đặng thị bảo quyên 21126482 dh21shb thứ 6 ca1

Thực tế ở nước ta có nguồn nguyên liệu trồng nấm rấtsẵn như: rơm rạ, mùn cưa, thân cây gỗ, thân lõi ngô, bông phế loại của các nhà máydệt, bã mía của các nhà máy đường… Ước tính cả nước

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH

KHOA KHOA HỌC SINH HỌC

BÁO CÁO MÔN HỌC

PHÁT TRIỂN SẢN PHẨM SINH HỌC

Sinh viên thực hiện : ĐẶNG THỊ BẢO QUYÊN

Mã số sinh viên : 21126482

Tháng 03/2024

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH

KHOA KHOA HỌC SINH HỌC

BÁO CÁO MÔN HỌC PHÁT TRIỂN SẢN PHẨM SINH HỌC

Hướng dẫn khoa học

KS NGUYỄN MINH QUANG

MSSV

21126482

Sinh viên thực hiện

ĐẶNG THỊ BẢO QUYÊN

Tháng 03/2024

MỤC LỤC

DANH SÁCH CÁC HÌNH ii

CHƯƠNG 1 MỞ ĐẦU 1

1.1 Đặt vấn đề 1

1.2 Mục tiêu thực hiện 1

1.3 Nội dung thực hiện 1

CHƯƠNG 2 TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2

2.1 Khái quát về nấm và hình thái học 2

2.1.1 Khái quảt về nấm 2

2.1.2 Hình thái học 2

2.2 Nấm bào ngư 2

2.2.1 Phân loại khoa học 3

2.2.2 Đặc điểm sinh học 3

2.2.3 Các yếu tố ảnh hưởng đến nấm bào ngư 4

2.3 Nấm linh chi 5

2.3.1 Phân loại và đặc điểm hình thái 5

2.3.3 Các yếu tố ảnh hưởng đến nấm linh chi Đài Loan 6

CHƯƠNG 3 VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP 7

3.1 Thời gian và địa điểm thực hiện 7

3.2 Vật liệu nghiên cứu và dung cụ thiết bị 7

3.2.1 Vật liệu nghiên cứu 7

3.2.2 Dụng cụ, thiết bị và hóa chất 7

3.3 Phương pháp nghiên cứu 7

3.3.1 Quy trình tổng quát nhân giống nấm 7

3.3.2 Chuẩn bị môi trường nuôi cấy 7

3.3.2.1 Chuẩn bị môi trường PDA và PDAY vật liệu nhân giống cấp 1 7

3.3.2.2 Phương pháp đóng túi meo lúa, phôi và thanh trùng 8

a) Phương pháp đóng túi meo lúa vật liệu nhân giống cấp 2 8

b) Phương pháp đóng phôi vật liệu nhân giống 9

c) Phương pháp thanh trùng 10

d) Phương pháp cấy giống cấp 1, cấp 2 và cấy phôi trấu 10

d) Phương pháp ươm túi 13

e) Phương pháp chăm sóc, thu hái 13

4.1 Kết quả quy trình cấy truyền mẫu nấm bào ngư xám sang môi trường PDAY 14

4.2 Kết quả quy trình cấy truyền mẫu nấm bào ngư xám vào môi trường meo lúa 14

4.3 Kết quả quy trình cấy truyền nấm linh chi Đài Loan trên môi trường mùn cưa 15

CHƯƠNG 5 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 16

5.1 Kết luận 16

5.2 Đề nghị 16

DANH SÁCH CÁC HÌNH

Hình 2.1 Nấm bào ngư 3

Hình 2.2 Nấm linh chi 5

Hình 3.1 Quá trình nấu môi trường PDA và PDAY 7

Hình 3.2 Quy trình đóng meo lúa 8

Hình 3.3 Quy trình đóng phôi 9

Hình 3.4 Phương pháp thanh trùng 10

Hình 3.5 Nhân giống cấp 1 11

Hình 3.6 Nhân giống cấp 2 .12

Hình 3.7 Nhân giống trong túi phôi 12

Hình 4.1 Ông nghiệm cấy truyền mẫu nấm bào ngư xám 12

Hình 4.2 Túi meo lúa sau 7 ngày nuôi cấy 14

Hình 4.3 Cấy truyền nấm linh chi Đài Loan trên cơ chất mùn cưa 15

CHƯƠNG 1 MỞ ĐẦU

1.1 Đặt vấn đề

Trồng nấm từ lâu đã được coi là một nghề đem lại lợi nhuận kinh tế khá cao ở Việt Nam với thu nhập hàng năm có thể lên tới 500 triệu đồng cho một trang trại Tuy nhiên việc áp dụng công nghệ trong canh tác nấm vẫn chưa được quan tâm đúng mức

và đầu tư bài bản so với nước ngoài Việc trồng nấm sử dụng túi nhựa chứa hỗn hợp đất trồng và phân hữu cơ kết hợp dàn dây treo trong nhà được coi là cách làm phổ biến

và lâu đời nhất từ trước tới nay Thực tế ở nước ta có nguồn nguyên liệu trồng nấm rất sẵn như: rơm rạ, mùn cưa, thân cây gỗ, thân lõi ngô, bông phế loại của các nhà máy dệt, bã mía của các nhà máy đường… Ước tính cả nước có trên 40 triệu tấn nguyên liệu và nếu chỉ cần sử dụng khoảng 10-15% lượng nguyên liệu này để nuôi trồng nấm

đã có thể tạo ra trên 1 triệu tấn nấm/năm và hàng trăm ngàn tấn phân hữu cơ Thế nhưng ở Việt Nam, phần lớn rơm rạ sau khi thu hoạch lúa đều bị đốt bỏ ngoài đồng ruộng hoặc ném xuống kênh, rạch, sông ngòi Vì thế, phát triển nghề sản xuất nấm ăn, nấm dược liệu ngoài cung cấp vầ nhu cầu lương thực mà còn có ý nghĩa lớn trong việc giải quyết ô nhiễm môi trường

Quy trình sản xuất và nuôi trồng nấm cực kỳ nghiêm ngặt, bàn tay phải vô trùng khi tiếp xúc với gần nấm hay nhưng thiết bị, vật dụng đảm bảo độ ẩm, nhiệt độ và ánh sáng phù hợp mọi giai đoạn phát triển của cây nấm Đặc biệt hơn, nấm trồng theo quy trình này có thể hái ngay và ăn sống được

1.2 Mục tiêu thực hiện

Thực hiện thành thạo quy trình nhân giống bào ngư xám và nấm linh chi Đài Loan phụ vụ nhân giống sản xuất nấm ăn và nấm dược liệu

1.3 Nội dung thực hiện

Nội dung : Quy trình nhân giống nấm bào ngư xám và bào ngư trắng nhân sinh khối giống nấm cấp 1, cấy 2, cấp 3

CHƯƠNG 2 TỔNG QUAN TÀI LIỆU

2.1 Khái quát về nấm và hình thái học

2.1.1 Khái quảt về nấm

Nấm không có lục lạp, không có sự phân hóa thành rễ, thân, lá, không có hoa, phần lớn không chứa cellulose trong thành tế bào, không có một chu trình phát triển chung như thực vật Nấm chỉ có thể hấp thu chất dinh dưỡng cần thiết cho cơ thể từ cơ thể khác hay từ đất qua bề mặt của tế bào hệ sợi nấm Chính vì thế, tất cả hệ thống phân loại sinh giới hiện nay đều coi nấm là một giới riêng, tương đương với giới thực vật và động vật (Nguyen Minh Quang) Năm 1973 nhà khoa học A.L.Takhtadjan đưa

ra hệ thống phân loại như sau:

- Giới Mycota: gồm vi khuẩn và vi khuẩn lam

- Giới nấm

- Giới thực vật

- Giới động vật

2.1.2 Hình thái học

Các nấm ăn thuộc ngành phụ nấm túi (Ascomycotina) và ngành phụ nấm đảm (Basidiomycotina) đều có thành tế bào cấu tạo chủ yếu bởi kitin – glucan.

Đối với nấm túi: Sợi nấm song nhân chỉ sinh ra trước khi hình thành túi Sự hình thành quả thể ở nấm túi là sự phối hợp giữa sợi nấm cấp một và sợi nấm song nhân Một số loại nấm có hình thái liên hợp dạng móc (clamp connection), tế bào đỉnh sợi nấm (2 nhân) mọc ra một mấu nhỏ, một trong hai nhân chui vào mấu này Mỗi nhân phân cắt thành hai, hai thành bốn nhân, hai nhân giữ lại đỉnh

tế bào, một nhân chui vào mấu, một nhân nằm ở gốc tế bào Tế bào đỉnh ban đầu xuất hiện hai vách ngăn, chia thành ba tế bào Sau đó vách ngăn giữa mấu và tế bào gốc bị khai thông, tế bào gốc tiếp nhận nhân từ mấu chuyển xuống và trở thành tế bào song nhân Như vậy từ một tế bào song nhân trở thành hai tế bào song nhân và giữa hai tế bào còn lưu lại một cái móc.

2.2 Nấm bào ngư

Nấm bào ngư hay còn gọi là nấm sò xám, nấm dai, nấm trắng, nấm hương chân

trắng có tên khoa học là Pleurotus sp.

Nấm bào ngư có tới 50 loài khác nhau Tuy nhiên số loài nuôi trồng được không nhiều khoảng 10 loài, gồm nhiều loại khác nhau về màu sắc và hình dạng, ít bị bệnh,

dễ trồng Nấm có dạng hình phễu lệch, thân có 3 phần mũ, phiến và cuống nấm

2.2.1 Phân loại khoa học

Giới (regnum): Fungi

Ngành (phylum): Basidiomycota

Lớp (class): Agaricomycetes

Bộ (ordo): Agaricales

Họ (familia): Pleurotaceae

Chi (genus): Pleurotus

Loài (species): P ostreatus

Nấm bào ngư hay còn gọi là nấm sò xám, nấm dai, nấm trắng và nấm hương

chân trắng nấm có tên khoa học là Pleurotus sp Nó là một loại nấm ăn được thuộc họ

Pleurotaceae Nấm bào ngư được trồng đầu tiên ở Đức Từ năm 1970, nấm đã được trồng rộng rãi trên khắp thế giới thế giới Nấm bào ngư thường mọc trên thân cây khô hoặc rơm rạ và phát triển thành các tai nấm xen kẽ nhau như hình bậc thang Nấm có giá trị dinh dưỡng cao như vitamin B, vitamin D và một số khoáng chất khác Hơn nữa, protein nấm có chứa tất cả các chất cần thiết các axit amin, đặc biệt là lysine và leucine, góp phần một lượng nhỏ trong hầu hết các loại ngũ cốc Ngoài ra các thành phần khác như lucid, vitamin, khoáng chất, axit béo (chủ yếu là axit không bão hòa, axit hữu cơ…) cũng góp phần tạo nên giá trị dinh dưỡng của nấm Ngoài ra, nấm ăn được còn có nhiều tác dụng có lợi cho sức khỏe như chữa bệnh huyết áp cao, béo phì

và rối loạn đường ruột Nhiều nghiên cứu cho thấy nấm bào ngư và các loại nấm ăn được khác nấm biểu hiện tác dụng chống ung thư Đồng thời, nấm cũng chứa nhiều axit folic hơn thịt và các loại rau cần thiết cho người bị thiếu máu Hơn nữa, nấm được chú ý vì ít chất béo và tinh bột

2.2.2 Đặc điểm sinh học

Nấm bào ngư có đặc điểm chung là tai nấm dạng phễu lệch, phiến mang bào, cuống nấm gần gốc có lớp lông nhỏ mịn Tai nấm bào ngư còn non có màu sắc sậm

Hình 2.1 Nấm bào ngư.

Nguồn: Internet.

hoặc tối nhưng khi trưởng thành màu trở nên sáng hơn Chu trình sống của nấm bào ngư cũng như các loại nấm đảm khác, bắt đầu từ đảm bào tử hữu tính, nẩy mầm cho hệ sợi tơ dinh dưỡng (sơithứ cấp).”Kết thúc” bằng việc hình thành cơ quan sinh sản là tai nấm Tai nấm sinh ra các đảm bào tử và chu trình lại tiếp tục Có 4 nhân đơn bội (n), mỗi nhân đơn bội về sau sẽ chui vào 1 đảm và tạo ra bào tử đảm (basidiospore)

Theo Lê Duy Thắng (2001), nấm bào ngư có đặc điểm chung là tai nấm có dạng phễu lệch, phiến nấm mang bào tử kéo dài xuống đến chân, cuống nấm gần gốc có lớp lông nhung nhỏ mịn Tai nấm bào ngư khi còn non có màu sậm hoặc tối nhưng khi trưởng thành có màu sáng hơn

Chu kỳ sống của nấm bắt đầu từ đảm bào tử hữu tính nảy mầm cho sợi tơ dinh dưỡng sơ cấp và thứ cấp, “kết thúc” bằng việc hình thành cơ quan sinh sản là tai nấm Tai nấm lại sinh đảm bào tử và chu kỳ sống lại tiếp tục

Quả thể nấm phát triển qua nhiều giai đoạn: dạng san hô, dạng dùi trống, dạng phễu dạng phễu lệch, dạng lá lục bình Từ giai đoạn phễu sang dạng phễu lệch có sự thay đổi về chất, còn từ giai đoạn phễu sang giai đoạn dạng lá lục bình có sự nhảy vọt

về khối lượng Vì vậy, thu hái nấm bào ngư nên chọn lúc tai nấm vừa chuyển sang dạng lá

2.2.3 Các yếu tố ảnh hưởng đến nấm bào ngư

Ngoài các chất dinh dưỡng, sự sinh trưởng và phát triển của nấm còn liên quan đến nhiều yếu tố khác của môi trường như: nhiệt độ, ẩm độ, pH, ánh sáng, oxy

Theo Lê Duy Thắng (2001) về nguồn dinh dưỡng ngoài các chất có trong nguyên liệu trồng cần bổ sung thêm nguồn đạm (cám, ure), khoáng (super lân, vôi, amon phosphate) Việc bổ sung sẽ giúp sợi nấm mọc nhanh hơn, sản lượng nấm cao hơn nhưng cũng dễ nhiễm các tạp khuẩn, tạp nấm hơn

Việc ảnh hưởng về nhiệt độ: Trong thực tế có các chủng loại nấm bào ngư thích ứng khác nhau với nhiệt độ của môi trường Người ta chia thành 6 loại: loại ưa lạnh (8-13°C), loại chịu rét (10-18°C), loại ưa ấm (12-22°C), thích nghi khá rộng (12-24°C), thích nghi rộng (15-25°C)

Độ ẩm: Trong thời kỳ tưới đón nấm, độ ẩm không khí không được dưới 70%, tốt nhất là 70-95% Độ ẩm cơ chất tốt nhất là 50-60%

Ánh sáng: Không cần nhiều ánh sáng, tốt nhất là 200-300 lux (ánh sáng phòng, ánh sáng khuếch tán)

Đối với yếu tố pH: Khả năng chịu đựng sự dao động của pH tương đối tốt Thích hợp nhất là 5-6

Nồng độ CO2: Quá trình nảy mầm của bào tử và tăng trưởng của tơ nấm bào ngư cần nồng độ CO2 cao (22%), nhưng khi cần ra nấm thì nồng độ CO2 phải giảm và lượng oxy tăng lên

Độ thông thoáng: Vừa phải và tránh gió lùa trực tiếp

2.3 Nấm linh chi

Nấm Linh chi (Ganoderma lucidum) có nhiều tên gọi khác nhau như Bất lão thảo, Vạn niên thảo, Thần tiên thảo, Chi linh, Đoạn thảo, Nấm lim,…Mỗi tên gọi của Linh chi gắn liền với một giá trị dược liệu của nó Tên gọi Linh chi bắt nguồn từ Trung Quốc, hay theo tiếng Nhật gọi là Reishi hoặc Mannentake

Ở các nước Châu Á, đặc biệt Trung Quốc, Nhật Bản, Hàn Quốc, Đài Loan…, việc nghiên cứu phát triển và sử dụng Linh chi đang được công nghiệp hóa với quy mô lớn về phân loại, nuôi trồng chủ động, chế biến và bào chế dược phẩm Đồng thời nghiên cứu hóa dược các hoạt chất có tác dụng dược lý và phương pháp điều trị lâm sàng

Trong số các loài Linh chi tìm thấy cho đến nay thì xích chi (Ganoderma lucidum) được nghiên cứu y dược chi tiết nhất Loài chuẩn Ganoderma lucidum có thành phần hoạt chất sinh học phong phú và hàm lượng nhiều nhất

2.3.1 Phân loại và đặc điểm hình thái

Nấm Linh chi có vị trí phân loại được thừa nhận rộng rãi hiện nay

Ngành: Eumycota

Ngành phụ: Basidiomycotina

Lớp: Hymenomycetes

Lớp phụ: Hymenomycetidae

Bộ: Aphyllophorales

Họ: Ganodermataceae

Họ phụ: Ganodermoidae

Chi: Amauroderma

Quả thể của nấm Linh chi thu hái được có cuống ngắn, đính bên, cuống nấm to (đường kính 2- 3 cm), lớp vỏ cuống láng, đỏ nâu Mũ nấm hình quạt, đôi khi có hình

dị dạng, mặt mũ nấm láng, đỏ nâu, có vân gợn đồng tâm Khi còn non, tai nấm có màu

Hình 2.2 Nấm linh chi.

Nguồn: Internet.

vàng chanh – vàng cam cho đến đỏ tươi, càng về già thì màu càng sẫm lại Kích thước

từ 3 – 12 cm, dày từ 1 – 3,5 cm Phần đính cuống gồ lên hoặc lõm xuống Mặt dưới thể quả thường màu trắng kem – hơi vàng, có nhiều lỗ nhỏ Đây là lớp bào tầng sinh sản của nấm, chính những lỗ này là nơi phóng thích bào tử khi quả thể trưởng thành Mật

độ lỗ khoảng 3 – 5 ống/mm2, miệng lỗ gần tròn Khi bổ đôi quả thể ra thì thấy đây là những ống thẳng, chiều dày từ 0,3 – 1,5 cm Khi bào tử đảm chín thì nó được phóng thích dọc theo ống này và thoát ra ngoài qua miệng lỗ ống Còn phần thịt nấm ở trên thì có màu vàng nâu đến nâu đỏ Phân cách giữa phần trên và phần dưới (tầng sinh sản)

là khá rõ ràng vì phần trên thì các lớp tia sợi hướng lên, còn phần dưới thì là ống thẳng hướng xu

2.3.3 Các yếu tố ảnh hưởng đến nấm linh chi Đài Loan

Nhiệt độ không nên thay đổi quá lớn, nếu thay đổi nấm Linh chi khó phát triển thành tán mà ở dạng sừng hươu, đuôi gà (Trịnh Tam Kiệt, 1983)

Các loại bột cám ngũ cốc, bột bánh dầu được xem là nguồn dinh dưỡng cơ bản cho nấm, hàm lượng bổ sung của chúng khá cao, từ 15 – 20% so với tổng lượng cơ chất Đây là nguồn cung cấp vitamine và đạm hữu cơ quan trọng cho nấm Linh chi – loại nấm đòi hỏi tỷ lệ C/N nhỏ, nhất là trong những giai đoạn đầu của quá trình sinh trưởng (Trịnh Tam Kiệt, 1983 và Lý Kiện, 1992)

CHƯƠNG 3 VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP

3.1 Thời gian và địa điểm thực hiện

Thời gian thực hiện từ ngày 8 tháng 3 đến ngày 15 tháng 3 năm 2024

Được tiến hành tại Phòng thí nghiệm nấm ăn và nấm dược liệu, Trường Đại học Nông Lâm TP HCM

3.2 Vật liệu nghiên cứu và dung cụ thiết bị

3.2.1 Vật liệu nghiên cứu

Giống nấm bào ngư (Pleurotus sp.) và nấm linh chi Đài Loan được cung cấp tại

phòng thí nghiệm nấm ăn và nấm dược liệu

3.2.2 Dụng cụ, thiết bị và hóa chất

Tủ an toàn sinh học, nồi hấp tiệt trùng, túi chịu nhiệt, cân đồng hồ lò xo, đĩa petri, ống nghiệm, que cấy, giàn phôi nấm và các vật liệu tiêu hao, môi trường lúa nuôi cấy, môi trường PDA (Potato Dextrose Agar), môi trường PDAY (Potato Dextrose Agar Yeast), phôi nấm, cám, mùn cưa, vôi

3.3 Phương pháp nghiên cứu

3.3.1 Quy trình tổng quát nhân giống nấm

3.3.2 Chuẩn bị môi trường nuôi cấy

3.3.2.1 Chuẩn bị môi trường PDA và PDAY vật liệu nhân giống cấp 1

Trên môi trường thạch, ngoài việc cung cầp nguồn dinh dưỡng dễ hấp thu cho nấm, còn thuận tiện trong việc quan sát, phát hiện các mầm bệnh nhiễm tạp

Môi trường nhân giống trong ống nghiệm: 500ml môi trường PDA ( 100g

khoai tây, dextrose 10g, agar 10g) và 500ml môi trường PDAY ( 100g khoai tây, dextrose 10g, agar 10g, 1g yeast)

Cách pha môi trường PDA và PDAY: khoai tây rửa sạch, gọt vỏ, cắt lát mỏng Nấu 200g khoai tây đã cắt lát mỏng trong nước, giữ sôi trong khoảng 30-40 phút Lọc thu dịch chiết loại bỏ cặn Hòa tan 20g dextrose vào dịch chiết, thêm nước cho đủ 1.000 mL thu được môi trường PDA Bổ sung thêm 15g agar, làm nóng môi trường để làm tan agar, thu được môi trường PDA Chia môi trường vào các ca thủy tinh trung tính hoặc các bình tam giác phân làm 2 bình, mỗi bình có thể tích 500ml, thêm 1 bình 1g yeast Thể tích môi trường bằng 1/3 ống nghiệm, đậy nút bông Hấp khử trùng môi trường ở 121oC, 1atm trong 20 phút Nghiên ống nghiệm khi còn nóng để làm ống thạch nghiên cấy nấm

Hình 3.1 Quá trình nấu môi trường PDA và PDAY.

3.3.2.2 Phương pháp đóng túi meo lúa, phôi và thanh trùng

a) Phương pháp đóng túi meo lúa vật liệu nhân giống cấp 2

Đem 2kg hạt lúa đi ngâm nấu chín cho đến khi hạt lúa nứt mép đều Vớt ra để ráo nước sau đó Tiếp theo, trộn cám ngô với lúa vừa luộc, cám ngô chiếm 3-5% tổng số

(a)

(f) (e)

(d)

(c) (b)

(g)