Phân lập và xác định vai trò của vi khuẩn e coli trong hội chứng tiêu chảy ở lợn con dưới 2 tháng tuổi tại một số huyện của tỉnh thái nguyên và biện ph

1 ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM o0o TRẦN TRUNG MỸ Tên đề tài: “PHÂN LẬP VÀ XÁC ĐỊNH VAI TRÒ CỦA E.COLI TRONG HỘI CHỨNG TIÊU CHẢY Ở LỢN CON DƢỚI THÁNG TUỔI TẠI MỘT SỐ HUYỆN CỦA TỈNH THÁI NGUYÊN VÀ BIỆN PHÁP PHÒNG TRỊ” Chuyên ngành: Thú y Mã số: 60 62 50 LUẬN VĂN THẠC SỸ KHOA HỌC NÔNG NGHIỆP Hướng dẫn khoa học: TS Đỗ Ngọc Thúy (Bộ môn vi trùng - Viện Thú y quốc gia) GS-TS Nguyễn Quang Tuyên (Viện Khoa học sống – ĐHTN) THÁI NGUYÊN - 2010 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên Tai ngay!!! Ban co the xoa dong chu nay!!! http://www.lrc-tnu.edu.vn LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng cá nhân Các số liệu, kết luận văn hoàn toàn trung thực chưa cơng bố cơng trình nghiên cứu khác Tôi xin đảm bảo thông tin, trích dẫn luận văn rõ nguồn gốc Thái Nguyên, tháng 10 năm 2010 Tác giả luận văn Trần Trung Mỹ Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn LỜI CẢM ƠN Tôi xin chân thành cảm ơn giúp đỡ quý báu thầy cô giáo khoa Sau Đại học, khoa Chăn nuôi Thú y - Trường Đại học Nông Lâm Thái Nguyên, Bộ môn Vi trùng - Viện Thú y Quốc gia dành nhiều thời gian cơng sức giúp đỡ tơi q trình học tập tiến hành đề tài nghiên cứu Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn TS Đỗ Ngọc Thúy phó trưởng Bộ mơn Vi trùng - Viện Thú y Quốc gia, GS.TS Nguyễn Quang Tuyên - Viện Khoa học sống - Đại học Thái Nguyên tạo điều kiện, giúp đỡ tận tình hướng dẫn để tơi hồn thành luận văn Xin chân thành cảm ơn cán bộ, công nhân viên chức Bộ môn Vi trùng - Viện Thú y Quốc gia, cán công nhân viên Chi cục Thú y tỉnh Thái Nguyên, cán công nhân viên Trạm Thú y huyện Định Hóa, Phú Lương Đồng Hỷ giúp đỡ tơi q trình nghiên cứu khoa học Tơi xin gửi lời cảm ơn sâu sắc tới người thân gia đình, bạn bè, đồng nghiệp ln động viên giúp đỡ tơi q trình học tập q trình thực luận văn Thái Nguyên, tháng 10 năm 2010 Tác giả luận văn Trần Trung Mỹ Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn i MỤC LỤC Trang PHẦN MỞ ĐẦU Chƣơng 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Một số biểu bệnh lý nguyên nhân chủ yếu hội chứng tiêu chảy lợn tháng tuổi 1.1.1 Bệnh lý tiêu chảy lợn tháng tuổi 1.1.2 Một số nguyên nhân gây tiêu chảy lợn tháng tuổi 1.2 Vai trò vi khuẩn E coli hội chứng tiêu chảy lợn 15 1.2.1 Vi khuẩn Escherichia coli (E coli) 15 1.3 Biện pháp phòng trị tiêu chảy lợn tháng tuổi vi khuẩn 26 1.3.1 Phòng bệnh 26 1.3.2 Điều trị bệnh 29 Chƣơng 2: NỘI DUNG - NGUYÊN LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 34 2.1 Nội dung nghiên cứu 34 2.2 Nguyên liệu 35 2.2.1 Đối tượng nghiên cứu 35 2.2.2 Địa điểm nghiên cứu 35 2.2.3 Mẫu bệnh phẩm 35 2.2.4 Môi trường, hóa chất, dụng cụ, động vật thí nghiệm 35 2.2.5 Thời gian nghiên cứu 36 2.3 Phương pháp nghiên cứu 36 2.3.1 Phương pháp điều tra dịch tễ học 36 2.3.2 Thu thập mẫu phân lập vi khuẩn 37 Chƣơng 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 46 3.1 Kết nghiên cứu số đặc điểm dịch tễ hội chứng tiêu chảy lợn từ sơ sinh đến tháng tuổi Thái Nguyên 46 3.1.1 Tỷ lệ lợn tiêu chảy chết tiêu chảy số huyện thuộc tỉnh Thái Nguyên 46 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn ii 3.1.2 Tỷ lệ lợn mắc tiêu chảy chết tiêu chảy theo mùa vụ 49 3.1.3 Tỷ lệ lợn mắc tiêu chảy chết tiêu chảy theo ph-ơng thức chăn nuôi 53 3.2 Biến động số lượng vi khuẩn hiếu khí vi khuẩn E coli phân lợn tháng tuổi 55 3.2.1 Biến động số lượng vi khuẩn hiếu khí 56 3.2.2 Biến động số lượng vi khuẩn E coli 57 3.3 Kết phân lập vi khuẩn E coli từ mẫu bệnh phẩm 59 3.3.1 Kết phân lập vi khuẩn E coli từ mẫu phân 59 3.3.2 Kết phân lập vi khuẩn E coli từ mẫu phủ tạng 62 3.4 Kết giám định số đặc tính sinh hóa chủng vi khuẩn E coli phân lập 63 3.5 Kết xác định số yếu tố gây bệnh chủng vi khuẩn E coli phân lập 65 3.6 Kết xác định serotyp kháng nguyên O chủng vi khuẩn E coli phân lập 66 3.7 Kết xác định độc lực chủng vi khuẩn E coli phân lập chuột bạch 69 3.8 Kết xác định khả mẫn cảm với kháng sinh chủng vi khuẩn E coli phân lập 71 3.9 Kết thử nghiệm số phác đồ điều trị bệnh tiêu chảy lợn tháng tuổi 74 3.10 Một số biện pháp phòng bệnh 77 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 78 Kết luận 78 Đề nghị 79 TÀI LIỆU THAM KHẢO 80 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn iii DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU VÀ CÁC CHỮ VIẾT TẮT Ký hiệu, từ viết tắt APEC BHI CS ColV Cl perfringens CFU DHL DNA E coli EDTA ETEC FAO KL LD50 LT MR NCCLS NXB OMPs PBW PCR ST Tr UV VP VTEC WTO Ý nghĩa : Asia-Pacific Economic Cooperation : Brain Heart Infusion : Cộng : Colicin V : Clostridium perfringens : Colony Forming Unit : Deoxycholate Hydrogensulfide Lactose : Deoxyribonucleic Acid : Escherichia coli : Ethylene Diamine Tetraacetic Acid : Enterotoxigenic Escherichia coli : Food and Argriculture Oganization : Khuẩn lạc : Lethal Dose 50 : Heat Labile Toxin : Methyl Red : National Committee of Clinical Laboratory : Standards : Nhà xuất : Outer Memberance Proteins : Buffered Pepton Water : Polymera Chain Reaction : Heat Stable Toxin : Trang : Ultraviolet : Voges Proskauer : Verotoxin Producing E coli : World Trade Organization Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn iv DANH MỤC CÁC BẢNG Trang Bảng 2.1: Tiêu chuẩn đánh giá mức độ mẫn cảm kháng kháng sinh theo NCCLS (1999) 45 Bảng 3.1 Tỷ lệ lợn tiêu chảy chết tiêu chảy số huyện 47 Bảng 3.2: Tỷ lệ lợn mắc tiêu chảy chết theo mùa vụ 50 Bảng 3.3 Tỷ lệ lợn tiêu chảy chết tiêu chảy theo phương thức chăn nuôi 53 Bảng 3.4: Số lượng vi khuẩn hiếu khí lợn tháng tuổi 56 Bảng 3.5: Biến động số lượng vi khuẩn E coli phân lợn tháng tuổi 57 Bảng 3.6: Kết phân lập vi khuẩn E coli phân lợn tháng tuổi trạng thái 59 Bảng 3.7: Kết phân lập vi khuẩn E coli từ phủ tạng lợn tháng tuổi chết tiêu chảy 62 Bảng 3.8: Đặc tính sinh hóa số chủng E coli phân lập 63 Bảng 3.9: Tỷ lệ chủng vi khuẩn E coli mang yếu tố gây bệnh 65 Bảng 3.10: Kết xác định serotyp kháng nguyên O chủng vi khuẩn E coli phân lập từ lợn bệnh 67 Bảng 3.11: Kết xác định độc lực chuột bạch số chủng E coli phân lập 69 Bảng 3.12: Kết xác định khả mẫn cảm với kháng sinh chủng vi khuẩn E coli 72 Bảng 3.13: Kết thử nghiệm số phác đồ điều trị bệnh tiêu chảy lợn từ sơ sinh đến 60 ngày tuổi 76 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn v DANH MỤC CÁC HÌNH Trang Hình 2.1: Quy trình phân lập vi khuẩn đường ruột (Bộ môn Vi trùng - Viện Thú y Quốc gia) 39 Hình 3.1: Biểu đồ tỷ lệ lợn tiêu chảy chết tiêu chảy số huyện 49 Hình 3.2: Biểu đổ tỷ lệ lợn mắc tiêu chảy chết theo mùa vụ 52 Hình 3.3: Biểu đồ tỷ lệ lợn tiêu chảy chết tiêu chảy theo phương thức chăn nuôi 54 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn PHẦN MỞ ĐẦU Tính cấp thiết đề tài Đã từ lâu chăn nuôi ngành cung cấp thực phẩm chủ yếu phục vụ đời sống người Cùng với nhu cầu thực phẩm người ngày cao, chăn nuôi đạt nhiều thành tựu nhằm đáp ứng nhu cầu Đặc biệt thời kỳ hội nhập APEC, WTO… nay, ngành chăn nuôi nước ta phải chuyển cho phù hợp với yêu cầu thời đại, ngành chăn nuôi, nghề chăn nuôi lợn chiếm vị trí quan trọng Theo thống kê FAO (2006) tổng sản lượng thịt toàn giới 232,1 triệu tấn, thịt lợn 103 triệu (chiếm gần 44%); thịt bò 52,9 triệu (chiếm 22,79%) , thịt gà 48,6 triệu (chiếm 20,93%) Ở nước ta, nghề chăn nuôi lợn có từ lâu đời ngày phát triển, đạt nhiều thành tựu quan trọng hầu hết lĩnh vực chọn tạo giống, dinh dưỡng, kỹ thuật chăn ni quy trình vệ sinh thú y… Do vậy, suất chất lượng sản phẩm chăn nuôi lợn không ngừng nâng cao, số lượng đầu lợn tăng ngày nhanh Theo số liệu Cục thống kê năm 2007, tổng đàn lợn Việt Nam năm 2005 đạt 27,434 triệu con, năm 2006 đạt 26,85 triệu con, sớm đạt vượt mục tiêu phấn đấu đến năm 2010 đạt 25 triệu Thực mục tiêu nâng cao chất lượng nạc hoá đàn lợn chuyển sang hướng chăn nuôi tập trung, Đảng Nhà nước ta thực nhiều dự án, chương trình nhằm cải tạo đàn lợn, tăng dần tỉ lệ đàn nái ngoại nái lai cấu đàn nhằm đáp ứng nhu cầu sản phẩm có chất lượng cao nước, hướng tới xuất Cùng với xu nước, tỉnh Thái Nguyên thực dự án nạc hoá đàn lợn, đưa nái ngoại vào chăn nuôi nông hộ từ năm 90 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn kỷ XX Đến nay, có nhiều sở chăn nuôi lợn nái ngoại quy mô từ 50 - 100 - 150 nái/trại Đây thực bước tiến chăn nuôi lợn tỉnh Thái Nguyên, góp phần cung cấp thực phẩm với tỷ lệ nạc cao cho người tiêu dùng Tuy nhiên, với phát triển chăn ni tình hình dịch bệnh diễn biến phức tạp (dịch tai xanh, dịch lở mồm long móng…) hàng năm làm chết nhiều đầu lợn Một bệnh gây thiệt hại lớn kinh tế, hay gặp phổ biến lợn tháng tuổi bệnh tiêu chảy Bệnh gọi hội chứng tiêu chảy nhiều nguyên nhân gây nên nhiều yếu tố bất lợi khác tác động thay đổi đột ngột thời tiết, khí hậu, kết hợp với sai sót chăm sóc, ni dưỡng, quản lý với điều kiện môi trường chăn nuôi bị ô nhiễm, vệ sinh kém, tạo điều kiện cho vi sinh vật gây bệnh phát triển Hội chứng tiêu chảy lợn tháng tuổi nhiều tác giả nước nghiên cứu đề cập tới nhiều khía cạnh khác Vi khuẩn E coli vi khuẩn thường gây tiêu chảy cho lợn tháng tuổi Việc nghiên cứu vi khuẩn giúp có hiểu biết sâu hơn, từ đưa biện pháp phịng điều trị bệnh phác đồ thích hợp hiệu quả, làm giảm thiểu thiệt hại bệnh Xuất phát từ lý trên, tiến hành nghiên cứu đề tài: “Phân lập xác định vai trò vi khuẩn E coli hội chứng tiêu chảy lợn tháng tuổi số huyện tỉnh Thái Nguyên biện pháp phòng trị” Mục tiêu nghiên cứu Phân lập xác định số đặc tính gây bệnh chủng vi khuẩn E coli phân lập từ lợn tiêu chảy lợn tháng tuổi số huyện tỉnh Thái Nguyên, làm sở cho việc tuyển chọn chủng Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 79 * Kết xác định yếu tố gây bệnh serotyp chủng vi khuẩn cho thấy: - Trong số 30 chủng vi khuẩn E coli kiểm tra yếu tố gây bệnh: có 43,33% chủng mang F4; 26,67% chủng mang F18; loại độc tố phân bố với tỷ lệ sau: độc tố STb chiếm tỷ lệ cao (50,0%), độc tố VT2e (40,0%) STa (36,7%), thấp LT (23,3%) - Các chủng E coli gây bệnh tiêu chảy cho lợn từ sơ sinh đến 60 ngày tuổi tỉnh Thái Nguyên thuộc serotyp là: O8, O101, O138, O139, O141, O149 O149 chiếm tỷ lệ cao (40,0%) thấp O138 (10,0%) * Độc lực chủng vi khuẩn E coli chuột bạch mạnh Có 7/8 chủng vi khuẩn E coli gây chết 100% chuột vòng 12-48 * Các chủng vi khuẩn E coli phân lập mẫn cảm với số loại kháng sinh Ceftiofur, Amikacin, Apramycin kháng mạnh với Tetracyclin Sulfamethoxazole/Trimethoprim * Trong phác đồ điều trị thử nghiệm, phác đồ I sử dụng kháng sinh Ceftiofur kết hợp với chất điện giải số vitamin có hiệu điều trị bệnh tiêu chảy cao hẳn Có thể sử dụng rộng rãi phác đồ I điều trị bệnh tiêu chảy lợn từ sơ sinh đến 60 ngày tuổi tỉnh Thái Nguyên Đề nghị Đề nghị tiếp tục nghiên cứu vấn đề nhằm lựa chọn chủng vi khuẩn phù hợp để chế vacxin phịng bệnh Để chăn ni lợn có hiệu hạn chế dịch bệnh, có bệnh tiêu chảy cần khuyến khích đầu tư vào chăn ni theo phương thức công nghiệp, xây dựng trại chăn nuôi đảm bảo yêu cầu kỹ thuật vệ sinh an tồn dịch bệnh Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 80 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt: Đặng Xuân Bình (2005), Vi khuẩn E.coli Clostridium perfringens bệnh tiêu chảy lợn theo mẹ, chế tạo sinh phẩm phòng trị, Luận án tiến sỹ Nơng nghiệp Đặng Xn Bình, Đỗ Văn Trung (2008), “Đặc tính sinh học vi khuẩn E.coli bệnh phân trắng lợn số tỉnh phía Bắc”, Tạp chí Khoa học Kỹ thuật Thú y, Tập XV (số 4) Tr 54 - 59 Lê Minh Chí (1995), “Bệnh tiêu chảy gia súc”, Hội thảo khoa học - Bộ Nông nghiệp Công nghiệp thực phẩm, Hà Nội Tr 20 - 22 Trần Thị Dân (2006), Sinh sản heo nái sinh lý heo con, NXB Nông Nghiệp - Thành phố Hồ Chí Minh Tr 91 - 103 Đồn Kim Dung (2003), “Sự biến động số vi khuẩn hiếu khí đường ruột, vai trị E.coli hội chứng tiêu chảy lợn phác đồ điều trị”, Luận án Tiến sỹ Nông nghiệp, Viện Thú y Quốc gia - Hà Nội Đào Trọng Đạt, Phan Thanh Phượng, Lê Ngọc Mỹ, Huỳnh Văn Kháng (1996), Bệnh lợn nái lợn con, NXB Nông nghiệp - Hà Nội Tr 44 - 81 Nguyễn Thị Thanh Hà, Bùi Thị Tho (2009), “Nghiên cứu bào chế thử nghiệm cao mật bò ứng dụng phòng bệnh phân trắng lợn con”, Tạp chí Khoa học Kỹ thuật Thú y, Tập XVI (số 2) Tr 57 - 60 Trần Thị Hạnh, Đặng Xuân Bình (2002), “Chế tạo, thử nghiệm số chế phẩm sinh học phòng trị bệnh tiêu chảy phân trắng lợn E.coli Cl Perfringens”, Tạp chí Khoa học Kỹ thuật Thú y, (số 1) Tr 19 - 28 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 81 Trần Thị Hạnh, Kiều Thị Dung, Lưu Quỳnh Hương, Đặng Xn Bình (1999 2000), “Xác định vai trị E coli CL perfringens bệnh ỉa chảy lợn bước đầu nghiên cứu chế tạo số sinh phẩm phòng bệnh”, Báo cáo khoa học Chăn nuôi thú y 1999 - 2000 - Phần thú y Tr 83 - 93 10 Đậu Ngọc Hào (2007), Độc chất học thú y (Giáo trình giảng dạy Đại học Cao học), NXB Nông nghiệp - Hà Nội Tr 86 - 87 11 Phạm Khắc Hiếu, Bùi Thị Tho (1999), “Một số kết nghiên cứu tính kháng thuốc vi khuẩn gây bệnh thú y”, Kết nghiên cứu Khoa học Kỹ thuật - Khoa Chăn nuôi Thú y, NXB Nông nghiệp Tr 134 - 138 12 Phạm Văn Khuê, Phan Lục (1996), Giáo trình ký sinh trùng thú y, NXB Nông nghiệp - Hà Nội 13 Nguyễn Thị Kim Lan, Nguyễn Thị Ngân, Lê Minh (2006), “Một số đặc điểm dịch tễ hội chứng tiêu chảy lợn Thái Nguyên”, Tạp chí Khoa học Kỹ thuật Thú y, Tập XIII (số 4) Tr 94 14 Nguyễn Thị Kim Lan, La Văn Công, Nguyễn Thị Ngân, Lê Minh (2009), “Tình hình bệnh tiêu chảy lợn sau cai sữa tỷ lệ nhiễm giun sán lợn tiêu chảy Thái Nguyên”, Tạp chí Khoa học Kỹ thuật Thú y, Tập XVI (số 1) Tr 36 - 41 15 Nguyễn Thị Kim Lan, Nguyễn Văn Quang, Phạm Đức Chương, Vũ Đình Vượng (2003), Giáo trình thú y bản, NXB Nông Nghiệp Tr 42 - 45; 81 - 82 16 Nguyễn Thị Kim Lan (2004), “Thử nghiệm phòng trị bệnh E.coli dung huyết cho lợn Thái Nguyên Bắc Giang”, Tạp chí Khoa học Kỹ thuật Thú y, Tập XII (số 3) Tr 35 - 39 17 Trương Lăng (2004), Cai sữa sớm lợn con, NXB Nông nghiệp - Hà Nội Tr 118 - 130 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 82 18 Phạm Sỹ Lăng, Phùng Quốc Chướng, Nguyễn Hữu Nam, Nguyễn Văn Thọ, Bạch Quốc Thắng (2007), Một số bệnh quan trọng gây hại cho lợn, NXB Nông Nghiệp - Hà Nội Tr 79 - 85 19 Phạm Sỹ Lăng, Phan Địch Lân, Trương Văn Dung (2005), Bệnh phổ biến lợn biện pháp phịng trị, NXB Nơng Nghiệp - Hà Nội Tr 93 - 114 20 Phạm Sỹ Lăng, Lê Thị Tài (2006), Thực hành điều trị thú y (Phòng trị số bệnh thường gặp vật nuôi), NXB Nông Nghiệp - Hà Nội Tr 110 - 120 21 Lê Hồng Mận (2004), Kỹ thuật chăn nuôi lợn nơng hộ, trang trại phịng chữa bệnh thường gặp, NXB Lao Động - Xã Hội Tr 244 - 245 22 Lê Hồng Mận (2007), Chăn nuôi lợn nái sinh sản nông hộ, NXB Nông Nghiệp - Hà Nội Tr 173 - 175 23 Vũ Bình Minh, Cù Hữu Phú (1999), “Kết phân lập vi khuẩn E.coli Salmonella lợn mắc tiêu chảy, xác định số đặc tính sinh vật, hóa học chủng vi khuẩn phân lập được”, Tạp chí Khoa học Kỹ thuật Thú y, Tập VI (số 3) Tr 47 - 51 24 Hồ Văn Nam, Nguyễn Thị Đào Nguyên, Trương Quang, Phùng Quốc Chướng, Chu Đức Thắng, Phạm Ngọc Thạch (1997), “Bệnh viêm ruột ỉa chảy lợn”, Tạp chí Khoa học Kỹ thuật Thú y, Tập IV (số 2) Tr 39 - 43 25 Nguyễn Hữu Nam (2002), Giáo trình Bệnh lý học thú y, NXB Nơng Nghiệp Tr 99 - 100 26 Nguyễn Thị Ngữ (2005), “Nghiên cứu tình hình hội chứng tiêu chảy lợn huyện Chương Mỹ - Hà Tây, xác định số yếu tố gây bệnh vi khuẩn E.coli Salmonella, biện pháp phịng trị”, Luận văn Thạc sỹ Nơng nghiệp, Hà Nội 27 Nguyễn Khả Ngự (2002), “Xác định yếu tố gây bệnh vi khuẩn E coli bệnh phù đầu lợn đồng sông cửu long, chế vaccin phịng bệnh” Luận án tiến sỹ Nơng Nghiệp , viện thú y Hà Nội, tr 161 - 170 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 83 28 Sử An Ninh (1993), “Các tiêu sinh lý, sinh hoá máu, nước tiểu hình thái đại thể số tuyến nội tiết lợn mắc bệnh phân trắng” Luận án tiến sỹ nông nghiệp, Trường ĐHNNI - Hà Nội 29 Nguyễn Thị Nội (1986), “Tìm hiểu vai trị Escherichia coli bệnh phân trắng lợn vacxin dự phịng”, Luận án Phó Tiến sỹ Nơng nghiệp, Viện Khoa học kỹ thuật Nông Nghiệp Việt Nam 30 Nguyễn Thị Nội, Nguyễn Ngọc Nhiên, Cù Hữu Phú, Nguyễn Thị Sở, Trần Thị Thu Hà (1989), “Kết điều tra tình hình nhiễm khuẩn dường ruột số sở chăn nuôi lợn”, Kết nghiên cứu KHKT Thú y 1985 1989, phần 2, Bệnh vi khuẩn, NXB Nông nghiệp - Hà Nội Tr 50 - 63 31 Cù Hữu Phú, Nguyễn Ngọc Nhiên, Đỗ Ngọc Thuý, Nguyễn Xuân Huyên, Âu Xuân Tuấn, Văn Thị Hường, Đào Thị Hảo, Vũ Ngọc Q , “Kết điều tra tình hình tiêu chảy lợn theo mẹ số trại lợn miền bắc Việt Nam, xác định tỷ lệ kháng kháng sinh yếu tố gây bệnh chủng E coli phân lập được” Báo cáo khoa học CNTY (2002 - 2003) 32 Cù Hữu Phú, Nguyễn Ngọc Nhiên, Vũ Bình Minh, Đỗ Ngọc Thuý (1999) “Kết phân lập vi khuẩn E coli Salmonella lợn mắc tiêu chảy, xác định số đặc tính sinh vật hoá học chủng vi khuẩn phân lập biện pháp phịng trị” Tạp chí khoa học kỹ thuật thú y Tr 47 -51 33 Trần Văn Phùng, Từ Quang Hiển, Trần Thanh Vân, Hà Thị Hảo (2004), Giáo trình chăn ni lợn, NXB Nơng Nghiệp - Hà Nội Tr 187 - 212 34 Phan Thanh Phượng (1988), Phịng chống bệnh phó thương hàn lợn, NXB Nơng nghiệp - Hà Nội 35 Phan Thanh Phượng, Trần Thị Hạnh, Phạm Thị Ngọc, Ngơ Hồng Hưng (1996), “Nghiên cứu xác định vai trị vi khuẩn yếm khí Clostridium perfringen hội chứng tiêu chảy lợn”, Tạp chí Nông nghiệp công nghiệp thực phẩm (số 12), Hà Nội Tr 495 - 496 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 84 36 Phan Thanh Phượng, Trần Thị Hạnh, Phạm Công Hoạt (2006), Bốn bệnh đỏ lợn biện pháp phòng trị, NXB Nông nghiệp - Hà Nội 37 Trương Quang, Trương Hà Thái (2007), “Biến động số vi khuẩn đường ruột vai trò Salmonella hội chứng tiêu chảy lợn - tháng tuổi”, Tạp chí Khoa học Kỹ thuật Thú y, Tập XIV (số 6) Tr 52 - 57 38 Trương Quang, Nguyễn Thị Ngữ, Trương Hà Thái, Chu Thị Thanh Hương (2005), “Kết nghiên cứu yếu tố gây bệnh, vai trò E.coli hội chứng tiêu chảy lợn nuôi gia đình trước sau xuất chuồng”, Tạp chí Khoa học Kỹ thuật Thú y, Tập XIV (số 5) Tr 39 - 43 39 Hồ Sối, Đinh Thị Bích Lân (2005), Xác định nguyên nhân chủ yếu gây bệnh tiêu chảy lợn xí nghiệp lợn giống Triệu Hải - Quảng Trị thử nghiệm phác đồ điều trị, Tạp chí Khoa học Kỹ thuật Thú y Tr 26 - 34 40 Phạm Thế Sơn, Lê Văn Tạo, Cù Hữu Phú, Phạm Khắc Hiếu (2008), “Đặc tính vi khuẩn E.coli, Salmonella, Clostridium perfringen gây bệnh lợn tiêu chảy”, Tạp chí Khoa học Kỹ thuật Thú y, Tập XV (số 1) Tr 73 - 77 41 Phạm Thế Sơn, Phạm Khắc Hiếu (2008), “Tác dụng kháng khuẩn chế phẩm EM-TK21 với vi khuẩn E.coli, Salmonella, Clostridium perfringen (In vitro) khả phòng trị tiêu chảy EM-TK21 lợn - 90 ngày tuổi”, Tạp chí Khoa học Kỹ thuật Thú y, Tập XV (số 1) Tr 69 - 72 42 Nguyễn Văn Sửu, Nguyễn Quang Tuyên, Trần Thị Hạnh (2008), “Xác định tỷ lệ lợn tiêu chảy viêm ruột hoại tử số địa phương tỉnh Thái Nguyên”, Tạp chí Khoa học Kỹ thuật Thú y, Tập XV (số 2) Tr 49 - 53 43 Lê Văn Tạo (2005), Một số bệnh truyền nhiễm thường gặp lợn, NXB Lao Động - Xã Hội Tr 56 - 57 44 Lê Văn Tạo (2006), “Bệnh vi khuẩn Escherichia coli gây lợn”, Tạp chí Khoa học Kỹ thuật Thú y, Tập XIII (số 3) Tr 75 - 84 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 85 45 Lê Văn Tạo (1993), “Phân lập định danh vi khuẩn Salmonella gây bệnh cho lợn”, Báo cáo khoa học mã số KN 02 - 15, NXB Nông nghiệp - Hà Nội 46 Đoàn Thị Băng Tâm (1987), Bệnh động vật nuôi, Tập I, NXB Khoa học Kỹ thuật - Hà Nội Tr 119 - 135 47 Nguyễn Như Thanh (2001), Cơ sở phương pháp nghiên cứu dịch tễ học thú y, NXB Nông Nghiệp - Hà Nội 48 Nguyễn Như Thanh, Nguyễn Bá Hiên, Trần Thị Lan Hương (2001), Vi sinh vật thú y, NXB Nông Nghiệp - Hà Nội 49 Tống Vũ Thắng, Đậu Ngọc Hào (2008), “Nghiên cứu mối quan hệ ô nhiễm nấm mốc, E.coli, Salmonella, Clostridium perfringen thức ăn hỗn hợp tỷ lệ lợn bị tiêu chảy mùa khô, mùa mưa sở chăn nuôi lợn sinh sản Hồ Chí Minh”, Tạp chí Khoa học Kỹ thuật Thú y, Tập XV (số 1) Tr 54 - 61 50 Chu Thị Thơm, Phan Thị Lài, Nguyễn Văn Tó (2006), Hướng dẫn phịng, trị thuốc nam số bệnh gia súc, NXB Lao Động - Hà Nội Tr 101 - 103 51 Đỗ Ngọc Thúy, Lê Thị Minh Hằng, Lê Thị Hoài (2008), “Đặc tính số chủng E.coli phân lập từ lợn mắc tiêu chảy tỉnh Hưng Yên”, Tạp chí Khoa học Kỹ thuật Thú y, Tập XV (số 4) Tr 49 - 53 52 Đỗ Ngọc Thúy, Cù Hữu Phú, Nguyễn Tất Thành, Lê Thị Minh Hằng, Tăng Thị Phương (2007), “Tổ hợp gen số yếu tố gây bệnh có chủng vi khuẩn E.coli gây bệnh tiêu chảy cho lợn sau cai sữa tỉnh Phú Thọ”, Tạp chí Khoa học Kỹ thuật Thú y, Tập XIV (số 2) Tr 49 - 53 53 Đỗ Ngọc Thúy, Darren Trot, Alan Frost, Kersty Townsend, Cù Hữu Phú, Nguyễn Ngọc Nhiên, Nguyễn Xuân Huyên, Âu Xuân Tuấn, Văn Thị Hường, Vũ Ngọc Quý (2002), “Tính kháng kháng sinh chủng Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 86 Escherichia coli phân lập từ lợn tiêu chảy số tỉnh miền Bắc Việt Nam”, Tạp chí Khoa học Kỹ thuật Thú y, Tập IX (số 2/2005) Tr 21 - 27 54 Bùi Trung Trực, Nguyễn Việt Nga, Thái Quốc Hiếu, Lê Thanh Hiếu, Nguyễn Ngọc Tuân, Trần Thị Dân (2004), “Phân lập định type kháng nguyên vi khuẩn E.coli phân heo nái, heo tỉnh Tiền Giang”, Tạp chí Khoa học Kỹ thuật Thú y, số Tr 12 - 19 55 Hoàng Văn Tuấn, Lê Văn Tạo, Trần Thị Hạnh (1998), “Kết điều tra tình hình tiêu chảy lợn số trại giống hướng nạc”, Tạp chí Khoa học Kỹ thuật Thú y, Tập V (số 4/1998) Tr 20 - 26 56 Nguyễn Quang Tuyên (2008), Giáo trình vi sinh vật thú y, NXB Nông nghiệp - Hà Nội 57 Nguyễn Quang Tuyên, Trần Văn Thăng (2007), Giáo trình sinh lý bệnh thú y, NXB Nông Nghiệp Tr 72 - 78; 141 58 Nguyễn Phước Tương (1994), Thuốc biệt dược thú y, NXB Nông nghiệp - Hà Nội Tr 363 - 364 59 Nguyễn Hữu Vũ, Nguyễn Đức Lưu (2000), Thuốc thú y cách sử dụng, NXB Nông nghiệp - Hà Nội Tr 326 - 328 Tài liệu dịch: 60 Archie H (2000), Sổ tay dịch bệnh động vật (Phạm Gia Ninh Nguyễn Đức Tâm dịch), NXB Bản đồ - Hà Nội Tr 53, 207 - 214 61 Laval A (1997), “Incidence des Enterites du porc”, Báo cáo hội thảo thú y bệnh lợn Cục Thú y tổ chức, Hà Nội Tài liệu tiếng Anh 62 Bertschinger H.U, Fairbrother J.M, Nielsen N.O, Pohlenz J.F (1992), Escherichia coli infection, Deseases of swine, IOWA State University press/AMES, IOWA U.S.A 7th Edition, 1992 Pages: 487 - 488 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 87 63 Clarke G.J, Wallis T.S, Starkey W.J, Collins J, Spencer A.J, Daddon G.J, Osborne M.P, Candy D.C and Stephen I (1988), “Expression of an antigen in strains of Salmonella typhymurium which antibodies tocholeratoxin”, Med Microbiol, 25 Pages 139 - 146 64 Fairbrother J.M, Bestchinger H.U, Nielsen O.N, Pohlenz J.F (1992), Escherichia coli infections - diseases of swine (Seventh edition), Wolfe publishingLtd - Australian Pages 489 - 497 65 Falkow S, Small P, Isberg R, Hayes S.F and Corwin D (1987), “A molecular stragety for the study of bacteria invastion”, Rev Infect Dis Pages 5450 - 5455 66 Freter R, Alweiss B, Obrien P.C.M (1981), “Role of chemotoxin in the association of motile bacteria with intestinal mucose”, In vitro studies, Infect Immu, 34 Pages 211 - 249 67 Jones G.W, Rutter J.M (1977), “Role of the K88 antigen in the pathogenesis of neonatal diarrhea caused by Escherichia coli in piglets”, Infection and immunity Pages 918 - 927 68 Jones, Richardson (1983), “The contribution of manose sensitive and manose sensitive heamagglutinate activities”, J.Gen Microbiol, V 127 Pages 361 - 370 69 Giannella R.A, Rout W R, Formal S.P, Colling H (1976), “Role of plasma filtration in the intestinal fluid secretion medicated by infection with Salmonella typhymurium” Pages 470 - 474 70 Gyles G.L (1992) “Escherichia coli cytotoxins and enterotoxin”, Can J Microbiol 38 - Pages: 734 - 746 71 Morris I.A, Wray C, Sojka W.J (1976), The effect of T and B lymphocyte depletion on the protection of mice vaccinated with a get E mutant of Salmonella typhymurium, Bristh J of Exp, Path 57 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 88 72 Ngeleka M, Prichard J, Appleyard G, Middleton P.M, Fairbrother J.M (2003), “Isolation and association of Escherichia coli AIDA-I/STb, rather than EASTI pathotype with diarrhea in piglets and antibiotic sensitivity of isolates”, J Vet Diagn Invets 15 Pages 242 - 252 73 Orskov I, Birch F, Andersen A (1980), “Comparison of Escherichia coli fimbriae antigen F7 with type I fimbriae”, Infect Immun (27) Pages 657 - 666 74 Radostits O.M cs (1997), “Role of fimbriae F18 for actively acquired immunity againt porcine enterotoxigenic Escherichia coli”, Vet Microbiol, page 133 75 Smith H W (1963), “The haemolysins of Escherichia coli”, J Pathol Bacterial Pages 197 - 212 76 Smith H W, Halls S (1967), “The transmissible nature of the genetic factor in E.coli that controls hemolysin production”, J Gen Microbiol 47 1967 Pages 153 - 161 77 Virginial, W waterst and Jorge H, Crosa (1991), “Colicin V virulence plasmid”, Microbiological Review Sept Pages 437 - 450 78 Weinstein D.L, Carsiotis M, Lisssner C.H.R, Osrien A.D (1984), “Flagella help Salmonella typhymirium survive within murine macrophages”, Infection and Immunity (No 46) Pages 819 - 825 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn MỘT SỐ HÌNH ẢNH MINH HỌA CHO ĐỀ TÀI Ảnh 1: Đàn lợn bị tiêu chảy Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên Ảnh 2: Lợn bị tiêu chảy nặng http://www.lrc-tnu.edu.vn Ảnh 3: Đàn lợn bị lạnh Ảnh 4: Mổ khám lấy bệnh phẩm lợn tiêu chảy Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn Ảnh 5: Phản ứng thử khả sinh Indol Ảnh 6: Phản ứng lên men đường chủng E coli Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn Ảnh 7: Nuôi cấy E coli thạch MacConkey M Ảnh 8: Các sản phẩm phản ứng PCR phức hợp sau trình điện di - M: 100 bp DNA marker - Giếng 1, 6, VT2e (+) - Giếng 2, 3, 4, VT2e, F18 (+) M Ảnh 9: Các sản phẩm phản ứng PCR phức hợp sau trình điện di - M: 100 bp DNA marker - Giếng 1, 2, STa, LT (+) - Giếng 3, 7, STb, LT (+) Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn Ảnh 10: Kết thử kháng sinh đồ chủng E coli phân lập Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn