0799 nghiên cứu thành phần hóa học độc tính cây ngón hoa trắng (nhài bắc) và cây trúc đào ở việt nam phục vụ cho giám định hóa pháp luận văn tốt nghiệp

BỘGIÁO DỤCVÀĐÀOTẠO BỘQUỐCPHÕNG VIỆNKHOAHỌCVÀCÔNG NGHỆQUÂNSỰ - LÊANH HÀO NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HĨA HỌC,ĐỘCTÍNHCÂYNGĨNHOATRẮNG(NHÀI BẮC) VÀ CÂY TRÚC ĐÀO Ở VIỆT NAMPHỤCVỤCHOGIÁMĐỊNHHĨAPH ÁP LUẬNÁNTIẾNSĨHĨAHỌC HàNội,2015 BỘGIÁO DỤC VÀĐÀOTẠO BỘQUỐCPHỊNG VIỆNKHOAHỌCVÀCÔNGNGHỆQUÂNSỰ - LÊANH HÀO NGHIÊNCỨUTHÀNHPHẦNHĨAHỌC, ĐỘC TÍNH CÂY NGĨN HOA TRẮNG (NHÀI BẮC)VÀCÂYTRÚC ĐÀOỞ VIỆTNAM PHỤCVỤCHO GIÁMĐỊNHHĨA PHÁP Chun ngành: Hóa Hữu CơMãsố:62440114 LUẬNÁNTIẾNSĨHĨAHỌC NGƢỜIHƢỚNGDẪNKHOAHỌC: PGS.TS.NGUYỄNTIẾNVỮNG TS.ĐÀOCƠNGMINH HàNội,2015 LỜICAMĐOAN Tơi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng Các số liệu, kếtquả nêu luận án trung thực chƣa đƣợc công bố cơngtrìnhnàokhác Ngƣờicamđoan LêAnhHào LỜICẢMƠN Tơixinbàytỏlịngbiết ơnsâusắcnhấttới: PGS.TS Nguyễn Tiến VữngTS.Đào CơngMinh ngƣời thầy tận tình hƣớng dẫn giúp đỡ tơi suốt q trình thựchiệnluậnánnày TơixintrântrọngcảmơnThủtrƣởng,phịngĐàotạo,ViệnHóahọc -Vậtliệu - Viện Khoa học Cơng nghệ quân - Bộ Quốc phòng, tạo điều kiện thuận lợichotơitrong suốtqtrìnhhọc tập vànghiêncứu Tơi xin trân trọng cảm ơn giúp đỡ quý báu củaGS.TS Nguyễn Việt Bắc,Viện Hóa học - Vật liệu, tận tình bảo tơi suốt q trình học tập, nghiêncứuvàhồnthànhluậnán Tơi xin trân trọng cảm ơn ban lãnh đạo, đồng nghiệp Khoa Hóa pháp Viện Phápy Quốc gia tạo điều kiện giúp đỡ, động v i ê n đ ể t ô i h o n t h n h b ả n luậnánnày Tôi xin trân trọng cảm ơn nhà khoa học, bạn đồng nghiệp Viện Kiểmnghiệm thuốc Trung ƣơng, Viện Hóa sinh biển, Viện Hóa học - Vật liệu, Viện Hóahọc hợp chất thiên nhiên, Viện Sinh thái Tài nguyên sinh vật, Bảo tàng thiênnhiênViệtNamđãgiúpđỡtơitrongqtrìnhthực hiệnluậnán Tơixincảmơngiađìnhvàbạnbèđãđộngviêntơitrongsuốtthờigianqua Một lần nữa, tơi muốn bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới tất giúp đỡ quíbáutrên HàNội,9/2015 LÊANHHÀO MỤCLỤC Trang DANHMỤCCÁCCHỮVIẾTTẮTDA NHMỤCCÁCBẢNG DANHMỤCCÁCHÌNHVẼ,ĐỒTHỊMỞ ĐẦU Chƣơng1:TỔNGQUAN 1.1 SƠLƢỢCVỀGIÁMĐỊNHHĨAPHÁP 1.1.1 Tìnhhình giámđịnhhóa pháptrênthếgiới 1.1.2 TìnhhìnhgiámđịnhhóapháptạiViệtNam 1.2 VỀVIỆCLỰACHỌNĐỐITƢỢNGNGHIÊNCỨU 1.3 CÂYNGĨNHOATRẮNG(NHÀIBẮC) 1.3.1 Đặcđiểmthựcvậtvàthànhphần hóahọcchiJasminum 1.3.2 Đặcđiểmthựcvậtcâyngónhoatrắng(Nhàibắc) 1.3.3 Nghiêncứuvềthànhphầnhóahọccâyngón hoatrắng(Nhàibắc) 1.4 CÂYTRƯCĐÀO 1.4.1 Đặcđiểmthựcvật 1.4.2 Cơngdụngcủacâytrúcđào 1.4.3 Tìnhhình nghiêncứu vềthànhphầnhóahọc 1.4.4 Độc tínhcủa câytrúc đào 1.4.5 Cácthuốcthử,địnhtínhvàđịnhlƣợngglycosid Chƣơng2:NGUYÊNLIỆUVÀPHƢƠNGPHÁPNGHIÊNCỨU,THỰCNGHIỆM 2.1 NGUYÊNLIỆU 2.2 HÓA CHẤT,THUỐCTHỬ 2.2.1 Hệd u n g m ô i c h y bả n m ỏ n g , t h u ố c t h v p h a đ ộ n g c h y s ắ c k ý l ỏ n g hiệunăngcao 2.2.2 Thiết bị,dụngcụ 2.3 PHƢƠNGPHÁPNGHIÊNCỨU,THỰCNGHIỆM 2.3.1 Nghiêncứuvềthực vật 10 10 10 11 11 24 25 30 30 30 30 31 31 2.3.2 Phƣơngphápchiếtxuất,phânlậpvàxácđịnhcấutrúc 36 2.3.3 Địnhlƣợngglycosidtimtronglátrúcđàobằngphƣơngphápcân 42 2.3.4 Thửđộctínhcấp 43 2.3.5 Ứng dụng giám định hóa 45 phápChƣơng3:KẾTQUẢVÀTHẢOLUẬN 3.1 KẾT QUẢNGHIÊNCỨUVỀTHỰC VẬT 47 3.1.1 Địnhdanhmẫuvật 47 3.1.2 Câyngónhoa trắng(Nhài bắc) 47 3.1.3 Đặcđiểmthựcvậtcâytrúc đào 56 3.2 CÁCPHƢƠNGPHÁPNGHIÊNCỨUĐÃSỬDỤNG 58 3.2.1 Cácphƣơngphápchiếtxuất,phânlậpvàtinhchế 58 3.2.2 Cácphƣơngphƣơngphápnhậndạng 60 3.3 XÁCĐ Ị N H C Ấ U T R Ú C C Á C C H Ấ T P H Â N L Ậ P T Ừ L Á C Â Y N G Ó N HOATRẮNG(NHÀIBẮC) 3.4 XÁCĐỊNH CẤU TRÚCCÁCCHẤTPHÂNLẬPTỪLÁ CÂYTRÖCĐÀO 60 67 3.5 XÁCĐ Ị N H C Ấ U T R Ú C C Á C H Ợ P C H Ấ T P H Â N L Ậ P T Ừ H O A C Â Y TRƯCĐÀO 113 3.6 NHẬNXÉTVỀTHÀNHPHẦNHĨAHỌC 123 3.7 ĐỊNHLƢỢNGGLYCOSIDTIMTRONGLÁTRƯCĐÀO 129 3.8 THỬĐỘCTÍNH CẤP 130 3.8.1 Thửđộctínhcấp mẫulátrúcđào 130 3.8.2 Thửđộctínhcấp mẫu ngónhoatrắng(Nhàibắc) 133 3.9 ỨNGDỤNGTRONGGIÁMĐỊNHHĨAPHÁP 3.9.1 ỨngdụnggiámđịnhhóaphápbằngphƣơngphápSắckýlớpmỏng 136 136 3.9.2 ỨngdụnggiámđịnhhóaphápbằngphƣơngphápSắckýlỏnghiệunăngcao KẾTLUẬN 138 DANH MỤC CÁC CƠNG TRÌNH KHOA HỌC ĐÃ CÔNG 145 BỐTÀILIỆUTHAMKHẢO 147 DANHMỤCCÁCKÝHIỆU, CÁCCHỮVIẾTTẮT A Liềugâychết a %độngvậtthínghiệmchếtsátdƣới50% b %độngvậtthínghiệmchếtsáttrên brs 50%Singlettù 13 Phổc ộ n g h ƣ n g t h t n h â n c a c b o n C , HCl3)δCC ( M H z , dungmơiđo) CCC Sắckícột(Colummchromatography)Chlo HCl3 roform δC(ppm)d Độ dịch chuyển hóa học tính D ppmdoublet dd Khoảng cách dq liềudoubletcủadoubletdoubl dt etcủaquartetdoubletcủatri DMSO pletDimethylsulfoxit đ.n.c Điểmnóngchảy ĐVTN Độngvậtthínghiệm EI-MS(70eV) Phổkhốivachạmelectronở70eV,(ElectronImpact- CNMR(125MHz,C MassSpectroscopy) ESI-MS Phổkhốibụielectron,(Electron S p r a y IonisationMassSpectroscopy) EtOAch EthylAcetat c Hợpchất Phổt ƣ n g t c p r o t o n , ( 1H- H- H1 HC O S Y C o r r e l a t i o n Spectroscopy) HNMR(500MHz,C Phổcộnghƣởngtừhạtnhânproton,(MHz,dungmôi HCl3)δCH đo) h.l Hàmlƣợng HPLCJ(Hz) Sắckílỏng hiệunăngcao kLD HằngsốtƣơngtáctínhbằngHzHệs 50 ốBehrens D Liềugâychết50% sốconvậtthử(LethalDose) m Limitofdetectionm MeOH ultiplet LO Methanol NOESY Phổt ƣ n g t c q u a k h ô n g g i a n ( h i ệ u ứ n g O v e r h aus pđ hạtnhân),(NuclearOverhausEffectSpectroscopy) Phânđoạn q quartet s Singlet S Phânphối chuẩn(standarddistribution) SELD50 SaisốchuẩncủaLD50(standarderrorof LD50) SKC Sắckýcột SKLMĐC Sắckílớpmỏngđiểuchế SKLM Sắckílớpmỏngtrip tt let d tripletcủadoublet TMS Tetramethylsilan X HàmlƣợngphầntrămcủaglycosidKhốil 𝑥 ƣợngcặn 𝑦 Khốilƣợngnguyênliệu(g) z Độẩmmẫu thử DANHMỤCCÁCBẢNG Trang Bảng1.1: CáchợpchấtđặctrƣngcủachiJasminum Bảng3.1: Bảngsosánhsự giống vàkhácnhaugiữangónhoatrắng (Nhài bắc)vớingónhoavàng 48 Bảng3.2: Danhsách12mẫulấytrênGenBankđƣợcdùngđểsosánh 55 Bảng3.3: Danhsách6mẫulấytrênGenBankđƣợcdùngđểsosánh 55 Bảng3.4: Dữliệuphổ1HNMR(500MHz,CHCl3)δCHvà13CNMR(125 64 MHz,CHCl3)δCCcủachấtHC2 Bảng3.5: Dữliệuphổ1HNMR(500MHz, CHCl3)δCHvà13CNMR(125 66 MHz,CHCl3)δCCcủachấtHC3 Bảng3.6: SốliệuphổNMR củahợpchấtNO13vàchất sosánh 70 Bảng3.7: SốliệuphổNMR củahợpchấtNO14vàchất sosánh 72 Bảng3.8: SốliệuphổNMR củahợpchấtNO15 78 Bảng3.9: SốliệuphổNMR củachấtNO16 vàchấtsosánh 81 Bảng3.10: SốliệuphổNMR củahợpchấtNO17vàchất sosánh 89 Bảng3.11: SốliệuphổNMR củahợpchấtNO18 93 Bảng3.12: Sốliệuphổ13C-NMR(125MHz,CHCl3)δCCcủahợpchấtNO1 vàchấtsosánh Bảng3.13: 95 Sốliệuphổ13C-NMR(125MHz,CHCl3)δCCcủahợpchấtNO2 vàchấtsosánh 98 Bảng3.14: SốliệuphổNMR củahợpchấtNO3vàchấtsosánh 101 Bảng3.15: SốliệuphổNMR củahợpchấtNO8vàchấtsosánh 107 Bảng3.16: SốliệuphổNMR củahợpchấtNO10vàchất sosánh 111 Bảng3.17: Cáchợpchấtphânlậpđƣợctừlácâyngónhoatrắng(Nhàibắc) 123 Bảng3.18: Cáchợpchấtphânlậpđƣợctừlá,hoacâytrúcđào 125 Bảng3.19: Bảngkếtquảđịnhlƣợngglycosidtimtronglátrúcđàokhơ 129 Bảng3.20: Thểtíchđƣamẫuthửvàmứcliềuthửnghiệmtrênchuột 130 Bảng3.21: Kếtquảthửnghiệmcaotrúcđào 131 Bảng3.22: Thểtíchđƣamẫuthửvàmứcliềuthửnghiệmtrênchuột 134 Bảng3.23 Kếtquảthửnghiệmcaongónhoatrắng(Nhàibắc) 134