TỔNG QUAN
Vị trí phân loại, đặc điểm thực vật và phân bố chi Sanchezia
Theo hệ thống phân loại của A Takhtajan, Sanchezia nobilis Hook.f thuộc giới Thực vật (Plantae), ngành Ngọc lan (Magnoliophyta), phân lớp Mộc lan (Magnoliidae Novák ex Takht), bộ Hoa môi (Lamiales), họ Ô rô (Acanthaceae), và chi Sanchezia.
1.1.2 Thành phần loài và phân bố của chi Sanchezia
Chi Sanchezia chủ yếu phân bố ở phía Tây Nam Mỹ, với trung tâm đa dạng loài tại Peru và Ecuador Một số loài cũng có mặt ở Bắc Mỹ, Trung Mỹ và Caribe, nhưng hiện nay chi này đã được di thực và trồng ở nhiều nơi, trở thành cây bản địa tại Việt Nam, Cuba, và Bangladesh Chi Sanchezia lần đầu được mô tả bởi Ruiz và Pavón vào năm 1794 với hai loài, sau đó được Emery C Leonard và Lyman B Smith sửa đổi vào năm 1964, công nhận 59 loài, trong đó 26 loài được mô tả lần đầu Đến năm 2015, E.A Tripp và D M Koenemann đã thống kê lại và lập danh lục 55 loài Theo "Plants of the World Online", tính đến ngày 15 tháng 10 năm 2022, chi Sanchezia có 70 kết quả, bao gồm 1 tên chi và 69 tên loài, trong đó 44 loài được chấp nhận Gần đây, Igor và Pedro đã xác định thêm 11 tên đồng nghĩa cho chi này.
Sanchezia comprises 44 species, and the classification results from Igor and Pedro align perfectly with the data presented on the "Plants of the World Online" platform Notably, Sanchezia oblonga is listed with 11 synonyms, including S hirsuta Pers.
Ancylogyne peruviana Nees, S bicolor Leonard & L.B.Sm, S flava Leonard, S helophila Leonard & L.B.Sm, S macbridei Leonard, S megalia Leonard &
L.B.Sm., S nobilis Hook.f., S nobilis var glaucophylla Lem, S peruviana (Nees) Rusby, S speciosa Leonard Như vậy 3 tên loài được nghiên cứu và công bố của chi là S nobilis, S speciosa và S oblonga thì được xác định là đồng danh
Bảng 1.1 Thành phần loài và phân bố của chi Sanchezia
STT Tên loài Phân bố TLTK
1 Sanchezia arborea Leonard & L.B Sm Peru b
2 Sanchezia aurantiaca Leonard & L.B Sm Peru a, b, c
3 Sanchezia aurea Leonard & L.B Sm Peru a, b, c
4 Sanchezia bicolor Leonard & L.B Sm Peru b
5 Sanchezia capitata (Nees) Lindau Peru b
6 Sanchezia coccinea Leonard & L.B Sm Peru a, b, c
7 Sanchezia coleifolia Leonard & L.B Sm Ecuador a, b, c
8 Sanchezia conferta Leonard, J.Wash Peru a, b, c
10 Sanchezia dasia Leonard & L.B Sm Peru a, b, c
11 Sanchezia decora Leonard & L.B Sm Peru b
12 Sanchezia ecuadorensis Leonard, J.Wash Ecuador a, b, c
13 Sanchezia ferreyrae Leonard & L.B Sm Peru a, b, c
15 Sanchezia flava Leonard, J.Wash Peru b
17 Sanchezia killipii Leonard, J.Wash Peru a, b, c
18 Sanchezia klugii Leonard & L.B Sm Peru a, b, c
19 Sanchezia lampra Leonard & L.B Sm Ecuador a, b, c
20 Sanchezia lasia Leonard & L.B Sm Peru a, b, c
21 Sanchezia lispa Leonard & L.B Sm Peru a, b, c
22 Sanchezia longiflora Hook f., Planch Ecuador,
26 Sanchezia megalia Leonard & L.B Sm Peru b
27 Sanchezia munita Nees, Planch Brazil a, b, c
Ecuador, Việt Nam, Bangladesh Brazil,… a, b, c
31 Sanchezia parviflora Leonard, J.Wash Ecuador,
32 Sanchezia pedicellata Leonard & L.B Sm Peru a, b, c
33 Sanchezia pennellii Leonard, J.Wash Colombia b
34 Sanchezia pulchra Leonard, J.Wash Peru a, b, c
35 Sanchezia punicea Leonard & L.B Sm Peru a, b, c
37 Sanchezia rhodochroa Leonard & L.B Sm Peru a, b, c
38 Sanchezia rosea Leonard, J.Wash Peru a, b, c
Peru, razil North, Colombia, Ecuador a, b, c
42 Sanchezia sericea Leonard, J.Wash Ecuador a, b, c
43 Sanchezia siraensis Leonard, J.Wash Peru a, b, c
44 Sanchezia skutchii Leonard & L.B Sm Ecuador b
45 Sanchezia speciosa Leonard, J.Wash Cuba b
47 Sanchezia stenantha Leonard, J.Wash Peru b
48 Sanchezia stenomacra Leonard & L.B Sm Peru b
49 Sanchezia sylvestris Leonard, J.Wash Peru a, b, c
50 Sanchezia tarapotensis Leonard & L.B.Sm Peru a, b, c
52 Sanchezia tigrina Leonard, J.Wash Peru a, b, c
53 Sanchezia villosa Leonard & L.B Sm Peru a, b, c
54 Sanchezia williamsii Leonard, J.Wash Peru a, b, c
55 Sanchezia woytkowskii Leonard & L.B Sm Peru a, b, c
57 Sanchezia xantha Leonard & L.B Sm Peru a, b, c
(a: phân loại theo trang “Plants of the world online”, b: phân loại theo E.A Tripp và D M Koenemann; c: phân loại theo “Igor và Pedro”)
Tại Việt Nam, loài Xăng xê (Sanchezia nobilis Hook.f.), còn gọi là Sanchezia speciosa, đã được phát hiện và mô tả bởi Phạm Hoàng Hộ Loài này được liệt kê trong Danh lục các loài thực vật ở Việt Nam Theo Trung tâm dữ liệu thực vật Việt Nam, mặc dù các nhà khoa học đã mô tả và đặt tên khác nhau cho cây, nhưng hiện nay tất cả đều được xác định là thuộc về một loài duy nhất.
Cây được trồng rộng rãi ở nhiều tỉnh thành như Tuyên Quang, Nam Định, và Thừa Thiên Huế, chủ yếu với mục đích làm cảnh Nguồn gốc của cây xuất phát từ Peru và Ecuador, nhưng sau nhiều năm trồng trọt, cây đã trở thành gần như cây bản địa và được ghi nhận trên bản đồ phân bố tại trang “Plants of the World Online”.
1.1.3.1 Đặc điểm chung của chi Sanchezia Sanchezia là một chi nhỏ của họ thực vật Acanthaceae (họ Ô rô) Ước tính có khoảng 20 đến 50 loài [215] Các thành viên của chi này là cây bụi, hiếm khi cây nhỏ hoặc cây thân thảo phân bố ở vùng đất thấp nhiệt đới Nam và Trung Mỹ Chi
Sanchezia là cây bụi hoặc cây cỏ với rễ không lông và hoa thường mọc đơn độc hoặc thành chùm, có màu sắc rực rỡ như vàng, cam, đỏ hoặc tím Hoa có đài 5 thùy, tràng 5 dính nhau thành hình ống, với 4 nhị và 2 nhị lép Quả nang chứa 6-8 hạt hình cầu Cây có cánh hoa lớn và nhiều màu sắc, cùng với lá đầy màu sắc, được trồng phổ biến làm cây cảnh ở vùng nhiệt đới và trong các khu vườn thực vật của vùng ôn đới.
S nobilis, S parvibracteata và S speciosa nhưng một số loài thì gần như đã tuyệt chủng như S lampra từ Ecuador Sanchezia được đặt tên theo José Sanchez, một giáo sư thực vật thế kỷ 19 tại Cadiz, Tây Ban Nha [39]
1.1.3.2 Đặc điểm loài Sanchezia nobilis Hook.F
Nguồn: www.nparks.gov.sg/florafaunaweb/flora/2/4/2418
Hình 1.1 Hình ảnh cây Sanchezia noilis Hook.f
Cây bụi cao từ 0,5 đến 1,5m, với thân và gân chính của lá có màu lục, đỏ hoặc vàng, gân bên màu trắng Lá đơn mọc đối hình chữ thập, cuống lá ngắn, phiến lá hình mũi mác dài từ 10 đến 25 cm và rộng từ 3 đến 7 cm, mặt trên xanh đậm, mặt dưới xanh nhạt với hệ gân lông chim có 9 - 12 đôi gân bên Hoa mọc thành cụm với từ 3 bông nhỏ trở lên, có cuống ngắn và lá bắc màu lục hay đỏ, hình trứng Hoa lưỡng tính có màu xanh lục mờ và mùi nhạt đặc trưng, đài hoa hình vảy dài từ 1,5 đến 1,8 cm và tràng hoa hình ống tròn màu vàng, cao 4 - 5 cm, thu hẹp dần xuống dưới Quả nang chứa 8 hạt.
Cả 3 loài đã có nghiên cứu được công bố về thành phân hóa học và tác dụng sinh học, nhưng chỉ có loài Sanchezia nobilis là được mô tả tương đối chi tiết và đầy đủ
* Đặc điểm vi phẫu loài Sanchezia nobilis Hook.F
Lá có cấu trúc vi phẫu đặc trưng với gân lá nổi lên ở cả hai mặt Biểu bì trên và dưới được tạo thành từ một hàng tế bào đa giác sắp xếp đều đặn Mô dày ở cả hai mặt bao gồm nhiều lớp tế bào có thành dày lên ở các góc Mô mềm chứa các tế bào thành mỏng, gần tròn, bên trong chứa tinh thể canxi oxalat và hạt tinh bột, cùng với các bó mạch phụ rải rác Libe gỗ được sắp xếp theo hình vòng cung, với libe ở phía ngoài và gỗ ở phía trong Ngoài ra, một số tế bào biểu bì phát triển thành lông che chở và lông tiết.
Vi phẫu phiến lá bao gồm biểu bì trên và biểu bì dưới, được cấu tạo bởi một hàng tế bào đa giác sắp xếp đều đặn Mô giậu nằm ngay dưới biểu bì trên, cấu tạo từ hai hàng tế bào hình chữ nhật sắp xếp đều Mô khuyết được hình thành từ các tế bào hình gần tròn, có sự sắp xếp lộn xộn.
Vi phẫu cuống lá hình chén, có các đặc điểm tương tự gân lá, tuy nhiên có thêm lớp mô dày sát lớp biểu bì [27]
Vi phẫu lá được thể hiện ở hình 1.2 [27]
Hình 1.2 Hình vẽ mô tả vi phẫu lá
Thân non có vi phẫu hình tròn, với cấu trúc từ ngoài vào trong bao gồm lớp biểu bì được tạo thành từ một hàng tế bào có lông che chở đơn bào Tiếp theo là mô dày với 6-8 hàng tế bào xếp thành hình tròn khép kín, và mô mềm gồm 5-7 lớp tế bào chứa tinh thể calcioxalat hình kim cùng các hạt tinh bột đơn Libe gần như hình tròn khép kín, với libe ở ngoài và gỗ ở trong, thỉnh thoảng bị gián đoạn bởi một số tế bào mô mềm Mô mềm ruột được cấu tạo bởi nhiều lớp tế bào, với các tế bào thành mỏng, to, và hình đa giác xếp lộn xộn với nhau.
Thân già: Vi phẫu hình vuông, cấu tạo tương tự thân non, ngoại trừ có thêm lớp bần bên ngoài cùng [27]
Vi phẫu thân được thể hiện ở hình 1.3 [27]
Hình 1.3 Hình vẽ mô tả vi phẫu thân
Mô dày trên Biểu bì
Tinh thể Calci oxalat Hạt tinh bột
Gỗ Tinh thể calci oxalat Hạt tinh bột
Nghiên cứu hình thái học của hoa cho thấy hoa được sắp xếp thành chùm, tạo thành cụm hoa đầu nhọn, phát triển từ dưới lên trên Những bông hoa lưỡng tính, không cuống, có kích thước nhỏ, không đều và đối xứng hai bên Hoa tỏa ra mùi đặc trưng thoang thoảng và có vị đắng nhẹ, dài khoảng 2,5 - 3,5 cm.
- Lá bắc: có màu xanh lục, hình thuôn hoặc hình thuôn dài với đỉnh nhọn có chiều dài 1,2 - 1,3 cm và chiều rộng 0,25 - 0,5 cm [27]
- Đài hoa: có màu xanh lục, bao gồm năm đài xen kẽ (đa giác), có chiều dài 1,3 - 1,5 cm và đường kính 0,2 - 0,4 cm, xếp lớp lên nhau [27]
Thành phần hóa học chi Sanchezia
Nghiên cứu về thành phần hóa học của các loài trong chi Sanchezia vẫn còn hạn chế, với chỉ một số loài được khảo sát Một nghiên cứu năm 2015 của Abu S R cho thấy dịch chiết ethyl acetat từ lá S speciosa ở Bangladesh chứa alcaloid, glycosid, flavonoid, triterpenoid, carbohydrat, steroid, phenolic, saponin và tannin Nghiên cứu của Nusrat Shaheen phát hiện alcaloid, glycosid, steroid, terpenoid và tannin trong dịch chiết vỏ thân và rễ S speciosa ở Pakistan, nhưng không có anthraquinon, flavonoid, saponin Omondi Seline (2015) chỉ ra rằng lá S speciosa trồng ở Kenya có chứa anthraquinon và saponin Progga và cộng sự đã báo cáo rằng S nobilis ở Bangladesh chứa phenolic, tannin, alcaloid, flavonoid, steroid, glycosid, gum, triterpenoid, nhưng không có saponin và xanthoprotein Tại Việt Nam, nghiên cứu năm 2017 của Nguyễn Tiến Vững cho thấy dịch chiết lá S speciosa ở Tuyên Quang có glycosid tim, flavonoid, tannin, acid hữu cơ, sterol và caroten, nhưng không có saponin, alcaloid, anthranoid, coumarin, acid amin và chất béo Sự khác biệt về thành phần hóa học giữa các nghiên cứu có thể do thời vụ thu hái, thổ nhưỡng và khí hậu khác nhau.
• Các nhóm hợp chất đã được xác định cấu trúc của Sanchezia
In 2017, Nusrat Shaheen and colleagues isolated a flavonoid compound, quercetin 3-O-β-D-glucopyranoside, from the dichloromethane extract of S speciosa roots Additionally, Ahmed E and associates identified three flavonoid compounds from the methanol extract of S nobilis flowers, including apigenin-7-O-β-glucopyranoside, apigenin-7-O-gentiobioside, and apigenin-7-O-β-glucuronopyranoside.
Hình 1 5 Các hợp chất flavonoid được phân lập từ chi Sanchezia
Nghiên cứu của Juliana Mourao Ravasi và cộng sự đã sử dụng phương pháp sắc ký khối phổ và sắc ký lỏng hiệu năng cao để phân tích các bộ phận khác nhau của loài S oblonga trồng ở Brazil, phát hiện 36 hợp chất, bao gồm các flavonoids như quercetin-7-O-arabinopyranosyl-3-O-glucopyranosid, kaempferol-7-O-arabinopyranosyl-3-O-glucopyranosid, kaempferol-7-O-glucopyranosid và quercetin-3-glucuronopyranosid.
Tại Việt Nam, nghiên cứu về thành phần hóa học của loài S speciosa đã được thực hiện, trong đó Bùi Thanh Tùng và cộng sự (2016) đã chiết xuất từ dịch ethanol của lá loài này và tách được hai hợp chất quan trọng là quercitrin và hyperosid.
Hai hợp chất lần đầu tiên được phân lập từ S speciosa, trong khi nghiên cứu của Vũ Đức Lợi và cộng sự vào năm 2019 đã chỉ ra rằng từ phân đoạn chiết ethyl acetat của lá S speciosa, các flavonoid như quercetin, quercetin-3-O-α-L-rhamnopyranosyl-(1→6)-β-D-glucopyranosyl-(1→3)-β-D-glucopyranosid, kaempferol-3-O-α-L-rhamnopyranosyl-(1→6)-β-D-glucopyranosid và epicatechin-3-O-arabinopyranosyl đã được xác định.
Nghiên cứu từ các tác giả quốc tế cho thấy chi Sachezia chứa nhiều hợp chất phenolic, đặc biệt là từ dịch chiết methanol của lá và rễ S nobilis Ahmed E và các cộng sự đã phân lập thành công các hợp chất như syringin, 4-O-β-glucopyranosyl dehydrodiconiferyl alcohol, cùng với hai hợp chất benzyl alcohol glycosid: 7-O-β-glucopyranosyl benzyl alcohol và 7-O-β-apiofuranosyl-(1→6)-.
In 2017, Nusrat Shaheen successfully isolated two phenolic compounds from the dichloromethane extract of S speciosa roots: p-hydroxyphenethyl-trans-ferulate and 4-hydroxybenzoic acid These compounds were identified as the first of their kind to be extracted from S speciosa roots.
Hình 1 6 Các hợp chất phenolic được phân lập từ chi Sanchezia
Juliana Mourao Ravasi và cộng sự đã sử dụng phương pháp sắc ký khối phổ và sắc ký lỏng hiệu năng cao để phân lập các hợp chất từ các bộ phận khác nhau của loài S oblonga trồng ở Brazil Nghiên cứu này đã phát hiện nhiều hợp chất polyphenol quan trọng.
O-coumaroyl-2-hydroxy propanal (21), 1-O-coumaroyl-2-O-arabinopyranosyl (22),
1-O-coumaroyl-2-O-rhamnopyranosyl propanal (23), ethyl rosmarinate (24), 4-O- arabinopyranosyl butyl sinapate (25), rosmarinic acid-3′-O-glucopyranosid (26), 4- hydroxy-3-methoxybenzyl (27), caffeic acid glucopyranosid (28), benzyl alcohol-7-
O-arabinopyranosyl (29), dihydrosinapic acid-O-glucopyranosid (30), 4-O-galloyl- sinapyl alcohol diacetate (31), sinapic acid-O-glucopyranosid (32) và 4-O- glucopyranosyl-ethyl-dihydrosinapat (33)
Nghiên cứu cho thấy, phần trên mặt đất của chi Sanchezia chứa nhiều acid và glycosid Năm 2013, Ahmed E Abd Ellah và cộng sự đã phân lập 5 hợp chất alcohol từ dịch chiết methanol của S speciosa, bao gồm 1-octen-3-ol, 3-O-β-glucopyranosyl-1-octen-3-ol, 3-O-β-glucopyranosyl-(1→6)-β-glucopyranosyl-1-octen-3-ol, 3-O-β-arabinopyranosyl-(1→6)-β-glucopyranosyl-1-octen-3-ol, và 3-O-β-arabinopyranosyl-(1→6)-β-glucopyranosyl-(1→6)-β-glucopyranosyl-1-octen-3-ol Từ cao chiết methanol của lá và rễ S speciosa, nhóm nghiên cứu cũng đã phân lập được 2 hợp chất, bao gồm 9-O-β-glucopyranosyl-trans-cinnamyl alcohol và 9-O-β-xylopyranosyl-(1→6)-.
O-β-glucopyranosyl-(1→6)-O-β-glucopyranosyl-trans-cinnamyl alcohol (40)
Nghiên cứu của Juliana Mourao Ravasi và cộng sự đã sử dụng phương pháp sắc ký khối phổ và sắc ký lỏng hiệu năng cao gắn khối phổ để xác định một số acid béo từ các bộ phận khác nhau của loài S oblonga trồng ở Brazil Các acid hữu cơ được phát hiện bao gồm ethyl octadecanoate, stearic acid và oleic acid.
(43), ethyl linoleate (44), 9,12-octadecadienal (45), linoleic acid (46), ethyl palmitate
(47), palmitic acid (48), acid nonadecylic acid (49)
Theo nghiên cứu của Lê Thị Hồng Nhung năm 2018, từ phân đoạn n-hexan của lá S speciosa, phương pháp sắc ký khối phổ (GC-MS) đã xác định được 14 acid béo, trong đó có stearic acid và oleic acid.
(43), palmitic acid (48), nonadecylic acid (49), acid lauric (50), acid myristic (51), acid pentadecylic (52), acid margaric (53), acid arachidic (54), acid eicosenoic (55), acid vaccenic (56), acid palmitoleic (57), acid linoleic (58), acid α-linolenic (59)
Hình 1 7 Các hợp chất acid hữu cơ và glycosid phân lập từ chi Sanchezia
Ngoài các nhóm hợp chất đã đề cập, một số nghiên cứu cho thấy chi Sanchezia cũng chứa các hợp chất terpen khác Cụ thể, vào năm 2017, Nusrat Shaheen và cộng sự đã xác định được từ cao chiết dichloromethan từ rễ của chi S Speciosa các hợp chất như (+)-3,13-clerodadien-16,15-olid-18-oic acid và stigmasterol 3-O-β-D-glucopyranosid.
Hình 1.8 Các hợp chất terpen được phân lập từ chi Sanchezia
Research by Juliana Mourao Ravasi and colleagues has identified various components from different parts of the S oblonga species cultivated in Brazil, including stigmasta-4,22-dien-3-one, sitosterol, stigmast-4-en-3-one, and campesterol.
Nghiên cứu cho thấy chi Sanchezia chứa nhiều hợp chất khác nhau Năm 2017, Nusrat Shaheen đã tách được hợp chất alcaloid 3-methyl-1H-benzoindole-4,9-dion từ cao chiết dichloromethan của rễ S speciosa Đến năm 2019, Vũ Đức Lợi và cộng sự đã phân lập một số hợp chất từ phân đoạn chiết ethyl acetat của lá S speciosa, bao gồm 3-methyl-1H-benzoindole-4,9-dion, scopoletin và 3′-O-methyl-3,4-methylenedioxy ellagic acid Ngoài ra, dịch chiết methanol từ lá và rễ S nobilis cũng chứa các hợp chất đáng chú ý.
Ahmed E và cộng sự đã phân lập được một hợp chất neolignan glucosid: 6,7,8- trimethoxy-cumarin (69)
Hình 1.9 Các hợp chất khác được phân lập từ chi Sanchezia Bảng 1 2 Các công bố về thành phần hóa học của chi Sanchezia trên Thế giới và Việt Nam
STT Năm công bố Tác giả Loài/Phân bố/BPD Các chất xác định Số
Rễ, lá, phần trên mặt đất
STT Năm công bố Tác giả Loài/Phân bố/BPD Các chất xác định Số
Vườn thực vật ĐH Maseno, Kenya Định tính [57]
Nusrat shaheen, Muhammad Uzair, Bashir Ahmad, Alamgeer,
Giuseppina Negri, Antonio Salatino, Maria Luiza Faria Salatino, et al
Progga Paramita Paul, Pritam Kundu, Utpal Kumar Karmakar,
(Bangladesh) Định tính [161] Ở Việt Nam
Bui Thanh Tung, Vu Duc Loi, Nguyen Thanh Hai, Nguyen Tien Vung,
Vũ Đức Lợi, Nguyễn Thị Mai
Loi Vu Duc, Tung Bui Thanh, Ha Vu Hoang,
STT Năm công bố Tác giả Loài/Phân bố/BPD Các chất xác định Số
Vu Duc Loi, Tran Minh Ngoc, Bui Thi Xuan,
Chi Sanchezia bao gồm các loài S speciosa, S nobilis và S oblonga, nhưng ba tên này được xác định là đồng danh, vì vậy nghiên cứu chỉ tổng hợp thành phần hóa học theo chi Các hợp chất phổ biến trong chi này bao gồm flavonoid, terpen và alcaloid Tuy nhiên, số lượng chất phân lập và xác định cấu trúc còn hạn chế, do đó việc tiếp tục nghiên cứu và phân lập các hợp chất sẽ cung cấp thêm thông tin về thành phần hóa học của cây và góp phần giải thích tác dụng sinh học của nó.
Tác dụng sinh học chi Sanchezia
Nghiên cứu về độc tính cấp của chi Sanchezia chủ yếu tập trung vào cao chiết n-hexan và ethyl acetat từ lá và rễ, cũng như dịch chiết methanol từ vỏ, gỗ, lá và rễ của S speciosa, được thử nghiệm trên ấu trùng tôm nước mặn Kết quả cho thấy tỷ lệ tử vong tăng theo nồng độ cao chiết n-hexan và ethyl acetat từ lá S speciosa, với giá trị LC50 lần lượt là 19,95 µg/mL và 12,88 µg/mL, so với vincristine sulphat có giá trị LC50 là 10,96 µg/mL Do đó, cao phân đoạn ethyl acetat độc hơn so với cao phân đoạn n-hexan trên ấu trùng tôm nước mặn, nhưng cả hai đều an toàn hơn vincristine sulphat.
Nusrat Shaheen và cộng sự (2017) đã nghiên cứu độc tính cấp của chiết xuất dichloromethan và methanol từ vỏ, gỗ, lá và rễ cây S speciosa trồng ở Multan trên ấu trùng tôm với các liều lượng khác nhau Kết quả cho thấy tỷ lệ tử vong khác nhau tùy thuộc vào nồng độ chiết xuất, với mức độ tử vong tỷ lệ thuận với nồng độ cao Đặc biệt, chiết xuất dichloromethan từ rễ cây cho thấy tác dụng gây độc mạnh mẽ với IC50 là 2,52 µg/mL, so với chất đối chứng etoposid có IC50 là 7,46 µg/mL.
Nurat Haseen đã nghiên cứu tác dụng chống viêm của cao chiết methanol từ vỏ và rễ S speciosa trên hai mô hình chuột gây phù bàn chân bằng carrageenan và cotton-pellet Kết quả cho thấy, ở liều 50 mg/kg, không có tác dụng chống viêm đáng kể trên mô hình carrageenan, nhưng có tác dụng nhẹ trên cotton-pellet Ở liều 100 mg/kg, cao chiết giảm độ phù 52,79%, và ở liều 200 mg/kg giảm 68,75%, đều có ý nghĩa thống kê so với nhóm chứng, gần bằng tác dụng của indomethacin (5 mg/kg) với mức giảm 76,34% Trên mô hình cotton-pellet, indomethacin giảm viêm 65,35%, trong khi cao chiết S speciosa giảm 46,12% và 59,32% ở các liều tương ứng Nghiên cứu của Vũ Đức Lợi năm 2016 cho thấy từ phân đoạn ethyl acetat cao chiết ethanol lá S speciosa, đã phân lập được 4 hợp chất có tác dụng chống viêm, trong đó 3-methyl-1H-benzoindole-4,9-dion ức chế mạnh nhất với giá trị IC50 là 193,70 ± 5,24 μg/mL Tất cả bốn hợp chất đều cho thấy hiệu quả ức chế biến tính albumin ở các nồng độ khác nhau, và hoạt động chống viêm phụ thuộc vào nồng độ.
Năm 2018, Lê Thị Hồng Nhung đã nghiên cứu hoạt tính kháng viêm của các chiết xuất n-hexan, ethyl acetat và butanol từ S speciosa bằng phương pháp xác định hoạt tính ức chế sản sinh nitric oxit (NO) trên tế bào RAW264.7 Kết quả cho thấy cặn n-hexan và ethyl acetat có khả năng ức chế sản sinh NO tốt, trong đó cặn n-hexan thể hiện hoạt tính mạnh hơn ở nồng độ thấp với IC50 là 10,82 ± 1,80 µg/mL.
Nurat haseen [155] đã nghiên cứu tác dụng giảm đau của cao chiết methanol từ vỏ và rễ S speciosa trên ba mô hình: acid acetic, tấm nóng và formalin Kết quả cho thấy, trên mô hình đau quặn bụng do acid acetic, cao chiết methanol ức chế đau tối đa 79,21% với liều 200 mg/kg, so với aspirin là 88,01% Ở mô hình tấm nóng, cao chiết với liều 100 và 200 mg/kg cho thấy hiệu quả rõ rệt sau 1 giờ, đặc biệt là liều 200 mg/kg đạt 20,28 ± 4,6 giây, gần tương đương với tramadol (22,60 ± 4,3 giây) Đối với thí nghiệm liếm chân do formalin, cao chiết methanol với liều 200 mg/kg cho kết quả 29,6 ± 3,1 giây, gần với indomethacin (39,3 ± 2,9 giây) Những kết quả này cho thấy cao chiết methanol từ vỏ và rễ S speciosa có tác dụng giảm đau trung ương hiệu quả.
Một nghiên cứu của Progga và cộng sự đã khảo sát tác dụng giảm đau của cao chiết ethanol từ cây S nobilis trên mô hình acid acetic Mẫu nghiên cứu sử dụng liều 250 và 500 mg/kg, với natri diclofenac 25 mg/kg làm chứng dương Kết quả cho thấy cao chiết ethanol của S nobilis ức chế đau với tỷ lệ 32,7% (p 0,05 > 0,05 > 0,05 > 0,05 > 0,05 > 0,05 > 0,05 > 0,05 Sau 28 ngày uống MNC
Các số liệu so sánh trước sau p(trước-sau) sử dụng t-test ghép cặp
Kết quả từ Bảng 3.24 cho thấy rằng sau 14 và 28 ngày sử dụng cao ethyl acetat, số lượng bạch cầu và công thức bạch cầu ở cả lô 1 (liều 50 mg/kg/ngày) và lô 2 (liều 250 mg/kg/ngày) không có sự khác biệt có ý nghĩa so với lô chứng, cũng như không có sự khác biệt giữa các thời điểm trước và sau khi uống mẫu nghiên cứu (p > 0,05).
Bảng 3.25 Ảnh hưởng của cao ethyl acetat đến số lượng tiểu cầu trong máu chuột
Số lượng tiểu cầu (G/l) P (t-test student)
Trước uống MNC 517,70± 85,17 465,70± 91,18 474,80± 76,71 > 0,05 Sau 14 ngày uống
MNC 528,90± 95,40 504,90± 81,13 465,40± 85,34 > 0,05 p (trước - sau) > 0,05 > 0,05 > 0,05 Sau 28 ngày uống
Các số liệu so sánh trước sau p(trước-sau) sử dụng t-test ghép cặp
Kết quả từ Bảng 3.25 cho thấy sau 14 và 28 ngày sử dụng cao ethyl acetat, số lượng tiểu cầu ở lô 1 (liều 50 mg/kg/ngày) và lô 2 (liều 250 mg/kg/ngày) không có sự khác biệt có ý nghĩa so với lô chứng, cũng như không có sự khác biệt giữa các thời điểm trước và sau khi uống mẫu nghiên cứu (p > 0,05).
Bảng 3.26 Ảnh hưởng của cao ethyl acetat đến mức độ hủy hoại tế bào gan (AST/ALT)
Hoạt độ AST (UI/l) Hoạt độ ALT (UI/l) P (t-test student)
29,20 ± 5,47 > 0,05 p (trước - sau) > 0,05 > 0,05 > 0,05 > 0,05 > 0,05 > 0,05 Sau 28 ngày uống MNC
Các số liệu so sánh trước sau p(trước-sau) sử dụng t-test ghép cặp
Kết quả từ Bảng 3.26 cho thấy sau 14 và 28 ngày uống cao ethyl acetat, mức độ hủy hoại tế bào gan được đánh giá qua hoạt độ AST và ALT trong máu chuột ở cả lô 1 (liều 50 mg/kg/ngày) và lô 2 (liều 250 mg/kg/ngày) không có sự khác biệt có ý nghĩa so với lô chứng, cũng như không có sự khác biệt giữa các thời điểm trước và sau khi uống mẫu nghiên cứu (p > 0,05).
Bảng 3.27 Ảnh hưởng của cao ethyl acetat đến chức năng gan (bilirubin, albumin, cholesterol toàn phần trong máu chuột)
Bilirubin toàn phần (mmol/l) Albumin (g/dl) Cholesterol toàn phần
Các số liệu so sánh trước sau p(trước-sau) sử dụng t-test ghép cặp
Kết quả từ Bảng 3.27 cho thấy rằng sau 14 và 28 ngày uống cao ethyl acetat, nồng độ bilirubin toàn phần, albumin toàn phần và cholesterol toàn phần trong máu chuột ở cả hai lô (lô 1 với liều 50 mg/kg/ngày và lô 2 với liều 250 mg/kg/ngày) không có sự khác biệt có ý nghĩa thống kê so với lô chứng, cũng như không có sự khác biệt giữa các thời điểm trước và sau khi uống mẫu nghiên cứu (p>0,05).
Bảng 3.28 Ảnh hưởng của cao ethyl acetat đến chức năng thận
(nồng độ creatinin trong máu chuột) Thời gian
Creatinin (mg/dl) p(t-test student)
Sau 14 ngày uống MNC 0,85 ± 0,11 0,79 ± 0,14 0,80 ± 0,14 > 0,05 p (trước - sau) > 0,05 > 0,05 > 0,05
Sau 28 ngày uống MNC 0,83 ± 0,13 0,84 ± 0,11 0,82 ± 0,18 > 0,05 p (trước - sau) > 0,05 > 0,05 > 0,05
Các số liệu so sánh trước sau p(trước-sau) sử dụng t-test ghép cặp
Kết quả từ Bảng 3.28 cho thấy sau 14 và 28 ngày uống cao ethyl acetat, nồng độ creatinin trong máu của chuột ở cả lô 1 (liều 50 mg/kg/ngày) và lô 2 (liều 250 mg/kg/ngày) không có sự khác biệt so với lô chứng, cũng như không có sự khác biệt giữa hai thời điểm trước và sau khi uống mẫu nghiên cứu (p>0,05).
Nghiên cứu ảnh hưởng của thuốc thử lên hình thái và cấu trúc vi thể gan, thận của chuột
Trên tất cả các chuột thực nghiệm, bao gồm cả lô chứng và hai lô sử dụng cao ethyl acetat, không ghi nhận sự thay đổi bệnh lý nào ở các cơ quan như tim, phổi, gan, lách, tụy, thận và hệ thống tiêu hóa Cấu trúc vi thể của gan và thận ở hai lô chuột uống mẫu nghiên cứu không khác biệt rõ rệt so với lô chứng sinh lý.
Bảng 3.29 Hình ảnh vi thể gan chuột
Lô chứng: TB gan bt Chuột số 04 (HE x 400) Lô chứng: TB gan bt
Chuột số 05 (HE x 400) Lô chứng: TB gan bt
Lô 1: TB gan thoái hóa nhẹ Chuột số 12 (HE x 400) Lô 1: TB gan thoái hóa nhẹ
Lô 1: TB gan thoái hóa nhẹ Chuột số 17 (HE x 400)
Lô 2: TB gan thoái hóa nhẹ Chuột số 23 (HE x 400) Lô 2: TB gan thoái hóa nhẹ
Chuột số 27 (HE x 400) Lô 2: TB gan thoái hóa nhẹ
(HE x 400: Nhuộm Hematoxylin - Eosin, độ phóng đại 400 lần)
Bảng 3.30 Hình ảnh vi thể thận chuột
Lô chứng: TB thận bình thường Chuột số 04 (HE x 400) Lô chứng: TB thận bình thường
Chuột số 05 (HE x 400) Lô chứng: TB thận bình thường
Lô 1: TB thận bình thường Chuột số 12 (HE x 400) Lô 1: TB thận bình thường
Chuột số 14 (HE x 400) Lô 1: TB thận bình thường
Lô 2: TB thận bình thường Chuột số 23 (HE x 400) Lô 2: TB thận bình thường
Chuột số 27 (HE x 400) Lô 2: TB thận bình thường
(HE x 400: Nhuộm Hematoxylin - Eosin, độ phóng đại 400 lần)
3.3.3 Kết quả nghiên cứu tác dụng chống viêm loét dạ dày 3.3.3.1 Kết quả nghiên cứu tác dụng chống viêm loét dạ dày của cao toàn phần
Thí nghiệm được tiến hành như mục 2.2.3.4 và thu được kết quả nghiên cứu như sau:
Bảng 3.31 Tỷ lệ chuột có loét sau thắt môn vị
Lô nghiên cứu n Tỷ lệ chuột có loét
Lô 4: Mẫu cao toàn phần liều 50 mg/kg 10 10/10
Lô 5: Mẫu cao toàn phần liều 150 mg/kg 10 9/10
Lô 6: Mẫu cao toàn phần liều 450 mg/kg 10 10/10 p > 0,05 so với lô chứng bệnh (test khi bình phương)
Kết quả nghiên cứu ở Bảng 3.31 cho thấy:
- Lô chứng sinh lý: chuột không có hình ảnh loét ở dạ dày
BÀN LUẬN
Về đặc điểm thực vật
Chi Sanchezia, thuộc họ Acanthaceae, bao gồm hơn 40 loài, nhưng số lượng chính xác vẫn khác nhau trong các công bố Theo phân loại đầu tiên của E C Leonard và L B Smith vào năm 194, có tổng cộng 59 loài, trong khi E.A Trip cũng đã có những nghiên cứu liên quan đến số lượng loài của chi này.
D M Koenemann năm 2015 [91] thì công bố khóa phân loại có 55 loài, theo trang
Theo "Plants of the World Online", chi được phân loại có 44 loài, trong đó Progga Paramita Paul xác định gần đây cũng có 44 loài Các loài được đề cập trong nghiên cứu bao gồm S nobilis, S speciosa và S oblonga, được xác định là đồng danh Mặc dù cùng một loài, nhưng do được mô tả bởi các nhà thực vật học khác nhau và thu thập ở các địa điểm cũng như điều kiện sinh trưởng khác nhau, những đặc điểm thực vật có thể có sự khác biệt nhỏ Tuy nhiên, trong ba tên loài này, chỉ có một loài
S nobilis là có nghiên cứu công bố về đặc điểm thực vật [27] Đặc điểm thực vật giữa các loài khác trong chi cũng chỉ khác nhau ở một số điểm nhất định như cuống lá có loài hình trụ, có loài hình tròn, có loài cuống lá trần có loài có rãnh; lá bắc cũng có thể có hình dạng khác nhau, cụm hoa đều 3 nhưng có loài thì hình gần cầu có loại lại hình dài, nhị và nhụy hoa cũng khác nhau đôi chút
Loài S nobilis Hook.f có những đặc điểm khác biệt rõ rệt so với các loài khác Tràng hoa của S nobilis có màu vàng nhạt, trong khi S leucerythra có tràng hoa màu hồng, S capitata có màu đỏ, và S aurea có màu cam Ngoài ra, lá bắc của S leucerythra có hình trứng hoặc hình mác, tạo nên sự đa dạng trong các loài này.
S capitata có hình chữ nhật trong khi loài S nobilis lá bắc chỉ hơi nhọn [27]) Chi này phân bố ở khu vực phía Tây Nam Mỹ, tập trung phần lớn ở Peru và Ecuador Một số ít loài phân bố ở phía bắc và đông của Bắc Mỹ, Trung Mỹ và Caribe [215],
Cây Xăng xê, được di thực từ Peru và Ecuador, hiện có mặt tại một số tỉnh ở Việt Nam như Tuyên Quang, Thừa Thiên Huế, Nam Định và Thái Bình Loài này, có tên khoa học là Sanchezia nobilis Hook.f (còn gọi là Sanchezia speciosa), mang đầy đủ đặc điểm của chi, với gân lá nổi rõ và màu sắc đặc trưng Hoa của cây mọc thành cụm, có lá bắc ở mấu đầu hoa, hoa đều, lưỡng tính, màu vàng và gần như không có cuống Theo Trung tâm dữ liệu thực vật Việt Nam, các tên khoa học này đã được nhiều nhà khoa học khác nhau mô tả và đặt tên, nhưng hiện nay đều được xác định là thuộc về một loài duy nhất.
Các loài thực vật có thể có sự khác biệt về hình thái ngay cả trong cùng một loài khi sống trong các điều kiện khác nhau Mẫu cây Xăng xê thu hái ở tỉnh Nam Định đã được ThS Nguyễn Quỳnh Nga, chuyên gia từ Viện Dược liệu, giám định và xác nhận là loài Sanchezia nobilis Hook.f Điều này khẳng định rằng tại Việt Nam, chi Sanchezia hiện chỉ mới phát hiện một loài và chưa có ghi nhận về sự xuất hiện của các loài khác.
Về thành phần hóa học loài Sanchezia nobilis Hook.F
Chi Sachezia chủ yếu được trồng làm cảnh, dẫn đến việc nghiên cứu về thành phần hóa học của nó còn hạn chế Chi này không lớn, và các nghiên cứu tập trung vào một số loài như S nobilis, S speciosa, S oblonga, nhưng các tên loài này thường được xác định là đồng danh Đến nay, chỉ có một số lượng hạn chế các chất được công bố phân lập từ chi này Tuy nhiên, các nghiên cứu về thành phần hóa học của chi Sachezia đã được công bố trong những năm gần đây, cho thấy sự quan tâm ngày càng tăng đối với chi này.
Luận án đã thực hiện chiết xuất cao phân đoạn từ lá Xăng xê bằng cách sử dụng các dung môi có độ phân cực tăng dần, bao gồm n-hexan, ethyl acetat và nước Kết quả cho thấy hai phân đoạn n-hexan và ethyl acetat có tác dụng chống viêm loét dạ dày, chứng minh tiềm năng của lá cây Sanchezia nobilis trong việc hỗ trợ điều trị bệnh này.
Nghiên cứu về Xăng xê đã sử dụng các phương pháp sắc ký thông thường để phân lập và xác định cấu trúc của 20 hợp chất, trong đó có 1 hợp chất lần đầu được phát hiện từ tự nhiên và 12 hợp chất lần đầu tiên được chiết xuất từ chi Sanchezia Trong số này, 12 hợp chất thuộc nhóm flavonoid, 1 dẫn xuất của coumarin, 2 hợp chất alcaloid, 2 dẫn xuất triterpenoid, và 3 dẫn xuất sterol Điều này cho thấy nhóm flavonoid là nhóm hợp chất chính trong Xăng xê.
Hình 4.1 Cấu trúc hóa học của 20 hợp chất phân lập từ lá cây Xăng xê
Nghiên cứu đã phân lập và xác định được 6 hợp chất từ phân đoạn n-hexan, trong đó có 5 hợp chất lần đầu được phân lập từ chi Sanchezia
α-Spinasterol (SXH1), một hợp chất được chiết xuất từ các loài thực vật như Spinacia oleracea, Melandrium firmum, Amaranthus spinosus và Acacia auriculiformis, có tiềm năng làm chất đối kháng vanilloid 1 (TRPV1) Hợp chất này cho thấy nhiều tác dụng có lợi như chống viêm, chống trầm cảm, chống oxy hóa và chống ung thư, đồng thời ức chế hoạt động của enzyme COX-1.
α-spinastrerol có giá trị IC50 đối với COX-2 lần lượt là 16,17 μM và 7,76 μM, cho thấy khả năng ức chế enzyme này Chất này không chỉ có tác dụng chống co giật cấp tính mà còn làm tăng ngưỡng co giật theo liều lượng, đồng thời giảm hành vi giống như trầm cảm ở chuột Ngoài ra, α-spinastrerol cũng đã được thử nghiệm với tác dụng chống viêm in vitro và ức chế tăng sản lành tính tuyến tiền liệt ở chuột.
α-spinasterol có thể là một phương pháp an toàn và hiệu quả để điều trị đau và trầm cảm ở bệnh nhân mắc hội chứng đau cơ xơ hóa Đây là kết quả đầu tiên công bố việc phân lập hợp chất (3β, 5α, 22E)-stigmasta-7,22-dien-3-ol, hay còn gọi là α-spinasterol, từ chi Sanchezia.
Stigmast-4-ene-3,6-dion (SXH2) là một hợp chất thuộc nhóm β-sitosterol, được phân lập lần đầu tiên từ loài Sambucus ebullus vào năm 1974 Nghiên cứu về hợp chất này đã chỉ ra rằng nó có tác dụng sinh học đáng chú ý, đặc biệt là khả năng chống viêm.
Hợp chất stigmast-4-ene-3,6-dion lần đầu tiên được phân lập từ chi Sanchezia, cho thấy nhiều tác dụng quan trọng như gây độc tế bào, bảo vệ thành mạch và giảm đau Ngoài ra, hợp chất này còn có tác dụng hiệp đồng với kháng sinh ampicillin và bảo vệ chống lại sự tăng sinh của Angiotensinogen II trong dòng tế bào cơ trơn động mạch chủ A7r5.
Scopoletin, hay 7-hydroxy-6-methoxy coumarin (SXH3), là một hợp chất coumarin phenolic được chiết xuất từ nhiều loại cây thuốc như Erycibe purusifolia, Aster tataricus, Foeniculum vulgare, và Artemisia iwayomogi, cùng với một số cây ăn quả như Lycium barbarum và Morinda citrifolia Hợp chất này đã được nghiên cứu và chứng minh có tác dụng chống viêm, chống oxy hóa, chống trầm cảm, hạ huyết áp và bảo vệ thần kinh.
Scopoletin, một hợp chất 7-hydroxy-6-methoxy coumarin, đã được phân lập lần đầu từ chi Sanchezia và cho thấy hiệu quả điều trị trong mô hình chuột bị viêm khớp do tá dược gây ra, mở ra khả năng ứng dụng trong điều trị các bệnh tự miễn Hợp chất này đóng vai trò quan trọng trong y học cổ truyền ở Châu Phi, Châu Á và Châu Âu, được sử dụng để điều trị các bệnh như co giật tại Nigeria, viêm tại Colombia, đau thấp khớp và bệnh phong ở Nigeria và Ghana.
* Coccinic acid (SXH4): Coccinic acid được phân lập lần đầu tiên năm 1986 từ rễ và thân của loài Kadsura coccinea bởi Li Lian-niang and Xue Hong [124]
Acid coccinic, được tìm thấy trong nhiều vị thuốc cổ truyền Trung Quốc, vẫn còn hạn chế trong nghiên cứu về tác dụng sinh học Mặc dù acid coccinic đã được đánh giá trên một số dòng tế bào ung thư như ung thư biểu mô phổi (A549), ung thư biểu mô tuyến tiền liệt (PC-3), và ung thư biểu mô biểu bì của mũi họng, nhưng chưa cho thấy tác dụng rõ ràng Tuy nhiên, acid coccinic cho thấy tiềm năng trong việc chống xơ gan thông qua việc ức chế sự tăng sinh của tế bào hình sao ở gan, với kết quả khả quan Đây là lần đầu tiên acid coccinic được phân lập từ chi.
Acid 3β-hydroxy-lup-20(29)-en-28-oic (acid betulinic) (SXH6) là một triterpenoid tự nhiên với năm vòng, được chiết xuất chủ yếu từ vỏ bạch dương trắng (Betula pubescens) Ngoài ra, nó cũng có mặt trong một số loài thực vật khác như cây táo chua (Ziziphus mauritiana), cây hạ khô thảo (Prunella vulgaris), và các loài cây ăn thịt nhiệt đới như Triphyophyllum peltatum và Ancistrocladus heyneanus, cũng như Diospyros leucomelas, Tetracera boiviniana thuộc họ sim.
(Syzygium formosanum) [184], trong lá Aegiphila integrifolia (Jacq) Moldenke
Dịch chiết methanol từ vỏ thân Alstonia boonei chứa acid betulinic, một hợp chất có nhiều đặc tính sinh học quan trọng Acid betulinic có khả năng ức chế virus HIV, chống vi khuẩn, chống sốt rét, tẩy giun sán và thể hiện hoạt động chống ung thư Đặc biệt, hợp chất này còn cho thấy hiệu quả mạnh mẽ trong việc ức chế các đặc tính viêm nhiễm.
Acid betulinic từ chi Sanchezia đã được công bố lần đầu tiên trong nghiên cứu này, với các giá trị IC50 lần lượt là 10,34 μg/mL cho COX-1, 12,92 μg/mL cho COX-2, 15,53 μg/mL cho 5-LOX, 15,21 μg/mL cho Nitrit, 16,65 μg/mL cho TNF-α, và hoạt động chống oxy hóa mạnh mẽ với IC50 là 18,03 μg/mL [77], [106].
Daucosterol (SXH7) là một hợp chất glycosid thuộc nhóm sterol, có cấu trúc vòng cyclopentan perhydrophenanthren, phổ biến trong thực vật bậc cao Hợp chất này có phần aglycon là β-sitosterol và phần đường là glucopyranose nối tại vị trí C-3 Nghiên cứu trong nước đã xác định daucosterol có mặt trong Cùm rụm răng (E dentata Courch.) và cườm rụng hoa dài (Ehretia longiflora Champ ex Benth) β-sitosterol nổi bật với tác dụng chống viêm mà không ức chế cyclooxigenase (COX), đồng thời được xem như thuốc giảm đau sinh học Nghiên cứu của Villasenor cho thấy β-sitosterol và glucoside của nó giảm số lượng cơn đau quặn do acid acetic, với hiệu quả tương ứng 70% và 73% Ngoài ra, β-sitosterol còn có khả năng chống oxy hóa tốt, giảm cholesterol và điều hòa miễn dịch qua thụ thể peroxisome proliferator Gần đây, cả β-sitosterol và daucosterol đã được nghiên cứu thêm nhiều tác dụng mới.
Về độc tính và tác dụng sinh học của loài Sanchezia nobilis Hook.F
Độ độc cấp tính là mức độ độc hại xuất hiện sau khi tiếp xúc ngắn hạn với chất độc Nghiên cứu về độc tính cấp giúp xác định mức độ độc của mẫu thử, dự đoán triệu chứng và biện pháp điều trị ngộ độc, cũng như thiết lập liều lượng cho các thử nghiệm độc tính và phạm vi an toàn của mẫu nghiên cứu.
Cao toàn phần và cao 3 phân đoạn của lá Xăng xê đã được thử độc tính cấp theo phương pháp Litchfield-Wilcoxon và theo quy định của Bộ Y tế Liều dùng cho chuột là liều tối đa có thể pha loãng để chuột uống một lần/ngày, nhưng chưa xác định được liều LD50 Liều cao toàn phần cho chuột uống là 12 g/kg/ngày, tương đương với 50 g cao/người/ngày (khoảng 600 g DL khô/người/ngày) Với liều lượng này, có thể khẳng định rằng việc sử dụng lá Xăng xê đúng liều sẽ ít có khả năng gây ra ngộ độc cấp tính.
Đến nay, thông tin về độc tính cấp tính của các dịch chiết từ chi Sanchezia vẫn còn hạn chế Năm 2015, Albu Shuaib và cộng sự đã nghiên cứu độc tính cấp của phân đoạn n-hexan và ethyl acetat trên ấu trùng tôm nước mặn, với giá trị LC50 lần lượt là 19,95 µg/mL và 12,88 µg/mL, so với vincristine sulphate có giá trị LC50 là 10,96 µg/mL Năm 2017, Nusrat Shaheen và cộng sự cũng đã tiến hành thử độc tính trên ấu trùng tôm từ cao chiết dichloromethan và methanol của vỏ, lá và rễ loài Sanchezia speciosa trồng ở Multan.
Kết quả nghiên cứu cho thấy mức độ gây chết khác nhau khi tiếp xúc với các liều thử nghiệm khác nhau, và tỷ lệ tử vong tỷ lệ thuận với nồng độ chất chiết Cụ thể, chiết xuất dichloromethan từ rễ cây có tác dụng độc hại đáng kể với IC50 là 2,52 µg/mL, so với chất đối chứng etoposide có IC50 là 7,46 µg/mL Ấu trùng tụm rất nhạy cảm với các hợp chất có hoạt tính sinh học độc hại, nhưng thử nghiệm trên chuột cho kết quả đáng tin cậy hơn.
Nghiên cứu về cây Xăng xê ở Việt Nam cho thấy lá cây này chứa nhóm alcaloid, trong đó có fawcettidin và 13-O-acetyl fawcettimin được phân lập từ phân đoạn ethyl acetat Alcaloid là thành phần có khả năng gây độc, nhưng thuốc từ dược liệu thường được sử dụng lâu dài Phân đoạn ethyl acetat cho thấy tác dụng tích cực trong điều trị viêm loét dạ dày và giảm đau, có thể nâng cao hiệu quả lâm sàng khi sử dụng thay cho cao toàn phần Nghiên cứu đánh giá độc tính bán trường diễn của phân đoạn này trên chuột cống trắng với liều tương đương và gấp 5 lần liều dùng trên người, cho thấy không gây độc tính mặc dù có dấu hiệu thoái hóa nhẹ ở gan, nhưng không khác biệt so với lô chứng Dấu hiệu này là phản ứng bình thường của gan và sẽ hồi phục khi ngừng tiếp xúc với tác nhân Đây là công bố đầu tiên về độc tính bán trường diễn của loài Sanchezia nobilis Hook.f tại Việt Nam và trên thế giới.
4.3.2 Về tác dụng sinh học
4.3.2.1 Về tác dụng chống viêm loét dạ dày trên mô hình thắt môn vị trên chuột cống trắng (Shay)
Viêm loét dạ dày là một bệnh tiêu hóa ảnh hưởng đến 8,4% dân số toàn cầu Mô hình thắt môn vị là phương pháp phổ biến để chẩn đoán tổn thương dạ dày ở chuột, với cơ chế gây ra tổn thương thông qua việc kích thích thụ thể histamin-2 (H2R), dẫn đến tăng tiết acid clohydric (HCL) trong dạ dày Hiện tượng này gây ra tăng tiết acid quá mức, dẫn đến tự tiêu niêm mạc dạ dày và tổn thương đường tiêu hóa, bao gồm loét và xuất huyết Thuốc kháng thụ thể histamin-2, như ranitidin, là phương pháp điều trị hiệu quả nhất để chống lại tác động của thắt môn vị, giúp giảm tiết acid và tăng tiết chất nhầy, từ đó ngăn ngừa loét Ranitidin, một thuốc đối kháng thụ thể H2 histamin, có khả năng ức chế tiết acid mạnh hơn cimetidin từ 3 đến 13 lần, giúp kiểm soát lượng acid dịch vị tiết ra cả ngày và đêm.
Dược liệu khô được chiết ngâm trong ethanol 80% trong 3 ngày, thực hiện 3 lần ở nhiệt độ phòng, thu được dịch chiết toàn phần Dịch chiết sau đó được thu hồi dung môi dưới áp suất giảm cho đến khi đạt khối lượng không đổi với độ ẩm 3,82% Hiệu suất chiết của lá Xăng xê đạt khoảng 8,9% Hiện tại, chưa có tài liệu nào đề cập đến liều dùng của lá Xăng xê khô trên người, vì vậy cần nghiên cứu để xác định mức liều phù hợp cho dược liệu này.
Nghiên cứu đã xác định liều cao toàn phần tương đương khoảng 150 mg/kg thể trọng chuột/ngày cho mô hình thắt môn Shay trên chuột cống trắng, dựa trên hệ số ngoại suy từ liều lượng 12 g/ngày Ba mức liều cao được lựa chọn để đánh giá tác dụng chống viêm loét dạ dày, tá tràng là 50, 150 và 450 mg/kg thể trọng chuột/ngày Kết quả cho thấy liều 150 mg/kg thể trọng chuột/ngày có hiệu quả rõ rệt trong việc chống viêm loét dạ dày tá tràng, giảm mức độ tổn thương, giảm thể tích dịch vị và cải thiện pH dạ dày.
Nghiên cứu đã chiết xuất các cao phân đoạn bằng cách sử dụng các dung môi có độ phân cực tăng dần, bao gồm n-hexan, ethyl acetat và nước Từ liều cao toàn phần (150 mg/kg thể trọng chuột/ngày), nghiên cứu đã tính toán hiệu suất chiết và độ ẩm của các cao phân đoạn, xác định mức liều cho cao phân đoạn n-hexan và ethyl acetat.
Nghiên cứu đánh giá tác dụng chống viêm loét dạ dày trên mô hình thắt môn vị chuột cống trắng (Shay) với liều 50 mg/kg thể trọng chuột/ngày và nước 100 mg/kg thể trọng chuột/ngày, nhằm xác định hiệu quả của các cao phân đoạn so với cao toàn phần Qua đó, nghiên cứu hướng đến việc tối ưu hóa hiệu quả dược liệu bằng cách sử dụng các cao phân đoạn phù hợp, với thiết kế liều thử nghiệm đảm bảo tính logic, hợp lý và khoa học.
- Kết quả của thử nghiệm cao toàn phần
Nghiên cứu cho thấy, với liều 50 mg/kg thể trọng chuột/ngày, cao toàn phần không có tác dụng rõ rệt trên viêm loét dạ dày tá tràng Tuy nhiên, ở liều 150 mg/kg/ngày, cao toàn phần giảm điểm số loét trung bình, chỉ số loét, độ acid tự do, và độ acid toàn phần, đồng thời tăng pH so với nhóm chứng với ý nghĩa thống kê Mặc dù liều này cũng làm giảm thể tích dịch vị và cải thiện hình ảnh đại thể và vi thể, nhưng không có ý nghĩa thống kê Ở liều 450 mg/kg/ngày, cao toàn phần tiếp tục giảm điểm số loét, thể tích dịch vị, và tăng pH, đồng thời có xu hướng giảm độ acid tự do và độ acid toàn phần, cùng với cải thiện hình ảnh đại thể và vi thể Kết quả nghiên cứu đầu tiên trên lá Xăng xê trên mô hình thắt môn vị chuột cống trắng (Shay) khẳng định tác dụng của lá Xăng xê đối với viêm loét dạ dày tá tràng, tuy nhiên cần thêm nghiên cứu để đánh giá rõ hơn.
- Kết quả thử nghiệm trên mô hình thắt môn vị trên chuột cống trắng của các cao phân đoạn
Cao phân đoạn n-hexan cho thấy khả năng giảm điểm số loét trung bình, thể tích dịch vị và độ acid toàn phần, tuy nhiên chỉ có xu hướng giảm chỉ số loét và tăng pH dịch vị so với lô chứng Trong khi đó, phân đoạn ethyl acetat thể hiện hiệu quả tốt hơn, giảm tất cả các chỉ số và đạt mức tương đương với lô ranitidin Cụ thể, điểm số loét trung bình của phân đoạn n-hexan là 5,90 ± 2,13 (p < 0,05), trong khi phân đoạn ethyl acetat là 4,60 ± 1,90 (p < 0,01) và lô ranitidin là 4,70 ± 2,13 (p < 0,01).
Nghiên cứu cho thấy phân đoạn ethyl acetat có hiệu quả điều trị viêm loét dạ dày rõ rệt nhất với giá trị 9,70 ± 3,59 (p < 0,01), so với lô dùng nanitidin đạt 10,00 ± 3,93 (p < 0,01) Điều này chứng tỏ rằng cao phân đoạn lá Xăng xê, đặc biệt là ethyl acetat, mang lại tác dụng tích cực trong việc điều trị tình trạng này.
Nghiên cứu về ảnh hưởng của mẫu nghiên cứu đến thể tích dịch vị, độ acid tự do, độ acid toàn phần và pH không bao gồm kết quả từ lô chứng sinh lý Việc thu thập thể tích dịch vị dạ dày ở chuột gặp nhiều khó khăn do lượng dịch vị thu được rất ít, gần như không đủ để đánh giá độ acid Trong các nghiên cứu đã công bố, các tác giả thường chỉ so sánh nhóm chứng bệnh với kết quả thử nghiệm để đánh giá tác dụng của mẫu nghiên cứu so với thuốc đối chứng, mà không sử dụng lô chứng sinh lý.
Phân đoạn ethyl acetat có tác dụng chống viêm loét dạ dày nhờ vào các thành phần hóa học đã được phân lập, chủ yếu là flavonoids Các hợp chất này, như quercetin, có khả năng chống viêm, giảm đau và làm lành vết thương, đã được chứng minh qua các nghiên cứu thực nghiệm.