Các Xét nghiệm đông máu sử dụng trên lâm sàng

Máu là một chất lỏng lưu thông dưới áp lực thông qua mạch máu. Sau chấn thương mạch máu, bất kỳ lượng máu thoát ra nào phải nhanh chóng được chuyển thành gel (“cục máu đông”) để bịt lỗ thủng và giảm thiểu mất máu thêm. Phần huyết tương của máu chứa một tập hợp các protein hòa tan hoạt động cùng nhau trong một loạt các sự kiện kích hoạt enzyme, đỉnh điểm là sự hình thành cục máu đông fibrin 1. Quá trình đông cầm máu bao gồm các tác động qua lại mật thiết giữa ba thành phần: thành mạch, các tế bào máu và các protein huyết tương họat động dưới hình thức phản ứng men. Quá trình này hoạt động theo yêu cầu và bị điều hòa bởi các yếu tố thần kinh và thể dịch. Trong cơ thể luôn có sự cân bằng giữa hai hệ thống: làm đông máu và chống lại quá trình đông máu. Một hệ thống mang tính bảo vệ cơ thể tránh chảy máu, một hệ thống đóng vai trò gìn giữ lưu thông lòng mạch để luôn bảo đảm tuần hoàn duy trì sự sống. Mất cân bằng hai hệ này sẽ dẫn đến hậu quả làm tắc mạch hoặc chảy máu.

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC QUỐC TẾ HỒNG BÀNG HỌC PHẦN: HUYẾT HỌC, ĐÔNG MÁU, TRUYỀN MÁU, TỦY ĐỒ VÀ ỨNG DỤNG SINH HỌC PHÂN TỬ TRONG HUYẾT HỌC CHUYÊN ĐỀ: XÉT NGHIỆM ĐÔNG MÁU SỬ DỤNG TRÊN LÂM SÀNG Học viên: Lê Anh Nhung Mã số học viên: 2226080043 Lớp: VS22CH3NC-XN Giảng viên hướng dẫn: TS BS Trần Thanh Tùng Thành phố Hồ Chí Minh - 2023 LỜI CẢM ƠN  Đầu tiên, em xin bày tỏ lòng biết ơn đến trường Đại học Quốc tế Hồng Bàng thầy cô Viện sau Đại học, quý thầy cô khoa Kỹ thuật Y học hỗ trợ giúp đỡ em suốt thời gian học tập nghiên cứu niên khóa 2022 – 2024 Đồng thời, em xin đặc biệt cám ơn thầy –TS.BS Trần Thanh Tùng – Giảng viên môn: “Huyết học, đông máu, truyền máu, tủy đồ ứng dụng sinh học phân tử huyết học” trường Đại học Quốc tế Hồng Bàng tận tình giúp đỡ, dạy hướng dẫn em hoàn thành chuyên đề Em xin chân thành cảm ơn! Học viên: LÊ ANH NHUNG LỚP: VS22CH3NC- XN1 MSSV: 2226080043 MỤC LỤC CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC BẢNG DANH MỤC SƠ ĐỒ DANH MỤC BIỂU ĐỒ MỞ ĐẦU CHƯƠNG I SINH LÝ ĐÔNG - CẦM MÁU 1.1 Các yếu tố tham gia đông cầm máu 1.1.1 Co mạch 1.1.2 Nội mạc lớp nội mạc 1.1.3 Tiểu cầu 1.1.4 Yếu tố Von Willebrand 1.1.5 Các yếu tố đông máu huyết tương 1.1.6 Các chất ức chế đông máu 1.2 Các giai đoạn đông cầm máu thể: 1.3 Giai đoạn cầm máu ban đầu 1.4 Giai đoạn đông máu huyết tương 1.4.1 Thời kỳ hình thành throboplastin hoạt hóa 1.4.2 Thời kỳ hình thành thrombin 10 1.4.3 Thời kỳ hình thành fibrin 10 1.5 Giai đoạn tiêu sợi huyết 11 CHƯƠNG II CÁC XÉT NGHIỆM ĐÔNG MÁU SỬ DỤNG TRÊN LÂM SÀNG 13 2.1 Chuẩn bị mẫu 13 2.2 Các xét nghiệm đông máu sử dụng lâm sàng 15 2.2.1 Prothrombin time (PT) INR 15 2.2.2 Thời gian Thromboplastin phần hoạt hóa (APTT – Activated Partial Thromboplastin time) 18 2.2.3 Thời gian Thrombin (TT) 22 2.2.4 Thời gian reptilase (RT) 25 2.2.5 Xét nghiệm chống đông máu Lupus (LA) 26 2.2.6 Xét nghiệm yếu tố đông máu 27 2.2.7 Bộ xét nghiệm tăng đông, huyết khối 40 2.2.8 Đếm số lượng tiểu cầu 41 KẾT LUẬN 42 TÀI LIỆU THAM KHẢO 43 CHỮ VIẾT TẮT APTT Activated partial thromboplastin time AT III Anti Thrombin III DIC Disseminated Intravascular Coagulation Đơng máu rải rác lịng mạch ELISA Enzyme-linked immunosorbent assay HMWK High Molecular Weigh Kininogen INR International Normalized Ratio PPP Platelet poor plasma PT Prothrombin Time RT Reptilase Time t-PA tissue plasminogen activator TT Thrombin Time DANH MỤC BẢNG Bảng 1 Bảng Các yếu tố đông máu huyết tương Bảng Các chất ức chế serin protease Bảng Bảng chất ức chế hệ thống Protein C Bảng Thành phần thuốc thử Prothrombin Time………………………… 16 Bảng 2 Thành phẩn thuốc thử APTT 20 Bảng Thành phần thuốc thử Thrombin Time 24 Bảng Nồng độ pha loãng dựa vào xét nghiệm PT giai đoạn 28 Bảng Nồng độ pha loãng dựa vào xét nghiệm APTT giai đoạn 31 Bảng Thành phần thuốc thử yếu tố nhiễm sắc thể VIII 32 Bảng Thành phần thuốc thử RVV 34 Bảng Các xét nghiệm định lượng Fibrinogen 35 Bảng Lựa chọn loại xét nghiệm Fibrinogen 36 Bảng 10 Phân tích kết fibrinogen 37 Bảng 11 Các xét nghiệm hịa tan cục máu đơng 38 Bảng 12 Các nhóm ngun nhân gây tăng, giảm tiểu cầu 41 DANH MỤC SƠ ĐỒ Sơ đồ 1 Giai đoạn cầm máu ban đầu Sơ đồ Đông máu huyết tương 11 Sơ đồ Giai đoạn tiêu sợi huyết 12 Sơ đồ Dòng thác đông máu yếu tố ảnh hưởng lên PT…………….15 Sơ đồ 2 Dịng thác đơng máu yếu tố ảnh hưởng lên APTT 19 Sơ đồ Dịng thác đơng máu yếu tố ảnh hưởng lên TT 23 Sơ đồ Phương pháp Clauss để đo Fibrinogen 36 DANH MỤC BIỂU ĐỒ Biểu đồ Biểu đồ Log - Log PT giai đoạn 29 Biểu đồ 2 Biểu đồ Log – Log APTT giai đoạn 31 MỞ ĐẦU Máu chất lỏng lưu thông áp lực thông qua mạch máu Sau chấn thương mạch máu, lượng máu thoát phải nhanh chóng chuyển thành gel (“cục máu đơng”) để bịt lỗ thủng giảm thiểu máu thêm Phần huyết tương máu chứa tập hợp protein hòa tan hoạt động loạt kiện kích hoạt enzyme, đỉnh điểm hình thành cục máu đơng fibrin [1] Q trình đơng cầm máu bao gồm tác động qua lại mật thiết ba thành phần: thành mạch, tế bào máu protein huyết tương họat động hình thức phản ứng men Quá trình hoạt động theo yêu cầu bị điều hòa yếu tố thần kinh thể dịch Trong thể ln có cân hai hệ thống: làm đông máu chống lại q trình đơng máu Một hệ thống mang tính bảo vệ thể tránh chảy máu, hệ thống đóng vai trị gìn giữ lưu thơng lịng mạch để ln bảo đảm tuần hồn trì sống Mất cân hai hệ dẫn đến hậu làm tắc mạch chảy máu Chuyên đề “Xét nghiệm đông máu sử dụng lâm sàng” viết với hai mục tiêu: Mục tiêu 1: Trình bày giai đoạn đơng cầm máu Mục tiêu 2: Trình các xét nghiệm đông máu sử dụng lâm sàng CHƯƠNG I SINH LÝ ĐƠNG - CẦM MÁU Đơng - cầm máu chế dẫn đến ngừng chảy máu từ mạch máu Đó q trình bao gồm nhiều bước liên kết với Dòng thác lên đến đỉnh điểm hình thành “phích cắm” đóng kín vị trí bị tổn thương mạch máu kiểm sốt chảy máu Nó bắt đầu với chấn thương niêm mạc mạch máu Cơ chế đông – cầm máu chia thành bốn giai đoạn:  Một là, co thắt mạch máu  Hai là, hình thành “nút tiểu cầu" tạm thời  Ba là, kích hoạt dịng thác đơng máu  Bốn là, hình thành “nút fibrin” cục máu đông cuối 1.1 Các yếu tố tham gia đông cầm máu 1.1.1 Co mạch Khi mạch máu bị tổn thương, yếu tố thần kinh thể dịch tác động làm co mạch làm giảm kính mạch máu giảm lưu lượng dịng chảy tạo điều kiện cho tiểu cầu dính vào lớp nội mạc 1.1.2 Nội mạc lớp nội mạc a, Tế bào nội mạc Các tế bào nội mạc có vai trị quan trọng việc chống tạo huyết khối tạo cân hệ thống yếu tố đông máu huyết tương hệ thống chất hoạt hóa đơng cầm máu nhờ số đặc tính cấu trúc sau: - Các tế bào nội mạc có lớp glycocalyx bề mặt, chứa heparin sunphat (có vai trị chống đơng máu) glycosaminoglycan (có khả hoạt hóa antithrombinIII chất ức chế đông máu mạnh) - Tế bào nội mạc tham gia vào q trình điều hịa vận mạch nhờ chuyển hóa bất hoạt peptid hoạt mạch - Nội mạc chứa men prostacyclin synthetase có tác dụng chuyển acid arachidonic thành prostaglandin, chất ức chế tiểu cầu mạnh - Tế bào nội mạc chứa thrombomodulin chất gắn với thrombin hoạt hóa protein C để thoái giáng ức chế yếu tố đơng máu có tên Va, VIIIa Ngồi tổng hợp protein S đồng yếu tố protein C - Khi có mặt thrombin, tế bào nội mạc hoạt hóa plasminogen để khởi động tiêu fibrin - Tế bào nội mạc tổng hợp yếu tố Von Willebrand (w-WF), yếu tố quan trọng cần thiết cho q trình dính tiểu cầu vào collagen tổ chức nội mạc để khởi động q trình đơng máu b, Tổ chức nội mạc Tổ chức bao gồm nhiều thành phần collagen, tổ chức chun, màng nền, vi sợi, proteoglycan, mucopolysarcarid, fibronectin…Khi thành mạch bị tổn thương, thành phần nội mạc bị bộc lộ gây dính tiểu cầu (nhất dính vào collagen) để hoạt hóa q trình cầm máu 1.1.3 Tiểu cầu Tiểu cầu đóng vai trị quan trọng hình thành đinh cầm máu Hayem (nút trắng tiểu cầu) thơng qua chức dính, giải phóng ngưng tập Chức dính tiểu cầu vào lớp nội mạc thành mạch tổn thương phụ thuộc vào yếu tố Von Willebrand glycoprotein màng tiểu cầu Sau dính tiểu cầu q trình giải phóng nhiều chất ADP, serotonin, yếu tố tiểu cầu… tiếp tục hoạt hóa q trình đơng máu Phản ứng giải phóng bị ức chế prostacyclin Các chất mà tiểu cầu vừa giải phóng ADP thromboxan A2 thúc đẩy tiểu cầu dính vào khuếch đại phản ứng giải phóng để tạo khối tiểu cầu đủ lớn nút vùng thành mạch tổn thương 1.1.4 Yếu tố Von Willebrand Là yếu tố tổng hợp từ tế bào nội mạc mẫu tiểu cầu Chúng lưu hành máu dạng tách rời tạo phức hợp gắn với yếu tố VIII đơng máu (VIII:C) Yếu tố có vai trò quan trọng cầm máu kỳ đầu cầu nối liên kết tiểu cầu collagen thành mạch bị tổn thương tạo đinh cầm máu Ngồi ra, chất mang yếu tố VIII nên có vai trị q trình đông máu huyết tương 1.1.5 Các yếu tố đông máu huyết tương Các yếu tố đông máu xác định đặt tên cách đánh số La mã theo thứ tự tìm ra, nhiên sau người ta nhận thấy số yếu tố không tương ứng với protein riêng biệt nên số bị bỏ (như III, IV, VI), số yếu tố phát khơng đánh số Bảng 1 Bảng Các yếu tố đông máu huyết tương Các yếu tố đông máu chất glycoprotein phân nhóm khác tùy theo chức nên ta có nhóm zymogen (dạng tiền men) hay đồng yếu tố, có yếu tố chất fibrinogen Ion Canxi có vai trị quan trọng đơng máu tạo điều kiện thuận lợi cho yếu tố phụ thuộc vitamin K kết hợp với phopsholipid Ion canxi cần thiết cho số phản ứng số yếu tố khơng phụ thuộc vitamin K thể hoạt tính men XIIIa, ổn định yếu tố V phức hệ yếu tố Willebrand VIII: C  Xét nghiệm yếu tố đông máu dựa vào APTT giai đoạn Nguyên lý: Xét nghiệm Yếu tố dựa APTT giai đoạn sử dụng để đo Yếu tố VIII, IX, XI XII Nó sử dụng để xét nghiệm Yếu tố X, V II (Protrombin) xét nghiệm dựa PT sử dụng phổ biến Yếu tố XII phân tích kỹ thuật Pre-Kallikrein (PRK) Kininogen trọng lượng phân tử cao (HMWK) hai yếu tố không liên quan đến xu hướng chảy máu chúng dẫn đến kéo dài APTT đáng kể Việc xét nghiệm yếu tố đông máu phụ thuộc vào việc đo mức độ hiệu chỉnh APTT huyết tương thêm vào mẫu huyết tương đặc biệt thiếu yếu tố cần đo Dưới tóm tắt nguyên tắc xét nghiệm Yếu tố VIII giai đoạn: Hình Xét nghiệm APTT giai đoạn Chất kích hoạt: + Silica, Axit Ellagic gặp Kaolin + PL: Phospholipid tổng hợp sử dụng để thay phospholipid có nguồn gốc từ tiểu cầu xét nghiệm thực Huyết tương nghèo tiểu cầu Phương pháp: Nói chung [nhưng khơng phải ln ln] độ pha lỗng 1/10 lấy để đại diện cho 100 IU/dL [100% 1,00 IU/mL] Bảng sau minh họa 30 nồng độ Yếu tố đơng máu với độ pha lỗng tăng dần độ pha lỗng 1/10 giả định có 100% [100 IU/dL 1,00 IU/mL] Bảng Nồng độ pha loãng dựa vào xét nghiệm APTT giai đoạn Pha 1/10 20/1 30/1 1/40 1/80 1/100 100% 50% 33% 25% 12,5% 10% % 100 50 33 25 12,5 10 Hoạt IU/dL IU/dL IU/dL IU/dL IU/dL IU/dL động 1,00 0,50 0,33 0,25 0,125 0,10 IU/mL IU/mL IU/mL IU/mL IU/mL IU/mL loãng 1/1000 1% IU/dL 0,01 IU/mL Kết quả: APTT huyết tương test độ pha loãng biểu diễn kết biểu đồ Log-Lin (độ pha loãng trục X, thời gian trục Y) Biểu đồ 2 Biểu đồ Log – Log APTT giai đoạn 31 b Xét nghiệm tạo màu: Xét nghiệm tạo màu sử dụng phân tách chất tạo màu (có màu) chất đường chuẩn để đánh giá hoạt động yếu tố  Xét nghiệm Nhiễm sắc thể VIII Với giai đoạn tạo FXa giai đoạn xác định lượng FXa tạo Trong phương pháp này, lượng FXa đo khả tương tác với chất tạo màu đặc hiệu cao cường độ màu tạo tỷ lệ trực tiếp với lượng FXa, suy tỷ lệ trực tiếp với FVIII, mức FVIII tính từ độ hấp thụ bước sóng đặc hiệu mẫu (bước sóng hấp thụ tối ưu cho nhiễm sắc thể tạo phân cắt FXa nhiễm sắc thể thường 405nm Bảng Thành phần thuốc thử yếu tố nhiễm sắc thể VIII Thành phần Hỗn hợp thuốc thử để tạo FXa Chất nhiễm sắc Huyết tương bệnh nhân Giải trình Chứa FIXa, FX dư thừa, Thrombin [Yếu tố IIa], nguồn cung cấp ion canxi phospholipid Một chất bị phân cắt FXa để tạo thay đổi màu sắc Cũng chứa chất ức chế Thrombin để ngăn chặn trình tạo FXa thêm chất nhiễm sắc Huyết tương nghèo tiểu cầu Huyết tương bệnh nhân ủ với hỗn hợp thuốc thử 37°C Thrombin cocktail kích hoạt FVIII thành FVIIIa với có mặt Ca 2+ phospholipid, chất hoạt động đồng yếu tố cho FIXa để chuyển đổi FX thành FXa Nồng độ FVIII bước giới hạn tốc độ Chất tạo màu thêm vào Yếu tố Xa thủy phân chất tạo màu độ hấp thụ sản phẩm thu (thường p -nitroaniline giải phóng enzyme) đo so sánh với đường cong tham chiếu để đưa mức FVIII 32 Đường cong tham chiếu vẽ độ hấp thụ bước sóng 405nm so với nồng độ đường thẳng đồ thị  Xét nghiệm sinh màu yếu tố X RVV (Russell’s Viper Venom) hoạt hóa trực tiếp FX diện FV, Prothrombin, Calcium, Phospholipid dẫn đến tạo thành cục máu đông RVV phân lập từ rắn hổ bướm, tên khoa học Daboia russelii Xét nghiệm RVV xét nghiệm để đo FX thực ngày (4 loại khác là: dựa vào PT, dựa vào APTT, tạo màu, miễn dịch) xét nghiệm dựa vào PT APTT thực phổ biến Nguyên lý: Nguyên lý RVV xét nghiệm FX tương tự xét nghiệm yếu tố dựa vào PT giai đoạn Một loạt độ pha loãng huyết tương tham chiếu huyết tương test thực cho tạo cục đông RVV Thời gian cục đông ghi lại, ghi biểu đồ Log-Log so sánh đường chuẩn với đường test 33 Phương pháp: Bảng Thành phần thuốc thử RVV Thành phần Yếu tố X tham chiếu huyết tương Độ pha loãng: 1/10, 1/20, thử nghiệm 1/140, 1/100 Nọc độc Russell Viper (RVV) + thay tiểu cầu Mua thương mại 0,025M Canxi Clorua Huyết tương chất thiếu hụt yếu tố X Mua thương mại Một mẫu huyết tương thiếu FX trộn với mẫu huyết tương tham chiếu huyết tương test pha loãng, ủ 37 độ C 30 giây sau RVV+chất thay tiểu cầu cho vào 30 giây sau, cục đông khởi động cách thêm Calcium Chloride 0,025M thời gian cục đông ghi lại Kết biểu diễn giấy Log-Log từ suy theo phương pháp dựa vào PT giai đoạn Kết quả: FX thấp gặp tình sau: + Kết hợp với thiếu hụt yếu tố đông máu khác bệnh nhân thiếu vitamin K bệnh nhân dùng thuốc đối kháng vitamin K, ví dụ Warfarin + Thiếu yếu tố X bẩm sinh + Bệnh gan + Bệnh amyloidosis hấp phụ Yếu tố X lên sợi amyloid + Thuốc ức chế yếu tố X mắc phải (hiếm) +Bệnh nhân bị nhiễm sắc thể 13 (chr13q) bị thiếu hụt Yếu tố X Yếu tố VII kết hợp gen hai protein nằm gần nhánh dài nhiễm sắc thể 13 +Sự thiếu hụt enzyme liên quan đến chuyển hóa Vitamin K, ví dụ VKORC1 c Fibrinogen Là tiền thân fibrin, thành phần cục máu đông fibrin Xét nghiệm Fibrinogen phần quan trọng việc điều tra xu hướng chảy máu kéo dài APTT PT khơng giải thích Nồng độ Fibrinogen 34 tăng cao tương quan với việc tăng nguy huyết khối nghiên cứu dịch tễ học ý nghĩa bệnh nhân khơng rõ ràng Hình Cấu trúc Fibrinogen Phương pháp: Có số phương pháp để đo mức fibrinogen huyết tương thực hành, hầu hết LABO sử dụng phương pháp Clauss Bảng Các xét nghiệm định lượng Fibrinogen Xét nghiệm Xét nghiệm Claus Xét nghiệm chức dựa thời gian hình thành cục máu đơng Fibrin Xét nghiệm Xét nghiệm chức dựa thời gian hình Fibrinogen dựa vào thành cục máu đông Fibrin PT Xét nghiệm miễn dịch phương pháp miễn dịch đo kháng nguyên Fibrinogen thay Fibrinogen chức Xét nghiệm trọng lực phương pháp dựa trọng lượng cục máu đông (ngày áp dụng) TEG & ROTEM Máy TEG ROTEM sử dụng để cung cấp số định tính nồng độ Fibrinogen 35 Sơ đồ Phương pháp Clauss để đo Fibrinogen Khuyến cáo cho việc lựa chọn xét nghiệm fibrinogen tùy thuộc bối cảnh lâm sàng khác Bảng Lựa chọn loại xét nghiệm Fibrinogen Xét nghiệm Điều tra chảy máu Clauss Nghi ngờ rối loạn chức Clauss protein đơng miễn Fib dịch Những rối loạn chảy máu thêm Clauss vào bên cạnh fib (như DIC) Liệu pháp tiêu sợi huyết Clauss Mức fib cao Clauss miễn dịch 36 Kết quả: Bảng 10 Phân tích kết fibrinogen Mức Fibrinogen Diễn dịch DIC tiêu thụ yếu tố đông máu Bệnh gan giảm tổng hợp Fibrinogen bất thường tìm thấy bệnh nhân mắc bệnh gan hàm lượng axit sialic bất thường (tăng) Truyền máu ạt dẫn đến rối loạn đông máu pha loãng Nồng độ Fibrinogen giảm trong: Các thiếu sót di truyền, ví dụ giảm fibrinogen máu, afibrinogenaemia rối loạn fibrinogen máu (sau thường liên quan đến việc giảm nồng độ Fibrinogen hoạt động) Sau liệu pháp tiêu huyết khối Ở số bệnh nhân sau điều trị asparaginase tăng tiêu fibrin nguyên phát Điều báo cáo người bị ung thư biểu mô tuyến tiền liệt bệnh ung thư khác Tăng tuổi Nồng độ Fibrinogen tăng lên trong: Giới tính nữ, mang thai, uống thuốc tránh thai Ở phụ nữ sau mãn kinh Phản ứng giai đoạn cấp tính Bệnh ác tính lan tỏa (nhưng giảm điều liên quan đến DIC)  Xét nghiệm yếu tố XIII Yếu tố XIII [FXIII] dị vịng lưu thơng huyết tương dạng pro-transglutaminase bao gồm hai tiểu đơn vị A xúc tác [FXIII-A 2] hai tiểu đơn vị B không xúc tác [FXIII-B 2] liên kết với liên kết khơng cộng hóa trị Yếu tố nội bào XIII bao gồm yếu tố tiểu cầu XIII bao gồm tiểu đơn vị FXIII-A tồn dạng homodimer tiểu đơn vị A [FXIII-A 2] Yếu tố XIII có số chức khác ngồi việc ổn định cục máu 37 đơng Fibrin chúng bao gồm trì thai kỳ, phát triển xương/sụn chữa lành vết thương Xét nghiệm hòa tan cục máu đơng: Các phịng thí nghiệm sử dụng xét nghiệm sàng lọc để phát tình trạng thiếu hụt Yếu tố XIII điều bất thường xét nghiệm FXIII thức thực Tuy nhiên, xét nghiệm sàng lọc gây hiểu nhầm khơng xác định bệnh nhân thiếu Yếu tố XIII mức độ nhẹ đến trung bình [Yếu tố XIII >2-3 IU/dL] Các xét nghiệm độ hịa tan cục máu đơng sử dụng Thrombin bổ sung báo cáo có độ nhạy cao xét nghiệm độ hòa tan khác Khuyến cáo khơng nên sử dụng Xét nghiệm độ hịa tan cục máu đơng để chẩn đốn Thiếu yếu tố XIII Các xét nghiệm định lượng hoạt tính FXIII khuyến nghị làm xét nghiệm sàng lọc tính khơng nhạy Xét nghiệm độ hịa tan cục máu đơng thiếu tiêu chuẩn hóa Khơng thể sử dụng xét nghiệm độ hịa tan cục máu đông để theo dõi liệu pháp thay FXIII Bảng 11 Các xét nghiệm hòa tan cục máu đông Xét nghiệm sàng lọc Nội dung Các mẫu huyết tương (bệnh nhân đối chứng) đông tụ cách bổ sung lượng canxi dư thừa ủ 37°C 30 phút Một cách tiếp cận khác liên quan đến việc đông máu huyết tương Thrombin nước muối Cục máu đông loại bỏ đặt urê 5M Phương pháp urê ủ 24 nhiệt độ phòng 37°C Nếu cục máu đông tan, điều cho thấy thiếu hụt FXIII nên thực xét nghiệm FXIII thức Hypofibrinogenaemia Dysfibrinogenaemia gây kết dương tính giả xét nghiệm Fibrinogen chức năng, nên thực thời gian Thrombin/thời gian Reptilase để loại trừ rối 38 loạn trước thực xét nghiệm sàng lọc Urea Các mẫu huyết tương [bệnh nhân đối chứng] đông tụ cách bổ sung lượng canxi dư Axit axetic 1% Axit monochloroacetic 2% Axit trichloroacetic thừa ủ 37°C 30 phút Một cách tiếp cận khác liên quan đến việc đông máu huyết tương Thrombin nước muối Cục máu đông loại bỏ đặt axit Trichloroacetic 2% axit Monochloroacetic 1% ủ 24 nhiệt độ phịng 37°C Nếu cục máu đơng tan điều gợi ý thiếu hụt FXIII Xét nghiệm kháng nguyên: Xét nghiệm kháng nguyên ELISAs (xét nghiệm hấp thụ miễn dịch liên kết với enzyme) sử dụng để đo yếu tố đông máu Điều thường thực có nhu cầu phân biệt thiếu hụt yếu tố định lượng định tính (giảm kháng nguyên hoạt động chức so với giảm hoạt động chức với mức độ kháng nguyên bảo tồn) Những xét nghiệm thường có sẵn trung tâm giới thiệu chuyên biệt d D-dimer D-dimer tạo fibrin liên kết ngang bị phân hủy chúng không tạo fibrin không liên kết ngang Fibrinogen bị phá vỡ - đó, bản, chúng khác với Sản phẩm thối hóa Fibrin (ogen) [FDP] Suy thoái Fibrinogen Sản phẩm [FDP] bao gồm mảnh X, D, Y E Hiện có kỹ thuật xét nghiệm định lượng D-dimer áp dụng: Xét nghiệm D-dimer ngưng tập Latex: + Xét nghiệm kỹ thuật có độ nhạy khơng cao, Test phát có nhiều cục đơng hình thành, có cục động kết âm tính + Do đó, xét nghiệm coi Test nhạy đặc hiệu để chẩn đốn tình trạng đơng máu rải rác lịng mạch Xét nghiệm D-dimer siêu nhạy: 39 + Kỹ thuật xét nghiệm tiến hành ELISA đo độ đục miễn dịch để xác định nồng độ D-dimer + Xét nghiệm siêu nhạy có độ nhạy cao, kể có cục đơng nhỏ, cho kết dương tính Nồng độ D-dimer bình thường huyết tương xét nghiệm ELISA