Tính thấm một chiều của da Ếch

Tính thấm một chiều của da Ếch Tính thấm một chiều của da Ếch Tính thấm một chiều của da Ếch Tính thấm một chiều của da Ếch Tính thấm một chiều của da Ếch Tính thấm một chiều của da Ếch Tính thấm một chiều của da Ếch

TÍNH THẤM MỘT CHIỀU CỦA DA ẾCH

I CƠ SỞ LÝ THUYẾTII ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU, DỤNG CỤ, HÓA CHẤTIII CÁC BƯỚC TIẾN HÀNH

IV KẾT QUẢ THỰC HÀNHV BÀN LUẬN KẾT QUẢ VÀ KẾT LUẬNVI TÀI LIỆU THAM KHẢO

I CƠ SỞ LÝ THUYẾT- Tế bào và mô là một hệ thống mở, thực hiện quá trình trao đổi chất với môi

trường bên ngoài, đồng thời thải các chất cặn bã ra ngoài môi trường Khảnăng đó được gọi là tính thấm của tế bào và mô Tính thấm không những chỉphụ thuộc vào cấu trúc đặc trưng của từng loại tế bào và mô mà còn phụthuộc rất nhiều vào trạng thái chức năng của chúng Khi tế bào bị chết thìtính thấm chọn lọc cũng không còn nữa

- Ngày nay ngoài thực bào, uống bào (còn gọi là ẩm bào) có hai cơ chế vận

chuyển vật chất qua màng tế bào đã được làm sáng tỏ, đó là:• Cơ chế vận chuyển thụ động

Là cơ chế vận chuyển vật chất qua màng theo tổng các loại gradient, khôngtiêu tốn năng lượng Quá trình vận chuyển này diễn ra như một quá trình khuếchtán, tuân theo định luật Fick:

dmdt = -DSdcdx

dmdt - tốc độ khuyếch tán vật chất qua màng (g/giây)

dcdx - gradien nồng độ (g/cm3)

S - tiết diện mà vật chất khuyếch tán qua (cm2)

D - hệ số khuyếch tán (g/cm2.giây)• Cơ chế vận chuyển tích cực

Là cơ chế vận chuyển vật chất qua màng ngược tổng gradien có tiêu phí nănglượng của quá trình trao đổi chất Cơ chế này gắn liền với hoạt động của cácchất mang là các phân tử lypoprotein trong thành phần cấu trúc màng

- Da ếch là một đối tượng thuận lợi để quan sát và nghiên cứu tính thấm một

chiều

Cấu tạo mô da ếch

1 Màng cutin 2 Lớp tế bào sừng 3 Các lớp tế bào sinh trưởng biểumô

a4 Lớp tế bào màng nền 5 Các sắc tố 6 Lớp mô liên kết

- Da ếch cấu tạo từ 2 lớp: biểu mô ở phía ngoài và mô liên kết ở bên trong.

+ Lớp ngoài: biểu mô được cấu tạo từ 5-8 lớp tế bào. Màng cutin: có nguồn gốc từ tuyến nhầy của da ếch. Lớp tế bào sừng

 Các lớp tế bào sinh trưởng biểu mô: hình tròn, xếp hơi thưa, tạo thànhcác khe gian bào

 Lớp tế bào màng nền: hình lăng trụ, nhân hình ovan, xếp xít nhau. Biểu mô của da ếch có khả năng hấp thụ cao, có tính axit yếu

+ Lớp trong: lớp mô liên kết-nơi định vị các sắc tốc màu đen.Lớp mô liênkết có khả năng hấp thụ yếu và phản ứng kiềm yếu Đặc biệt với một sốchất nhuộm có tính kiềm yếu như xanhmethylen, da ếch chỉ cho thấm mộtchiều từ mô liên kết ra biểu mô

II ĐỐI TƯỢNG, HÓA CHẤT, DỤNG CỤ

1 Đối tượng: ếch (da đùi ếch)2 Hóa chất, dụng cụ :

- 1 kim chọc tủy- 1 kéo to sắc- 1 cuộn chỉ- 1 khay mổ hoặc bàn mổ- 4 ống thủy tinh hình trụ có chiều dài 7-8 cm- 4 nắp đậy lá nhôm hoặc nhựa, ở giữa được đục một lỗ có đường kính bằngđường kính ống thủy tinh

- 6 cốc thủy tinh loại 100ml

- 1 máy so màu để xác định mật độ quang học của dung dịch- 100ml cồn 96

- 100ml dung dịch xanh methylen 0.05% trong dung dịch sinh lý- 100ml dung dịch sinh lý dùng cho động vật biến nhiệt

- 2 pipet loại 5-10ml và giá để pipet- 2 khăn lau dùng để mổ

- 2 con ếch/nhóm sinh viên

III CÁC BƯỚC TIẾN HÀNH

1 Chuẩn bị túi da ếch

- Mỗi nhóm bắt hai con ếch, dung kim chọc tủy ếch cho ếch bất động Cẩn thận lấy da ở hai chân sau của ếch sao cho không bị thủng để làm các túi da ếch - Dùng chỉ buộc một đầu của những túi da ếch đã chuẩn bị trên vào các ống thủy tinh hình trụ, còn đầu kia buộc túm lại Cho dung dịch sinh lý vào túi để kiểm tra xem túi có bị rò rỉ không

- Dùng hai chiếc, một để nguyên, chiếc kia lộn ngược lại cho biểu mô vào trongrồi ngâm vào dung dịch sinh lý cho da ếch giữ nguyên trạng thái sinh lý bình thường Hai chiếc còn lại làm như trên nhưng ngâm trong cồn 96

với thời gian là 20 phút nhằm giết chết da ếch

- Đổ dung dịch sinh lý đi và vớt hai chiếc túi da ếch ngâm trong cồn ra rồi cho 5

ml dung dịch xanh methylene 0,05% vào và nhúng các túi này vào các cốc đựng một lượng 100mldung dịch sinh lý bằng nhau

Chú ý sao cho mức xanh methylene trong túi cao bằng mức dung dịch sinh lí trong cốc

2 Quan sát hiện tượng thấm của xanh methylene qua các túi da ếch

Đặt các cốc có túi da ếch trên vao bình ổn nhiệt độ trong 40 phút Sau đó nhận xét bằng mắt thường xem xanh methylene khuyếch tán từ trong ra ngoài theo chiều nào: từ mô liên kết ra biểu mô hay ngược lại từ biểu mô ra mô liên kết? Đồng thời so sánh với những túi đã ngâm trong cồn xem có nhận xét gì, ghi các nhận xét vào vở và báo cáo kết quả với cán bộ hướng dẫn thực hành

3 Định lượng xanh methylene đã thấm qua da ếch

- Dựng đồ thị chuẩn

Sau khi đặt các túi da ếch vào bình ổn nhiệt, trong khi chờ đợi kết quả, nhanh nhóng chuẩn bị các dung dịch xanh methylene có các nồng độ: 0,002; 0,004; 0,006; 0,008; 0,01; 0,02% trong dung dịch sinh lí Dùng máy so màu xác định mật độ quang học (D) của các dung dịch vừa pha Dựng đồ thị biểu diễn sự phụ thuộc mật độ quang học vào nồng độ, ta có đồ thị chuẩn

- Xác định lượng xanh methylene đã thấm qua da

Sau 40 phút (hoặc lâu hơn nếu có thời gian) nhấc bỏ các túi da ếch ra khỏi các cốc, dùng đũa thủy tinh khuấy đều dung dịch trong cốc rồi đem xác định mật độ

quang học trên máy so màu, Dựa vào đồ thị chuẩn xác định nồng độ xanh methylene đã thấm qua da ra ngoài.

IV KẾT QUẢ

- Từ trái sang phải:

 Bình 1: Túi da ếch để nguyên và được ngâm trong dung dịch sinh lý

Có xanh methylene thấm ra ngoài nhưng rất ít. Bình 2: Túi da ếch lộn ngược và được ngâm trong dung dịch sinh lý

Không thấy thấm xanh methylene ra ngoài. Bình 3: Túi da ếch lộn ngược và được ngâm trong cồn

Thấy thấm xanh methylene ra ngoài. Bình 4: Túi da ếch để nguyên và được ngâm trong cồn

Thấy thấm xanh methylene ra ngoài

V BÀN LUẬN KẾT QUẢ VÀ KẾT LUẬN

• Bình 1: Lớp da ếch giữ nguyên bị xanh methylene thấm qua vì: lớp mô liên kết của ếch có tính kiềm yếu các chất này không bị phân li thành các ion, chúng cũng không bị hấp thu mạnh nên dễ dàng khuyết tán qua lớp biểu mô Tuy nhiên thời gian ngắn nên lượng xanh methylene thấm qua chưa nhiều.• Bình 2: Da lộn ngược không thấm vì: lớp biểu mô do có tính acid nên các chấtbị phân li và hấp thụ mạnh, do đó chúng không có khả năng khuyếch tán theo chiều ngược lại

• Bình 3+4 : Vì khi ngâm trong cồn các tết bào biểu mô và mô liên kết đều bị phá hủy nên xanh methylene dễ dàng thấm qua 2 lớp trên để ra ngoài dung dịch sinh lý

- Giải thích:+ Với cấu tạo của da ếch, lớp tế bào biểu mô bên ngoài là lớp có tính hấp thụ cao và có tính acid yếu Ngược lại, lớp mô liên kết có tính chất hấp thụ yếu và tính kiềm yếu

+ Với dung dịch kiềm yếu xanh methylen thì lớp tế bào biểu mô và lớp mô liên kết có tính hấp thụ khác nhau Vì:

 Tế bào biểu mô có tính hấp thụ cao và acid yếu sẽ hấp thụ mạnh dung dịch kiềm yếu xanh methylen và đưa dung dịch ra ngoài

 Lớp mô liên kết có tính hấp thụ yếu và kiềm yếu nên không hấp thụ tốt dung dịch xanh methylen mà lớp mô liên kết sẽ hấp thụ và giữ lại.→ Như vậy, tính thấm của da ếch từ trong ra ngoài tế bào cao hơn tính thấm từ ngoài vào trong

VI TÀI LIỆU THAM KHẢO - Phan Sỹ An ( Chủ biên ), Lý sinh Y học, NXB Y học, Hà Nội, 2005.

- Nguyễn Thị Qùy, Lý sinh học (Phần thực tập), NXB Khoa học và kỹ thuật, HàNội, 2002