Phúc trình thực tập hóa học hợp chất thiên nhiên

- Chưng cất bằng lôi cuốn hơi nước dựa trên sự thẩm thấu, hòa tan, khuếch tán và lôi cuốn theo hơi nước của những hợp chất hữu cơ trong tinh dầu chứa trong các mô khi tiếp xúc với hơi nư

TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ

Khoa Khoa học Tự Nhiên

Bộ Môn Hóa Học

PHÚC TRÌNH THỰC TẬP HÓA HỌC HỢP CHẤT THIÊN NHIÊN

Nguyễn Anh Thư B2110380 Nguyễn Thị Bảo Vy B2110388

Lê Bảo Châu B2110392

BÀI 1 TÁCH CHIẾT VÀ KHẢO SÁT TÍNH CHẤT VẬT LÝ CỦA

I Mục tiêu

TINH DẦU CAM, BƯỞI

- Nghiên cứu một phương pháp tách chiết tinh dầu vỏ quả: chưng cất lôi cuốn hơi nước

- Khảo sát các hằng số vật lý, hóa học của tinh dầu

Tinh dầu vỏ cam, bưởi có thành phần limonene cao Limonene ngoài khả năng gây ngán ăn trên sâu và côn trùng có hại (được ứng dụng vào việc diệt côn trùng gây hại mùa màng), còn có dược tính Limonene đã và đang được quan tâm nghiên cứu hoạt tính sinh học với khả năng ức chế tế bào ung thư (khi sử dụng DMBA, NDEA, thử nghiệm gây tác động sinh khối u tại vú trên động vật)

II Phương pháp

Thực hiện tách chiết tinh dầu bằng cơ học

Chiết xuất tinh dầu bằng chưng cất lôi cuốn hơi nước trực tiếp

Ôn phương pháp chiết lỏng – lỏng, làm khan hợp chất hữu cơ

III Tiến hành

- Cân 100g nguyên liệu vỏ cam tươi, xắt nhỏ

* Chưng cất lôi cuốn hơi nước

- Đong nước cất, cho cùng nguyên liệu vào bộ chưng cất (tỷ lệ thể tích là 1:2)

- Khởi động máy tăng nhiệt, theo dõi quy trình, ghi nhận kết quả thể tích hứng theo thời gian

Chú ý: 5 ml nước chưng cất thu được đầu tiên phải để riêng, đậy lại

Chưng cất vỏ cam tươi

- Tắt nguồn nhiệt sau 1 giờ kể từ lúc nước trong bộ chưng cất sôi Sau khi hoàn thành, chờ nguội 20 phút để tháo và làm vệ sinh bộ chưng cất, đồng thời tiến hành tách chiết tinh dầu

Kết quả

Tinh dầu vỏ cam có màu vàng nhạt, mùi thơm nhẹ đặc trưng phần vỏ quả, có vị đắng nhẹ (vì thành phần hóa học của tinh dầu có chứa terpene), cay, ngọt, có tính sát trùng, phản ứng trung tính với giấy quỳ

IV Trả lời câu hỏi

1 Phương pháp chưng cất lôi cuốn hơi nước tinh dầu vỏ quả như: cam, bưởi,… có thể thực hiện trong điều kiện nguyên liệu như thế nào? Giải thích?

- Chưng cất bằng lôi cuốn hơi nước dựa trên sự thẩm thấu, hòa tan, khuếch tán

và lôi cuốn theo hơi nước của những hợp chất hữu cơ trong tinh dầu chứa trong các

mô khi tiếp xúc với hơi nước ở nhiệt độ cao

Do đó: Phương pháp chưng cất lôi cuốn hơi nước tinh dầu vỏ quả như cam bưởi,

có thể thực hiện trong điều kiện nguyên liệu còn nguyên, dạng mảng lớn và không

bị ảnh hưởng quá nhiều bởi nhiệt độ cao Nguyên liệu nên dùng lúc còn tươi để tránh hao hục tinh dầu vì tinh dầu có tính bay hơi

2 Phương pháp tách tinh dầu vỏ quả bằng lực cơ học như ép, vắt… có thể thực hiện trong điều kiện nguyên liệu như thế nào? Giải thích?

- Các trái thuộc họ Rutaceae như cam, chanh, bưởi, quýt,… có các túi tinh dầu nằm sát mặt ngoài vỏ và với hàm lượng cao nên có thể dùng lực cơ học để giải phóng tinh dầu Sau đó có thể vắt lấy tinh dầu Tinh dầu thu được trong trường hợp này có mùi tự nhiên hơn do không bị ảnh hưởng bởi nhiệt độ Tuy vậy, hiệu suất theo cách này không cao

Do đó: Phương pháp tách tinh dầu vỏ quả bằng lực cơ học như ép, vắt có thể

thực hiện trong điều kiện nguyên liệu còn tươi, ở dạng đã được cắt nhỏ, mỏng

3 Nguyên tắc lóng tách hai chất lỏng từ một hỗn hợp?

* Chiết lỏng - lỏng:

- Chiết lỏng – lỏng là quá trình chuyển một chất ở dạng hòa tan hay huyền phù

từ pha lỏng này sang pha lỏng khác Tùy theo bản chất của chất cần chiết và môi trường chúng đang tồn tại mà ta chọn dung môi chiết thích hợp sao cho chỉ hòa tan chất định chiết mà không hòa tan các chất của môi trường Quá trình chiết kết thúc khi chất đã chiết hết Kiểm tra bằng màu hay sắc ký

*Nguyên tắc chọn dung môi:

- Dung môi phải chọn là dung môi có khả năng hòa tan lớn hơn dung môi cũ

- Dễ tách ra khi tinh chế lại thành chất tinh khiết không trộn lẫn vào dung môi

cũ

- Có sự khác biệt nhiều về tỉ khối so với dung môi cũ

- Ít có khả năng tạo nhũ và ít nguy hiểm

- Hai chất lỏng phải không hòa tan vào nhau

- Có nhiệt độ sôi thấp vì sau khi chiết ta thường dùng phương pháp chưng cất để tách dung môi ra

- Dung môi không phân cực (ether dầu hỏa…) hòa tan tốt hợp chất không phân cực

- Dung môi phân cực trung bình (diethyl ether, chloroform…) hòa tan tốt hợp chất phân cực trung bình (hợp chất có nhóm chức eter –O–, aldehyde –CH=O, ceton –CO–, ester –COO–,…)

- Dung môi phân cực mạnh (metanol…) hòa tan tốt các hợp chất phân cực mạnh (các hợp chất có chứa nhóm chức –OH, –COOH, )

*Những lưu ý khi sử dụng bình lóng:

- Trước hết khóa kín bình, đổ dung dịch vào, rồi cho dung môi vào bình lóng, thường dùng từ 1/5 – 1/3 thể tích dung dịch Đậy nút, tay phải giữ nắp và bình, tay trái giữ khóa bình, lắc nhẹ cẩn thận, đảo ngược nhiều lần Khi lắp áp suất trong bình tăng lên nên thỉnh thoảng mở khóa bình để cân bằng áp suất với bên ngoài, sau đó đóng khóa lại, tiếp tục lắc Khi lắc xong, để bình trên giá, mở nắp và chờ dung dịch tách thành hai lớp Mở khóa bình cho lớp chất lỏng phía dưới chảy xuống một cốc hứng riêng, lớp chất lỏng lớp trên hứng vào một cốc riêng

*Chú ý:

- Nếu sau khi lắc và lắng, nếu không thấy hai chất lỏng không tách thành hai lớp ra mà tạo nhũ tương, ta dùng một đũa thủy tinh dài đưa vào trong bình lóng, khuấy nhẹ dung dịch hoặc cọ xát nhẹ vào thành bình, chổ mặt thoáng dung dịch nhằm phá

vỡ bọt khí để dung dịch nhanh chóng phân thành hai lớp Ngoài ra, ta có thể thêm dung dịch NaCl bão hòa tinh khiết vào cho đến khi tách thành hai lớp chất lỏng, hoặc

có thể thêm vào bình lóng khoảng 30ml nước cất

4 Nguyên tắc làm khan hợp chất hữu cơ?

- Đây là phương pháp loại nước hoặc dung môi ra khỏi sản phẩm hoặc hóa chất ban đầu

- Làm khô trong hóa hữu cơ là làm khô nước Một chất làm khô được gọi là tốt khi cường độ làm khô mạnh và khả năng làm khô lớn Cường độ làm khô được đánh giá bằng áp suất hơi nước của chất đó, khả năng làm khô được đánh giá bằng lượng nước hấp thụ được

- Các chất như P4O10, H2SO4 đặc, CaCl2, MgSO4, Na2SO4 đều là các chất làm

khô mạnh Người ta còn chia chất làm khô thành 3 loại: Acid như P4O10, H2SO4

đặc ; Base như KOH, NaOH viên và chất làm khô trung tính: MgSO4, Na2SO4 tùy theo tính chất của đối tượng được làm khô mà người ta chọn chất làm khô thích hợp theo nguyên tắc không làm biến chất chất được làm khô về cả tính chất vật lý lẫn hóa học

*Chất làm khô phải thỏa mãn các điều kiện sau

- Không có tác dụng hóa học với chất lỏng

- Có khả năng hút nước mạnh

- Không hòa tan trong chất lỏng

- Có tác dụng làm khô nhanh

5 Nguyên tắc xác định hằng số vật lý tinh dầu nhằm mục đích gì?

Mục đích là để xác định độ tinh khiết của tinh dầu cam thu được, khảo sát được lượng nước còn lẫn trong tinh dầu, hiệu suất chiết cũng như độ tan của tinh dầu cam

6 Báo cáo kết quả thực nghiệm:

- Thu được tinh dầu màu vàng nhạt

- Công thức phân tử: C10H16

- Tên IUPAC: 1-methyl-4-(1-methylethenyl)-cyclohexene

BÀI 2 TÁCH CHẤT BÉO TỪ DẦU THỰC VẬT

(HOẶC MỠ ĐỘNG VẬT)

I Đại cương

A Chất béo toàn phần (lipid): gồm nhiều hợp chất, có thể chia làm 3 nhóm

lớn như: các chất béo dầu mỡ, sáp, phospholipid

* Các chất béo dầu mỡ: gồm các chất acid béo (dạng dầu hoặc hơi sệt),

hydroxyacid, các acetylenic acid và hỗn hợp các glycerid

- Acid béo: hầu như bao giờ cũng có số carbon chẵn

Các acid béo dạng dầu có chứa từ 1 đến 6 nối đôi trong phân tử Trong thiên nhiên đa số acid béo không no, kể cả những acid không liên hợp quan trọng nhất (như là acid oleic, acid linoleic, acid linolenic) đều có cấu trúc dạng cis

Các acid béo no thường có dạng mỡ, sệt hơn Acid caproic – C6, acid caprylic – C8, acid capric – C10, acid lauric – C12, aicd myristic – C14, acid panmitic – C16, acid stearic – C18, acid arachidic – C20, acid behenic – C22 và acid montanic – C28 Khi chúng ta thực hiện xà phòng hóa chất béo, các acid béo cũng tham gia phản ứng nên bị biến đổi hóa tính, tạo muối

Các acid béo cũng tham gia trong phản ứng xà phòng hóa tạo thành muối

- Acid acetylenic: nhóm hợp chất acid carboxylic dạng dầu luôn có chứa liên

kết ba trong phân tử, (có 1 hoặc 2 liên kết ba liên hợp, hoặc có liên kết ba liên hợp với liên kết đôi), ngoài ra có thể có thêm các liên kết đôi Nhóm chất này cũng có

thể gồm các dẫn xuất có oxygen tương ứng

Ví dụ: acid tariric CH3(CH2)10C ≡ C(CH2)4 COOH, và các hợp chất có cùng công thức phân tử là acid stearolic CH3(CH2)7C ≡ C(CH2)7 COOH

Acid ximenynic CH3(CH2)5C = CH–C ≡ C(CH2)7 COOH

- Glycerid: hợp chất không phân cực, khi bị xà phòng hóa tạo thành glycerol

và muối của acid béo Có 2 loại glycerid: loại đơn glycerid và loại hỗn hợp glycerid

Ví dụ: Oleodistearin là glycerid hỗn hợp

* Các chất sáp: chủ yếu gồm các acid béo dây hở, ester của acid béo và các

alcol monohydric, thường chứa từ 24 - 36 carbon Ví dụ về những chất sáp trong thiên nhiên như: sáp ong (ngoài acid panmitic có chauws acid cerotic và alcol melicssylic); mỡ sáp từ lông cừu (lanolin), mỡ sáp trong dầu cá nhà táng – spermaceti (có chứa alcol cetylic, acid oleic và acid panmitic) Các sáp chịu được

sự xà phòng hóa hơn là dầu và các chất béo

* Các chất béo là hợp chất hữu cơ biến dưỡng thứ cấp: Sphingomyelin,

phospholipid

- Phospholipid: có chứa acid phosphoric và một base nito (như cholin hoặc

etanolamin hoặc serin) và một polyhydroxyalcol

- Sphyngomyelin: có mạch acid béo hóa hợp với một polyhydroxyamin mạch hở tạo

nối amid, và có thể còn có liên kết glycosidic với hydratcarbon

- Do sterol không tan trong nước và không bị xà phòng hóa nên có thể tách ra khỏi dung dịch chất béo đã bị xà phòng hóa bằng cách chiết lỏng – lỏng với dung môi hữu cơ kém phân cực

C Tính chất, vai trò và cách khảo sát chất béo:

- Chất béo không tan trong nước, tan trong dung môi hữu cơ kém phân cực Vì vậy có thể sử dụng các dung môi như: eter dầu hỏa, hexan, chloroform để tách lấy chất béo từ nguyên liệu khô, hoặc chiết lỏng – lỏng để tách lấy chất béo từ dịch chiết alcol của nguyên liệu

- Vai trò của chất béo với cơ thể động, thực vật rất quan trọng Đặc biệt vai trò của các sterol khác hẳn các lipid, không những ảnh hưởng trực tiếp lên chủ thể

mà còn ảnh hưởng đến các sinh vật khác có liên hệ đến chủ thể

II Mục đích yêu cầu

- Khảo sát sơ bộ thành phần chất béo của dầu đậu nành bằng sắc ký lớp mỏng (TLC)

III Tiến hành

1 Chiết chất béo trong đậu nành

- Chuẩn bị: Cân 150g bột khô đậu nành đã giã nhuyễn, cho vào túi vải, để lơi

thể tích túi nhưng cột chặt miệng túi

- Dùng eter dầu hỏa ngâm bột đậu chiết lấy các hợp chất béo, ngâm chiết 3 lần, lần lượt với thể tích 200ml, 150ml, 100ml Khi cho dung môi vào ngâm túi, dùng đũa khuấy động lên túi 10 phút rồi để yên 5 phút, vắt lấy dịch eter dầu hỏa (mang bao nhựa để thực hiện) Gom dịch chiết, lọc qua giấy lọc, đong 2/3 thể tích chia cho

bài 3, đem đi cô quay 1/3 dung dịch còn lại

Ngâm bột đậu nành với eter dầu hỏa Ngâm chiết phần bã với

dichloromethane 2 lần

- Ngâm chiết phần bã đậu nành với diclomethane 2 lần, mỗi lần 100ml dung môi Thu lấy dịch chiết, đuổi dung môi bằng máy cô quay thu hồi dung môi, đến thể tích còn khoảng 3ml

2 Phân tích sắc ký dung dịch chất béo của đậu nành

- Chuẩn bị 2 bản mỏng sắc ký, vạch đường xuất phát và đường mốc đến của

dung môi

- Trên mỗi bảng mỏng chấm 2 vết sắc ký ứng vói 2 loại dịch chiết thu được:

dịch eter dầu hoả (E) và dịch dichloromethane (C)

- Chuẩn bị giải ly từng bản mỏng trong trong 2 loại hệ dung môi khác nhau

Dung môi giải ly (1): eter dầu hoả : etyl acetate (0,5:1,5)

Dung môi giải ly (2): dichloromethane : metanol = 99 : 1 (dùng 2ml

dichloromethane và cho vào một giọt metanol)

- Ghi nhận kết quả sắc ký ứng với 2 loại dịch chiết và so sánh khi giải ly trong

2 loại dung môi khác nhau đã nêu

Dịch chiết sau cô quay Sắc ký lớp mỏng

IV Báo cáo kết quả

1 Kết quả sắc ký

(1) Dung môi eter dầu hỏa : etyl acetate (0,5:1,5)

(2) Dung môi dichloromethane : metanol (99:1)

* Nhận xét:

- (1) thì chất chạy cao hơn (2)

- Hai chấm ở cả 2 bảng mỏng thì có Rf bằng nhau nhưng với dịch chiết từ eter dầu hỏa thì đậm hơn dịch chiết từ dichloromethane

*Tìm hiểu về nhóm chất béo dầu mỡ, chất béo biến dưỡng thứ cấp

- Từ ngàn xưa, người châu Á đã sử dụng đậu nành như một nguyên liệu quen thuộc để chế biến các món ăn và loại đồ uống khác nhau Thành phần dinh dưỡng của đậu nành rất đa dạng và phong phú, giúp mang đến giá trị cao

- Đậu nành (Glycine max) là một cây họ đậu có nguồn gốc từ Đông Á Đây là một loại nguyên liệu quan trọng trong chế độ ăn của người dân châu Á và được sử dụngtừ rất lâu Ngày nay, loại đậu này chủ yếu được trồng ở châu Á, Nam và Bắc

Mỹ

- Người châu Á thường dùng cả đậu nành tươi và khô hoặc ươm thành mầm đậu nành để chế biến thực phẩm, trong khi đó các sản phẩm đậu nành đã qua chế biến phổ biến hơn ở nhiều nước phương Tây Chúng ta có thể bắt gặp rất nhiều sản phẩm khác nhau bao gồm bột đậu nành, protein đậu nành, đậu phụ, sữa đậu nành, nước tương và dầu đậu nành Loại đậu này chứa các chất chống oxy hóa và các dưỡng chất từ thực vật có lợi cho sức khỏe Tuy nhiên, nhiều người cũng lo ngại về tác dụng phụ tiềm ẩn của loại hạt này

- Thành phần dinh dưỡng của đậu nành

Đậu nành chủ yếu chứa nhiều protein nhưng cũng chứa một lượng lớn đường

và chất béo Các thành phần dinh dưỡng có trong 100g đậu nành luộc là:

- Chất béo bão hòa: 1,3g

- Chất béo không no đơn nguyên: 1,98g

- Chất béo không no đa nguyên: 5,07g + Omega-3: 0,6g

+ Omega-6: 4,47g

- Có hai phương pháp trích ly dầu nành:

• Phương pháp một, dùng máy ép lấy dầu Phương pháp này đơn giản, dễ thực hiện nhưng hiệu quả không cao

• Phương pháp hai, dùng dung môi để ly trích, phương pháp này đòi hỏi quy trình và công nghệ phức tạp nhưng hiệu suất cao Phương pháp này được ápdụng cho quy mô công nghiệp để sản xuất ra dầu nành tinh luyện

- Để có được dầu tinh luyện như trên thị trường, dầu nành trích ly được từ phươngpháp trích ly dung môi (n-hexan) Trước đó nguồn nguyên liệu được xử lí

sơ bộ: phân loại, làm sạch, gia nhiệt (ram), cracking sau đó được chuyển đến công đoạntrích ly lấy dầu Dầu được lấy ra được gọi là dầu thô, có chứa nhiều dung môi

và tạp chất tan trong dầu Dầu thô được đưa vào một hệ thống phân lập lấy dầu phức tạp, dung môi được làm bay hơi và được tái sử dụng Để tẩy màu của dầu, dầu được cho vào đất sét ẩm chuyên dùng cho hấp phụ vài ngày Tiếp theo, dầu được khử mùi bằng cách cho bay hơi những chất có mùi, sau đó được làm bền hóa-tinh luyện và làm sạch dầu (loại nhựa, loại xà phòng ) để được dầu thành phẩm Trên thị trường, dầu thành phẩm là hổn hợp của nhiều loại dầu oliu, dầu nành, dầu phộng

- Chất béo trong đậu nành sẽ được chiết xuất qua ép nóng và tinh chế Dầu tinh chế sẽ có màu vàng nhạt, không có vị và chứa hơn 60% axit béo đa không bão hoà

- Lợi ích của dầu đậu nành: Dầu đậu nành có chứa các loại chất béo không bão hòa đa, là một loại chất béo tốt cho hệ thống tim mạch Loại dầu thực vật này cung cấp dinh dưỡngtốt cho cơ thể, lại không chứa cholesterol giúp ngăn chặn quá

trình hình thành mảng bám ở mạch máu, phòng tránh được nguy cơ mắc bệnh về tim, xơ vữa động mạch

- Vitamin K có trong dầu đậu nành giúp tăng cường hoạt động của hoạt chất osteotrophic trong xương giúp tốc độ phục hồi xương nhanh hơn Vitamin K trong đậu nành có thể kích thích sự phát triển xương một cách tích cựcvà mạnh mẽ, việc chuyển sang dùng dầu đậu nành để thay thế cho những loại dầu hiện tại nếu muốn tránh nguy cơ bị loãng xương

- Dầu đậu nành chứa một lượng lớn acid béo omega-3, đóng vai trò quan trọng trong việc tăng cường sức khỏe và ngăn ngừa bệnh mạn tính Tăng lượng acid béo omega-3 trong bữa ăn hàng ngày có thể giúp giảm viêm, được cho là có liên quan đến sự phát triển của các bệnh mạn tính như bệnh tim, ưng thư và đái tháo đường Ngoài dầu đậu nành bạn có thể kết hợp nhiều loại thực phẩm khác chứa acid béo omega-3 như cá hồi, hạt lanh, hạtóc chó…

- Dầu đậu nành rất giàu vitamin E, một chất dinh dưỡng có thể giúp tăng cường sức khỏe làn da Vitamin E có thể bảo vệ chống lại tổn thương và giúp điều trị một

số tình trạng xấu của da như mụn trứng cá, viêm da, dị ứng…

- Lưu ý khi dùng dầu đậu nành

• Mặc dù dầu đậu nành mang đến nhiều lợi ích cho sức khỏe, nhưng việc tiêu thụ quá thường xuyên có thể gây ra những mối nguy hại tiềm ẩn

• Dầu đậu nành chứa tỷ lệ chất béo omega-6 cao Mặc dù cả chất béo omega- 6và omega-3 đều cần thiết cho chế độ ăn uống, nhưng hầu hết mọi người tiêu thụ quá nhiều thực phẩm giàu chất béo omega-6 và quá ít chất béo omega-3 Sự mất cân này có thể dẫn đến một số tình trạng như béo phì, suy giảm nhận thức…

• Một số nghiên cứu trên chuột cho thấy, chế độ ăn quá nhiều dầu đậu nành dẫn đến những thay đổi bất lợi về trao đổi chất bao gồm tăng mỡ trong cơ thể, lượng đường trong máu cao, gan nhiễm mỡ

BÀI 3 TÁCH CHIẾT STEROL TỪ HỖN HỢP KHÔNG BỊ XÀ

PHÒNG HÓA CỦA CHẤT BÉO

I Đại cương

Sterol cũng là một dạng chất béo thuộc nhóm chất hữu cơ biến dưỡng thứ cấp, khác hẳn các chất béo dầu mỡ, và cũng khác nhóm phospholipid Sterol thường có cấu trúc hệ vòng cyclopentano perhydrophenantren, với nhóm –OH ở vị trí C–3 trên vòng; và trong một số ít trường hợp có cấu trúc biến đổi của hệ vòng đó Nhờ cấu trúc này mà cách định tính và định lượng sterol có những phương pháp riêng

Sterol không bị xà phòng hóa nên có thể vẫn giữu được tính chất kém tan trong nước, không tan trong dung dịch chất béo đã xà phòng hóa, có thể tách ra khỏi hệ dung dịch bằng cách chiết lỏng lỏng dung dịch này với dung môi hữu cơ kém phân cực

II Mục tiêu

- Sử dụng soxhlet để xà phòng hóa chất béo trong vật liệu → tách rời sterol

- Sử dụng bình lóng để chiết lỏng lỏng, tách lấy sterol ra khỏi dầu thực vật

- Khảo sát, so sánh sản phẩm sterol và chất béo ban đầu bằng sắc ký lớp mỏng

- Thực hiện cách kéo ống vi quản, sắc ký lớp mỏng

III Tiến hành

- Xà phòng hóa dung dịch chất béo của đậu nành: 100 ml dung dịch chất béo, thêm 100 ml methanol và 25 g KOH, cho vào bộ đun hồi lưu, đun trong 1 giờ

- Sau đó cho thêm 50 ml nước cất vào thu được hỗn hợp Hỗn hợp này chia làm 2 phần, chiết 3 lần, mỗi lần với 50 ml eter dầu hỏa

Chiết với eter dầu hỏa

- Tinh chế hỗn hợp sterol

Dịch chiết eter dầu hỏa rửa với 50 ml nước muối bão hòa, và làm khan bằng

Na2SO4 khan, lọc Dung dịch eter dầu hỏa được cô quay thu hồi dung môi đến còn 3-5ml cho ra cốc, và ngâm đá, thu lấy tủa Kết tinh lại: hòa tan kết tủa này trở vào

lại 3ml chloroform đã đun nhẹ (50ᴼC), sau đó lọc qua phễu giấy lọc, ngâm lạnh đặt vào tủ hút để bay hơi, thu được kết tủa sterol

- Sắc ký bản mỏng khảo sát sơ bộ thành phần sterol

Chuẩn bị bản mỏng sắc ký, vạch đường xuất phát và đường mốc đến của dung môi Chấm sắc ký 3 vết: dung dịch chất béo của đậu nành (1), dịch chiết eter dầu hỏa (2), dung dịch khi ngâm kết tủa sterol đã kết tinh (lấy 1 ít ngâm vào 1ml eter dầu hỏa) (3)

Chuẩn bị hệ dung môi giải ly là CHCl3 : CH3OH (2ml CHCl3 nhỏ 1 giọt

CH3OH)

Đặt bản mỏng sắc ký vào cốc giải ly, chờ đến khi dung môi dâng lên cao đến vạch mốc của dung môi đã gạch sẵn trên bản Lấy bản đã giải ly xong hong khô trên bếp điện Xem kết quả của giải ly bản mỏng: Bản mỏng hoặc soi đèn UV, hoặc hiện hình vết: đem nhúng vào thuốc hiện hình vết, hơ nhẹ và sấy trên bếp điện (120ᴼC) đến khi hiện màu vết, ghi nhận kết quả

IV Kết quả

1 Kết quả màu sắc

Sterol (2) và (3) thu được hiện trên bản mỏng với các vết tròn, rõ không kéo vệt so với dung dịch chất béo đậu nành (1) Sterol trước và sau kết tinh lại không có

sự khác biệt nhiều, nhưng vết sterol sau khi kết tinh lại (3) rõ và ít tạp hơn một chút

so với trước khi kết tinh (2) Nguyên nhân là do quá trình kết tinh lại, lọc nóng đã loại đi một số tạp chất có trong sterol trước nên vết sterol sau khi kết tinh sẽ rõ và ít tạp chất hơn

2 Tìm hiểu và viết báo cáo về nhóm chất sterol trong sữa đậu nành

Sterol là những ancol thường ở thể rắn, có cấu trúc 27 – 29 nguyên tử carbon, nhưng đều có chung khung sườn cơ bản là khung gonan và một nhóm thế alkyl ở mạch nhánh ở C–17