Trang 1 Tr-ờng Đại Học Bách Khoa Hà Nội ---o0o--- Luận Văn Thạc sĩ Khoa học Ngành: cơng nghệ hố học Nghiên cứu thành phần hố học và hoạt tính sinh học của cây bách bệnh Eurycoma longifol
Bộ giáo dục đào tạo Tr-ờng Đại Học Bách Khoa Hµ Néi -o0o - Luận Văn Thạc sĩ Khoa học Ngành: công nghệ hoá học Nghiên cứu thành phần hoá học hoạt tính sinh học bách bệnh (Eurycoma longifolia Jack) Nguyễn Văn Thông Hà nội - 2008 Tai ngay!!! Ban co the xoa dong chu nay!!! 17057205136941000000 Bé gi¸o dục đào tạo Tr-ờng Đại Học Bách Khoa Hà Néi -o0o - Luận Văn Thạc sĩ Khoa học Nghiên cứu thành phần hoá học hoạt tính sinh học bách bệnh (Eurycoma longifolia Jack) Ngành : Công nghệ hoá học M· sè : Ng-êi h-íng dÉn khoa häc: PGS.TS TrÇn Thu H-ơng Học viên: Nguyễn văn thông Hà nội - 2008 Mở đầu Việt Nam n-ớc nằm vïng khÝ hËu nhiƯt ®íi giã mïa, ®é Èm cao Với điều kiện thiên nhiên thuận lợi nh- nên hệ thực vật Việt Nam phát triển đa dạng phong phú với khoảng 12.000 loài thực vật bậc cao, không kể đến loài tảo, rêu nấm Nhiều loài số từ xa x-a đến đà đ-ợc sử dụng y học cổ truyền mục đích khác phục vụ đời sống nhân dân ta Nghiên cứu hợp chất có nguồn gốc thiên nhiên có hoạt tính sinh học cao để ứng dụng y học, nông nghiệp mục đích khác đời sống ng-ời nhiệm vụ quan trọng đà đ-ợc nhµ khoa häc vµ ngoµi n-íc hÕt søc quan tâm Với việc phát nhiều chất có hoạt tính sinh học có giá trị từ thiên nhiên, nhà khoa học đà có đóng góp đáng kể việc tạo loại thuốc điều trị bệnh nhiệt đới bệnh hiểm nghèo nh-: Penicillin (1941); Artermisinin (những năm 1970 để kéo dài tuổi thọ nâng cao chất l-ợng sống ng-ời Thiên nhiên không nguồn nguyên liệu cung cấp hoạt chất quí để tạo biệt d-ợc mà cung cấp chất dẫn đ-ờng để tổng hợp loại thuốc Cũng từ tiền chất đ-ợc phân lập từ thiên nhiên, nhà khoa học đà chuyển hoá chúng thành hoạt chất có khả trị bệnh cao Việt Nam nằm vực nhiệt đới có khí hậu nóng ẩm nên hệ thực vật phong phú đa dạng Nhiệt độ trung bình hàng năm từ 150C đến 270C, l-ợng m-a lớn (trung bình từ 1200 đến 1800 mm), độ ẩm t-ơng đối cao (trên 80%) Điều kiện nh- thuận lợi cho phát triển loài thực vật nói chung d-ợc liệu nói riêng [2] Theo số liệu thống kê gần đây, hệ thực vật Việt Nam có khoảng 10500 lài, có khoảng 3200 loài đ-ợc sử dụng y học dân tộc Theo dự đoán nhà khoa học, hệ thực vật Việt Nam có khoảng 12000 loài có 4000 loài đ-ợc nhân dân ta dùng làm thảo d-ợc hệ thực vật phong phú giới Các hợp chất thiên nhiên có hoạt tính sinh học đà đóng vai trò quan trọng đời sống ng-ời Các hợp chất thiên nhiên đ-ợc dùng làm thuốc chữa bệnh, thuốc bảo vệ thực vật nh- nguyên liệu cho công nghiệp thực phẩm, h-ơng liệu mỹ phẩm Đặc biệt lĩnh vực làm thuốc, nguồn d-ợc liệu phong phú đa dạng đà cung cấp cho nghành d-ợc n-ớc khối l-ợng nguyên liệu lớn để chữa bệnh nh- xuất có giá trị kinh tế cao Về lâu dài phát triển d-ợc phẩm mới, sản phẩm thiên nhiên có vai trò quan trọng, nhiều chất chất dẫn đ-ờng cho việc tổng hợp sản phẩm mới, dùng làm chất dò sinh hoá để làm sáng tỏ nguyên lý d-ợc lý ng-ời Theo h-ớng nghiên cứu trên, mục tiêu luận văn tập trung nghiên cứu, phân lập hợp chất có Bách bệnh (Eurycoma longifolia Jack) có hoạt tính sinh học cao nhằm tạo sở cho nghiên cứu lĩnh vực tìm kiếm ph-ơng pháp thuốc nh- giải thích đ-ợc tác dụng chữa bệnh thuốc cổ truyền Nhiệm vụ luận văn Chiết tách phân lập số hợp chất từ Bách bệnh (Eurycoma longifolia Jack) Xác định cấu trúc hoá học hợp chất phân lập từ Bách bệnh (Eurycoma longifolia Jack) Nghiên cứu hoạt tính sinh học dịch chiết metanol Bách bệnh (Eurycoma longifolia Jack) Ch-ơng 1: Tổng quan 1.1.Vài nét Bách bệnh (Eurycoma longifolia Jack) 1.1.1 Giới thiƯu Tªn khoa häc: Eurycoma longifolia Jack thc hä Thanh thất (Simaroubaceae)[2] Tên th-ờng gọi: Bách bệnh, Lồng bẹt, Bá bịnh, Mật nhơn, Tho nan Eurycoma longifolia Jack Bách bệnh thuộc loại nhỡ, cao 2-8 m, thân phân cành Lá kép lông chim lẻ, mọc so le, gồm 21-25 chét không cuống, mọc đối, hình mác bầu dục, gốc thuôn, đầu nhọn, mép nguyên, mặt xanh sẫm bóng, mặt d-ới có lông mịn màu trắng xám, cuống kép màu nâu đỏ Cụm hoa mọc thành chùm kéo chuỳ rộng, cuống có lông màu gỉ sắt; hoa màu đỏ nâu, đài hoa chia thành thuỳ hình tam giác có tuyến l-ng, tràng hoa cánh hình thoi có tuyến; nhị có lông dày hai vảy nhỏ gốc, bầu có noÃn dính gốc Phân bố: Eurycoma longifolia Jack chi nhỏ gồm đại diện bụi gỗ nhỏ, phân bố chủ yếu vùng nhiệt đới Đông Nam Vùng Đông Nam có loài vài d-ới loài, đáng ý loài Bách bệnh phân bố rộng rÃi từ Myanmar đến n-ớc Đông D-ơng, Thái Lan, Malaysia, đảo Sumantra Việt Nam, Bách bệnh phân bố rải rác tØnh vïng nói thÊp (d-íi 1000 m) vµ trung du Các tỉnh Tây Nguyên miền Trung gặp nhiều tỉnh phía Bắc 1.1.2 Công dụng Rễ th-ờng dùng để chữa khí h-, huyết kém, ăn uống không tiêu, ngực có cục tích, gân đờ, x-ơng yếu, chân tay đau yếu Nhân dân th-ờng dùng rễ chữa sốt, sốt rét, chữa ngộ độc say r-ợu, giun sán Vỏ thân làm thuốc bổ, chữa ăn uống không tiêu, nôn Bách bệnh có tác dụng d-ợc lý [3]: - Cao chiÕt tõ B¸ch bƯnh cã t¸c dơng kh¸ng ký sinh trïng sèt rÐt thư nghiƯm nu«i cÊy in vitro - Bách bệnh có tác dụng tăng dục Có mối t-ơng quan hoạt tính kích thích sinh dục nam l-ợng nội tiết tố sinh dục nam huyết Thân rễ Bách bệnh làm tăng l-ợng testosteron huyết động vật, rễ làm tăng testosteron nhiều thân - Một chế phẩm thuốc gồm d-ợc liệu: Bách bệnh, Trâm bầu Xấu hổ có độc tính cấp diễn tr-ờng diễn thấp Thuốc có tác dụng lợi mật rõ rệt không làm thay đổi thành phần mật chuột lang Thuốc làm thải trừ BSP gan thỏ so với đối chứng - Chế phẩm thuốc có tác dụng làm chậm trình h- biến gan chuột cống trắng gây nên Carbon Tetraclorid Nó làm tăng tái tạo tế bào gan chuột nhắt trắng mô hình gây th-ơng tổn gan thực nghiệm 1.1.3 Thành phần hoá học Cây Bách bệnh thuốc tiếng Cây chữa đ-ợc nhiều chứng bệnh (nên có tên Bách - nghĩa 100) Trên giới đà có nhiều công trình nghiên cứu hoá học nh- hoạt tính sinh học thuốc quý này, nhằm khai thác triệt để tiềm y học thuốc quí Năm 1970, Việt Nam đà có nghiên cứu hoá học Bách bệnh, nghiên cứu đ-ợc thực tác giả L.V Thoi, N.N Suong [5,30], kết nghiên cứu cho thấy thành phần hoá học Bách bệnh có hợp chất Eurycomalactone; -Sitosterol; Campesterol; 2,6Dimethoxybenzoquinone Dihydroeurycomalactone Năm 1982, Các tác giả Muchsin Darise, Hiroshi Kohda, Kenji Mizutani vµ Osamu Tanaka [9] đà tiến hành nghiên cứu thành phần hoá học rễ Bách bệnh, kết nghiên cứu ban đầu cho thấy thành phần rễ Bách bệnh có chứa: Eurycomanone, Eurycomanol Eurycomanone-2-O--glycopyranoside, 9-Hydroxycanthin-6-one Cùng thời gian này, nhóm tác giả Việt Nam đà có nghiên cứu thành phần hoá học Bách bệnh, kết nghiên cứu cho thấy thành phần Bách bệnh Việt Nam cã Eurycomalactone, Campesterol; 2,6-Dimethoxybenzoquinone vµ Dihydroeurycomalactone,7-Methoxy-- carboline-1-propionic acid [28] Năm 1983, nhóm tác giả Muchsin Darise cộng [27] tiến hành nghiên cứu thành phần hoá học Bách bệnh, kết nghiên cứu cho thấy có -Sitosterol; 9-Hydroxycanthin-6-one-N-oxide Năm 1986, nhóm tác giả Chan, L., ONeill, M J Phillipson cộng [8] đà có nghiên cứu hoạt tính sinh học Bách bệnh, kết nghiên cứu cho thấy Bách bệnh có khả chống sốt rét Năm 1989, Nhóm tác giả K L Chan, S Lee, T W Sam B H Han [19] đà nghiên cứu thành phần hoá học hoạt tính chống sốt rét Bách bệnh, kết đà tìm hợp chất Eurycomanol-2-O--glycopyranoside; Eurycomanol từ rễ Bách bệnh thể hoạt tính chống sốt rét Năm 1990, Nhóm tác giả Hiroshi Morita cộng [26] tìm thấy có hợp chất Eurycomanol, Klaineanone, 11-Ketone thành phần hóa học Bách bệnh Năm 1991, Itokawa, H., Kishi, E., Morrita, H [16], tìm thấy có hợp chất Eurylen có hoạt tính độc tế bào thành phần hoá học Bách bệnh Cùng thời gian nhóm tác giả K L Chan, S Lee, T W Sam B H Han [7] đà phân lập đ-ợc hợp chất 3,18-Dihydroeurycomanol; 14, 15Dihydroxyklaineanone từ Bách bệnh Hoạt tính gây độc tế bào hoạt tính chống sốt rét Bách bệnh đà đ-ợc nghiên cứu nhóm tác giả Leonardus B.S Kardono cộng [23], nhóm tác giả đà phân lập đ-ợc alkaloit: 9-Methoxycanthin-6-one; 9-Methoxycanthin-6-one-Noxide; 9-Hydroxycanthin-6-one vµ 9-Hydroxycanthin-6-one-N-oxid, mét quassinoit: Eurycomanone lần phân lập hai -Carboline alkaloid (-carboline-1-proprionic acid; 7-Methoxy--carboline-1-proprionic acid) Năm 1992, Hiroshi Morita, Etsuko Kishi, Koichi Takeya and Hideji Itokawa [13] nghiên cứu thành phần hoá học gỗ Bách bệnh, kết nghiên cứu cho thấy gỗ Bách bệnh có 2,2-Dimethoxy-4-(3hydroxy-1-propenyl)-4-(1,2,3-trihydroxypropyl) diphenyl ete 2-Hydroxy3,2,6-trimethoxy-4-(2,3-epoxy-1-hydroxypropyl)-5-(3-hydroxy-1propenyl)-biphenyl 2-Hydroxy-3,2dimethoxy-4-(2,3-epoxy-1- hydroxypropyl)-5-(3-hydroxy-1-propenyl)-biphenyl Cùng năm này, tác giả K L Chan, Y Iitaka, H Noguchi, H Sugiyama, I Saito and U Sankawa [20] đà tìm hợp chất có thành phần hoá học Bách bệnh, hợp chất 6-Hydroxyeurycomalactone, tác giả đà nghiên cứu hoạt tính gây độc tế bào Bách bệnh Ngoài ra, nhóm tác giả Itokawa cộng [10] đà phân lập đ-ợc hợp chất (Dihydroniloticin; 24,25Epoxytirucall-7-ene-3,23-diol; 24,25-Epoxytirucall-7-ene-3,23-diol; (3,23R,24S)-form, 3-Ketone, 23-Ac) thành phần hoá học Bách bệnh Năm 1993, nhóm tác giả Hiroshi Morita cộng [14] tiếp tục nghiên cứu thành phần hoá học hoạt tính sinh học Bách bệnh, kết cho thấy hai hỵp chÊt míi cã khung quassinoid (C 19) 6-Dehydroxylongilactone 7-Hydroxyeurycomalactone hợp chất (13(21)-Epoxyeurycomanone,15-Acetyl-13(21)Epoxyeurycomanone;12,15-diacetyl-13(21)-Epoxyeurycomanone;12Acetyl-13,12-dihydroeurcomanone; 15 -Acetyl-14-hydroxyklaineanone; 6Acetoxy-14,15-dihydroxyklaineanone;6-Acetoxy-14,15dihydroxyklaineanone Hoạt tính gây độc tế bào hợp chất đà đ-ợc nghiên cứu, kết cho thấy hợp chất 6-Dehydroxylongilactone 7Hydroxyeurycomalactone thể hoạt tính gây độc tế bào cao Nhóm tác giả tiếp tục nghiên cứu hoá học hoạt tính sinh học đà phân lập đ-ợc hợp chất Eurylene, 14-Deacetyl eurylene Longilene peroxide, Teurilene đà tiến hành nghiên cứu độc tế bào hợp chất [25] Trong năm 1993, nhóm nghiên cứu khác tác giả Itokawa, H., cộng [18] đà phân lập xác định cấu trúc hợp chất: Eurylactone A, Eurylactone B, Laurycolactone A, Laurycolactone B Năm 1994, nhóm tác giả Mitsunaga cộng [24] đà phân lập đ-ợc 9,10-Dimethoxycanthin-6-one; 10-Hydroxy-9-methoxycanthin-6-one; 11-Hydroxy-10-methoxycanthin-6-one; 5,9-Dimethoxycanthin-6-one 9-Methoxy-3-methylcanthin-5,6-dione Năm 2000, nhóm tác giả Hooi Hoon Ang cộng [4] đà phân lập xác định cấu trúc hợp chất: Eurycolactone A, Eurycolactone B, Eurycolactone C từ Bách bệnh Năm 2001, nhóm tác giả Suratwadee Jiwajinda, Vilai Santisopasri cộng [29] đà nghiên cứu thành phần hoá học hoạt tính sinh học Bách bệnh, đà phân lập đ-ợc Longilactone, 6-Dehydroxylongilactone, 11-Dehydroxyklaineanone;15-Dihydroxyklaineanone;14,15-