Phân lập và tuyển chọn các dòng vi khuẩn có khả năng cố định đạm và chuyển hóa lân ở huyện cần giờ

Bộ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NGUYỄN TÁT THÀNH VIỆN KỸ THUẬT CÔNG NGHỆ CAO NTT NGÀNH CƠNG NGHỆ SINH HỌC NGUYEN TA I THANH KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐÈ TÀĨ: PHÂN LẬP VÀ TƯYÉN CHỌN CÁC DỊNG VI KHUẨN CĨ KHẢ NẤNG CĨ ĐỊNH ĐẠM VÀ CHUYỂN HÓA LÂN Ở HUYỆN CÀN GIỜ GVHD : ThS GIANG CẤM TÚ ThS NGUYỄN PHẠM TRÚC PHƯƠNG SVTH : Lư GIA HÂN MSSV : 1811544997 LỚP : 18DSH1A TP HCM, tháng năm 2021 Bộ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NGUYỄN TÁT THÀNH VIỆN KỸ THUẬT CÔNG NGHỆ CAO NTT NGÀNH CÔNG NGHỆ SINH HỌC NGUYEN TA I THANH KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐÈ TÀĨ: PHÂN LẬP VÀ TUYẺN CHỌN CÁC DỊNG VI KHUẨN CĨ KHẢ NẤNG CÓ ĐỊNH ĐẠM VÀ CHUYỂN HÓA LÂN Ở HUYỆN CÀN GIỜ GVHD : ThS GIANG CÁM TÚ ThS NGUYỀN PHẠM TRÚC PHƯƠNG SVTH : LU GIA HÂN MSSV : 1811544997 LỚP : 18DSH1A TP HCM, tháng 05 năm 2021 LỜI CẢM ƠN Tôi xin chân thành cảm ơn đến Ban lãnh Đạo Ngành thầy cô cùa Ngành Công nghệ Sinh học, Trường Đại học Nguyễn Tất Thành, dành tâm huyết giảng dạy, trang bị kiến thức cho tơi suốt khóa học Đặc biệt, xin gửi lời cảm ơn chân thành sâu sắc tới ThS Giang Cẩm Tú, Ngành Công nghệ Sinh học, Trường Đại học Nguyễn Tất Thành Th.s Nguyễn Phạm Trúc Phương, Trung tâm Nghiên cứu & Phát triển Nông nghiệp Công nghệ cao Tp HCM tận tình hướng dần, truyền đạt kiến thức kinh nghiệm mà tơi cịn thiếu sót suốt q trình thực đề tài Tôi gửi lời cảm ơn đến tập anh chị Phịng Nghiên cứu Cơng nghệ sinh học Thủy sản Trung tâm Nghiên cứu & Phát triển Nông nghiệp Công nghệ cao nhiệt tình hướng dần tơi suốt q trình thực đề tài Cuối cùng, xin gửi lời cảm ơn đến gia đình bạn bè ln bên cạnh động viên, chia sẻ khó khăn, tạo điều kiện giúp đờ tơi q trình học tập thực khóa luận Kính chúc cha mẹ, quý thầy cô, bạn bè dồi sức khoẻ công tác tốt Sinh viên (ký ghi rõ họ tên) Lư Gia Hân NHẬN XÉT CỦA GIẢNG VIÊN HƯỚNG DẪN 1/ Trình độ lý luận: 2/ Kỳ nghề nghiệp: 3/ Nội dung báo cáo: 4/ Hình thức báo cáo: Điểm: TP HCM, ngày thảng năm 2021 (Ký ghi rõ họ tên) 11 MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN i NHẬN XÉT CỦA GIẢNG VIÊN HƯỚNG DẦN ii MỤC LỤC iii DANH MỤC CÁC BẢNG BIÊU V DANH MỤC CÁC HÌNH ẢNH, sơ Đồ, BIÈU ĐÒ vi KÝ HIỆU CÁC CỤM TỪ VIẾT TẮT vii LỜI MỞ ĐÀU CHƯƠNG TỐNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Tống quan đất nhiễm mặn 1.1.1 Khái niệm đất nhiễm mặn 1.1.2 Tác hại đất nhiễm mặn 1.2 Sơ lược chu trình nitơ, trình cố định đạm tổng quan vi sinh vật cố định đạm 1.2.1 Sơ lược chu trình nitơ tự nhiên 1.2.2 Quá trình cố định đạm 1.2.3 Tổng quan vi sinh vật co định đạm 1.3 Các dạng lân đất, vòng tuần hồn lân vi sinh vật hịa tan lân 1.3.1 Các dạng lân đất 1.3.2 Vịng tuần hồn lân tự nhiên 1.4 Tình hình nghiên cứu ngồi nước 10 1.4.1 Tình hình nghiên cứu giới 10 1.4.2 Tình hình nghiên cứu nước 12 CHƯƠNG NỘI DƯNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CÚƯ 14 2.1 Nơi thực 14 iii 2.2 Nội dung nghiên cứu 14 2.2.1 Nội dung nghiên cứu 14 2.2.2 Đối tượng nghiên cứu 14 2.3 Dụng cụ, hóa chất, thiết bị 14 2.3.1 Dụng cụ 14 2.3.2 Thiết bị 14 2.3.3 Hóa chất 15 2.4 Phương pháp nghiên cứu 15 2.4.1 Lấy mầu 15 2.4.2 Phân lập 15 2.4.3 Xác định đặc điềmhình thái khuẩn lạc hình thái tế bào 16 2.4.4 Tuyển chọn dịng vi khuẩn chịu mặn có khả cố định đạm chuyển hóa lân 17 2.4.5 Xử lý thống kê 19 CHƯƠNG KÉT QUẢ VÀ THAO LUẬN 20 3.1 Kết phân lập 20 3.1.1 Đặc điếm khuấn lạc 21 3.1.2 Đặc điểm tế bàovi khuẩn 23 3.2 Tuyển chọn chủng vi khuẩn chịu mặn có khả cố định đạm, chuyển hóa lân 25 3.2.1 Các chủng vi khuẩn chịu mặn có khả chuyển hóa lân 25 3.2.2 Các chủng vi khuẩn chịu mặn có khả cố định đạm 27 KẾT LUẬN VÀ ĐÈ NGHỊ 30 PHỤ LỤC 31 TÀI LIỆU THAM KHẢO 43 IV DANH MỤC CÁC BẢNG BIÉU Bảng 1.1 Các loại đất nhiễm mặn (phân theo nồng độ) ảnh hưởng trồng Bảng 1.2 Các nhóm vi sinh vật cố định đạm chủ yếu tự nhiên Bảng 2.4 Thành phần dãy đường chuan Nessler 18 Bảng 3.1 Ký hiệu mầu, địa điểm thu thập mầu 20 Bảng 3.2 Đặc điểm hình thái khuẩn lạc 22 Bảng 3.3 Đặc điểm tế bào vi khuẩn quan sát kính hiển vi kết nhuộm Gram 23 Bảng 3.4 Kết số chuyển hóa lân (SI) trung bình dịng vi khuấn ngày 4, ngày 5, ngày 25 Bảng 3.5 Hàm lượng N - NH4 tống hợp chủng vi khuẩn 48 giờ, 72 (pg/ml) 27 V DANH MỤC CÁC HÌNH ẢNH, sơ ĐỊ, BIẾU ĐỊ Hình 1.1 Chu trình nitơ Hình 1.2 Vịng tuần hồn lân tự nhiên 10 Hình 3.1 Một số khuân lạc vi khuẩn phân lập đuọc mơi truờng TSB 22 Hình 3.2 Một số hình thái tế bào sinh vật kính hiển vi 25 Hình 3.4 Một số hình ảnh vịng chuyển hóa lân chủng vi khuẩn 27 Hình 3.3 Đường chuẩn hàm lượng NH4+ (pg/ml) 27 vi KÝ HIỆU CÁC CỤM TỪ VIÉT TẤT TỪ VIẾT TẤT GIẢI THÍCH Gam (-) Gram âm Gram (+) Gram dương TSB Tryptone Soya Broth EC Độ dẫn điện ESP Phần trăm Natri trao đổi SAR Tỉ lệ hấp thụ Natri vii LỜI MỞ ĐẦU Hiện nay, diện tích đất nơng nghiệp ngày xuống cấp thối hóa trầm trọng Nguyên nhân nhiễm mặn Dưới tác động biến đổi khí hậu, mực nước biển dâng lên, làm cho vấn đề nhiễm mặn có nguy trầm trọng hơn, đặc biệt khu vực ven biên đồng song Cửu Long, Nhà Bè, cần Giờ xã phía Nam huyện Bình Chánh Đất nhiễm mặn đất có nong độ muối cao bình thường, làm hạn chế nảy mầm hạt, ức chế “hạch rễ cây”, ảnh hưởng đến q trình chuyến hóa nitơ, hấp thu nước chất dinh dưỡng cầy Không vậy, đất nhiễm mặn cịn có the chưa vi sinh vật gây hại cho người Việc sử dụng phân hóa học mức, thuốc bảo vệ thực vật nông nghiệp làm giảm khả chống chịu trồng ngun nhân dẫn đến thối hóa đất Những tồn dư phân hóa học tích lũy hệ sinh thái, trở thành mối nguy đe dọa đến sức khỏe môi trường sống người Một giải pháp cho vấn đề mà nhà khoa học hướng đen sừ dụng chế phẩm phân vi sinh Hiện nay, số biện pháp áp dụng thủy lợi, lượng mưa đế rửa mặn, bón vơi, biện pháp vần chưa the làm tăng khả thích nghi tăng trưởng trồng lên vùng nhiễm mặn Một số nghiên cứu cho thấy, có nhiều chủng vi khuẩn Bacillus sp., Pseudomonas sp., Oceanobacillus sp., Vừgibacillus sp., Stanphylococcus sp., có khả chịu mặn, phát triển gần rễ cây, tăng trình thấm thấu cho hạn chế phát triển vi khuẩn có hại Các chủng vi khuẩn sản sinh chất kháng sinh mà sử dụng đe bảo vệ chống lại nấm hại, kích hoạt q trình sản sinh rễ tạo thành phần thúc đẩy hình thành hạch rề, tăng khả cố định đạm tăng sức sống cho Nhiều nghiên cứu cho thấy, nhiều loài vi khuẩn nội sinh sống đất vùng rễ khu vực bị nhiễm mặn có đặc tính có lợi cho trồng khả cố định đạm, chuyển hóa lân, sinh tổng hợp hormon tăng trưởng thưc vật nhằm tăng suất chất lượng sản phấm Mục tiêu đề tài: KẾT LUẬN VÀ ĐÈ NGHỊ Kết luận Từ mầu đất vùng rễ chuối thu số địa điểm thuộc huyện cần Giờ, TP Hồ Chí Minh đà phân lập 24 chủng vi khuấn khác mơi trường Ashby NBRIP, sau kiếm tra khả chịu mặn môi trường TSB bố sung °/oo NaCl cho kết tất 24 chủng phân lập có khả chịu mặn nồng độ %0 NaCl Trong đó, có 10 chủng có khả chuyển hóa lân, 14 chủng có khả cố định đạm, 05 chủng vừa có khả vừa hịa tan lân, vừa có khả cố định đạm gồm chủng Đl, Đ8, ĐI 1, ĐI4, ĐI7 Đặc biệt chủng Đ4 có khả tổng họp lượng đạm cao vượt bậc (5,02 pg/ml) so với chủng lại chủng ĐI chúng tiềm có khả chuyển hóa lân cố định đạm cao Đề nghị Đe xuất tiếp tục đo làm lượng đạm sau 96 để phát chủng có khả cố định đạm cao có thời gian tăng trưởng chậm, đồng thời đo tiêu phân giải lân sau ngày nuôi đe phát chủng vi khuẩn có hoạt tính có tốc độ sinh trưởng nhanh Tiến hành thực nghiên cứu với mầu đất vùng rễ đối tượng thực vật khác huyện cần Giờ đề đa dạng thêm chùng vi khuẩn có đặc tính chuyển hóa lân cố định đạm Định danh phân tử chủng Đ1, Đ17 có đặc tính hịa tan lân cao chủng Đ4 có khả cố định đạm cao 30 PHỤ LỤC Phụ lục 1: Thành phần số môi trường Bảng Thành phần mơi trường TSB Hóa chất Nồng độ (g/1) Trytone 17 g/1 Soya peptone 3g/l Sodium chloride (NaCl) g/1 Dipotassium hydrogen phosphate (K2HPO4) 2,5 g/1 Dextrose 2,5 g/ Agar 20 g/1 pH 7,3 ± 0,2 Bảng Thành phân mơi trường Ashby Hóa chất Nồng độ (g/1) Mannitol 20 g/L K2HPO4 0,2 g/1 MgSO4.7H2O 0,2 g/1 NaCl 0,2 g/1 K2SO4 0,1 g/1 CaCO3 g/1 Agar 20 g/1 pH 6,8-7,0 Bảng Thành phần môi trường NBRIP Hóa chất Nồng độ (g/I) Glucose 10g/l Ca3(PO4)2 g/1 MgCl2.6H2O g/1 MgSO4.7H2O 0,25 g/1 KC1 0,2 g/1 (NH4)2SO4 0,1 g/1 31 Agar 20 g/1 pH 7,0 Phụ lục 2: Ket quan sát hình dạng khuấn lạc hình dạng tế bào chủng vi khuân tuyến chọn STT Mà chủng Hình dạng khuân Hình dạng Hình ảnh Hình ảnh tế lạc tế bào khuấn lạc bào Khn lạc khơng Hình que đều, trắng đục, ĐI / bia cưa, lài ní Khuẩn lạc hình Hình que trịn, màu trắng Đ4 đục, khơng nhân, mơ Khuẩn lạc trịn, Hình que màu trắng đục, Đ8 A bìa ngun, khơng nhân Khuẩn lạc trịn, A Hình que màu trắng trong, Đ15 i mơ, bìa ngun 32 \f w % Phụ lục 3: Kết số chuyển hóa lân (SI) ngày 4, ngày Phụ lục 3.1 Kết khảo sát số chuyến hóa lân (SI) ngày STT Tên mầu Lần Lần Lần ĐI 4,11 3,8 3,98 Đ2 - - - Đ3 - - - Đ4 - - - Đ5 2,77 2,63 2,36 Đ6 - - - Đ7 - - - 33 Đ8 2,53 2,47 2,54 Đ9 - - - 10 Đ10 - - - 11 Đll 2,33 2,21 2,16 12 Đ12 2,03 2,1 2,2 13 Đ13 2,52 2,36 2,37 14 Đ14 2,35 2,61 2,51 15 Đ15 - - - 16 Đ16 - - - 17 Đ17 3,4 3,41 3,75 18 Đ18 - - - 19 Đ19 - - - 20 Đ20 2,54 2,31 2,48 21 Đ21 - - - 22 Đ22 - - - 23 Đ23 - - - 24 Đ24 2,12 2,16 2,13 Phụ lục 3.2 Ket khảo sát số chuyến hóa lân (SI) ngày STT Tên mầu Lần Lần Lần ĐI 4,18 4,23 4,14 Đ2 - - - Đ3 - - - Đ4 - - - 34 Đ5 2,65 2,4 2,77 Đ6 - - - Đ7 - - - Đ8 2,61 2,74 2,57 Đ9 - - - 10 Đ10 - - - 11 Đll 2,21 2,42 2,25 12 Đ12 2,36 2,25 2,18 13 Đ13 2,48 2,64 2,77 14 Đ14 2,95 2,61 2,53 15 Đ15 - - - 16 Đ16 - - - 17 Đ17 3,64 3,66 3,93 18 Đ18 - - - 19 Đ19 - - - 20 Đ20 2,61 2,53 2,75 21 Đ21 - - - 22 Đ22 - - - 23 Đ23 - - - 24 Đ24 2,43 2,45 2,41 Phụ lục Kết hàm lượng N-NH4 48 giờ, 72 (gg/ml) Phụ lục 3.1 Ket hàm hàm lượng N-NH4+ 48 STT Tên mầu Lần 35 Lần Lần ĐI 3,71 3,67 3,68 Đ2 0,52 0,53 0,61 Đ3 - - - Đ4 4,97 4,96 5,02 Đ5 - - - Đ6 1,79 1,65 1,58 Đ7 1,54 1,46 1,52 Đ8 4,96 5,02 5,09 Đ9 - - - 10 Đ10 - - - 11 Đll 1,23 1,12 1,28 12 Đ12 - - - 13 Đ13 - - - 14 Đ14 1,39 1,26 1,17 15 Đ15 4,02 3,84 3,86 16 Đ16 1,34 1,43 1,28 17 Đ17 3,11 2,71 2,62 18 Đ18 - - - 19 Đ19 1,43 1,59 1,35 20 Đ20 - - - 21 Đ21 3,52 3,65 3,58 22 Đ22 2,95 3,04 3,08 23 Đ23 - - - 24 Đ24 - - - 36 Phụ lục 3.2 Ket hàm lượng N-NH4+ 72 STT Tên mầu Lần Lần Lần ĐI 4,19 4,11 4,22 Đ2 1,05 0,86 2,15 Đ3 - - - Đ4 5,69 5,61 5,82 Đ5 - - - Đ6 2,15 2,11 1,94 Đ7 1,92 2,05 2,07 Đ8 5,63 5,59 5,73 Đ9 - - - 10 Đ10 - - - 11 Đll 1,51 1,43 1,48 12 Đ12 - - - 13 Đ13 - - - 14 Đ14 1,59 1,54 1,62 15 Đ15 4,65 4,63 4,75 16 Đ16 1,79 1,85 1,87 17 Đ17 3,01 3,06 3,05 18 Đ18 - - - 19 Đ19 1,83 1,87 1,89 20 Đ20 - - - 21 Đ21 4,11 4,09 4,05 22 Đ22 3,47 3,52 3,54 37 23 Đ23 - - - 24 Đ24 - - - Phụ lục Kết xử lý thống kê vi sinh vật hòa tan lân ngày 4, ngày 5, ngày Chỉ số chuyển hóa lân (SI) trung bình Mau _ STT Ngày Ngày Ngày Đ1 3,96a±0.1557 4,18a± 0.0451 3,88a± 0.0361 Đ5 2,59c ± 0.2084 2,61cd± 0.1888 2,63cd ± 0.0757 Đ8 2,51c± 0.0379 2,64cd ± 0.0889 2,82c± 0.0889 Đ11 2,23cde ± 0.0874 2,29d ± 0.1115 2,28e± 0.0306 Đ12 2,1 le± 0.0854 2,26d ± 0.0907 2,26e± 0.0833 Đ13 2,42cde ± 0.0896 2,63cd ± 0.1453 2,82c±0.1762 Đ14 2,49cd ± 0.1311 2,7C± 0.2230 2,76cd ± 0.0924 Đ17 3,52b± 0.1992 3,74b± 0.1620 3,3 lb± 0.0557 Đ20 2,44cde ± 0.1193 2,63cd ± 0.1114 2,78c±0.1210 10 Đ24 2,14de± 0.0208 2,43cd ± 0.0200 2,5 lde± 0.0208 ss Source nghiệm thúc Error Total DF 20 29 s = 0.1279 R-Sq = 96.85% 10.0655 0.3273 10.3927 MS 1.1184 0.0164 F 68.35 R-Sq(adj) p 0.000 = 95.43% Individual 95% cis For Mean Based on Pooled StDev Level Đ1 Đ11 Đ12 Đ13 Đ14 Đ17 Đ20 Đ24 Đ5 Đ8 N 3 3 3 3 3 Mean 3.9633 2.2333 2.1100 2.4167 2.4900 3.5200 2.4433 2.1367 2.5867 2.5133 StDev 0.1557 0.0874 0.0854 0.0896 0.1311 0.1992 0.1193 0.0208 0.2084 0.0379 - (-* ) (-* ) (-* ) (-* ) ( *-) ( *-) (-*( *-) 2.40 3.00 38 3.60 4.20 Pooled StDev 0.1279 Grouping Information Using Tukey Method nghiệm thức Đl Đ17 Đ5 Đ8 Đ14 Đ20 Đ13 Đll Đ24 Đ12 Mean 3.9633 3.5200 2.5867 2.5133 2.4900 2.4433 2.4167 2.2333 2.1367 2.1100 N 3 3 3 3 3 Grouping A B c c c D c D E c D E c D E D E E Means 1ihat not share a letter are significantly different Source DF ss MS F p nghiệm thức: 10.8456 1.2051 68.43 0.000 Error 20 0.3522 0.0176 Total 29 11.1978 R-Sq = 96.85% s = 0.1327 Level Đ1 Đ11 Đ12 Đ13 Đ14 Đ17 Đ20 Đ24 Đ5 Đ8 Mean 4.1833 2.2933 2.2633 2.6300 2.6967 3.7433 2.6300 2.4300 2.6067 2.6400 N 3 3 3 3 3 StDev 0.0451 0.1115 0.0907 0.1453 0.2230 0.1620 0.1114 0.0200 0.1888 0.0889 R-Sq(adj) 95.44% Individual 95% cis For Mean Based on Pooled StDev - + - - -1 - I + (-* ) ( *-) ( *-) -) (—*-) ( *-) (-* ) (—*— ) - + + 2.40 3.00 - + - -1 3.60 4.20 Pooled StDev = 0.1327 Grouping Information Using Tukey Method nghiệm thúc Đ1 Đ17 Đ14 Đ8 Đ13 Đ20 Đ5 Đ24 Đ11 Đ12 N 3 3 3 3 3 Mean 4.1833 3.7433 2.6967 2.6400 2.6300 2.6300 2.6067 2.4300 2.2933 2.2633 Grouping A B c c D c D c D c D c D D D Means that not share a letter are significantly different Source DF ss MS F p nghiệm thức 6.30968 0.70108 87.05 0.000 Error 20 0.16107 0.00805 Total 29 6.47075 s = 0.08974 R-Sq = 97.51% R-Sq(adj) = 96.39% 39 Level Đl Đll Đ12 Đ13 Đ14 Đ17 Đ20 Đ24 Đ5 Đ8 Mean 3.8800 2.2767 2.2633 2.8167 2.7567 3.3100 2.7833 2.5133 2.6267 2.8200 N 3 3 3 3 3 StDev 0.0361 0.0306 0.0833 0.1762 0.0924 0.0557 0.1210 0.0208 0.0757 0.0889 Individual 95% cis For Mean Based on Pooled StDev - + - -+— - +— ( *-) ( *-) (-*-) (-*-) (-*-) (-*-) (-*-) (-*-) (— *-) - +— - + - - 4-— 4-— 2.50 3.00 3.50 4.00 Pooled StDev = 0.0897 Grouping Information Using Tukey Method nghiệm thức ĐI Đ17 Đ8 Đ13 Đ20 Đ14 Đ5 Đ24 Đll Đ12 N 3 3 3 3 3 Mean 3.8800 3.3100 2.8200 2.8167 2.7833 2.7567 2.6267 2.5133 2.2767 2.2633 Grouping A B c c c c D c D D E E E Means that not share a letter are significantly different Phụ lục kết xừ lý thống kê vi sinh vật cố định đạm 48 giờ, 72 Hàm lượng N - NH4+ (gg/ml) STT Mau — 48 72 Đ1 3,69bc ± 0.0208 4,17c± 0.0569 Đ2 0,55g± 0.0493 1,02'±0.1473 Đ4 4,98a± 0.0321 5,71a± 0.1060 Đ6 l,67e± 0.1069 2,07f ± 0.1115 Đ7 l,51ef± 0.0416 2,0 lf8± 0.0814 Đ8 5,02a± 0.0651 3,65a± 0.0721 Đ11 l,21f± 0.0819 l,47h± 0.0404 40 Đ14 1,27* ±0.1106 l,58h± 0.0404 Đ15 3,91b± 0.0987 4,68b ± 0.0643 10 Đ16 l,35f± 0.0755 1,848± 0.0416 11 Đ17 2,81d± 0.2608 3,04e ± 0.0265 12 Đ19 l,46ef± 0.1222 l,84fg± 0.0306 13 Đ21 3,58c± 0.0651 4,08c ± 0.0306 14 Đ22 3,02d ± 0.0666 3,51d± 0.0361 MS 6.5604 0.0105 Source nghiệm thức Error Total DF 13 28 41 s = 0.1026 R-Sq = 99.66% Level Đ1 Đ11 Đ14 Đ15 Đ16 Đ17 Đ19 Đ2 Đ21 Đ22 Đ4 Đ6 Đ7 Đ8 Mean 3.6867 1.2100 1.2733 3.9067 1.3500 2.8133 1.4567 0.5533 3.5833 3.0233 4.9833 1.6733 1.5067 5.0233 N 3 3 3 3 3 3 3 ss 85.2852 0.2946 85.5798 StDev 0.0208 0.0819 0.1106 0.0987 0.0755 0.2608 0.1222 0.0493 0.0651 0.0666 0.0321 0.1069 0.0416 0.0651 F 623.53 R-Sq(adj) = 99.50% Individual 95% cis For Mean Based on Pooled StDev -1 - —+ - -I-. - + c (*) (*) (*) (*) (*) (*) (*) (*) (*) (*) (*) (*) (*) 3.6 1.2 Pooled StDev = 0.1026 Grouping Information Using Tukey Method nghiệm thúc Đ8 Đ4 Đ15 Đ1 Đ21 Đ22 Đ17 Đ6 Đ7 Đ19 Đ16 Đ14 Đ11 Đ2 N 3 3 3 3 3 3 3 Mean 5.0233 4.9833 3.9067 3.6867 3.5833 3.0233 2.8133 1.6733 1.5067 1.4567 1.3500 1.2733 1.2100 0.5533 p 0.000 Grouping A A B B c c D D E E F E F F F F G 41 4.8 Means that not share a letter are significantly different Source DF ss MS F p nghiệm thức 13 98.05543 7.54273 1438.01 0.000 Error 28 0.14687 0.00525 Total 41 98.20230 s = 0.07242 Level Đ1 Đ11 Đ14 Đ15 Đ16 Đ17 Đ19 Đ2 Đ21 Đ22 Đ4 Đ6 Đ7 Đ8 R-Sq = 99.85% Mean 4.1733 1.4733 1.5833 4.6767 1.8367 3.0400 1.8633 1.0200 4.0833 3.5100 5.7067 2.0667 2.0133 5.6500 N 3 3 3 3 3 3 3 R-Sq(adj) = 99.78% Individual 95% cis For Mean Based on Pooled StDev + - -1-— - + - - + StDev 0.0569 0.0404 0.0404 0.0643 0.0416 0.0265 0.0306 0.1473 0.0306 0.0361 0.1060 0.1115 0.0814 0.0721 (* (* (* *) *) *) *) (* *) *) (*) (* *) (* + - -1-— + - + - 1.5 3.0 4.5 6.0 Pooled StDev = 0.0724 Grouping Information Using Tukey Method nghiệm thúc Đ4 Đ8 Đ15 ĐI Đ21 Đ22 Đ17 Đ6 Đ7 Đ19 Đ16 Đ14 Đll Đ2 N 3 3 3 3 3 3 3 Mean 5.7067 5.6500 4.6767 4.1733 4.0833 3.5100 3.0400 2.0667 2.0133 1.8633 1.8367 1.5833 1.4733 1.0200 Grouping A A B c c D E F F G F G G H H I Means that not share a letter are significantly different 42 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt Hồng Thị Thái Hịa (2011), Giảo trình phán bón Đại học Nơng lâm Huế, NXB Nông Nghiệp Lê Văn Nhương, Nguyền Văn Cách, Quản Lê Hà, Trần Liên Hà, Nguyễn Thanh Hằng, Hoàng Đình Hịa, Nguyễn Lan Hương, Ngơ Trang Nhung, Khuất Hữu Thanh, Nguyền Quang Thảo, Phạm Thị Thùy, Phạm Văn Toàn (2009), Tập Công nghệ vi sinh, Nxb Giáo dục Việt Nam, Cơ sở công nghệ sinh học Nguyễn Như Hà (2005), Giảo trình: Thơ nhưỡng nơng hóa, NXB Hà Nội Nguyễn Thị cẩm Tú (2012), PHẢN LẬP VI KHUÂN cộ ĐỊNH ĐẠM VÀ HÒA TAN LÂN TỪ ĐÂT VÙNG RẺ Ở ĐẮT NÂU ĐỎ TỈNH BÀ RỊA VỮNG TÀU, sinh viên, Trường Đại học cần Thơ Nguyền Thị Thu Hằng Nguyễn Thị Thủy (2015), TUYÊN CHỌN VIKHUẢN AZOTOBACRE CĨ KHA NĂNG CƠ ĐỊNH NITO VÀ SINH TÔNG HOP IAA Th.s, Trường Đại học Lâm nghiệp Trần Văn Chính (2010), Giảo trình thơ nhường học, NXB Đại học Nơng nghiệp Hà Nội 10 VÕ Đình Quang (1999), Trạng thải lân đất Việt Nam, NXB Nông nghiệp Hà Nội Tiếng Anh 11 M Dworkin, s Falknow, Eugene, Rosenberg (2006), The Prokaryotes, a handbook on the Biology of Bacteria 12 R.c Foster, A.D Rovira, T.w Cock (1983), Ultrastructure of the Root and Soil Interface, The American Phytopathological Society Published, St Paul, MN, USA 13 Hartmann Baldani (2006), The GenusAzospirillum, Prokayote, 5: 115-140 14 Jan Kotuby-Amacher, Rich Koenig, Boyd Kitchen (2000), SALINITY AND PLANT TOLERANCE 15 L Busman, J Lamb, G Randall, G Rehm, M Schmitt (2002), Phosphorus in the Agricultural Environment: The nature of Phosphorus in soils Minneapolis The nature of Phosphorus in soils, University of Minnesota 16 Nachiket s Dighe, Dhirendra Shukla, Ramesh s Kalkotwar, Ravindra B Laware, Sanjay B Bhawar4, Ravindra w Gaikwad (2010), Nitrogenase Enzyme: A Review, Der Pharmacia Sinica, 2: 77-84 17 Ohtake Norikuni, Momoko Suzuki, Toru Fujiwara Yoshihiko Takahashi, Mitsuo Chino, Taro Ikarashi, Takuji Ohyama (2019), Physiol Pl 96,101-110 Ohtake 1996, Physiologia Plantarum, 96 43 18 Onyia, Chiadikobi Centre, Anyanwu, Chukwudi Uzoma (20133), Comparative study on solubilization of tri-calcium phosphate (TCP) by phosphate solubilizing fungi (PSF) isolated from Nsukka pepper plant rhizosphere and roof free soil, Journal of Yeast and Fungal Research, 4(5): 52-57 19 J L Sanders, L s Murphy, Anne Noble, R J Melgar, James Perkins (2012), Improving Phosphorus use Efficiency with Polymer Technology, Procedia Engineering, 46: 178-184 20 J.p Verma, J Yadav, N.T Tiwari, Lavakush, V Singh (2010), Impact of Plant Growth Promoting Rhizobacteria on Crop Production, international Journal of Agricultural Research, 5: 954-983 Internet Cty Nam Khoa Bộ thuốc nhuộm Gram, website: nkbiotek com.vn, truy cập: ngày 17 tháng năm 2022 Đông Nam Lab website: http://www.dongnamlab.com/publics/product/910/files/Trypto-casein soy brothBK046HA.pdf, truy cập: ngày 17 tháng năm 2022 Lê Nguyên (2020), chu trình Nitơ tự nhiên, website: https://tincay.com/chu-trinh-nito-trong-tu-nhien/ , truy cập: ngày 10 tháng 09 năm 2021 44