67 Trang 13 TRÍCH YẾU LUẬN VĂN Tên tác giả luận văn: Phạm Văn Tuân Tên luận văn: “Nghiên cứu hoàn thiện quy trình sản xuất và kiểm nghiệm chế phẩm sinh học có chứa vi khuẩn Lactic ở qu
ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM PHẠM VĂN TN NGHIÊN CỨU HỒN THIỆN QUY TRÌNH SẢN XUẤT VÀ KIỂM NGHIỆM CHẾ PHẨM SINH HỌC CÓ CHỨA VI KHUẨN LACTIC Ở QUY MÔ CÔNG NGHIỆP LUẬN VĂN THẠC SĨ THÚ Y Thái Nguyên - 2023 … ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM PHẠM VĂN TUÂN NGHIÊN CỨU HỒN THIỆN QUY TRÌNH SẢN XUẤT VÀ KIỂM NGHIỆM CHẾ PHẨM SINH HỌC CÓ CHỨA VI KHUẨN LACTIC Ở QUY MÔ CÔNG NGHIỆP Ngành: Thú y Mã ngành: 8.64.01.01 LUẬN VĂN THẠC SĨ THÚ Y Người hướng dẫn khoa học: TS Phạm Thị Trang Thái Nguyên - 2023 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan công trình nghiên cứu chúng tơi Các kết nghiên cứu luận văn hoàn toàn trung thực chưa công bố luận văn khác Mọi thơng tin trích dẫn luận văn rõ nguồn gốc Tôi xin cam đoan giúp đỡ cho việc thực đề tài nghiên cứu hoàn thành Luận văn cảm ơn TÁC GIẢ Phạm Văn Tuân i LỜI CẢM ƠN Để hồn thành luận văn này, tơi xin bày tỏ lịng kính trọng biết ơn sâu sắc tới TS Phạm Thị Trang hướng dẫn, bảo tơi tận tình suốt q trình nghiên cứu hồn thành Luận văn Tơi xin trân trọng cảm ơn giúp đỡ tạo điều kiện to lớn sở vật chất, nhân lực, vật lực Ban Giám đốc, Ban Đào tạo - Đại học Thái Nguyên; Đảng ủy, Ban Giám hiệu, Phòng Đào tạo, Ban chủ nhiệm Khoa Chăn nuôi thú y, Trường Đại học Nông Lâm, tập thể cán giảng dạy Khoa Chăn nuôi Thú y Trường Đại học Nông Lâm - Đại học Thái Nguyên Đặc biệt, xin trân trọng cảm ơn cán Chi cục Chăn nuôi thú y tỉnh Lào Cai tận tình giúp đỡ, tạo điều kiện thuận lợi cho suốt thời gian triển khai đề tài Một phần nghiên cứu thuộc đề tài cấp Bộ: “Hồn thiện qui trình công nghệ sản xuất chế phẩm sinh học vi khuẩn Lactic địa quy mô công nghiệp dùng chăn ni”, thời gian nghiên cứu 2020 - 2023 Nhóm tác giả xin trân trọng cảm ơn Bộ Khoa học Cơng nghệ hỗ trợ kinh phí cho nghiên cứu Tôi vô biết ơn thành viên gia đình bạn bè ln bên tôi, giúp đỡ động viên suốt trình học tập, nghiên cứu hồn thành Luận văn Thái nguyên, ngày 24 tháng 10 năm 2023 HỌC VIÊN Phạm Văn Tuân ii MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN ii MỤC LỤC iii DANH MỤC CÁC BẢNG v DANH MỤC CÁC HÌNH vii TRÍCH YẾU LUẬN VĂN xi THESIS ABSTRACT xiv MỞ ĐẦU 1 Tính cấp thiết đề tài Mục tiêu đề tài Ý nghĩa khoa học ý nghĩa thực tiễn đề tài Chương TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Một số hiểu biết vi khuẩn Lactic .3 1.2 Tổng quan tình hình nghiên cứu nước CHƯƠNG ĐỐI TƯỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 19 2.1 Đối tượng, phạm vi vật liệu nghiên cứu 19 2.2 Nội dung nghiên cứu 21 2.2.1 Xây dựng quy trình sản xuất chế phẩm sinh học từ chủng vi khuẩn Lactic 21 2.2.2 Kiểm nghiệm chế phẩm sau sản xuất 21 2.3 Phương pháp nghiên cứu, kỹ thuật sử dụng 21 2.3.1 Nội dung 1: Xây dựng quy trình sản xuất chế phẩm sinh học từ chủng vi khuẩn Lactic 21 iii 2.3.2 Nội dung 2: Kiểm nghiệm chế phẩm sau sản xuất 27 2.4 Phương pháp xử lý số liệu 32 CHƯƠNG KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 33 3.1 Kết xây dựng quy trình để sản xuất chế phẩm sinh học có chứa vi khuẩn Lactic quy mô công nghiệp 33 3.1.1 Kết đánh giá q trình hoạt hóa giống sản xuất 03 chủng vi khuẩn Lactic dùng để sản xuất chế phẩm 38 3.1.2 Kết hồn thiện quy trình nhân giống (cấp 1, 2, 3) 03 chủng vi khuẩn Lactic thiết bị lên men 40 3.1.3 Kết hoàn thiện quy trình nhân sinh khối chủng vi khuẩn Lactic quy mô 500 kg/mẻ .48 3.1.4 Kết xây dựng quy trình cơng nghệ sản xuất chế phẩm sinh học quy mô công nghiệp 02 tấn/mẻ 54 3.2 Kết kiểm nghiệm chế phẩm sinh học có chứa vi khuẩn Lactic 61 3.2.1 Kết đánh giá tiêu vật lý (độ ẩm, màu sắc, mùi vị ) chế phẩm 61 3.2.2 Kết đánh giá tiêu hóa học (kim loại nặng, hóa chất độc hại ) chế phẩm 64 3.2.3 Kết đánh giá tiêu vi sinh (mật độ chủng vi sinh vật Lactic) chế phẩm 66 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 69 Kết luận 69 Kiến nghị 69 TÀI LIỆU THAM KHẢO 69 MỘT SỐ HÌNH ẢNH THỰC HIỆN ĐỀ TÀI 69 iv DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 2.1: Các thơng số chương trình lị vi sóng .28 Bảng 3.1 Hàm lượng axit Lactic hoạt độ bacteriocin chủng Bifidobacterium animalis NG52 sau hoạt hóa quy mơ 200 lít/mẻ theo thời gian 34 Bảng 3.2 Hàm lượng axit Lactic hoạt độ bacteriocin chủng Bifidobacterium animalis NG52 sau hoạt hóa quy mơ 500 lít/mẻ theo thời gian 35 Bảng 3.3 Hàm lượng axit Lactic hoạt độ bacteriocin chủng Pediococcus pentosaceus PT 16.9 sau hoạt hóa quy mơ 200 lít/mẻ theo thời gian 36 Bảng 3.4 Hàm lượng axit Lactic hoạt độ bacteriocin chủng Pediococcus pentosaceus PT 16.9 sau hoạt hóa quy mơ 500 lít/mẻ theo thời gian 37 Bảng 3.5 Hàm lượng axit Lactic hoạt độ bacteriocin chủng chủng Lactobacillus plantarum UL485 sau hoạt hóa quy mơ 200 lít/mẻ theo thời gian 39 Bảng 3.6 Hàm lượng axit Lactic hoạt độ bacteriocin chủng chủng Lactobacillus plantarum UL485 sau hoạt hóa quy mơ 500 lít/mẻ theo thời gian 40 Bảng 3.7 Các tính chất vật lý sản phẩm chế phẩm sinh học từ Bifidobacterium animalis NG52 62 Bảng 3.8 Các tính chất vật lý sản phẩm chế phẩm sinh học từ Pediococcus pentosaceus PT 16.9 63 Bảng 3.9 Các tính chất vật lý sản phẩm chế phẩm sinh học từ Lactobacillus plantarum UL485 63 v Bảng 3.10 Hàm lượng kim loại nặng tồn dư sản phẩm chế phẩm sinh học từ Bifidobacterium animalis NG52 64 Bảng 3.11 Hàm lượng kim loại nặng tồn dư sản phẩm chế phẩm sinh học từ Pediococcus pentosaceus PT 16.9 64 Bảng 3.12 Hàm lượng kim loại nặng tồn dư sản phẩm chế phẩm sinh học từ Lactobacillus plantarum UL485 .65 Bảng 3.13 Hàm lượng hóa chất độc hại tồn dư sản phẩm chế phẩm sinh học từ Bifidobacterium animalis NG52 65 Bảng 3.14 Hàm lượng hóa chất độc hại tồn dư sản phẩm chế phẩm sinh học từ Pediococcus pentosaceus PT 16.9 66 Bảng 3.15 Hàm lượng hóa chất độc hại tồn dư sản phẩm chế phẩm sinh học từ Lactobacillus plantarum UL485 .66 vi DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 1.1 Con đường lên men vi khuẩn Lactic Hình 3.1 Mặt trước (Trái) mặt sau (phải) thí nghiệm khuếch tán đĩa thạch chủng Bifidobacterium animalis NG52 sau hoạt hóa quy mơ 200 lít/mẻ 33 Hình 3.2 Mặt trước (Trái) mặt sau (phải) thí nghiệm khuếch tán đĩa thạch chủng Bifidobacterium animalis NG52 sau hoạt hóa quy mơ 500 lít/mẻ 35 Hình 3.3 Mặt trước (Trái) mặt sau (phải) thí nghiệm khuếch tán đĩa thạch chủng Pediococcus pentosaceus PT 16.9 sau hoạt hóa quy mơ 200 lít/mẻ .36 Hình 3.4 Mặt trước (Trái) mặt sau (phải) thí nghiệm khuếch tán đĩa thạch chủng Pediococcus pentosaceus PT 16.9 sau hoạt hóa quy mơ 500 lít/mẻ .42 Hình 3.5 Mặt trước (Trái) mặt sau (phải) thí nghiệm khuếch tán đĩa thạch chủng Lactobacillus plantarum UL485 sau hoạt hóa quy mơ 200 lít/mẻ 43 Hình 3.6 Mặt trước (Trái) mặt sau (phải) thí nghiệm khuếch tán đĩa thạch chủng Lactobacillus plantarum UL485 sau hoạt hóa quy mơ 500 lít/mẻ 39 Hình 3.7 Khuẩn lạc hình thái chủng vi khuẩn Bifidobacterium animalis NG52 sau nhân giống .41 Hình 3.8 Hình dạng khuẩn lạc Pediococcus pentosaceus phân lập môi trường MRSA sau nhân giống 41 Hình 3.9 Hình ảnh Pediococcus pentosaceus nhuộm bắt màu Gram (+) soi kính hiển vi quang học có độ phóng đại từ 40 đến 1.500 lần 41 Hình 3.10 Hình thái khuẩn lạc (A); tế bào chủng Lactobacillus plantarum UL485 kính hiển vi soi (B); Vi khuẩn kính hiển vi điện tử quét (C) 42 Hình 3.11 Mật độ vi khuẩn Bifidobacterium animalis NG52 điều kiện nhiệt độ 43 Hình 3.12 Mật độ vi khuẩn Bifidobacterium animalis NG52 điều kiện pH 43 vii Hình 3.13 Mật độ vi khuẩn Bifidobacterium animalis NG52 điều kiện thời gian 44 Hình 3.14 Mật độ vi khuẩn Pediococcus pentosaceus PT 16.9 điều kiện nhiệt độ 44 Hình 3.15 Mật độ vi khuẩn Pediococcus pentosaceus PT 16.9 điều kiện pH 45 Hình 3.16 Mật độ vi khuẩn Pediococcus pentosaceus PT 16.9 điều kiện thời gian 45 Hình 3.17 Mật độ vi khuẩn Lactobacillus plantarum UL485 điều kiện thời gian 46 Hình 3.18 Mật độ vi khuẩn Lactobacillus plantarum UL485 điều kiện pH 46 Hình 3.19 Mật độ vi khuẩn Lactobacillus plantarum UL485 điều kiện thời gian 47 Hình 3.20 Hình thái vi khuẩn Bifidobacterium animalis NG52 sau nhân sinh khối kính hiển vi .48 Hình 3.21 Hình thái vi khuẩn Pediococcus pentosaceus PT 16.9 sau nhân sinh khối kính hiển vi .49 Hình 3.22 Hình thái vi khuẩn Lactobacillus plantarum UL485 sau nhân sinh khối kính hiển vi .49 Hình 3.23 Mật độ vi khuẩn Bifidobacterium animalis NG52 điều kiện hàm lượng glucose quy mô lên men khác 50 Hình 3.24 Mật độ vi khuẩn Pediococcus pentosaceus PT 16.9 điều kiện hàm lượng glucose quy mô lên men khác 50 Hình 3.25 Mật độ vi khuẩn Lactobacillus plantarum UL485 điều kiện hàm lượng glucose quy mô lên men khác 51 viii Ảnh 7: Trộn chế phẩm Ảnh 8: Cân, đóng gói chế phẩm Ảnh 9, 10: Đóng gói chế phẩm 82 Ảnh 11: Cân mẫu để kiểm nghiệm Ảnh 12: Pha loãng mẫu để kiểm nghiệm Ảnh 13: Trộn mẫu kiểm nghiệm Ảnh 14: Chuẩn bị mẫu kiểm nghiệm 82 82 TẠP CHÍ KHOA HỌC CÔNG NGHỆ CHĂN NUÔI Năm thứ mười tám MỤC LỤC Trang DI TRUYỀN - GIỐNG Chịu trách nhiệm xuất TS Phạm Công Thiếu Ảnh hưởng tỷ lệ nguồn gen bò Droughtmaster đến khả sinh trưởng lai Tây Nguyên Tổng biên tập PGS.TS Ngô Thị Kim Cúc Tel: 0989160653 Một số đặc điểm ngoại hình sinh sản trâu Thanh Chương, Nghệ An Ban biên tập GS.TS Nguyễn Văn Thu PGS.TS Hoàng Văn Tiệu PGS.TS Lê.T Thanh Huyền PGS.TS Trần T Bích Ngọc PGS.TS Chu Mạnh Thắng TS Phạm Doãn Lân TS Nguyễn Văn Quang TS Phạm Văn Giới CN Nguyễn Thị Thanh CN Võ Thị Hồi Hương Trụ sở Viện Chăn ni Thụy Phương Bắc Từ Liêm - Hà Nội Việt Nam Tel: (024)37571453 (024)38385023 (024)38389267 Fax: (024)38389775 Email: phongdaotaovcn@gmail.com Website: http://vcn.org.vn Giấy phép xuất Số: 471/GP-BTTTT ngày 22-7-2021 Phạm Văn Giới, Đặng Văn Dũng, Phạm Văn Sơn Đỗ Thị Thanh Vân 18 Nguyễn Thu Hằng, Nguyễn Thị Lan, Nguyễn Đức Chuyên, Vũ Đình Ngoan, Nguyễn Huy Huân, Nguyễn Đình Nguyên, Nguyễn Đức Trường Nguyễn Văn Đại Tạo dòng ông bà sở trao đổi gen lợn Landrace Pháp Mỹ nhân giống chọn lọc qua hệ 28 Nguyễn Tiến Thông, Trịnh Hồng Sơn, Phạm Duy Phẩm, Trịnh Quang Tuyên, Trần Phương Nam, Lê Thị Thanh Huyền Đặng Vũ Bình Tạo dịng ông bà sở trao đổi gen lợn Yorkshire Pháp Mỹ nhân giống chọn lọc qua hệ 40 Nguyễn Tiến Thông, Trịnh Hồng Sơn, Phạm Duy Phẩm, Trịnh Quang Tuyên, Trần Phương Nam, Lê Thị Thanh Huyền Đặng Vũ Bình DINH DƯỠNG VÀ THỨC ĂN Xác định mức protein thô lượng trao đổi phù hợp phần ăn cho vịt sinh sản Huba 52 Nguyễn Thị Hồng Trinh, Phạm Thị Như Tuyết Lê Thanh Hải CNSH VÀ CÁC VẤN ĐỀ KHÁC Đánh giá q trình hoạt hóa giống sản xuất quy mô công nghiệp ba chủng vi khuẩn Lactic 61 Phạm Thị Trang, Nguyễn Quang Tính, Nguyễn Thu Quyên, Nguyễn Thị Bích Đào, Phạm Lê Anh Tuấn Phạm Văn Tuân Nghiên cứu tỷ lệ nhiễm giun trịn đường tiêu hóa chó, mèo ni huyện Việt Yên, tỉnh Bắc Giang 72 Trần Thị Trinh, Vũ Thị Hoài Thu, Nguyễn Thị Huế Nguyễn Thị Hương ISSN: 1859-0802 Chế in Nhà xuất Nông Nghiệp Hà Nội THÔNG TIN Thực trạng định hướng công tác nghiên cứu khoa học ngành Chăn nuôi TS Nguyễn Đức Trọng 82 81