Tính đa dạng của hệ vi khuẩn và mối liên quan giữa tình trạng nhiễm một số chủng vi khuẩn đường tiêu hoá với ung thư đại trực tràng

Tính đa dạng của hệ vi khuẩn và mối liên quan giữa tình trạng nhiễm một số chủng vi khuẩn đường tiêu hoá với ung thư đại trực tràngTính đa dạng của hệ vi khuẩn và mối liên quan giữa tình trạng nhiễm một số chủng vi khuẩn đường tiêu hoá với ung thư đại trực tràngTính đa dạng của hệ vi khuẩn và mối liên quan giữa tình trạng nhiễm một số chủng vi khuẩn đường tiêu hoá với ung thư đại trực tràngTính đa dạng của hệ vi khuẩn và mối liên quan giữa tình trạng nhiễm một số chủng vi khuẩn đường tiêu hoá với ung thư đại trực tràngTính đa dạng của hệ vi khuẩn và mối liên quan giữa tình trạng nhiễm một số chủng vi khuẩn đường tiêu hoá với ung thư đại trực tràngTính đa dạng của hệ vi khuẩn và mối liên quan giữa tình trạng nhiễm một số chủng vi khuẩn đường tiêu hoá với ung thư đại trực tràngTính đa dạng của hệ vi khuẩn và mối liên quan giữa tình trạng nhiễm một số chủng vi khuẩn đường tiêu hoá với ung thư đại trực tràngTính đa dạng của hệ vi khuẩn và mối liên quan giữa tình trạng nhiễm một số chủng vi khuẩn đường tiêu hoá với ung thư đại trực tràngTính đa dạng của hệ vi khuẩn và mối liên quan giữa tình trạng nhiễm một số chủng vi khuẩn đường tiêu hoá với ung thư đại trực tràngTính đa dạng của hệ vi khuẩn và mối liên quan giữa tình trạng nhiễm một số chủng vi khuẩn đường tiêu hoá với ung thư đại trực tràngTính đa dạng của hệ vi khuẩn và mối liên quan giữa tình trạng nhiễm một số chủng vi khuẩn đường tiêu hoá với ung thư đại trực tràngTính đa dạng của hệ vi khuẩn và mối liên quan giữa tình trạng nhiễm một số chủng vi khuẩn đường tiêu hoá với ung thư đại trực tràngTính đa dạng của hệ vi khuẩn và mối liên quan giữa tình trạng nhiễm một số chủng vi khuẩn đường tiêu hoá với ung thư đại trực tràngTính đa dạng của hệ vi khuẩn và mối liên quan giữa tình trạng nhiễm một số chủng vi khuẩn đường tiêu hoá với ung thư đại trực tràngTính đa dạng của hệ vi khuẩn và mối liên quan giữa tình trạng nhiễm một số chủng vi khuẩn đường tiêu hoá với ung thư đại trực tràngTính đa dạng của hệ vi khuẩn và mối liên quan giữa tình trạng nhiễm một số chủng vi khuẩn đường tiêu hoá với ung thư đại trực tràngTính đa dạng của hệ vi khuẩn và mối liên quan giữa tình trạng nhiễm một số chủng vi khuẩn đường tiêu hoá với ung thư đại trực tràngTính đa dạng của hệ vi khuẩn và mối liên quan giữa tình trạng nhiễm một số chủng vi khuẩn đường tiêu hoá với ung thư đại trực tràngTính đa dạng của hệ vi khuẩn và mối liên quan giữa tình trạng nhiễm một số chủng vi khuẩn đường tiêu hoá với ung thư đại trực tràngTính đa dạng của hệ vi khuẩn và mối liên quan giữa tình trạng nhiễm một số chủng vi khuẩn đường tiêu hoá với ung thư đại trực tràngTính đa dạng của hệ vi khuẩn và mối liên quan giữa tình trạng nhiễm một số chủng vi khuẩn đường tiêu hoá với ung thư đại trực tràngTính đa dạng của hệ vi khuẩn và mối liên quan giữa tình trạng nhiễm một số chủng vi khuẩn đường tiêu hoá với ung thư đại trực tràngTính đa dạng của hệ vi khuẩn và mối liên quan giữa tình trạng nhiễm một số chủng vi khuẩn đường tiêu hoá với ung thư đại trực tràngTính đa dạng của hệ vi khuẩn và mối liên quan giữa tình trạng nhiễm một số chủng vi khuẩn đường tiêu hoá với ung thư đại trực tràngTính đa dạng của hệ vi khuẩn và mối liên quan giữa tình trạng nhiễm một số chủng vi khuẩn đường tiêu hoá với ung thư đại trực tràngTính đa dạng của hệ vi khuẩn và mối liên quan giữa tình trạng nhiễm một số chủng vi khuẩn đường tiêu hoá với ung thư đại trực tràngTính đa dạng của hệ vi khuẩn và mối liên quan giữa tình trạng nhiễm một số chủng vi khuẩn đường tiêu hoá với ung thư đại trực tràngTính đa dạng của hệ vi khuẩn và mối liên quan giữa tình trạng nhiễm một số chủng vi khuẩn đường tiêu hoá với ung thư đại trực tràngTính đa dạng của hệ vi khuẩn và mối liên quan giữa tình trạng nhiễm một số chủng vi khuẩn đường tiêu hoá với ung thư đại trực tràngTính đa dạng của hệ vi khuẩn và mối liên quan giữa tình trạng nhiễm một số chủng vi khuẩn đường tiêu hoá với ung thư đại trực tràngTính đa dạng của hệ vi khuẩn và mối liên quan giữa tình trạng nhiễm một số chủng vi khuẩn đường tiêu hoá với ung thư đại trực tràngTính đa dạng của hệ vi khuẩn và mối liên quan giữa tình trạng nhiễm một số chủng vi khuẩn đường tiêu hoá với ung thư đại trực tràngTính đa dạng của hệ vi khuẩn và mối liên quan giữa tình trạng nhiễm một số chủng vi khuẩn đường tiêu hoá với ung thư đại trực tràngTính đa dạng của hệ vi khuẩn và mối liên quan giữa tình trạng nhiễm một số chủng vi khuẩn đường tiêu hoá với ung thư đại trực tràngTính đa dạng của hệ vi khuẩn và mối liên quan giữa tình trạng nhiễm một số chủng vi khuẩn đường tiêu hoá với ung thư đại trực tràng

BỘ GIÁO DỤC VÀĐÀOTẠO BỘ QUỐCPHÒNG

VIỆN NGHIÊN CỨU KHOA HỌC Y DƯỢC LÂM SÀNG108

NGUYỄN DUY TRƯỜNG

NGHIÊN CỨU MỐI LIÊN QUAN

GIỮAMỘTSỐCHỦNGVIKHUẨNĐƯỜNGTIÊUHOÁ VỚIUNG THƯ ĐẠI TRỰCTRÀNG

LUẬN ÁN TIẾN SĨ Y HỌC

Hà Nội - 2023

BỘ GIÁO DỤC VÀĐÀOTẠO BỘ QUỐCPHÒNG

VIỆN NGHIÊN CỨU KHOA HỌC Y DƯỢC LÂM SÀNG108

NGUYỄN DUY TRƯỜNG

TÍNH ĐA DẠNG CỦA HỆ VI KHUẨN VÀ MỐILIÊN QUAN GIỮA TÌNH TRẠNG NHIỄMMỘT

SỐ CHỦNG VI KHUẨN ĐƯỜNG TIÊU HOÁ VỚIUNGTHƯĐẠI TRỰCTRÀNG

Ngành: Bệnh truyền nhiễm và các bệnh nhiệt đới Mã số: 9720109

LUẬN ÁN TIẾN SĨ Y HỌC

HƯỚNG DẪN KHOA HỌC:1 GS.TS Lê HữuSong2 TS Ngô TấtTrung

Hà Nội - 2024

LỜI CAM ĐOAN

Tôi xin cam đoan đây là công trình nghiên cứu của riêng tôi, các số liệutrong luận án là do chính tôi thu thập và chưa từng được ai công bố trong bấtkỳ công trình nào khác.

Tôi xin đảm bảo tính khách quan, trung thực của các số liệu và kết quảxử lý số liệu trong nghiên cứu này.

Hà Nội, ngày 04 tháng 10 năm 2023

Tác giả luận án

Nguyễn Duy Trường

LỜI CẢM ƠN

Tôi xin chân thành cảm ơn Ban Giám đốc, Phòng sau đại học, BộmônTruyền nhiễm và các bệnh nhiệt đới – Viện Nghiên cứu khoa học y dượclâm sàng 108/Bệnh viện Trung ương Quân đội 108 đã cho phép và tạo mọiđiều kiện thuận lợi cho tôi trong suốt quá trình học tập, nghiên cứu và hoànthành luận án.

Vớilòngkínhtrọngvàbiếtơnsâusắc,tôixinchânthànhcảmơntớiThầyGS.TS LêHữu Song, Thầy TS Ngô Tất Trung đã tận tình hướng dẫn, tạo mọiđiềukiệntốtnhấtchotôitrongquátrìnhhọctậpvàhoànthiệnluậnán.

Cuối cùng, nhưng vô cùng quan trọng, tôi xin trân trọng gửi lời cảmơntới gia đình, những người luôn bên tôi, là chỗ dựa tinh thần vững chắc đểtôi yên tâm học tập và hoàn thành luận án này.

Hà Nội, ngày 04 tháng 10 năm 2023

NCS Nguyễn Duy Trường

MỤC LỤCLời cảm ơn

Mục lục

Danh mục chữ viết tắtDanh mục bảng

Danh mục hình Danh mục biểu đồ

1.2.4 Vai trò của vi môi trường khối u trong cơ chế bệnh sinh ung thưđạitrực tràng 10

1.2.5 Đặc điểm hệ vi khuẩn tại tổ chức u và tổ chức di căn ở bệnh nhânung thư đạitrựctràng 12

1.3 VAITRÒCỦA HỆVIKHUẨN ĐƯỜNG TIÊU HOÁTRONGCƠCHẾBỆNHSINHUNGTHƯĐẠITRỰCTRÀNG .141.3.1 Đặc điểm hệ vi khuẩn đường tiêu hoáởngười 14

1.3.2 Một số cơ chế sinh ung thư đại trực tràng liên quan đến hệ vikhuẩn đườngtiêuhoá 16

1.3.3 Vai trò củaFusobacterium nucleatumtrong cơ chế bệnh sinhungthưđạitrựctràng 18

1.3.4 Tình hình nghiên cứu về mối liên quan giữaF nucleatumvớiung thư đạitrựctràng 22

1.3.5 Vai trò củaBacteroides fragilistrong cơchếbệnh sinh ung

1.5.1 Chẩn đoán polyp đạitrựctràng 31

1.5.2 Chẩn đoán ung thư đạitrựctràng 32

1.6 ỨNG DỤNG KỸ THUẬT 16S rRNA METAGENOMICS TRONGNGHIÊN CỨU TÍNH ĐA DẠNG HỆ VI KHUẨN ĐƯỜNG TIÊUHOÁ 33

1.6.1 Kháiniệm 33

1.6.2 Ứng dụng 16S rRNA metagenomics nghiên cứu mối liên quangiữa hệ vi khuẩn đường tiêu hoá với ung thư đại trực tràng trênthếgiới 34

1.6.3 Ứng dụng 16S rRNA metagenomics nghiên cứu mối liên quangiữa hệ vi khuẩn đường tiêu hoá với ung thư đại trực tràng tạiViệtNam 36

Chương 2 ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁPNGHIÊNCỨU 37

3.2.2 Chỉ số đa dạng sinh học alpha(Alphadiversity) 66

3.2.3 Chỉ số đa dạng sinh học beta(Betadiversity) 69

3.2.4 Chỉ thịsinhhọc 71

3.3 MỐILIÊNQUANGIỮATÌNHTRẠNGNHIỄMF.NUCLEATUMVÀB.FRAGILISVỚIUNGTHƯĐẠITRỰCTRÀNG 75

3.3.1 TỷlệpháthiệnF.nucleatumvàB.fragilistạimẫumôđạitrựctràng 75

3.3.2 Tải lượng tương đối củaF nucleatumvàB fragilistạimẫu mô đạitrựctràng 80

3.3.3 Mối liên quan giữa tuổi, giới, vị trí u, nhiễmF.nucleatumvàB fragilisvới nguy cơ ung thư đạitrựctràng 83

Chương 4BÀNLUẬN 85

4.1 ĐẶCĐIỂMCHUNG 85

4.1.1 Đặc điểm về tuổivàgiới 85

4.1.2 Đặc điểm vị trí ung thư đạitrựctràng 86

4.1.3 Đặc điểm mô bệnh học của bệnh nhân ung thư đạitrựctràng 87

4.1.4 Đặc điểm giai đoạn bệnh củabệnhnhân 88

4.1.5 ĐặcđiểmnồngđộCEAhuyếttươngtạithờiđiểmchẩnđoán 88

4.2 TÍNHĐA DẠNG HỆ VI KHUẨN TẠI MÔ UNG THƯ ĐẠI

TRỰCTRÀNG, MÔ GAN VÀ HẠCHDICĂN 89

4.2.1 Thành phần hệ vi khuẩn(taxonomicprofilling) 89

4.2.2 Chỉ số đa dạng sinh học alpha(Alphadiversity) 93

4.2.3 Chỉ số đa dạng sinh học beta(Betadiversity) 95

4.2.4 Chỉ thị sinh học(Biomarkeranalysis) 96

4.3 MỐI LIÊN QUAN GIỮAF NUCLEATUMVỚI UNG THƯ ĐẠITRỰCTRÀNG 100

4.3.1 Tỷ lệ phát hiệnF nucleatumtại mẫu u đạitrựctràng 100

4.3.2 Tải lượng tương đối củaF nucleatumtại mẫu u đại trựctràng1024.3.3 Mối liên quan giữa tuổi, giới, vị trí u và nhiễmF.nucleatumvới nguy cơ ung thư đạitrựctràng 106

4.4 MỐILIÊNQUANGIỮAB.FRAGILISVỚIUNGTHƯĐẠITRỰCTRÀNG 106

4.4.1 Tỷ lệ phát hiệnB fragilistại mẫu u đạitrựctràng 106

4.4.2 Tải lượng tương đối củaB fragilistại mẫu u đạitrựctràng 108

4.4.3 Mối liên quan giữa tuổi, giới, vị trí u, nhiễmB.fragilisvới nguy cơ ung thư đạitrựctràng 109

4.5 MỐILIÊNQUANGIỮATÌNHTRẠNGĐỒNGNHIỄMF.NUCLEATUMVÀB FRAGILISVỚI UNGTHƯĐẠITRỰCTRÀNG 110

4.6 NHỮNGĐIỂMHẠNCHẾCỦALUẬNÁN 111

KIẾNNGHỊ 114DANH MỤC CÁC CÔNG TRÌNH NGHIÊN CỨU KHOA HỌC

ĐÃCÔNG BỐ CÓ LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN ÁNTÀI LIỆU THAM

KHẢOPHỤ LỤC

DANH SÁCH BỆNH NHÂN

DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT

1 AJCC American Joint Committee on Cancer(Hiệp hội ung thư Mỹ)

Analysis of compositions of microbiomes withbias correction (Phân tích thành phần của hệ visinh vật với hiệu chỉnh sai số)

3 APC Adenomatous Polyposis Coli (Gen ức chế khối u APC)4 B fragilisBacteroides fragilis

6 BRAF B-Raf proto-oncogene serine/threonine kinase (Tiền gen sinh ung thư BRAF)

7 CDC Centers for Disease Control and Prevention (TrungtâmkiểmsoátvàphòngngừabệnhtậtMỹ)

(Kháng nguyên ung thư bào thai)9 CIMP CpG island methylator pathway

(Con đường methyl hóa các đảo CpG)10 CIN pathway Chromosomal Instability pathway

(Con đường mất ổn định nhiễm sắc thể)

STT Phần viết tắtPhần viết đầy đủ

14 DNA MMR DNA mismatch repair

(Hệ thống sửa lỗi ghép cặp DNA)

16 ECM Extracellular matrix (Ma trận ngoại bào)

17 ECs Intestinal epithelial cells (Tế bào biểu mô ruột)18 EPCs Endothelial progenitor cells

(Tế bào tiền thân nội mô)

19 F nucleatumFusobacterium nucleatum

20 FadA Fusobacteriumadhesin A (Yếu tố kết dính FadA)

21 FAP Familial adenomatous polyposis (Bệnh đa polyp tuyến gia đình)

22 Fap2 Fusobacteriumautotransporter protein 2

(Protein vận chuyểnFusobacterium)

23 FCD Mô ung thư đại trực tràng

26 FFPE Formalin-fixed paraffin-embedded

(Cố định formalin và đúc khối nến paraffin)27 GLOBOCAN Global Cancer Observatory

(Tổ chức ghi nhận ung thư toàn cầu)

28 HNPCC Hereditary Nonpolyposis Colorectal Cancer(Ung thư đại trực tràng không đa polyp di truyền)

STT Phần viết tắtPhần viết đầy đủ

29 IBD Inflammatory Bowel Disease (Bệnh viêm ruột)

30 KRAS

Kirsten rat sarcoma viral oncogene homolog(Gen tương đồng với gen sinh ung thư của chuột Kirsten)

31 LefSe Linear discriminant analysis Effect Size (Phân tích sự khác biệt tuyến tính)

32 NF-kB Nuclear factor-κB signalling B signalling (Yếu tố nhân kappa B)

33 NK Natural killer (Tế bào giết tự nhiên)34 NOS Nitrogen oxygen species

(Các gốc chứa nitơ hoạt tính)

35 NSAID Non-steroidal antiinflamatory drug (Thuốc chống viêm không steroid)36 PCR Polymerase chain reaction

(Phản ứng khuếch đại chuỗi)37 PRR Pattern recognition receptors

(Các thụ thể nhận diện kiểu mẫu)38 ROS Reactive oxygen species

(Các gốc chứa oxy hoạt tính)

39 RQ Realative Quantification (Tải lượng tương đối)40 UTĐTT Ung thư đại trực tràng

41 WHO World Health Organization (Tổ chức Y tế thế giới)

DANH MỤC BẢNG

Bảng 2.1 Phân loại giai đoạn bệnh theoWHO2019 42

Bảng 2.2 Kết quả đánh giá xây dựngquytrình 48

Bảng 2.3 Trình tự mồi và mẫu đầu dòsử dụng trong nghiêncứu 56

Bảng 2.4 Thành phần phản ứngRealtimePCR 57

Bảng 2.5 Chu kỳ nhiệt phản ứngRealtimePCR 57

Bảng 3.1 Đặc điểm tuổi và giới củabệnhnhân 60

Bảng 3.2 Đặc điểm vị trí polyp và ung thư đạitrựctràng 61

Bảng 3.4 Đặc điểm giai đoạn bệnh của bệnhnhânUTĐTT 62

Bảng 3.6 Chỉ số beta giữa cácnhómmẫu 70

Bảng 3.7 Tỷ lệ phát hiệnF nucleatumtại mẫu mô ung thư đại trực tràng vàpolyp đạitrựctràng 75

Bảng 3.8 Tỷ lệ phát hiệnF nucleatumtại mẫu mô ung thư đại trực tràng theogiai đoạn và mô lành cạnhungthư 76

Bảng 3.9 Tỷ lệ phát hiệnF nucleatumtại mẫu mô ung thư đại trực tràngtheo vịtríu 76

Bảng 3.10 Tỷ lệ phát hiệnB fragilistại mẫu mô ung thư đại trực tràng vàpolypđạitrựctràng 77

Bảng 3.11 Tỷ lệ phát hiệnB fragilistại mẫu mô ung thư đại trực tràng theogiai đoạn và mô lành cạnhung thư 77

Bảng 3.12 Tỷ lệ phát hiệnB fragilistại mẫu mô ung thư đại trực tràng theovịtríu 78

Bảng 3.13 Tỷ lệ phát hiện đồng nhiễmF nucleatumvàB fragilistại mẫumôđại trực tràng theo giaiđoạnbệnh 78

Bảng 3.14 Tỷ lệ phát hiện đồng nhiễmF nucleatumvàB fragilistại mẫumô

ung thư đại trực tràng và mô lành cạnhungthư 79

Bảng 3.15 Tỷ lệ phát hiện đồng nhiễmF nucleatumvàB fragilistại

mẫu mô ung thư đại trực tràng theo vịtríu 79

Bảng 3.16 Tải lượng tương đối củaF nucleatumtại mẫu mô ung thư

đại trực tràng và polyp đạitrựctràng 80

Bảng 3.17 Tải lượng tương đối củaF nucleatumtại mẫu mô ung thư

đại trực tràng theo giai đoạn và mô lành cạnhungthư 80

Bảng 3.18 Tải lượng tương đối củaF nucleatumtại mẫu mô ung thư

đại trực tràng theo vịtríu 81

Bảng 3.19 Tải lượng tương đối củaB fragilistại mẫu mô ung thư

đại trực tràng và polyp đạitrựctràng 81

Bảng 3.20 Tải lượng tương đối củaB fragilistại mẫu mô đại trực tràng

theo giai đoạn và mô lành cạnhungthư 82

Bảng 3.21 Tải lượng tương đối củaB fragilistại mẫu mô ung thư

đại trực tràng theo vịtríu 82Bảng 3.22 Yếu tố nguy cơ ung thư đại trực tràng bằng phân tích hồi quy

đơnbiếnlogistic 83Bảng 3.23 Yếu tố nguy cơ ung thư đại trực tràng bằng phân tích hồi quy

đabiếnlogistic 84

DANH MỤC HÌNH

Hình 1.1 Mô hình biến đổi gen trong UTĐTTcủa Fearon (A) và được bổsung bởiVogelstein(B) 5Hình 1.2 Các con đường hìnhthànhUTĐTT 6Hình 1.3 Sơ lược về đường truyền tínhiệuWnt 8Hình 1.4 Vai trò của các acid béo chuỗi ngắn (SCFAs) và polyamines

trongcơ chế bệnh sinh ung thư đạitrựctràng 18

Hình 1.5 Vai trò củaF nucleatumtrong cơ chế bệnh sinh ung thư

Hình 1.6 Vai trò củaB fragilistrong cơ chế bệnh sinh ung thư

đạitrựctràng 26Hình 2.1 Sơ đồ thiết kếnghiêncứu 39Hình 2.2 Phân tích kết quả xét nghiệm 16SrRNAmetagenomics 50

DANH MỤC BIỂU ĐỒ

Biểu đồ 3.1 Thành phần hệ vi khuẩn tại các mẫu mô ở mức

Biểu đồ 3.2 Thành phần hệ vi khuẩn tại các mẫu mô ở mức phânloạichi 64

Biểu đồ 3.3 Thành phần hệ vi khuẩn tại các mẫu mô ở mức phân loại loài 65Biểu đồ 3.4 Chỉ số alpha giữacácmẫu 67

Biểu đồ 3.5 So sánh các chỉ số alpha ở cácnhómmẫu 68

Biểu đồ 3.7 Xác định các biomarker bằng phântíchLefSe 71

Biểu đồ 3.8 Đồ thị biểu diễn sự thay đổi cấp log2 ở mức phân loại ngành vềtỷlệ vi sinh vật giữa các 2 nhóm mẫu và thanh khoảng tin cậy95% 72

Biểu đồ 3.9 Tỷ lệ hiện diện ngành FusobacteriotavàBacteroidota 74

ĐẶT VẤN ĐỀ

Ung thư đại trực tràng (UTĐTT) là một trong những bệnh ung thư phổbiếntrênthếgiới.Theotổchứcghinhậnungthưtoàncầu(GLOBOCAN)năm 2020,UTĐTT đứng thứ 3 về tỷ lệ mắc mới và thứ 2 về tỷ lệ tử vong do ung thư Ở ViệtNam, UTĐTT đứng hàng thứ 5 về tỷ lệ mắc mới và tỷ lệ tử vong lần lượt sau ungthư gan, ung thư phổi, ung thư vú và ung thư dạ dày[1] Quá trình sinh bệnh củaUTĐTT trải qua nhiều giai đoạn, xuất phát từ các tế bàobiểumôđạitrựctrànglànhtính[2].Hiệnnayđãxácđịnhđượcyếutốditruyền và yếutốmôitrường góp phần vào sự phát triển củaUTĐTT[3].

Các tác nhân truyền nhiễm có liên quan tới khoảng 15 - 20% cácloạiungthư, trong đó có UTĐTT[4, 5] Số lượng vi khuẩn trong đại tràng caogấp khoảng một triệu lần so với số lượng vi khuẩn ở ruột non và tỷ lệ UTĐTTcao gấpkhoảng12lầnungthưởruộtnon,chothấyvaitròtiềmẩncủahệvikhuẩn đườngtiêu hoá trong UTĐTT[6] Vi khuẩn đường tiêu hoá là nguyên nhân chính gâyviêm đại tràng và liên quan đến sự tiến triển của UTĐTT[7] Vi môitrườngkhốiuđóngvaitròquantrọngtrongsựpháttriển,tồntại,xâmlấnvàdi căn của tếbào UTĐTT[8] Hệ vi khuẩn tại khối u có vai trò quan trọng hình thành đáp ứngmiễn dịch tại chỗ của vi môi trường khối u và ảnh hưởng đến tiến triển củaUTĐTT Hệ vi khuẩn tại khối u có vai trò khác nhau trong miễn dịch chống lạikhối u, có thể là tăng hoặc giảm đáp ứng miễn dịch kháng khốiu[9].HệvikhuẩntạimôUTĐTT,môganvàhạchdicănbaogồmcácvikhuẩn nội bào đặchiệu cho từng loại khối u khácnhau[9].

Nghiên cứu trên mô hình tế bào và động vật đã xác định được vai trò củamột số chủng vi khuẩn đường tiêu hoá trong cơ chế bệnh sinh UTĐTT

nhưFusobacterium nucleatum(F nucleatum), Bacteroides fragilis (B.

fragilis),Peptostreptococcussp,Escherichiacoli(E.coli)vàStreptococcusgallolyticus(S gallolyticus)[10] Đặc biệt làF nucleatumcó liên quan đến UTĐTT thông

quamộtsốcơchếnhưgâytăngsinhcóchọnlọcdòngtếbàoUTĐTT[11],giúptếbàoungthưkhôngbịtiêudiệtbởitếbàodiệttựnhiên(NK)vàtếbàolympho

T[12],tạoravimôitrườngtiềnviêmtạikhốiu[13]vàthúcđẩyquátrìnhkháng trị với hoá

chất ở BN UTĐTT[14].F nucleatumcó 1 yếu tố kết dính là FadA, nồng độ của

FadA trong mô đại trực tràng ở BN u tuyến và ung thư biểu mô tuyến cao hơn

10-100 lần so với người khỏe mạnh[11] Ngoài ra, các chủngFusobacterianếu

thiếu hoặc bị bất hoạt yếu tố Fap2 bằng đột biến dẫn đến giảm hình thành

UTĐTT[15] Đo tải lượng củaF nucleatumcó thể có giá trị trong tiên lượng

và theo dõi điều trị ở BNUTĐTT[16].

Bên cạnh đó,B fragiliscũng đang được chứng minh có liên quan tiếntriển UTĐTT[17].B fragiliscó khả năng xuyên qua lớp chất nhầy của ruột vàhình thành màng sinh học trên bề mặt biểu mô đường ruột[18].B fragilissinhra độc tốfragilysinlàm tổn thương biểu mô ruột thông qua sự phân cắt của E-cadherin.ChínhđiềunàychophépB.fragilisvàđộctốfragilysintươngtácvới

cáctếbàomiễndịchvàkíchhoạtphảnứngviêm[19].Độctốfragilysinlàmthay đổi cấu trúc và

chức năng của các tế bào biểu mô đại tràng Sự phân catenintrongtếbàochấtgiúphoạthoáconđường tínhiệuNF-kBvàSTAT3làmtăngsinhtếbàobiểumôcũngnhưtăngbiểuhiện của gen gây ungthư[20].

cắtE-cadherinlàmtăngnồngđộβ-Hiện nay mối liên quan giữa hệ vi khuẩn tại khối u với UTĐTT đang

được nghiên cứu trên thế giới, đặc biệt là với hai chủngF.

nucleatumvàB.fragilis,tuynhiênkếtquảcókhácnhaug i ữ a cácchủngtộc.TạiViệtNam

chưa cónghiêncứunàovềtínhđadạnghệvikhuẩntạimôUTĐTTvàmôgan,hạch di căn

cũng như mối liên quan củaF nucleatumvàB fragilisvới UTĐTT Vì vậy, đề tài

được tiến hành nghiên cứu với hai mụctiêu:

1 Xác định sự đa dạng hệ vi khuẩn tại mô ung thư đại trực tràngvàmôgan,hạchdicănởbệnhnhânungthưđạitrựctràngtạiBệnhviệnTrung ươngQuân đội108.

2 Phân tích mối liên quan giữa tình trạng nhiễm F nucleatum vàB.fragilis với giai đoạn bệnh và nguy cơ ung thư đại trựctràng.

Chương 1TỔNG QUAN

1.1 DỊCH TỄ HỌC UNG THƯ ĐẠI TRỰCTRÀNG1.1.1 Trênthếgiới

Theo GLOBOCAN 2020, ước tính có khoảng 19,3 triệu ca mắc mới và10 triệu ca tử vong do ung thư trên toàn thế giới, trong đó UTĐTT đóng gópkhoảng 1,93 triệu (10%) số ca mắc thêm và 0,94 triệu (9,4%) ca tử vong Tỷlệ mắc và tử vong do UTĐTT khác nhau đáng kể giữa các quốc gia và giữacác khu vực trên thế giới do liên quan tình trạng kinh tế xã hội của mỗinước[1] Tỷ lệ mắc và tử vong do UTĐTT đang gia tăng ở các quốc gia đangphát triển đối với cả nam và nữ Năm 2020, UTĐTT là bệnh ung thư đượcchẩn đoán nhiều nhất (trong số 36 bệnh ung thư) ở nam giới tại 18 trong số185 quốc gia trên toàn thế giới và ở nữ giới tại 6 trong số 185 quốc gia[1].UTĐTT phổ biến ở nam giới hơn nữ giới và phổ biến ở các quốc gia có thunhập cao với tỷ lệ gấp bốn lần so với các quốc gia có thu nhập thấp Số ca tửvong ở các quốc gia có thu nhập cao cũng cao hơn khoảng 2,5 lần so với cácquốc gia có thu nhập thấp[21] Năm 2020, tỷ lệ mắc bệnh chuẩn hóa theo độtuổi(trênthếgiới)trên100.000ngườimắcUTĐTTởcảhaigiớilà19,8,trong đó nam cótỷ lệ mắc cao hơn là 23,4 và nữ là 16,2, gần như bằng tỷ lệ mắc của năm 2018 Tỷlệ tử vong ở cả hai giới là 9,1; trong đó nam là 11 và nữ là7,2trên 100.000 ngườimắc UTĐTT[1, 22] Trong số các trường hợp UTĐTT, ung thư đại tràngchiếm phần lớn và chiếm 59,5% số ca mắc mới, 61,9% số ca tử vong, trongkhi ung thư trực tràng có tỷ lệ mắc là 37,9% và tỷ lệ tử vong là 36,3% ở cả haigiới và mọi lứa tuổi Riêng ung thư đại tràng đứng thứ năm về số ca ung thưmới và tử vong so với tất cả các bệnh ung thư Ngược lại, ung thư trực tràng làloại ung thư đứng thứ tám về tỷ lệ mắc và thứ mười về tỷ lệ tửvong[1].

1.1.2 ỞViệtNam

9%)lầnlượtsauungthưvúvàungthưphổi.SốlượngngườitửvongdoUTĐTTlà8524người,chiếmkhoảng6,9%,đứnghàngthứnămlầnlượtsauungthưgan,ung thư phổi, ungthư dạ dày và ung thưvú[1].

1.2 CƠ CHẾ BỆNH SINH UNG THƯ ĐẠI TRỰCTRÀNG1.2.1 Kháiniệm

UTĐTT là tổn thương ác tính xuất phát từ đại tràng và trực tràng Hơn97% UTĐTT là ung thư biểu mô, các loại ung thư khác hiếm gặp như: Ulympho ác tính, ung thư mô mềm (sarcoma), carcinoid[23].

UTĐTTtiếntriểnquanhiềugiaiđoạn,xuấtpháttừcáctếbàobiểumôđại trực trànglành tính Hiện nay đã xác định được yếu tố di truyền và môi trườnggópphầnvàosựpháttriểncủaUTĐTTbằngcáchtíchlũycácđộtbiếngensinh

ungthư,genứcchếungthưvàgensửachữaDNAthôngquamộtsốconđường khác nhau dẫnđến hình thành khốiu[3].

1.2.2 Mô hình và các con đường phát sinh ung thư đại trựctràng

UTĐTT phát triển từ các tế bào biểu mô lành tính, trải qua quá trình gồmnhiềubướcđểchuyểnthànhkiểuhìnháctính.Năm1990,FearonvàVogelstein đề xuất môhình biến đổi gen nhiều bước trong cơ chế bệnh sinh UTĐTT Đầu tiên, gen ức chế khối uAPC bị bất hoạt ở tế bào niêm mạc đại tràng lành tính, dẫn tới tăng sinh tế bào và hìnhthành u tuyến sớm Tiếp theo là đột biếnhoạt

hóa ở genKRASvà đột biến gen DCC cùng với các gen ức chế khối u khác ở

nhiễm sắc thể 18q làm tiến triển thành u tuyến muộn Sau đó,đột biến genp53dẫntới hình thành tế bào ung thư biểu mô Các đột biến tích lũy khác thúc đẩy tếbào ung thư xâm lấn và di căn[24].

Hình 1.1 Mô hình biến đổi gen trong UTĐTTcủa Fearon (A) và được bổ sung bởi Vogelstein (B).

*Nguồn: E R Fearon and B Vogelstein (1990)[24]

Hiệnnay,môhìnhcủaFearonvàVogelsteinvẫnđượcchấpnhậnrộngrãi và đượccoi là mô hình mẫu phát sinh u đặc Một phiên bản sửa đổi của mô hình mô tảcon đường biến đổi di truyền chủyếuở bệnh nhân UTĐTT, được mô tả ở hình1.2 - con đường mất ổn định nhiễm sắc thể (CIN: chromosomal instability).Ngoài ra, các con đường biến đổi di truyền khác làm phát sinh UTĐTT cũngđược nghiên cứu và đề xuất là con đường mất ổn định vi vệ tinh (MSI:microsatellites instability) và thay đổi di truyền biểu sinh(epigeneticalterations)[25].

Hình 1.2 Các con đường hình thành UTĐTT

*Nguồn: Eric R Feason (2011)[25]

1.2.2.1 Con đườngmấtổn định nhiễm sắcthể

Khoảng 80% bệnh nhân UTĐTT mất ổn định nhiễm sắc thể: tăng, giảmvà chuyển đoạn, tạo ra các khuếch đại, mất và sắp xếp lại gen, dẫn tới thay đổicả về số lượng và cấu trúc nhiễm sắc thể Về số lượng nhiễm sắc thể có thể làmất hoặc tăng số lượng nhiễm sắc thể Cấu trúc nhiễm sắc bị thay đổi có thể

gây ra mất cân bằng alen, thường dẫn tới việc kích hoạt đột biến genKRASvàhiệntượngmấtdịhợptử(lossofheterozygosity–LOH)genứcchếkhốiup53, genAPCvàgenDDC Các đột biến trên đẩy nhanh việc tích lũy các đột biến cần thiết cho

quá trình chuyển từ tế bào niêm mạc lành tính thành tế bào ung thư biểumô[3].

1.2.2.2 Con đường mất ổn định vệtinh

Rải rác ở bộ gen có các đoạn lặp lại đơn giản Sự lặp đi lặp lại tạo thànhcác đơn vị lặp gồm từ một cặp base đến hàng nghìn cặp base Những đơn vịlặp gồm từ một đến sáu cặp base gọi là vi vệ tinh (microsatellite) Vi vệ tinhchiếm khoảng 3% bộ gen người, phổ biến nhất là chuỗi lặp gồm Cytosine(C) và Adenine (A) Chiều dài của vi vệ tinh khác nhau ở từngcá thể,tuy

nhiên giống nhau giữa các tế bào của cùng một cơ thể và là một dấu ấn đặctrưng cho mỗi người Khi những sai sót trong quá trình tái bản DNA khôngđược phát hiện và sửa chữa bởi hệ thống sửa lỗi ghép cặp DNA (DNAmismatch repair – DNA MMR) sẽ dẫn tới hình thành các đột biến và kéo dàiđoạn vi vệ tinh Do đó, mất ổn định vi vệ tinh được biểu hiện bởi sự tăngchiều dài đoạn vi vệ tinh, là hậu quả của sự suy giảm chức năng hệ thốngsửa lỗi ghép cặp DNA[26] Khoảng 15% bệnh nhân UTĐTT có số nhiễm sắcthể chỉnh bội nhưng suy giảm chức năng của hệ thống sửa lỗi ghép cặp DNA,dẫn đến mang hàng ngàn lần chèn và xóa đoạn vi vệtinh[3].

1.2.2.3 Con đường liên quan đến thay đổi di truyền biểusinh

Các quá trình thay đổi biểu sinh (hay còn gọi là di truyền ngoại gen –epigenetics) được mô tả là một trong những con đường thay thế của quá trìnhphátsinhUTĐTT,mặcdùkhônglàmthayđổitrìnhtựcácgenliênquan.Những thay đổi biểusinh này tạo ra sự mất ổn định hệ gen thông qua sự bất hoạt của hệ thống gen sửa chữa Ditruyền biểu sinh gồm có các thay đổi methyl hóa DNA, thay đổi histone và các microRNAkhông mã hóa Trong đó, thay đổi methyl hóa DNA đóng vai trò quan trọngnhất[27].

MethylhóaDNAthườngxảyraởvịtrí5’trênvòngcytosinetrongcácchuỗidinucleotideCpGtậptrungởcácđảoCpG.ViệcmethylhóađảoCpGcóliênquanđến việc bấthoạt các gen ức chế khối u và gen sửa chữa DNA, trong đó có cácgenthamgiavàohệthốngsửalỗighépcặpDNA,kếtquảlàdẫntớiungthư[3,27].

1.2.3 Cácđộtbiếngenvàđườngtruyềntínhiệuthườnggặptrongungthư đại trựctràng

Thông qua các con đường biến đổi di truyền kể trên, tế bào biểu mô niêmmạc đại trực tràng tích lũy các đột biến gen để biến đổi về mặt hình thái và đạtđượckiểuhìnháctính.Cácnghiêncứuướctínhrằngtrungbìnhcó81độtbiến gen trênmỗiUTĐTT[3].

1.2.3.1 Gen APC và đường truyền tín hiệuWnt

Gen APC (Adenomatous Polyposis Coli) nằm ở cánh ngắn của nhiễm sắcthể số 5 (5q21) Gen APC mã hóa protein APC có trọng lượng phân tử xấp xỉ300kDa, tham gia vào đường truyền tín hiệu Wnt[3, 28].

Khi không có tín hiệu Wnt,β-catenin thường xuyên bị các enzyme phânhủy Các glycoprotein Wnt biến đổi lipid tham gia vào phức hợp đồng thụ thểFrizzled-LRP5/6 để tạo một phức hợp ức chế bao gồm AXIN và sản phẩm củagen APC Phức hợp này thường nhắm mục tiêuβ-catenin, làm choβ-cateninbàotươngkhôngphânhủybởicácenzymephânhủyprotein(Hình1.3).D o đó,

tínhiệuWntổn địnhβ-catenintếbào,giúpchuyểnhóavào nhânvà kếthợpvớicácmụctiêuphiênmã,kếtquảcuốicùnglàthúcđẩysựsaochépcủatếbào[28].

Hình 1.3 Sơ lược về đường truyền tín hiệu Wnt

*Nguồn: Shivdasani RA (2018)[3]

KhigenAPCbịđộtbiếnlàmchoproteinAPCbịbiếnđổi,dẫnđếnkhông tạo đượcphức hợp phá hủyβ-catenin Do đó, mặc dù không có tín hiệu từ các proteinWnt, mứcβ-catenin bào tương vẫn tăng lên, chuyển vào nhân và dẫnđếnliêntụcsaochépcácgenđích,làmchotếbàotăngsinhquámứcvàtạo

thành u[28].

1.2.3.2.GensinhungthưKRAS,NRAS,BRAFvàđườngtruyềntínhiệuMAPKKRASb ị đ ộ t b i ế n ở k h o ả n g 4 0 % U T Đ T T v à N R A S t r o n g k h o ả n g 5 % trườn

g hợp khác Đột biến KRAS xuất hiện ngay cả ở những tổnthươngcótiềmnăngáctínhthấp,chẳnghạnnhưởcáctiềnutuyếnvàpolyprấtnhỏvàtần số của chúng tăng theo kích thước tổn thương[3, 29].

BRAF bị đột biến ở khoảng 10% UTĐTT, V600E là đột biến BRAF phổbiến nhất ở UTĐTT, melanoma và các bệnh ung thư khác Đột biến KRAS vàBRAFlàloạitrừlẫnnhautrongUTĐTT,chothấyrằngchúngđạidiệnchocác cách luânphiên nhau đến cùng một tín hiệu kết thúc Đột biến BRAF là một dấu hiệu đặctrưng của UTĐTT MSI-hi không có tính gia đình và xuất hiện sớm trong các utuyến có răng cưa[3,29].

1.2.3.3 Đột biến gen PIK3CA và con đường tín hiệuPI3K

Có tới 20% UTĐTT mang đột biến hoạt hóa trong PIK3CA, gen mã hóatiểu đơn vị p110 xúc tác của PI3K và rất ít UTĐTT mang đột biến liên quanPIK3R1 Nhóm đột biến PIK3CA ở exon 9 và 20 thường phát sinh muộntrong tiến trình chuyển từ u tuyến thành ung thư biểu mô, có thể trùng vớixâmlấn[3].

1.2.3.4 Gen TP53 và các gen kháng ung thưkhác

Mất allen của nhiễm sắc thể 17p được quan sát thấy trong khoảng 75%UTĐTT nhưng chỉ ở < 10% polyp, cho thấy đó là một sự kiện muộn cóthểcólợi cho sự tiến triển của khối u Trong hầu hết các khối u có xảy ra hiệntượng mất dị hợp tử (Loss of heterozygosity - LOH) này, alen TP53 còn lại bịbất hoạt,thườnggặpnhấtởcodon175,245,248,273hoặc282.Cáctếbàocóchức năngTP53 nguyên vẹn trải qua quá trình dừng chu kỳ tế bào và apoptosis khi bị stress dotổn thương DNA, thiếu oxy, giảm khả năng tiếp cận chất dinhdưỡng,hoặcdịbội.MấtTP53chophépcáctếbàovượtquanhữngràocảnnày

đểsốngsótvàtiếntriểnkhốiunhưngkhôngmanglạicácđặcđiểmbệnhcụthể

1.2.4.1 Tế bào xâm nhập khốiu

Mộtyếutốđónggópchínhchovimôitrườngkhốiulàtìnhtrạngviêmvà các chấttrung gian gây viêm, có liên quan mật thiết điến việc thúc đẩy sự phát triển của khốiu Tình trạng viêm và các chất trung gian gây viêm được tiết ra bởi cả tế bào khối uvà tế bào mô đệm, thúc đẩy các tế bào xâm nhập như đại thực bào liên quan khối u(tumor-associated macrophages - TAMs), tế bào ức chếcónguồngốctủy(myeloid-derivedsuppressorcells-MDSCs),tếbàomast, nguyên bào sợi liên quan đến ung thư(cancer-associated fibroblasts - CAFs), bạch cầu đơn nhân, bạch cầu đa nhân trung tính, tếbào lympho TCD8và TCD4, tếbàođuôigai(dendriticcells-DCs),tếbàogiếttựnhiên(naturalkiller-NK),

tếbàonộimô(endothelialcells),tếbàotiềnthânnộimô(endothelialprogenitor cells - EPCs),tiểu cầu và tế bào gốc trung mô ( mesenchymal stem cells - MSCs) Tình trạng viêm củamô đệm được chứng minh trên mô hình thực nghiệm, có tương tác với khối u và có vaitrò thúc đẩy sự tiến triển của các u tuyến thành ung thư đại trựctràng[8].

1.2.4.2 Tăng sinh mạch khốiu

Sự phát triển của các khối u đòi hỏi sự bổ sung của các mạch máu và cáctếbàonộimạcđểđápứngnhucầuchuyểnhóacủakhốiu.Tăngsinhmạchkhối

uxảyrakhisựcânbằngđộngcủacácyếutốkíchthíchvàcácyếutốứcchế

nghiêng về tân tạo mạch máu Các yếu tố kích thích tăng sinh mạch u gồm cótìnhtrạngthiếuoxymô,tìnhtrạngviêmvàhoạtđộngkíchthíchcủacáctếbào u.[31].

Cácmạchmáukhốiukhôngbìnhthường,chúngcócấutrúcvàdòngchảy hỗn độn.Về cấu trúc, các mạch máu khối u quanh co và giãn nở với đườngkínhthayđổi,phânnhánhvàtạocầunốiquámức.Dòngmáucủakhốiudođó cũng thayđổi, tạo nên các vùng thiếu oxy và toan hóa, dẫn tới sự thay đổi vi môi trườngthúc đẩy quá trình đề kháng tình trạng thiếu oxy và chết theo chương trình(apoptosis) Thành mạch máu khối u là một lớp không đồng đều, có nhiều lỗmở, được mở rộng từ các vị trí kết nối của tế bào nội mô và gián đoạn hoặc mấtmàng đáy, điều này cũng góp phần làm tăng tính thấm của cácmạchmáunày,cùngvớisựmấtchứcnăngcủahệthốngbạchmạch,gâyratăng áp lực thẩmthấu trong khốiu[31].

1.2.4.3 Chất nền ngoại bào và các phần tử liênquan

Chất nền ngoại bào (extracellular matrix - ECM) là một cấu trúc ba chiềucó tính tổ chức cao với nhiều vai trò sinh lý và bệnh lý Ngoài việc duy trì tínhtoànvẹnvàcấutrúcổnđịnhchomôtổchức,ECMcònđiềuchỉnhsựdichuyển của tế bào, sựbiệt hóa và tăng sinh của tế bào, cung cấp một kho chứa các cytokine và các yếu tốtăng trưởng Việc thay đổi thành phần và cấu trúc của ECM có vai trò rất quan trọngtrong sự hình thành và phát triển khốiu[8].

ECM có năm loại đại phân tử, bao gồm collagen, laminin, fibronectin,proteoglycan và hyaluronan ECM có thể được chia thành hai nhóm chính:màng đáy và mô đệm Màng đáy có vai trò như một rào cản cơ học và tổ chứccấu trúc mô, cũng như điều chỉnh sự phát triển, biệt hóa, phân cực và biểu lộgen của tế bào Sự phát triển xâm lấn của ung thư biểu mô là một quá trìnhnhiều bước phức tạp, liên quan đến sự phân giải của màng đáy Mô đệm baogồm các polysaccharide, proteoglycan và các loại protein sợi khác nhau, trongkhicácphântửliênkếtvớichấtnềnbaogồmcácthụthểđườngruột,protease,

phosphoprotein, chất nhầy, lectin và các phân tử khác[8].

1.2.5 Đặc điểm hệ vi khuẩn tại tổ chức u và tổ chức di căn ở bệnh nhânung thư đại trựctràng.

Nhiều nghiên cứu đã chỉ ra rằng hệ vi khuẩn đường tiêu hoá là cần thiếttrong điều hoà đáp ứng miễn dịch của vật chủ[9] Hệ vi khuẩn tại khối u(intratumoral microbiota) có vai trò quan trọng hình thành đáp ứng miễn dịchtại chỗ của vi môi trường khối u và ảnh hưởng đến tiến triển của UTĐTT Hệvi khuẩn tại khối u có vai trò khác nhau trong miễn dịch chống lại khối u, cóthể là tăng hoặc giảm đáp ứng miễn dịch kháng khối u[9, 32] Hệ vi khuẩn tạimôUTĐTT,môganvàhạchdicănbaogồmcácvikhuẩnnộibàođặchiệucho từng loạikhối u khácnhau[9].

Có mối liên quan giữa hệ vi khuẩn đường tiêu hoá với vi môi trườngkhối uđại trực tràng Một số chủng vi khuẩn đường tiêu hoá di chuyển tới vi môitrườngkhốiuvàtổchứcgan,hạchdicănthôngquahệthốngtuầnhoàn,quacác

hàngràoniêmmạcbịtổnthươnghoặccũngcóthểtừmôlànhcạnhkhốiu[33] Hệ vi khuẩntại khối u ảnh hưởng đến sự tiến triển của UTĐTT thông qua một số cơ chế nhưgây tổn thương DNA, hoạt hoá các con đường tín hiệu gây ung thư, gây ức chếmiễn dịch kháng ung thư và tác động tới quá trình chuyển hóathuốctrongcơthể[33].Đángchúý,trongcácloạikhốiukhácnhau,thànhphần và sự đa dạngcủa hệ vi khuẩn trong khối u rất không đồng nhất và có vai trò khác nhau trong sự pháttriển của khối u[33,34].

hoàtạivimôitrườngkhốiu.Hệvikhuẩnđườngtiêuhoátácđộnggiántiếptới vi môitrường khối u thông qua các chất chuyển hoá hoặc hệ thống miễn dịchlàmbiếnđổithànhphầnvàchứcnăngcủahệvikhuẩntạikhốiu[35].Bêncạnh

đó,hệvikhuẩntạikhốiucóvaitròquantrọngtrongđáp ứngmiễndịchkháng ung thư vàảnh hưởng tới hiệu quả kháng ung thư của các chất ức chế chốt kiểm soátmiễndịch[36].

Ngoài ra, sự phân bố của hệ vi khuẩn tại khối u và mô lành cạnh khối u là

có khác nhau Nghiên cứu của Nakatsu (2015) cho thấy tại mô UTĐTT có 5

chủng vi khuẩn chiếm tỷ lệ cao nhất làFusobacterium, B fragilis,

Gemella,Peptostreptococcus and Parvimonas Tại mô đại tràng lành cạnh

khối u đa số là sự xuất hiện củaE.coli.Nghiên cứu cũng chỉ ra rằng, tải lượngtương đối củaB fragilistăng dần tại mô đại tràng ở người khoẻ mạnh, đến mô

lành cạnh u tuyến, mô tại u tuyến, mô lành cạnh ung thư và cuối cùng là mô

ung thư có tải lượng tương đốiB fragiliscao nhất (p< 0,05)[37] Hoang

N.H.T(2022), ứng dụng kỹ thuật 16S rRNA metagenomics mô tả đặc điểmhệ vi khuẩn tại mẫu mô ung thư, mô lành cạnh ung thư của 43 bệnh nhânUTĐTT Nghiên cứu cho thấy sự hiện diện của các chủng vi

khuẩnHungatella, Lachnoclostridium và Osillibactertại mô ung thư cao hơn

tại mô lành cạnh ung thư (p<0,05)[38].

Bên cạnh sự hiện diện của một số chủng vi khuẩn tại mô ung thư đại trựctràng,mộtsốnghiêncứuđãxácđịnhđượcsựcómặtcủamộtsốchủngvikhuẩn tại mẫu môgan và mô hạch di căn từ UTĐTT Bullman và cộng sự (2017) đã xác định

đượcFusobacteriumở 7/11 mẫu mô gan di căn từ UTĐTT bằng kỹ thuật nuôicấy mô kỵ khí và PCR Khi tiến hành giải trình tự gen chủngFusobacteriumtạimô ung thư đại trực tràng và chủngFusobacteriumtại mô gan di căn thấy có sựtương đồng 99% về kiểu gen[39] Yu và cộng sự (2016) đã xác định đượcF.

nucleatumở 20/20 (100%) mẫu hạch di căn từ UTĐTT cao hơn so với tỷ lệ

phát hiệnF nucleatumtại mẫu hạch không di căn từ UTĐTT (40%) (p<0,01)

[40] Abeb và cộng sự (2016) đã xác định

tròcủahệvikhuẩnđườngtiêuhoácũngnhưhệvikhuẩntạivimôitrườngkhối u trong cơ chếbệnh sinh UTĐTT Các nghiên cứu cho thấy có sự biến đổi về thành phần hệ vikhuẩn tại khối u UTĐTT so với mô lành cạnh ung thư, đồngthờicũngđãxácđịnhđượcsựhiệnhiệncủamộtsốchủngvikhuẩnđườngtiêu hoá tại môgan và hạch di căn từ UTĐTT Tuy nhiên cáckếtquả nghiên cứu được tiến hànhtrên số lượng mẫu thấp, chưa có sự so sánh ghép cặp trêncùng

một bệnh nhân nên giá trị nghiên cứu còn chưa cao.

1.3 VAI TRÒ CỦA HỆ VI KHUẨN ĐƯỜNG TIÊU HOÁ TRONG CƠCHẾ BỆNH SINH UNG THƯ ĐẠI TRỰCTRÀNG

1.3.1 Đặc điểm hệ vi khuẩn đường tiêu hoá ởngười

Trong hệ vi khuẩn đường tiêu hoá ở người, phần lớn vi khuẩn ởruộtnonlàvikhuẩnGr(+),cóvaitròlênmencarbohydrate,vikhuẩnởđạitràngchủyếu là vikhuẩn Gr (-), chịu trách nhiệm phân huỷ protein và các amino acid Hệ vi khuẩn ở đạitrực tràng gồm các loài thuộc 4 ngành chính là Firmicutes (chiếm khoảng 64%),Bacteroidetes (23%), Proteobacteria (8%) và Actinobacteria Sự phân bố của hệ vi khuẩnđường tiêu hoá phụ thuộc vào nồng độ pH, tải lượng vi khuẩn tại dạ dày và tá tràngkhoảng 102-103vi khuẩn/gram chất trong lòng ruột, chủ yếu là vi khuẩn hiếukhí, trong khi đó tải lượng vi khuẩn ở manh tràng và đại tràng khoảng 1011-1012vi khuẩn/ gram phân, chủ yếu là vi khuẩn kỵ khí[41].

Hệ vi khuẩn đường tiêu hoá ở người phát triển mạnh mẽ từ khi trẻ đượcsinh ra và có sự biến đổi thành phần của hệ vi khuẩn theo thời gian do có sựkhác nhau về chế độ ăn, lối sống, tình trạng bệnh tật, yếu tố di truyền, môitrường nơi sinh sống và các thuốc đang sử dụng Ở trẻ sơ sinh, ngành vi khuẩnchủyếulàBacteroidesvàBifidobacteria,hệvisinhvậtởtuổidậythìcóngành Firmicutesvà Bacteroides là chính, trong khi ở người trưởng thành thì ngành Bacteroides vàFirmicutes chiếm ưu thế [42,43].

Hệ vi khuẩn đường tiêu hoá ở người có chức năng điều hoà miễn dịch,chuyển hoá và bảo vệ cơ thể vật chủ thông qua các chất trung gian chuyển hoátổng hợp của hệ vi khuẩn đường tiêu hoá và vật chủ Hệ vi khuẩn đường tiêuhoácóvaitròrấtquantrọngchoquátrìnhlênmencácchấtxơvàtinhbột.Các

- SCFA) như butyrate, propionate, acetate hoạt động như những cơ chất cungcấp khoảng 10% năng lượng khẩu phần ăn hàng ngày cho cơ thể[44].Khoảng

80% các tế bào miễn dịch hoạt động trong cơ thể người tập trung ở hệ lymphocủaruột(Gutassociatedlymphoidtissue-GALT),chothấymốitươngtácquan

trọnggiữahệvisinhđườngruộtvàhệmiễndịchđườngruột Cácthụthểnhận dạng kiểumẫu (PRR-Pattern recognition receptors) có khả năng phân biệt visinhvậtgâybệnhvàcáckhángnguyênvôhại,đólàcácthụthểtoll-like(TLR- Toll-likereceptor) TLR có mặt trên đại thực bào, bạch cầu trung tính, tế bào tua (DCs-dendritic cells), các tế bào biểu mô ruột (ECs-intestinal epithelial cells) và các tếbào khác thuộc hệ miễn dịch tự nhiên Các TLR có vai trò quan trọng để duy trìmối quan hệ cộng sinh giữa hệ vi sinh đường ruột với vật chủ và tạo sự cân bằngnội môi đường ruột[45] Các vi khuẩn chí ức chế sự phát triển của vi khuẩn có hạithông qua cạnh tranh các chất dinh dưỡng và điểm gắn (receptor) vào tế bàobiểu mô đường ruột Các vi khuẩn chí còn sản xuất ra chất bacteriocin có thể tiêudiệt vi khuẩn có hại Quá trình lên men và tạo ra các acid béo làm giảm độ pHtrong đại tràng, làm ức chế sự phát triển của vi khuẩn có hại và tạo điều kiệnthuận lợi cho các vi khuẩn có lợi tăng sinh Các vi khuẩn có ích giúp cho hệ miễndịch phản ứng một cách hợp lí đối với các kháng nguyên Do đó, việc thiếu các vikhuẩn có ích này làm cho hệ miễn dịch phản ứng quá mức đối với các khángnguyên gây dịứng[46].

Các yếu tố ảnh hưởng đến sự cân bằng hệ vi khuẩn đường ruột ở ngườigồm nồng độ pH đường ruột, tác dụng của kháng sinh, probiotic và prebiotic,tình trạng bệnh tật Nồng độ pH của đường ruột tăng dần từ dạ dày đến đạitràng, pH dạ dày thấp giúp cho quá trình tiêu hoá thức ăn và tiêu diệt các vikhuẩncóhại.NồngđộpHthayđổiảnhhưởngtớisựpháttriểncáccácvikhuẩn lên men sinhacid lactic và vi khuẩn gây thối sản xuất amoniac Sự mất cân bằng của 2 loại vi khuẩnnày có thể gây ra các tổn thương đường tiêu hoá[47] Sử dụng kháng sinh kéo dài làmgiảm số lượng vi khuẩn có lợi, giúp vi khuẩn gây bệnh phát triển và tăng tỷ lệ vi khuẩnkháng kháng sinh Probiotic làcác

vi khuẩn có lợi cho cơ thể, giúp cải thiện sự cân bằng vi khuẩn đường ruột,ức chế sự phát triển của vi khuẩn gây hại và các vi khuẩn sản sinh độc tố.Prebiotic là các thực phẩm cho lợi khuẩn, có thể lên men được trong quátrình tiêu hóa Người ta thường kết hợp probiotic với prebiotic (synbiotic)để tăng tác dụng có ích đối với cơ thể[48] Đối với bệnh nhân mắc bệnh viêmruột thì việc giảm số lượng Bifidobacteria, Lactobacillivàtăng số lượng các vikhuẩn khác như Bacteroides có liên quan đến sự xuất hiện và mức độ nặngnhẹ củabệnh[49].

1.3.2 Một số cơ chế sinh ung thư đại trực tràng liên quan đến hệ vikhuẩnđường tiêuhoá.

1.3.2.1 Tương tác giữa yếu tố môi trường và ditruyền

Các yếu tố môi trường như tiếp xúc khói bụi, ô nhiễm, các chất hóa họcvà một số thói quen ăn uống: uống nhiều rượu, ăn nhiều chất béo và thịtđỏ,ănít chất xơ, cùng với những bệnh rối loạn chuyển hóa như tiểu đường, béophì dẫn đến rối loạn hệ vi sinh vật đường ruột (dysbiosis) Loạn khuẩn đườngruột dẫn đột biến gen của các gen ức chế khối u, tiền gen sinh ung thư (proto-oncogenes) và các gen sửa chữa DNA đã thúc đẩy quá trình chuyển dạng củacáctếbàobiểumôđạitràngbìnhthường,đồngthờilàmthayđổiđápứngmiễn dịch dẫnđến tiến triển UTĐTT Hiện tượng tăng methyl hóa DNA và đột biến gen dẫn đếnrối loạn điều hòa các con đường tín hiệu (TGFβ/KRAS/Wnt) và khi các conđường tín hiệu này được kích hoạt sẽ thúc đẩy UTĐTT Ngoài ra, loạn khuẩn ruộtcũng tạo tiền đề cho những biểu hiện bất thường của các miRNA đã thúc đẩy quátrình tiến triển của UTĐTT và dicăn[50].

1.3.2.2 Quá trình viêm và điều hòa miễndịch

UTĐTT có liên quan đến bệnh viêm ruột (IBD) như viêm loét đại trànghoặc bệnh Crohn Trong một nghiên cứu phân tích tổng hợp từ 12 nghiên cứuvớigần45.000bệnhnhânmắcIBD,nguycơmắcUTĐTTởnhữngngườimắc

IBDcaohơnkhoảngbalầnsovớinhữngngườikhôngmắcIBD(RR2,93,95%CI 1,79–4,81)[51] Một số nghiên cứu trên mô hình chuột thực nghiệm cũng chỉ ra

rằng, chủng vi khuẩnF nucleatumcó thể hoạt hóa con đường tín hiệu nuclear

factor-κB signalling B và thúc đẩy sự xâm nhập của tế bào dòng tủy vào trong các khối

u, tạo ra các cytokinsgâyviêm thúc đẩy tiến triển thành UTĐTT ở chuột[11].Ngoài ra,B fragilissản xuất ra các nội độc tố của chúng (virulence factorB.

fragilis toxin) đã kích hoạt một loạt các phản ứng viêm liên quan tới IL-17,

các con đường tín hiệu STAT3 (signal transducer and activator oftranscription 3) và NF-κB signalling B (nuclear factor-κB signalling B signalling) tại tế bào biểu môđại trực tràng[52] Sự tương tác giữa hệ vi khuẩn đường ruột và hệ thống miễndịch của cơ thể thông qua các thụ cảm thể nhận dạng khuôn mẫu (Patternrecognition receptors- PRRs) Chính sự tương tác này đã tạo ra các chất trunggian gây viêm và hoạt hoá các con đường tín hiệu beta-catenin và STAT thúcđẩy hình thành UTĐTT Ngoài ra, vi khuẩn đường ruột sinh ra các enzymhoạt hoá các chất gây ung thư làm tổn thương DNA và biến đổi gen, từ đóhình thànhUTĐTT[53].

1.3.2.3 Sự trao đổi chất của các thành phần trong thứcăn

Các axit béo chuỗi ngắn (SCFAs) như butyrate, propionate và acetate làcácchấtchuyểnhóađượcsảnxuấttừquátrìnhchuyểnhóacủavikhuẩnđường ruột với cácthành phần trong khẩu phần ăn Khi ăn phải cacbohydrat khó tiêu như chất xơ vàtinh bột khó tiêu sẽ dẫn đến quá trình lên men vi sinh vật tạo ra các axit béo chuỗingắn (SCFAs) trong đại tràng Chất butyrate có thể ức chế histone deacetylase trongtế bào biểu mô đại tràng và tế bào miễn dịch để điều hòa làm giảm các cytokine gâyviêm và gây ra hiện tượng chết tế bào theo chương trình (apoptosis) ở các dòng tếbào ung thư đại trực tràng Hơn nữa, butyrate và propionat có tác dụng kích thích tếbào lympho T tạo ra một chất chống viêm mạnh trong mô hình động vật[54].

Hình 1.4 Vai trò của các acid béo chuỗi ngắn (SCFAs) và polyaminestrong cơ chế bệnh sinh ung thư đại trực tràng.

*Nguồn: Lidia Sánchez-Alcoholado (2020)[55]

Polyamines là các amin béo cần thiết cho sự phát triển của tế bào, chúngđược tạo ra từ quá trình chuyển hóa của vi sinh vật và enzym ornithinedecarboxylase (ODC) đóng vai trò quan trọng vào quá trình sinh tổng hợppolyamines.TrongungthưđạitràngcótăngmứcđộbiểuhiệncủaenzymODC

tạimôungthưsovớimôlànhcạnhkhốiu,gợi ýrằngtăngsảnxuấtpolyamine có thể liênquan tới hình thành ung thư đại trực tràng Việc sử dụng alpha-difluoromethylornithine (DFMO), là chất ức chế tổng hợp polyamine kết hợp vớichất chống viêm non-steroids cũng là một liệu pháp điều trị có hiệu quả ở bệnhnhân u tuyến đại trực tràng Ngoài ra, sử dụng chất ức chế vận chuyểnpolyamineAMXT1501kếthợpDFMOcũngcóhiệuquảtrongđiềutrịUTĐTT trên mô hìnhthực nghiệm[56].

1.3.3 VaitròcủaFusobacteriumnucleatumtrongcơchếbệnhsinhungthư đại trực

F nucleatumlà một vi khuẩn Gram âm kỵ khí và đang được nghiên cứu

làcóliênquannhiềuđếnUTĐTT.F.nucleatumcókhảnăngbámvàxâmnhập vàocáctếbàobiểu môđạitrựctràngbằngcáchsửdụngmộtsốyếu tốđộclực

nhưFusobacteriumadhesin A (Fad A),Fusobacteriumautotransporter protein 2(Fap2) và protein A màng ngoài củaF nucleatumchịu trách nhiệm hoạt hóa

cáctínhiệutiềnungthư,kíchhoạtquátrìnhc h u y ể n dạngtrungbiểumô(EMT) tại biểu môđể gây ung thư đại trực tràng[11,15].

F nucleatumcó 1 yếu tố kết dính là FadA gắn với E-cadherin ở vùng

amino acid 11 để hoạt hóa con đường tín hiệu β-Catenin dẫn tới hoạt hóa cácgensinhungthư.NồngđộcủaFadAtrongtổchứcđạitràngởnhữngbệnhnhân u tuyến và ungthư biểu mô tuyến cao hơi 10-100 lần so với người khỏe mạnh Tăng biểu hiện của FadAtrong ung thư đại trực tràng tương quan với sự tăng biểu hiện của các gen gây viêm vàsinh ung thư[11,50].

củatếbàovậtchủvànógiúpchovikhuẩnnàytậptrungvớisốlượnglớntạicáctếbàobiểumôcủaungthưđạitràng.Gal-GalNAcđượcbiểuhiệnquámứcởbệnhnhân UTĐTT và nó

được nhận ra bởiF nucleatummang Fap2 Người tanhậnthấyrằngcácchủngF.nucleatumthiếuhoặcbịbấthoạtyếutốFap2bằngđộtbiếnch

o thấy giảm gắn với Gal-GalNAc và giảm hình thành UTĐTT trên mô hìnhchuột[15].Điềunàychothấycácyếutốđộclực,chẳnghạnnhưFadAcùngvới

Khi sử dụng dòng tế bào ung thư đại tràng, Zhang và cộng sự (2019) đã

chứng minh nhiễmF nucleatumlàm giảm hiệu quả với hoá chất của dòng tế

bào UTĐTT với 5-fluorouracil (5-FU), một thuốc được sử dụng phổ biến ở

UTĐTTkhibịnhiễmF.nucleatumđượcđiềuhoàthôngquaconđườngtínhiệu

TLR4/NF-kBvàlàmgiảmnhạycảmvớihoáchấtcủadòngtếbàoUTĐTTvới

5-FU Ngoài ra,F nucleatumcũng gây ra kháng hoá trị của dòng tế bàoUTĐTT với 5-FU trên mô hình chuột Tải lượng củaF nucleatumtương quantới kháng 5-FU ở bệnh nhân UTĐT tiến triển, điều này gợi ýF nucleatumcó

thể được sử dụng như là một đích tác động nhằm nâng cao hiệu quả điều trịUTĐTT với 5-FU[57] Yu và cộng sự (2017) đã chứng minh được

rằngF.nucleatumthúc đẩy kháng hoá trị của dòng tế bào UTĐTT thông qua

điều hoà quá trình tự thực bào Khi nghiên cứu trên dòng tế bào ung thư đại

tràng,F.nucleatumthúc đẩy UTĐTT kháng với các thuốc hoá trị như

Oxaliplatin và 5- FU thông qua con đường tín hiệu bẩm sinh TLR4 và

MYD88 Tiếp

theo,F.nucleatumlàmgiảmđiềuhoàcácmicroRNAs:miR-18avàmiR-4802,làmtăng điều hoà các yếu tố tự thực bào như ULK1 và ATG7, dẫn đến ức chế quátrình chết tế bào theo chương trình củatếbào ung thư và tăng cường kháng hoá trị.

tế bào UTĐTT như HT-29 nhưng không kích thích phát triển các dòng tế bào không

phải UTĐTT như HEK293[11] Khi loại bỏ gen gây độcfadA, nghiên cứu đã chứng

minh FadA là yếu tố gây độc quan trọng để thúcđẩypháttriểndòngtếbàoUTĐTT[11].Yangvàcộngsự(2017)đãchứngminh

F nucleatumlàm tăng sinh dòng tế bào UTĐTT do làm tăng biểu hiện của

microRNA-21 có chức năng như một gen gây ung thư do ức chế biểu hiện của

cácgenứcchếkhốiu.Nghiêncứucũngchỉrarằng,F.nucleatumhoạthoácon đường tín

hiệu NF-kB thông qua Toll-like receptor 4 làm tăng biểu hiệnmicroRNA-21[58].Tế bào T gây độc tế bào và tế bào diệt tự nhiên là những tế bàochínhcóvaitròloạibỏcáctếbàoungthưvàtiềnungthư[59].Shenkervàcộngsự(1995)

đã chứng minhF nucleatumức chế tế bào lympho T ở người đáp ứng với quá

trìnhphânbàodolàmngừngquátrìnhphânbàoởphaG1[60].Gurvàcộngsự (2015) đã

chứng minhF nucleatumbảo vệ tế bào ung thư từ tế bào diệt tự nhiên (NK)

thông qua yếu tố Fap2 Các lymphocytes thâm nhiễm khối u và tế bào T hoạt

động bị ức chế bởiF nucleatumthông qua yếu tố Fap2[61] Kostic

F nucleatumthì thấy số lượng u ở đại tràng tăng cao hơn ở nhóm chuột được

gây nhiễmF nucleatumso với nhóm không gây nhiễm Nghiên cứu cũng chỉ

ra rằng, tại mô ung thư đại tràng từ chuột thực nghiệm có tăng biểu hiện cáccytokines như yếu tố hoại tử u (TNF), IL-6 và IL-8, đây chính là các cytokinscũng xuất hiện tại mô UTĐTT ở người[57].

Hình 1.5 Vai trò củaF nucleatumtrong cơ chế bệnh sinh ung thư

đại trực tràng.

*Nguồn: Lee (2019)[62]

1.3.4 Tình hình nghiên cứu về mối liên quan giữaF nucleatumvới ung

thư đại trựctràng

Đến nay trên thế giới đã có một số nghiên cứu về mối liên quan

UTĐTT giai đoạn III và IV, sử dụng kỹ thuật qPCR phát hiện tải

lượngF.nucleatumtại mẫu mô ung thư cao hơn tại mẫu mô lành cạnh ung

F nucleatumtại mẫu mô ung thư tương đối cao (87,1%) Tần suất bệnh nhân

UTĐTT di căn hạch là cao hơn ở nhóm có tải lượngF nucleatumcao (52/88

(59,1%)) so với nhóm có tải lượng thấp (0/13(0%)) (p<0,005)[64].

Yu và cộng sự (2017) nghiên cứu trên 31 bệnh nhân UTĐTT gồm 16 catái phát và 15 ca không tái phát, tỷ lệ phát hiện và tải lượng tương

đốiF.nucleatumtại mô đại tràng ở nhóm tái phát cao hơn nhóm không tái phát

(p<0,01),tạimôungthưcaohơntạimôlànhcạnhungthưởcả2nhómtáiphát và không táiphát (p<0,05)[16] Nghiên cứu của Liang và cộng sự (2017) trên 203 bệnh nhânUTĐTT và nhóm chứng 236 người khoẻ mạnh tình nguyện, tỷ

lệpháthiệnF.nucleatumtrongmẫuphânởnhómungthưcaohơnnhómchứng (98,2% và72%, p<0,0001) Tải lượng trung bìnhF nucleatumtrong mẫu phân

ởnhómungthưcaohơnnhómchứng(0,0288và8,1.e-6;p<0,0001)[65].Wong và cộng sự(2017) nghiên cứu trên 3 nhóm gồm 104 bệnh nhân UTĐTT, 103bệnhnhânutuyếnvà102ngườikhoẻmạnhlàmnhómchứng.Tảilượngtương

đốiF.nucleatumtrongmẫuphânởnhómbệnhnhânungthưcaohơnnhóm

chứng 132 lần (p<0,001)[66].

NghiêncứucủaYamaokavàcộngsự(2018)trên100mẫumôUTĐTTvà 72 mẫu

mô niêm mạc bình thường, tỷ lệ phát hiệnF nucleatumtại mẫu mô ung thư cao

hơn tại mẫu mô niêm mạc bình thường (75% và 63,9%, p<0,05) Tải lượng

trung bình củaF nucleatumtại mẫu mô niêm mạc bình thường là 0,4 copies/ng

DNA thấp hơn tải lượng tại mô ung thư là 1,9 copies/ng DNA (p=0,0031) Tải

lượngF nucleatumtại mô ung thư giai đoạn IV cao hơn giai

đoạnI-IIIvàtươngquan vớikíchthướckhốiu,độtbiếnKRAS,thờigiansống thêm(p<0,05)[67].Itovàcộngsự(2015)nghiêncứutrên511mẫumôUTĐTT và 343 mẫu mô polyp

tiền ung thư, tỷ lệ phát hiệnF nucleatumtại mẫu mô ung thư là 56%, cao hơn tỷ

lệ phát hiện trong các mẫu mô tiền ung thư (polyp tăng sản 24%, u tuyến răngcưa có cuống 35%, u tuyến răng cưa truyền thống30%,utuyếnkhôngcórăngcưa33%(p<0,0001)[68].NghiêncứucủaSuehiro và cộngsự (2017) trên 158 bệnh nhân UTĐTT, 19 bệnh nhân polyp ung thư hoá, 11 bệnhnhân polyp lành tính và 60 người khoẻ mạnh làm nhóm chứng.

KhisosánhvớinhómchứngthìtảilượngtươngđốiF.nucleatumtạimẫuphân cao hơn ở

nhóm polyp lành tính (p=0,00147), polyp ung thư hoá (p=0,006) và nhóm UTĐTT(p<.0,0001)[69] Như vậy, tổng hợp từ các nghiên cứu trên nhóm bệnh nhânUTĐTT người Châu Á cho thấy tỷ lệ phát hiện và tảilượng

F nucleatumtại mẫu mô UTĐTT giai đoạn muộn cao hơn giai đoạn sớm, tại

mô ung thư cao hơn mô lành cạnh ung thư Tải lượngF nucleatumliên quan

tới thời gian sống thêm không bệnh ở BN UTĐTT.

Nghiên cứu của Flangan và cộng sự (2014) xác định tỷ lệ phát

hiệnF.nucleatumtrong mẫu mô ung thư và mô lành cạnh ung thư từ 122 bệnh

nhân UTĐTT ở 3 nước Châu Âu ( cộng hoà Séc, Đức và Irelan) Tỷ lệ phát

(p=0,002, p= 0,0001, p= 0,006 tương ứng với các nước Cộng hoà Séc, Đứcvà

Ireland) Tải lượngF nucleatumtại mô u tuyến có loạn sản độ cao, cao hơn tại

mô lành (p< 0,015)[70] Bundgaard và cộng sự (2019) nghiên cứu trên 99

bệnh nhân UTĐTT và 96 bệnh nhân u tuyến, tỷ lệpháthiệnF nucleatumở

nhóm ung thư cao hơn nhóm u tuyến (29,3% và 3,0%, p<0,001), tỷ lệ phát

hiệnF nucleatumkhông liên quan đến tỷ lệ sống không bệnh trong 5 năm[71].

Nghiên cứu của Eklof và cộng sự (2017) trên 39 bệnh nhân UTĐTT, 134bệnh nhân u tuyến có loạn sản và 66 người khoẻ mạnh làm nhóm chứng Tỷ lệ

phát hiệnF nucleatumtrong mẫu phân ở nhóm ung thư cao nhất (69,2%), tiếp

đến là nhóm có loạn sản (20,1%) và nhóm chứng (24,3%) (p< 0,001)[72].Castellarin và cộng sự (2012) nghiên cứu trên 99 bệnh nhân UTĐTT, tải

lượng trung bìnhF nucleatumtại mẫu mô ung thư cao hơn tại mẫu mô lành

cạnh ung thư 415 lần (p<0,05)[73] Tổng hợp các nghiên cứu trên nhóm BN

UTĐTT người Châu Âu, tỷ lệ phát hiện và tải lượng tương đối củaF.

nucleatumtại mô ung thư cao hơn tại mô u tuyến, tại mô ung thư cao hơn mô

lành cạnh ungthư.

Mima và cộng sự (2015) nghiên cứu trên 598 mẫu mô UTĐTT và 558

mẫu mô lành cạnh ung thư, tỷ lệ phát hiệnF nucleatumở nhóm mô ung thư

cao hơn nhóm mô lành cạnh ung thư (13% và 3,4%, p<0,001) Trong số 558

cặpghépmẫu,tảilượngF.nucleatumtạimôungthưcaohơntạimôlànhcạnh ung thư

(p<0,0001)[74] Nghiên cứu của Mima và cộng sự (2016) trên 1102 bệnh nhân

UTĐTT, tỷ lệ phát hiệnF nucleatumtrong mẫu mô ung thư tăng dần từ trực

tràng (2,5%) cho đến manh tràng (11%) (p<0,0001)[75] Proenca và cộng sự(2018), nghiên cứu trên 43 bệnh nhân UTĐTT và 27 bệnh nhân u tuyến, tỷ lệ

phát hiệnF nucleatumtại mẫu ung thư và u tuyến cao hơn tại mẫu mô lànhcạnh ung thư và mô lành cạnh u tuyến (p=0,0002) Tải lượngF.nucleatumtại

mẫu mô ung thư cao hơn tại mẫu mô u tuyến 24,84 lần (p<0,0001)[76] Nhưvậy, ở BN UTĐTT người Châu Mỹ cũngcho kết quả

tương tự là tải lượngF nucleatumtại mô ung thư cao hơn u tuyến Ngoài ra,tải lượng tương đối củaF nucleatumcó biến đổi theo vị trí u.

Tại Việt Nam chưa có nghiên cứu nào tìm hiểu về mối liên quan giữa tỷ

cắtE-tạođiềukiệnchoviệctăngsảnxuấtcácchemokinesnhưIL-6,IL-8vàIL-1β,từ đó chúng hoạthóa các con đường tín hiệu NF-κB signalling B và MAPK ở tế bàobiểumôđạitràng,tạorađápứngviêmtrongtếbàovàcácchấtsinhungthư.Sựkếthợp

(reactive oxygen species) và NOS (nitrogen oxygen species) gây tổn thươngDNA ở các tế bào biểu mô, đồng thời cũng gây tăng biểu hiện của mộtsốgengâyungthưlênnhiềulầnnhưc-Myc,dẫnđếnsựhìnhthànhlênutuyến và ung thưđại trực tràng[52,77-79].

B fragilistạo ra các màng sinh học (biofilm) có thể làm giảm hoặc tái

phân bố lại E-cadherin ở tế bào biểu mô đại tràng, từ đó kích thích tế bào biểumô đại tràng sản xuất IL-6, hoạt hoá con đường tín hiệu STAT3 gây tăng sinh