Đặc điểm hóa sinh của bệnh nhân thiếu beta ketothiolase

Bộ GIÁO DỤC VÀ DÀO TẠO Bộ Y TÉ TRƯỜNG DẠI HỌC Y HÀ NỘI MAI QUỲNH ANH ĐẶC ĐIẾM HÓA SINH CỦA BỆNH NHÂN THIÉƯ BETA-KETOTHIOLASE KHÓA LUẬN TÓT NGHIỆP cử NHÂN Y KHOA KHÓA 2019-2023 HÀ NỘI - 2023 -ãc ô4 ugc V Hl B GIO DC V DÀO TẠO BỌ Y TÉ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y HÀ NỘI *** MAI QUỲNH ANH ĐẶC ĐIẼM HÓA SINH CỦA BỆNH NHÂN THIẾU BETA-KETOTHIOLASE Ngành đào tạo : Kỳ thuật xét nghiệm y hục Mà ngành : 7720601 KHĨA LUẬN tót:nghiệp NHÂN Y KHOA KHĨA 2019-2023 Người hướng dần khoa học: ThS NGUYÊN THỊ PHƯƠNG THÚY H NI - 2023 -ãc ô4 ugc V Hl LI CÁM ON Với tất ca lòng kinh trọng biết ơn sâu sác, lời cho phép cm xin đưực gửi lời cam ơn tới ThS Nguyền Thị Phương Thúy, giang vicn trường Đại học Y Hả Nội đà ân cần tận tinh hướng dần cung cấp cho cm kiến thức, kinh nghiệm quỷ báu dồng hãnh tạo điều kiện tốt dế em hoàn thành khóa luận tot nghiệp Em ln biết ơn thay cô giáo dà tận tinh dạy báo truyền dạt tri thức quỷ báu cho chúng em suốt thời gian nám học tập luyện Trường Đại học Y Hà Nội Em xin gưi lời câm ơn tới Ban giâm hiệu Phòng Quan lý dão tạo Bộ mơn Hóa sinh lâm sàng Khoa Kỳ thuật Y học trường Đại học Y Hà Nội tạo thuận lợi suốt quàng thời gian em học tập nơi dãy Cuổi cùng, cm xin gứi biết ơn tới bố mẹ, người thân gia dinh đà quan tâm dộng viên em; cam ơn bạn dã chia giúp đờ em suốt trinh học tập hồn thành khố luận Em xin trân thành cam ơn! Hà Nội ngày tháng năm 2023 Sinh viên Mai Quỳnh Anh -c ^H «4 ugc V Hl LỜ! CAM ĐOAN Kinh iỊÍri: - Phịng Qn lý Đào tạo - Trường Đại học Y Hả Nội - Hội (lồng chấm thi khóa luận tốt nghiệp Em tên Mai Quỳnh Anh sinh viên tổ 29 lóp Y4XN, niên khóa 2019 2023 Trường Đại học Y Nội Em xin cam đoan tằt cá sỗ liệu kết qua trinh bày khóa luận lã hồn tồn trung thực vã chưa tửng dược cơng bố công trinh nghiên cứu não khác Em xin chịu hoàn toàn trách nhiệm cam đoan Hà Nội ngày thâng nảnt 2023 Sinh viên Mai Quỳnh Anh -c ^H «4 ugc V Hl MỤC LỤC TĨM TÁT NỘI DƯNG KHÓA LUẬN DANH MỤC TÙ’ VIẾT TÁT DANH MỤC BÁNG DANH MỤC B1ẼƯ ĐÒ DANH MỤC Sơ DỊ DANH MỤC HÌNH DẠT VÁN DÈ I I TÓNG QUAN i Tông quan rỗi loạn chuyến hóa bàin sinh 1.1.1 Phân loại theo hỏa sinh bệnh học 1.1.2 Phàn loại theo sinh lý bệnh học 1.2 Bệnh lý thiếu beta-ketothiolasc 1.2.1 Khái niệm 1.2.2 Cơ chế bệnh sinh 1.2.3 Dịch tẻ học 14 1.2.4 Triệu chúng làm sàng cận lâm sàng 14 1.2.5 Chân đoán 17 1.2.6 Điều trị 18 1.3 Các kỳ thuật sàng lọc chân đoán bệnh nhãn thiểu bcta-ketothiolase 19 1.3.1 Kỳ thuật khói phơ đơi (MS/MS) 19 1.3.2 Kỹ thuật sắc ký ghép nồi khối phổ (GC/MS) 20 1.3.3 Phân tích gen 22 1.3.4 Đo hoạt độ enzym beta-ketothiolase 23 II DỚI TƯỢNG VẢ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN cửu 24 2.1 Thởi gian, địa điểm 24 2.2 Doi tượng phương pháp nghicn cứu 24 -•c ^H «4 ugc V Hl 2.3 Chi tiêu nghiên cứu 25 2.3.1 Định lượng acylcamitin acid ainin bang kỳ thuật khối phô đôi (MS/MS) 25 2.3.2 Phân tích acid hùn niệu bang kỳ thuật sắc ký ghép nỗi khối phồ (GC/MS) 27 2.5 Sơ đỗ nghiên cứu 29 III KẾT QUÁ 30 3.1 Đặc diêni chung 30 3.2 Đặc dièin sàng lọc sư dụng khối phổ dôi (MS/.MS) cua bệnh nhàn thiếu beta-ketothiolase Bệnh viện Nhi Trung ương 33 3.3 Đặc diêm acid hữu niệu cua bệnh nhãn thiếu beta-ketothiolase Bệnh viện Nhi Trung ương 41 IV BÀN LUẬN 45 4.1 Đặc diêm chung cua bệnh nhân thiều beta-ketothiolase Bệnh viện Nhi Trung ương 46 4.2 Dặc đicni sàng lọc sữ dụng khói phơ dơi (MS/MS) bệnh nhân thiếu beta-ketothiolase Bệnh viện Nhi Trung ương 49 4.3 Đặc diêm acid hữu niệu cua bệnh nhân thiếu beta-ketothiolasc Bệnh viện Nhi Trung ương 51 KÉT LUẬN 55 TÀI LIỆU THAM KHÁO -•c ^H «4 ugc V Hl TÓM TÁT NỘI DUNG KliÓA LUẬN Bệnh thiếu hụt cnzym bcta-kctothiolasc bệnh rối loạn chuyến hóa dột bicn gcn ACATI (T2) nầm trẽn nhicin sắc sổ 11 (11 q22.3-q23) Bệnh dược đặc trưng bơi dợt nhiẻm loan ceton cap triệu chứng lâm sàng giừa cấp nhiễm toan Cơ chế gây bệnh thiếu enzym bcta-ketothiolasc lã giãn doạn quã trinh giáng hóa isoleucin dong thời, bệnh làm giãn đoạn q trình giáng hóa thê ccton Các xét nghiệm hóa sinh dõng vai trị quan trọng việc sàng lọc chắn đoán bệnh thiếu hụt enzym beia-ketothiolase Nghiên cứu dược thực nhằm mô la đặc diêm hóa sinh, acylcarnilin acid hữu niệu cua bệnh nhân thiếu bclakctothiolasc Nghiên cửu hôi cứu mô loạt ca bệnh; nghicn ciru sàng lọc chắn đoán bệnh thiếu hụt cnxym bcta-kctothiolasc qua phương pháp định lượng acylcamitin bàng kỳ thuật khối phô dơi (MS MS) vã phân tích acid hữu niệu bang kỳ thuật sắc ký ghép nối khối phố (GC/MS) 30 bệnh nhân Bệnh viện Nhi Trung ương từ tháng 01 /2023 den tháng 05/2023; xứ lý sỗ liệu bang phần mem SPSS Excel Kcl qua nghiên cửu cho thắy lãng nồng độ cùa acylcarnitin C5:1 (19/23) C5:OII (20/23); tảng nồng độ cua acid niệu 2MAA (6 26) 2M3HB (23/26) TIG (13 26) bệnh nhản thiêu beta-kctothiolase Bệnh thiếu hụt enzym beta-ketothiolase dược sàng lục chân đoán nhờ phương pháp sàng lọc rối loạn chuyên hóa sir dụng MS/MS GC/MS Từ khóa: thiếu hụt bcta-ketothiolasc khối phơ đỏi (MS MS) sc ký ghộp ni ph (GC/MS) -ãc ô4 ugc V Hl DANH MỤC TỪ VIẾT TẤT Từ viết tát Giãi thích Gen T2 Gen ACAT1 Enzym T2 Enzym bcta-kctothiolasc 2-methylacetoacctyl-CoA thiolase Acctoacctyl-CoA thiolase Enzym T1 3-kctoacyl-CoA thiolase MS MS Phương pháp định lượng acylcamitin kỳ thuật khối phơ đỏi Phương pháp phán tích acid hữu GC/MS niệu kỳ thuật sắc ký ghép noi khỏi phô MAA 2-methylacetoacetic 2M3HB 2-methyl-3-hydroxybutyric TIG Tiglylglycin C5:l Tiglylcamitin C5:OH 2-methyl-3-hydroxybutyryl-camitin RLCHBS Rối loạn chuyền hóa bấm sinh RLCH Rỗi loạn chuyên hóa NST Nhiễm sác thê FFA Acid bộo t AcAc Acctoacetat -ãc ô4 ugc V Hl H& Từ vict tắt Giải thich 3HB 3-hydroxybutyrat PCR Polymcrasc-Chain-Reaction MLPA Multiplex Ligation-dependent Probe Amplification HMG-CoA 3-hydroxy-3-mcthylglutaryl-CoA mils HMG-CoA HL HMG-CoA lyase SCOT succinyi-CoA:3- transferase -ãc ô4 ugc V Hl oxoacid CoA DANH MỤC BÁNG Bang I I Phân loại RLCHBS iheo sinh lý bẻnh hục Bang I Kct qua xét nghiệm sinh hóa máu thường quy cua bẻnh nhân 32 Bang Kct qua định lượng acid amin kỳ thuật khối phố đỏi (MS/MS) bệnh nhân thiếu beta-ketothiolasc 33 Bang 3.3 Kct qua định lượng acylcarnitin bang kỳ thuật khối phô đôi (MS/MS) bệnh nhân thiếu bela-ketothiolase 35 Bang So sánh nồng dụ C5:1 C5:0H theo giói tinh cùa bệnh nhân 39 Bang So sánh nồng dộ C5:1 theo dộ tuồi cũa bệnh nhân 39 Bang So sánh nồng dộ C5:0H theo độ tuổi cua bệnh nhân 40 Bang Kết phân tích acid hừu niệu băng kỳ thuật sắc ký ghép noi khói phơ (GC/MS) bệnh nhân thiếu beta-kctothiolasc.41 Bang Tổng hợp kết qua acylcamitin vã acid hừu niệu cua bệnh nhân thicu enzym bcta-ketolhiolasc 45 -ãc ô4 ugc V Hl 45 Nhận xét: Trong sị 26 bịnh nhãn có liệu vê thè ceton nước liêu, cò 10 bệnh nhàn khùng có celon niệu; bịnh nhàn làng tiết lượng nhó; bệnh nhàn tâng tiểt vừa phái; II bệnh nhãn tâng tiết lượng lớìi Báng Tông hợp kết (ỊUà acylcarnitin acid hữu cư niệu cua bệnh nhàn thiều enzym bcta-ketothiolase HỌ V A li X STT DO n Õ4 (MAM H X 1* NaaÙỉ Nbcll rX tlá ĩ 11 S’co 'ftdurự ukN tuJi xa 0.11 O.*? S-Ỉ2 tLMf mời Na CCS 1JW : Nxo 0.-Í 144 l > 0.0* Q.4J * ft dune UÀM M K Xcnm Ok 11 SfẠỈaWaH X vcxjTi-ft A SfV>ỉnGuB X Nfiaer VfX Yr- N vĩ lb*x M K Irak Th Danil J 1 J t Jỉ Mi Iki IX«-.X r V ,Xv Irvag IM B *•< ttó1 Ị r v»'2 Ị G PKmĩi Vxh Hwnf Q K xu ĨK«f H ( «t»s fckU o.a S-12 ftuaj túi nc 0.J Nd ĩrinUSXaỤ riim Sax í 1c ^.0H0~rf Neo t Ị } « c c N'xi i z N' t j c J ị Nj OJI 04» J te 0A1 1.04 j • xa Sxa M KUMt ttri 0.WX9 rutterb !kó Oiwj OOH 0.M.4J liftf >40 trt \’X»pèax ' ĩ lo1 Ml w kxof thft k*x Nhận xét: 30 bệnh nhún nghiên cừu dều tăng it nhài hai chi số acylcarnitin mâu acid hữu cư niệu, khơng cị bệnh nhân không tâng dồng thời cá hai chi sổ -ãc ^H ô4 ugc V Hl 46 IV BN LUN 4.1 Đặc diem chung cùa bệnh nhân thiếu beta-ketothiolasc Bệnh viện Nhi Trung ương Qua hồi cứu dử liệu cũa 30 bệnh nhàn từ tháng 04/2017 đến tháng 01/2023 Bệnh viện Nhi Tning ương, bệnh nhàn nhơ tuổi lã 27 ngày tuôi bệnh nhàn lởn tuổi 14 tuổi Nhóm bệnh nhân nhơ bang tháng tuổi chiếm ti lệ nhiều (11/30 lương dương 36.7%) II lệ nhiều thứ hai lã nhôm bệnh nhân từ đen 12 tháng tuồi (7/30 chiếm 23.3%); ti lộ nhiều thử ba lã nhóm bệnh nhân I tuổi (3/30 chiếm 10%); sơ bệnh nhãn 2; 3; tuổi lần lưụrt lã 5; 2; I bệnh nhân (tương đương 16.7%; 6.7%: 3.3%); có I bệnh nhãn độ tuổi 14; chiếm 3.3% Ngoại trừ trường hợp bệnh nhãn 14 tuồi, thi trung binh dộ tuổi xuầt triệu chứng dầu tiên cua bệnh nhãn 15 tháng tuôi Tông hợp bệnh nhân xuất com câp lan đầu trước 24 tháng tuói 26/30 (86.7%) Nghiên cửu cua Nguyền Ngục Khánh cộng 41 bệnh nhân Bệnh viện Nhi Trưng ương Việt Nam khoáng thời gian tử năm 2005 den 2016 tuỏi xuất đau tiên trung binh 13 tháng luỏi lứa luôi xuầt cấp lẩn dầu chu yếu trước 24 tháng tuổi chiếm 97.5% lứa tuổi 12 tháng tuối chiếm 60%6 Nghiên cứu cua Fukao cộng 26 bệnh nhân vảo nám 2001 tuồi trung binh cua cap lan đau 15 tháng tuồi xuầt cẩp sớm lã lúc ngày vả muộn 48 tháng3 Cho đến chi cỏ I trường họp xuất cẩp lúc ngày tuổi bệnh nhàn Tây Ban Nha’ Nghiên cứu cua Fukao cộng 135 bệnh nhản, gồm 26 trưởng hợp vào năm 2001 nâin 2017 loạt 26 trường hợp khác từ Pháp 41 trường hợp từ Việt Nam 32 yếu từ Thố Nhì Kỳ I Lan Đức 10 trướng hợp từ Án Độ cho kết qua hầu hết bệnh nhân phát triển nhicm toan ccton đầu liên irong khoáng lừ đến 36 tháng tuổi vởi dinh diêm khơi phát lúc 11 tháng tuổi:í Khơi phát thiểu T2 trũ s sinh l -ãc ^H ô4 ugc V Hl 47 vã chi có hai bệnh nhân khơi phát tre sơ sinh'5 Nghiên cứu cua Sarah Catharina Grunert cộng 32 bệnh nhân mắc bệnh thiếu beta- kctothiolasc vào nám 2017, độ tuồi khơi phát điền hinh nhỏm bệnh nhàn dao dộng lừ giai đoạn sơ sinh den tuồi di học'1 Ngoại trừ hai bệnh nhân, tầt ca cảc bệnh nhân có triệu chứng bị bù lần dầu độ tuồi từ tháng den tuổi, khơng có bệnh nhân biểu tre sơ sinh người Iởn): Nghiên cứu cua Sarah c Griinert Jôm Oliver Sass 244 bệnh nhân thiều hụt betaketothiolase từ trước lới năm 2020 tuồi xuất triệu chửng dầu liên dao dộng lừ ngày den X tuổi (trung binh 12 tháng)-'1 Như trung binh độ tuôi khơi phát cua bệnh thiêu hụt beta- kctothiolase khoáng 12-15 tháng tuói Tuổi xuầt cap phù hợp với chế bệnh sinh sinh lý chuyển hoá cua the Thứ nhất, giai đoạn sau tháng tuổi giai đoạn kháng thê cua mẹ truyền sang cho bat đẩu giam sút dần lới tre de bị nhiễm khuân Và nguyên nhân chinh gây khơi phát cấp Do nhiềin khuân nhu cầu nàng lượng tãng lên 150% den 200% so với nhu câu binh thường x Trong dỏ náng lượng cung cap từ ăn uống lại giam sút tre biếng ăn vả nơn trớ Và thê sư dụng nâng lượng dự trừ từ lipid kết qua lượng lớn ceton dược sán xuất khơng dược giáng hố dẫn tới tinh trạng nhiễm loan colon* Thứ hai tre lớn it bị cấp vi nhu cầu nàng lượng so với cản nặng it so với tre nhò’, nhu cầu nâng lượng giam so với thề trọng lượng ket hợp với khối lượng bắp tâng lẽn cung cầp nguồn dự trừ protein cho trinh tạo dưỡng Diều cỏ thê có nghĩa lã thê celon il quan trọng ứ tre lớn việc tri lượng dường màu so với tre nho có thê giai thích lại kiên nhiễm toan ceton trơ nên it xay him với tre kín l0 Thử ba phân bo lớp mờ lớp cùa thê nguyên nhân giúp cho trê lớn it xay cắp Ớ tre côn bú mẹ thi s phõn b lừp m -ãc ô4 ugc V Hl 48 da nhiều, nảng lượng dự trừ chu yếu từ lớp mò dự trừ dối với tre lớn thi lớp mờ da thay vào dó lớp nén lượng dự trữ dược lay từ protein dự trừ* Thứ tư tre tháng tuồi có tần suất bừa án nhiều, khoang cách bừa ân ngấn ncn xuắt nhicni toan ccton cấp* Trong 30 bệnh nhân hồi cứu dừ liệu lừ tháng 04 2017 đến tháng 01 2023 Bệnh viện Nhi Trung ương, có 15/30 bệnh nhân nam 15/30 bệnh nhân nữ ti lộ nam: nừ 1:1 Nghiên cửu cua Nguyễn Ngọc Khánh cộng 41 bệnh nhân Bệnh viện Nhi Trung ương Việt Nam khoang thời gian từ nãm 2005 đền 2016 có 23/41 bệnh nhân nam 18/41 bệnh nhân nừ ti lộ nam: nừ lã 1.28:1 Ti lộ nam: nử tương dương nghiên cứu cua Fukao cụng 26 bệnh nhân vào năm 2001' Tỳ lệ giới tinh nam: nử 15:11 (1.36:1) nghiên cửu Fukao cộng 26 bệnh nhân vào năm 20019 Nghiên cứu cùa Sarah Catharina Gninert cộng 32 bệnh nhân mac bệnh thiểu bcla-kctothiolase vào năm 2017 từ 12 trung tâm trao dôi chất Đức (sáu trung tâm) Thô Nhĩ Kỳ (hai trung tâm) Hà Lan (hai trung tàm) Áo (một trung tâm) vã Thụy Sĩ (một trung tâm) 17/32 bệnh nhân nam 15/32 bệnh nhàn nữ: li lệ nam: nừ lã 1.13: INghiên cửu cũa Sarah c Gríincrt Jõm Oliver Sass 244 bệnh nhàn thiếu hụt bcta-kctothiolase lừ trước tới nãm 2020, 132/244 bệnh nhân nam 107/244 bệnh nhân nữ 5/244 bỳnh nhãn chưa có liệu giới linh; ti lộ nam: nử lã 1.23:1 Từ ket qua cua nghiên cứu trên, thu dược ket qua u lệ nam: nữ bộnh nhân thiếu bcta-kctothiolasc lả tương dối dòng phú hợp với nguyên nhãn gây bệnh dột biền gcn lặn nầm trẽn NST thường Ti lệ nam giới chi cao ti lộ nữ giới khơng dáng kể; giái thích cho khác biệt ti lệ nam: nữ nghiên cứu có the chọn địi tượng, cừ mẫu khãc -•c ^H «4 ugc V Hl 49 4.2 Đặc diem sàng lọc sử dụng khối phố đôi (MS/MS) bệnh nhân thiếu bcta-kctothiolasc Bệnh viện Nhi Trung ương Trong 30 bệnh nhân hồi cứu dừ liệu thiếu beta-kctothiolasc Bệnh viện Nhi Trung ương lừ tháng 04/2017 đen tháng 01/2023 có 23 bệnh nhãn có liệu acylcarnitin nồng độ C5:1 C5:0H tâng hầu hết bệnh nhân, chiếm ti lệ lã 19/23 (82.6%) 20/23 (87%) Giá trị tâng cao cùa C5:l 0.94 pmol/L; thấp lã 0.07 pmol/L; giá trị trung binh 0.36 pmol'L: tàng gấp lừ 1.4 - 10.4 lần giới hạn cùa giá trị bình thường (khoang tham chiếu: 0.0-0.09 pmol/L) Giá trị tâng cao nhẩt cùa C5:OI I 1.56 pmol/L; thấp lã 0.17 pmol/L; giá trị trung binh 0.73 pmol/L; táng gấp từ l.l - 3.47 lần giới hạn trẽn cua giã trị binh thưởng (khoáng tham chiểu: 0.0-0.45 pmol/L) Nghiên cứu cua Nguyền Ngọc Khảnh cộng trẽn 41 bệnh nhân Bệnh viện Nhi Trung ương Việt Nam khoang thời gian tữ năm 2005 đen 2016 có 38/39 bệnh nhân lãng C5:1 (ương dương chiếm 97.4%; cỏ 38 39 bệnh nhân tăng C5:OH tương dương chiếm 97,4%x Giá trị lãng cao cùa C5:l cấp 15.56 pmol/L; giá trị trung bình lã 0.59 pmol/Ư Giá trị tâng cao cùa C5:OH cắp lả 13.8 pmoL L: giả trị trung binh 1.45 pmol/L Mức độ tàng cua C5:l C5:OH cua bệnh nhân nghiên cứu cua Nguyễn Ngọc Khánh cộng dao động lớn (('5:1: 0.05 pmol/L: C5:OH: 0.53 15,56 13.8 pmol L) nghiên cửu 30 bệnh nhân lại Bệnh viện Nhi Trung ương dao dộng nhó (C5:l: 0.07 - 10.94 pmol/L: C5:OH: 0.17 1.56 pmol/L) Nghiên cứu cua Fukao cộng cho biết, hầu het trung tâm sàng lọc sơ sinh Nhật Ban tiêu chi sàng lọc thiêu hụt T2 ca C5:l vã C5:()ll lương ứng lãng lên lum 0.05 1.0 nmol/mL10 Nghiên cứu cùa Sarah Catharina Grunerl vả cộng 32 bệnh nhân mắc bệnh thiếu bcia-ketothiolase vào năm 2017 kết qua acylcaraitin máu huyết -•c «4 ugc V Hl 50 tương: 15/16 bệnh nhàn (94%) cho thấy mức độ acylcanútin C5:OH táng lên 11/14 (78%) cỏ gia lủng acylcamitin C5:l ’’ Acylcamiũn C5:l C5:OH dấu ấn dang dược sư dụng sảng lọc so sinh mo rộng dê sàng lọc bệnh thiều enzym beia-kctothiolase dắu ấn C5:OH có giá trị dặc hiệu * Nghiên cứu cua Nguyen Ngọc Khánh cộng 41 bệnh nhân Bệnh viện Nhi Trung ương Việt Nam khoáng thời gian lừ năm 2005 đen 2016 bệnh nhãn có cá hai giá trị C5:1 C5:OI I ỡ mức binh thường Neu có sàng lọc sơ sinh thi bệnh nhân sè bị bo sót n lộ bo sót cùa bệnh sè lã 1/41 (2.5%) Như có kha nàng bị bo sót bệnh thiêu enzym bcta-kctolhiolasc qua sàng Iqc sơ sinh x Trên thê giới có trường hợp bó SỎI chân đốn đặc biệt ca bệnh có dột biển nhẹ trường hợp (2/4) Bắc Carolina lừ 1997 đen 2005 trưởng hợp (2/5) Minnesota tử tháng 01/2001 đen tháng 11/2010 trường hợp (3/7) New South Wales (úc) từ tháng 04 1998 đến tháng 03/2002 Trong nghiên cứu số 30 bệnh nhân thicu enzym beta-kctothiolase Bệnh viện Nhi Trung ương có hai bệnh nhân cỏ cá hai kết qua nồng độ C5:1 vã ('5:011 mức binh thưởng, bệnh nhân tháng tuổi bệnh nhân luói Tuy nhiên ket qua phàn tích acid hữu niệu cua bệnh nhàn thầy có tảng bãi tiet 2MAA 2M3IIB TIG tăng lượng km ccton niệu nên bệnh nhãn đà dưực chân đoản thiếu enzym beta-ketothiolase mà không bị bo sót I lầu hết bệnh nhãn thiếu T2 dược xác định cho den có il đột biến "nhẹ”, vần giừ lại hoạt dộng T2 lại đảng kế” Ỡ nhửng bệnh nhãn nảy, chắt chuyến hỏa từ trinh dị hóa isoleucin phân tích acylcarnitin máu acid hừu nước tiều thấp nhiều so với nhừng bệnh nhãn thiểu T2 điên hình với hai dột biến vỏ nghĩa'” Do dó phương pháp sàng lục sơ sinh có thê bo lữ bệnh nhân bị dột biền nhẹ nh vy -ãc ^H ô4 ugc V Hl 51 õy lý lại tliicu T2 phân loại số bệnh mục liêu thứ cấp không thiết phái sàng lọc sàng lọc sơ sinh Nhật Ban1" Tuy nhiên, theo nhả khoa học, nen đưa thiếu T2 vảo sàng lục sơ sinh; ca sàng lọc sơ sinh thơng thường bó SĨI so bệnh nhàn thiếu T2 so vần sè phát hiện10 Qua phân lích trẽn thấy sàng lọc sơ sinh RLCHBS khơng thè loại trừ hồn tồn bệnh Đỗi với bệnh nhãn dương linh chương trinh sàng lọc sơ sinh mơ rộng thi cần dược làm xét nghiệm phân tích acid him niệu dê khàng định chân đoán Sư dụng phương pháp kiêm định One Way Anova dê so sánh nồng độ C5:1 vã C5:OH theo giới tinh (ớ bang 3.5) độ tuồi (ớ bang 3.6 3.7) cho thấy giới tinh, độ tuổi nồng dộ C5:1, C5:O11 biền độc lập, tức nồng độ C5:1 vã C5:OH cúa bệnh nhân không liên quan tới độ tuổi vã giới tinh Ben cạnh dó xét nghiệm sàng lục MS/MS nhận thấy acid amin cỏ thê tảng giam khác bệnh nhân, vi dụ nong độ acid amin Alanin giam 5/23 bệnh nhân Glutamic lâng 5/23 bệnh nhàn Lcucin giam 23 bệnh nhân Valin tăng Ỡ4/23 bệnh nhân giam 3/23 bệnh nhãn Sự gia tảng acid amin lã ihử phát, chi diêm cho tinh trạng roi loạn chuyên hóa cùa thê thường táng dị hóa protein 4.3 Đặc diem acid hữu niệu cua bệnh nhân thiếu bcta-ketolhiolase Bệnh viện Nhi Trung ương Trong nghiên cứu 30 bệnh Bệnh viện Nhi Trung ương 2M3HB tảng hầu hết bệnh nhàn (23/26) TIG tâng 13/26 bệnh nhân 2MAA tâng bệnh nhãn (6/23) bệnh nhàn tàng 2M3HB, da sổ bệnh nhãn lãng bãi tiết lưựng lớn chiêm 76.9%; bệnh nhân táng T1G, cỏ 3S.5% bệnh -ãc ô4 ugc V Hl 52 nhõn tng bi tit lượng lớn: đa sổ bệnh nhân có 2MAA mức binh thường (khơng có nước tiêu) Kết qua nghiên cứu cho thấy 2M3IIB tăng bãi tiết lưựng lớn hầu hết bệnh nhân tâng nhiều so vói 2MAA TIG Kct qua phù hợp với nghiên cứu cùa Nguyền Ngọc Khánh trcn 41 bệnh nhân Bệnh viện Nhi Trung ương Việt Nam khoang thời gian từ năm 2005 đến 2016 có 7/8 bệnh nhân tăng 2MAA 2M3HB TIG mầu nước tiếu tươi; không 2MAA nước tiêu giấy thấm 33/33 bệnh nhân lâng 2M3HB T1GX Kết luận có 97.6% (40/41) bệnh nhân tâng 2M3HB vã T1G* Mức độ lãng cùa chất 2M3I IB cao (550.78 mol/mol Crcatinin), liếp theo 2MAA (392,67 mol/mol Crcatinin) cuối TIG (231.39 mol /mol Creatinin)* Bời vi 2MAA chất khơng ơn định giầy thầm giáng hố tự nhiên thành 2-butanon sau tuần nhiệt độ phịng nên 2MAA sê khơng phát trẽn mầu bệnh phàm giấy thấm nước tiêu' Ket qua phân lích acid hừu niệu (các chi sổ 2MAA 2M3I1B TIG) nghiên cứu tương tự với kết qua nghiên cứu cua tác giá Fukao nám 2001' (nghiên cửu cùa tác giá Fukao có 100% bệnh nhân tăng 2M3HB vã 2MAA 61% ti lộ bệnh nhân tăng TIG) Nghicn cứu cùa Fukao vả cộng vào năm 2001 cho rằng, yếu tố dự đỗn hừu ích chân đoán bệnh thiếu enzym bcta-kelothiolase diện cua tiglylglycin nước tiêu' Sự diện cua tiglylglycin nước tiêu có thê phan ánh tắc nghẽn nghiêm trọng trinh dị hóa isolcucin bước enzym T2 vi cá hai phan ứng enzym sau có thê dao ngược'*u Do 2-methylacctoacctat dễ bay nên 2-mcihyl-3-hydroxybutyrat cô nguồn gổc lừ 2-mcihyl-3- hydroxy butyryl-Co A vã tigylglycine từ tigyl-CoA trư thành dấu hiệu dặc trưng cho tinh trạng thiếu T2 ' Bắt kỳ mức độ cua hoạt dộng enzym T2 lại đểu lảm giam kha nâng tích tụ nhicu chai trung gian trinh dị hóa isolcucinDo vẳng mặt cùa tiglylglycin cho thấy diện cua số hot dng T2 -ãc ô4 ugc V Hl 53 cũn sót lại thể’ Nghiên cửu cua Sarah Catharina Gruncrt vã cộng 32 bệnh nhân mac bệnh thiểu beia-ketolhiolase vào năm 2017 cho kết qua tất cá bệnh nhân (28''28 100%) cho thấy gia tăng đặc trưng cua 2.M31IB; 26.28 (93%) có tin hiệu TIG tảng cao; 2MAA chi dược ghi nhận nước ticu cua 12/28 bệnh nhân (43%)’-\ Trong nước tiều 3- hydroxy-n-butyrat (10/28 36%) acid 3-hydroxy isovaleric (4/28.14%) acetoacetat (4/28 14%) chi dược báo cáo so người bệnh5' So sánh kết qua cùa nghiên cứu trên, da phần bệnh nhàn thiểu cnzym bcia-ketothiolasc có đặc trưng láng nồng độ 2M3HB rò rệt ti lộ bệnh nhân táng nong độ TIG không cao bang 2M3HB mức dộ lãng khơng lớn bang 2M3HB, nong độ 2MAA khó quan sát vi 2MAA không ben giấy tham nước liêu Giừa nghiên cứu vần có khác biệt nhẹ li lộ biên đối hoá sinh đặc hiệu giừa chi so acid niệu, giái thích cho vấn đê có thê nghiên cứu liên quan đền loại dột biến cua gen 12 dột biến mẩt chức nâng hay cịn chức x Những bệnh nhân có kiểu gen chức năng, bị nhiễm toan cclon thưởng không cỏ triệu chứng triệu chửng nhẹ acid hữu nước lieu vả acylcarnitin máu cùa họ Khác với bệnh nhân có kiêu gen chức năng, nhừng bệnh nhân có kiêu gen chức nhiễm loan celon sè cỏ dặc trưng tàng acid hữu nước tiêu acylcamitin máu diên hình10 Trong giai đoạn nhiễm toan ceton, 2M3IIB có the chi lãng nhẹ chi không phát dược’ Xét nghiệm GC7MS lã xét nghiệm dặc hiệu dê chân đoán bệnh Tuy nhiên, xét nghiệm khơng dien hình cùa bệnh thiếu cnzym bctakctothiolase binh thường khơng the loại trừ hồn toàn* Vi tnrởng hợp thay lâm sàng xét nghiệm CƯ ban diên hình cua RLCHBS giáng hố the ceton thi xét nghiệm hoại dộ enzym phõn l dc d ngh lm -ãc ^H ô4 ugc V Hl 54 đế khắng định chần đoán* Biền dối đậc hiệu xẻt nghiệm phàn tích acid hừu ca niệu vả dinh lượng acylcamitin mãu bệnh thiếu en/ym beta- kctothiolase phụ thuộc it vào thời diem làm xct nghiệm giai đoạn cấp hay giai doạn ôn định m ph thuc vo loi dt bin* -ãc ô4 ugc V Hl 55 KẾT LUẬN Qua hồi cứu dừ liệu 30 bệnh nhân từ tháng 04.2017 đến tháng 01/2023 Bệnh viện Nhi Trung ương, rút nhùng kềt luận sau: I Bệnh nhân thiếu enzym bcia-kctothiolasc tàng nồng độ C5:l (19'23) vã C5:OH (20/23) định lượng acylcarnitin máu theo kỳ thuật khối phị dơi (MS MS) Trong dó có 18/23 bệnh nhân lãng cá chi sỗ C5:l C5:OII; I bệnh nhân chi tăng C5:1: bệnh nhân tãng C5:OI I; bệnh nhân không tãng ca chi số Giá trị táng cao cua C5:l 0,94 pmol/L; thẩp lã 0,07 umol/L; giá trị trung binh 0,36 pniol/L; táng gấp lừ 1.4 - 10.4 lần giới hạn cùa giá trị bình thường (khống tham chiếu: 0.0-0,09 pmol/L) Giá trị tảng cao cùa C5:OH 1.56 pmol/L; thấp 0.17 pmol/L; giá trị trung binh 0.73 pmol/L; tăng gầp từ l.l - 3.47 lằn giới hạn giá trị binh thường (khoáng tham chiều: 0.0-0.45 pmol/L) Nồng độ C5:1 C5:OH da sổ bệnh nhân táng cao Bệnh nhãn thiếu enzym bcta-kctoihiolase làng đảo thái 2MAA (6/26) 2M3HB (23/26) TIG (13/26) nước tiêu phàn tích acid hữu niệu bang kỳ thuật sac ký ghép noi khói phó (GC7MS) Trong dó có 10/26 bệnh nhân tâng dồng thời 2M3HB TIG; 6/26 bệnh nhân tâng dồng thời 2MAA 2M3I IB; 7/26 bệnh nhân chi tàng 2M31 IB; 3/26 bệnh nhân chi tâng TIG; không cỏ bệnh nhân chi lảng 2MAA; tảng đồng thời 2MAA vã TIG tâng dồng thời ca ba chi số Trong ba acid hửu cư niệu dậc hiệu cho bệnh nhân thiểu enzym beta-ketothiolase 2M3HB tâng tiết lượng lớn hầu hết bệnh nhân mức dộ làng nhiều so với 2MAA, TIG (với 23 26 bệnh nhân tảng tiết 2M3HB đỏ cô tới 20 bệnh nhàn láng bi tit lng ln 2M3HB) -ãc ^H ô4 ugc V Hl TÀI LIÊU THAM KHÁO Fukao T Yamaguchi s Kano M et al Molecular cloning and sequence of the complementary DNA encoding human mitochondrial acctoacetylcocnzym A thiolase and study of the variant enzyms in cultured fibroblasts from patients with 3-kctothiolasc deficiency J Clin Invest Dec 1990;86(6):2086-92 doiJO.l 172/jcil 14946 Daum RS Lamm PH Marner OA Scrivcr CR A "new" disorder of isoleucin catabolism Lancet Dec 11 1971:2(7737): 1289-90 doi: 10.1016 SO 140-6736(71 )90605-2 Fukao T Beta-ketothiolase deficiency Orphanet encyclopedia, September 2001 Fukao T Zhang GX Sakura N Ct al The mitochondrial acctoacctyl-CoA thiolase (T2) deficiency in Japanese patients: urinary organic acid and blood acylcamitin profiles under stable conditions have subtle abnormalities in T2-deficient patients with some residual T2 activity J Inherit Metah Dis 2OO3:26(5):423-31 doi: 10.1023/a: 1025117226051 Mak CM Lee HC, Chan AY Lam CW Inborn errors of metabolism and expanded newborn screening: review and update Crit Rev Clin Lab Sci Nov 2013:50(6): 142-62 doi: 10.3109/10408363.2013.X47896 Nguyen KN, Abdclkrccm E, Colombo R Ct al Characterization and outcome of 41 patients with bcta-kctothiolasc deficiency: 10 years' experience of a medical center in northern Vietnam J Inherit Metab Dis May 2017;40(3):395-401 doi: 10.1007/s 10545-017-0026-6 Phúc HH Chần đốn bệnh rối loạn chuyến hóa bắm sinh kỹ thuật sấc ký khí khối phố Tạp chi nghiên cứu y học 2008:57(4):! - Nguyền Ngục Khánh (2017) Nghiên cửu kiêu hình, kiêu gen kềt qua diêu trị cua bênh nhàn thiêu en:ym Beta-ketothiolase Việt Nam Luận án tiên sỳ y học, Trường Đại học Y Hà Nội .^H «4 ugc V Hl Fukao T Scriver CR Kondo N Ilie clinical phenotype and outcome of mitochondrial acctoacctyl-CoA thiolase deficiency (beta-kctothiolasc or T2 deficiency) in 26 enzymatically proved and mutation-defined patients A/ớ/ Genet Metah Feb 2001 ;72(2): 109-14 doi: 10.1006/mgme.2000.3113 10 Fukao T, Sasai H Aoyama Y et al Recent advances in understanding betakctothiolasc (mitochondrial acctoacctyl-CoA thiolase T2) deficiency /1 him Genet Feb 2019;64(2):99- III doi: 10.1038/s 10038-018-0524-x 11 Fukao T Nguyen I IT Nguyen NT cl al A common mutation R2O8X, identified in Vietnamese patients with mitochondrial acetoacclyl-CoA thiolase (T2) deficiency Mol Genet Metab May 2010:100( I ):37-4l doi -.10.1016/j.ymgme.2O10.01.007 12 Zhang GX Fukao T Rolland MO Ct al Mitochondrial acctoacctyl-CoA thiolase (T2) deficiency: T2-deficient patients with "mild" mutation(s) were previously misinterpreted as normal by the coupled assay with tiglyl-CoA Pediatr Res Jul 2004;56( I ):60-4 doi: 10.1203/01 Pdr.0000129657.48122.52 13 Fukao T Maruyama s Ohura T, et al Three Japanese Patients with BctaKctothiolasc Deficiency Who Share a Mutation c.431A>C (HI44P) in AC ATI : Subtle Abnormality in Urinary Organic Acid Analysis and Blood Acylcarnitin Analysis Using Tandem Mass Spectrometry .HMD Rep 2012;3:107-15 doi:l0.1007/8904 2011 72 14 Thummlcr s Dupont D, Acquaviva c Fukao T de Ricaud D Different clinical presentation in siblings with mitochondrial acetoacctyl-CoA thiolase deficiency and identification of two novel mutations Tohoku J Exp Med Jan 201O:22O( I ):27-31 doi: 10.1620/tjem.220.27 15 Abdelkrecm E, Marijan RK Yamaguchi s Wiercnga RK Fukao T Mutation update on AC AT I variants associated with mitochondrial acctoacctyl-CoA thiolase (T2) deficiency 2019;40( 10): 1641 -1663 doi: 10.1OO2/humu.23831 -c ^H «4 ugc V Hl Hum Mulat Oct 16 Akella RR Aoyama Y Mori c Lingappa L Cariappa R Fukao T Metabolic encephalopathy in bcta-kctothiolasc deficiency: the first report from India Brain Dev Jun 2014:36(6):537-40 doi: 10.1016 j.braindcv.2013.07.007 17 Yang Y Jiang SH Liu s et al Two Infants With Beta-Ketothiolase Deficiency Identified by Newborn Screening in China Front Genet 2019; 10:451 doi: I0.3389/fgcne.2019.00451 18 Wojcik Ml I Wicrcnga KJ Rodan 1.11, cl al Bcta-Kctothiolasc Deficiency Presenting with Metabolic Stroke After a Normal Newborn Screen in Two Individuals .HMD Rep 2018:39:45-54 doi: 10.1007/8904 2017 45 19 Law CY Lam CW Ching CK et al NMR-based urinalysis for beta- kctothiolasc deficiency Clin Chun Acta Jan I 2015:438:222-5 doi:10.!016/j.cca.2014.08.04I 20 Sass JO Fukao T Mitchell Ci A Inborn Errors of Ketone Body Metabolism and Transport Journal of Inborn Errors of Metabolism and Screening 2018:6doi: 10.1177/2326409818771101 21 Griincrt sc Sass JO 2-methylacetoacetyl-coenzym A thiolase (beta- kctothiolasc) deficiency: one disease - two pathways Orphanet J Rare Dis Apr 28 2020:15( 1): 106 doi: 10.1186/s 13O23-O2O-01357-0 22 Sarafoglou K Matcrn D Rcdlingcr-Grossc K Ct al Siblings with mitochondrial acetoacetyl-CoA thiolase deficiency not identified by newborn screening Pediatrics Jul 2011:128( I ):c246-50 doi:10.1542 peds.2010-3918 23 Pandey R Singh PM Garg R Darlong V Punj J Perioperative concerns in a beta-ketothiolase-deficient child J Anesth Aug 2015;29(4):647 doi: 10.1OO7/SOO54O-014-1967-7 24 Buha$ D Bernard G Fukao T Dccaric JC Chouinard s Mitchell GA A treatable new cause of chorea: bcta-kctothiolasc deficiency Mov Disord Jul 2013:28(8): 1054-6 doi: lO.IOO2/mds.25538 -c -.ãfK ô4 Hgc V Hl H 25 Fukao T Mitchell G Sass JO Hori T Orii K Aoyama Y Ketone body metabolism and its defects J Inherit Metab Dis Jul 2014;37(4):54l-5l doi: 10.1007/s 10545-014-9704-9 26 Fukao T Beta-kctothiolase deficiency Orphanet encyclopedia September 2001; 27 Bennett MJ I tasking GP Smith MF Gray RG Middleton B Biochemical investigations on a patient with a defect in cytosolic acetoacctyl-CoA thiolase, associated with mental retardation ./ Inherit Metah Dis 1984:7(3): 125-8 doi: 10.1007/btb 1801770 28 Kayani R Botros s Moore p Beta-ketothiolasc deficiency and pregnancy, bit J Ohstet Anesth Jul 2O13:22(3):26O-I doi: 10.1016.j.ijoa.20l 3.03.006 29 Chace Dll Kalas TA Naylor E\v Use of tandem mass spectrometry for multianalytc screening of dried blood specimens from newborns Clin Chern Nov 2003:49( 11): 1797-817 doi: 10.1373/clinchem.2OO3.O22178 30 Kimura M Yamamoto T Yamaguchi s Automated metabolic profiling and interpretation of GC/MS data for organic acidemia screening: a personal computer-based system Tohoktt J Exp Med Aug 1999; 188(4):317-34 doi: 10.1620/tjcm 188.317 31 de Kremer RD de Boldini CD Kelley RI Civallcro GE [Mitochondrial 2-methylacctoacetyl-CoA thiolase deficiency in Argentina] Medicina (B Aires) !997;57(l):52-8 Dcficicncia de la 2-mctilacctoacctil-CoA tiolasa mitocondrial en Argentina 32 Griincrt sc Schmitt RN, Schlatter SM Ct al Clinical presentation and outcome in a scries of 32 patients with 2-methylacctoacctyl-coenzym A thiolase (MAT) deficiency Mo! Genet Metah Sep 2017; I22( I-2):67-75 doi: 10.1016/j.ymgmc.2017.06.012 33 Middleton B Bartlett K Romanos A Ct al 3-Ketothiolase deficiency Ear J Pediatr Apr 1986;144(6):586-9 doi: 10.1007/b100496042 -c ^H «4 ugc V Hl