Phân lập, xác định vai trò gây bệnh của escherichia coli (e coli) trong hội chứng tiêu chảy ở lợn con tại một số huyện của tỉnh bắc giang và biện pháp phòng

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM LÊ VĂN DƯƠNG PHÂN LẬP, XÁC ĐỊNH VAI TRÒ GÂY BỆNH CỦA ESCHERICHIA COLI TRONG HỘI CHỨNG TIÊU CHẢY Ở LỢN CON TẠI MỘT SỐ HUYỆN CỦA TỈNH BẮC GIANG VÀ BIỆN PHÁP PHÒNG TRỊ Chuyên ngành: Thú Y Mã số: 60 62 50 LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC NÔNG NGHIỆP Người hướng dẫn khoa học: GS.TS NGUYỄN QUANG TUYÊN PGS.TS CÙ HỮU PHÚ THÁI NGUYÊN - 2010 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên Tai ngay!!! Ban co the xoa dong chu nay!!! http://www.lrc-tnu.edu.vn ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM LÊ VĂN DƯƠNG PHÂN LẬP, XÁC ĐỊNH VAI TRÒ GÂY BỆNH CỦA ESCHERICHIA COLI TRONG HỘI CHỨNG TIÊU CHẢY Ở LỢN CON TẠI MỘT SỐ HUYỆN CỦA TỈNH BẮC GIANG VÀ BIỆN PHÁP PHÒNG TRỊ LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC NƠNG NGHIỆP THÁI NGUN - 2010 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn MỞ ĐẦU Tính cấp thiết đề tài Bắc Giang tỉnh có nghề chăn ni phát triển đem lại nguồn thu nhập cao cho nhiều hộ gia đình, ngày 17/08/2005 chủ tịch UBND tỉnh Bắc Giang ban hành Quyết định số 61/2005/QĐ- UB việc ban hành Quy định số sách hỗ trợ đầu tƣ phát triển Chăn nuôi - Thú y thời kỳ 2006 - 2010 địa tỉnh Bắc Giang Do vậy, tỉnh Bắc Giang thực nhiều dự án nạc hoá đàn lợn, hỗ trợ giống, đƣa nái ngoại vào chăn nuôi nông hộ Theo báo cáo thống kê chăn nuôi năm 2009 Sở Nông nghiệp PTNT tổng đàn lợn tỉnh đạt 1.133.188 con; đó, đàn lợn nái 191.957 đàn lợn thịt 939.809 Trên địa bàn tỉnh có 430 trại chăn nuôi lợn tập trung với quy mô trang trại 20 nái 100 lợn thịt trở lên Đây thực bƣớc tiến chăn nuôi lợn tỉnh, góp phần phát triển chăn ni lợn bền vững, tạo sản phẩm an tồn có sức cạnh tranh cao thị trƣờng Tuy nhiên, song song với phát triển chăn ni tình hình dịch bệnh diễn biến phức tạp, hàng năm làm chết nhiều đầu lợn tỉnh Theo báo cáo dịch tễ Chi cục Thú y[5] năm 2007 tồn tỉnh có 79.430 lợn bị ốm 7.620 chết; năm 2008 có 71.671 lợn bị ốm 5.100 chết; năm 2009 có 88.036 lợn bị ốm 5.970 chết, gây thiệt hại lớn kinh tế, hay gặp phổ biến hội chứng tiêu chảy lợn dƣới tháng tuổi, vi khuẩn E.coli đƣợc đánh giá nguyên nhân gây bệnh phổ biến quan trọng Cù Hữu Phú cs (1999)[41] tiến hành phân lập vi khuẩn E.coli từ mẫu phân lợn từ 35 ngày đến tháng tuổi bị tiêu chảy xác định đƣợc 60/70 mẫu có vi khuẩn E.coli, chiếm tỷ lệ 85,71% Lý Thị Liên Khai (2001)[22] phân lập đƣợc 42 mẫu phân có vi khuẩn E.coli tổng số 50 mẫu phân lợn bị tiêu chảy, chiếm tỷ lệ 84% Trịnh Quang Tuyên cs (2004)[73] tiến hành phân lập vi khuẩn Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn E.coli từ mẫu phân lợn bị tiêu chảy, xác định đƣợc 259/325 mẫu có vi khuẩn E.coli chiếm tỷ lệ 79,69% Trong đó, Nguyễn Thị Kim Lan (2004)[23] phân lập E.coli từ mẫu phân lợn bị bệnh phù đầu tỉnh Bắc Giang Thái Ngun, thơng báo có 100% mẫu phân lợn bị tiêu chảy phù đầu phân lập đƣợc vi khuẩn E.coli Bệnh tiêu chảy lợn theo mẹ xảy quanh năm, nhƣng cao từ tháng đến tháng (Hoàng Văn Tuấn cs, 1998)[70] Trong năm, lợn nuôi mùa xuân mùa hè mắc tiêu chảy cao so với hai mùa lại (Nguyễn Thị Kim Lan cs, 2006b)[25] Đặc biệt lợn thƣờng bị tiêu chảy thời tiết thay đổi đột ngột (lạnh, ẩm, mƣa phùn…) kết hợp với điều kiện chăm sóc ni dƣỡng khơng đảm bảo vệ sinh; lợn bị ảnh hƣởng yếu tố stress; lợn sinh không đƣợc bú sữa kịp thời sữa đầu lợn mẹ thiếu, không đảm bảo chất lƣợng dinh dƣỡng Tổng hợp báo cáo dịch tễ hàng năm Trạm thú y huyện, thành phố tỉnh cho thấy bệnh tiêu chảy lợn hai năm 2007 2008 xảy phổ biến chiếm tỷ lệ 60% so với tổng số ca bệnh thƣờng gặp lợn, riêng năm 2009 số lợn mắc bệnh tiêu chảy 62.151 / 88.036 mắc ca bệnh thông thƣờng (chiếm tỷ lệ 71%) Khi áp dụng phác đồ điều trị bệnh tiêu chảy lợn tính kháng thuốc vi khuẩn cao nên kết điều trị thấp Xuất phát từ thực tiễn nêu trên, triển khai nghiên cứu đề tài: “Phân lập, xác định vai trò gây bệnh Escherichia coli (E.coli) hội chứng tiêu chảy lợn số huyện tỉnh Bắc Giang biện pháp phòng trị” Mục tiêu nghiên cứu - Xác định số đặc điểm dịch tễ hội chứng tiêu chảy lợn dƣới hai tháng tuổi số huyện thuộc tỉnh Bắc Giang - Xác định vai trò gây bệnh vi khuẩn E.coli hội chứng tiêu chảy lợn Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn - Xây dựng đề xuất phác đồ điều trị bệnh tiêu chảy lợn đạt hiệu cao Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài - Đề tài cơng trình nghiên cứu có hệ thống, lý luận gắn liền với thực tiễn sản xuất, chứng minh vai trò vi khuẩn E.coli hội chứng tiêu chảy lợn dƣới tháng tuổi tỉnh Bắc Giang - Kết nghiên cứu đề tài sở khoa học phục vụ cho nghiên cứu nhƣ phục vụ cho công tác bào chế chế phẩm sinh học phòng bệnh (vác xin, kháng thể…), đồng thời đóng góp thêm tƣ liệu tham khảo cho nghiên cứu giảng dạy, cho cán thú y sở ngƣời chăn nuôi - Kết nghiên cứu phác đồ điều trị bệnh tiêu chảy lợn có hiệu cao giúp cho thú y sở, ngƣời chăn ni phịng trị bệnh, góp phần giảm thiệt hại tăng thu nhập chăn nuôi lợn Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn Chƣơng TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 MỘT SỐ HIỂU BIẾT CHUNG VỀ HỘI CHỨNG TIÊU CHẢY 1.1.1 Khái niệm hội chứng tiêu chảy Tiêu chảy thuật ngữ để tƣợng đại tiện phân lỏng, đƣợc mô tả phân lỏng, nhiều nƣớc có máu, mủ Tiêu chảy biểu lâm sàng q trình bệnh lý đƣờng tiêu hóa, tƣợng vật ỉa nhanh, nhiều lần ngày, phân có nhiều nƣớc rối loạn chức tiêu hóa, ruột tăng cƣờng co bóp tiết dịch (Phạm Ngọc Thạch, 1996)[58] Hoặc phản ánh đơn thay đổi tạm thời phân gia súc bình thƣờng gia súc thích ứng với thay đổi phần ăn Tiêu chảy xảy nhiều bệnh thân khơng phải bệnh đặc thù (Arche.H, 2000)[2] Tuỳ theo đặc điểm, tính chất, diễn biến bệnh, loài gia súc, nguyên nhân gây bệnh mà hội chứng tiêu chảy đƣợc gọi tên khác nhƣ bệnh xảy gia súc non theo mẹ, gọi bệnh lợn ỉa phân trắng, hay bê nghé ỉa phân trắng,… cịn gia súc sau cai sữa chứng khó tiêu, chứng rối loạn tiêu hoá, hội chứng rối loạn tiêu hố Nếu xét ngun nhân gây bệnh có tên gọi nhƣ bệnh Colibacillosis vi khuẩn E.coli gây ra, bệnh phó thƣơng hàn lợn vi khuẩn Samonella Cholerae Suis gây ra, bệnh viêm dày ruột truyền nhiễm (TGE) Coronavirus gây … Thực chất tiêu chảy phản ứng tự vệ thể nhƣng thể tiêu chảy nhiều lần ngày (5 đến lần trở lên) nƣớc phân từ 75% trở lên gọi tƣợng tiêu chảy Tiêu chảy nhiều nguyên nhân gây đồng thời nên gọi hội chứng tiêu chảy Cho dù nguyên nhân dẫn đến tiêu chảy hậu nghiêm trọng nƣớc, chất điện Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn giải kiệt sức, gia súc khỏi thƣờng bị còi cọc, thiếu máu, chậm lớn Đặc biệt gia súc bị tiêu chảy nặng kèm tƣợng viêm nhiễm, tổn thƣơng thực thể đƣờng tiêu hóa dẫn đến gia súc chết với tỷ lệ cao, gây thiệt hại lớn kinh tế 1.1.2 Đặc điểm sinh lý tiêu hóa lợn 1.1.2.1 Đặc điểm tiêu hóa lợn Ở gia súc non sau sinh , chƣ́c của các quan thể nhất là quan tiêu hóa chƣa hoàn chỉ nh , nồng độ HCl và các men tiêu hóa chƣa đảm nhiệm đầy đủ chƣ́c tiêu hóa , rất dễ gây rối loạn trao đổi chất , hậu quả dễ nhận biết là rối loạ n tiêu hóa , gây tiêu chảy , còi cọc, thiếu máu và chậm lớn Trong dị ch vị của gia súc non chƣa có đủ axit HCl tƣ̣ nên không hoạt hóa đƣợc men pepsin khơng tiêu hóa hết sữa mẹ , đó sƣ̃a mẹ lại môi trƣờng ph át triển tốt nhiều loại vi khuẩn Cù Xuân Dần cs (1996)[7] cho dịch vị lợn dƣới tháng tuổi khơng có HCl tự do, lúc axit tiết nhanh chóng liên kết với dịch nhầy Do vậy, vi sinh vật có điều kiện phát triển gây bệnh viêm dày, viêm ruột lợn Ở lợn có giai đoạn khơng có HCl dày , đƣợc coi giai đoạn thí ch ƣ́ng cần thiết tƣ̣ nhiên Chính nhờ thích ứng , thể lợn mới có khả hấp thu đƣợc kh thể miễn dịch qua sữa đầu Trong giai đoạn này thì dị ch vị lại không có hoạt tí nh phân giải protein mà chỉ có hoạt tính làm vón sƣ̃a đầu và sƣ̃a nên a lbumin và globulin đƣợc chuyển xuống ruột thẩm thấu vào máu, nhƣng lợn 15 ngày tuổi tình trạng thiếu HCl dày khơng cịn cần thiết sinh lý bình thƣờng Việc tập ăn cho lợn sớm và cai sƣ̃a sớm đã rút ngắn đƣợc giai đoạn thiếu HCl , hoạt hóa hoạt đợng tiết dị ch, giúp tăng khả tạo đáp ứng miễn dịch thể Giai đoạn sau cai sƣ̃a sẽ là một giai đoạn khó khăn đối với lợn chuyển tƣ̀ sƣ̃ a mẹ sang thƣ́c ăn tổng hợp (dạng rắn ) Điều đó có thể gây mất Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn cân bằng hệ vi sinh vật đƣờng ruột tạo điều kiện cho vi khuẩn có hại phát triển và cũng là nguyên nhân gây bệnh , dẫn đến kết quả là lợn chậm lớn và có thể chết Ngoài , lợn còn chị u nhiều tác động của lợn mẹ , sƣ̣ thay đởi ngoại cảnh góp phần làm tăng stress lợn 1.1.2.2 Khả đáp ứng miễn dịch lợn Là khả thể đáp ứng lại cá c kí ch thí ch của mầm bệnh xâm nhập vào thể Ở gia súc non , mầm bệnh có nhiều thuận lợi xâm nhập vào thể Trong hệ thống tiêu hóa của lợn lƣợng enzym tiêu hóa và lƣợng HCl tiết còn í t nên chƣa đủ để đá p ƣ́ng cho quá trì nh tiêu hóa , gây rối loạn trao đổi chất , tiêu hóa kém , hấp thu kém Chính , giai đoạn mầm bệnh nhƣ Salmonella, E.coli… dễ dàng xâm nhập vào thể qua đƣờng tiêu hóa và gây bệnh cho lợn Ngoài ra, gia súc non yếu tố mi ễn dịch không đặc hiệu nhƣ bổ thể, protein liên kết , lysozym đƣợc tổng hợp còn í t , phản ứng đại thực bào rất yếu , gia súc non khơng chƣa có kháng thể đặc hiệu mà kháng thể không đặc hiệu cũng rất yếu Chính lợn bú sữa đầu cần thiết để tăng sƣ́c bảo vệ thể , chống lại mầm bệnh Do cấu tạo đặc biệt của gia súc non nên tiêu chảy thƣờng xảy ở giai đoạn lợn tập ăn và cai sƣ̃a Bên cạnh đó còn một yếu tố quan trọng nƣ̃a là sƣ̣ phát triển của hệ vi sinh vật đƣờng ruột của gia súc non , việc cân bằng hệ vi sinh vật có lợi đƣờng ruột nhƣ thế nào để khắc phục , hạn chế sƣ̣ loạn khuẩn quá trì nh phát triển và trƣởng thành của thể gia súc non là rất quan trọng Để nuôi dƣỡng tốt và hạn chế đƣợc hội chƣ́ng tiêu chảy ở lợn cần tiêm phòng cho lợn mẹ và tạo cho gia súc non điều kiện sống tốt , tránh yếu tố bất l ợi tác động vào thể nhƣ c hế độ ăn ́ng khơng hợp lý , khẩu Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn phần thƣ́c ăn không đảm bảo dinh dƣỡng , ăn không đúng giờ , thời tiết thay đổi đột ngột, chế độ chăm sóc không thí ch hợp sẽ tạo điều kiện cho mầm bệnh xâm nhập vào thể gây bệnh 1.1.3 Một số nguyên nhân gây tiêu chảy lợn Theo Lê Minh Chí (1995)[6], Phạm Ngọc Thạch (1996)[58] tiêu chảy tƣợng bệnh lý có liên quan đến nhiều yếu tố, có yếu tố nguyên nhân nguyên phát, có yếu tố nguyên nhân thứ phát Vì việc phân biệt rạch ròi nguyên nhân gây tiêu chảy khó khăn Phạm Sỹ Lăng (2009)[31] tiêu chảy lợn biểu lâm sàng nhiều tác nhân gây bệnh khác nhƣ virut, vi khuẩn, ký sinh trùng, thời tiết, môi trƣờng ngoại cảnh, độc tố 1.1.3.1 Do môi trường ngoại cảnh Môi trƣờng ngoại cảnh yếu tố gây bệnh dịch, mối quan hệ Cơ thể - Mầm bệnh - Môi trƣờng nguyên nhân không ổn định sức khoẻ, đƣa đến phát sinh bệnh (Nguyễn Nhƣ Thanh, 2001)[57] Môi trƣờng ngoại cảnh bao gồm yếu tố: nhiệt độ, ẩm độ, điều kiện chăm sóc nuôi dƣỡng, vệ sinh chuồng trại, di chuyển, thức ăn, nƣớc uống… Khi gia súc bị nhiễm lạnh kéo dài làm giảm phản ứng miễn dịch, giảm tác dụng thực bào, làm cho gia súc dễ bị nhiễm khuẩn gây bệnh (Hồ Văn Nam cs, 1997)[32] Khẩu phần ăn cho vật ni khơng thích hợp, trạng thái thức ăn không tốt, thức ăn chất lƣợng nhƣ mốc, thối nhiễm tạp chất, vi sinh vật có hại dễ dẫn đến rối loạn tiêu hố kèm theo viêm ruột, ỉa chảy gia súc (Trịnh Văn Thịnh, 1985a [64], Hồ Văn Nam, 1997 [32]) Khi gặp điều kiện ngoại cảnh không thuận lợi, thay đổi đột ngột thức ăn, vitamin, protein, thời tiết, vận chuyển… làm giảm sức đề kháng Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn vật, vi khuẩn thƣờng trực tăng độ độc gây bệnh (Bùi Quý Huy, 2003)[20] Nhƣ nguyên nhân môi trƣờng ngoại cảnh gây bệnh tiêu chảy khơng mang tính đặc hiệu mà mang tính tổng hợp Lạnh ẩm gây rối loạn hệ thống điều hoà trao đổi nhiệt thể lợn, dẫn đến rối loạn trình trao đổi chất, làm giảm sức đề kháng thể, từ mầm bệnh đƣờng tiêu hố có thời tăng cƣờng độc lực gây bệnh 1.1.3.2 Nguyên nhân vi sinh vật Vi sinh vật bao gồm loại virus, vi khuẩn, nấm mốc chúng vừa nguyên nhân nguyên phát, vừa nguyên nhân thứ phát gây tiêu chảy * Tiêu chảy vi khuẩn Trong đƣờng tiêu hoá gia súc có hệ vi khuẩn gọi hệ vi khuẩn đƣờng ruột, đƣợc chia thành loại, vi khuẩn có lợi lên men phân giải chất dinh dƣỡng, giúp cho q trình tiêu hố đƣợc thuận lợi vi khuẩn có hại, có điều kiện phát triển nhanh gây bệnh cho vật chủ Theo Lê Văn Tạo (1997)[55] cho biết họ vi khuẩn đƣờng ruột gồm vi khuẩn cộng sinh thƣờng trực đƣờng ruột Những vi khuẩn này, muốn từ vi khuẩn cộng sinh trở thành gây bệnh phải có điều kiện: - Trên thể vật chủ có cấu trúc giúp cho vi khuẩn thực đƣợc chức bám dính - Vi khuẩn phải có khả sản sinh yếu tố gây bệnh, đặc biệt sản sinh độc tố, quan trọng độc tố đƣờng ruột Enterotoxin - Có khả xâm nhập vào lớp tế bào biểu mô niêm mạc ruột, từ phát triển nhân lên Một số vi khuẩn thuộc họ vi khuẩn đƣờng ruột E.coli, Salmonella spp, Shigella, Klebsiella, Cl.perfringens… vi khuẩn quan trọng gây rối loạn tiêu hoá, viêm ruột tiêu chảy ngƣời nhiều loại động vật Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn vi 3.1.4 Tỷ lệ lợn dƣới tháng tuổi mắc tiêu chảy chết tiêu chảy theo lứa tuổi số huyện tỉnh Bắc Giang 66 3.1.5 Các triệu chứng lợn tiêu chảy 69 3.2 Kết nghiên cứu xác định vai trò vi khuẩn E.coli hội chứng tiêu chảy lợn dƣới tháng tuổi 70 3.2.1 Kết xác định số lƣợng vi khuẩn E.coli có phân lợn tiêu chảy lợn bình thƣờng 70 3.2.2 Kết phân lập vi khuẩn E.coli từ mẫu phân phủ tạng lợn tiêu chảy tỉnh Bắc Giang 73 3.2.3 Kết quả giám đị nh đặc tí nh sinh học của các chủng vi khuẩn E.coli phân lập đƣợ c 75 vi khuẩn E.coli phân lập đƣợc 75 3.2.4 Kết quả xác đị nh serotype kháng nguyên O của các chủng vi khuẩn E.coli phân lập đƣợc 76 3.2.5 Kết xác định yếu tố gây bệnh chủng vi khuẩn E.coli phân lập đƣợc 80 3.2.6 Kết quả kiểm tra độc lƣ̣c của một số chủng vi khuẩn E.coli chuột bạch 83 3.2.7 Kết xác định khả mẫn cảm với kháng sinh chủng vi khuẩn E.coli phân lập đƣợc 85 3.3 Kết thử nghiệm phác đồ điều trị bệnh tiêu chảy lợn 88 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 90 Kết luận 90 Đề nghị 91 TÀI LIỆU THAM KHẢO 92 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn vii DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT TRONG LUẬN VĂN AEEC BHI cs : Adhenicia Enteropathogenic Escherichia coli : Brain-heart infusion : Cộng CPU ED EDP EHEC : : : : EMB : Eosin Methylene Blue Agar EPEC ETEC HEM : Enteropathogenic Escherichia coli : Enterotoxigenic Escherichia coli : Heamolysin KN : Kháng nguyên LT : Heat-Labile toxin NBX : Nhà xuất PCR : Polymerase Chain Reaction RR SLT : Relative Risk : Shiga-like toxin SLT1 : Shiga-like toxin SLT2 : Shiga-like toxin ST (a,b) ST1 Stx2e tr : : : : TSI TT : Triple Sugar Iron : Thể trọng VP VT2e : Voges Pros Kaver : Verotoxin 2e VTEC : Verotoxigenic Escherichia coli Colinial Forming Unit Endema disease Eudema disease pathogenic Entero haemarrhagic Heat- Slable toxin (a,b) Heat- Slable Shiga toxin 2e trang Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn viii DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 3.1 Tỷ lệ lợn tiêu chảy chết tiêu chảy số huyện 56 Bảng 3.2 So sánh nguy mắc tiêu chảy lợn huyện 58 Bảng 3.3 Tỷ lệ lợn mắc tiêu chảy chết tiêu chảy theo mùa vụ 59 Bảng 3.4 So sánh nguy lợn mắc tiêu chảy mùa 61 Bảng 3.5 Tỷ lệ lợn tiêu chảy chết tiêu chảytheo phƣơng thức chăn nuôi 63 Bảng 3.6 So sánh nguy lợn tiêu chảy theo phƣơng thức chăn nuôi 66 Bảng 3.7 Tỷ lệ lợn mắc tiêu chảy chết tiêu chảy theo lứa tuổi 67 Bảng 3.8 So sánh nguy mắc tiêu chảy lứa tuổi lợn 68 Bảng 3.9 Tổng hợp triệu chứng lợn mắc tiêu chảy 70 Bảng 3.10 Kết xác định số lƣợng vi khuẩn E.coli có 1gam phân lợn bị tiêu chảy lợn khỏe mạnh bình thƣờng 71 Bảng 3.11 Kết phân lập vi khuẩn E.coli từ mẫu phân phủ tạng lợn tiêu chảy (n=270) 73 Bảng 3.12 Kết quả giám đị nh đặc ính t sinh học chủngvi khuẩn E.coli phân lập đƣợc 75 Bảng 3.13 Kết quả xác đị nh serotype kháng nguyên O của các chủng vi khuẩn E.coli phân lập đƣợc 77 Bảng 3.14 Tỷ lệ chủng vi khuẩn E.coli mang gen quy định sinh tổng hợp yếu tố gây bệnh 80 Bảng 3.15 Kết quả kiểm tra độc lƣ̣c của một số chủng vi khuẩn E.coli chuột bạch 84 Bảng 3.16 Kết xác định tính mẫn cảm với kháng sinh chủng vi khuẩn E.coli phân lập đƣợc 85 Bảng 3.17 Kết điều trị thực nghiệm phác đồ điều trị bệnh tiêu chảy cho lợn 89 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Ngun http://www.lrc-tnu.edu.vn ix DANH MỤC HÌNH Hình 2.1 Sơ đồ quy trình phân lập xác định yếu tố gây bệnh vi khuẩn E.coli (Bộ môn Vi trùng, Viện Thú y) 46 Hình 3.1 Biểu đồ so sánh tỷ lệ lợn mắc chết tiêu chảy huyện 57 Hình 3.2 Biểu đồ so sánh tỷ lệ lợn mắc chết tiêu chảy theo mùa vụ 61 Hình 3.3 Biểu đồ so sánh tỷ lệ lợn mắc chết tiêu chảy theo phƣơng thức chăn nuôi 65 Hình 3.4 Biểu đồ so sánh tỷ lệ lợn mắc chết tiêu chảy theo lứa tuổi 68 Hình 3.5 Biểu đồ kết xác định serotype kháng nguyên O chủng vi khuẩn E.coli phân lập đƣợc 79 Hình 3.6 Biểu đồ tỷ lệ chủng vi khuẩn E.coli mang gen quy định sinh tổng hợp yếu tố gây bệnh 82 Hình 3.7 Biểu đồ kết xác định tính mẫn cảm với kháng sinh chủng vi khuẩn E.coli phân lập đƣợc 87 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Ngun http://www.lrc-tnu.edu.vn x KẾT QUẢ TÍNH KHI BÌNH PHƢƠNG SO SÁNH LỢN MẮC TIÊU CHẢY GIỮA CÁC ĐỊA PHƢƠNG SO SÁNH GIỮA HIỆP HÕA VỚI TÂN YÊN Diễn giải Có bệnh Hiệp Hịa 3312 Tân n 3340 Cộng 6652 ad bc (ad-bc) (a+b)*(c+d)*(a+c)*(b+d) χ2TN Khơng có bệnh 5916 6865 12781 22736880 19759440 2977440 8.00641E+15 21.51732192 Cộng 9228 10205 19433 SO SÁNH GIỮA HIỆP HÕA VỚI VIỆT YÊN Diễn giải Có bệnh Hiệp Hịa 3312 Việt n 2470 Cộng 5782 ad bc (ad-bc) (a+b)*(c+d)*(a+c)*(b+d) χ2TN Khơng có bệnh 5916 7777 13693 25757424 14612520 11144904 7.48654E+15 323.1090427 Cộng 9228 10247 19475 SO SÁNH GIỮA TÂN YÊN VỚI VIỆT YÊN Diễn giải Có bệnh Tân Yên 3340 Việt Yên 2470 Cộng 5810 ad bc (ad-bc) (a+b)*(c+d)*(a+c)*(b+d) χ2TN Khơng có bệnh 6865 7777 14642 25975180 16956550 9018630 8.89583E+15 186.9952796 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên Cộng 10205 10247 20452 http://www.lrc-tnu.edu.vn xi KẾT QUẢ TÍNH KHI BÌNH PHƢƠNG SO SÁNH LỢN MẮC TIÊU CHẢY GIỮA CÁC MÙA SO SÁNH GIỮA MÙA XUÂN VỚI MÙA THU Diễn giải Có bệnh Mùa xuân 2531 Mùa Thu 1890 Cộng 4421 ad bc (ad-bc) (a+b)*(c+d)*(a+c)*(b+d) χ2TN Khơng có bệnh 5089 5949 11038 15056919 9618210 5438709 2.91492E+15 156.8723858 Cộng 7620 7839 15459 SO SÁNH GIỮA MÙA HÈ VỚI MÙA THU Diễn giải Có bệnh Mùa hè 2135 Mùa thu 1890 Cộng 4025 ad bc (ad-bc) (a+b)*(c+d)*(a+c)*(b+d) χ2TN Khơng có bệnh 3997 5949 9946 12701115 7554330 5146785 1.92432E+15 192.3190901 Cộng 6132 7839 13971 SO SÁNH GIỮA MÙA ĐÔNG VỚI MÙA THU Diễn giải Có bệnh Mùa đơng 2566 Mùa thu 1890 Cộng 4456 ad bc (ad-bc) (a+b)*(c+d)*(a+c)*(b+d) χ2TN Khơng có bệnh 5523 5949 11472 15265134 10438470 4826664 3.24145E+15 114.4762939 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên Cộng 8089 7839 15928 http://www.lrc-tnu.edu.vn xii KẾT QUẢ TÍNH KHI BÌNH PHƢƠNG SO SÁNH LỢN MẮC TIÊU CHẢY GIỮA CÁC MÙA SO SÁNH GIỮA MÙA XUÂN VỚI MÙA HẠ Diễn giải Có bệnh Mùa xuân 2531 Mùa hạ 2135 Cộng 4666 ad bc (ad-bc) (a+b)*(c+d)*(a+c)*(b+d) χ2TN Khơng có bệnh 5089 3997 9086 101116407 10865015 - 748608 1.98095E+15 3.890453304 Cộng 7620 6132 13752 SO SÁNH GIỮA MÙA XUÂN VỚI MÙA ĐÔNG Diễn giải Có bệnh Mùa xn 2531 Mùa đơng 2566 Cộng 5097 ad bc (ad-bc) (a+b)*(c+d)*(a+c)*(b+d) χ2TN Khơng có bệnh 5089 5523 10612 13978713 13058374 920339 3.33397E+15 3.991007188 Cộng 7620 8089 15709 SO SÁNH GIỮA MÙA HÈ VỚI MÙA ĐÔNG Diễn giải Có bệnh Mùa hè 2135 Mùa đơng 2566 Cộng 4701 ad bc (ad-bc) (a+b)*(c+d)*(a+c)*(b+d) χ2TN Khơng có bệnh 3997 5523 9520 11791605 10256302 1535303 2.21985E+15 15.10059821 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên Cộng 6132 8089 14221 http://www.lrc-tnu.edu.vn xiii KẾT QUẢ TÍNH KHI BÌNH PHƢƠNG SO SÁNH LỢN MẮC TIÊU CHẢY GIỮA CÁC PHƢƠNG THỨC CHĂN NUÔI SO SÁNH GIỮA BÁN CÔNG NGHIỆP VỚI CÔNG NGHIỆP Diễn giải Có bệnh Bán cơng nghiệp 4591 Cơng nghiệp 2190 Cộng 6781 ad bc (a+b)*(c+d)*(a+c)*(b+d) χ2TN Khơng có bệnh 7551 8740 16291 40125340 1.7E+07 1.46606E+16 875.6681174 Cộng 12142 10930 23072 SO SÁNH GIỮA TRUYỀN THỐNG VỚI CÔNG NGHIỆP Diễn giải Có bệnh Truyền thống 2341 Cơng nghiệp 2190 Cộng 4531 ad bc (a+b)*(c+d)*(a+c)*(b+d) χ2TN Khơng có bệnh 4267 8740 13007 20460340 9344730 4.25659E+15 509.0791012 Cộng 6608 10930 17538 SO SÁNH GIỮA BÁN CÔNG NGHIỆP VỚI TRUYỀN THỐNG Diễn giải Có bệnh Bán cơng nghiệp 4591 Truyền thống 2341 Cộng 6932 ad bc (a+b)*(c+d)*(a+c)*(b+d) χ2TN Khơng có bệnh 7551 4267 11818 19589797 1.8E+07 6.57299E+15 10.43820275 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên Cộng 12142 6608 18750 http://www.lrc-tnu.edu.vn xiv KẾT QUẢ TÍNH KHI BÌNH PHƢƠNG SO SÁNH LỢN CON MẮC TIÊU CHẢY GIỮA CÁC LỨA TUỔI SO SÁNH GIỮA NHÓM LỢN 31-60 NGÀY VỚI NHÓM LỢN 1-21 NGÀY Diễn giải Có bệnh 31-60 ngày 4283 1-21 ngày 1720 Cộng 6003 ad bc (a+b)*(c+d)*(a+c)*(b+d) χ2TN Không có bệnh 7064 6506 13570 27865198 1.2E+07 7.06358E+15 635.7329738 Cộng 11347 8226 19573 SO SÁNH GIỮA NHÓM LỢN 31-60 NGÀY VỚI NHĨM LỢN 22-30 NGÀY Diễn giải Có bệnh 31-60 ngày 4283 22-30 ngày 3119 Cộng 7402 ad bc (a+b)*(c+d)*(a+c)*(b+d) χ2TN Khơng có bệnh 7064 6988 14052 3E+07 2.2E+07 1.19286E+16 112.1606946 Cộng 11347 10107 21454 SO SÁNH GIỮA NHÓM LỢN 22-30 NGÀY VỚI NHĨM LỢN 1-21 NGÀY Diễn giải Có bệnh 22-30 ngày 3119 1-21 ngày 1720 Cộng 4839 ad bc (a+b)*(c+d)*(a+c)*(b+d) χ2TN Khơng có bệnh 6988 6506 13494 2E+07 1.2E+07 5.42884E+15 231.119697 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên Cộng 10107 8226 18333 http://www.lrc-tnu.edu.vn xv MỘT SỐ HÌNH ẢNH MINH HOẠ CHO ĐỀ TÀI Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn xvi Ảnh 1, 2, 3: Triệu chứng phân lợn mắc bệnh tiêu chảy Ảnh 4: Lợn mắc bệnh tiêu chảy có biểu sƣng phù mí mắt Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn xvii Ảnh 5: Mổ khám kiểm tra bệnh tích lợn mắc bệnh tiêu chảy Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn xviii Ảnh 6: Hình thái vi khuẩn E.Coli Ảnh 7: Khuẩn lạc vi khuẩn E.coli môi trƣờng thạch MacConkey Ảnh 8: Phản ứng lên men đƣờng Ảnh 9: Vi khuẩn E.coli mơi Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn xix vi khuẩn E.coli Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên trƣờng Sim phản ứng sinh Indol http://www.lrc-tnu.edu.vn xx Ảnh 10,11: Bệnh tích chuột thí nghiệm Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn