NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
Đối tượng, địa điểm và thời gian nghiên cứu
3.1.1 Đối tượng nghiên cứu Đàn gà nhiều ngón của 8 gia đình tại Xuân Sơn – Tân Sơn – Phú Thọ và 2 gia đình tại Cổ Đô – Ba Vì – Hà Nội
- Tại xã Xuân Sơn - Tân Sơn - Phú Thọ
- Tại xã Cổ Đô – Ba Vì – Hà Nội
- Thời gian thực hiện luận văn từ tháng 6/2013 đến tháng 10/2015
Nội dung nghiên cứu
Đặc điểm di truyền của gà nhiều ngón
- Đánh giá đặc điểm và khoảng cách di truyền giữa gà nhiều ngón với một số giống gà khác
- Nghiên cứu khả năng di truyền tính trạng nhiều ngón cho thế hệ sau
Khả năng sản xuất của gà nhiều ngón
- Khả năng cho thịt và thành phần hóa học chất lượng thịt
- Tỷ lệ nuôi sống và bệnh chính xảy ra trên gà nhiều ngón
Phương pháp nghiên cứu
3.3.1 Phương pháp nghiên cứu đặc điểm di truyền của gà nhiều ngón Đánh giá đặc điểm và khoảng cách di truyền giữa gà nhiều ngón với một số giống gà khác
* Các ch ỉ tiêu theo dõi:
+ Kết quả chạy điện di
+ Dải alen và tần số alen quan sát
+ Độ phong phú các alen
+ Tần số dị hợp tử và hệ số cận huyết
+ Sự sai khác, khoảng cách và cây quan hệ di truyền giữa gà nhiều ngón với một số giống gà khác
* Ph ươ ng pháp nghiên c ứ u:
Lấy mẫu máu tĩnh mạch cánh từ 30 con gà nhiều ngón (6 ngón) tại xã Xuân Sơn, Tân Sơn, Phú Thọ, với thể tích 1ml mỗi con Sau khi hút, máu được cho vào ống Eppendorf 1.5ml có nắp kín, chứa 0.5ml dung dịch EDTA 0.5M Sau đó, hỗn hợp được lắc nhẹ 4-5 lượt và bảo quản trong hộp lạnh để đảm bảo chất lượng mẫu.
Mẫu sau khi thu thập sẽ được gửi ngay đến phòng Thí nghiệm trọng điểm và công nghệ tế bào thuộc Viện Chăn Nuôi để tiến hành phân tích đặc điểm và khoảng cách di truyền thông qua công nghệ Microsatellite.
Kết quả của quá trình điện di cho thấy chất lượng mẫu phân tích có tốt hay không, điều này có ảnh hưởng trực tiếp đến kết quả cuối cùng Mẫu phân tích sau khi thực hiện điện di cần phải rõ nét, với chỉ số OD đạt từ 1,8 đến 2,0.
Sau khi đạt được kết quả tốt từ quá trình điện di, chúng ta sẽ tiếp tục phân tích các đặc điểm di truyền của quần thể gà nhiều ngón Những yếu tố cần xem xét bao gồm dải alen quan sát, tần số alen quan sát, tần số dị hợp tử và hệ số cận huyết, nhằm đánh giá chính xác đặc điểm di truyền của quần thể này.
Bài viết tiếp tục đánh giá khoảng cách di truyền và xây dựng cây quan hệ di truyền của gà nhiều ngón so với bốn giống gà khác: gà Đông Tảo, gà Mía, gà Ri và gà Tàu Vàng Phương pháp neighbor joining theo tác giả Nei (1978) được sử dụng để thực hiện so sánh này Các giống gà được chọn có nhiều đặc điểm tương đồng hoặc có phân bố gần gà nhiều ngón, góp phần làm rõ mối quan hệ di truyền giữa chúng.
33 địa lý tương đồng Đồng thời chúng cũng đã được phân tích, đánh giá đặc điểm di truyền phân tử
* Các công th ứ c đượ c s ử d ụ ng:
- Tần số alen trong locus:
Trong nghiên cứu di truyền, pi đại diện cho tần số của alen i Các ký hiệu AiAi và AiAj tương ứng với số lượng cá thể mang đồng hợp tử và dị hợp tử với alen i Ký hiệu k biểu thị số lượng alen của locus, trong khi N là tổng số cá thể trong nghiên cứu.
- Độ phong phú alen được tính theo công thức:
Độ phong phú alen (R s) được tính bằng cách xác định số lượng alen loại i (N i) trong tổng số 2N gen Để tính toán R t, số lượng alen (n) được giữ nguyên, trong khi N đại diện cho tổng số cá thể trong các mẫu gen được phân tích tại locus đang xem xét.
- Tính tần số dị hợp tử mong đợi (Nei, 1987):
Trong đó: Hnb là tần số dị hợp tử mong đợi, n số lượng các cá thể; x tần số alen ở locus i; k số lượng các alen ở locus i
- Hệ số cận huyết (Fis) được tính theo công thức:
Hệ số cận huyết Fis tại locus k trong một quần thể được xác định thông qua tần số dị hợp tử quan sát (Hok) và tần số dị hợp tử mong đợi (Hsk).
- Khoảng cách di truyền (Nei, 1978):
Trong đó: Pijx, Pijy là tần số alen j tại locus i ở nhóm x và y tương ứng; K là số alen tại locus i; L là số locus
Khả năng di truyền tính trạng nhiều ngón cho thế hệ sau
+ Kết quả số lượng ngón chân của thế hệ con
* Ph ươ ng pháp nghiên c ứ u:
Tại Xuân Sơn – Phú Thọ, chúng tôi đã thực hiện việc ghép phối 5 gà trống với 30 gà mái bố mẹ có nhiều ngón (6 ngón) Trứng từ những cặp bố mẹ này được thu hoạch và ấp nở, đồng thời thông tin di truyền về tính trạng số ngón của đàn gà con được ghi chép đầy đủ để đánh giá mức độ ổn định của giống.
3.3.2 Phương pháp nghiên cứu về khả năng sản xuất của gà nhiều ngón
Bảng 3.1 Chế độ chăm sóc nuôi dưỡng đàn gà nhiều ngón
Giai đoạn nuôi (tuần tuổi)
Phương thức nuôi Thức ăn Cách cho ăn
Biện pháp vệ sinh thú y Chuồng trại
Bán chăn thả tự nhiên (theo mẹ)
Có chuồng đơn sơ che mưa nắng và tối ngủ
Bán chăn thả tự nhiên (theo mẹ)
Gạo, tấm, cám ngô, thóc, bỗng rượu
Có chuồng đơn sơ che mưa nắng và tối ngủ
Bán chăn thả tự nhiên (tách mẹ mẹ)
Cám ngô, cám gạo, thóc, bỗng rượu, sắn lát nhỏ, rau xanh
Có chuồng đơn sơ che mưa nắng và tối ngủ
Sinh sản Bán chăn thả tự nhiên
Cám ngô, cám gạo, thóc, bỗng rượu, sắn lát nhỏ, rau xanh
Có chuồng đơn sơ che mưa nắng và tối ngủ và có ổ đẻ
B Phương pháp nghiên cứu trên các chỉ tiêu
* Các ch ỉ tiêu theo dõi:
* Ph ươ ng pháp nghiên c ứ u:
- Thí nghiệm nghiên cứu trên 100 con gà nhiều ngón được nuôi từ 01 ngày tuổi tại Xuân Sơn – Tân Sơn – Phú Thọ
Hàng tuần, cân đồng hồ Nhơn Hòa được kiểm tra định kỳ với các trọng lượng 100g, 200g, 500g, 1000g, 2000g và 5000g, phù hợp với từng giai đoạn tuổi Việc này giúp theo dõi sự sinh trưởng tích lũy, từ đó tính toán được sinh trưởng tương đối và tuyệt đối.
Các công th ứ c đượ c s ử d ụ ng:
Trong đ ó: R là sinh trưởng tương đối
P1, P2 lần lượt là khối lượng tại thời điểm ban đầu và sau
+ Sinh trưởng tuyệt đối (g/con/tuần)
Trong đ ó: A là sinh trưởng tuyệt đối
P1, P2 lần lượt là khối lượng tại thời điểm ban đầu và sau t là khoảng thời gian gian giữa 2 lần cân
Tỷ lệ nuôi sống của gà nhiều ngón
* Ph ươ ng pháp nghiên c ứ u
Nghiên cứu chỉ tiêu này chúng tôi tiến hành tại 2 địa điểm là tại Xuân Sơn - Phú Thọ và tại Cổ Đô - Ba Vì
- Tỷ lệ nuôi sống: Ghi chép, cập nhật tình hình số con đầu kỳ, cuối kỳ từng giai đoạn
* Các ch ỉ tiêu theo dõi:
+ Tuổi đẻ quả trứng đầu, đẻ 30% và đẻ đỉnh cao
+ Tỷ lệ đẻ và sản lượng trứng/mái/năm
+ Kết quả trứng có phôi và tỷ lệ ấp nở
+ Một vài chỉ tiêu chất lượng về trứng: Màu sắc, khối lượng
* Ph ươ ng pháp nghiên c ứ u:
- Tuổi đẻ quả trứng đầu, đẻ 30% và đẻ đỉnh cao
+ Theo dõi trên đàn gà của 10 hộ gia đình (8 hộ tại Xuân Sơn và 2 hộ tại Cổ Đô) có nuôi gà nhiều ngón sinh sản
+ Tuổi đẻ quả trứng đầu, 30% và đẻ đỉnh cao: là thời điểm tại đó trong đàn gà đẻ quả trứng đầu tiên, 30% và đẻ đỉnh cao
- Tỷ lệ đẻ và năng suất trứng
+ Từ 100 con gà nhiều ngón từ đàn theo dõi chỉ tiêu sinh trưởng được nuôi đến
Vào tuần thứ 20, 35 cá thể gà nhiều ngón (5 trống và 30 mái) khỏe mạnh và đặc trưng nhất đã được chọn để thực hiện thí nghiệm và theo dõi các chỉ tiêu sinh sản Đàn gà sinh sản được nuôi trong một khu cách ly có rào chắn với các đàn gà khác, nhằm đảm bảo việc theo dõi và thu thập kết quả một cách khách quan nhất.
+ Hàng ngày định kỳ theo dõi, ghi chép tổng số trứng đẻ ra của toàn đàn
Các công th ứ c đượ c s ử d ụ ng:
+ Tỷ lệ đẻ (%) Tổng số trứng đẻ ra trong kỳ (quả) x 100 Tổng số mái có mặt trong kỳ (con)
+ NST (quả/mái/tuần) Tổng số trứng đẻ ra trong kỳ (quả)
Số mái bình quân có măt trong kỳ (con)
- Kết quả trứng có phôi và tỷ lệ ấp nở
Chúng tôi đã theo dõi chỉ tiêu kết quả trứng có phôi và tỷ lệ ấp nở không chỉ tại Xuân Sơn, Phú Thọ mà còn tại Cổ Đô, Hà Nội để so sánh sự khác biệt giữa các địa phương về các chỉ tiêu này.
+ Tại Xuân Sơn lấy 346 trứng, tại Cổ Đô lấy 634 quả trứng gà nhiều ngón đẻ ổn định từ tuần đẻ thứ 10 trở đi cho ấp nhân tạo
Các công th ứ c đượ c s ử d ụ ng:
+ Tỷ lệ trứng có phôi
(%) Số trứng có phôi (quả) x 100
Số trứng đem ấp (quả)
+ Tỷ lệ trứng ấp nở (%) = Số gà con nở ra (con) x 100
Số trứng đem ấp (quả)
- Một vài chỉ tiêu về trứng:
+ Thống kê ghi chép số lượng màu trứng của 435 quả
Cân đồng hồ Nhơn Hòa với định mức 100g và độ chính xác 0,01g được sử dụng để đo khối lượng trứng khi gà vào đẻ và trong giai đoạn đẻ trứng đỉnh cao Bên cạnh đó, việc đánh giá khả năng cho thịt và thành phần hóa học chất lượng thịt của gà nhiều ngón cũng rất quan trọng.
+ Thành phần hóa học thịt:
* Ph ươ ng pháp nghiên c ứ u:
Nghiên cứu đã tiến hành mổ khảo sát 6 con gà nhiều ngón (bao gồm 3 trống và 3 mái) ở giai đoạn 24 tuần tuổi để đánh giá các chỉ tiêu chất lượng như tỷ lệ thân thịt, tỷ lệ thịt lườn (ức), tỷ lệ thịt đùi và tỷ lệ mỡ bụng Phương pháp nghiên cứu được áp dụng theo Bùi Quang Tiến (1993) và Auaas và Wike (1978).
Các công th ứ c đượ c s ử d ụ ng:
+ Tỷ lệ thân thịt (%) = Khối lượng thân thịt (g) x 100 Khối lượng sống (g)
+ Tỷ lệ thịt đùi (%) = Khối lượng đùi trái (g) x 2 x 100 Khối lượng thân thịt (g)
+ Tỷ lệ thịt lườn (%) = Khối lượng lườn trái (g) x 2 x 100 Khối lượng thân thịt (g)
+ Tỷ lệ mỡ bụng (%) = Khối lượng mỡ bụng (g) x 100 Khối lượng thân thịt (g)
- Thành phần hoá học thịt: Được gửi phân tích tại Phòng phân tích - Viện Chăn Nuôi
+ Xác định hàm lượng vật chất khô theo TCVN 43.26-86
+ Xác định hàm lượng protein thô theo TCVN 43.26-86
+ Xác định hàm lượng mỡ thô theo TCVN 43.26-86
+ Xác định hàm lượng khoáng tổng số theo TCVN 43.26-86
+ Phân tích thành phần của 16 axit amin có trong thịt gà theo phương pháp Aminoquan trên máy sắc kí lỏng cao áp HPLC.
Xử lý số liệu
Microsatellite data was processed using various software tools, including FSTAT v2.9.3, Genetix v4.03, and Microsatellite Analyser (MSA) v4.05 Additionally, the analysis involved the neighbor and consensus programs from the Phylip v3.69 software package, along with Treeview v1.6.6, the ggplot2 package, and R software.
- Số liệu được thu thập và xử lý theo phương pháp thống kê sinh học bằng các phần mềm Excell 2003 và Minitab 16