Trang 1 TRƢỜNG ĐẠI HỌC SƢ PHẠM HÀ NỘI 2 KHOA SINH - KTNN ====== TRẦN THỊ ÁNH NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG GIẢI PHÓNG THUỐC CỦA VẬT LIỆU CELLULOSE NẠP NEOMYCIN SULFATE TẠO RA TỪ GLUCONACETOBA
TRƢỜNG ĐẠI HỌC SƢ PHẠM HÀ NỘI KHOA SINH - KTNN ====== TRẦN THỊ ÁNH NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG GIẢI PHÓNG THUỐC CỦA VẬT LIỆU CELLULOSE NẠP NEOMYCIN SULFATE TẠO RA TỪ GLUCONACETOBACTER XYLINUS Khóa luận tốt nghiệp đại họcNI CẤY TRONG MƠI TRƢỜNG CHUẨN KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Chuyên ngành: Sinh lý học ngƣời động vật Hà Nội, 2019 TRƢỜNG ĐẠI HỌC SƢ PHẠM HÀ NỘI KHOA SINH - KTNN ====== TRẦN THỊ ÁNH NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG GIẢI PHÓNG THUỐC CỦA VẬT LIỆU CELLULOSE NẠP NEOMYCIN SULFATE TẠO RA TỪ GLUCONACETOBACTER XYLINUS NUÔI CẤY TRONG MƠI TRƢỜNG CHUẨN Khóa luận tốt nghiệp đại học KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Chuyên ngành: Sinh lý học ngƣời động vật Ngƣời hƣớng dẫn: ThS Hà Thị Minh Tâm Hà Nội, 2019 LỜI CẢM ƠN Lời đầu tiên, em xin phép bày tỏ lòng biết ơn chân thành tới ThS Hà Thị Minh Tâm - người bên động viên hướng dẫn em nhiều thời gian vừa qua Em xin chân thành cảm ơn giảng viên thuộc Khoa Sinh KTNN thầy, cô Viện Nghiên cứu Khoa học Ứng dụng cung cấp cho em nhiều kiến thức tạo điều kiện thuận lợi, giúp đỡ em để em hồn thành khóa luận Và cuối cùng, khơng thể thiếu em xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới cha mẹ, người thân bạn bè - người bên cạnh chia sẻ, động viên giúp đỡ em suốt trình học tập thực nghiệm khóa luận Đây lần em tham gia nghiên cứu khoa học nên tránh khỏi hạn chế thiếu sót Vì vậy, em mong nhận góp ý chân thành quý thầy, cô bạn bè để khóa luận tốt nghiệp em hồn thiện Khóa luận tốt nghiệp đại học Em xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, ngày 20 tháng năm 2019 Sinh viên Trần Thị Ánh LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan khóa luận “Nghiên cứu khả giải phóng thuốc vật liệu cellulose nạp Neomycin Sulfate tạo từ Gluconacetobacter xylinus nuôi cấy môi trường chuẩn” tơi viết Các số liệu kết nghiên cứu hồn tồn khách quan, tơi thực nghiệm mà có khơng trùng lặp với kết cơng bố Những trích dẫn từ cơng bố trước có ghi rõ ràng Nếu sai tơi xin hồn tồn chịu trách nhiệm Hà Nội,ngày 20 tháng 05 năm 2019 Sinh viên Khóa luận tốt nghiệp đại học Trần Thị Ánh DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT STT Tên viết tắt Tên đầy đủ CNM Cao nấm men G xylinus Gluconacetobacter xylinus NS Neomycin Sulfate OD Mật độ quang phổ VLC Vật liệu cellulose Khóa luận tốt nghiệp đại học MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN DANH MỤC BẢNG DANH MỤC HÌNH MỞ ĐẦU 1 Lí chọn đề tài Mục đích nghiên cứu 3 Đối tượng phạm vi nghiên cứu Ý nghĩa khoa học ý nghĩa thực tiễn NỘI DUNG Chƣơng TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1.Vật liệu cellulose (VLC) vi sinh vật tổng hợp vật liệu cellulose 1.1.1.Vật liệu cellulose (VLC) 1.1.2 Vi sinh vật tổng hợp VLC Khóa luận tốt nghiệp đại học 1.1.3 Môi trường nuôi cấy G xylinus 1.2 Tổng quan thuốc Neomycin Sulfate (NS) 1.2.1 Công thức cấu tạo 1.2.2 Tính chất lý hóa 10 1.2.3 Dược lý dược động học 10 1.2.4 Chỉ định chống định 11 1.3 Tình hình nghiên cứu nước 12 1.3.1 Vật liệu cellulose (VLC) 12 1.3.2 Thuốc Neomycin Sulfate 13 Chƣơng VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 14 2.1 Vật liệu nghiên cứu 14 2.1.1 Hóa chất dung mơi sử dụng nghiên cứu 14 2.1.2 Thiết bị sử dụng nghiên cứu 14 2.1.3 Vật liệu làm môi trường nuôi cấy vi sinh vật tạo VLC 14 2.2 Phương pháp nghiên cứu 14 2.2.1 Chuẩn bị VLC 14 2.2.2 Chế tạo VLC nạp thuốc NS 17 2.2.3 Xác định lượng thuốc giải phóng thơng qua hệ thống thiết kế 19 2.2.4 Xử lý thống kê 20 Chƣơng KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 21 3.1 Thu VLC thô tinh chế VLC 21 3.1.1 Thu VLC thô 21 3.1.2 Tinh chế VLC 21 3.2 Xác định lượng thuốc NS nạp vào VLC 23 3.3 Xác định tỉ lệ thuốc NS giải phóng từ hệ thống thiết kế 23 3.3.1 Mật độ quang NS tiến hành giải phóng thuốc từ hệ thống thiết kế 23 3.3.2 Tỉ lệ giải phóng NS VLC hệ thống thiết kế 26 Khóa luận tốt nghiệp đại học KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 29 TÀI LIỆU THAM KHẢO 30 DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1 Ứng dụng VLC Bảng 1.2 Thành phần môi trường nuôi cấy thu VLC Bảng 1.3 Thành phần dinh dưỡng cao nấm men Bảng 2.1 Thành phần môi trường chuẩn tạo VLC 15 Bảng 2.2 Môi trường đệm pH = 7,4 17 Bảng 2.3 Mật độ quang dung dịch NS nồng độ (n = 3) 18 Bảng 3.1 Lượng thuốc NS hấp thụ vào VLC (n = 3) 23 Bảng 3.2 Mật độ quang phổ tiến hành giải phóng thuốc từ hệ thống thiết kế (n = 3) 25 Bảng 3.3 Tỉ lệ giải phóng thuốc NS từ VLC hệ thống thiết kế (n=3) 26 Khóa luận tốt nghiệp đại học DANH MỤC HÌNH Hình 1.1 Cấu trúc VLC Hình 1.2 Cấu trúc sợi cellulose VLC Hình 1.3 Cơng thức cấu tạo NS 10 Hình 2.1 Quy trình tinh chế VLC 16 Hình 2.2 Phương trình đường chuẩn NS môi trường pH = 7,4 18 Hình 3.1 VLC thơ lên men từ mơi trường chuẩn 21 Hình 3.2 VLC sau tinh chế 22 Hình 3.3 Thí nghiệm kiểm tra diện protein màng 22 Hình 3.4 Hiệu chỉnh pH 23 Hình 3.5 Dùng máy khuấy từ gia nhiệt, tốc độ khuấy 50 vòng/phút, nhiệt độ 37 ± 0,50C 24 Hình 3.6 Các mẫu rút để đo quang phổ 24 Hình 3.7 Giá trị OD trung bình giải phóng thuốc NS VLC 25 Khóa luận tốt nghiệp đại học Hình 3.8 Tỷ lệ giải phóng thuốc NS VLC 27 MỞ ĐẦU Lí chọn đề tài Trong nhiều năm trở lại đây, nhà nghiên cứu đặc biệt quan tâm tới việc ứng dụng vật liệu sinh học đời sống, chăm sóc sức khỏe Trong quan tâm trọng vật liệu cellulose (VLC) Vật liệu cellulose (VLC) sản phẩm vi khuẩn tổng hợp ra, ví dụ chủng Gluconacetobacter xylinus (G xylinus) Chúng gồm phân tử glucose liên kết với liên kết β - 1,4 glucorit (rất giống với cellulose thực vật), nhiên, VLC không chứa hợp chất cao phân tử peptin, hemicellulose, ligin sáp nến Vì thế, ngồi độ dẻo dai, bền chắc, độ đàn hồi cao, khả chịu nhiệt tốt, chúng cịn có đặc tính vượt trội như: độ tinh khiết cao, có khả hút nước cao trạng thái ẩm phục hồi, tái chế hay phân hủy hoàn toàn Trong y học, chúng quan tâm có bề mặt tiếp xúc lớn gỗ bình thường, khơng độc, khơng gây dị ứng đặc biệt khả cản khuẩn [4, 6] Ngồi VLC cịn có tác dụng giữ thuốc kéo dài thời gian giải phóng thuốc Do vậy, VLC coi hướng đường tìm nguồn nguyên liệu Khóa luận tốt nghiệp đại học Trên giới, VLC ứng dụng rộng rãi sống, ví dụ như: dùng VLC làm thực phẩm, màng lọc nước, dùng làm chất mang đặc biệt cho pin lượng cho tế bào cịn làm môi trường chất sinh học, [13] Đặc biệt y học, VLC dùng làm chất bọc vật liệu vận tải thuốc sử dụng ngồi da, làm da tạm thời q trình điều trị loét da, trị bỏng làm mạch máu nhân tạo điều trị bệnh tim mạch Và lĩnh vực làm đẹp, VLC dùng làm mặt nạ dưỡng da cho người [8, 13] Ở Việt Nam, việc dùng VLC nghiên cứu ứng dụng chưa phổ biến Các nghiên cứu ứng dụng dừng lại bước đầu, chưa sâu vào bước Các nhà khoa học ni cấy thu VLC từ nhiều loại môi trường Tuy nhiên, giới, VLC lên men từ môi trường chuẩn