Đang tải... (xem toàn văn)
Cây thuốc là bất kỳ loại cây nào mà trong một hoặc nhiều bộ phận của nó có chứa các chất có thể được sử dụng cho mục đích chữa bệnh hoặc là tiền chất để tổng hợp các chất chữa bệnh trực
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NAM CẦN THƠ KHOA DƯỢC BÀI BÁO CÁO MÔN PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU DƯỢC LIỆU ĐỀ TÀI XÂY DỰNG TIÊU CHUẨN DƯỢC LIỆU CÂY CỎ XƯỚC (Achyranthes aspera L.Amaranthaceae) GVHD: THS.DS THÁI THỊ CẨM THS.DS NGUYỄN THỊ LINH EM SVTH: TRẦN DƯƠNG MINH TÂM MSSV: 189675 LỚP: DH18DUO02 Cần thơ-2022 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NAM CẦN THƠ KHOA DƯỢC BÀI BÁO CÁO MÔN PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU DƯỢC LIỆU ĐỀ TÀI XÂY DỰNG TIÊU CHUẨN DƯỢC LIỆU CÂY CỎ XƯỚC (Achyranthes aspera L.Amaranthaceae) GVHD: ThS.DS Thái Thị Cẩm ThS.DS Nguyễn Thị Linh Em Sinh viên thực hiện: Trần Dương Minh Tâm Lớp: DH18DUO02 MSSV: 189675 Nhóm: 2 Tiểu nhóm: 3 Số điện thoại:0832685898 Email: jemtemmy@gmail.com Cần thơ-2022 LỜI CẢM ƠN Xin gửi lời cảm ơn chân thành đến cô TS DS Thái Thị Cẩm, trưởng Bộ môn Dược Liệu trường Đại học Nam Cần Thơ, cô đã hướng dẫn tiểu luận cho tôi, cô là một người thầy đáng kính đã tận tình truyền đạt kiến thức, kinh nghiệm học tập cho tôi để đạt kết quả tốt nhất, cũng như tạo điều kiện cho chúng tôi nghiên cứu mở mang tầm nhìn, kiến thức và nhiều kinh nghiệm thực tiễn hữu ích Tôi cũng xin gửi lời cảm ơn sâu sắc đến các thầy cô dạy thực hành, cán bộ quản lí phòng thực hành thí nghiệm Trường Đại Học Nam Cần Thơ đã nhiệt tình chỉ dẫn, chia sẻ những kinh nghiệm quý báu và tạo điều kiện thuận lợi để tôi và các bạn hoàn thành tốt tiểu luận của mình Cuối cùng, tôi xin bày tỏ sự biết ơn sâu sắc và xin gửi lời chúc sức khỏe đến gia đình, người thân quý, thầy cô và tất cả bạn bè của tôi Chúc những điều tốt đẹp sẽ luôn đồng hành cùng tất cả mọi người Cần Thơ, ngày 11 tháng 12 năm 2022 Người thực hiện Trần Dương Minh Tâm MỤC LỤC ĐẶT VẤN ĐỀ .1 CHƯƠNG I TỔNG QUAN VỀ NGHIÊN CỨU 2 1 Đặc điểm thực vật 2 1.1 Tên gọi: 2 1.2 Mô tả cây: 2 1.3 Bộ phận sử dụng 4 1.4 Thu hái 5 1.5 Sinh thái,phân bố .5 2.Thành phần hóa học 5 3 Tác dụng dược lý 7 4 Công dụng .8 5 Một số bài thuốc 8 6 Sản phẩm .10 CHƯƠNG II .12 ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 12 1 Đối tượng 12 2 Dụng cụ, máy móc, hóa chất và thiết bị 12 2.1 Kiểm nghiệm dược liệu bằng phương pháp vi học: 12 2.2 Kiểm nghiệm dược liệu bằng phương pháp phân tích vi hóa: 12 3 Phương pháp nghiên cứu .13 3.1 Nghiên cứu về đặc điểm vi học: .13 3.1.1 Khảo sát hình thái: .13 3.1.2 Khảo sát vi phẫu: 14 3.1.3 Khảo sát bột dược liệu: 14 3.2 Phân tích thành phần hóa thực vật: 15 3.2.1 Chiết xuất dược liệu: 15 3.2.2 Chuẩn bị dịch chiết: 15 3.2.3 Xác định các nhóm hoạt chất có trong dịch chiết 16 3.3 Định tính bằng phương pháp sắc ký lớp mỏng: 17 CHƯƠNG III .20 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 20 1 Kết quả nghiên cứu thực vật: 20 2 Đặc điểm vi phẫu 22 2.1 Bóc tách biểu bì: .22 2.2 Vi phẫu rễ: 22 2.2 Vi phẫu Thân: 25 2.3 Vi phẫu Lá: 27 3.Khảo sát bột dược liệu 30 3.1 Bột rễ cây Cỏ xước: 30 3.2 Bột thân cây Cỏ xước: 31 3.3 Bột lá cây Cây Cỏ xước: 32 4 Phân tích thành phần hóa thực vật 33 4.1 Quy trình chiết và kết quả: 33 4.2 Xác định các chất tan trong dịch ether .34 4.2.1 Xác định tinh dầu: .34 4.2.2 Xác định chất béo: 34 4.2.3 Định tính carotenoid: 35 4.2.4 Định tính triterpenoid: .35 4.2.5 Định tính alkaloid: 36 4.2.6 Định tính coumarin: 37 4.2.7 Định tính anthraquinon: 38 4.2.8 Định tính flavonoid: 38 4.3 Dịch chiết cồn 39 4.3.1 Định tính alkaloid: 39 4.3.2 Định tính coumarin: 40 4.3.3 Định tính glycosid tim: .40 4.3.4 Định tính flavonoid: 42 4.3.5 Định tính anthocyanosid: 42 4.3.6 Định tính proanthocyanidin: .43 4.3.7 Định tính tanin: 43 4.3.8 Định tính saponin: .44 4.3.9 Định tính các chất khử: .45 4.3.10 Định tính các acid hữu cơ: 45 4.4 Dịch chiết nước .46 4.4.1 Định tính alkaloid: 46 4.4.2 Định tính glycosid tim: .47 4.4.3 Định tính flavonoid: 48 4.4.4 Định tính anthocyanosid: 49 4.4.5 Định tính proanthocyanidin: .49 4.4.6 Định tính tanin: 50 4.4.7 Định tính saponin: .50 4.4.8 Định tính các chất khử: .51 4.4.9 Định tính các acid hữu cơ: 52 4.4.10 Định tính polyuronid: 52 5 Đính tính Saponin bằng Sắc ký lớp mỏng: 55 CHƯƠNG IV .58 XÂY DỰNG TIÊU CHUẨN DƯỢC LIỆU CÂY CỎ XƯỚC 58 1 Định nghĩa: 58 2 Đặc điểm cảm quan: 58 3 Đặc điểm vi học: 58 4 Đặc điểm bột lá, thân, rễ cây: 59 5 Độ ẩm bột lá, thân, rễ: 59 6 Tro toàn phần: 59 8 Chế biến: .60 9 Bảo quản: .60 10 Tính vị, quy kinh: 60 11 Công năng, chủ trị .60 12 Cách dùng, liều lượng: 60 MỤC LỤC HÌNH ẢNH Hình 1: Cây Cỏ xước và môi trường sống 3 Hình 2: Lá cây Cỏ xước 3 Hình 3: Hoa Cỏ xước 4 Hình 4: Rễ Cỏ xước 4 Hình 5: Cấu trúc hóa học của Ecdysterone (1), Strigmasta-5, 22-dien-3-E-ol (2), N-hexacos-14- enoic acid (3), Axit trans-13-docasenoic (4) 6 Hình 6: Cấu tạo hóa học của Triacontanol (1), tetracontanol-2(2), 17- pentatriacontanol (3), spinasterol (4) 6 Hình 7: Cấu tạo hóa học của p-benzoquinone (1), hydroquinone (2), asarone (3), spathulenol (4), nerol (5) 7 Hình 8: Sản phẩm y dược từ Cỏ xước [11][12] 11 Hình 9: Sơ đồ chuẩn bị các dịch chiết .16 Hình 10: Môi trường cây Cỏ xước 20 Hình 11: Thân cây Cỏ xước 20 Hình 12: Lá cây Cỏ xước 21 Hình 13: Hoa cây Cỏ xước 21 Hình 14: Rễ cây Cỏ xước 22 Hình 15: Bốc tách biểu bì vẽ (40x) 22 Hình 16: Hình vẽ lỗ khí 22 Hình 17: Ảnh chụp vi phẫu rễ Cỏ xước (4x) 23 Hình 18: Ảnh chụp vi phẫu rễ Cỏ xước 24 Hình 19: Ảnh chụp vi phẫu rễ Cỏ xước (40x) 24 Hình 20: Hình vẽ vi phẫu rễ Cỏ xước .25 Hình 21: Ảnh chụp vi phẫu thân Cỏ xước (4x) 26 Hình 22: Ảnh chụp vi phẫu thân Cỏ xước (10x) .26 Hình 23: Ảnh chụp vi phẫu thân Cỏ xước (40x) .27 Hình 24: Hình vẽ vi phẫu thân Cỏ xước 27 Hình 25: Ảnh chụp vi phẫu cuống lá Cỏ xước (4x) 28 Hình 26: Ảnh chụp vi phẫu cuống lá Cỏ xước (10x) 28 Hình 27: Ảnh chụp vi phẫu cuống lá Cỏ xước (40x) 29 Hình 28: Hình vẽ vi phẫu cuống lá Cỏ xước 29 Hình 29: Ảnh chụp vi phẫu gân lá Cỏ xước (10x) 30 Hình 30: Ảnh chụp vi phẫu gân lá Cỏ xước (4x) 30 Hình 31: Ảnh chụp vi phẫu gân lá Cỏ xước (40x) 30 Hình 32: Ảnh chụp các tế bào và mô trong bột rễ Cỏ xước (40x) 31 Hình 33: Ảnh chụp các tế bào và mô trong bột thân Cỏ xước (40x) 32 Hình 34: Ảnh chụp các tế bào và mô trong bột lá Cỏ xước (40x) 33 Hình 35: Sơ đồ chuẩn bị các dịch chiết 34 Hình 36: Định tính chất béo dịch chiết ether 35 Hình 37: Định tính carotenoid dịch chiết ether 35 Hình 38: Định tính triterpenoid dịch chiết ether .36 Hình 39: Định tính alkaloid dịch chiết ether .37 Hình 40: Định tính coumarin dịch chiết ether 37 Hình 41: Định tính anthraquinon dịch chiết ether 38 Hình 42: Định tính flavonoid dịch chiết ether 39 Hình 43: Định tính alkaloid dịch chiết cồn .40 Hình 44: Định tính coumarin dịch chiết cồn .40 Hình 45: Định tính vòng lacton 5 cạnh dịch chiết cồn 41 Hình 46: Định tính đường 2- desoxy dịch chiết cồn 41 Hình 47: Định tính flavonoid dịch chiết cồn 42 Hình 48: Định tính anthocyanosid dịch chiết cồn .42 Hình 49: Định tính proanthocyanidin dịch chiết cồn 43 Hình 50: Định tính tanin dịch chiết cồn 44 Hình 51: Định tính saponin dịch chiết cồn 44 Hình 52: Định tính các chất khử dịch chiết cồn 45 Hình 53: Định tính các acid hữu cơ dịch chiết cồn 46 Hình 54: Định tính alkaloid dịch chiết nước 47 Hình 55: Định tính vòng lacton 5 cạnh dịch chiết nước 47 Hình 56: Định tính đường 2- desoxydịch chiết nước 48 Hình 57: Định tính flavonoid dịch chiết nước 48 Hình 58: Định tính anthocyanosid dịch chiết nước 49 Hình 59: Định tính proanthocyanidin dịch chiết nước 50 Hình 60: Định tính tanin dịch chiết nước 50 Hình 61: Định tính saponin dịch chiết nước .51 Hình 62: Định tính các chất khử dịch chiết nước 51 Hình 63: Định tính các acid hữu cơ dịch chiết nước .52 Hình 64: Định tính polyuronid dịch chiết nước 53 Hình 65: Bảng sắc ký soi UV bước sóng 254nm 56 Hình 66: Bảng sắc ký soi UV bước sóng 365nm 56 Hình 67: Điều kiện ánh sáng bình thường 57 MỤC LỤC BẢNG Bảng 1: Thuốc thử hiện màu 18 Bảng 2: Tóm tắt kết quả phân tích sơ bộ thành phần hóa thực vật 54 Bảng 3: Kết quả định tính sắc ký .57 Xây dựng tiêu chuẩn dược liệu – Cỏ xước Trần Dương Minh Tâm – 189675 ĐẶT VẤN ĐỀ Từ xưa đến nay, thực vật đóng vai trò quan trọng trong đời sống con người như là lương thực,thực phẩm,nguyên liệu công nghiệp, gia vị, và đặc biệt là vai trò vô cùng quan trọng trong chữa bệnh đó là làm thuốc Cây thuốc là bất kỳ loại cây nào mà trong một hoặc nhiều bộ phận của nó có chứa các chất có thể được sử dụng cho mục đích chữa bệnh hoặc là tiền chất để tổng hợp các chất chữa bệnh trực tiếp Khoảng 25% thuốc trong dược điển hiện đại có nguồn gốc từ thực vật và các chất tương tự được tổng hợp và xây dựng trên các hợp chất nguyên mẫu được phân lập từ thực vật Các bệnh truyền nhiễm là nguyên nhân hàng đầu gây tử vong sớm trên thế giới Do đó, nhu cầu liên tục và cấp bách của con người hiện nay là khám phá các hợp chất chống vi khuẩn mới với cấu trúc hóa học đa dạng và cơ chế hoạt động tốt Cỏ xước (còn gọi là Ngưu tất Nam) là một loại thảo mộc mọc hàng năm Thân cây có góc cạnh, có gân và đơn giản hoặc phân nhánh từ gốc, thường có màu tím nhạt, cành (cao 1-2 m) hình trụ hoặc hình tứ giác tuyệt đối, có vân, có lông tơ và có lá dày Cây mọc hoang khắp cả nước ở những chỗ ven đường, nương rẫy ruộng vườn bỏ hoang nơi có ánh sáng đầy đủ và đất còn nhiều dinh dưỡng Ở Việt Nam, cho tới nay có rất ít công trình nghiên cứu về cây Cỏ xước cho nên vấn đề về việc phát triển rộng rãi và xây dựng một tiêu chuẩn chất lượng cho cây Cỏ xước chưa được xem trọng Thêm vào đó điều kiện sống của cây ở mỗi nơi khác nhau sẽ cho giá trị dinh dưỡng khác nhau Vì vậy, vấn đề xây dựng tiêu chuẩn chất lượng cho cây Cỏ xước là rất cần thiết Mục tiêu của đề tài là mô tả tổng quan về cây Cỏ xước, đặc điểm vi học, đặc điểm vi hóa của lá Từ đó sẽ xây dựng nên một tiêu chuẩn dược liệu về Cỏ xước để có thể bổ sung vào Dược điển Việt Nam V nhằm để có thể nâng cao công tác kiểm nghiệm và chất lượng của dược liệu Đây là một yêu cầu rất lớn đối với ngành y tế nhằm đảm bảo tính an toàn, hiệu quả và chất lượng của thuốc trong việc chăm sóc sức khỏe cộng đồng Trang 1 Xây dựng tiêu chuẩn dược liệu – Cỏ xước Trần Dương Minh Tâm – 189675 CHƯƠNG I TỔNG QUAN VỀ NGHIÊN CỨU 1 Đặc điểm thực vật 1.1 Tên gọi: Tên khác: Ngưu tất nam Tên khoa học: Achyranthes aspetra L., Amaranthaceate (họ Rau dền) Phân loại : Ngành Ngọc lan (Magnoliophyta) Lớp Ngọc lan (Magnoliopsida) Phân lớp Cẩm Chướng (Caryophyllidae) Bộ Cẩm Chướng (Caryophyllales) Họ Rau dền (Amaranthaceae) Chi Achyranthes Loài Achyranthes aspera L.(Cây Cỏ Xước) [9] 1.2 Mô tả cây: Cây thảo, mọc đứng, cao 20-50 cm, có khi đến 1 m, phía góc phân nhiều nhanh đối nhau Thân non tiết diện vuông, gốc lỏng phù to, màu xanh lục, có nhiều lông trắng dài và hơi nhảm; thân giả cũng tiết diện gần tròn, có lông thưa và nhiều nốt sẩn, nơi mọc lá thường phình to [4] Trang 2 Xây dựng tiêu chuẩn dược liệu – Cỏ xước Trần Dương Minh Tâm – 189675 Hình 1: Cây Cỏ xước và môi trường sống Lá đơn, mọc đối chéo chữ thập, nhiều lông trắng dài và hơi nhảm, mặt trên màu xanh lục sậm, mặt dưới nhạt hơn; mép lá nguyên, lượn sóng, gân lá hình lông chim nổi rõ ở mặt dưới, đôi khi màu hơi đỏ ở gốc Cuống lá dài 1-1,5 cm, màu xanh lục, hình lòng máng, hơi nở rộng phía gốc [4] Hình 2: Lá cây Cỏ xước Cụm hoa giẻ ở ngọn cảnh, dài 30-40 cm, phủ đầy lông dài màu trắng Hoa nhỏ, đều, lưỡng tính Cây ra hoa vào mùa đông và xuân [4] Trang 3