Nghiên cứu ảnh hưởng của chất điều hòa sinh trưởng đến sự phát sinh cơ quan của lan thiên nga ( cycnoches chlorochiron) giai đoạn invitro

TRUONG DAI HOC HUNG VUONG KHOA KHOA HQC Ty’ NHIEN TRUONG NGQC TUAN NGHIÊN CỨ UẢNH HƯỚNG CỦA CHAT DIEU HOA SINH TRƯỞNG ĐÉN SV PHÁT SINH CƠ QUAN CỦA LAN THIEN NGA (Cycnoches chlorochiron)GIAI DOAN IN VITRO KHOA LUAN TOT NGHIEP DAI HOC Ngành: Sư phạm Sinh học PHÚ THỌ, 2019 TRƯỜNG ĐẠI HỌC HÙNG VƯƠNG TRUONG DAI HOC HUNG VUONG KHOA KHOA HQC TU’ NHIEN TRUONG NGỌC TUÁN NGHIEN GU UANH HUONG QUA CHAT DIEU HOA SINHTRUONG DEN SU’ PHAT SINH CO QUAN CUA LAN THIEN NGA (Cycnoches chlorochiron)GIAI DOA N IN VITRO KHÓA LUAN TOT NGHIEP DAI HOC Ngành: Sư phạm Sinh học Giáo viên hướ ng dẫn: TS Trần Trung Kiên PHÚ THỌ, 2019 TRƯỜNG ĐẠI HỌC HÙNG VƯƠNG LOI CAM ON Trong thời gian nghiên cứu hồn thành khóa luận, em xin gửi lời cảm ơn chân thành nhát tới thầy giáo hướng dẫn TS Trần Trung Kiên hướng dẫn tận tình, quan tâm động viên em hồn thành khóa luận Em xin bày tỏ lời cảm ơn sâu sắc đến thầy (cô) Trung tâm nghiên cứu Công nghệ sinh học trường Đại học Hùng Vương toàn thể thầy cô giáo Khoa Khoahọc Tự nhiên, Trường Đại học Hùng Vương tạo điều kiện giúp đỡ để em thực hồn thành khóa luận Cuối cùng, em xin gửi lời cảm ơn đến gia đình, bạn bè, người bên cạnh động viên, giúp đỡ em suốt trình thực hồn thành khóa luận tốt nghiệp Em xin chân thành cảm ơn! Phú Thọ, ngày tháng 05 năm 2019 Sinh viên Trương Ngọc Tuấn TRƯỜNG ĐẠI HỌC HÙNG VƯƠNG LOI CAM DOAN Tôi xin cam đoan số liệu kết nghiên cứu khóa luận tơi, kết nghiên cứu trình bày khóa luận trung thực Mọi giúp đỡ cho việc thực khóa luận cảm ơn thơng tin trích dẫn khóa luận rõ nguồn gốc phép cơng bó Phú Thọ, ngày tháng 05 năm 2019 Sinh viên Trương Ngọc Tuin TRƯỜNG ĐẠI HỌC HÙNG VƯƠNG DANH MUC VIET TAT BAP CT : : Công thức ĐC: MS Benzylamino purinne Đối chứng : Môi trường Murashige & Skoog, MT : Môi trường NAA: Naphthtalen acetic acid TRƯỜNG ĐẠI HỌC HÙNG VƯƠNG DANH MUC BANG Bang 3.1 Anh hưở ng BAP đế n phat trién than, aia cay in vitro lan Thién nga (Cycnoches ChlorOchirOn) c.ccccccceceseseeseeveseseteneseseeseeeeeseseenenenes 23 Ba ng 3.2 Ảnh hưở ng aia BAP dén sinh trưở ng phát ¿» vo lan Thién nga (Cycnoches chlorochiron) Bả ng 3.3 Ảnh hưở ng BAP đế n hệ số nhân, dic dié m chd i aia cay in vitro lan Thién nga (Cycnoches chlorochiron) Bá ng 3.4 Ảnh hưở ng chất điều hòa sinh trưởng NAA dén sinh trưở ng phat trén aia cy in vitro lan Thién nga (Cycnoches chlorochiron) 129 Bang 3.5 Ảnh hưở ng aia NAA dén gy phat sinh lao cay in vitro lan Thién nga (Cycnoches chlorochiron) Bả ng 3.6 Ảnh hưở ng NAA đến hệ số nhân chỗ ¡ - :-:5555:cz55+ 33 Ba ng 3.7 Ti Ệ sống sót TRƯỜNG ĐẠI HỌC HÙNG VƯƠNG DANH MUC HiNH Hình 3.1 Ảnh hưởng BAP đến sr phat trén than,é ata cay in vitro lan Thién nga (Cycnoches chlorochiron) Hình 3.2 Ảnh hưởng BAP đến sr phát trỀn thân - 24 Hình 3.3 Ảnh hưởng BAP đến sy phát sinh rễ -.::55555::c222x 25 Hình 3.4 Ảnh hưở ng BAP đến sy phát sinh Hình 3.5 Ảnh hưởng BAP đến lệ số nhân chồ ¡ - -55::::5+ 28 Hình 3.6 Ảnh hưởng NAA đế n sinh trưở ng phát trŠ n thân, tễ in viro lan Thiên nga (Cyenoches chlorochiron) Hình 3.7 Ảnh hưởng NAA đế n sinh trưở ng phát trỀ n thân Hình 3.8 Ảnh hưởng NAA đến sr phát sinh IỄ . :555scccc2 31 Hình 3.9 Ảnh hưởng NAA đến phát sinh ssc: 32 Hình 3.10 Ảnh hưởng NAA đến lệ số nhân chồ ¡ - :-:55552:: 33 Hình 3.11 RỄ sau ] tuần -.cccc 222tr 35 MUC LUC PHAN 1: MO DAU Tinh cip thét aia dé tai Mục tiêu đề tài Ý nghĩa khoa học ý nghĩa thực tế n 3.1 Ý nghĩa khoa học 3.2 Ý nghĩa thực LỄ, Phần II: NỘI DUNG CHƯƠNG TONG QUAN VAN ĐÈ NGHIÊN CỨU 1.1 Gi thệu chung Thiên nga (Cycnoches ) 1.1.1 Wị trí phân loại phân ló 1.12 Đặc điểm hình thái 1.1.3.Lan Thién nga ( Cycnoches chlorochiron) 1.2 Kĩ thuật nhân gid ng bing nudi ciy mé - É bào thực vật 1.2.1 Khái nệm 1.2.2 lịch sử phát trền aia kỹ thuật nhân gó ng ni aty mé - € bào thực vậ 1.2.3 Cơ sở khoa học qìa ni qấy mơ - Ế bào thực \ật 1.2.4 Các giai đoạn k thuậ t nhân ging in vitro 1.2.5 Các điều kện nuôi diy in vitro 1.2.6 Môi trường nuôi dấy in vitro 1.2.7 Tầm quan trọ ng dìa phương pháp ni cấy mơ - É bào thực \ật 1.3 Tình hình nghiên cứu lan Thiên nga 1.3.1 Tình hình nghiên du thỄ gửi 1.3.2 Tình hình nghiên qdứu nước 1.4 Các chút điều hòa sinh trưở ng 1.4.1 BAP ( 6- Benzylaminopurine, 1.4.2, NAA ( Naphthalene Acetic Acid) 1.5 Giá thể lan Thiên nga (Cycnoches chlorochiron) Chương ĐÓI TƯỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Đối tượ ng phạm vi nghiên aru 2.2 Nội dung nghiên cữu 2.3 Phương pháp nghiên u 2.3.1 Phương pháp luậ 2.3.2 Phương pháp bố trí thí nghiệ m 2.3.3 Phương pháp thu thập sơ lệu 2.3.4 Phương pháp xử lý lệu CHƯƠNG III: KÉT QUÁ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 3.1 Anh hud ng aia BAP dén gr phat sinh hinh thai cay in vitro lan Thién nga (Cycnoches chlorochiron) 3.1.1, Ảnh hưởng dìa BAP đến 23 phat sinh than, ré aia céy in vitro lan Thién nga ( Cycnoches chlorochiron) 3.1.2 Ảnh hưởng aia BAP đến sinh trưởng phat trién aia lé cay in vitro lan Thién nga (Cycnoches chlorochiron) 3.1.3 Ảnh hưởng qìa chát điều hịa sinh trưởng BAP đến phát sinh chỗi aia cay in vitro lan Thién nga (Cycnoches chlorochiron) 3.2 Anh hưởng chat diéu hoa sinh truéng NAA dén sinh trưởng phát trỀn in vio lan Thiên nga ( Cycnoches chlorochiron) 3.2.1 Ảnh hưởng da clát điều hòa sinh trưởng NAA đến sinh trưởng phát trền thân, rỄ dìa in vitro lan Thiên nga ( Cycnoches chlorochiron) 3.2.2 Ảnh hưởng qìa clát điều hịa sinh trưởng NAA đến phat sinh la aia in vitro lan Thiên nga (Cyenocheschlorochiron) TRƯỜNG ĐẠI HỌC HÙNG VƯƠNG 3.2.3 Anh huéng aia NAA dén hệ 86 nhan choi, đặc diém chdi aia cay in vitro lan Thién nga (Cycnoches chlorochiron) 3.3 Ảnh hưởng giá thể đến ti chlorochiron) cay sống sót lan Thiên nga (Cycnoches KET LUAN VA KIEN NGH Kết luận KẾn nghị TAI LIEU THAM KHAO TRƯỜNG ĐẠI HỌC HÙNG VƯƠNG 25 phat sinh chồi, đóng vai trị quan trọng giai đoạn phát triển thân nhân nhanh chdi trình ni ¿z vio Qua bảng 3.1, hình 3.1 hình 3.2 tơi nhận thấy sinh trưởng phát thân tốt nhấtở BAP Img/lít với chu CT3 nồng độ cao than trung bình đạt 34,2 mm, dat 5,68g Khi tăng nồng độ BAP lên đế n 2mg/lít xuống 0,5mgífít sinh trưởng chều cao thân trọng lượng gảm xuống Lin lugt 1a 30,36 mm 4,02 g 28,8 mm, 3,41g Tat ci déu cao so với sinh trưởng chu cao thân tương đố¡ CT ¡ chứng Hình 3.3.Ảnh hưởng BAP đến - thi nghiệm dù không phát sinh rễ bé auxin tỉ lệ rễ đạt 100% Tuy nhiên nhận thấy CT3 với nồng độ BAP Img/lít có số lượng rễ phát sinh vượt trội hẳn CT lại cụ thẻ là 5.2 rễ Khi giảm nồng độ BAP xuống 0,5mg/lít số rễ giảm xuống cịn 4,2 rễ.Khi tăng lênnồng độ 1,5mg/lít 2mg/lít số rễ giảm xuống đáng kể 3,6 rễ Ở CT ĐC số rễ đạt 3.4 rễ thấp BAP cao CTI CT2 chút so với số rễ tạo nồng độ 26 3.1.2 Ảnh hướng BAP đến sinh trưởng phát triển cay in vitro lan Thiên nga (Cycnoches chlorochiron) - BAP la chat điều hịa sinh trưởng có ảnh hưởng lớn đến sinh trưởng phát triển thân Sau thời gian tuần nuôi cấy thu kết sau 'Bả ng 3.2 Ảnh hưở ng BAP đế n sinh trưở ng phát trỂ n củ a in vitro lan Thién nga (Cycnoches chlorochiron) Công thức Số (lá) Chều dài (mm) ĐC 4,8 + 0,07 40,36 + 1,26 CTI 5,6 + 0,12 48,87 + 1,42 CT2 5,8+ 0,11 44,04 + 1,25 CT3 6,6 + 0,09 49,98 + 2,56 CT4 5.4+0,14 46,91 + 1,38 mm _— 48 | I 58 56 54 mSốlá N w ˆ wa † 66 0+ ĐC r cm r cra r CT3 x cra Hình 3.4 Ảnh hưở ng BAP đến sr phát sinh Qua bảng 3.2 hình 3.4 tơi nhận thấy : Ở giai đoạn twin nuôi dy bồ sung BAP với nồng độ khác có sr phát trỀn khác nhau, lầu TRƯỜNG ĐẠI HỌC HÙNG VƯƠNG 27 phát tương đồ ¡ tố t.Ở CT3 có phát triển vượt trội so với CT khác cụ thể CT3 đạt tới 6,6 lá, chiều dài đạt 49.98 mm cao nhiều so với CT DC chi la 4,8 14, chiều dài 40,36 mm Ở nồng độ khác số tạo chênh lệch không nhiều, tăng nồng độ BAP lên tới I,5mg/lít 2mg/lít CT1 CT2 5,6 5,8 chiều dài đạt 48,87 44,04 mm, giảm nộng độ BAP xuống 0,5mg/lit số tạo 5,4 chiều dài 46,91 mm Các CT bổ sung BAP cho số nhiều so với CT ĐC 3.1.3 Ảnh hưởng chất điều hòa sinh trưởng BAP đến phát sinh chỗi in vifro lan Thiên nga (Cycnoches chlorochiron) Để tìm mơi nồng độ BAP thích hợp dé nhân nhanh chòi phát triển chiều cao chồi tốt nhát, tơi tiến hành thí nghiệm mi cấy MT MS có bổ sung 100g khoai tây/lít, 100ml nước dừa/lít, 30g saccarozơilít, 6g agar/lit, 0,5g than hoạt tính/lít, pH 5,6 với nồng độ BAP theo CT nêu Sau tiến hành đánh giá CT dé lựa chọn với nồng độ thích hợp cay in vitro lan Thién nga (Cycnoches chlorochiron) Sau tuần nuôi cấy thu kết sau: Ba ng 3.3 Anh hué ng BAP đến hệ số nhân, đặc điểm chồi in vitro lan Thién nga (Cycnoches chlorochiron) CT tuần tuần Đặc điểm chồi ĐC 1,74+0,08 2,8740,09 CTI 2,45+0,11 3,62+0,12_ | Chồi xanh, đều, nhỏ CT2 2,78+0,15 3,91+0,17_ | Chỗi xanh, đều, nhỏ CT3 3,47+0,12 6,15£0,13 | Chéi xanh, đều, mập CT4 2,23+0,09 3,52£0,11 | Chéi xanh,thưa, nhỏ Chôi xanh, thưa, nhỏ TRUONG BAI HOC HUNG VUONG 28 Hình 3.5 Ảnh hưở ng BAP đến hệ số nhân chồ¡ Chất điều hịa sinh trưởng BAP có tác dụng mạnh mẽ việc tạo chỗi giai đoạn ứr vio Dựa vào bảng 3.3 hình 3.5 tơi nhận thấy nồng độ khác có khác biệt rõ rệt số lượng chdi hình thái chdi cụ thể CT3 cho hệ số nhân chồi cao 6.15, chồi xanh, mọc mập map sau tuần nuôi cấy, CT2 cho hệ số nhân chỗi cao thứ với 3.91 chỗi sau tuần, chỗi xanh, mọc đều, nhỏ Khi tăng nộng độ BAP lên 2mg/lít hay xuống 0,5mg/lít số lượng chồi tạo tương đương 3,62 3,5 chồi sau tuần, chồi xanh, mọc thưa nhỏ Ở CT ĐC khơng bỗ sung BAP nên hệ số nhân chi thấp đạt 2,87 chổi sau tuần, chồi mọc thưa nhỏ 3.2 Ảnh hưởng chất điều hòa sinh trưởng NAA đến sinh trưởng phát triển céy in vitro lan Thién nga ( Cycnoches chlorochiron) 3.2.1 Ảnh hưởng chất điều hòa sinh trwéng NAA dén sw sinh trưởng phát triển thân, rễ in vitro lan Thién nga ( Cycnoches chlorochiron) Đề tìm nịng độ thích hợp nhát chất điều hịa sinh trưởng NAA ảnh hưởng đến sinh trưở ng phát trền ¿z viro lan Thiên nga tiến hành ni cấy mơi trường MS đừa/lt, có bồ sung 100g khoai tây/lít, 100ml nước 30g saccarozo/lit, 6g agar/lit, 0.5g than hoat tinh/lit, pH 5,6 wi cac 29 mồng độ NAA_ khác Sau tiễn hành đánh giá xem với MT MS rồng độ chất điều hịa sinh trưởng NAA có tác dụng mạnh đền sr sinh trué ng, phat trén ala cay in vitro lan Thién nga (Cycnoches chlorochiron) Bang 3.4 Anh hưở ng chất điều hòa sinh trưởng NAA đế n sinh trưở ng phát củ a in vitro lan Thién nga (Cycnoches chlorochiron) Công | ChỀucao| Số rễ thức | thân(mm) Chều dài | Tỉ rarễ | Khối lượng rễ (mm) (%) tươi (g) DC 25,7541,32 | 3.440,14) 24.91+1,52 100% 1,84+0,57 CTI 33,8140,91 | 4/2+0,17| 29.29+1,29 100% 2,84+0,62 CT2 32,36+1,54 | 4,64+0,22| 34,35+1,47 100% 4,74+0,45 CT3 37,2941,27| 33,58+41,36 100% 6,24+0,37 CT4 46,76+1,21 | 6,6+0,19) 29,23+1,22 100% 10,41+0,41 5+0,1 Hình 3.6 Ảnh hưở ng NAA đế n sinh trưở ng phát trể n thân, rễ cay in vitro lan Thién nga (Cycnoches chlorochiron) TRƯỜNG ĐẠI HỌC HÙNG VƯƠNG 30 mm 50 46.76 45 40 35 30 25 3381 37.29 32:36 25.75 # chiều cao A thân 20 15 10 ĐC CT1 + T T T c2 CT3 CT4 Hình 3.7 Ảnh hưởng NAA đến sinh trưởng phát thân Chất điều hịa sinh trưởng NAA có tác dụng kích thích sinh trưởng giãn tế bào nên có tác dụng đến sinh trưởng phát triển thân giai doan in vitro Dựa vào bảng 3.3 hình 3.5, hình 3.6 tơi nhận thay cac CT bổ sung NAA sinh trưởng phát triển tốt, nhiên với nồng độ khác có thay đổi rõ rệt chiều cao thân, cụ thể CT4 với nồng độ NAA bổ sung 0,5mg/lít có khối lượng tươi đạt tới 10,41g chiều cao thân 46,76 mm cao vượt trội so với công thức khác Ở CT3 chiều cao thân đạt 37,29 mm cao thứ CT, nồng độ NAA tăng lên cao từ 1,5mg/lít đến 2mg/lít chiều cao thân CT tương đương 32,36 33,8I mm Ở CT đối chứng không bồ sung NAA nên chiều cao thân đạt 27,75 mm, khối lượng tươi 1,84g nhỏ nhiều so với CT bồ sung NAA TRƯỜNG ĐẠI HỌC HÙNG VƯƠNG 31 Hình 3.8 Ảnh hưởng aia NAA đến phát sinh rễ - Trong giai doan in vitro chất điều hịa sinh trưởng NAA có tác dụng mạnh mẽ đến trình phát sinh rễ - Qua số liệu tảng 3.3 hình 3.6, hình 3.7 tơi nhận thay cac CT duge bé sung NAA déu sinh trưởng phát triển trương đối tốt, nhiên với nồng độ NAA khác phát sinh rễ CT có thay đổi, cụ thể CT4 bổ sung NAA với nồng độ 0,5mg/lít cho tỉ lệ rễ cao 6,6 rễ, nồng độ NAA tăng dan tir Img/lit đến 2mg/lít tỉ lệ rễ giảm dần rễ 4,2 rễ Ở CT đối chứng số rễ tạo 3.4 rễ thấp nhiều so với CT bồ sung NAA 3.2.2 Ảnh hướng chất điều hòa sinh trưởng NAA đến phát sinh in vitro lan Thiên nga (Cyenocheschlorochiron) Chất điều hịa sinh trưởng NAA có tác dụng quan trọng trình sinh trưởng phát triển giai đoạn nudi cay in vitro Sau tuần nuôi cấy thu kết sau: 32 Bang 3.5 Anh hué ng cia NAA dén gr phát sinh in vitro lan Thién nga (Cycnoches chlorochiron) Công thire | ĐC CTI CT2 CT3 CT4 Số đá) 5,620,17 5,840.15 6+0,11 6,240.16 6,4+0,13 Chề u dài (mm) 40,3641,26 43,8941,18 39,92+1,25 46,13+1,32 50,5+1,2 Hình 3.9 Ảnh hưở ng NAA đế n sr phát sinh Dựa vào số lệu bing 3.4 hình 3.9 tơi nhận thíy CT bổ sung NAA có sr sinh trưởng phát tương đói Ốt, nhiên số cơng thức có thay đồi rõ tệt tùy thuộc vào mồng độ NAA Đối với CT4 bổ sung NAA với rồng độ 0,5mg/lít cho số cao 6,4 cao vượt trội so với CT hi, nồng độ NAA tăng dần từ Img/lít đến 2mg/lít s TRƯỜNG ĐẠI HỌC HÙNG VƯƠNG 33 tạo giảm dần, cụ thể làở CT3 số tạo 6,2 lá,ở CT2 lá,ở CTI 5,8 lá.Ở CT BC sé ạo 5,8 thấp hẳn so với CT bổ sung NAA 3.2.3 Ảnh hưởng NAA đến hệ số nhân chồi, đặc điểm chồi in vitro lan Thién nga (Cycnoches chlorochiron) Ba ng 3.6 Ảnh hưở ng NAA đế n hệ số nhân chồ¡ CT tuần 8tuần Đặc điểm chỗ¡ ĐC 1,74+0.08 2,87+40,09 Choi xanh, thua, nho CTI 2,32+0,17 3,56+0,18 Choi xanh, thua, nho CT2 2,67+0,11 3,73+0,12 Choi xanh, dé u, nhỏ CT3 2,79+0,13 3,85+0,15 Clôi xanh, đều, nhỏ CT4 3,27+0,09 5,1140,11 Choi xanh, dé u, mip 5.11 356 | —282 267 3.85 2.18 3.27 >° —12 373 m4tuần m8tuan oĐC C11 CI2 CT3 CI4 Hình 3.10 Ảnh hưở ng NAA đế n hệ số nhân chồi Dựa vào số lệu bảng 3.6 hình 3.10 nhận thấy CT bổ sung NAA sinh trưởng phát tương đối ốt,ở CT4 cho hệ số nhân chồ¡ TRƯỜNG ĐẠI HỌC HÙNG VƯƠNG 34 cao 5,11 sau § trần ni dây chồ¡, chồ¡ mọc đều, xanh, nệ p Ở CT3 CT2 CTI nồng độ NAA tăng dần hệ số nhân chdi giim din từ 3,85 chồ¡ gia CT3 đến 3,56 chồiở CTI, chồi mọc thưa, màu xanh, nhỏ Ở CT ĐC cho Ê chồi tấp nhát 2,87 chồi, chồi mọc thưa, xanh, nhỏ khơng bồ sung NAA Như sau trần ni díy thi cay in vitro lan Thién nga (Cycnoches ehlorochiron) sinh trưởng phát tốt môi trường MS bồ sung thêm 100ml nước đừa/lít, 100g khoai tây/lít, 30g saccarozơilít, 6g agar/lít, 0.5g than haat tính/lít, pH 5,6 chất điều hòa sinh trưởng BAP mồng độ Img/lit hoaic NAA 0,5mg/lit 3.3 Ảnh hưởng giá thể đến tỉ lệ số ng st lan Thiên nga (Cyenoches chlorochiron) Sau thời gian nuôi dấy đạt đủ tiêu rễ, thân, đưa ngồi mơi trường để huấn luyện Để lựa chọn giá thể ót cho tến hành trồng thử nghệm 30 CT với thành phần khác sau: + CTI: 100% don trắng { ngâm sát khuâ n) + CT2: 100% mụn sơ dừa ( ngâm sát khuẩn) + CT3: 50% mụn sơ dừa + 50% đá perlit (ngâm nước vôi qua đêm ) + CT4: 70% mụn sơ dừa + 30% đá perlit (ngâm nước vôi qua đêm) Sau ngày thu kết nhưa sau: Bá ng Tỉ Ệ số ng sót Cơng thức Tỉ Ệ số ng sót (%) Số chết CTI 86,67% CT2 90% CT3 83,33% CT4 100% TRUONG BAI HOC HUNG VUONG 36 KET LUAN VA KIEN NGHI Kết luận Khi tến hành nghiên cứu nuôi dy cay in vitro lan Thién nga trén méi trường MS bồ sung thêm 100g khoai tây/lít, 100ml nước dừa/lít, 30g saccarozơilít, 6g agar/lít, 0,5g than hoạt tính/Iít, pH 5,6 chất điều hịa sinh trưởng BAP NAA với mồng độ khác Tôi thu kết qưả sau: Đối với BAP mồng độ Iml/lít cho tác dụng đt đến sinh trưởng phát trén cua cay in vitro lan Thiên nga ( Cyenoches chlorochiron) đặc có tác dung kéo dai thân, phát trền lá, kích thích phát sinh chồi Ht so với mồng độ lại Chiu cao thân đạt 342mm, số tạo 6,6 với chều dài tương đó¡ 48,9§mm, lệ số nhân chỗ¡ 6,15 Ở rồng độ BAP Iml/Iít khả phát sinh rễ cao so với công thức bỏ sung BAP rồng độ khác Đối với NAA rồng độ 0,5ml/lít cho tác dụng mạ nh nát đển sinh trưởng phát aia i cay in vitro lan Thién nga ( Cycnoches chlorochiron) cụ thể Ệ lễ cao 29,23mm 6,6 1, khối lượng tươi nặng nlá t 10,41g, chu nhan chdi 5,11 Su phát thân rồng dai rễ độ đạt kết cao so với nồng độ NAA hịi Đối với giá thể khiở CT4 với 70% dớn tắng 30% mụn sơ dừa ngâm nước vôi qua đêm cho ti Ệ sống xót cao nhát 100% Kiến nghị TẾp tục nghiên cứu nồng độ chát điều hòa sinh trưởng BAP,, NAA nghiên cứu công thức phối hợp gữa BAP với NAA giai đoạn khác trình nhân gié ng in vitro ata loai lan TRUONG BAI HOC HUNG VUONG 37 TAI LIEU THAM KHAO [1] Bùi Danh Chung (2015) “Nghiên cứu nhân gống thio Kén (Dendrobium litujflorum)” Luận vizo văn Thạc sĩ lồi lan Hoang khoa Nơng nghiệp trường Học vện Nông nghệp VỆt Nam [2] Tần Hợp (1990), Phong lan Vệt Nam, Nhà xuất tản kỹ thuật Hà Nộ ¡ [3] Dương Đức Huyến (2007), Thuc vat chi Viiét Nam Tập 9, Ho Lan - Orchidaceae Juus (Chi thién nga— (Flora of Vietnam) Cycnoches chlorochiron) Khoa hoc va ky thuat [4] Vũ Kim Dung, Nguyễn Văn Việt Bùi Văn Thắng (2016) “Nhân gố ng lan Hoang thio Y thio ba mau (Dendrobium gratiosissimum reichenb.f) bang ki thujt nudi cay in vitro” Tap chi Khoa học công nghệ lâm nghệp, số 6-2016 [5] Vũ Thanh Sắc, Nguyễn Thị Thu Huyền, Lê Thị Lý (2012),” Nghiên cứu nhn giéng in vitro lan Hoang thảo trầm trắng (Ð anosmum var.albay’, Tap chí khoa học cơng nghệ, Đại học Thái Nguyên, 93(05), tr 131 -135 [6].Nguyễn Quang Thạch, Nguyễn Thị Lý Anh vàNguyễn Thị Phương Thao, (2005), Giáo trình công nghệ sinh học nông nghiệp, NXB NongNghiép [7] Nguyễn Thanh Tùng cộ ng (2010) mỏng € bảo nhân gống “Áp dụngphương pháp nuôi cá y lát in vitro cay lan Hoang Thio (Dendrobium aduncum)” Tap chi Cong nghé sinh hoc [8] Nguyễn Văn Vinh, Nguyễn Hữu Lễ (2009), Ảnh hưởng chất điều hòa sinh trưởng anosmum, thực vật lên phát sinh chồi iễ Tạp chí khoa học cơng ngiệ, ập 47, số Phong lan gä lạt Ð 5, 2009 Tr 99 - 10 [9] Va Van Vu, Nguyén Mong Hing, Lé Hong Diép, (2005), Công nghệ sinh học tế bào, tập 2, NXB Giáo dục, Hà Nội Tài liệu tham khảo nước [10] Stephen R Batchelor “Catasetum and cycnoches — Culture influenced by Growth Cycle” [11] Ned Nash “ Catasetum and cycnoches — Problems Commonly Encountered” TRUONG BAI HOC HUNG VUONG 38 [12] Shivani Vyas, Satyakam Guha (2009), “Rapid regeneration of plants of Dendrobium lituiflorum Lindl (Orchidaceae) by using banana extract” Horticulturae Scientia 121 (2009): 32-37 [13] M Maridass R Mahesh, G.Raju, A.Benniamin and K.Muthuchelian vitro Propagation of Dendrobium nanum through rhizome bud Jn culture International Journal of Biological Technology (2010):1(2):50-54 [14] Tuhuteru S (2012), “Growth and development of in vitro culture media with several coco D anosmum orchid on Agrologia, Vol 1, No 1, April 2012, hal.1-12 TRƯỜNG ĐẠI HỌC HÙNG VƯƠNG 39 Phú Thọ, Ý kiến giảng viên hướng dẫn ngày tháng 05 năm 2019 Sinh viên thực (Kí ghỉ rõ họ tên) (Kí ghi rõ họ tên) TS Trần Trung Kiên Trương Ngọc Tuấn TRƯỜNG ĐẠI HỌC HÙNG VƯƠNG