Nhiệm vụ của khóa luận- Khảo sát sự ảnh hưởng của thành phần đến dầu gội.- Xây dựng công thức và đánh giá dầu gội.- Khảo sát hoạt tính kháng nấm gàu của các loại thảo dược ở Việt Nam trê
TỔNG QUAN
Tóc, da đầu và các nguyên nhân gây ra gàu
Tóc và da đầu là nơi sinh sống của nhiều vi sinh vật và chịu ảnh hưởng từ các yếu tố bên ngoài lẫn bên trong cơ thể Khi tóc và da đầu suy yếu, chúng dễ bị tấn công bởi các tác nhân tiêu cực, dẫn đến các vấn đề và bệnh lý liên quan Điều này cũng góp phần vào sự hình thành gàu.
Tóc là một vật liệu sinh học dạng sợi chủ yếu cấu tạo từ protein keratin, có đường kính từ 20 đến 180 micromet Các sợi tóc không tham gia vào quá trình trao đổi chất với tế bào bên trong cơ thể, mà được nuôi dưỡng và phát triển từ nang tóc nằm dưới da đầu.
Sợi tóc được cấu trúc từ ba lớp chính: lớp biểu bì, cortex (vùng lõi) và medulla (vùng tủy) Lớp biểu bì là lớp ngoài cùng, gồm 5 đến 10 tế bào hình vảy xếp chồng lên nhau, được bảo vệ bởi một lớp thượng bì giúp ngăn nước thẩm thấu Vùng lõi nằm bên trong lớp biểu bì, chứa các tế bào hình thoi xếp song song với sợi trục, cấu tạo từ các sợi trung gian liên kết với keratin Trung tâm sợi tóc có thể có hoặc không có vùng tủy, được hình thành do sự mất nước tạo ra không bào dọc theo trục sợi tóc, với các tế bào tủy có cấu trúc hình cầu và rỗng bên trong Các lớp tế bào và vùng của sợi tóc được kết nối nhờ vào phức hợp màng tế bào.
Hình 1 1 Cấu trúc của sợi tóc
Tóc không chỉ là yếu tố quan trọng trong việc tạo nên ngoại hình mà còn có chức năng bảo vệ đầu và da đầu khỏi tác động của bức xạ mặt trời và mài mòn cơ học Một mái tóc khỏe mạnh không chỉ mang lại giá trị thẩm mỹ mà còn góp phần nâng cao tinh thần.
Da đầu là phần da dày nhất trên cơ thể, với độ dày khoảng 3-8 mm, có nhiệm vụ bảo vệ vùng não Cấu trúc da đầu bao gồm 5 lớp: da, lớp dưới da, Aponeurosis, mô liên kết vùng cực và Pericranium Ba lớp đầu liên kết chặt chẽ, tạo ra bề mặt da đầu căng và kém đàn hồi Các tế bào mới được sản sinh từ lớp trong cùng, sau đó được đẩy lên bề mặt và trải qua quá trình sừng hóa Lớp sừng hóa chứa keratin, tạo thành lớp màng bảo vệ các mô dưới da khỏi tác động của nhiệt, vi khuẩn và hóa chất từ môi trường.
Bề mặt da đầu chứa nang lông, tuyến bã nhờn và tuyến mồ hôi, liên kết chặt chẽ với mô dưới da Tuyến bã nhờn sản xuất triglyceride, acid béo, wax ester, cholesterol, cholesterol ester và squalene, giúp phát triển biểu bì và duy trì hàng rào bảo vệ cho da Ngoài ra, quá trình bài tiết bã nhờn trên da đầu bị ảnh hưởng trực tiếp bởi các thay đổi nội tiết tố.
Hình 1 2 Cấu trúc của da đầu
Da đầu có mật độ nang lông cao và sản xuất bã nhờn dồi dào, tạo điều kiện thuận lợi cho vi sinh vật phát triển trong môi trường tối và ẩm Điều này dẫn đến nguy cơ mắc các bệnh nhiễm trùng nấm bề mặt Nghiên cứu của Rituja Saxena và cộng sự chỉ ra rằng da đầu chứa nhiều loại nấm như Malassezia, Aspergillus, Cladosporium, Wallemia, và Alternaria, cùng với các vi khuẩn thuộc nhiều chi khác nhau.
Propionibacterium, Staphylococcus, Corynebacterium, Bacillus và Pseudomonas là những vi khuẩn có thể gây ra các vấn đề về da đầu Ngoài ra, các yếu tố bên ngoài như bức xạ mặt trời, tác động của mũ, dụng cụ làm tóc, hóa chất, và sự thay đổi nội tiết trong cơ thể do tác dụng phụ của thuốc cũng có thể làm thay đổi môi trường của tóc và da đầu, từ đó làm tăng nguy cơ nhiễm trùng và nhiễm nấm trên bề mặt da đầu.
Các vấn đề phổ biến liên quan đến da đầu bao gồm ngứa, gàu, viêm da đầu tiết bã, nấm và vảy nến Trong số đó, gàu là tình trạng thường gặp nhất, ảnh hưởng đến hơn 50% dân số toàn cầu, chủ yếu ở người trưởng thành.
1.1.3 Gàu và nguyên nhân gây ra gàu
Gàu là một rối loạn da đầu phổ biến, gây ngứa và bong tróc tế bào da chết với tốc độ nhanh Mặc dù gàu và viêm da tiết bã có triệu chứng tương tự, nhưng chúng khác nhau về mức độ nghiêm trọng Viêm da tiết bã không chỉ ảnh hưởng đến da đầu mà còn xuất hiện trên mặt và ngực, gây ra bong tróc da, viêm, ngứa, và nổi ban đỏ, trong khi gàu chỉ gây ngứa và bong tróc trên da đầu mà không gây viêm.
Các vấn đề sinh lý và yếu tố môi trường có ảnh hưởng trực tiếp đến sự hình thành và phát triển của gàu Những yếu tố này bao gồm hoạt động của tuyến bã nhờn, mức độ nhạy cảm của từng cá nhân và tác động của nấm.
Gàu thường xuất hiện do nhiều nguyên nhân, bao gồm thời tiết, tiếp xúc với ánh nắng mặt trời, và thói quen gội đầu không đúng cách Chế độ ăn thiếu dinh dưỡng, đặc biệt là thiếu kẽm và vitamin B, cũng góp phần làm tăng tình trạng gàu Ngoài ra, một số loại thuốc điều trị có thể gây khô da và bong tróc trên da đầu Đặc biệt, người trưởng thành thường gặp phải gàu nhiều hơn do sự thay đổi nội tiết tố và sự gia tăng hoạt động của tuyến bã nhờn Áp lực và căng thẳng cũng là yếu tố làm trầm trọng thêm tình trạng này Những người có da nhạy cảm dễ bị kích ứng với hóa chất trong dầu gội, dẫn đến viêm nhiễm nấm Sử dụng dầu gội nhẹ có thể không đủ để loại bỏ dầu thừa, tạo điều kiện cho nấm phát triển Ngoài ra, các tình trạng da như viêm da tiết bã và vảy nến cũng có thể gây ra triệu chứng tương tự như gàu, trong khi những người bị suy giảm miễn dịch như HIV hay Parkinson có nguy cơ cao hơn.
Năm 2016, Soares và cộng sự đã phân tích hệ vi khuẩn và nấm trên da đầu, phát hiện rằng 96% nấm thuộc chi Malassezia Một nghiên cứu khác của Rituja Saxena và cộng sự cho thấy Malassezia chiếm hơn 70% tổng số nấm trên da đầu của 70 người bị gàu Nghiên cứu cũng chỉ ra sự hiện diện của một số nấm men khác như Candida và Filobasodium, tuy nhiên, số lượng của chúng ít hơn nhiều so với Malassezia.
Malassezia[13] Từ đó,Malasseziađược đánh giá là tác nhân nấm men chủ yếu gây ra gàu.
Nấm men Malassezia
1.2.1 Sơ lược về nấm men Malassezia
Nấm men Malassezia được biết đến từ năm 1846, trước đây còn được gọi là
Pityrosporum, thuộc nhóm nấm men ưu lipid, sinh sống quanh các lỗ nang lông của người và động vật máu nóng Nấm Malassezia có khả năng hấp thụ và chuyển hóa chất béo từ bề mặt da, và đã được liên kết với nhiều bệnh ngoài da ở người, trong đó có bệnh lang ben Mối liên hệ giữa các loài Malassezia và bệnh viêm da tiết bã, gàu cũng đã được xác nhận trong nhiều năm qua Hiện nay, có nhiều loài Malassezia khác nhau đang được nghiên cứu.
M cuniculi, M nana, M slooffiae, M caprae, M pachydermatis, M globosa, M. sympodialis, M equina, M dermatis,M furfur, M japonica, M obtusa, M restricta,
M yamatoensis và M Arunalukei [16] Các loài Malassezia đều tồn tại trên da đầu khỏe mạnh và da đầu nhiễm bệnh Trong các loài Malassezia trên da đầu,Malassezia có hình bầu dục chiếm đa số (từ 82-91%) [17], trong đó, M furfur, M globosa và M. restrictachiếm phần lớn và là nguyên nhân chủ yếu gây ra gàu [9].
Cấu trúc của Malassezia bao gồm màng sinh chất, không gian ngoại chất, thành tế bào, tế bào chất và nhân Thành tế bào được chia thành ba vùng nhỏ, với cấu trúc giống lomasome liên kết với màng sinh chất, tạo thành lớp vỏ bao bọc nhân và tế bào chất Đối với các nấm Malassezia hình bầu dục, thành tế bào dày 0,12 àm, chiếm khoảng 26-37% thể tích tế bào, với màng sinh chất được sắp xếp thành 9-14 hình xoắn ốc Thành tế bào chứa khoảng 50% đường trung tính, 10-15% hexosamine, 15% lipid và 11% protein.
Hình 1 3 Cấu trúc lớp vỏ của nấm
Sự xâm nhiễm và gây tổn thương lên da củaMalassezia phụ thuộc vào các yếu tố sinh lý của con người và các tác động từ bên ngoài:
Các yếu tố sinh lý như thay đổi nội tiết tố trong giai đoạn dậy thì và tiền mãn kinh có thể dẫn đến tăng tiết bã nhờn Bên cạnh đó, tình trạng suy giảm miễn dịch, chẳng hạn như ở bệnh nhân HIV, cũng ảnh hưởng đến quá trình này.
Malasseziadễ tấn công và gây bệnh; các yếu tố di truyền gây nhiễm trùng cấu trúc lớp sừng [9].
Các tác động từ bên ngoài, bao gồm thói quen gội đầu quá nhiều và sử dụng dụng cụ làm tóc, có thể gây tổn thương cho da đầu Bên cạnh đó, ô nhiễm môi trường và bức xạ mặt trời cũng làm tăng nguy cơ tiếp xúc với nấm Malassezia.
1.2.2 Cơ chế tác động của nấm Malassezia
Năm 2012, nghiên cứu của Turner và cộng sự chỉ ra rằng sự thay đổi tiết bã nhờn trên da đầu có thể dẫn đến mất nước qua biểu bì, gây rối loạn lớp sừng và bong tróc da Sự gia tăng tiết bã nhờn tạo điều kiện cho nấm Malassezia phát triển, vì loại nấm này sử dụng các chất tiết từ bã nhờn làm nguồn dinh dưỡng cần thiết cho sự sinh trưởng của chúng.
Malassezia tiết ra nhiều enzyme như lipase, phospholipase và lipoxygenase, giúp phân giải triglyceride và ester từ tuyến bã nhờn Dưới tác dụng của lipase, các triglyceride và ester được phân hủy thành diglyceride, monoglyceride và acid béo tự do Malassezia chỉ hấp thụ acid béo bão hòa để phát triển, trong khi acid béo không bão hòa như acid oleic có thể xâm nhập và phá hủy cấu trúc lớp sừng, dẫn đến bong vảy da và suy yếu chức năng hàng rào bảo vệ da Quá trình phân giải lipid cũng giúp Malassezia tồn tại trong môi trường giàu lipid như da đầu.
Hình 1 4 Cơ chế tổng hợp argosterol từ squalene
Squalene là thành phần chính của bã nhờn, được chuyển đổi thành ergosterol dưới sự hỗ trợ của squalene epoxidase và 14-α-demethylase từ Malassezia Ergosterol đóng vai trò quan trọng trong cấu trúc màng tế bào của Malassezia, trong khi quá trình chuyển đổi squalene kích thích tế bào sừng nhân lên, dẫn đến tình trạng bong tróc da đầu Ở những vùng da đầu có gàu, n-glycan xuất hiện với hàm lượng cao hơn, giúp duy trì tính toàn vẹn của tế bào Malassezia và cần thiết cho quá trình tổng hợp glycoprotein Glycoprotein cho phép Malassezia bám vào bề mặt da đầu, tạo điều kiện thuận lợi cho sự phát triển của chúng, từ đó làm suy giảm chức năng bảo vệ của lớp sừng.
Khi Malassezia tương tác với tế bào sừng, tế bào này có thể được kích hoạt bởi các hapten thông qua thụ thể Toll-like, dẫn đến việc giải phóng cytokine và kích hoạt quá trình viêm da Nghiên cứu của Donnaruma và cộng sự vào năm 2014 cho thấy rằng tế bào sừng bị kích hoạt bởi M globosa, M restricta và M furfur tạo ra phản ứng viêm cytokine thông qua thụ thể Toll-like 2 Sự biểu hiện của phản ứng viêm cytokine khác nhau tùy thuộc vào loài Malassezia, do sự tương tác khác nhau giữa tế bào sừng và các loài này Một yếu tố khác có thể gây viêm là sự chuyển hóa của tryptophan, được tiết ra từ tuyến mồ hôi, với tỷ lệ khoảng 12-41% ở người trưởng thành Tryptophan, dưới tác dụng của enzyme tryptophan aminotransferase 1, chuyển hóa thành các dẫn xuất indole, là những chất tiền viêm.
Nghiên cứu đã chỉ ra rằng M globosa và M restricta có khả năng chuyển hóa tryptophan thành indole-3-acetic acid và indole-3-lactic acid Trong các thử nghiệm in-vitro, các dẫn xuất indole này cho thấy tác dụng gây viêm ở nồng độ khoảng 100 µM Tuy nhiên, lượng các dẫn xuất indole được sản xuất bởi M globosa và M restricta thấp hơn nhiều so với mức này.
4,4-26,4 àM) so với nồng độ cú thể gõy viờm [28].
1.2.3 Cơ chế kháng nấm Malassezia
Tình trạng gàu có thể được cải thiện bằng cách ức chế nấm Malassezia, với các nghiên cứu chỉ ra rằng các chiến lược kháng Malassezia chủ yếu nhằm ngăn chặn sự sinh trưởng của nó Những phương pháp này bao gồm việc ngăn chặn quá trình tổng hợp ergosterol, làm rối loạn hoạt động của màng tế bào, cũng như ức chế lipase và carbonic anhydrase Trong số đó, tác động lên màng tế bào được coi là cơ chế kháng nấm chủ yếu.
Các hợp chất azole là những chất ức chế quá trình tổng hợp ergosterol, được sử dụng trong lâm sàng Malassezia tiết ra enzyme 14-α-demethylase để chuyển hóa lanosterol thành ergosterol Việc ức chế enzyme này ngăn chặn tổng hợp ergosterol, dẫn đến sự tích tụ các tiền chất sterol, gây ra sự không toàn vẹn về cấu trúc và thay đổi chức năng của màng sinh chất.
Năm 2013, Carrillo-Munoz và các cộng sự đã nghiên cứu hoạt tính kháng Malassezia in-vitro của các loại thuốc và xác định rằng các hợp chất triazole có hoạt tính kháng nấm cao, đặc biệt là ketoconazole với MIC50 là 0,01 μg/ml và itraconazole.
0,01 μg/ml) Tuy nhiên, fluconazole có phạm vi nồng độ ức chế rộng ở các loài
Malasseziakhác nhau với MIC5032 μg/ml.
Malassezia có thể bị ức chế thông qua việc ngăn chặn enzyme β-1,3-glucan synthetase, enzyme cần thiết cho quá trình tổng hợp glucan, một thành phần cấu trúc quan trọng của tế bào nấm Các chất ức chế này hoạt động theo cơ chế không cạnh tranh, làm giảm sản xuất glucan và tác động đến các thành phần khác của thành và màng tế bào, như giảm lượng ergosterol và tăng hàm lượng chitin Kết quả là cấu trúc tế bào nấm bị thay đổi, dẫn đến thành tế bào dày hơn và làm cho chồi không thể tách khỏi tế bào mẹ.
Amphotericin B, một tác nhân polyene nổi bật, được biết đến với khả năng kháng nấm hiệu quả trong điều trị nhiễm trùng toàn thân Khác với các tác nhân azole, amphotericin B hoạt động bằng cách liên kết trực tiếp với ergosterol trên màng tế bào, tạo ra các kênh xuyên màng, dẫn đến sự thay đổi tính thấm và làm cho các ion di chuyển ra ngoài, gây mất cân bằng nội mô và phá vỡ tế bào Tuy nhiên, việc sử dụng amphotericin B cũng đi kèm với nguy cơ gây độc, đặc biệt là đối với thận ở động vật có vú.
Một số hoạt chất có khả năng kháng nấm Malassezia
Hiện nay, nhiều hoạt chất chiết xuất từ thảo dược và quá trình tổng hợp đã được chứng minh có khả năng kháng nấm và điều trị gàu Các thành phần trong chiết xuất thảo dược chủ yếu thuộc nhóm terpenoid và các hợp chất thơm, béo, mang lại hiệu quả trong việc chống lại nấm gây gàu.
Geraniol là một loại alcohol monoterpene acyclic nổi bật với nhiều đặc tính sinh hóa và dược lý, bao gồm khả năng xua đuổi và tiêu diệt côn trùng, chống oxy hóa, chống viêm, chống ung thư, kháng khuẩn và kháng nấm Nghiên cứu cho thấy geraniol có hoạt tính kháng nấm mạnh mẽ trên Candida albicans, nơi nó tác động lên màng tế bào, làm rối loạn tính thấm của màng thông qua quá trình khử cực, từ đó ức chế sự phát triển của nấm Geraniol cũng là một trong những thành phần chính trong tinh dầu tự nhiên.
Pelargonium graveolens (22,1%) đã được chứng minh có khả năng kháng 3 loài M. globosa, M furfurvà M obtusavới đường kính vòng ức chế trung bình 26,1 mm [40].
1, 8-cineole thuộc loại monoterpene bão hòa được phát hiện trong các họ Myrtaceae
(Eucalyptus kochill subsp Borealis, Callistemon viminalis, Melaleuca armillaris), họ Lamiaceae (Rosmarinus officinalis L., Thymus mastichina) và họ Zingiberaceae
Alpiniae zerumbet và Alpinia galangal chứa 1,8-cineole, một hợp chất nổi bật với khả năng kháng khuẩn, kháng viêm và chống oxy hóa hiệu quả Thành phần này thường được sử dụng trong nhiều sản phẩm, bao gồm nước súc miệng, sản phẩm tắm gội, cũng như thuốc điều trị các bệnh liên quan đến tiêu hóa và đường hô hấp.
1,8-cineole đã được chứng minh có khả năng kháng nấm hiệu quả, đặc biệt trong nghiên cứu của Marei và các cộng sự vào năm 2012, khi họ khảo sát và so sánh hoạt tính kháng nấm trên bốn loài nấm: Rhizoctonia solani, Fusarium oxysporum, và Penicillium digitatum.
Asperigallus nigercủa các monoterpene, trong đó có 1, 8-cineole Kết quả cho thấy 1, 8-cineole là một chất tiềm năng có hoạt tính kháng nấm mạnh với EC50 khoảng 36,4- 148,4 mg/l [38].
Limonene được xem là hợp chất phổ biến nhất trong tự nhiên có trong tinh dầu của chi
Limonene, một hợp chất chiết xuất từ họ cam quýt (Rutaceae), không chỉ được sử dụng làm hương liệu trong nhiều sản phẩm mà còn có nhiều lợi ích sức khỏe, bao gồm khả năng kháng oxy hóa, chống viêm, chống ung thư, kháng khuẩn và kháng nấm Nghiên cứu so sánh hoạt tính kháng nấm của limonene trên bốn loài nấm như Rhizoctonia solani, Fusarium oxysporum, Penicillium digitatum và Aspergillus niger cho thấy rằng limonene có hiệu quả kháng nấm mạnh hơn so với các hợp chất khác như geraniol, 1,8-cineole và carvone, với giá trị EC50 của limonene khoảng 26,8-153,2 mg/l.
Linalool là một hợp chất alcohol monoterpene không bão hòa, có mặt trong tinh dầu của cây húng quế, tía tô và hương thảo Hợp chất này nổi bật với các đặc tính kháng khuẩn, chống viêm, chống oxy hóa và kháng nấm Nghiên cứu của Dias (2017) đã chỉ ra rằng linalool có khả năng ức chế Candida spp gây bệnh candidiasis miệng, với nồng độ ức chế tối thiểu (MIC) trong khoảng 500-2000 µg/ml Thêm vào đó, nghiên cứu của Herman và các cộng sự đã kết hợp linalool với các tinh dầu khác như Thymus vulgaris, Pelargonium graveolens và Cinnamomum zeylanicum để khảo sát hoạt tính kháng nấm và kháng khuẩn, cho thấy hiệu quả đáng kể của linalool trong việc hỗ trợ điều trị các nhiễm trùng nấm.
Syzygium aromaticum kết hợp với linalool có khả năng tăng cường hoạt tính kháng nấm và kháng khuẩn, nhờ vào hiệu ứng bổ trợ và hiệp đồng giữa linalool và các tinh dầu này.
Thymol là một hợp chất monoterpene phenol có nguồn gốc từ các cây thuộc họ Lamiaceae như Thymus, Ocimum, và Origanum, nổi bật với các đặc tính kháng viêm, chống oxy hóa, gây tê cục bộ, chống ung thư và khử trùng hiệu quả Ngoài ra, thymol còn có hoạt tính kháng nấm và kháng khuẩn mạnh mẽ Nghiên cứu của Schlemmer và các cộng sự năm 2019 đã chỉ ra rằng thymol, carvacrol và cinnamaldehyde có khả năng kháng nấm hiệu quả khi kết hợp với các tác nhân kháng nấm như fluconazole và itraconazole, với MIC50 lần lượt là 80, 80, và 10 µg/ml Sự kết hợp này tạo ra các tương tác hiệp đồng, làm tăng khả năng kháng nấm của các hợp chất ban đầu.
Năm 2007, Schmidt và các cộng sự đã tiến hành nghiên cứu về hoạt tính kháng nấm của eugenol cùng với các tinh dầu chiết xuất từ lá cây ớt ngọt pimento, lá cây nguyệt quế, lá đinh hương và lá cây quế, trong đó eugenol là thành phần chính.
Candida albicans được phân lập từ hầu họng, vùng âm đạo và trên da Nghiên cứu cho thấy các loại nấm này nhạy cảm với eugenol và tinh dầu ở nồng độ 0,1-2% gây ức chế sự sinh trưởng, trong khi nồng độ từ 0,5-4% có khả năng diệt nấm Khả năng kháng nấm của eugenol được giải thích qua việc chuyển đổi thành methide quinone, làm giảm glutathione nội bào và phản ứng với các phần tử tế bào, tạo ra độc tính Eugenol đơn lẻ không hiệu quả bằng các tinh dầu chứa eugenol Phân tích GC-MS cho thấy các tinh dầu còn chứa methyl eugenol, chavicol và linalool, các hợp chất này có tác dụng bổ sung hoặc hiệp đồng với eugenol, tăng cường hoạt tính kháng nấm.
Bảng 1 1 Hoạt tính kháng nấm của eugenol và các tinh dầu chứa eugenol
Tinh dầu Các loại nấm
Candida albicans MIC (àg/ml) FIC (àg/ml)
Tinh dầu ớt ngọt pimento
Một số thảo dược có khả năng kháng nấm Malassezia
Nhiều loại thảo dược tự nhiên đã được nghiên cứu và chứng minh có khả năng kháng nấm Malassezia, giúp kiểm soát gàu hiệu quả Dưới đây là một số thảo dược tiềm năng với khả năng kháng nấm đáng chú ý.
Hương nhu trắng, hay còn gọi là Ocimum Gratissimum L., là loại cây mọc hoang và được trồng rộng rãi ở Việt Nam Trong y học dân gian, hương nhu trắng được biết đến với nhiều công dụng dược lý, bao gồm khả năng chống tiêu chảy, điều trị ho, sốt, hạ đường huyết và đặc biệt là tác dụng chống ung thư.
Năm 2007, Akinmoladun và cộng sự đã phát hiện các hợp chất như tanin, steroid, terpenoid, flavonoid và glycoside tim trong chiết xuất lá hương nhu trắng bằng nước và methanol, đồng thời ghi nhận hoạt động chống oxy hóa mạnh mẽ với khả năng thu dọn gốc tự do DPPH đạt 84,6% ở nồng độ 250 µg/ml Cũng trong năm 2007, Matasyoh và cộng sự đã phân tích tinh dầu lá hương nhu trắng ở Kenya, xác định các thành phần chính là eugenol (68,81%), methyl eugenol (13,21%) và cis-Ocimene (7,47%) Một nghiên cứu khác của Mbakwem-Aniebo cùng cộng sự đã chỉ ra rằng chiết xuất ethanol từ lá hương nhu trắng có khả năng ức chế nấm hiệu quả, với MIC đối với Malassezia furfur, Microsporum, Trichophyton và Epidermophyton lần lượt là 50,01; 52,40; 63,06 và 63,09 mg/ml.
Sả chanh, hay còn gọi là Cymbopogon citratus S., là một gia vị phổ biến và được trồng rộng rãi tại Việt Nam Là cây sống lâu năm, sả chanh có chiều cao khoảng 1,5 m, với lá hẹp, dài và mép hơi nháp giống như lá lúa Cụm hoa của sả chanh bao gồm nhiều bông nhỏ không cuống Với vị cay và mùi thơm đặc trưng, sả chanh có tính ấm, giúp tăng cường tiết mồ hôi, có tác dụng sát khuẩn, chống viêm và chống oxy hóa hiệu quả.
Tinh dầu sả chanh, chiết xuất từ lá, chứa 42,16% citral A (geranial) và 31,52% citral B (neral), theo nghiên cứu của Boukhatem và cộng sự năm 2014 Nghiên cứu này cũng chỉ ra rằng tinh dầu sả chanh có hoạt tính kháng nấm và kháng viêm, với tác dụng mạnh mẽ trong việc giảm phù ở chuột khi bôi tại chỗ Các loại nấm như Candida albicans, Candida tropicalis và Aspergillus niger đều nhạy cảm với tinh dầu này, thể hiện qua đường kính vòng ức chế từ 33-90 mm, vượt trội hơn so với Amphotericin B (12-35 mm) Một nghiên cứu khác năm 2013 của Mugal và cộng sự cho thấy tinh dầu sả chanh có khả năng ức chế enzyme lipase ngoại bào của Malassezia globosa ở nồng độ thấp (100 µg/ml).
Năm 2011, Wuthi-Udomlert và cộng sự đã nghiên cứu hiệu quả của dầu gội chứa tinh dầu sả chanh trong việc điều trị gàu với các nồng độ khác nhau Nhóm tác giả đã xác định hoạt tính kháng nấm Malassezia furfur của tinh dầu sả chanh với MIC và MFC tương ứng là 6,25 àg/ml Sau 6 tuần, dầu gội với các nồng độ 1%, 2%, 3%, 4% và 5% được bảo quản ở nhiệt độ 28-30 oC cho thấy khả năng chống lại M furfur với MFC lần lượt là 75, 75, 37,5, 18,8 và 18,8 àl/ml.
Bạc hà Á (Mentha arvensis Linn) là loại rau nêm phổ biến trong ẩm thực nhờ mùi thơm đặc trưng và vị cay mát Ngoài công dụng làm gia vị, bạc hà Á còn được sử dụng trong y học cổ truyền để chữa trị nhiều bệnh như ho, viêm khớp, các vấn đề về dạ dày, tiêu chảy, tăng huyết áp, thiếu máu cơ tim, hen suyễn và vàng da.
Menthol là thành phần chính trong tinh dầu bạc hà Á, với hàm lượng lên tới 77,94%, theo nghiên cứu của Markar và cộng sự năm 2018 sử dụng phương pháp GC-MS Ngoài menthol, tinh dầu còn chứa isomenthone 5,24% và menthone 5% Năm 2021, Vu và cộng sự đã khảo sát hoạt tính kháng nấm của tinh dầu bạc hà Á chiết xuất từ cây bạc hà trồng ở Việt Nam.
Tinh dầu bạc hà Á có khả năng kháng nấm mạnh mẽ, ức chế sự phát triển của Malassezia furfur và Malassezia globosa với nồng độ ức chế tối thiểu (MIC) là 2,5 àl/ml.
Tràm trà, hay Melaleuca alternifolia, ngày càng được biết đến như một chất kháng khuẩn tự nhiên Nghiên cứu của Carson và các cộng sự vào năm 1995 đã chỉ ra rằng tinh dầu tràm trà có hiệu quả tốt trong việc kháng lại Candida albicans, Escherichia coli và Staphylococcus aureus Phổ kháng khuẩn rộng của tinh dầu này cũng đã được chứng minh qua nhiều nghiên cứu khác.
Nghiên cứu của Zhang và các cộng sự (2018) cho thấy tinh dầu tràm trà có khả năng ức chế mạnh mẽ sự phát triển của cả vi khuẩn Gram âm và Gram dương Phân tích bằng GC-MS và GC-FID chỉ ra rằng các thành phần chính trong tinh dầu tràm trà bao gồm terpinene-4-ol (31,11%), γ-terpinene (25,30%) và α-terpenene (12,70%) Hơn nữa, tinh dầu tràm trà còn được công nhận là một chất chống oxy hóa tiềm năng, có khả năng ức chế quá trình hydroxyl hóa lipid, loại bỏ các gốc hydroxy và làm giảm gốc tự do DPPH.
Vào năm 2000, Hammer và các cộng sự đã nghiên cứu hoạt tính của tinh dầu tràm trà đối với các tác nhân azole như ketoconazole, econazole và miconazole, nhằm kiểm tra hiệu quả chống lại 54 loài Malassezia, bao gồm M furfur, M sympodialis, M slooffiae, M globosa và M obtusa Kết quả cho thấy các loài Malassezia nhạy cảm với các tác nhân kháng nấm, trong đó tinh dầu tràm trà thể hiện khả năng ức chế mạnh mẽ với nồng độ ức chế tối thiểu (MIC) khoảng 0,016-0,25 ml/ml.
Lá trầu không, hay còn gọi là Piper betle L., được sử dụng rộng rãi trong dân gian với nhiều công dụng như ngăn ngừa sâu răng, khử mùi hơi thở, chữa ho, chống viêm, cầm máu và khử trùng Nghiên cứu cho thấy lá trầu không chứa nhiều vitamin, khoáng chất và enzyme quan trọng như diastase và catalase, cần thiết cho các acid amin thiết yếu Hơn nữa, chiết xuất từ lá trầu không còn có khả năng kháng oxy hóa, kháng khuẩn và kháng nấm hiệu quả.
Cũng trong báo cáo về nghiên cứu hoạt tính kháng Malasseziacủa tinh dầu bạc hà Á,
Vu cùng cộng sự đã chiết xuất tinh dầu từ lá trầu không tại Việt Nam để nghiên cứu hoạt tính kháng nấm đối với M furfur và M globosa Kết quả cho thấy cả hai loại nấm này đều nhạy cảm với tinh dầu lá trầu không, với nồng độ ức chế tối thiểu (MIC) là 1 àl/ml, cho thấy khả năng ức chế mạnh mẽ hơn so với tinh dầu bạc hà Á trong nghiên cứu Đặc biệt, khi kết hợp 1 àl/ml tinh dầu bạc hà Á với 0,5 àl/ml tinh dầu lá trầu không, hỗn hợp này có thể ức chế 80-90% M furfur và M globosa sau 20 phút xử lý.
Gừng, với tên khoa học là Zingiber officinale Rocs, từ lâu đã được sử dụng như một gia vị và thuốc nhờ vào tác dụng làm ấm tỳ, chống cảm lạnh, giảm buồn nôn, đau đầu, trị ho và cải thiện mạch yếu Tính cay và hăng của gừng chủ yếu do sự hiện diện của gingerol và shogaol Sự quan tâm và nghiên cứu sâu rộng về gừng đã chỉ ra hoạt tính kháng khuẩn của nó, được khảo sát bởi Raja và các cộng sự thông qua phương pháp khếch tán đĩa đối với các vi khuẩn như Proteus mirabilis, Klebsiella pneumoniae và Streptococcus aureus.
Dầu gội thảo dược có tác dụng trị gàu
Dầu gội là sản phẩm chăm sóc tóc chủ yếu giúp làm sạch tóc và da đầu khỏi bụi bẩn và bã nhờn, đồng thời có thể điều trị các vấn đề như gàu, tóc mượt và hạn chế rụng tóc Trên thị trường hiện nay, có nhiều loại dầu gội trị gàu, bao gồm cả sản phẩm tổng hợp và chiết xuất thảo dược, mang lại trải nghiệm tích cực cho người dùng Tuy nhiên, một số thành phần trong dầu gội có thể gây ra tác dụng phụ không mong muốn, dẫn đến xu hướng ngày càng tăng trong việc sử dụng dầu gội tự nhiên và thân thiện với môi trường.
1.5.1 Thành phần có trong dầu gội
Dầu gội đầu là sản phẩm chăm sóc tóc và da đầu, giúp làm sạch bụi bẩn và bã nhờn hiệu quả Ngoài khả năng làm sạch, dầu gội còn cung cấp độ ẩm, giữ tóc mượt mà, ngăn ngừa xơ rối và rụng tóc, đồng thời kích thích mọc tóc và duy trì màu sắc ổn định Sản phẩm này còn hỗ trợ kiểm soát các vấn đề về da đầu như gàu, viêm da tiết bã và nấm Để đạt được những công dụng này, dầu gội thường chứa nhiều thành phần được kết hợp trong các công thức khác nhau, bao gồm chất hoạt động bề mặt, chất điều hòa, chất phụ gia và thành phần hoạt tính.
- Chất hoạt động bề mặt (HĐBM):
Chất HĐBM là thành phần thiết yếu trong dầu gội, giúp làm sạch bụi bẩn và bã nhờn bằng cách giảm sức căng bề mặt giữa nước và chất bẩn Chúng có cấu trúc đặc biệt với một nhóm ưa nước và một nhóm ưa dầu, cho phép bao quanh và liên kết với bã nhờn, tạo thành cấu trúc micelle Nhờ vào cấu trúc này, chất bẩn được hòa tan trong nước và dễ dàng rửa trôi Các chất HĐBM được phân loại dựa trên tính ưa nước của chúng.
4 nhóm: anion, cation, lưỡng tính và không ion (Bảng 1.2) [87, 88].
Bảng 1 2 Các chất hoạt động bề mặt
Phân loại Chất hoạt động bề mặt Đặc tính
Ammonium lauryl sulfate, sodium laureth sulfate, sodium lauryl sarcosinate, sodium myreth sulfate, sodium pareth sulfate, sodium stearte, sodium lauryl sulphate, alpha-olefin sulfonate, ammonium laureth sulphate,
Cation Trimethylalkylammonium chloride, benzalkonium chloride, alkylpyridinium chloride, Làm mềm tóc, làm sạch nhẹ
Lưỡng tính Alkyl iminopropionate và (amido) betaine Làm sạch vừa phải
Không ion Fatty alcohol, cetyl alcohol, stearyl alcohol, cetostearyl alcohol, oleyl alcohol, Làm sạch nhẹ
Hầu hết các sản phẩm dầu gội hiện nay sử dụng chất hoạt động bề mặt (HĐBM) anion và lưỡng tính, kèm theo các loại HĐBM không ion và cation tùy theo nhu cầu Mặc dù HĐBM anion tổng hợp mang lại hiệu quả làm sạch vượt trội, nhưng chúng có thể gây kích ứng và khô da, làm tăng tình trạng da như gàu Do đó, các chất HĐBM tự nhiên trở thành giải pháp an toàn và hiệu quả Các chiết xuất thảo dược như quả bồ kết, bồ hòn, dây khổ qua và vỏ cây xà phòng đang được sử dụng trong nhiều sản phẩm dầu gội từ thiên nhiên Những chiết xuất này chứa hợp chất saponin, như australoside trong quả bồ kết và sapindus saponoside trong quả bồ hòn, mang lại khả năng tẩy rửa nhẹ nhưng an toàn cho da đầu.
Chất làm đặc được thêm vào dầu gội để tạo độ nhớt phù hợp, giúp sản phẩm không bị chảy ra khỏi tay khi sử dụng Điều này không chỉ nâng cao trải nghiệm người dùng mà còn giảm nguy cơ sản phẩm chảy vào mắt, gây khó chịu cho người sử dụng.
Một số chắc làm đặc phổ biến: Xanthan gum, cellulose gum, acrylate crosspolymer, guar hydroxypropyltrimonium chloride, , PEG-120-methyl glucose triisostearate,
Với sự gia tăng nhu cầu thị trường đối với sản phẩm chăm sóc tóc, các chất phụ gia được bổ sung nhằm đảm bảo chất lượng sản phẩm, bao gồm độ ổn định, hương liệu và chất giữ ẩm.
Chất dưỡng ẩm và giữ ẩm là cần thiết để bảo vệ tóc khỏi tình trạng khô, xơ và xỉn màu do các chất hoạt động bề mặt (HĐBM) có tính chất tẩy rửa Dầu tự nhiên, ester của acid béo và alkanolamide là những thành phần chính trong chất dưỡng ẩm, trong khi propylene glycol, polyethylene glycol, glycerin, sorbitol và lactate thường được sử dụng làm chất giữ ẩm Việc bổ sung các chất này giúp làm mềm tóc và duy trì độ ẩm cần thiết.
Các chất ổn định đóng vai trò quan trọng trong việc duy trì độ ổn định của sản phẩm, ngăn ngừa sự xâm nhập của vi khuẩn và nấm, cũng như hạn chế quá trình oxy hóa.
Hương liệu là thành phần quan trọng trong dầu gội, giúp tăng cường hương thơm và tạo cảm giác dễ chịu cho người sử dụng Các loại hương như dầu nước hoa, tinh dầu bạc hà, tinh dầu oải hương và nước hoa hồng thường được sử dụng để làm cho sản phẩm thêm hấp dẫn Để đảm bảo hương thơm bền lâu, chất lưu hương được bổ sung vào công thức dầu gội.
Bảng 1 3 Các chất ổn định thường được sử dụng trong dầu gội
Thành phần Các hợp chất
Chất bảo quản Acid hữu cơ và các dẫn xuất của chúng: parahydroxybenzoic acid ester, salicylic acid, sorbic acid; methylparaben; chất khử formaldehyde: DMDM hydantoin,
Chất chống oxy hóa Axit ascorbic, -tocopherol, butyl hydroxyanisole,
Chất ổn định pH Chất đệm citrate, lactate, và phosphate,
Chất phân tán Polyvinylpyrrolidone, cũng được thêm vào Các chất lưu hương hay sử dụng như vetiver, hạt amprette, patchouli, [13]
Chất điều hòa giúp duy trì tình trạng tự nhiên của tóc mới mọc lâu dài, mặc dù tóc hư tổn không thể phục hồi hoàn toàn Các chất này có khả năng tăng độ bóng và mượt, đồng thời dưỡng tóc để trông khỏe mạnh hơn Thành phần của chất điều hòa bao gồm các chất béo như dầu thực vật và sáp, chất thủy phân protein như collagen và tơ tằm, cùng với các hợp chất amoni bậc 4, silicone và polymer cationic như polyquaternium-10 và polyquaternium-16.
- Các thành phần hoạt tính:
Các thành phần hoạt tính trong dầu gội được sử dụng để kiểm soát các vấn đề về da đầu và tóc như gàu, viêm da tiết bã, tăng tiết bã nhờn, bệnh vẩy nến và nấm da đầu Tùy thuộc vào mục đích sử dụng, có nhiều nhóm chất khác nhau trong các sản phẩm này Chẳng hạn, dầu gội trị gàu thường chứa các hoạt chất như selen disulfide, kẽm pyrithione, piroctone olamine, ketoconazole và ciclopirox olamine.
Các thành phần trong dầu gội được phối hợp với tỉ lệ và nồng độ nhất định, đảm bảo sản phẩm đạt tiêu chuẩn chất lượng cần thiết.
1.5.2 Dầu gội thảo mộc hỗ trợ điều trị gàu
Từ xa xưa, con người đã sử dụng thảo mộc và chiết xuất tự nhiên để chăm sóc tóc và làm đẹp Hiện nay, sản phẩm mỹ phẩm chiết xuất từ thiên nhiên ngày càng được ưa chuộng, đặc biệt là dầu gội thảo mộc Với ưu điểm an toàn và thân thiện với môi trường, dầu gội thảo mộc đang trở thành xu hướng nổi bật trên thị trường tiêu dùng.
Các sản phẩm dầu gội trị gàu hiện nay không chỉ mang lại hiệu quả điều trị gàu mà còn có thể gây ra nhiều tác dụng phụ như khô da đầu, kích ứng da và rụng tóc Do đó, việc nghiên cứu và phát triển các loại dầu gội trị gàu sử dụng thành phần tự nhiên đang trở thành xu hướng mới nhằm giảm thiểu những tác động không mong muốn này.
Năm 2015, Padma và cộng sự đã tiến hành nghiên cứu so sánh hiệu quả điều trị gàu của các sản phẩm dầu gội trị gàu phổ biến như Clear, Head & Shoulders, Pantene, Vivel Ultra Pro, Dove và Nizoral với các chiết xuất thảo dược Nhóm tác giả đã thực hiện việc phân lập để đánh giá khả năng của từng sản phẩm trong việc kiểm soát tình trạng gàu.
THỰC NGHIỆM VÀ NỘI DUNG NGHIÊN CỨU
Mục tiêu và nội dung nghiên cứu
Hơn 50% dân số thế giới hiện nay phải đối mặt với tình trạng gàu, một vấn đề không thể loại bỏ hoàn toàn nhưng có thể được quản lý hiệu quả Các thành phần hóa học kháng nấm trong dầu gội trị gàu giúp kiểm soát tình trạng này, nhưng việc sử dụng lâu dài có thể gây ra tác dụng phụ như ngứa, kích ứng và khô tóc Do đó, các thành phần tự nhiên ngày càng được ưa chuộng trong sản phẩm dầu gội như một giải pháp thay thế để kiểm soát gàu và các vấn đề về da đầu Nghiên cứu này nhằm xây dựng công thức dầu gội ổn định và hiệu quả trong việc kiểm soát gàu, đồng thời khảo sát hoạt tính kháng gàu của 15 loại thảo dược tại Việt Nam thông qua khả năng kháng nấm trên Malassezia furfur, từ đó kết hợp các thảo dược vào sản phẩm dầu gội để tăng cường hiệu quả kháng gàu.
Từ mục tiêu nghiên cứu đã đề ra, nội dung nghiên cứu bao gồm:
- Khảo sát sự ảnh hưởng và lựa chọn hàm lượng của các thành phần trong dầu gội.
- Xây dựng công thức dầu gội.
- Đánh giá dầu gội đã được xây dựng.
- Khảo sát hoạt tính kháng nấm của các thảo dược Việt Nam trênM furfur.
Xử lý và đánh giá tính chất của nguyên liệu.
Chiết xuất cao tổng từ các mẫu nguyên liệu trong ethanol tuyệt đối.
Khảo sát hoạt tính kháng nấm của các chiết xuất trênM furfur.
Chọn các chiết xuất có hoạt tính khángM furfur nổi bật để phối trộn và khảo sát tương tác của chúng đến hoạt tính kháng nấm của hỗn hợp.
Tiến hành kết hợp vào dầu gội và đánh giá lại dầu gội.
Thiết bị, dụng cụ và môi trường sử dụng
2.2.1 Thiết bị và dụng cụ
- Máy đo độ ẩm Satorius MA37-1.
- Máy đồng hóa HG-15D (Daihan Scientific).
- Máy đo pH Starter 5000 (Ohaus).
- Cân 5 số, cân 2 số, máy khuấy,…
- Máy quang phổ tử ngoại khả kiến UV-Vis Thermo Genesys 10S UV-Vis.
- Các dụng cụ như đĩa petri, đĩa 96 giếng, bộ lọc chân không, erlen,…
Các thiết bị và dụng cụ thuộc Phòng Thí nghiệm Hóa Dược (401B2) trường Đại học Bách Khoa, Đại học Quốc gia Tp HCM.
2.2.2 Môi trường nuôi cấy sử dụng
+ PDA (Potato Dextrose Agar): môi trường giữ giống
+ PDB (Potato Dextrose Broth): môi trường hoạt hóa nấm
+ MHA (Mueller Hinton): môi trường thử nghiệm khả năng kháng vi sinh vật
Các môi trường sử dụng được hấp khử trùng ở 121 o C trong 15 phút trước khi sử dụng.
2.2.3 Vi sinh vật thử nghiệm
Malassezia furfur (Pityrosporum ovale) là một loại nấm men thuộc họ Malassezia, có khả năng ưa keratin và lipid Để nuôi cấy, nấm được đặt trên thạch Potato Dextrose (PDA) có bổ sung 0,4% dầu ô liu vô trùng, sau đó được dán nhãn và ủ ở nhiệt độ 30 độ C trong khoảng 3 đến 7 ngày để phát triển khuẩn lạc.
Hình 2 1 Hình thái qua kính hiển vi và khuẩn lạc của Malassezia furfur
Phương pháp thực nghiệm và nội dung nghiên cứu
2.3.1 Xây dựng công thức dầu gội thảo dược có hoạt tính trị gàu
Dầu gội là sản phẩm kết hợp nhiều thành phần với công dụng đa dạng Sự tương tác giữa các thành phần ảnh hưởng đến cảm quan, độ ổn định và hoạt tính của dầu gội Đồng thời, hàm lượng sử dụng các chất phải tuân thủ quy định về mỹ phẩm, ảnh hưởng đến các đặc tính chung của sản phẩm.
Trong quá trình phát triển công thức dầu gội, lớp kết tủa xuất hiện ở đáy hộp chứa sau 2 tuần, ảnh hưởng đến cảm quan và làm giảm độ nhớt của sản phẩm Do đó, cần khảo sát tác động của các thành phần đến dầu gội, bao gồm khả năng tạo kết tủa, khả năng làm sạch và tạo bọt, khả năng làm đặc, và khả năng giữ ẩm.
Hình 2 2 Mẫu dầu gội bị kết tủa sau 2 tuần
Bảng 2 1 Công thức thử nghiệm ban đầu
STT Thành phần Hàm lượng (% w/w)
Trong đó, thành phần cao thảo dược và tinh dầu được cung cấp từ Công ty TNHH
Notessen là một loại cao thảo dược được chiết xuất từ quả bồ kết, lá dâu tằm và dâu khổ qua, với các thành phần cụ thể được liệt kê trong Bảng 2.2 Ngoài ra, thành phần của tinh dầu cũng được trình bày chi tiết trong Bảng 2.3.
Bảng 2 2 Thành phần thảo dược dùng để chiết xuất
STT Thành phần Hàm lượng (% w/w)
Bảng 2 3 Thành phần của tinh dầu dầu gội
2.3.1.1 Khảo sát nồng độ tạo kết tủa của cao thảo dược (cao) và các cationic polymer Để khảo sát khả năng tạo kết tủa của cao, cao được hòa tan trong nước cất để thu được dung dịch mẫu (mẫu cao) có hàm lượng cao lần lượt là 2; 3; 4; 5; 8 và 10%w/w Các chất polyquaternium-7 (PQ-7), polyquaternium-10 (PQ-10), hỗn hợp PQ-7: PQ-10 = 2:
Guar hydroxypropyltrimonium chloride (GHC) được sử dụng với hàm lượng 3% w/w và được hòa tan trong mẫu cao ở nhiệt độ từ 60 đến 65 độ C Các mẫu trắng chứa mẫu cao với các nồng độ khác nhau cũng được chuẩn bị Sau hai tuần, các mẫu được quan sát để đánh giá khả năng tạo kết tủa của cao, từ đó lựa chọn hàm lượng cao phù hợp cho việc sử dụng trong dầu gội.
STT Thành phần Hàm lượng (% w/w)
4 Tinh dầu hương nhu trắng 5,0
Dựa trên kết quả thí nghiệm, hàm lượng cao được chọn để khảo sát thêm với các mức khác nhau, dựa trên hàm lượng cho phép của PQ-7, PQ-10, và hỗn hợp PQ-7: PQ-10 cùng GHC nhằm đánh giá khả năng tạo kết tủa Khả năng tạo kết tủa sẽ được xác định sau 2 tuần Hàm lượng cao chiết sử dụng và các cationic polymer trong chế phẩm dầu gội phù hợp để hạn chế hiện tượng kết tủa.
Bảng 2 4 Hàm lượng các chất cationic polymer được khảo sát (% w/w)
2.3.1.2 Xác định tính chất của cao thảo dược ở hàm lượng được lựa chọn
Dựa trên kết quả từ Phần 2.3.1.1, các tính chất được khảo sát bao gồm cảm quan, độ pH, khả năng tạo bọt, khả năng làm sạch, hàm lượng saponin và hàm lượng polyphenol của cao với hàm lượng đã lựa chọn.
- Về cảm quan, quan sát màu sắc, mùi và độ trong.
- Độ pH được xác định bằng máy đo độ pH Starter 5000 (Ohaus) của dung dịch chứa 1% w/wdầu gội ở nhiệt độ 25±2 o C.
- Khả năng tạo bọt và làm sạchđược khảo sát tương tự Phần 2.3.1.3.
- Xác định hàm lượng saponin:
Lượng saponin tổng được xác định theo phương pháp của Perez cùng cộng sự (năm
Phương pháp xác định hàm lượng saponin tổng trong cao bồ kết được điều chỉnh từ nghiên cứu của V Le cùng cộng sự (2018) và dựa trên phản ứng tạo màu của nhóm triterpenoid với thuốc thử vanillin – sulfuric acid Kết quả được định lượng dựa trên đường chuẩn oleanolic acid.
PQ-7 PQ-10 PQ-7: PQ-10 GMC
Để lập đường chuẩn, dung dịch oleanolic acid với các nồng độ khác nhau (0; 100; 200; 300; 400; 500; 600; 700 ppm trong ethanol 80% v/v) được trộn với 300 μl dung dịch vanillin 8% và 3000μl H2SO4 72% Hỗn hợp này được ủ ở 60 o C trong 10 phút, sau đó làm lạnh trong 10 phút Độ hấp thu được đo tại bước sóng 538 nm, với thí nghiệm được lặp lại 3 lần để lấy giá trị trung bình Hàm lượng saponin trong mẫu cao được xác định theo quy trình tương tự.
Hàm lượng ước tính của saponin tổng được xác định theo công thức:
� Trong đó: TTS: Khối lượng saponin tổng tính trên 1g cao khô (mg OLE/g cao)
�: Thể tích mẫu (ml) m: Khối lượng cao khô (mg)
� ��� : Giá trị x trong công thức đường chuẩn saponin (mg/ml)
Hình 2 3 đường chuẩn oleanolic acid
- Xác định hàm lượng polyphenol:
Hàm lượng polyphenol trong cao bồ kết được xác định bằng phương pháp Folin-Ciocalteau theo nghiên cứu của Singlenton và cộng sự (1999) Trong môi trường kiềm, các hợp chất phenolic sẽ bị oxy hóa, tạo ra hợp chất có màu xanh khi phản ứng với thuốc thử Folin-Ciocalteau Độ hấp thu của hợp chất này được đo ở bước sóng 760 nm, và hàm lượng polyphenol được tính toán dựa trên đồ thị đường chuẩn của axit gallic.
Để lập đường chuẩn, thuốc thử Folin-Ciocalteau (200μl) được pha trộn với 40μl dung dịch axit gallic ở các nồng độ khác nhau (0; 0,02; 0,04; 0,06; 0,08; 0,1 mg/ml) Các mẫu sau đó được đồng nhất bằng cách sử dụng bể lắc siêu âm trong 5 phút ở nhiệt độ phòng.
Na2CO3 20% (600 μl) được thêm vào 3160 μl nước cất và siêu âm trong 30 phút ở nhiệt độ phòng Mật độ quang được đo ở bước sóng 760 nm Thí nghiệm được lặp lại 3 lần để lấy giá trị trung bình Các mẫu được chuẩn bị và đo theo quy trình lập đường chuẩn Hàm lượng polyphenol được xác định bằng công thức.
� Trong đó: TPE: Khối lượng polyphenol tổng tính trên 1g cao khô (mg GAE/g cao)
�: Thể tích mẫu (ml) m: Khối lượng cao khô đem đi pha mẫu (mg)
� ��� : Giá trị x trong công thức đường chuẩn polyphenol (mg/ml)
Hình 2 4 Đường chuẩn Gallic acid 2.3.1.3 Khảo sát khả năng làm sạch và tạo bọt
Khả năng làm sạch và tạo bọt của dầu gội chủ yếu phụ thuộc vào bản chất và nồng độ của các chất hoạt động bề mặt (HĐBM) Các chất HĐBM được sử dụng trong dầu gội bao gồm cao thảo dược, sodium lauroyl sarcosinate (SLSr), sodium methyl cocoyl taurate (SMCT), decyl glucoside và cocamidopropyl betain (CAB) Nghiên cứu này khảo sát khả năng làm sạch và tạo bọt của từng chất HĐBM riêng biệt, đồng thời CAB và decyl glucoside được chọn để nghiên cứu ảnh hưởng đến dầu gội ở các hàm lượng khác nhau như trình bày trong Bảng 2.5, trong khi các thành phần khác được giữ cố định.
Bảng 2 5 Hàm lượng của CAB và decyl glucoside được khảo sát (% w/w)
Chất HĐBM CAB Decyl glucoside
MA MB MC MD ME MF MG MH
+ Khảo sát khả năng tạo bọt
Khảo sát khả năng tạo bọt và ổn định bọt được thực hiện theo TCVN 5817-1994 và phương pháp lắc của José Guitián (1996) với một số điều chỉnh Trong thử nghiệm, dung dịch dầu gội 1% (50 ml) được cho vào ống đong 250 ml và đậy kín bằng màng bọc thực phẩm Sau đó, ống đong được lắc trong 1 phút, và tổng thể tích bọt được ghi nhận bằng cách đo chiều cao cột bọt tạo thành Sau 5 phút giữ cố định, cột bọt được đo lại để xác định phần trăm tạo bọt bằng công thức.
�� 100 Trong đó: �: Phần trăm tạo bọt của mẫu (% v/v)
� � : Thể tích cột bọt (ml)
� � : Thể tích mẫu dầu gội bao đầu (� � P ml) + Khảo sát khả năng làm sạch
Khả năng làm sạch của sản phẩm được đánh giá thông qua sợi len, trong đó 10% w/w dầu olive được thêm vào sợi len Sợi len được ngâm trong 200 ml dung dịch dầu gội 1% ở nhiệt độ 30±2 o C, khuấy đều trong 4 phút với tốc độ khoảng 50 lần/phút Sau đó, sợi len được lấy ra, sấy khô và cân để xác định lượng dầu đã loại bỏ Mẫu đối chứng được chuẩn bị tương tự nhưng sử dụng nước cất thay vì dung dịch dầu gội Lượng dầu loại bỏ được tính toán theo công thức cụ thể.
� 100 Trong đó: DP: Phần trăm tẩy rửa (%)
C: Khối lượng sợi len ban đầu (g) T: Khối lượng sợi len sau khi sấy (g) D: Khối lượng dầu olive được sử dụng (g)
KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN
Ảnh hưởng của các thành phần đến dầu gội
Dầu gội là sản phẩm được tạo ra từ nhiều thành phần khác nhau, mỗi thành phần mang lại công dụng riêng Sự tương tác và tỷ lệ của các thành phần này ảnh hưởng trực tiếp đến đặc tính và hiệu quả của dầu gội Do đó, việc nghiên cứu các thành phần là cần thiết để hiểu rõ tác động của chúng đối với sản phẩm Nghiên cứu tập trung vào khả năng gây keo tụ, khả năng làm sạch và tạo bọt, cũng như khả năng làm đặc và giữ ẩm của dầu gội.
3.1.1 Khảo sát nồng độ tạo kết tủa của cao thảo dược và các cationic polymer a) Khảo sát hàm lượng cao thảo dược
Cao thảo dược, chiết xuất từ quả bồ kết, lá dâu tầm và dây khổ qua, chứa hàm lượng lớn saponin, một chất hoạt động bề mặt tự nhiên với khả năng tẩy rửa nhẹ Dịch chiết này còn giàu polyphenol và pectin, một polysaccharide có cấu trúc phân tử đặc biệt, cho phép tương tác tĩnh điện với các ion dương Các chất như polyquaternium-7, polyquaternium-10 và guar hydroxypropyltrimonium chloride (GHC) được sử dụng trong dầu gội để trung hòa tĩnh điện, mang lại cảm giác mượt mà cho tóc và làm đặc hệ Pectin và các chất cation này có thể liên kết ion với nhau, tạo thành các chuỗi dài gây hiện tượng keo tụ, ảnh hưởng đến màu sắc và độ đặc của dầu gội Do đó, cần khảo sát hàm lượng cao thảo dược trong dầu gội để xác định ngưỡng keo tụ, tức nồng độ mà quá trình keo tụ bắt đầu xảy ra.
Hình 3 1 Công thức phân tử: A-Pectin, B-PQ-7, C-PQ-10 và D-GHC
Bảng 3 1 Khảo sát ngưỡng keo tụ của cao thảo dược ở các hàm lượng khác nhau
Nồng độ cao thảo dược 2% w/w 3% w/w 4% w/w 5% w/w 8% w/w 10% w/w
Chú thích: (-) : Dung dịch không có kết tủa và không bị đục
(+): Dung dịch bị đục nhưng không có xuất hiện kết tủa (++): Dung dịch có kết tủa
Kết quả từ bảng 3.1 xác nhận giả thuyết về sự hình thành keo tụ giữa pectin trong cao thảo dược và các polymer cationic là chính xác Khi đạt ngưỡng keo tụ, dung dịch chuyển màu đột ngột và xuất hiện hiện tượng lắng đọng so với mẫu đối chứng Tại hàm lượng 3% w/w của các polymer cationic, hầu hết các chất đều gây keo tụ với cao thảo dược ở nồng độ 2-10% w/w, ngoại trừ PQ-10 chỉ có hiện tượng keo tụ tại 5% w/w cao Dựa trên cảm quan màu sắc mong muốn của sản phẩm, hàm lượng 3% w/w cao thảo dược đã được chọn để tiến hành các thí nghiệm tiếp theo.
Nghiên cứu về ngưỡng keo tụ của các polymer cationic được thực hiện với nồng độ 3%w/w, tại các hàm lượng khuyến nghị sử dụng trong mỹ phẩm Kết quả khảo sát được thể hiện trong Bảng 3.2.
Bảng 3 2 Khả năng gây kết tủa của các polymer cationic ở các nồng độ khác nhau
Hàm lượng PQ-7 PQ-10 PQ-7: PQ-10
Chú thích: (-) : Dung dịch không có kết tủa và không bị đục
(+): Dung dịch bị đục nhưng không có xuất hiện kết tủa (++): Dung dịch có kết tủa
Khả năng keo tụ của polymer cationic và pectin phụ thuộc vào bản chất và hàm lượng sử dụng Ở nồng độ 3% w/w, PQ-7 gây keo tụ ở 1,5% w/w, GHC ở 0,5% w/w, trong khi PQ-10 không hình thành keo tụ GHC ở 0,5% w/w tạo kết tủa lắng đọng, nhưng không ở nồng độ cao hơn Khi nồng độ vượt ngưỡng keo tụ, sản phẩm sẽ lắng xuống đáy, với kết tủa dễ quan sát hơn ở nồng độ cao GHC hình thành liên kết liên phân tử với nước, làm cho các hạt GHC trương nở và giữ lại trong dung dịch Khi GHC tương tác với pectin, dung dịch chỉ bị đục mà không có kết tủa Sự kết hợp 1,5% w/w PQ-10 với PQ-7 cho thấy không có keo tụ ở tỉ lệ 3:1, cho phép sử dụng PQ-10 và PQ-7 với nồng độ dưới 2% và 1% w/w.
3.1.2 Khảo sát tính chất của cao thảo dược ở nồng độ sử dụng
Cao thảo dược với hàm lượng saponin cao có ảnh hưởng tích cực đến khả năng làm sạch và tạo bọt của dầu gội Nghiên cứu này khảo sát cao thảo dược với 3% w/w trong dầu gội, tập trung vào các tính chất như cảm quan, khả năng tạo bọt, khả năng làm sạch, pH, hàm lượng saponin và hàm lượng polyphenol tổng.
Bảng 3 3 Các đặc tính của cao thảo dược ở 3% w/w trong dầu gội Đặc tính Thông số được xác định
Cảm quan Lỏng, màu nâu sẵm, mùi thảo dược
Cột bọt ban đầu (ml) 107,3
Cột bọt sau 5 phút (ml) 104,7
Phần trăm làm sạch (%) 61,35 pH 5,80
Hàm lượng saponin (mg OLE/g dầu gội) 93,10
Hàm lượng polyphenol tổng (mg GAE/g dầu gội) 0,94
Cao thảo dược có mùi hương tự nhiên và màu nâu sẫm, chứa hàm lượng saponin cao lên tới 93,10 mg OLE/g dầu gội Mặc dù khả năng làm sạch chỉ đạt 61,35% và tạo bọt ít (53,42%) ở hàm lượng sử dụng thấp, nhưng cột bọt vẫn ổn định sau 5 phút thử nghiệm Điều này được giải thích bởi tính chất tẩy rửa nhẹ nhàng của saponin chiết xuất từ thiên nhiên.
3.1.3 Ảnh hưởng của các chất hoạt động bề mặt đến khả năng làm sạch và tạo bọt
Dầu gội có công dụng chính là làm sạch, giúp loại bỏ bụi bẩn và bã nhờn từ da đầu bám trên tóc Khả năng làm sạch này phụ thuộc vào bản chất và hàm lượng các chất HĐBM Bên cạnh đó, khả năng tạo bọt cũng rất quan trọng; dầu gội tạo nhiều bọt thường mang lại cảm giác sạch sẽ và thoải mái hơn khi sử dụng Mặc dù khả năng tạo bọt ít ảnh hưởng đến khả năng tẩy rửa của chất HĐBM, nhưng nó vẫn là tiêu chí quan trọng trong việc đánh giá chất lượng sản phẩm tẩy rửa.
Các chất hoạt động bề mặt (HĐBM) được khảo sát nhằm xác định hàm lượng tối ưu cho dầu gội, bao gồm cao thảo dược, sodium lauroyl sarcosinate (SLSr), sodium methyl cocoyl taurate (SMCT), cocamidopropyl betain (CAB) và decyl glucoside (DG) Trong đó, CAB và decyl glucoside được thử nghiệm với các hàm lượng khác nhau, cụ thể là 7-10% w/w cho CAB và 3-6% w/w cho decyl glucoside.
Hình 3 2 Khả năng tạo bọt và làm sạch của các chất hoạt động bề mặt
Hình 3.2 cho thấy các chất HĐBM có khả năng làm sạch và tạo bọt hiệu quả, với cột bọt ổn định sau 5 phút Tuy nhiên, cao thảo dược có hiệu quả làm sạch chỉ đạt 61,35% w/w và tạo bọt 53,42% v/v, thấp hơn nhiều so với các chất HĐBM khác Sự chênh lệch này có thể do hoạt động tẩy rửa của cao thảo dược phụ thuộc vào hàm lượng saponin, một chất HĐBM không ion với khả năng tẩy rửa dịu nhẹ Hơn nữa, chỉ 3% w/w cao thảo dược được sử dụng trong dầu gội, dẫn đến khả năng làm sạch và tạo bọt kém hơn so với các chất HĐBM khác.
Hình 3 3 Ảnh hưởng của CAB và decyl glucoside đến khả năng tạo bọt và làm sạch
Kết quả thử nghiệm cho thấy khi tăng hàm lượng chất HĐBM, khả năng tạo bọt và làm sạch đều tăng Mặc dù khả năng tạo bọt của các mẫu không thay đổi nhiều, khả năng làm sạch lại tăng đáng kể Hàm lượng chất HĐBM ảnh hưởng không đáng kể đến màu sắc, pH, và độ nhớt của dầu gội Dầu gội có khả năng làm sạch thấp không loại bỏ được bụi bẩn và chất thải, tạo điều kiện cho vi sinh vật gây hại phát triển Ngược lại, dầu gội có hoạt động tẩy rửa quá mạnh có thể làm khô tóc và da đầu, gây kích ứng cho da nhạy cảm Do đó, dầu gội cần có khả năng làm sạch vừa phải, với 9% w/w CAB và 4% w/w decyl glucoside là hàm lượng thích hợp.
3.1.4 Khảo sát khả năng tạo đặc của dầu gội Độ đăc của sản phẩm là một tiêu chí chất lượng quan trọng, cảm quan tốt khi dầu gội có thể chảy thành dòng Độ nhớt cần đủ đặc để giữ trên tay trong quá trình gội nhưng vẫn cần đủ lỏng để lấy ra dễ dàng từ vật chứa Do vậy, khả năng làm đặc của các chất trong dầu gội cũng cần được khảo sát Đối tượng khảo sát được lựa chọn là polyquaternium-10 và PEG-120 methyl glucose dioleate (PEG-120) Khả năng làm đặc của dầu gội được đánh giá trong hai trường hợp: chỉ sử dụng PQ-10 hoặc PEG-120 và sử dụng kết hợp hai chất này.
Hình 3 4 Khả năng làm đặc của PQ-10 và PEG-120
Kết quả từ Hình 3.4 cho thấy độ nhớt của các chất thay đổi không tuyến tính theo nồng độ Khi kết hợp PQ-10 và PEG-120, độ nhớt của dầu gội tăng nhanh và cao hơn so với việc chỉ sử dụng PQ-10 hoặc PEG-120 để làm đặc Khả năng làm đặc của PQ-10 và PEG-120 thể hiện rõ rệt trong sản phẩm dầu gội.
Cấu trúc phân tử của PQ-10 và PEG-120 cho phép chúng tạo liên kết hydro với nước, dẫn đến sự trương nở và độ đặc cho dung dịch Các sản phẩm dầu gội thường có độ đặc từ 3000 đến 7000 cSt, vì vậy hàm lượng PQ-10 và PEG-120 được lựa chọn là 1,5% và 1% w/w tương ứng.
Hình 3 5 Cấu trúc của PEG-120 methyl glucose dioleate 3.1.5 Khảo sát ảnh hưởng của dầu Sacha inchi đến dầu gội
Dầu Sacha inchi, chiết xuất tự nhiên, được sử dụng trong dầu gội để giữ ẩm cho tóc và da đầu Việc sử dụng chất HĐBM trong dầu gội có thể làm mất đi lượng dầu tự nhiên, dẫn đến tình trạng khô tóc và da đầu Tóc khô dễ bị xơ rối và chẻ ngọn, trong khi da đầu có thể bong tróc, làm giảm sức khỏe của tóc Do đó, bổ sung thành phần giữ ẩm là cần thiết trong dầu gội Nghiên cứu này khảo sát ảnh hưởng của dầu Sacha inchi ở hàm lượng 0,2-2% w/w, với các thành phần khác được giữ cố định.
Bảng 3 4 Ảnh hưởng của dầu Sacha inchi đến đầu gội
Sàng lọc và khảo sát hoạt tính kháng nấm gàu của các loại thảo dược trên
Nấm men M furfur thường cư trú xung quanh các nang lông, có khả năng chuyển hóa lipid phức tạp thành các dạng đơn giản, góp phần hỗ trợ quá trình sinh trưởng của tóc.
M furfurkhông hấp thụ được, sẽ tác động trực tiếp và làm bong tróc lớp sừng trên da đầu Đây là nguyên nhân chính gây ra gàu Vì thế, việc ức chế M furfur có thể giúp kiểm soát gàu hiệu quả Nhiều nghiên cứu đã xác định rằng các hợp chất terpenoid và một số hợp chất thơm có khả năng ức chếM furfurthông qua cơ chế ức chế sinh tổng hợp thành tế bào nấm Nghiên cứu đã lựa chọn 14 loại thảo mộc ở Việt Nam có chứa hàm lượng lớn terpenoid và hợp chất thơm để tiến hành khảo sát.
3.2.1 Hiệu suất thu cao tổng
Các chất chuyển hóa thứ cấp trong thảo dược như rễ, vỏ, thân, lá, hoa, quả và hạt đã được chứng minh là có khả năng kháng nấm tự nhiên Nghiên cứu này lựa chọn một số thảo dược giàu terpenoid như chanh, lá hương thảo, kinh giới, tràm trà, hạt mùi già, hạt thì là, thân củ gừng, lá thanh cao, lá sả chanh, vỏ bưởi và bạc hà, cùng với các thảo dược chứa hợp chất thơm cao như hương nhu, lá trầu không và lá neem, để khảo sát khả năng kháng nấm Malassezia furfur.
Ngoài ra, nghiên cứu còn khảo sát hoạt tính kháng nấm của saponin có trong qua Bồ kết.
Các đối tượng nghiên cứu được chiết xuất với các điều kiệu như sau:
- Dung môi: EtOH tuyệt đối.
- Tỉ lệ rắn: lỏng = 1: 7 g/ml
Hình 3 8 Hiệu suất chiết xuất cao tổng của các đối tưởng nghiên cứu
Do sự không đồng bộ trong nghiên cứu các thảo dược về bộ phận sử dụng, cấu trúc và thành phần hoạt chất, hiệu suất chiết xuất có sự chênh lệch Theo Hình 3.7, hương thảo đạt hiệu suất chiết xuất tốt nhất với 29,05% nhờ vào cấu trúc lá ít chất xơ, giúp hoạt chất được chiết xuất nhiều hơn Ngoài ra, sả chanh, bạc hà, trầu không, neem, thanh cao và tràm trà cũng cho thấy hiệu suất thu hồi cao, dao động từ 20,67% đến 26,82%.
3.2.2 Khảo sát khả năng kháng nấm của các thảo dược trên Malassezia furfur
Các chiết xuất thảo dược có khả năng kháng nấm đa dạng và khác nhau về tỉ lệ thành phần Nghiên cứu này đánh giá hiệu quả kháng nấm của cả cao chiết từ ethanol tuyệt đối và tinh dầu.
3.2.2.1 Khả năng kháng nấm của cao chiết trong ethanol tổng trên M furur
Mục tiêu của nghiên cứu là xác định và so sánh hoạt tính kháng nấm của M furfur đối với các cao chiết thảo dược thông qua phương pháp đo đường kính vòng ức chế Các thí nghiệm được thực hiện theo quy trình đã nêu trong Phần 2.3.3.5 và kết quả được ghi nhận sau 72 giờ, thời điểm mà nấm phát triển mạnh nhất.
Bảng 3 9 Khả năng ức chế nấm M furfur của các cao chiết
Thảo dược Đường kính của vòng ức chế (mm)
25 mg/ml 50 mg/ml 100 mg/ml 200 mg/ml Hương nhu trắng 19±1,41 26±0,00 28±2,83 38±0,00
Kết quả từ Bảng 3.7 cho thấy hầu hết các cao chiết từ thảo dược đều có hoạt tính kháng M furfur, với hiệu quả ức chế tăng dần theo nồng độ Đặc biệt, cao chiết trầu không, bạc hà và thì là thể hiện khả năng kháng nấm vượt trội, ức chế hoàn toàn sự sinh trưởng và phát triển của M furfur trong cả hai thời điểm khảo sát trước và sau 72 giờ.
Hình 3 9 Khả năng kháng nấm M.furfur của cao chiết trầu không, thì là và bạc hà
Kết quả nghiên cứu cho thấy cao chiết từ trầu không chứa nhiều polyphenol và terpenoid như eugenol và hydroxychavicol, góp phần giải thích hiệu quả của nó.
Các hợp chất như α-pinene, 1,8-cineole và p-coumaric acid trong thì là, cũng như menthol, p-coumaric acid và hesperidin trong bạc hà, đã cho thấy khả năng tương tác và ức chế các enzyme trong quá trình tổng hợp ergosterol, một sterol thiết yếu cho sự phát triển của nấm Ergosterol không chỉ đóng vai trò quan trọng trong tính lưu động và toàn vẹn của màng tế bào mà còn hỗ trợ chức năng enzym liên kết màng Ngoài ra, các hợp chất phenolic và saponin cũng có thể ảnh hưởng đến sự phát triển của nấm Đặc biệt, cao chiết hương nhu trắng cho thấy khả năng kháng nấm mạnh mẽ, với đường kính vòng ức chế tăng theo nồng độ, đạt hiệu quả tương đương với ketoconazole ở nồng độ thấp Kh
Nghiên cứu khả năng kháng nấm của cao chiết lá hương nhu đối với M furfur cho thấy ở nồng độ 200 mg/ml, đường kính vòng ức chế đạt 20,50 mm, thấp hơn 1,85 lần so với hương nhu trắng Sự khác biệt này xuất phát từ nguồn nguyên liệu và phương pháp chiết xuất khác nhau giữa Nigeria và Việt Nam, cũng như môi trường nuôi cấy (SDA và PDA) ảnh hưởng đến kết quả.
Cao chiết từ lá hương thảo thể hiện hoạt tính kháng M furfur với đường kính vòng ức chế tăng từ 15±1,41mm đến 24±2,83mm Ở nồng độ 200 mg/ml, khả năng ức chế của cao chiết tương đương với ketoconazole ở nồng độ 1,25 μg/ml Hoạt tính kháng nấm của cao chiết hương thảo chủ yếu được xác định bởi carnarol, acid carnosic và 1,8-cineole.
Kết quả thử nghiệm cho thấy M furur nhạy cảm với cao chiết tràm trà ở nồng độ lớn hơn 50 mg/ml Ở nồng độ 200 mg/ml, đường kính vòng ức chế M furur của cao chiết tràm trà lớn gấp 1,5 lần so với cao chiết lá hương thảo Khả năng kháng nấm mạnh của tràm trà được giải thích bởi hàm lượng lớn terpinene (1,8 – cineole) trong cao chiết, tác động đến quá trình chuyển hóa thứ cấp và ức chế sinh tổng hợp ergosterol.
Nghiên cứu cho thấy các cao chiết từ thảo dược có khả năng kháng M furfur, với hiệu quả ức chế tăng dần theo nồng độ thử nghiệm Các mẫu như kinh giới, mùi già, thanh cao, sả chanh và bồ kết chỉ thể hiện hoạt tính kháng nấm ở nồng độ cao nhất (200 mg/ml), với đường kính vòng ức chế từ 17±1.41 mm đến 24±2.83 mm Ngược lại, cao chiết từ chanh, lá neem và mẫu chứng âm DMSO không có khả năng kháng nấm Đặc biệt, các cao chiết từ trầu không, thì là, bạc hà, hương nhu, tràm trà, gừng và hương thảo cho thấy hoạt tính kháng M furfur nổi bật Do đó, các thảo dược này sẽ được tiếp tục thử nghiệm để xác định nồng độ ức chế tối thiểu (MIC) trên nấm M furfur.
3.2.2.2 Khả năng kháng nấm của tinh dầu trên Malassezia furur
Khả năng kháng M furfur của tinh dầu được đánh giá thông qua phương pháp xác định đường kính vòng ức chế sau 72 giờ, như mô tả ở Phần 2.3.3.5 Kết quả trong Bảng 3.8 cho thấy hầu hết các tinh dầu đều có khả năng ức chế sự phát triển của M furfur, và mức độ ức chế phụ thuộc vào nồng độ hoạt chất Ở nồng độ 20 mg/ml, các tinh dầu đều thể hiện hoạt tính kháng M furfur hiệu quả với đường kính vòng ức chế lớn hơn 15 mm.
Bảng 3 10 Khả năng ức chế nấm M furfur của tinh dầu
Tinh dầu mùi già thể hiện hoạt tính mạnh mẽ trong việc ức chế hoàn toàn M furfur ở các nồng độ khác nhau Phân tích GC-MS cho thấy thành phần chính của tinh dầu này là 2-decenal (32,7%), có khả năng ngăn chặn sự phát triển của sợi nấm và hạn chế sản sinh bào tử Bên cạnh đó, tinh dầu mùi già cũng chứa linalool (27,9%), góp phần tăng cường hiệu quả chống nấm.
Thảo dược Đường kính của vùng ức chế (mm)
2,5 mg/ml 5,0 mg/ml 10 mg/ml 20 mg/ml
Bưởi 0 10±2,83 14±0,00 17±1,41 khả năng gây tổn thương cấu trúc thành tế bào, ức chế hô hấp và làm rối loạn quá trình trao đổi chất [101].
