1 sau khi chuẩn độ bằng dung dịch Na 2 S 2 O 3

(dung dịch có màu vàng nhạt)

Hình 4.3: Bình 2 sau khi chuẩn độ bằng dung dịch Na 2 S 2 O 3

(dung dịch có màu vàng nhạt) Hình 4.1: Hai bình dung dịch trước khi để yên trong bóng tối 1 giờ

Hình 4.4: Hai bình sau khi cho tinh bột vào và chuẩn độ tiếp

Kết quả:

1

Bình tam giác

2

Thể tích dung dịch phản ứng

Tính chỉ số Iode:

X(Iode) = (V K − V T)×0.01269 × f

m × 100 = (19.5− 10.7) ×0.01269 ×1

Giải thích:

_Khi thêm vào mỗi bình tam giác 10 giọt tinh bột 1%, ta thấy bình 1 có màu xanh nhạt, bình 2 không có màu

_Vì bình 1 lượng iode vẫn còn trong bình nên khi phản ứng với tinh bột, dung dịch cho màu xanh nhạt

_Bình 2, lượng iode đã hết khi kết hợp với các liên kết đôi trong phân tử acid béo không no trong dầu Nên khi cho tinh bột vào, không xảy ra phản ứng màu

Thí nghiệm 5: Chỉ số peroxide (X (peroxide))

Tiến trình:

_Lấy 6 erlenmeyer 250 mL có nút mài, chia làm 2 nhóm, mỗi nhóm 3 bình tam giác, đánh số nhóm 1 và 2, cho vào:

_Các erlenmeyer số 1: 2mL nước cất (mẫu kiểm chứng)

_Các erlenmeyer số 2: 2g dầu (mẫu thí nghiệm)

_Thêm vào mỗi bình tam giác 20mL dung môi hỗn hợp 2 (acid Acetic và Chloroform)

_Kể đỏ thêm vào mỗi bình tam giác 1mL KI bão hòa, lắc kỹ

_Đậy nút bình tam giác, để yên trong tối 50 phút.

Hình 5.2: Sau 50 phút trong tối

Bình 2 Bình 1

Hình 5.1: Trước khi để trong tối

_Sau đó cho vào mỗi bình 50mL nước cất và chuẩn độ bằng Na2S2O3 0,002N đến khi dung dịch

có màu vàng nhạt

Hình 5.3: Sau khi chuẩn độ dung dịch có màu vàng nhạt

Bình 2 Bình 1

_Thêm vào mỗi bình tam giác 10 giọt tinh bột 0,5%, tiếp tục chuẩn độ đến khi dung dịch mất màu xanh

Kết quả:

X(peroxide) = (V T −V K)× f ×0.000253

m × 100=(11.3 −6.65) ×1 ×0.000253

Giải thích:

_Cần tiến hành chuẩn độ nhanh vì dung môi dễ bay hơi  mẫu sẽ bị đục  kết quả xét điểm tương đương bị sai

_Cần đậy nắp bình tam giác vì I2 dễ thăng hoa, bỏ trong bóng tối vì oxi không khí + ánh sáng sẽ oxi hóa các acid béo không no  peroxide  kết quả bị sai

Bình 2 Bình 1

Hình 5.4: Sau khi chuẩn độ đến mất màu dung dịch