Trang 1 TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM HÀ NỘI 2 KHOA SINH - KTNN --- TRẦN THỊ HƯỜNG NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG GIẢI PHÓNG THUỐC CỦA VẬT LIỆU CELLULOSE NẠP DICLOFENAC NATRI TẠO TỪ GLUCONACETOBACTER X
TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM HÀ NỘI KHOA SINH - KTNN - TRẦN THỊ HƯỜNG NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG GIẢI PHÓNG THUỐC CỦA VẬT LIỆU CELLULOSE NẠP DICLOFENAC NATRI TẠO TỪ GLUCONACETOBACTER XYLINUS NUÔI CẤY TRONG MÔI TRƯỜNG NƯỚC VO GẠO Khóa luận tốt nghiệp đại học KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Chuyên ngành : Sinh lý học người động vật Hà Nội, 5/2019 TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM HÀ NỘI KHOA SINH - KTNN - TRẦN THỊ HƯỜNG NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG GIẢI PHÓNG THUỐC CỦA VẬT LIỆU CELLULOSE NẠP DICLOFENAC NATRI TẠO TỪ GLUCONACETOBACTER XYLINUS NUÔI CẤY TRONG MƠI TRƯỜNG NƯỚC VO GẠO Khóa luận tốt nghiệp đại học KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Chuyên ngành : Sinh lý học người động vật Người hướng dẫn ThS Phạm Thị Kim Dung Hà Nội, 5/2019 LỜI CẢM ƠN Thành công nỗ lực thân ủng hộ, giúp đỡ người cho dù trực tiếp hay gián tiếp, hay nhiều Viện Nghiên Cứu Khoa học Ứng dụng-Trường Đại học Sư phạm Hà Nội nơi em chọn để hồn thành chương trình học, thực nghiên cứu, hồn thiện khóa luận tốt nghiệp với đề tài: “Nghiên cứu khả giải phóng thuốc vật liệu cellulose nạp Diclofenac Natri tạo từ glconacetobacter xylinus nuôi cấy môi trường nước vo gạo” Em xin gửi lời cảm ơn Th.S Phạm Thị Kim Dung, người tận tình hướng dẫn em suốt trình nghiên cứu thực đề tài khóa luận Em xin gửi lời cảm ơn tới thầy cô khoa Sinh-KTNN thầy cô Viện Nghiên cứu Khoa học Ứng dụng-Trường Đại học Sư phạm Hà Nội tạo điều kiện thuận lợi giúp đỡ em hồn thành khóa luận tốt nghiệp Em xin bày tỏ lịng biết ơn vơ hạn tới gia đình, bạn bè thân u chăm sóc khích lệ em thời gian nghiên cứu Khóa luận tốt nghiệp đại học Bài khóa luận tốt nghiệp em cịn nhiều thiếu sót, em mong nhận đóng góp, nhận xét, góp ý q thầy, bạn để khóa luận em hồn chỉnh Em xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, Ngày 20 tháng 05 năm 2019 Sinh viên Trần Thị Hường LỜI CAM ĐOAN Em xin cam đoan viết khóa luận tốt nghiệp với đề tài: “Nghiên cứu khả giải phóng thuốc vật liệu cellulose nạp Diclofenac Natri tạo từ Glconacetobacter Xylinus nuôi cấy môi trường nước vo gạo” thật, kết nghiên cứu cá nhân em, không chép, khơng trùng lặp với đề tài Trong q trình viết luận văn tốt nghiệp em có tham khảo, trích dẫn số tài liệu có nguồn gốc rõ ràng, hướng dẫn Th.S Phạm Thị Kim Dung Nếu đề tài có vấn đề em xin hoàn toàn chịu trách nhiệm Hà Nội, Ngày 20 Tháng 05 Năm 2019 Sinh viên Khóa luận tốt nghiệpTrần đại học Thị Hường DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT G.xylium Gluconacetobacter xylinus OD Mật độ quang phổ TDKD Tác dụng kéo dài VLC Vật liệu cellulose VNCKH&UD Viện Nghiên cứu Khoa học Ứng dụng Khóa luận tốt nghiệp đại học MỤC LỤC MỞ ĐẦU 1 Lý chọn đề tài Mục đích nghiên cứu Nội dung nghiên cứu Ý nghĩa khoa học ý nghĩa thực tiễn Tính đề tài PHẦN NỘI DUNG CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan đối tượng, lĩnh vực nghiên cứu 1.1.1 Tổng quan vật liệu cellulose tạo từ gluconacetobacter xylinus 1.1.2 Tổng quan thuốc Diclofenac Natri 1.1.2.1 Công thức hoá học Khóa luận tốt nghiệp đại học 1.1.2.2 Tính chất hóa lý 1.1.2.3 Độ ổn định 1.1.2.4 Hấp thụ 1.1.2.5 Tác dụng định 1.2 Tổng quan tình hình nghiên cứu nước 1.2.1 Tình hình nghiên cứu nước 1.2.2 Tình hình nghiên cứu nước CHƯƠNG ĐỐI TƯỢNG, PHẠM VI, PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Đối tượng 2.1.1 Đối tượng 2.1.2 Nguyên vật liệu nghiên cứu 2.1.3 Thiết bị dụng cụ 2.1.3.1 Thiết bị 2.2 Phạm vi nghiên cứu 2.3 Phương pháp nghiên cứu 2.3.1 Bố trí thí nghiệm 2.3.2 Chuẩn bị màng BC 2.3.3 Xử lí kiểm tra độ tinh khiết VLC 11 2.3.4 Phương pháp dựng đường chuẩn 11 2.3.5 Tạo VLC nạp Diclofenac Natri 14 2.3.6 Pha dung dịch đệm 14 2.3.7 Xác định lượng thuốc giải phóng VLC nạp thuốc Diclofenac Natri nuôi cấy môi trường nước vo gạo 15 2.3.8 Phương pháp thống kê xử lí số liệu 16 CHƯƠNG KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 17 Khóa luận tốt nghiệp đại học 3.1 Tạo VLC nuôi cấy môi trường nước vo gạo 17 3.2 Màng tinh chế 18 3.3 Vật liệu cellulose nạp thuốc Diclofenac Natri 18 3.4 Xác định lượng thuốc Diclofenac natri giải phóng khỏi màng 18 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 29 TÀI LIỆU THAM KHẢO 30 DANH MỤC BẢNG Bảng 2.1 Vật liệu sử dụng nghiên cứu Bảng 2.2 Các thiết bị sử dụng nghiên cứu Bảng 2.3 Dụng cụ sử dụng nghiên cứu Bảng 2.4 Tạo VLC môi trường nuôi cấy nước vo gạo 10 Bảng 2.5 Mật độ quang_OD, dung dịch Diclofenac nồng độ khác (n=3) bước sóng 278nm 13 Bảng 3.1 Kết thu VLC 17 Bảng 3.2 Giá tri OD tiến hành giải phóng thuốc Diclofenac Natri thời điểm khác VLC chưa ép nước 20 Bảng 3.3 Giá trị OD tiến hành giải phóng thuốc Diclofenac Natri thời điểm khác VLC ép 50% nước 21 Bảng 3.4: Tỉ lệ giải phóng thuốc màng chưa ép nước môi trường pH khác khoảng thời gian khác nhau(%) (n=3) 24 Khóa luận tốt nghiệp đại học Bảng 3.5: Tỉ lệ giải phóng thuốc màng ép 50% nước môi trường pH khác khoảng thời gian khác nhau(%) (n=3) 25 DANH MỤC HÌNH Hình 1.1 Cấu trúc hóa học thuốc Diclofenac Natri Hình 2.1 Sơ đồ trình tạo Vật liệu cellulose thơ 10 Hình 2.2 Sơ đồ chu trình tinh chế VLC 11 Hình 2.3 Phương trình đường chuẩn Diclofenac bước sóng 278nm 13 Hình 2.4 Pha dung dịch đệm 15 Hình 2.5 Máy khuấy từ nhiệt tủ ấm 16 Hình 3.1 Tạo VLC nuôi cấy môi trường nước vo gạo 17 Hình 3.2 Rung siêu âm 18 Hình 3.3 Máy xác định lượng thuốc giải phóng 19 Hình 3.4 Mẫu rút để đo quang phổ 19 Hình 3.5 Biểu đồ so sánh mật độ quang phổ lượng thuốc giải phóng màng 0,5cm 1cm chưa ép nước môi trường pH khác (n=3) 22 Khóa luận tốt nghiệp đại học Hình 3.6 Biểu đồ so sánh mật độ quang phổ lượng thuốc giải phóng màng 0,5cm 1cm ép nước mơi trường pH khác (n=3) 22 Hình 3.7 Tỉ lệ giải phóng thuốc nồng độ pH khác thời điểm khác màng gạo chưa ép nước( % ) (n=3) 26 Hình 3.8 Tỉ lệ giải phóng thuốc nồng độ pH khác thời điểm khác màng gạo ép 50% nước( % ) (n=3) 27 Hình 3.9 Tỉ lệ giải phóng thuốc nồng độ pH khác thời điểm 24 màng chưa ép màng ép 50% nước (% ) (n=3) 28 MỞ ĐẦU Lý chọn đề tài Vật liệu cellulose (VLC) có giá thành thấp tạo nên từ nguyên liệu dễ kiếm, rẻ sản xuất quy mơ cơng nghiệp VLC có cấu trúc hóa học giống cellulose thực vật có số tính chất hóa lí đặc biệt như: độ tinh lớn, độ kết tinh độ bền học cao, khả đàn hồi tốt, phân hủy sinh học, tái chế, bề mặt tiếp xúc lớn gỗ thường, khơng độc khơng gây dị ứng, có khả chịu nhiệt tốt đặc biệt khả cản khuẩn Do tính chất tương đối đặc biệt mà màng cellulose vi khuẩn ứng dụng nhiều lĩnh vực như: thực phẩm, công nghiệp, mĩ phẩm đặc biệt y học [3, 4, 8] Việc nghiên cứu ứng dụng VLC nước quan tâm có số thành tựu định VLC có tẩm dầu mù u thử nghiệm thỏ gây bỏng làm màng trị bỏng giúp vết thương mau lành ngăn nhiễm trùng kết nghiên cứu Trường Đại học Y Dược TP Hồ Chí Minh Ngồi ra, VLC cịn ứng dụng trong: phẫu thuật, ghép mơ, quan [9] Khóa luận tốt nghiệp đại học Diclofenac dẫn chất acid phenylacetic thuốc chống viêm không steroid Diclofenac chất ức chế mạnh hoạt tính cyclooxygenase, làm giảm đáng kể tạo thành prostaglandin, prostacyclin thromboxan chất trung gian trình viêm Diclofenac điều hòa đường lipoxygenase kết tụ tiểu cầu Thuốc có tác dụng chống viêm, giảm đau giảm sốt mạnh [5] Diclofenac Natri đánh giá có tác động giảm đau mạnh đau từ trung bình trầm trọng, viêm chấn thương, can thiệp phẫu thuật, thuốc nhanh chóng làm giảm chứng đau tự nhiên, đau vận động, giảm phù nề viêm phù nề vết thương [5] Tuy nhiên, dùng Diclofenac Natri gây tác dụng không mong muốn đau đầu, đau vùng thượng vị, chán ăn, khó tiêu, trướng bụng, bồn chồn, buồn nôn, nôn, ỉa chảy, gan tăng transaminase, ù tai; có gặp trường hợp phù, dị ừng, đau bụng, chảy máu đường tiêu hóa,