Trang 1 TRƢỜNG ĐẠI HỌC SƢ PHẠM HÀ NỘI 2 KHOA SINH - KTNN ====== HOÀNG THỊ QUỲNH NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG HẤP THỤ THUỐC NEOMYCIN SULFATE CỦA VẬT LIỆU CELLULOSE TẠO RA TỪ GLUCONACETOBACTER X
TRƢỜNG ĐẠI HỌC SƢ PHẠM HÀ NỘI KHOA SINH - KTNN ====== HOÀNG THỊ QUỲNH NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG HẤP THỤ THUỐC NEOMYCIN SULFATE CỦA VẬT LIỆU CELLULOSE TẠO RA TỪ GLUCONACETOBACTER XYLINUS NUÔI CẤY TRONG MÔI TRƢỜNG NƢỚC DỪA GIÀ Khóa luận tốt nghiệp đại học KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Chuyên ngành: Sinh lý học ngƣời động vật HÀ NỘI - 2019 TRƢỜNG ĐẠI HỌC SƢ PHẠM HÀ NỘI KHOA SINH - KTNN ====== HOÀNG THỊ QUỲNH NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG HẤP THỤ THUỐC NEOMYCIN SULFATE CỦA VẬT LIỆU CELLULOSE TẠO RA TỪ GLUCONACETOBACTER XYLINUS NI CẤY TRONG MƠItốt TRƢỜNG NƢỚC GIÀ Khóa luận nghiệp đạiDỪA học KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Chuyên ngành: Sinh lý học ngƣời động vật Ngƣời hƣớng dẫn khoa học TS CAO BÁ CƢỜNG HÀ NỘI – 2019 LỜI CẢM ƠN Với lòng biết ơn sâu sắc, em xin gửi lời cảm ơn chân thành tới thầy giáo Cao Bá Cƣờng, ngƣời thầy tận tình hƣớng dẫn, giúp đỡ em suốt trình thực khóa luận Em xin chân thành cảm ơn thầy, cô giáo khoa Sinh KTNN thầy cô Viện Nghiên cứu Khoa học Ứng dụng tạo điều kiện thuận lợi, giúp đỡ cho em trình làm thực nghiệm để em hồn thành khóa luận Cuối cùng, xin gửi lời cảm ơn tới gia đình, bạn bè ln bên cạnh động viên, giúp đỡ tơi suốt q trình học tập hồn thành khóa luận Do lần đầu em tham gia nghiên cứu khoa học, kiến thức hạn chế nên khơng tránh khỏi thiếu sót Em mong nhận đƣợc góp ý thầy bạn để khóa luận tốt nghiệp em đƣợc hoàn thiện Em xin chân thành cảm ơn! Khóa luận tốt nghiệp đạitháng học Hà Nội, năm 2019 Sinh viên Hồng Thị Quỳnh LỜI CAM ĐOAN Tơi xin cam đoan đề tài tơi thực dƣới hƣớng dẫn TS Cao Bá Cƣờng Tất số liệu đƣợc thu thập từ thực nghiệm, qua xử lý thống kê, khơng có số liệu chép hay bịa đặt, không trùng với kết cơng bố Những trích dẫn khóa luận lấy từ cơng bố thức có ghi rõ ràng Nếu sai tơi xin hồn tồn chịu trách nhiệm Hà Nội, tháng năm 2019 Sinh viên Hồng Thị Quỳnh Khóa luận tốt nghiệp đại học MỤC LỤC MỞ ĐẦU 1 Lý chọn đề tài Mục đích nghiên cứu Đối tƣợng phạm vi nghiên cứu Ý nghĩa khoa học thực tiễn NỘI DUNG CHƢƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Tổng quan vật liệu cellulose (VLC) 1.1.1 Vi khuẩn tổng hợp lên VLC 1.1.2 Môi trƣờng nuôi cấy G Xylinus 1.1.3 Cấu trúc VLC 1.1.4 Tính chất VLC 1.1.5 Ứng dụng VLC 1.2 Tình hình nghiên cứu VLC 1.2.1 Trên giới 1.2.2 Tại Việt Nam 1.3 Tổng quan NS 1.3.1 Công thức cấu tạo 1.3.2 Tính chất lí hóa 1.3.3 Dƣợc lý học dƣợc động học 1.3.4 Chỉ định chống định 1.4 Tình hình nghiên cứu NS 10 1.4.1 Trên giới 10 1.4.2 Tại Việt Nam 10 CHƢƠNG VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 11 2.1 Vật liệu nghiên cứu 11 2.1.1.Chủng vi khuẩn 11 2.1.2 Nguyên liệu hóa chất 11 2.1.3 Trang thiết bị 11 2.2 Phƣơng pháp nghiên cứu 11 Khóa luận tốt nghiệp đại học 2.2.1 Chuẩn bị VLC 11 2.2.2 Chế tạo VLC nạp NS 13 2.2.3 Phƣơng pháp xử lí thống kê 15 CHƢƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 16 3.1 Thu VLC tinh chế màng 16 3.1.1 Thu VLC từ môi trƣờng lên men 16 3.1.2 Tạo VLC tinh khiết 16 3.1.3 Phƣơng pháp đánh giá độ tinh khiết củaVLC 17 3.2 Phƣơng trình đƣờng chuẩn NS PBS (pH = 7,4) 18 3.3 Xác định lƣợng thuốc NS nạp vào VLC 19 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 24 TÀI LIỆU THAM KHẢO 25 Khóa luận tốt nghiệp đại học DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT VLC Vật liệu cellulose G.xylinus Gluconacetobacter xylinus NS Neomycin sulfate OD PBS Mật độ quang phổ Phosphate buffered saline S.fradiae Streptomyces fradiae Khóa luận tốt nghiệp đại học DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1: Giá trị dinh dƣỡng nƣớc dừa già 100g [9] Bảng 2.1 Thành phần môi trƣờng lên men thu VLC 12 Bảng 2.2 Môi trƣờng đệm PBS với pH = 7,4 13 Bảng 3.1 Mật độ quang dung dịch Neomycin sufate nồng độ (n = 3) 18 Bảng 3.2 Giá trị OD hấp thụ thuốc NS VLC (n = 3) 19 Bảng 3.3 Khối lƣợng, hiệu suất hấp thụ thuốc NS vào VLC(n=3) 20 Khóa luận tốt nghiệp đại học DANH MỤC HÌNH Hình 1.1 Cấu trúc hóa học VLC Hình 1.2 Cấu trúc VLC (Yamanaka et al, 2000) Hình 1.3 Cơng thức cấu tạo Neomycin sunfate [27] Hình 3.1 VLC ni cấy ngày 16 Hình 3.2.VLC thơ sau thu 16 Hình 3.3 VLC 0,5 cm đƣợc tinh chế 17 Hình 3.4 Thí nghiệm kiểm tra độ tinh khiết VLC 17 Hình 3.5 Phƣơng trình đƣờng chuẩn thuốc NS 18 Hình 3.6 VLC hấp thụ thuốc NS 19 Hình 3.7 Khối lƣợng thuốc NS hấp thụ vào VLC( 0,3cm) VLC(0,5cm) giờ, 1,5 giờ, 21 Khóa luận tốt nghiệp đại học Hình 3.8 Hiệu suất hấp thụ thuốc NS VLC(0,3cm) VLC(0,5cm) giờ, 1,5 giờ, 21 MỞ ĐẦU Lý chọn đề tài Ngày việc sử dụng vật liệu sinh học để ứng dụng lĩnh vực nhƣ: y học, mỹ phẩm, thực phẩm,…đang đƣợc nhà nghiên cứu khoa học nƣớc giới đặc biệt quan tâm Một vật liệu sinh học đƣợc nhà khoa học đặc biệt ý đến vật liệu cellulose (VLC) VLC đƣợc tổng hợp nhiều vi khuẩn, phải kể đến vi khuẩn Gluconacetobacter xylinus ( G.xylinus) – loại vi khuẩn có khả tạo VLC tốt VLC hợp chất tƣơng hợp sinh học, không độc hại, với cấu trúc siêu mịn, đặc tính học bền, dai, khả giữ ẩm cao nên có nhiều ứng dụng nhiều lĩnh vực nhƣ: công nghệ giấy, thực phẩm, y học, …[4] Trong y học, VLC đƣợc ứng dụng làm màng trị bỏng, mặt nạ dƣỡng da, mạch máu nhân tạo [4] Khơng vậy, VLC cịn có khả hấp thu thuốc, tăng tác dụng thuốc, hạn chế đƣợc tác dụng phụ thuốc Khóa luận tốt nghiệp đại học Để tạo VLC, G.xylinus nuôi cấy môi trƣờng nhƣ: nƣớc dừa già, rỉ đƣờng, dịch ép hoa quả, …Trong đề tài chọn nƣớc dừa già môi trƣờng nuôi cấy G.xylinus nƣớc dừa già chứa nhiều chất dinh dƣỡng cần thiết để nuôi cấy vi khuẩn G.xylinus Neomycin sunfate (NS) loại thuốc kháng sinh nhóm aminoglycoside Đƣợc sử dụng để điều trị nhiễm khuẩn da, ức chế vi khuẩn đƣờng ruột trƣớc phẫu thuật, điều trị hôn mê gan, nhiễm trùng ống tai ngồi, … NS hấp thụ qua đƣờng tiêu hóa kém, khoảng 97% lƣợng thuốc uống vào thể bị tiết dƣới dạng không đổi qua phân Kem NS điều trị bệnh viêm da có khả thẩm thấu qua da không cao đạt 45%, nhanh bị khô bề mặt da,…[1] Chính cần phải nghiên cứu hệ thống hấp thụ thuốc NS để giúp thuốc đƣợc hấp thụ cách tốt