PHẦN 1. MỞ ĐẦU 1.1. TÍNH CẤP THIẾT CỦA ĐỀ TÀI Chi Paris L. (thuộc họ Melanthiaceae) thường được gọi là Bảy lá một hoa hoặc Trọng lâu đây là cây thuốc bản địa của Việt Nam và nhiều nơi trên thế giới như Trung Quốc, Bhutan, Ấn Độ, Myanma, Nepal, v.v. Các loài thuộc chi này phân bố rộng khắp Âu - Á, tới Bắc Cực ở giới hạn cực Bắc và đến đảo Hải Nam và Đông Dương ở giới hạn cực nam (Ji, 2021). Ở Việt Nam, các loài thuộc chi Paris nằm rải rác trên các khu rừng lá rộng thường xanh ở vùng miền núi cao phía Bắc đến Tây Nguyên. Phân bố ở những vùng đất ẩm và nhiều mùn ở độ cao từ 100 m đến 1.500 m (Nguyễn Quỳnh Nga & cs., 2016). Cho đến nay, thế giới ghi nhận 27 loài thuộc chi Paris (Xu & cs., 2019), phân bố chủ yếu ở vùng Tây Nam Trung Quốc với 22 loài (Li H, 1986), trong đó tỉnh Vân Nam được xem là trung tâm phát sinh của Bảy lá một hoa. Ở Việt Nam, các nhà khoa học đã ghi nhận 8 loài và 2 thứ thuộc chi Paris, trong đó loài Paris vietnamensis (Takht.) H. Li có phổ phân bố rộng nhất. Các nghiên cứu về thành phần hóa học và dược lý cho thấy, các hoạt chất của cây Bảy lá một hoa là các saponin steroid, đặc biệt là diosgenin và các pennogenin (Zhang & cs., 2012). Các saponin này có khả năng giúp hạ cholesterol máu, kháng u (đặc biệt với một số dòng tế bào ung thư vú và ung thư phổi), kháng viêm, kháng nấm và ức chế ngưng tụ tiểu cầu. Ở Nepal, thân rễ của các loài thuộc chi Paris có vai trò quan trọng về mặt y học và được sử dụng để chống rắn cắn, côn trùng cắn, để giảm bớt tác dụng của ma tuý, vết thương, sốt và ngộ độc thực phẩm. Thân rễ được làm thức ăn cho gia súc nhằm giảm tiêu chảy và kiết lỵ (Madhav & cs., 2010). Ở Ấn Độ, nó được dùng để chữa bỏng, vết cắt, tiêu chảy, kiết lỵ, sốt, đau bụng và chữa vết thương (Paul & cs., 2015). Thân rễ của nhiều loài khác nhau thuộc chi Paris được sử dụng làm nguồn nguyên liệu chính cho ‘Vân Nam Bạch Dược’ - một sản phẩm phổ biến trên toàn cầu được sử dụng trong y học Trung Quốc (Hong & cs., 2017). Vì vậy, thân rễ Paris được sử dụng chữa chấn thương và một số bệnh khác nhau như sốt, đau lưng, chảy máu, gãy xương, bệnh nấm, rắn độc, côn trùng cắn, dị ứng da, khối u và nhiều loại ung thư (Vu & cs., 2019). Đối với những mục đích y học dân tộc này, thân rễ Paris được bán rộng rãi trên các thị trường y học cổ truyền ở cả Trung Quốc, Nepal, Ấn Độ và các nước khác trên thế giới (Acharya & Rokaya, 2005). Khối lượng và giá trị thương mại các loại cây thuốc và cây hương liệu, bao gồm Paris polyphylla Sm. đã nhanh chóng mở rộng trong thập kỷ qua do nhu cầu ngày càng tăng trên thị trường quốc tế, trong đó chủ yếu từ các ngành công nghiệp dược phẩm và hương liệu của Ấn Độ và Trung Quốc (Vasisht & cs., 2016). Khoảng 80% dân số thế giới sử dụng các sản phẩm thuốc từ cây dược liệu cho sức khoẻ cũng như cuộc sống hàng ngày, đặc biệt là bà con dân tộc vùng cao (Applequist & cs., 2020). Cho đến nay, có khoảng 90 loại thuốc thương mại và sản phẩm sức khỏe đã được cấp phép ở Trung Quốc bằng cách sử dụng thân rễ của cây thuốc thuộc chi Paris làm nguyên liệu. Chính quyền tỉnh Quảng Châu ước tính rằng thu nhập tạo ra từ việc bán các loại thuốc và sản phẩm này tăng gấp 2 lần trong 5 năm vừa qua và đạt hơn 20 tỷ Nhân dân tệ (tương đương 2,95 tỷ USD) (Guo & cs., 2020). Do công dụng chữa được nhiều bệnh, lại là những bệnh hiểm nghèo và có giá trị kinh tế cao nên tất cả các loài thuộc chi Paris đều bị khai thác quá mức và sự tái sinh tự nhiên của loài này kém, các quần thể hoang dã có nguy cơ bị tuyệt chủng. Bên cạnh đó, nạn chặt phá rừng, đốt nương làm rẫy ở miền núi nên khu vực phân bố của Bảy lá một hoa bị thu hẹp, tần suất bắt gặp trong tự nhiên ngày càng ít, chỉ bắt gặp những cây nhỏ (Hoàng Thị Thanh Hà & cs., 2017). Mặt khác, khả năng tái sinh cây trong tự nhiên khá thấp bởi nhiều nguyên nhân như hạt có thời gian ngủ nghỉ dài, khó nảy mầm.... Vì những lý do đó nên từ năm 1996, Bảy lá một hoa đã được đưa vào Sách Đỏ Việt Nam với cấp đánh giá Hiếm (bậc R) và đến năm 2007 được đánh giá theo khung phân hạng mới ở mức độ nguy cấp, đề nghị có biện pháp khai thác hợp lý nguồn thuốc đồng thời đưa vào trồng để bảo vệ nguồn gen. Tại Việt Nam, các nghiên cứu trước tác chung về chi Paris chưa có hệ thống và còn nhiều hạn chế, thường tập trung về mô tả đặc điểm hình thái, định danh và xác định tên khoa học (Nguyễn Thị Đỏ, 2007; Nguyễn Quỳnh Nga & cs., 2016, 2015; Hoàng Tấn Quảng & cs., 2016, Nguyễn Thị Thu & cs., 2016; Vũ Thị Thu Thủy & cs., 2017; Nguyễn Thị Ngọc Lan & cs., 2020), cũng như phân tích thành phần hóa học và hoạt tính sinh học có trong loài cây Bảy lá một hoa (Đỗ Huy Bích & cs., 2006; Nguyễn Thị Duyên & cs., 2017). Các nghiên cứu về biện pháp kỹ thuật nhân giống và gây trồng, đặc biệt là kỹ thuật nhân giống còn rất hạn chế, mới
HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM NGUYỄN TIẾN DŨNG NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM NÔNG SINH HỌC, KỸ THUẬT NHÂN GIỐNG VÀ TRỒNG TRỌT CÂY BẢY LÁ MỘT HOA [Paris vietnamensis (Takht.) H Li] TẠI SA PA, LÀO CAI LUẬN ÁN TIẾN SĨ NHÀ XUẤT BẢN HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP - 2023 MỤC LỤC Trang Lời cam đoan i Lời cảm ơn ii Mục lục iii Danh mục chữ viết tắt vi Danh mục bảng vii Danh mục hình x Trích yếu luận án xii Thesis abstract xiv Phần Mở đầu 1.1 Tính cấp thiết đề tài 1.2 Mục tiêu nghiên cứu đề tài 1.3 Phạm vi nghiên cứu 1.3.1 Đối tượng nghiên cứu 1.3.2 Thời gian nghiên cứu 1.3.3 Địa điểm phạm vi nghiên cứu 1.4 Những đóng góp luận án 1.5 Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài 1.5.1 Ý nghĩa khoa học 1.5.2 Ý nghĩa thực tiễn Phần Tổng quan tài liệu 2.1 Tình hình nghiên cứu Bảy hoa giới 2.1.1 Nghiên cứu thực vật học 2.1.2 Nghiên cứu đa dạng di truyền sử dụng ADN Bảy hoa 2.1.3 Nghiên cứu thành phần hóa học hoạt chất sinh học 11 2.1.4 Các kết nghiên cứu nhân giống trồng Bảy hoa 17 2.2 Tình hình nghiên cứu Việt Nam 23 2.2.1 Nghiên cứu thực vật học 23 2.2.2 Nghiên cứu thành phần hóa học, tác dụng dược lý giá trị sử dụng 27 iii 2.2.3 Nghiên cứu trồng trọt 31 Phần Nội dung phương pháp nghiên cứu 33 3.1 Vật liệu nghiên cứu 33 3.2 Nội dung nghiên cứu 34 3.3 Phương pháp nghiên cứu 35 3.3.1 Nội dung 1: Nghiên cứu đặc điểm nông sinh học, sai khác di truyền khả sinh trưởng, phát triển mẫu giống Bảy hoa 35 3.3.2 Nội dung 2: Nghiên cứu kỹ thuật nhân giống Bảy hoa hạt hom rễ 38 3.3.3 Nội dung 3: Nghiên cứu số biện pháp kỹ thuật trồng Bảy hoa Sa Pa, Lào Cai 42 3.4 Phương pháp xử lý số liệu 46 Phần Kết nghiên cứu thảo luận 47 4.1 Nghiên cứu đặc điểm nông sinh học, khác biệt di truyền khả sinh trưởng, phát triển mẫu giống Bảy hoa 47 4.1.1 Đặc điểm nông sinh học mẫu giống Bảy hoa 47 4.1.2 Đánh giá sai khác di truyền Bảy hoa sinh học phân tử 65 4.1.3 Đặc điểm sinh trưởng chiều cao, đường kính thân qua năm mẫu giống Bảy hoa 75 4.2 Nghiên cứu kỹ thuật nhân giống Bảy hoa Invivo 78 4.2.1 Diễn biến thời tiết khí hậu thị xã Sa Pa, tỉnh Lào Cai năm 78 4.2.2 Kỹ thuật nhân giống hạt 80 4.2.3 Nhân giống Bảy hoa thân rễ 95 4.3 Kỹ thuật trồng Bảy hoa Sa Pa, Lào Cai 102 4.3.1 Ảnh hưởng thời vụ trồng đến sinh trưởng phát triển Bảy hoa 102 4.3.2 Ảnh hưởng mật độ, khoảng cách trồng đến sinh trưởng phát triển suất Bảy hoa 108 4.3.3 Ảnh hưởng cơng thức phân bón đến sinh trưởng Bảy hoa 111 Phần Kết luận kiến nghị 117 5.1 Kết luận 117 5.2 Kiến nghị 118 iv Danh mục cơng trình cơng bố có liên quan đến luận án 119 Tài liệu tham khảo 120 Phụ lục 134 v DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT Chữ viết tắt Nghĩa Araf Arabinofuranosyl BLMH Bảy hoa Cs Cộng CT Công thức d Doublet EtOH Ethanol Fuc Fructopyranosyl Gal Galactopyranosyl Glc Glucopyranosyl GA3 Acid Gibberellic HPLC High-performance liquid chromatography (Sắc ký lỏng hiệu cao) IBA Indole-3-butyric acid ITS Internal Transcribed Spacers MeOH Methanol NCS Nghiên Cứu Sinh OMe Methoxy P Paris Ppm Parts Per Million Rha Rhamnopyranosyl STT Số thứ tự TG Thời gian TLC Thin Layer Chromatography (Sắc ký lớp mỏng) TLTK Tài liệu tham khảo v/v Thể tích/thể tích Xyl Xylopyranosyl vi DANH MỤC BẢNG TT 2.1 Tên Bảng Trang Bộ sưu tập tiêu loài chi Paris 2.2 Tác dụng dược lý chất bảy hoa 15 3.1 Đặc điểm mẫu giống Bảy hoa 33 3.2 Trình tự cặp mồi sử dụng nghiên cứu 37 4.1 Đặc điểm rễ mẫu giống Bảy hoa 48 4.2 Đặc điểm thân rễ mẫu giống Bảy hoa 49 4.3 Đặc điểm hình thái thân khí sinh mẫu Bảy hoa 50 4.4 Đặc điểm mẫu Bảy hoa 52 4.5 Đặc điểm hình thái hoa mẫu giống Bảy hoa 54 4.6 Đặc điểm sinh trưởng phát triển mẫu giống Bảy hoa qua năm 76 4.7 Khả sinh trưởng thân rễ mẫu giống Bảy hoa 76 4.8 Năng suất hàm lượng saponin thân rễ mẫu giống Bảy hoa 77 4.9 Thời tiết khí hậu trung bình năm thị xã Sa Pa, tỉnh Lào Cai năm 79 4.10 Ảnh hưởng thời vụ gieo đến thời gian tỉ lệ mọc mầm, xuất vườn Bảy hoa 81 4.11 Ảnh hưởng thời vụ gieo tới sinh trưởng phát triển giống Bảy hoa thời điểm xuất vườn 82 4.12 Ảnh hưởng thời gian xử lý GA3 tới tỉ lệ nảy mầm, xuất vườn Bảy hoa 83 4.13 Ảnh hưởng thời gian xử lý GA3 đến sinh trưởng Bảy hoa 84 4.14 Ảnh hưởng nồng độ GA3 đến thời gian, tỉ lệ mọc mầm tỉ lệ xuất vườn Bảy hoa 85 4.15 Ảnh hưởng nồng độ GA3 đến sinh trưởng giống Bảy hoa 86 4.16 Ảnh hưởng phương pháp bảo quản hạt giống đến thời gian, tỉ lệ mọc mầm tỉ lệ xuất vườn giống Bảy hoa 87 vii 4.17 Ảnh hưởng phương pháp bảo quản hạt giống đến sinh trưởng giống Bảy hoa 88 4.18 Ảnh hưởng độ sâu gieo hạt đến thời gian mọc mầm, tỉ lệ mọc mầm tỉ lệ xuất vườn giống Bảy hoa 90 4.19 Ảnh hưởng độ sâu gieo hạt đến sinh trưởng giống Bảy hoa thời điểm xuất vườn 90 4.20 Ảnh hưởng khối lượng hạt tới thời gian, tỉ lệ mọc mầm tỉ lệ xuất vườn Bảy hoa 92 4.21 Ảnh hưởng khối lượng hạt khả sinh trưởng của Bảy hoa thời điểm xuất vườn 93 4.22 Ảnh hưởng phân bón qua đến sinh trưởng phát triển Bảy hoa giai đoạn vườn ươm 94 4.23 Ảnh hưởng tuổi xuất vườn đến sinh trưởng phát triển Bảy hoa 95 4.24 Ảnh hưởng nồng độ GA3 IBA đến tỉ lệ mọc mầm tỉ lệ xuất vườn Bảy hoa 96 4.25 Ảnh hưởng nồng độ GA3 IBA đến khả sinh trưởng Bảy hoa thời điểm xuất vườn 97 4.26 Ảnh hưởng bổ sung chế phẩm sinh học đến khả sinh trưởng, phát triển Bảy hoa 98 4.27 Ảnh hưởng bổ sung chế phẩm sinh học vào giá thể đến sâu bệnh hại Bảy hoa 99 4.28 Ảnh hưởng chế độ che sáng đến khả sinh trưởng phát triển Bảy hoa 100 4.29 Ảnh hưởng số mầm/hom rễ đến tỉ lệ mọc chồi tỉ lệ hình thành Bảy hoa 100 4.30 Ảnh hưởng số mầm/hom rễ đến khả sinh trưởng phát triển của Bảy hoa thời điểm xuất vườn 101 4.31 Ảnh hưởng thời vụ trồng đến thời gian qua giai đoạn sinh trưởng Bảy hoa 102 4.32 Ảnh hưởng thời vụ trồng đến sinh trưởng phát triển Bảy hoa 103 4.33 Ảnh hưởng thời vụ trồng đến tiêu cấu thành suất Bảy hoa qua năm 104 viii 4.34 Ảnh hưởng thời vụ trồng đến suất hàm lượng saponin Bảy hoa 106 4.35 Ảnh hưởng mật độ trồng đến thời gian sinh trưởng qua giai đoạn Bảy hoa 108 4.36 Ảnh hưởng mật độ khoảng cách trồng đến sinh trưởng Bảy hoa qua năm 109 4.37 Ảnh hưởng mật độ khoảng cách trồng đến tiêu cấu thành suất Bảy hoa 109 4.38 Ảnh hưởng mật độ trồng đến suất hàm lượng saponin Bảy hoa 110 4.39 Một số tiêu lý hố tính đất trước sau thí nghiệm 112 4.40 Ảnh hưởng cơng thức bón phân đến thời gian sinh trưởng qua giai đoạn Bảy hoa 112 4.41 Ảnh hưởng cơng thức phân bón đến số tiêu sinh trưởng phát triển Bảy hoa 113 4.42 Ảnh hưởng công thức phân bón đến tiêu cấu thành suất Bảy hoa 114 4.43 Ảnh hưởng cơng thức phân bón đến suất hàm lượng saponin Bảy hoa 114 ix DANH MỤC HÌNH TT 2.1 Tên hình Trang Điều kiện sống Bảy hoa 27 3.1 Khu vực nghiên cứu đề tài 34 4.1 Thân rễ mẫu giống Bảy hoa 48 4.2 Phần thân khí sinh mặt đất Bảy hoa mẫu Paris 49 4.3 Lát cắt ngang thân khí sinh mẫu Paris 50 4.4 Mắt mầm thân rễ phụ mọc từ thân rễ mẫu Paris 51 4.5 Sự đa dạng hình thái Bảy hoa 52 4.6 Lá bao chồi Bảy hoa mẫu Paris 53 4.7 Sự đa dạng hình thái hoa mẫu giống thuộc chi Paris 55 4.8 Hoa Bảy hoa 55 4.9 Cánh hoa Bảy hoa mẫu Paris 56 4.10 Nhị bảy hoa 56 4.11 Hình thái nhuỵ Bảy hoa mẫu Paris 57 4.12 Quả chín mở khe nứt dọc mẫu Paris 58 4.13 Hạt Bảy hoa mẫu Paris 58 4.14 Đặc điểm vi phẫu rễ mẫu Paris 60 4.15 Đặc điểm vi phẫu thân khí sinh mẫu Paris 61 4.16 Hình ảnh vi phẫu thân rễ mẫu Paris 62 4.17 a: Đặc điểm vi phẫu toàn gân lá; b: Một phần gân mẫu Paris 63 4.18 Đặc điểm vi phẫu phần phiến mẫu Paris 63 4.19 Đặc điểm vi phẫu dược liệu Bảy hoa mẫu Paris 64 4.20 Đặc điểm vi phẫu bột dược liệu mẫu Paris 65 4.21 Kết điện di DNA tổng số (a) sản phẩm PCR vùng gen ITS (b) psbA-trnH (c) mẫu nghiên cứu 66 4.22 Cây phát sinh chủng loại xây dựng dựa vùng gen ITS mẫu nghiên cứu theo phương pháp Maximum-Likelihood 67 4.23 Cây phát sinh chủng loại xây dựng dựa vùng gen ITS mẫu nghiên cứu theo phương pháp Neighbor-Joining 68 x 4.24 Cây phát sinh chủng loại vùng gen psbA-trnH theo phương pháp Maximum-Likelihood 70 4.25 Cây phát sinh chủng loại vùng gen psbA-trnH theo phương pháp Neighbor-Joining 71 4.26 Cây phát sinh chủng loại vùng gen ITS + psbA-trnH theo phương pháp Maximum - Likelihood 73 4.27 Cây phát sinh chủng loại vùng gen ITS + psbA-trnH theo phương pháp Neighbor-Joining 74 4.28 Các tiêu sinh trưởng mẫu giống Bảy hoa qua năm 78 4.29 Ảnh hưởng thời vụ trồng đến khả tăng trưởng bình quân sinh trưởng yếu tố cấu thành suất Bảy hoa qua năm 105 4.30 Ảnh hưởng thời vụ trồng đến khả tăng trưởng bình quân yếu tố cấu thành suất Bảy hoa qua năm 106 4.31 Ảnh hưởng mật độ trồng đến khả tăng trưởng hàng năm số tiêu sinh trưởng yếu tố cấu thành suất Bảy hoa 111 4.32 Ảnh hưởng chế độ bón phân đến lượng tăng trưởng bình qn hàng năm số tiêu sinh trưởng yếu tố cấu thành suất Bảy hoa qua năm 115 xi 2.37500 9.38000 SE(N= 4) 0.144338E-01 0.185405E-01 5%LSD 6DF 0.499287E-01 0.641346E-01 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TN02 gH_2 20/12/16 10:39 :PAGE Anh huong cua sau gieo hat F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE CCC DKT CRL CDL SR/C KL10C GRAND MEAN (N= 12) NO OBS 12 4.3585 12 2.7109 12 3.4444 12 4.3168 12 2.4000 12 9.3883 STANDARD DEVIATION C OF V |CTTN SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 0.10812 0.23523E-01 0.5 0.0001 0.10638 0.13610E-01 0.5 0.0000 0.13243 0.90828E-01 2.6 0.0764 0.45583E-010.22551E-01 0.5 0.0057 0.11282 0.28868E-01 1.2 0.0003 0.19385 0.37081E-01 0.4 0.0001 148 |LAPLAI | | | 0.3562 0.1887 0.1275 0.8873 0.0162 0.8624 | | | | Phụ lục 03 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TGMM FILE TN01BQ 12/12/16 8:58 :PAGE Anh huong cua PP bao quan hat giong den VARIATE V003 TGMM LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 4068.92 1356.31 89.10 0.000 LAPLAI 28.6667 14.3333 0.94 0.443 * RESIDUAL 91.3334 15.2222 * TOTAL (CORRECTED) 11 4188.92 380.811 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLMM FILE TN01BQ 12/12/16 8:58 :PAGE Anh huong cua PP bao quan hat giong den VARIATE V004 TLMM LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 1114.67 371.556 47.60 0.000 LAPLAI 5.16667 2.58333 0.33 0.733 * RESIDUAL 46.8334 7.80556 * TOTAL (CORRECTED) 11 1166.67 106.061 - BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLHTCC FILE TN01BQ 12/12/16 8:58 :PAGE Anh huong cua PP bao quan hat giong den VARIATE V005 TLHTCC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 1052.25 350.750 49.52 0.000 LAPLAI 9.50000 4.75000 0.67 0.549 * RESIDUAL 42.5001 7.08335 * TOTAL (CORRECTED) 11 1104.25 100.386 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TN01BQ 12/12/16 8:58 :PAGE Anh huong cua PP bao quan hat giong den MEANS FOR EFFECT CT CT NOS 3 3 TGMM 322.667 308.333 305.000 272.333 TLMM 45.3333 66.6667 60.0000 70.6667 TLHTCC 41.6667 62.6667 58.6667 66.0000 SE(N= 3) 2.25257 1.61303 1.53659 5%LSD 6DF 7.79200 5.57972 5.31532 MEANS FOR EFFECT LAPLAI - 149 LAPLAI NOS 4 TGMM 304.250 300.750 301.250 TLMM 59.7500 61.0000 61.2500 TLHTCC 56.5000 56.7500 58.5000 SE(N= 4) 1.95078 1.39692 1.33073 5%LSD 6DF 6.74807 4.83218 4.60320 - ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TN01BQ 12/12/16 8:58 :PAGE Anh huong cua PP bao quan hat giong den F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE TGMM TLMM TLHTCC GRAND MEAN (N= 12) NO OBS 12 302.08 12 60.667 12 57.250 STANDARD DEVIATION C OF V |CT SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 19.514 3.9016 1.3 0.0001 10.299 2.7938 4.6 0.0003 10.019 2.6615 4.6 0.0003 150 |LAPLAI | | | 0.4430 0.7329 0.5490 | | | | Phụ lục 04: BALANCED ANOVA FOR VARIATE CCC FILE TN01BQ_2 14/12/16 12:15 :PAGE Anh huong cua PP bao quan hat giong den VARIATE V003 CCC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CTTN 180963 603210E-01 3.08 0.112 LAPLAI 176866 884328E-01 4.52 0.063 * RESIDUAL 117345 195574E-01 * TOTAL (CORRECTED) 11 475173 431976E-01 BALANCED ANOVA FOR VARIATE DKT FILE TN01BQ_2 14/12/16 12:15 :PAGE Anh huong cua PP bao quan hat giong den VARIATE V004 DKT LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CTTN 111325 371083E-01 16.89 0.003 LAPLAI 185302E-01 926509E-02 4.22 0.072 * RESIDUAL 131858E-01 219764E-02 * TOTAL (CORRECTED) 11 143041 130037E-01 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CRL FILE TN01BQ_2 14/12/16 12:15 :PAGE Anh huong cua PP bao quan hat giong den VARIATE V005 CRL LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CTTN 121204 404014E-01 5.33 0.040 LAPLAI 588502E-01 294251E-01 3.88 0.083 * RESIDUAL 454945E-01 758241E-02 * TOTAL (CORRECTED) 11 225549 205044E-01 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CDL FILE TN01BQ_2 14/12/16 12:15 :PAGE Anh huong cua PP bao quan hat giong den VARIATE V006 CDL LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CTTN 161321 537737E-01 7.25 0.021 LAPLAI 719011E-01 359506E-01 4.85 0.056 * RESIDUAL 444868E-01 741447E-02 * TOTAL (CORRECTED) 11 277709 252463E-01 - BALANCED ANOVA FOR VARIATE SR/C FILE TN01BQ_2 14/12/16 12:15 :PAGE Anh huong cua PP bao quan hat giong den 151 VARIATE V007 SR/C LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CTTN 625000E-01 208333E-01 1.47 0.314 LAPLAI 150000E-01 750001E-02 0.53 0.617 * RESIDUAL 850000E-01 141667E-01 * TOTAL (CORRECTED) 11 162500 147727E-01 BALANCED ANOVA FOR VARIATE KL10C FILE TN01BQ_2 14/12/16 12:15 :PAGE Anh huong cua PP bao quan hat giong den VARIATE V008 KL10C LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CTTN 374467 124822 6.39 0.028 LAPLAI 158166E-01 790832E-02 0.40 0.687 * RESIDUAL 117184 195306E-01 * TOTAL (CORRECTED) 11 507467 461334E-01 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TN01BQ_2 14/12/16 12:15 :PAGE Anh huong cua PP bao quan hat giong den MEANS FOR EFFECT CTTN CTTN SE(N= 5%LSD NOS 3 3 3) 6DF CTTN CCC 4.36867 4.51567 4.50100 4.71267 DKT 2.52967 2.71233 2.73333 2.78500 CRL 3.26567 3.47133 3.49767 3.51567 CDL 4.22267 4.41767 4.52700 4.48033 0.807412E-01 0.270656E-01 0.502740E-01 0.497141E-01 0.279297 0.936242E-01 0.173906 0.171969 NOS 3 3 SR/C 2.26667 2.40000 2.36667 2.46667 KL10C 9.09000 9.41667 9.53333 9.50667 SE(N= 3) 0.687184E-01 0.806858E-01 5%LSD 6DF 0.237708 0.279105 MEANS FOR EFFECT LAPLAI LAPLAI SE(N= 5%LSD 4) 6DF LAPLAI SE(N= NOS 4 4) CCC 4.43175 4.69600 4.44575 DKT 2.67000 2.74500 2.65525 CRL 3.36900 3.53375 3.41000 CDL 4.33700 4.38025 4.51850 0.699239E-01 0.234395E-01 0.435385E-01 0.430537E-01 0.241878 0.810809E-01 0.150607 0.148929 NOS 4 SR/C 2.35000 2.42500 2.35000 KL10C 9.34750 9.43500 9.37750 0.595119E-01 0.698760E-01 152 5%LSD 6DF 0.205861 0.241712 - ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TN01BQ_2 14/12/16 12:15 :PAGE Anh huong cua PP bao quan hat giong den F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE CCC DKT CRL CDL SR/C KL10C GRAND MEAN (N= 12) NO OBS 12 4.5245 12 2.6901 12 3.4376 12 4.4119 12 2.3750 12 9.3867 STANDARD DEVIATION C OF V |CTTN SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 0.20784 0.13985 3.1 0.1116 0.11403 0.46879E-01 1.7 0.0031 0.14319 0.87077E-01 2.5 0.0402 0.15889 0.86107E-01 2.0 0.0210 0.12154 0.11902 5.0 0.3141 0.21479 0.13975 1.5 0.0276 153 |LAPLAI | | | 0.0634 0.0718 0.0827 0.0559 0.6174 0.6869 | | | | Phụ lục 05 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TGMM FILE TNGA3 21/12/16 8:24 :PAGE Anh huong cua nong GA3 den VARIATE V003 TGMM LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 956.250 318.750 17.63 0.003 LAPLAI 148.167 74.0833 4.10 0.075 * RESIDUAL 108.500 18.0833 * TOTAL (CORRECTED) 11 1212.92 110.265 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLMM FILE TNGA3 21/12/16 8:24 :PAGE Anh huong cua nong GA3 den VARIATE V004 TLMM LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 385.667 128.556 36.16 0.001 LAPLAI 666666 333333 0.09 0.911 * RESIDUAL 21.3334 3.55556 * TOTAL (CORRECTED) 11 407.667 37.0606 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLHTCC FILE TNGA3 21/12/16 8:24 :PAGE Anh huong cua nong GA3 den VARIATE V005 TLHTCC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 389.583 129.861 36.81 0.001 LAPLAI 3.50000 1.75000 0.50 0.635 * RESIDUAL 21.1667 3.52778 * TOTAL (CORRECTED) 11 414.250 37.6591 - 154 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TNGA3 21/12/16 8:24 :PAGE Anh huong cua nong GA3 den MEANS FOR EFFECT CT CT NOS 3 3 TGMM 270.667 253.667 248.333 249.667 TLMM 70.3333 82.0000 85.3333 81.6667 TLHTCC 69.6667 81.3333 84.6667 81.3333 SE(N= 3) 2.45515 1.08866 1.08440 5%LSD 6DF 8.49277 3.76586 3.75112 MEANS FOR EFFECT LAPLAI LAPLAI NOS 4 TGMM 253.750 260.500 252.500 TLMM 80.0000 80.0000 79.5000 TLHTCC 79.5000 79.7500 78.5000 SE(N= 4) 2.12623 0.942810 0.939119 5%LSD 6DF 7.35495 3.26133 3.24856 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TNGA3 21/12/16 8:24 :PAGE Anh huong cua nong GA3 den F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE TGMM TLMM TLHTCC GRAND MEAN (N= 12) NO OBS 12 255.58 12 79.833 12 79.250 STANDARD DEVIATION C OF V |CT SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 10.501 4.2525 1.7 0.0028 6.0877 1.8856 2.4 0.0006 6.1367 1.8782 2.4 0.0005 155 |LAPLAI | | | 0.0754 0.9113 0.6351 | | | | Phụ lục 06 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CCC FILE TNGA3_2 21/12/16 10:39 :PAGE Anh huong cua nong GA3 den VARIATE V003 CCC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CTTN 563150E-01 187717E-01 1.19 0.391 LAPLAI 289123 144561 9.15 0.016 * RESIDUAL 948213E-01 158036E-01 * TOTAL (CORRECTED) 11 440259 400236E-01 BALANCED ANOVA FOR VARIATE DKT FILE TNGA3_2 21/12/16 10:39 :PAGE Anh huong cua nong GA3 den VARIATE V004 DKT LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CTTN 310110E-01 103370E-01 4.21 0.064 LAPLAI 591217E-02 295608E-02 1.21 0.364 * RESIDUAL 147185E-01 245308E-02 * TOTAL (CORRECTED) 11 516417E-01 469470E-02 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CRL FILE TNGA3_2 21/12/16 10:39 :PAGE Anh huong cua nong GA3 den VARIATE V005 CRL LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CTTN 204700E-02 682333E-03 1.43 0.324 LAPLAI 599462E-01 299731E-01 62.87 0.000 * RESIDUAL 286051E-02 476752E-03 * TOTAL (CORRECTED) 11 648537E-01 589579E-02 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CDL FILE TNGA3_2 21/12/16 10:39 :PAGE Anh huong cua nong GA3 den VARIATE V006 CDL LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CTTN 926290E-02 308763E-02 0.67 0.604 LAPLAI 445653E-02 222826E-02 0.48 0.643 * RESIDUAL 277448E-01 462414E-02 * TOTAL (CORRECTED) 11 414643E-01 376948E-02 - 156 BALANCED ANOVA FOR VARIATE SR/C FILE TNGA3_2 21/12/16 10:39 :PAGE Anh huong cua nong GA3 den VARIATE V007 SR/C LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CTTN 715833 238611 14.08 0.005 LAPLAI 245000 122500 7.23 0.026 * RESIDUAL 101667 169444E-01 * TOTAL (CORRECTED) 11 1.06250 965909E-01 BALANCED ANOVA FOR VARIATE KL10C FILE TNGA3_2 21/12/16 10:39 :PAGE Anh huong cua nong GA3 den VARIATE V008 KL10C LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CTTN 489966 163322 2.87 0.125 LAPLAI 239116 119558 2.10 0.203 * RESIDUAL 340883 568139E-01 * TOTAL (CORRECTED) 11 1.06997 972696E-01 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TNGA3_2 21/12/16 10:39 :PAGE Anh huong cua nong GA3 den MEANS FOR EFFECT CTTN CTTN SE(N= 5%LSD NOS 3 3 3) 6DF CTTN CCC 4.55300 4.68967 4.73667 4.63233 DKT 2.65300 2.67533 2.77400 2.75300 CRL 3.44367 3.47333 3.47367 3.45267 CDL 4.29700 4.32267 4.37233 4.34500 0.725800E-01 0.285953E-01 0.126062E-01 0.392604E-01 0.251066 0.989159E-01 0.436070E-01 0.135808 NOS 3 3 SR/C 2.46667 2.73333 3.03333 3.06667 KL10C 9.62333 9.84333 10.0700 10.1367 SE(N= 3) 0.751542E-01 0.137615 5%LSD 6DF 0.259970 0.476033 MEANS FOR EFFECT LAPLAI LAPLAI SE(N= 5%LSD 4) 6DF LAPLAI NOS 4 CCC 4.45925 4.66025 4.83925 DKT 2.71175 2.68775 2.74200 CRL 3.37625 3.45700 3.54925 CDL 4.30700 4.34825 4.34750 0.628561E-01 0.247643E-01 0.109173E-01 0.340005E-01 0.217429 0.856637E-01 0.377648E-01 0.117613 NOS 4 SR/C 2.62500 2.95000 2.90000 KL10C 9.75250 9.90500 10.0975 157 SE(N= 4) 0.650854E-01 0.119178 5%LSD 6DF 0.225141 0.412257 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TNGA3_2 21/12/16 10:39 :PAGE Anh huong cua nong GA3 den F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE CCC DKT CRL CDL SR/C KL10C GRAND MEAN (N= 12) NO OBS 12 4.6529 12 2.7138 12 3.4608 12 4.3342 12 2.8250 12 9.9183 STANDARD DEVIATION C OF V |CTTN SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 0.20006 0.12571 2.7 0.3912 0.68518E-010.49529E-01 1.8 0.0638 0.76784E-010.21835E-01 0.6 0.3236 0.61396E-010.68001E-01 1.6 0.6039 0.31079 0.13017 4.6 0.0047 0.31188 0.23836 2.4 0.1254 158 |LAPLAI | | | 0.0157 0.3642 0.0002 0.6429 0.0257 0.2026 | | | | Phụ lục hình ảnh Hình 1: Thí nghiệm chuẩn bị hạt giống đất gieo hạt Bảy hoa Hình 2: Triển khai thí nghiệm gieo hạt Bảy hoa 159 Hình 3: Theo dõi giống Bảy hoa năm tuổi a b c d e Hình : Cây giống Bảy hoa mẫu Paris - Paris vietnamensis (Takht.) H Li a Hạt giống trước gieo; b Cây năm tuổi; c Cây năm tuổi; d Cây năm tuổi; e Cây năm tuổi 160 Hình 5: Cây giống tách chồi Bảy hoa mẫu Paris Paris vietnamensis (Takht.) H Li Hình 6: Thí nghiệm trồng Bảy hoa 161 Hình 7: Thí nghiệm phân bón Bảy hoa năm tuổi Sa Pa, Lào Cai 162