Trương Thu Hằ ận Văn Thạc Sĩng CNTP Lu Việ ện Công Ngh Sinh H c và Công Ngh ọ ệ Thự ẩ Đạ ọ ộc Ph m i H c Bách Khoa Hà N i 1 L ỜI CAM ĐOAN c th hi n trong Lu m n [.]
Trang 1Việ n Công Ngh Sinh H c và Công Ngh ệ ọ ệ Thự c Ph m ẩ Đạ i H c Bách Khoa Hà N i ọ ộ
L ỜI CAM ĐOAN
i dung nghiên c u, k t qu nghiên c u, s u th c hi li u trung thc thc
hi n b i chính b c công b i b t k hình th c nào
ng s li u trong các b ng bi u ph c v cho vi c phân tích, nh n xét,
c chính tác gi thu th p t các ngu n khác nhau có ghi rõ trong ph n tài liu tham kh o
Hà N
ng
Trang 2Việ n Công Ngh Sinh H c và Công Ngh ệ ọ ệ Thự c Ph m ẩ Đạ i H c Bách Khoa Hà N i ọ ộ
2
L Ờ I CẢM ƠN
Em xin g i l i c c t ng viên B môn Công Ngh Thc Ph m, Vi n Công Ngh Sinh H c và Công Ngh Thc Phng dng viên em trong su t quá trình
thc hin lut nghi p này
i l i c n TS Nguy n Ti n Thành và Ths Lê Th Lan
Trang 3M Ụ C LỤ C
L 1
LI C 2
DANH MC CÁC CH VI T TT 6
DANH MC CÁC BNG 7
DANH MC CÁC HÌNH 9
T V 10
NG QU AN 12
1 T ng quan v ph n ng Maillard 13
1.1 Lch s nghiên c u v ph n ng Maillard 13
n ph n ng Maillard 14
1.1.2 Các s n ph m ch y u c a ph n ng Maillard và ng d ng trong công ngh thc phm 18
1.2 Aminoreductone 19
1.2.1 S hình thành Aminoreductone 19
1.2.2 ng d ng s t ki m soát quá trình gia nhi 22 t c tính c a Aminoreductone 24
Trang 4Việ n Công Ngh Sinh H c và Công Ngh ệ ọ ệ Thự c Ph m ẩ Đạ i H c Bách Khoa Hà N i ọ ộ
4
1.2.4 Các nghiên c u v c tính ca sn ph m c a ph n ng Maillard và
hot tính kháng vi sinh v a st c n ph m ph n ng Maillard 25
1.3 Listeria monocytogenes 28
m 28
1.3.2 Phân i 29 lo 1.3.3 L ch s 29
1.3.4 Ngu n lây nhi m 29
1.3.5 ng ti và thc phm 30
nh ki m soát L monocytogenes 30
T LIU 33
2.1 Vt liu nghiên c u 33
ng nghiên c u 33
a Aminoreductone (AR) 33
b Listeria monocytogenes 33
m nghiên c u 35
2.1.3 Thi t b s d ng 35
2.1.4 D ng c và hóa ch t 36
Trang 5T QU VÀ TH O LU N 48 3.1 Kh o sát kh c ch L.monocytogenes c a Aminoreductone (AR) 48
3.2 N c ch t i thi u (MIC) c i vi
Trang 6Việ n Công Ngh Sinh H c và Công Ngh ệ ọ ệ Thự c Ph m ẩ Đạ i H c Bách Khoa Hà N i ọ ộ
6
DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT
AR: Aminoreductone
Ak: Amikacin
CFU: Colony-forming unit (
K2HPO4: Kali hydrophosphate
KH2PO4: Kali dihydrophosphate
MHB: Mueller-Hinton
MIC Minimum Inhibitory Concentration ( N: c ch i thi t u )
MBC: Minimum Bactericidal Concentration ( N di t khu i thin t u)
XTT : (2,3
-bis[2-methoxy-4-nitro-5-sulfophenyl]-2H-tetrezolium-5-carboxanilide)
Trang 8Việ n Công Ngh Sinh H c và Công Ngh ệ ọ ệ Thự c Ph m ẩ Đạ i H c Bách Khoa Hà N i ọ ộ
Trang 911 1.11 Hình nh minh h a Listeria monocytogenes 26
12 2.1 chu n b dung d m phosphat 1,28M (pH
Trang 10Việ n Công Ngh Sinh H c và Công Ngh ệ ọ ệ Thự c Ph m ẩ Đạ i H c Bách Khoa Hà N i ọ ộ
Trang 11ng báo cáo v Aminoreductone tác d
Aminoreductone (AR) là m t trong nh ng s n ph m c a ph n ng Maillard,
c hình thành sau m t th i gian gia nhi t ng n, nên AR là ch s r t quan tr ng
nh m ph n x lý nhi t trong s n xu t thc ph c tách chi t d a Shimamura [38] H p chc bi n có ho t tính ch ng oxi hóa [40], kh o v riboflavin
i tác d ng c a ánh sáng [46] Ngoài ra còn có nh ng nghiên c n ch ng minh kh ng l i m t s chng vi khu n gây b nh t n t i trong th c ph m
: Helicobacter pylori, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Salmonella enterica, Bacillus subtilis, Enterococcus faecalis [44] Qua các báo cáo
th c hi u qu kháng khu n c a AR t th thêm ho t tính trên các chng gây b t khu n c a AR
Listeria monocytogenes là m t vi khu n gây b nh, Gram +, t n t i nhi u trong th c ph m, là nguyên nhân ch y u gây b nh Listeriosis (m t b nh nhi m trùng nghiêm tri th c ph m nhi m vi khu n Listeria monocytogenes)
[4]
Trang 12Việ n Công Ngh Sinh H c và Công Ngh ệ ọ ệ Thự c Ph m ẩ Đạ i H c Bách Khoa Hà N i ọ ộ
12
D a trên k t qu nghiên c u t c công b v s n ph m c a ph n
ng Maillard gây c ch i v i Listeria monocytogenes không rõ ràng là h p ch t nào [20] và t i hi n nay v y có báo cáo liên quan t i kh n gây b nh Listeria monocytogenes c a AR Vi mong mu n tìm hi u sâu s a tôi titài Nghiên c u kh ứ ả năng kháng khu n c a Aminoreductone v i các ch ẩ ủ ớ ủng Listeria monocytogenes phân
l p t ậ ừ thự c ph m ẩ Trong ph tài này, tôi kh o sát ho t tính kháng khu n
c a AR trên ch ng vi khu n gây b nh : Listeria monocytogenes c phân l p t các s n ph m th c ph m b nh vòng kháng khunh
n ng c ch i thi t u, và kh t khu n v i ni dung nghiên c u sau :
1 Kh o sát kh c ch vi khu n Listeria monocytogenes c a AR
nh n c ch t i thi u c a AR v i vi khu n Listeria monocytogenes
nh kh t Listeria monocytogenes c i v i vi khu n Listeria
monocytogenes
4 So sánh kh t Listeria monocytogenes c ng nuôi cy
ng th c ph m
CHƯƠNG 1 : T NG QU AN Ổ
Trang 131 T ng quan v ổ ề phản ứng Maillard
1.1 L ch s nghiên c ị ử ứ u về phản ứ ng Maillard
Ph n ng Maillard x y ra gi ng kh ( ví d
c bi t quan tr ng trong k thu t s n xu t th c
ph m Ph n ng Maillard ng t i giá tr d ng và giá tr c m quan c a
s n ph m, ch y i màu s c, c u trúc trong quá trình gia nhi ng th i t o ra m t s s n ph m ph không mong mu n Vì v y tùy thu c vào yêu c u tính ch t, c m quan c a t ng s n ph m
nh ng d liu liên quan t i thành ph n hóa h ng th i d kh
ng d ng c a h p ch t trong nhi c, sinh h c th m chí liên quan t i b nh lý c i Lu bác b b i c ng nghiên c u khoa h c cho t i t n ng
c th a nh n ch c ch n là nguyên nhân t o màu nâu và làm gi m giá tr
ng trong s a b t [17].Sa t nhi c p t i nh ng
ph n ng ph c t p x y ra và b ng nhi nh
ng t các thông s ( pH, nhi , thng ph n ng, n các ch t,
ho i s i chng c phth ng, t n th t
Trang 14Việ n Công Ngh Sinh H c và Công Ngh ệ ọ ệ Thự c Ph m ẩ Đạ i H c Bách Khoa Hà N i ọ ộ
14
acid amin c n thi t, s i ch t trong s n ph m ph n ng, tác d ng sinh lý khi
n ph m c a ph n ng Maillard [28]
1.1.1 Các giai đoạ n ph n ng Maillard ả ứ
D a vào m màu s c c a các s n ph m có th chia thàn n k ti
- u: s n ph m không màu và không h p th ánh sáng tia c c tím
- n trung gian: không màu ho c có màu vàng, h p th m nh ánh sáng c c tím
- n cum
a Giai đoạ n đ ầ u
- Ph n ng cacbonylamin
u tiên c a ph n ng Maillard là s ng v i acid
u ki n nhi sinh lý thì t o thành base Schiff (H p ch t h nhóm - HC=N -) ho c glucozit
Hình 1.1 Phản ứng ngưng tụ đườ ng v i acid amin ớ
- Ph n ng chuy n v Amadori
Trang 15Khi nhi cao phng amin b ng phân hóa hay còn g i là chuy n
v n i phân Amadori K t qu là gi a nguyên t th nht và th 2 sinh ra n i kép
t o thành 1 amin 1 dezoxy 2 xetoza
Hình 1.2 Phản ứ ng chuy n v Amadori t o ra 1-amin-1-dezoxy-2-xetoza ể ị ạ
Phm v t c a s chuy n v Amadori là h p ch t có kh n ng và là cht kh t o thành polymer có màu s m g i là melanoidin
b Giai đoạ n trung gian
n này x y ra s kh c c a 1 amin 1 dezoxy 2 xetoza
u king và nhi mà t o thành s n ph m phân ly khác nhau
- T o thành furfurol và ozon
Hình 1.3 Phản ng t ứ ạ o thành furfurol và ozon
- T o thành reductone có 6 cacbon
Trang 16Việ n Công Ngh Sinh H c và Công Ngh ệ ọ ệ Thự c Ph m ẩ Đạ i H c Bách Khoa Hà N i ọ ộ
Trang 17Hình 1.5 Phản ng ứ phân h y các h p ch t amin ủ ợ ấ
c Giai đoạ n cu i ố
n cu i này bao g m nhi u ph n ng ph c t p, có th chia thành 2
ki u ph n ng:
- Ph n alldol vi s t o thành polymer màu nâu không cha nito
- Ph n ng trùng h p hóa aldehitamin v i s t o thành các h p ch t nito d vòng
n cu i cùng c a ph n ng melanoidin s t u tiên là các
n là các polymer không no và
m và có cùng tên g i chung là melanoidin Các melanoidin h p th m nh tia c c tím ( c dung d c iot và 2,6 diclophenolindophenol Kh hòa tan c a melanoidin ph thuc vào nhi mà ph n ng ti n hành
Trang 18Việ n Công Ngh Sinh H c và Công Ngh ệ ọ ệ Thự c Ph m ẩ Đạ i H c Bách Khoa Hà N i ọ ộ
ph n ng d ng và kh ng cc thc
hi n, Aminoreductone là m t trong s t trong
nh ng s n ph m c a ph n u c a quá trình gia nhi c s d t thông s quan tr phát hi n và ki m
Trang 19soát ph n ng Maillard trong th c ph ó nh ng nghiên c n liên quan tc thc hin
1.2 Aminoreductone
1.2.1 S hình thành Aminoreductone ự
c phát hi n l u tiên b i Monika Pischetsrieder [23] khi tác gi nghiên c u v s hình thành c a AR t maltose Ba c u trúc chung c a AR thu
c b t ngu n t h p ch t ngu n g c Amadori malto 3-Hydroxy-5,6- se
dihydropyridones c hình thành trong ph n ng Ph n ng ca maltose v i amin dn s hình thành c a m t chu C6i m -aminoreducton và 3-hydroxy-5,6-dihydropyridone [22]
Hình 1.7 Quá trình hình thành Aminoreductone theo Pischetsrieder, 1994
HC N R'Ac
C OAc
C O CH CH
R' O
1 a,b
a: R= H b: R= glucoza R = e.g propyl butyl
Hình 1.3: Quá trình hình thành Aminoreducton theo Pischetsrieder, 1994
hình thành AR ti p t c kh o sát b i Pischetsrieder [24], tác gi cho r c hình thành do ph n ng c a Lactose v i Na-acetyllysinyllysine hoc protein Khi lactoza N v i α acetyllysine trong mt
Trang 20Việ n Công Ngh Sinh H c và Công Ngh ệ ọ ệ Thự c Ph m ẩ Đạ i H c Bách Khoa Hà N i ọ ộ
20
chng h n -lactoglobulin, s n ph m t o thành là AR K t AR c t o thành sau khi gia nhi t trong m t th i gian ngn, tác gi cho AR r ng là s n ph m
m i t m quan tr ng cho ph n ng có th có Maillard trong quá trình ch bi n s a [18]
o sát phn ng t o
AR gia Lactose và Butylamin các d i nhi khác nhau, k t qu c phn
ng x y ra 100 0C tc sn ph m h p th tia cc tím c = 320nm [38]
Hình 1.8 Quá trình hình thành Aminoreductone theo Shimamura, 2000
CH OH2OH
O O
HC NHR
C OH C
hexuloza
Trang 21dehydro-4-deoxy-3-Các nhà khoa hu r t quan tâm t hình thành Aminoreductone Vào Trang cùng c ng s n hành m t nghiên c u lti m sng t
hnh th nh c a AR trong ph n ng Maillard ca lactose M c ch ca nghiên c u n y l l m s ng t hnh thnh ca AR, m t ch s quan trng
c t nh m c phn ng Maillard ca cc hp ch t lactoza v amin S d ng
mô hình m u lactoza v butylamin, c c dung d ch m u c a lactoza v protein s a, v sa N chng minh r ng D- c gi i ph ng cng mt l
t o thnh ca i ta thy r ng m c a ph n ng Maillard v phân hy lactose trong qu trnh gia nhi t ph thuc ch t ch v t l n ca nhm amin / lactose trong cc dung d ch m u [45 ]
Pischetsrieder (1998) v Severin (1995), Shimamura (2002, 2004) cho rng D-galactoza (Gal) c th c sinh ra trong sut qu trnh h nh th nh AR Gal là
m t trong nh ng s n ph m chính c a s phân h y lactoza trong th i gian gia nhi t [45]
Hình 1.9 Sơ đồ phan ưng cua lactoza va hợp chất có chứa nhóm amin.
Trang 22Việ n Công Ngh Sinh H c và Công Ngh ệ ọ ệ Thự c Ph m ẩ Đạ i H c Bách Khoa Hà N i ọ ộ
c áp d ng trong các nhà máy ch bi n s a Nh t B n vì nh c tính t i gian nhanh so v i nh ng
n thng hydromethylfufural,
óm nghiên c u c cpháp th nghi m XTT là d a trên kh oxy hóa c a XTT do s hình thành
c a AR trong quá trình gia nhi ng trong vinh
m gia nhi t c a s n ph m, nghiên c u v c tính ch thành
m tài quan tri vi các nhà s n xu t th c phm [8]
Tomoko Shimamura c ng cc c ng s xut m ph x nh kh l sa nhi siêu cao (UHT) làm m - -gi [1[(phenylamino)carbonyl]-3,4-tetra-zolium]bis(4-methoxy-6-nitro)benzensulfonic
m nh gi m ca phn ng Maillard So snh vi c p bo c ng h nh
Trang 23cng c th p d c tnh m x l nhi t ca cc lo i th c phm khc Tuy nhiên, tác nhm XTT
Trang 24Việ n Công Ngh Sinh H c và Công Ngh ệ ọ ệ Thự c Ph m ẩ Đạ i H c Bách Khoa Hà N i ọ ộ
24
c hình thành sau m t th i gian gia nhi t ng n, nên AR là ch s
r t quan tr nh m ph n x lý nhit trong s n xu t th c ph m, vì v y vi c nghiên c u v c tính c a h p ch t này r t
c m i quan tâm
1.2.3 Các đặ c tính c a Aminoreductone ủ
B ng nh ng n l c nghiên c u chuyên sâu v ph n ng Maillard trong s n
xut thc phc bit là trong công ngh ch bi n s a và các s n ph m t s ch t o thành AR trong ph n c làm sáng t ng th i
bic tính ch[27] hi n các ho t tính ch t tính ch ng oxi hóa, ho t tính ch ng cao huy t
áp [14], o v i tác d ng c a ánh sáng [46] Chính vì l thi t r ng AR có th có kh ng t i m t s
Trang 25vi khu n gây b nh Trong n l c tìm ki m các ngu n thay th cho thu c kháng sinh
và làm sáng t c tính cha AR
1.2.4 Các nghiên c u v ứ ề các đặ c tính c a s n ph m c a ph ủ ả ẩ ủ ả n ứ ng Maillard và
ho ạ t tính kháng vi sinh v t củ ả ậ a s n ph m ph ứng Maillard ẩ ả n
AR là sn ph
cht ch th c a quá trình gia nhi t Tuy nhiên, trong nghiên c u v c tính
cha sn ph m ph n ng Maillard, nhi u nhà khoa h c mi ch c n các tác dng ca sn ph m hìn n cu i c a ph n ng -
Melanoidin Nhóm nghiên c u c u tiên công b ho t tính kháng khu n c a sn ph m ph n ng Maillard [12]
José A Rufián-Henares ch ng minh melanoidins hình thành n cui cùng c a ph n ng Maillard có m t s c tính ch
ch t ch ng oxy hóa, các ho ng kháng khu n và ch ng cao huy t áp Tác gi cho rng màu sc ca melanoidins không n nh ng ho t tính này [14]
K ti a u c José A Rufián-Henares
chng minh E.coli và S.aureus
Trang 26Việ n Công Ngh Sinh H c và Công Ngh ệ ọ ệ Thự c Ph m ẩ Đạ i H c Bách Khoa Hà N i ọ ộ
phá v màng t bào Ho ng kháng khu n c a melanoidins
i v i m t lo i vi khu n gây b nh Gram tham âm chi u ( Escherichia coli ) Có kh
p vào các quá trình sinh t ng h p, ch ng h c ch v n chuy n các ch ng [16]
Nghiên c u thu nh c cho th y AR có kh c ch vi khu dày Helicobacter pylori [44] T t c các ch u th hi n tính nh y c m v i
0,5-giá qua kh n t c th c hi n vi b i s cchng minh r ng kh a AR l ng k so v i melanoidin h nh th n n cui ca phn
gi tr n H.pylori gây b nh trong d d [y 44]
Theo tc gi Trang và c ng s - AR c kh chng l i các vi khu n gây b nh Staphylococcus aureus ng methicillin (MRSA) kh[43] Kho st ny cho th y AR có kh c ch s ng ca tt c 51
Trang 27chng phân l p không phân bi t gi a chng có kh y
cm vi kháng sinh Giá tr MIC ARc a dao ng t 13 n 26 mM Kh dit khu n c a AR i n AR là i b b
s c a MIC S a AR và các thung s d u
tr b nh nhi m khu n gây ra b vi khu n Gram (+) và Gram (-), ch ng h n i
amikacin, ciprofloxacin , imipenem và c ki m tra K t qu là ,
AR không ng t i ho t ng c a các kháng sinh ch ng l i 12 ch ng phân
l p c la chn và cho y kh th c nâng cao rõ r khi AR t
kt h thup v i c kháng sinh a, ho t tính c a AR ng vi
Amikacin, m kháng sinh t c s d u tr các b nh nhi m
khu n K t qu nghiên cu cho th AR có th là t tác nhâny r ng m kháng khu n t nhiên hình thành trong thc ph ch m bi n nhi t v i nhi u l i ích v s c khe và có
n trong ngành y [44]
Ma tác gi Trang và c ng s kh kháng khu n c a AR ch ng l i m t s vi khu n gây b nh nh y c m, kháng kháng
Pseudomonas aeruginosa (PA), ch ng Pseudomonas aeruginosa (MRDP) kháng thuc Kt qu kim tra thech cho thy
AR c ch 8 ch ng gây b nh (PA 1-4, MRDP, EC, MSSA và MRSA) Ho t tính
cc so sánh vng c a kháng sinh (Amikacin,
ciprofloxacin ,imipenem và levofloxacin )[34] Nhng nghiên c u này s p t ti c
c m r ng cho nh ng lo i vi khu n gây b nh khác Hi u qu kháng khu n c a
AR gi ý r ng các lo i th c ph m có cha, các sn ph m t s a, các
s n ph m b sung AR có th là ngu n th c ph m h a hn và có hi u qu h u tr tr b ng kháng sinh Sau khi làm sáng t c tính c a h p ch t hình thành trong
ph n ng Maillard, nghiên c u này s g i ý cho các nhà s n xu t th c ph a m l
chu ki n ch bi n thích h không ch c sn ph m v i ch ng
ng s hình thành các h p ch t có l i trong th c ph m [42]
Trang 28Việ n Công Ngh Sinh H c và Công Ngh ệ ọ ệ Thự c Ph m ẩ Đạ i H c Bách Khoa Hà N i ọ ộ
L monocytogenes ng b ng roi nhi phòng 20-250i không
t ng h p roi nhi 370C H u h t các vi khu n kém phát tri n khi nhi t
gi m xu i 40CL.monocytogenes v n t n t i c nhit
-70C) t c là bao g m c d i nhi b o qu n l nh, nhi 30-370C
vi khu n phát tri n m nh nh t Thi gian phát tri n trung bình c a L monocytogenes 40C là 43 gi , 10 0C là 6,6 gi và 37 0C là 1,1 gi , nhi t
i 00C ch làm ch m s phát tri n c a L monocytogenes. pH thích h p cho s phát tri n c a L monocytogenes là 7,0 tuy nhiên nó có th phát tri n v i pH bi n
ng t 5,6 t i 9,6 [31]
Listeria monocytogenes
Trang 291.3.2 Phân lo i ạ
Chi Listeria bao g m 6 loài khác nhau ( L monocyt ogenes, L ivanovii, L innocua, L welshimeri, L seeligeri, và L grayi ) C L ivanovii và L monocytogenes u gây b nh chu có L monocytogenes luôn liên
n b nh c i [36]
1.3.3 L ch s ị ử
L monocytogenes c p t i l u tiên b
da trên nghiên c u v ng h p t t ngt tr nh , lúc i vi khu n là Monocytogenes i tên thành chi Listeria
1940 [4]
L monocytogenes mnh nguyên do b nh nhân
b lây nhi m t ng th c ph m M t bùng phát b nh Listeriosis Halifax, Nova Scotia bao gng h i t vong, ch y u
là ph n mang thai và tr nh là n vi c tiêu th xà lách tr n ch a b p c nhi m L monocytogenes t vi c bón phân c u
K t ng h p ng c th c ph m L monocytogenes c báo cáo,
và L monocytogenes c công nh n r ng gây
b nh trong ngành công nghi p th c phm [4]
1.3.4 Ngu n lây nhi m ồ ễ
L.monocytogenes t n t i kh ng nên r t nhi u kh lây nhi m vào th c ph m.[31] Vi khu n có th ng t ng v t hoang hay
t tr c th i, th c v t L
monocytogenes c tìm th t và th c v t cho th y th c ph m d dàng
Trang 30Việ n Công Ngh Sinh H c và Công Ngh ệ ọ ệ Thự c Ph m ẩ Đạ i H c Bách Khoa Hà N i ọ ộ
30
nhi m và lan r ng b ng v t s o này, vi i ti p xúc
v i vi khu n là hoàn toàn không tránh kh i
1.3.5 Ảnh hưở ng tới người và thự c ph m ẩ
L monocytogenes là m t vi khu n gây b nh nghiêm tr ng t n t c trong
u ki n kh c nghi t vì v y vi c lây nhi nên d dàng ng
Trang 31Tiêu chu n v L monocytogenes trong th c ph c Châu Âu,
M là 0 CFU/25g (ml) Vit Nam, theo C c An toàn V sinh th c ph m (7/2006), tiêu chu n v L monocytogenes c bao g m trong ch g có vi sinh vt gây bL monocytogenes c ki m soát trong tiêu chu n ngành th y s i v i th y h i xu t kh u sang châu Âu và M Khoa h c và Công ngh hai Tiêu chu n Qu c Gia là TCVN 7700- 1:2007 (ISO 11290-1:1996) và TCVN 7700-2:2007 (ISO 11290- phát
h p s gây ng t i s c kh c và các nhà công ngh hi n t i không ng ng tìm ki m nh ng h p ch t thay th c mà có tác
dt ngu n t ngu n g c t nhiên nh m m c tiêu ng d ng s n
Trang 32Việ n Công Ngh Sinh H c và Công Ngh ệ ọ ệ Thự c Ph m ẩ Đạ i H c Bách Khoa Hà N i ọ ộ
tài c a tôi là
Nghiên c u kh ứ ả năng kháng khuẩ n c a Aminoreductone ủ
v i các ch ng Listeria monocytogenes phân l p t ớ ủ ậ ừ thự c ph m ẩ c th nghi m trên 30 chng phân l p có ngu n g c t th c ph m
n hành theo trình t Quá trình nghiên cc ti
1 Kh o sát kh c ch vi khu n Listeria monocytogenes c a AR
nh n c ch t i thi u c a AR v i vi khu n Listeria monocytogenes
nh kh t khu n c a AR v i vi khu n Listeria monocytogenes
4 So sánh kh t Listeria monocytogenes c ng nuôi c y
ng th c ph m (s a)
Trang 33CHƯƠNG 2 : VẬ T LI ỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨ U
2.1 V ậ t liệ u nghiên c u ứ
2.1.1 Đối tượ ng nghiên c u ứ
a Aminoreductone (AR)
c tách chi t t ph n ng gi pháp nghiên c u c Shimamura [37] a
Trang 34Việ n Công Ngh Sinh H c và Công Ngh ệ ọ ệ Thự c Ph m ẩ Đạ i H c Bách Khoa Hà N i ọ ộ
Trang 35Thit b cô quay
chân không Rotavapor R-215 Buchi Th
4
T nuôi c y l c n
Taitec corporation - Nht Bn
Trang 36Việ n Công Ngh Sinh H c và Công Ngh ệ ọ ệ Thự c Ph m ẩ Đạ i H c Bách Khoa Hà N i ọ ộ
36
Ice Flaker
10 Máy khu y t SP131320-33 Thermo, Malaysia
11 Máy block heater MS 401186 Taipec, Nh t B n
100µl-1000µl,1 Que c ng nghi m, giá c m eppendoff, h u típ các lo u típ 10 µl , 200ml, 1000ml
- Cân phân tích, thìa cân, con quay t
b Hóa chất
- Môi tr Mueller Hinton (MHB) Becton, Dickinson (Mng - )
- Lactoza monohydrat Sigma, M
- n-Butylamine,
- Th - ch aga
