BO KHOA HOC VA CONG NGHE
CHUONG TRINH KHOA HQC CONG NGHE CAP NHÀ NƯỚC MASO KC - 06
BAO CAO NGHIEN CUU KHOA HOC VA PHAT TRIEN CONG NGHE
DE TAL
NGHIEN CUU UNG DUNG CONG NGHE CHONG
NAM MOC AP DUNG TRONG SAN XUAT VA LUU
THONG CAC LOAI GIAY VAI, GIAY DA XUAT KHAU
Trang 2Cơ quan chủ trì: Công ty Da giầy Hà
DANH SÁCH NHỮNG NGƯỜI THỰC HIỆN
Chủ nhiệm đề tải: Ks Trần Danh Đáng Các cắn bộ thực hiện dé tai: lo 2 7 8 x Vii Anh Tuan Ong Thé Nam Tạ Việt Thành Nguyễn Đức Chuyên Hồ Đoài Dương Văn Sáng Hoàng Văn An Bùi Duy Cam Phạm Văn Ty 10 Nguyễn Minh Thái 11.Dao Thị Lương - Kỹ sư Hoá - Kỹ sư Hoá - Kỹ sư Hoá - Kỹ sư Hoá - Kỹ sư Hoá - Kỹ sư Kinh tế - Kỹ sư Chế tạo máy - Tiến sỹ Hoá - Tiến sỹ vi sinh - Tiến sỹ vi sinh - Tiến sỹ vi sinh
- Công ty Da giầy Hà Nội - Công ty Da giầy Hà Nội - Công ty Da giầy Hà Nội - Công ty Da giầy Hà Nội - Công ty Da giầy Hà Nội - Công ty Da giầy Hà Nội - Công ty Da giầy Hà Nội
Trang 3TOM TAT DE TAI KC.06.16.CN
Công nghệ phòng chống nấm mốc được ứng dụng ngày càng nhiễu trong các
lĩnh vực khác nhau của KTXH, KHKT như các ngành về công nghệ thực phẩm, công
nghệ vật liệu trong đó có ngành Da giầy Công nghệ phòng chống nấm mốc được Công ty Da giầy Hà nội nghiên cứu và áp dụng vào thực tiễn sản xuất các sản phẩm giầy dép xuất khẩu Trong báo cáo tổng kết KH &KT, Đề tài đã thực hiện các phần
công việc chính như sau:
1 Phân lập, định tên các chủng loại nấm mốc cho các sản phẩm gidy vải và giầy da tại Công ty Da giầy Hà nội, phân lập các chủng loại nắm mốc trước và sau khi áp dụng các công nghệ phòng chống nấm mốc, để tài đã phân lập được 117 chủng loại nấm mốc trên các vị trí sản xuất, trên giây trong lưu kho và lưu thông
2 Nghiên cứu tổng quan các loại hoá chất có thể sử dụng để tiêu điệt các loại
nấm mốc trên cơ sở tìm hiểu qua phân lập nấm mốc, qua các patent tài liệu, qua các dữ liệu của nhà cung cấp
3 Nghiên cứu, xác định được công nghệ chống ẩm áp dụng trong lưu kho và lưu thông các sản phẩm giầy
4 Xác lập được quy trình công nghệ chống nấm mốc cho các sản phẩm giầy
vải, trên cơ sở xác định được các cơng nghệ sử dụng hố chất, sử dụng các chất chống ẩm, sử dụng các thiết bị phụ trợ
3 Xác lập được quy trình công nghệ chống nấm mốc cho các sản phẩm giây da
6 Lap đặt bổ sung một số thiết bị tự động hoá nhằm nâng cao hiệu quả kiểm sốt của cơng nghệ phòng chống nấm mốc, đề tài được trang bị các thiết bị tự động
hoá phụ trợ trên dây chuyền sản xuất, như thiết bị bỗi tráng, thiết bị gia nhiệt, điều khiển nhiệt độ tự động, thiết bị điều khiển băng chuyển bằng motor biến tần, thiết bị chiếu tỉa UV
Trang 4MUCLUC
DANH SÁCH NHỮNG NGƯỜI THỰC HIỆN
TOM TAT DE TAI MỞ ĐẦU Chương L PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU VÀ TÓM TẮT CÁC NOI DUNG ĐÃ THỰC HIỆN 11 Cách tiếp cận 12 Phương pháp nghiên cứu 1.3 Kỹ thuật sử dụng
14 Tóm tắt các nội dung đã thực hiện
Chương I TONG QUAN NHUNG NGHIEN CUU VE CHONG NAM MOC
DUGC UNG DUNG Ở TRONG NƯỚC VÀ QUỐC TẾ TL1 Tổng quan những nghiên cứu nước ngoài
T2 Tổng quan những nghiên cứu trong nước
Chương HE TÔNG HỢP NỘI DUNG VA KET QUA NGHIEN CUU
IIL1 Phan lp, định tên các chủng loại nắm mốc trên các sản phẩm giầy vải, giầy
đa tại Công ty Da giây Hà Nội
T2 Các hoá chất sử dụng và công nghệ liên quan
TIL3 Phân lập, định tên các chủng loại nắm mốc trên các sản phẩm giầy vải, giầy đa đã áp dụng công nghệ chồng nấm mốc
TI.4 Các công nghệ chống mốc cho các sản phẩm giầy vải, giầy da trong quá trình
sản xuất, bảo quản và lưu thông
THL.4.1 Nghiên cứu ứng dụng công nghệ xử lý độ Âm đỗ phòng chồng nắm mắc
trong sản xuất và lưu thông các loại sẵn phẩm giây vải, giây da xuất khẩu
TIL4.2 Kỹ thuật sấy, công nghệ và thiết bị phụ trợi
TH.4.3 Quy trình chẳng mắc cho các sản phẩm giầy vải, giẫy da trong quá trình
sản xuất
TH.4.4, Quy trình chống mốc cho các sản phẩm giây vải, giấy da trong quá trình
bảo quản và lưu thông
HLS Téng hợp các kết quả nghiên cứu:
Chương IV KẾT LUẬN VÀ KIÊN NGHỊ
LỜI CẢM ƠN
PHỤ LỤC
Trang 5Chú giải ký hiệu viết tắt, thuật ngữ QTCN KHKT ĐHKHTN ĐHQGHN Quy trình công nghệ Khoa học và kỹ thuật
Đại học Khoa học Tự nhiên
Trang 6MO DAU
Về vấn đề " mốc" đang là nạn địch xảy ra ở mội nơi, mọi thời điểm, ảnh hưởng hàng hoá và thiệt hại lớn về kinh tế, làm biệt là hành hoá phục vụ xuất khẩu Đã có
nhiều đề tài về chống mốc được nghiên cứu, nhưng đối tượng là sản phẩm giầy dép rất lớn đến chất lượng , mỹ quan các lo: giảm tối đa uy tín của nhà sản xuất
trong quá trình sản xuất, lưu thông trong điều kện khí hậu nước ta và đặc biệt khi xuất
khẩu sang các vùng khí hậu khác nhau trên thế giới thì chưa được nghiên cứu đề cập
đến
Do dé dé tai được đặt ra nhằm nghiên cứu và tìm ra các giải pháp có thể áp dụng trong việc sản xuất và lưu thông các loại giầy vải và giầy da xuất khẩu là hết sức cần thiết Theo báo cáo từ các cơ sở sản xuất giầy đép, các sản phẩm giầy xuất khẩu chỉ lưu kho được trong khoảng thời gian từ 1-2 tháng là bất đầu mốc và cũng có nhiều khách hàng khiếu nại về việc giầy đép bị mốc và phạt tiền rất nặng các nhà cung cấp, gây thiệt hại lớn về kinh tế và ảnh hưởng đến uy tín, chất lượng giầy đép xuất khẩu
Trường hợp khách hing PRIMARK Vương quốc Anh phat 18 000 USD đơn hàng ầy da moeasin CP-01, sản xuất tại Công ty Da giấy Hà Nội do da mặt bị mốc Một số Công ty khác như Thượng Đình, Thuy Khuê cũng không tránh khỏi giầy dép sản xuất ra bị mốc
Trong ngành Da giầy những biện pháp đang áp dụng để diệt nấm mốc như
dang mét sé lagi hoá chất, sử dụng thiết bị chiếu tia tử ngoại để diệt khuẩn (như đã
trình bày ở trên) đang được áp dụng, song hiệu quả của việc diệt trừ nấm mốc cũng
như ý nghĩa về mặt khoa học, kinh tế còn thấp và bị nhiều hạn chế Do vậy, vấn đề đặt
ra là nghỉ cứu công nghệ chống nấm mốc áp dụng trong sản xuất và lưu thông các
Trang 7Chương T
PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU VẢ TÓM TẮT CÁC NỘI DUNGĐÃ THỰC HIỆN
1.1 Cách tiếp cận
~ Dựa vào các patent đã công bố liên quan đến các nội dung nghiên cứu của đề tài - Những kiến thức và kinh nghiệm rút ra từ các đợt đào tạo, thăm quan khảo sát, trao đổi kinh nghiệm trong và ngoài nước
- Kế thừa những kết quả nghiên cứu có liên quan
- Những yêu cầu từ thực tế sản xuất và của khách hàng nhập khẩu
1.2 Phương pháp nghiên cứu
Để thực hiện để tài, chúng tôi đã tập trung vào giải quyết những van dé mau chốt có tính chất quyết định đến công nghệ chống mốc:
- Về sinh học: xác định, phân lập các chủng loại nấm mốc gây hại trên các sản
giầy vải, giầy da, xác định các đặc tính sinh lý, sinh hoá của chúng qua đó sử
% =
dụng tối đa các biện pháp sinh thái để bảo quản và phòng chống nấm mị
- VỀ hoá học: xác định các hoá chất chống nấm mốc có khả năng kìm hãm và tiêu điệt các loại nắm mốc gây hại sử dụng trong quá trình sản xuất, phương pháp pha chế và áp dụng trong đây chuyển sản xuất
* Sử dụng hỗn hợp 2-(thiocianometylthio) benzothiazole (TCMTB) và 3-iođo- 2-propynyl-N-butylearbamate (IPBC) [5] véi một số phụ gia như polyoxyetylene triglyceride, polyalkylene glycor ether, xathan gum va dipropylene glycol duéi dang
nấm trên mặt da, tăng hiệu quả
sữa làm thuốc điệt nấm để tăng hiệu quả diệt nấm
khi sử dụng keo
* Sử dụng đẫn xuất phenol phối với benzimidazol, imidazol hoặc morpoline
làm chất điệt nắm trên da thành phẩm, tăng thời gian bảo quản trong kho
* Sử dụng dẫn xuất hoặc muối của phenol dé tan trong nước phối hợp trong keo rất tiện lợi trong sản xuất và chống mốc ngay tại keo cho sản phẩm
- VỀ lý học: sử dụng tia cực tím để tiêu điệt nắm mốc trước khi lưu kho và lưu chuyển qua tiêu dùng, xuất khẩu
- Xác định các yêu tổ ảnh hưởng đến công nghệ phòng chống nấm mắc, từ đó xây dựng quy trình công nghệ áp dụng trên dây chuyển sản xuất hiện có tại Công ty
- Thiết kế, chế tạo thiết bị chiếu tỉa cực tím, thiết bị phun tẩm, thiết bị bồi tráng keo, thiết bị
1.3 Kỹ thuật đã sử dụng
Những kỹ thuật đã sử dụng trong quá trình thực hiện đề tài
tút âm
Trang 8hoặc kích thích khả năng sinh trưởng của chúng Nấm mốc nói chung là các vi sinh
vật nhân thật, được chia ra thành hai chủng loại chính là nắm men (yeast) và nấm sợi
(ñlamentous fungi) là những vi sinh vật có cơ thể nhỏ bé, cấu tạo đơn giản, chúng được xếp vào giới nguyên sinh theo hệ thống phân loại 5 của R.H.Whittaker Nói
là một tản (thallus), có thể là đơn hoặc đa bào, đa số dang sợi gọi là nấm hay khuẩn tỉ (hypha), có loại có màu, có loại không
chung nấm thuộc một giới riêng biệt Cơ
màu Một số loại tiết sắc tố và môi trường nuôi cấy gây ra loang mốc làm thay đổi
màu sắc của vật phẩm
~ Về mặt sinh học: Phân lập các chủng loại nắm mốc trên cơ sở thực hiện các
biện pháp kỹ thuật sau:
* Xác định hình thái và cấu trúc của tế bào nấm bằng phương pháp vỡ tế bào, ly tâm và quan sát đưới kính hiển vi từ đó xác định được thành phần phần trăm
ịnh cấu trúc thành nhân tế bào bằng kỹ thuật chiếu tia
protein, lipit, polisaceait, xe tử ngoại
* Xác định chu kỳ sinh sản, xác định các điều kiện thuận lợi giúp nấm mốc sinh sản, các thông số kỹ thuật như độ ẩm không khí, độ ẩm nguyên vật liệu, nhiệt độ
của môi trường, độ PH của môi trường nấm mốc phát triển (nhất là đối với nấm lên
men)
* Chứng mình sự sinh trưởng hay “chết” của nắm mốc bằng các dung dich hoá
chất FeCl; 0,5%, dung địch K;Fe(CN); với nồng độ thích hợp, trong quá trình kiểm
tra theo đối kết quả của các biện pháp chống mốc
~_ VỀ mặt hoá học: Những kỹ thuật đã sử dụng đối với các hoá chất diệt nấm:
* Xác định các thông số kỹ thuật phủ hợp: nồng độ, độ hoà tan, độ phân tán,
liều lượng sử dụng độ PH, thời gian tác dụng, nhiệt độ phân huỷ trong các công đoạn
sử dụng hoá chất cho vào keo, phun tẩm chau chuốt
* Xác định các đơn pha chế keo, pha chế dung dịch phun tim cho các loại
nguyên vật liệu giầy vải, giầy đa
~ VỀ cúc thiẾt bị phụ trợ :
# Xác định thông số phủ hợp cho các thiết bị tráng keo như: độ dầy, mỏng của lớp, keo, nhiệt độ lò sấy, tốc độ bồi tráng, nhiệt độ làm khô, áp lực sấy khô hơi nước
* Xác định các thông số kỹ thuật phù hợp đồ với thiết bị làm khô giầy trong quá trình
gò ráp, làm khô keo, nguyên vật liêu: nhiệt độ, tốc độ sấy
* Xác định thông số kỹ thuật phủ hợp đối với thiết bị chiếu tia UV: nhiệt độ chiếu tia, công suất của bóng chiếu tia, thời gian chiếu tia
1.4 Tóm tất các nội dung đã thực
Trang 9
- Tình trạng các công nghệ sử dụng chất chống mốc cho nguyên liệu trong sản
xuất giầy, các vấn đề về sử dụng keo, chất chống mốc trong các loại keo dung địch nước;
- Công nghệ sản xuất như sấy, bồi tráng có đạt các tiêu chuẩn cần đạt về yếu tố sinh thái phòng chống nấm mốc không;
- Đánh
xem có chống ẩm, thơng thống không? Từ đó rút ra các kết luận chính xác;
cách lưu kho, bảo quản giầy thành phẩm trong các doanh nghiệp - Quá trình nghiên cứu đã đưa ra hai công nghệ phòng chống nấm mốc cho giầy vải và giầy đa:
1.4.1, Quy trinh công nghệ chẳng mốc dựa vào các biện pháp sinh hạc:
- Nghiên cứu, phân lập các chủng loại nấm mốc;
- Nghiên cứu xác định rõ những chỗ hiễể
- Nghiên cứu các đặc điểm sinh thái "khắc nghiệt" mà nấm mốc không thể phát trong cơ thể vi nấm;
triển được;
- Triệt phá nguồn cung cấp thức ăn của nắm mốc
- Thiết lập quy trình công nghệ cho các phương pháp sinh thái phòng chống
nắm mốc;
- Thiết kế chế tạo các thiết bị phụ trợ dùng trong các biện pháp trên;
1.4.2 Quy trình công nghệ dựa vào các biện pháp hoá học bao gầm các quy trình nhỏ sau: - Trên cơ sở nghiên cứu các đặc tính sinh học tế bào của nấm mốc, tìm ra các hoá chất - Quy trình công nghệ sử dụng hoá chất gây hại lên vách tế bào nắm mốc, các lệt nắm phủ hợp: chỉ tiêu kỹ thuật của hoá chất, độ thẩm thấu của mỗi loại hoá chất lên vách tế bào,
hiệu quả sử dụng của các quy trình công nghệ loại này
- Quy trình cơng nghệ sử dụng hố chất gây hại lên các thành khác của tế bào
nấm mốc, như là vón thể keo của tế bào chất, làm mắt nước của nguyên sinh chất như
chất dedoxyl guanidin acetat (điođin), gây ra các thảm các "thảm hoạ" đối với nấm
mốc
- Quy trình chống mốc bằng hoá chất gây hại lên ty thể của tế bào nắm, nơi mà các enzym " làm việc" để cung cấp năng lượng sống cho tế bào, ít nhất cũng thiết lập được cơ chế dùng hoá chất để phá huỷ hoặc ngăn cản hoạt động của hai loại enzym trên ty thể: các enzym tham gia vào quá trình hô hấp, các enzym tham gia vào quá
Trang 10Chương TT
TONG QUAN NHUNG NGHIEN CUU VE CHONG NẮM MÓC ĐƯỢC ỨNG DỤNG Ở TRONG NƯỚC VÀ QUỐC TẾ
TL Tổng quan những nghiên cứu nước ngoài
Vấn dé chống mốc cho các sản phẩm ngành đa giẩy từ lâu đã được các nước có
nền công nghiệp da giầy phát triển hết sức quan tâm, có rất nhiều công trình được nghiên cứu chống lại sự phá hoại của nấm mốc đối với sản phẩm nghành da giầy đã Việ ật lý phụ trợ như công cụ sấy, phụ tẩm hoá chất, máy làm lạnh, máy chiếu tia tử được công bố trên thế gi dùng hoá chất, các phương pháp sinh học, các biện pháp ngoại để diệt khuẩn đã và đang được áp dụng như là một công cụ hữu hiệu nhất để
ngăn chặn sự phá hoại của nắm mốc
Việc dùng các hoá chất để tiêu điệt nắm mốc cũng được nghiên cứu và công bố
vào năm 1999 Trong công trình nghiên cứu này, tác giả sử dụng hỗn họp 2- (thiocianometylthio) benzothiazole (TCMTB) và 3-iodo-2-propynyi-N-butylcarbamate ([EBC) véi mét sé phy gia nhu polyoxyetylene triglyceride polyalkylene glycol ether, xanthan
gum va dipropylene glycol duéi dang sita lam thuée diét nim Hén hop duge thêm
một mol polyoxyetylene triglyeeride để trộn IPBC và TCMTB sau đó thêm dung địch chứa xanthan gum trong dipropylene glycol Thành phần hỗn hợp này rất phủ hợp cho việc bảo quản trong công đoạn thuộc xanh cũng như trong công đoạn thuộc da Công
trình nghiên cứu này cũng nói lên rằng thành phần các hoá chất trên đặc biệt hữu hiệu
trong công nghiệp sản xuất da thuộc, ngoài ra còn có thể áp dụng trong sơn nước, keo
nước và có thể nói rằng hỗn hợp này điệt mốc cũng rất quả đối với một số lĩnh
vực khác như ngăn chặn sự phá hoại của nấm mốc trên các loại nguyên vật liệu và
thành phẩm là vải sợi, keo đán, mỹ phẩm Có thể đây là một cách dùng hoá chất mới và áp dụng được trên nhiều công đoạn trong sản xuất giầy như sản xuất keo đán, phun tấm vải sợi, và đặc biệt là trong xử lý mốc ở đa hay cho vào chất chau chuốt giầy thành phẩm Các công ng| hồng mốc ứng dụng trong quá trình sản xuất, lưu kho và lưu
thông các loại giầy vải, giầy da bằng phương pháp sinh học cũng được một số công trình nghiên cứu và công bố vào những năm của thập kỷ 90 thế kỷ XX, năm 1998 khi
các tác giả {7} {PN:301999} sử dụng các hợp chất polyme siloxanee và silane như
trialkoxysilane để bảo quản các nguyên vật liệu võ cơ, hữu cơ bằng chic tim vào các nguyên liệu này với các chất trên trong công đoạn sau cùng để có một tính chất đặc
biệt trong môi trường, đây là biện pháp sinh thái nhằm cách ly nguyên vật liệu với bào
Trang 11cập đến; hoặc là phương pháp phun sấy và các biện pháp cô lập hơi dung môi ra môi trường khi phun thì chưa thấy đề tài nêu ra
12 Tổng quan tình hình nghiên cứu trong nước
Theo số liệu của Hiệp hội Da giầy Việt Nam và báo cáo của Tổng Công ty Da giầy Việt Nam thì sản lượng giầy dép sản xuất ở nước ta trong năm 2001 xắp xỉ 320
triệu đôi Kế hoạch dự kiến năm 2002 là 350 triệu đôi, giá trị xuất khẩu năm 2001 đạt
1.8 tỷ USD Sản lượng đa thành phẩm năm 2001 đạt xấp xỉ 14 triệu sqfs và năm 2002
dự kiến đạt khoảng 20 triệu sqfs
Ngành Da giầy đã xây dựng Chiến lược phát triển ngành đến năm 2010 và có tầm nhìn 2020 đã được phê duyệt; theo đó đến năm 2005 sản lượng giầy dép các loại
sẽ đạt trên 500 triệu đổi, da thuộc thành phẩm sẽ là 50 triệu sqfs và kim ngạch xuất khả
một ngành kinh tế kỹ thuật mũi nhọn hướng ra xuất khẩu, có tốc độ tăng trưởng khá sẽ đạt 5 tỷ USD Những số liệu trên chứng tỏ ngành công nghiệp da giầy đang là
cao và có những đóng góp quan trong trong sự nghiệp phát triển nền kinh tế đất nước trong những thập niên đầu của thế kỷ XXI
Các sản phẩm giầy đép thường tập trung chủ yếu theo 4 loại, đó là : giầy vải, chiếm khoảng 18%, giầy thể thao 50%, giầy da 179%, đép các loại 15% Nguyên liệu chính để sản xuất các loại giầy đép nói trên chủ yếu là da thành phẩm, vải sợi, bìa
hút ẩm, mốc, nhất là trong điều kiện thời
tiết nóng ẩm của nước ta Bằng một phép tính đơn giả, giả sử các sản phẩm giầy đép carton đây là những nguyên liệu rất dễ bị nắm mốc chiếm khoảng 2% (Trong thực tế khả năng còn cao hơn) bị hư hại đo mốc thì con số thiệt hại cũng mất đến 36 triệu đô la (xấp xỉ 550 tỷ đồng) đó là một con số
không nhỏ
¡ quyết ày, nhiều đơn vị trong ngành da giầy đã có một số biện pháp tỉnh huống để chống nấm mốc ngay từ khâu thuộc đa đến các khâu bảo quản da thành phẩm và nguyên vật liệu vải, sợi trong sản xuất giây dép
Phương pháp sử đụng hoá chất được sả: đụng trong bảo quản la nguyên
liệu đã được Viện nghiên cứu da giầy nghiên cứu {1} năm 1997, nhưng chỉ áp dụng
để chống các vi khuẩn thâm nhập vào da tươi, chưa quan tâm đến công nghệ chống mốc đa thành phẩm và lưu kho ngay trong các công đoạn thuộc, do đó da thành phẩm rất khó bảo quản, lưu kho chỉ được một thời gian ngắn đã có mốc trắng, vàng trên bé
mặt da
Các công nghệ chống mốc đụng được úp đụng trong đây chuyền sản xuất giấy ở nước ta như: Công ty Da giầy Hà Nội đã và đang áp dụng một số biện pháp
chống mốc cho đa thành phẩm (nguyên liệu dùng cho các sản phẩm giầy da, gidy thé
thao), áp dụng phương pháp chống mốc bằng sử dụng hoá chất ly rửa mốc trên bề
Trang 12Nhưng những giải pháp trên thị trường chỉ tạm thời đảm bảo trong thời gian ngắn dé kiểm tra khi giao hàng, không chống được các tác nhân gây mốc còn tồn tại bên trong
nguyên liệu, do vậy khi lưu thông trên thị trường vẫn bị khiếu nại về nấm mốc
Đối với công nghệ sản xuất giầy vải, một số công ty cũng đã áp dụng một số biện pháp chống mốc, chống arm nhưng chưa có hiệu quả rõ rệt, ví dụ như ở Công ty
Da giầy Hà Nội, đang sử dụng chất Benzoat Natri để hoà vào keo latex, keo PVAC,
keo EVA dạng nhũ sử dụng trong bồi tráng và dán quy trình gò giây, khi tan vào nước hợp chất này phân huỷ thành phenol và tạo môi trường kiềm tính có thể hạn chế nấm mốc phát triển sau một thời gian Ưu điểm của hoá chất này là dễ tan trong nước (muối của kim loại kiềm với phenol) nhưng nó cũng có không ít các nhược điểm như dễ gây chết keo (do ảnh hưởng của độ PH) dẫn đến khả năng phân tán không đều trong dung dich keo và hiệu quả chống mốc giảm đáng kể; dùng chất này đối với các loại keo nước thì thích hợp nhưng keo nước lại mang yếu tố ẩm ướt đối với nguyên
vật liệu, đó là điều kiện rất thích hợp cho vi khuẩn phát triển khi chất chống mốc hết tác dụng
Chat PCP ( pentacloro- phenol) vin đang được nhiều xưởng thuộc da ding làm
chất bảo quản, theo (4), nhưng chất này rất độc và mùi hăng, mức độ chịu đựng của
con người nhỏ hơn 0.5ppm, chất này có thể xâm nhập qua da gây hại đến sức khoẻ
cho người sử dụng
Phương pháp sinh học để phòng chống nấm moc được giới thiệu trong cuốn sách "Nấm mốc và phương pháp phòng chống" (2) (tác giả GS Bùi Xuân Đồng, PGS Hà Huy Kế - NXBKH&KT - 1999) nói một cách tổng quát là tạo ra các điều kiện sinh
thái không thích hợp với sự phát triển của nấm mốc, hai điều kiện sinh thái quan trọng
ảnh hưởng tới đời là độ
đối của không khí và độ ẩm của vật phẩm) và nhiệt độ môi trường xung quanh Muốn
ng của nấm mốc như chúng ta đã b (độ Âm tương các bào tử của hầu hết các lồi nấm khơng phát triển được nhất thiết ta phải giữ được
độ ẩm tương đối ở mức dưới 70% và điều kiện là nguyên vật liệu, hàng hóa thành
phẩm phải thật khô, nhưng thật khô ở mức độ nào? Tác giả cũng đã nêu ra vấn dé nay như sau: cần giữ độ ẩm tương đối là 65%, nguyên vật liệu bảo quản tuỳ thuộc từng loại, từng chất liệu mà hàm lượng nước chứa trong đó cho phép tối đa là bao nhiêu Hai phương pháp sinh thái chống mốc được đưa ra là "phương pháp kín" và "phương
pháp hở
Đối với "Phương pháp kín" là cách ly hoàn tồn vật phẩm với mơi trường khơng khí bên ngồi và ngược lại " Phương pháp hở" là phải có lưu thông không khí
để đảm bảo nhiệt độ luôn luôn đồng đều trong khi lưu giữ và bảo quản Mục đích của hai phương pháp này là giống nhau nhưng kết quả lại hoàn toàn khác nhau Với "Phương pháp kín" chúng ta có thể tạo được độ ẩm như ý muốn nhưng nhiệt độ trong
Trang 13cao hon 250 C vin bi méc den,
kho bảo quản không giống nhau, chỗ nào nhiệt
ngược lại với " Phương pháp hẻ" chỉ có tác dụng khi trời khô hanh, nếu trời nằm, âm,
dù có thông thoáng đến máy thì cũng bị nấm mốc làm hư hại ít nhiều Do đó hai biện pháp sinh thái đưa ra vẫn còn chỗ cần làm rõ khi áp dụng vào bảo quản giầy đép xuáat Phương pháp chống mốc bằng thiết bị đặc biệt nhị Máy chiếu tia cực tím (4) Công ty Da giầy Hà nội cúng đã tự chế tạo ra máy chiếu tia UV dùng để diệt
khuẩn, nó có hiệu quả đáng kể với các vi khuẩn ruột già Vấn đề đặt ra với loại may này là : Công suất bóng chiếu tia là bao nhiêu, thời gian, nhiệt độ chiếu tia là như thế
nào mới phát huy được hiệu lực của nó, do vậy phải nghiên cứu thật kỹ về đặc tính của vi khuẩn, bởi có rất nhiều loại vi khuẩn có thể chống chịu được các điều kiện chiếu ta rất lâu Hơn nữa giầy lại có hình dạng lỗi lõm mà tia chiếu lại di thẳng do đó
có những chỗ không thể chiếu tia được Vì vậy nếu có hướng sử dụng phương pháp này thì phải tìm hiểu nâng cao tầm hiểu biết hơn nữa
Để giải quyết những vấn để nêu trên liên quan đến nắm mốc trên các sản phim giầy vải, giầy đa trong quá trình sản xuất, lưu kho và lưu thông, qua nghiên cứu tình hình ngoài nước, với tình hình thực tế sản xuất trong ngành da giầy và qua khảo sát kỹ
các điều kiện khí hậu môi trường nước ta, chúng tôi nhận thấy cần phải có một giải
pháp tốt nhất, hợp lý và khoa học nhất để chống mốc cho các sản phẩm giây dép: Các phương pháp chống nấm mốc có thị
~ Phương pháp vỀ ruặt sinh hoá: Phân lập các loại nấm mốc, tìm ra điểm yếu của chúng, từ đó có thể dùng các biện pháp hoá chất, các biện phấp sinh thái và các
thiết bị chiếu tia để loại trừ
- Phương pháp hoá học: Trên cơ sở nghiên cứu về mặt sinh học của nắm mốc,
dùng các hoá chất có các tác dụng tốt nhất chống lại sự tồn tại và hoạt động phá hoại của nấm mốc, đảm bảo an toàn về hoá chất và đạt được các chỉ tiêu về hiệu quả kinh
tế như giá thành và chất luợng sản phẩm
- Giải phấp vỀ công nghệ: Cô gắng áp dụng các công nghệ tiên tiến trong và ngoài nước trong sản xuất và lưu thơng, tính tốn hợp lý trong công nghệ chống mốc, không gây ảnh hưởng đến năng suất, chất lượng của sản phẩm
- Thiết kế, chế tạo một số thiết bị phụ trọ: Lắp thêm trên đây truyền sản xuất
chống mốc như các thiết bị bỗi tráng, thiết bị phun, thiết bị chiếu xạ
trong công ngh
Trang 14Chương HT
TONG HGP CAC NOI DUNG VA KET QUA DE TAINGHIEN CUU TIL1 Phan lập, định tên các chủng loại nấm mốc trên các sản phẩm giây vải, giầy đa tại Công ty Da giầy Hà Nội
Nấm là giới sinh vật phổ biến trong tự nhiên Chúng sống hoại sinh nhờ các hợp
chất hữu cơ trong đất hoặc trên bể mặt đất Chúng cũng tỏn tại trong không khí ở dạng
bào từ, trong nước hoặc sống kí sinh trên các cơ thể sống Bên cạnh các chùng đã được sử dụng rộng rãi trong các nghành sản xuất như công nghiệp thực phẩm, công nghiệp được phẩm thì còn có nhiều chủng vi nấm gây hại cho con người Chúng không chỉ
là tác nhân gây các bệnh khác nhau ở người, động vật, thực vật mà còa là thù phạm
gây hư hỏng nhiều loại vật liệu, sản phẩm hàng hoá dẫn đến những thiệt hại nặng nể về của cải vật chất cho xã hội, trong số đó có ngành công nghiệp giầy da
Việt nam là nước nhiệt đới với khí hậu nóng ẩm, đây là điều kiện thuận lợi cho sự phát triển của nhiều loài vi nấm nói chung và nấm hại nói riêng Chúng phong phú cả về số lượng và chủng loại, có những loài có khả năng sinh trưởng phát triển trên các
môi trường có hoạt độ nước (wafer activity) rất thấp từ 0.7 - 0.95, được các nhà nghiên
cứu xếp thành một nhóm sinh thái riêng gọi là nhóm vị nấm ưa khô (xerophile) Đây là nhóm nấm chủ yếu phá hoại da giày và các sản phẩm bảo quản khô khác
Khi bào từ nấm mốc phát tần trong không khí, tơi xuống bẻ mặt giày vải hoặc đa, khi gặp điều kiện thuận lợi (nhiệt độ, độ ẩm thích hợp) bào từ sẽ nảy mầm rồi phát triển thành hệ sợi nấm Để ức chế sự nảy mầm của bào tử đó, người ta đã sử dụng các phương pháp hoá học như các chất diệt nấm trong xi đánh giày hoặc các hoá chất lau giày, các phương pháp khác như hạ nhiệt độ, độ ẩm Việc sử dụng các hoá chất có thể ảnh hưởng xấu đến sức khoẻ cho người tiêu dùng dẫn đến khó bán, khó xuất khẩu Để sử dụng các phương pháp sinh học trong bảo quản da giầy thì ta cản phải biểu tường tận các đặc tính nuôi cấy, các đặc tính sinh trưởng và phát triển của những chủng nấm thường cư trú trên đó Dựa vào các đặc tính đó để thiết lập các phương pháp phòng chống nấm mốc một cách hiệu quả và kinh tế Từ những vấn đẻ đó, chúng tôi tiến hành phân lập, định tên các chủng loại nấm mốc trên dây truyền sản xuất, trong lưu kho và trong lưu thông cho các sản phẩm giẩy vải, giầy da tại công ty giầy da Hà Nội
THHL1.1.TÔng quan:
1I1.1.1.1 Sơ hược về nấm mốc
Theo hệ thống phân loại của Whittaker thì nấm mốc thuộc giới Nấm, là sinh vật đị dưỡng nhân thật, không có khả năng quang hợp, sinh sản chủ yếu bằng bào từ Ty thể là vị trí chuyển hoá năng lượng của tế bào, có nguẻn gốc từ vi khuẩn thực (eubacteria) như là kết quả của sự cộng sinh giữa vi khuẩn không lưu huỳnh màu tía với các tế bào nhân thực [9]
Trang 15Nấm dinh dưỡng theo kiểu hấp thụ, chúng là vi sinh
quan trọng trong chu trình tuần hoàn vật chất Nhiều loài nấm sản sinh ra các enzym ật phân huỷ có vai trò
ngoại bào phân giải các polyme thực vật như: cellulose, lignin.[9]
Nấm phân bố rộng rãi trong đất, trong nước, trên các tàn dư thực vật, trên rau,
quả và các chất có nguồn gốc từ thực vật Trong không khí là dạng bào từ phát tán Nấm sợi phát triển tạo nên một cấu trúc phân nhánh gọi là sợi nấm (#ypla), sợi nấm kết hợp với nhau hình thành nên hệ sợi nấm (zyceihøm), sợi nấm có thể phân cách thành các ngăn khác nhau bởi các vách ngăn (zep/2) Sợi thường được bao bọc
bởi lớp thành tế bào có chứa kitin hay cellulose [9] Sự phát triển của hệ sợi nấm là sự kéo dài ta ở các đầu sợi nấm Khi một đoạn sợi nấm đứt ra, nó có thể phát triển để tạo thành một hệ sợi nấm mới.[ l2]
Phần sợi nấm làm nhiệm vụ thu nhận dinh dưỡng gọi là sợi cơ chất, phản sợi mọc ra ở phía trên môi trường nuôi cấy gọi là khí sinh, thường sẽ phát triển thành cơ
quan mang bào từ
Phân loại nấm mốc thường dựa vào các đặc điểm hình thái khuẩn lạc và cấu
trúc cơ quan sinh sản.[12]
THL.1.1.2 Các phương thức sinh sản của nấễm
Nấm có ba phương thức sinh sản: sinh sản sinh dưỡng, sinh sản vô tính và sinh sản hữu tính
- Sinh sản sinh dưỡng: Phương thức nầy được thực hiện bằng nhiều cách:
* Bằng bào tử vách mỏng: Khi gặp điều kiện bất lợi các tế bào dinh dưỡng tách rời nhau, chuyển sang trạng thái sống tiêm tầng, nếu gặp điều kiện thuận lợi mối tế bào này lại nảy mảm và phát triển thành một hệ sợi mới Bào từ vách mỏng cũng là
một biện pháp phát tần của nấm
* Bằng sợi nấm: Các đoạn sợi nấm đứt ta phát triển thành hệ sợi nấm mới
* Bang hạch nấễm: Khi gặp điêu kiện bất lợi, cả hệ sợi bện xít lại với nhau và các sợi bên ngoài được bao bởi màng dày rồi phát triển dày lên thành lớp vỏ bảo vệ Khi gặp điều kiện thuận lợi, hệ sợi lại phát triển phá vỡ lớp vỏ bọc
* 8ằng nảy chỗi: ở nấm men đơn bào, các tế bào phân chia sinh dưỡng nhưng không tách rời nhau tạo thành chuỗi
- Sinh sản vô tính: Phương thức này thực hiện bằng cách hình thành động bào tử hay bào từ Có hai loại bào tử là bào tử nội sinh và bào từ ngoại sinh:
* Bào từ nội sinh còa được gọi là bào tử kín hình thành do nhân và nội chất của cơ quan sinh sản vô tính phân chia không giảm nhiễm nhiều lần tạo nên một số lượng
Trang 16* Bào từ ngoại sinh hay cda goi [A đính bào từ Sự bình thành bào từ ngoại sinh về cơ bản là tương tự như bào từ nội sinh, chỉ khác là bào từ này đính trên cuống chứ không bọc trong nang bào từ, cuống ở đây gọi là cuống đính bào tử
- Sinh sản hữu tính:
Cơ quan sinh sản nằm trên hai sợi nấm khác nhau hay chỉ là sự kết hợp hai nhân trong một tế bào nhưng có nguồn gốc từ hai bào từ khác nhau Sau khi kết hợp, hợp từ có thể nghỉ hoặc phân chia giảm nhiễm ngay, tạo thành bào từ hữu tính đơn bội La kết quả của quá trình phân chia giảm nhiễm nên bào tử hữu tính trên mối co quan
sinh sản là số chắn và thường là 2,4,8.16, ít khi nhiều hơn Những nấm có bào tử hữu
tính nằm trong tế bào mẹ thì gọi là nấm túi, còa những nấm có bào từ hữu tính đính tự
do trên cơ quan sinh sản hữu tính thì là nấm đảm Các cơ quan mang bào từ hữu tính
có thể nằm tải rác trên sợi nấm hoặc tập trung trên cơ quan được gọi là quả thể.[4]
Một số loại nấm, thường là nấm gây bệnh, có hiện tượng lưỡng hình (dimorphism) tite là có hai phương thức sinh trưởng Phương thức giống nấm mốc là có cả sợi cơ chất và sợi khí sinh, phương thức giống nấm men là hình thức nảy chỏi Hiện tượng lưỡng hình phụ thuộc vào nhiệt độ hay nỏng độ khí CO,.[12]
Đào từ nấm khác nhiều so với nội bào tử ở vi khuẩn Nội bào từ của vi khuẩn
chỉ cho phép một tế bào vi khuẩn chống lại những điều kiện môi trường bất lợi Một tế
bào vi khuẩn tạo thành một nội bào từ, bào tử này về sau nảy mầm tạo thành một tế
bào vi khuẩn Quá trình này không phải là sự sinh sản bởi vì số lượng tế bào vì khuẩn không tăng lên Còn ở nấm mốc, sau khi một bào từ nảy mầm nó sẽ tạo thành một hệ
sợi nấm Hệ sợi này tạo ra rất nhiều cuống sinh bào tử, trên mối cuống sinh bào từ lại
sinh ra rất nhiều bào từ đính, các bào từ này sau khi rời khỏi cuống sinh bào tử thì tổn
tai rat lau trong không khí do nó có trọng lượng nhỏ và kích thước rất bé Nhờ gió, các bào từ phát tán đi khắp nơi Điều đó giải thích cho tốc độ phát triển và khả năng lây
lan của các loài nấm mốc
111.1.1.3 Các yếu tố ảnh hưởng tới sự phát triển của nấm mốc:
- Nhiệt đô:
Nhiệt độ là yếu tố quan trọng cho sự phát triển của sinh vật nói chung và nấm mốc nói riêng vì nhiệt độ có liên quan đến hoạt độ của enzym, sự biến tính của ADN
và sự thay đổi cấu trúc màng sinh chất Đa số nấm mốc phát triển tốt ở nhiệt độ trung
bình từ 20° - 26°C, nhiệt độ tối ưu cho sự nảy mầm của bào từ trần là 25° - 28°C, nhiệt độ thấp nhất la 10°C va cao ohat là 32°C Dưới 10°C và trên 35°C, bào tử của chúng
không thể nảy mầm được Bào tử có thể chết ở nhiệt độ nước nóng 50°C trong 10 phút (trừ một số loài nấm ưa nhiệt) [6]
- Đó ẩm:
Tình trạng vật lý của nước được biểu thị bằng khả năng hoạt động nhiệt động học của nước trong cơ chất, và được gọi là hoạt độ clia aude (water activity), viết tắt là a „
Trang 17Hoạt độ của nước trong cơ chất được biểu thị bằng tỷ lệ giữa áp suất hơi nước
trên bể mặt cơ chất (P), so với áp suất hơi nước trên bề mặt nước nguyên chất (P;) ở
cùng một nhiệt độ (1) xác định
a„=P/Pe [I3]
Giảm a„ của môi trường sẽ dẫn đến làm chậm quá trình phát triển của vì nấm, đến một mức độ nào đó sẽ làm ức chế hoàn toàn sự phát triển của chúng Khả năng chống chịu ở môi trường có a„ thấp của những chùng vi sinh vật khác nhau là rất khác nhau Vì khuẩn là nhóm có khả năng chịu đựng kém nhất đối với môi trường cd a, thấp Khi a„ môi trường bằng 0,9 thì hầu hết các loại vi khuẩn đều không phát triển được Trong khi đó, nhiều loại vi nấm có thể phát triển ở a„= 0,8, đặc biệt có những loài nấm sợi phát triển ngay ở a„ = 0,55 như Đenicillhơm adaznetzzi ([msem hatski,
1984) Loai Aspergillus repens c6 thé phat trién 6 a, = 0,65 (Zlochevski, 1986) Tuy
nhiên theo nhiều tác giả thìa„ tối thiểu cho nấm sợi ưa khô nói chung là trong khoảng
từ 0,7 - 075,17] điều đó có nghĩa là nếu a„ giảm xuống dưới 0,7 thì có thể loại trừ
được khả năng phát triển của rất nhiều loại vì nấm Để tỏa tại và phát triển, các loài nấm sợi có hiện tượng thích nghỉ, cơ chế của hiện tượng này đã được nhiều tác giả nghiên cứu nhưng cho đến nay vẫn chưa thống nhất Một số tác giả cho rằng để tăng
hoạt độ của nước khi ở trên cơ chất có a,„ tÍ Íp, tế bào vì nấm phải tăng nông độ chất
hoà tan trong bào bằng cách tự tổng hợp hoặc hấp thụ từ bên ngoài
Nhiệt độ và độ ẩm có ảnh hưởng tương hỗ đối với sự phát triển của vi nấm Nếu mức chịu đựng cao nhất của một loài đối với hoạt độ nước thấp được tìm ra ở xấp xỉ nhiệt độ tối ưu thì mức chịu đựng cao nhất của nhiệt độ lại xấp xỉ ở hoạt độ nước tối
ưu Như vậy hoạt độ nước tối ưu sẽ trở nên thấp hơn tại nhiệt độ cao và nhiệt độ tối ưu
cho sự phát triển sẽ cao hơn khi có hoạt độ nước thấp
Khi nhiệt độ môi trường giảm thấp so với nhiệt độ tối ưu thì khả năng chịu khô hạn của vi nấm cũng giảm theo Theo Scott (1957) đối với vi nấm, chỉ số hoạt độ nước tối thiểu có thể tăng từ 0,01 đến 0,05 hoặc cao hơn khi nhiệt độ môi trường thay đổi
trong khoảng L0°C Ví dụ loài A#ernaria cữri, nhiệt độ phát triển tối ưu là 30°C tương
ứng với chỉ số a„ tối thiểu là 0,838 Khi môi trường có nhiệt độ là L8°C hay 37C, a„ tối thiểu sẽ tăng lên 0,87, ở I0°C là 0,98 và ở 5°C là 0,99 Trên đối tượng Aspergillus chevalieri, Ayerst di chimg mình được mối quan hệ giữa độ ẩm và nhiệt độ Nhiệt độ
tối ưu của vi nấm này khi thay đổi trong khoảng từ 30°C đến 35°C thì hoạt độ nước tối ưu sẽ là từ 0,885 đến 0,90, Mức độ hoạt độ nước tối thiểu a„ = 0,7 tìm thấy khi nuôi cấy vì nấm này ở nhiệt độ tối ưu, khả năng phát triển được ở nhiệt độ cao hơn 40°C của vỉ nấm này lại tìm thấy khi môi trường có hoạt độ nước tố ưu
- Các yếu lố khác:
Trang 18* Nấm thường phát triển tốt hơn trong môi trường có pH = 5, là môi trường quá axit đối với sự phát triển của đa số các loài vi khuẩn
* Hầu hết nấm mốc là do thiếu khí
* Hầu hết các loại nấm mốc có khả năng chống chịu áp suất thẩm thấu cao hơn so với vi khuẩn, chúng có thể phát triển được ở những nơi có nông độ đường và muối cao
* Nhu cầu dinh dưỡng của nấm vẻ nguôn nitơ ít hơn so với vi khuẩn khi tạo nên một lượng sinh khối tương đương
* Nấm mốc có thể phát triển trên những cơ chất có độ dm rất thấp, thường là
qúa thấp đối với sự phát triển của vi khuẩn
* Nấm mốc có khả năng đỏng hoá các loại hydrocacbon phức tạp giống như lignin, celluloza, tỉnh bột, gelatin Có được khả năng này là do nấm là những sinh vật hoá dị dưỡng (chemoheterotroph), có hệ thống enzym ngoại bào tất phát triển Các enzym sau khi đã tiết ra môi trường xung quanh, chúng phân huỷ các hydrocacbon phức tạp thành các phân từ nhỏ, sau đồ các phân từ nầy được vận chuyển qua màng vào tế bào Đó là nguôn đình dưỡng để nấm xây dựng các thành phản cản thiết cho tế
bao [12]
Sur don gidn vé oguén dinh dưỡng, khả năng chống chịu với các điều kiện khắc nghiệt của môi trường, cùng với các phương thức sinh sản đa dạng của nấm đã giúp cho chúng có mặt ở khắp mọi nơi với số lượng lớn, trong đó giày da và giày vải là những cơ chất không tránh khỏi sự xâm nhập của nấm mốc
1II.1.14 Tác bại của nấm trong nghành công nghiệp Da - Giẫy:
Do đặc tính nhỏ, nhẹ của bào tử Khi một vùng nào đó trong kho bảo quản bị nhiễm nấm mốc, nhờ các luông gió thổi xung quanh kho kèm theo sự chuyển động của không khí, bào từ nấm sẽ phát tán khắp phòng Khi một bào từ nấm mốc rơi xuống bể mặt giảy vải, hoặc giày da, gặp điều kiện thuận lợi, bào tử sẽ nảy mầm tạo nên hệ
sợi phát triển theo cả ba chiều trên bề mặt cơ chất Trong quá trình phát triển, hệ sợ
nấm tiết ra các loại enzym ngoại bào để phân giải cơ chất Một kết quả nghiên cứu về
Aspergillus oryzae cho thấy, trong quá trình phát triển, chủng nấm này đã tạo ra một
loạt các loại enzym nhưr glucose dehydtogenaza, mannitol dehydtogenaza, B - fructofwanosidaza,
amylaza, proteinaza, uwaza, glucosidaza, catalaza, petoxidaza, nucleaza, lecithilaza, phytaza, transglucosidaza, B - glucosidaza, B - glactosidaza, xylosidaza, endo - 1,3 - xylanaza, endo - L3 -
plucanaza [7] Các enzym này sẽ tấn công vào các sợi vải (hydrocacbon có nguồn gốc từ thực vật) và các sợi gelatin trên da, các sợi đó sẽ bị mục và bị đứt ra, ảnh hưởng lớn đến chất lượng của sản phẩm
Trong quá trình phát triển, nhiều loài nấm mốc đã sử dụng nguỏn dinh dưỡng sắn có trên các sản phẩm giầy vải và da để tổng hợp nên các loại sắc tố, các chất dư
thừa trong quá trình trao đổi chất, các chất này được tiết vào sản phẩm tạo nên các vết
Trang 19lốm đốm, ảnh hưởng đến tính phẩm mỹ của sản phẩm Một kết quả nghiên cứu về
Aspergilius oryza đã cho thấy, bèn cạnh một loạt enzym được tạo ra trong quả trình
sinh trưởng thì hàng loạt chất khác ciĩng được tạo ra như: các axitaminL -œ:-aminoadiic,
bebine, stachydrin céc axit v6 co obit axit_kojc, uric, pyruvic, ketoglutatic, indone -3 -axetic các
chất bay hoi obit 1 -octen -3 -ol, 3-octanon, 3-methybutanol, riboflavin hai chết phát hurỳnh quang là asperoEtin A và B, một loạt các chất khác như: hydroxybenœ maltoiảne, din xuat piperazine, anhydroaspcrgillomarasnine,porphyrincoixoporphyrin1 [7]
Trong quá trình phát triển, nhiều loại nấm cũng tạo ta các chất độc gây ảnh hưởng đến sức khoẻ của con người và vật nuôi như: aflatoxin được tạo ra bởi một số loai thude chi Aspergillus (nhur Aspergillus /fiavuz), nó là tác nhân gây ung thư gan ở người Các chất độc ergot alkaloid, ergometrine, ergotamine, ergotaminine cũng được sinh ra từ nấm, chúng là những tác nhân gây bệnh co cơ, bệnh thản kinh, bệnh tim mạch và một số triệu chứng nôn mừa, ỉa chảy [9] Ngoài ra nhiều chất độc khác cũng
duge tao ra nhur Aspergillus oryza tao ra axit cyclopiazonic, là chất rất độc đối với
dong vat cé vi Penicillin implicatum tao ra cittinia, sclerotiorin, 7 - epi -
sclerotiorin, là những chất độc đối với than Penicillium oxalicum tao ta axit secalonic và oxaline , là những chất rất doc doi véi gan Penicillium steckii tạo ra curvularin, là chất độc đối với động vật có vú, chuột, phôi gà, tôm biển Øuzothen chevalieri gây nên
bệnh xuất huyết ở vịt con
Nấm mốc mọc ở trên giẩy nên khi đi gidy, da chân của người tiếp xúc trực tiếp với bào từ và hệ sợi nấm, từ đó gây nên những kích thích dị ứng cho con người Hiện tượng dị ứng thường gặp ở Aspergillus fienigatuz và một số loài nấm khác thuộc chỉ
Aspergillus [8]
- Một số chỉ nấm mốc thường gặp trên giây vải và giầy da:
* Chi Penicillium
Chi Penicilliwn la mot trong ohimg nhóm nấm phân bố rộng rãi trên toàn thế
giới, cư trú trên rất nhiều ở sinh thái Vì thế nên các loài thuộc chỉ Pericilliwm dễ đàng
phân lập từ nhiều vị trí khác nhau như: trên da giầy, trên vải bạt, trên thực phẩm, trên
các sản phẩm nông aghiép Penicillium không chỉ bao gồm những cấu trúc sinh bào tử riêng rẽ, nổi bật mà còn có rất nhiều các đặc tính sinh lý có tác động to lớn đến cuộc sống của coa người theo cả phương thức có lợi hay có hại
Một trong những ví dụ quan trọng nhất về khía cạnh có lợi của những chủng nấm này là sự phát hiện ra chất kháng sinh Penicilia, một sản phẩm trao đổi chất bậc hai được tạo ra từ 2enicillhen chyrogemuen, Penicillin đã cứu sống tất nhiều sinh mạng thoát khỏi bệnh nhiễm trùng trong chiến tranh thế giới thứ hai Tiếp theo là sự phát hiện ra griseofulvin, được sinh ra từ ạriseofiiivuen, đã chữa trị rất nhiều bệnh nấm tốc, nấm da, nấm vảy Những phát hiện đó tạo đà to lớn cho nghành công nghệ dược
Trang 20Những hoạt tính mạnh mẽ của hệ thống enzym ngoại bào ở các loài thuộc chỉ Penicillium đã góp phần phân giải nhanh các mảnh thực vật, các chất thải động vật,
các phần hữu cơ dư thừa trong chu trình tuần hoàn vật chất Một vài loại enzym như: B
- glucanaza, dextranaza, pectinaza, proteaza đã được sử dụng rất hiệu quả trong công
nghiệp thực phẩm va cong aghiép hod chat Viée sir dung P verruculosum trong sin xuất những chất kích thích phát triển thản kinh và não bộ dang ngày càng hứa hẹn
Bên cạnh những mặt có lợi, một số loài thuộc chỉ Øeniciiiiuzm là nguyên nhân gây nên sự thối rữa và những chuyển hoá sinh học theo hướng không mong muốn trên đồng ruộng, trong bảo quản lương thực thực phẩm và các đỏ dùng khác Khoảng 50 loài thuộc chỉ này tạo ra những độc tố nấm nguy hại đến sinh mạng của người và động vật Một số loài gây bệnh ở thực vật như bệnh xanh rể ở táo, cam, chanh Một số loài gây bệnh cơ hội ở người [10]
enicillien thường có mầu xanh xám Cuống đính bào từ là hình đế trên gắn các thể bình, dạng phức tạp phân nhánh một hoặc hai lần, đối xứng hoặc không Trên nhánh mang cầi metulae, trên metulae mang thể bình, nhờ phân nhánh nên số thể bình tăng lên rất nhiều lần Toàn bộ cuống đính bào từ dang mang bào từ có dạng một cầi
chổi, do vậy nấm này có tên là nấm chổi [9] * Chi Aspergillus
Cùng với chi Penicilliwn, chỉ Aspergillus cũng phân bố khắp nơi trên thế giới, và có thể phân lập được từ nhiều nguỏn khác nhau, Azpezaillz cũng có thể phát triển được ở những nơi có hoạt độ nước thấp từ đó tạo cho chúng có tính cạnh tranh cao trên những vật liệu khô như các loại hạt trong bảo quản, các nguyên liệu vải, da trong công
nghiệp da giày
Một số loài thuộc chỉ Aspergitluz là những tác nhân gây dị ứng cho con người, một số loài gây bệnh cho người và cả động vật đặc biệt ở những cơ thể có hệ thống miễn địch yếu Một số loài gây bệnh ở thực vật Nhiều loài tạo độc tố cao điển hình là A flavus va A parasiticus sinh aflatoxin, một chất gây ung thư gan cho cả người và động vật có vú
Aasperaillus cũng được sừ dụng nhiều trong công nghệ lên men để tạo các chất có hoạt tính sinh học cao như: vitamin, eazym, chất kháng sinh, inteferon Ngoài ra chúng còn có nhiều ứng dụng trong công nghiệp thực phẩm và hoá chất.[LI]
Aasperailluz thường có màu vàng Cuống đính bào từ của Asperailuø gồm một cuống hình ống, hình thành trên một tế bào của sợi nấm gọi là tế bào chân, đầu cuống, phình to hình cầu, hình bầu dục hay hình chuỳ, trên nó là các giá thể hình chai để đính các chuối bào từ gọi là thể bình Nếu chỉ có một lớp thể bình thì gọi là thể bình sơ cấp, nếu có hai lớp thì lớp mang bào tử là thể bình sơ cấp, lớp đính với đầu cuống đính bào tử là thể bình thứ cấp Toàn bộ cuống đính bào từ dang mang bào tử trông giống như một bông hoa trinh nữ thu nhỏ [4]
Trang 21Vật liệu và phương pháp nghiên cứu phân loại nm mốc: Nguyên liệu và thiết bị
- Nguyên liệu
* Mẫu phân lập
Các mẫu giầy da, giây vải bị nhiễm nấm mốc được lấy tại công ty giầy da Hà Nội tại kho nguyên liệu, trên dây chuyển sản xuất giấy vải, giầy da, tại kho thành
phẩm
* Môi trường phân lập và phân loại nấm mốc
Môi trường Czapek (gi) Sacctoza 30 NaNO, 3 K;HPO, 1 MgSO, 0,5 KCL 0,5 FeSO,.7H,O 0,05 Thạch 15 Nước Lit pH 60 Môi tring OA (of) Bột yến mạch 30 Thạch 15 Nước Lit pH 60 ~ Thiết bị: * Kính hiển vi quang học - Nikon P400 (Nhật) * Tủ ấm Memrnert (Đức) * Bốc cấy Osi (Pháp)
* Các thiết bị cầu thiết cho nuôi cấy vị sinh
1I1.L2.2 Phương pháp nghiên cứa phân loại nắm m
- Kiểm tra nấm mốc có trong không khí (heo phương pháp Kock
Dat 5 dia Petri có chứa môi trường Czapek ở các vị trí khác nhau tại nơi cần kiểm tra Thời gian mở nắp hộp là 10 phút Đóng nắp hộp ù 28 - 30°C trong 3 - 5 ngày Theo Omelianki, tổng số khuẩn lạc trên diện tích thạch 00cm để trong thời gian khoảng 5 phút bằng tổng số khuẩn lạc trong 10 lít không khí, qui đổi ta l m°
trong không khí ta có công thức sau: [5]
Trang 22Trong đó: X là tổng số bào tử nấm mốc trong | m? khong khi
A là tổng số khuẩn lạc trong một đĩa thạch Slà điện tích hộp Petri (tính bằng cm?) K [a thời gian mở hộp Fetri, được tính ra với hệ số 3 phút K=l 10 phút K 13 phút K=3 - Kiểm tra nấm mốc trên các giá dung nguyên liệu và trên các thiết bị máy móc của nhà máy: Chuẩn bị
vô trùng nhúng vào dung dịch NaCl và lau trên bề mặt của các giá đựng nguyên liệu và trên các thiết bị máy móc, lau đi lau lại nhiều lần, mối lần lại nhúng vào dung dịch NaCl Pha loãng dung dịch trên đến 10 Hút 0,05 mÍ dịch từ các ống pha loãng trên yao dia Petri đã chứa sắn môi trường Czapek, gạt đều bỏ vào tù ấm 28 - 30°C sau 3 - 3 ngày, lấy ra, đếm khuẩn lạc có trong mỗi đĩa Petri Thí nghiệm lặp đi lặp lại 3 lần
Số bào từ nấm mốc/đm? được tính theo công thức sau:
X=axM/VxS
Trong đó: X là số bào từ nấm mốc trên 1 dm?
A là số khuẩn lạc trung bình trên đĩa thạchở dịch ban đầu Mà số mÍ dung dịch để cấy Slà điện tích lau ~ Kiểm tra nấm mốc trên giấy vai, giây da ình tam giác sạch vô trùng có chứa dung dịch NaCL 0,9% Dùng tăm
lấy các mẫu giầy vải, giầy da đã bị nhiễm mốc trong quá trình bảo quản, cân các mẫu đó rồi cho vào nước cất vô trùng rửa sạch bằng các dụng cụ vô trùng Pha loãng nước rửa trên đến 10° Hút 0,05 mÍ dịch từ các ống pha loãng trên vào đĩa Petri đã chứa sắn môi trường Czapek, gạt đều bỏ vào tù ấm 28 - 30°C sau 3 - 5 ngày, lấy ra, đếm khuẩn lạc có trong mỗi đĩa Petri Số lượng nấm mốc trong 1g giảy được tính
theo công thức:
X=axLkxILw
Trong đó: a là số khuẩn lạc trung bình trên đĩa Petri klà độ pha loãng
v là thể tích pha loãng được cấy gạt trên đĩa Petri
- Phương pháp phân loại nất
Nấm được nuôi cấy trong tủ ấm 28 - 30°C trên môi trường Czapek hoặc môi trường OA có cắm lamen nghiêng Sau 72 giờ, lấy ra quan sát hình thái dưới kính hiển vi quang học
Phân loại nấm dựa vào 2 tiêu chí: /TĐặc điềm hình thái khuẩn lạc
Trang 23- Quan sát dạng mặt khuẩn lạc
- Màu sắc khuẩn lạc (mầu sắc hệ sợi nấm, bào từ) và các đặc điểm khác như
mặt trái, giọt tiết
/?Đặc điển hiển vi của nấm
- Đặc điểm của cơ quan sinh bào từ trần và bào từ trần (tế bào chân, giá sinh
bào từ trần, bọng đỉnh giá, cuống thể bình, thể bình, hình dạng, kích thước )
- Đặc điểm của bào từ túi (thể quả, nang bào tử, bào từ túi)
Phân loại đến chỉ: dùng khoá phân loại của H.L.Barnet và cộng sự
Phân loại đến chỉ Aspereillù dùng khố phân loại của Raper và Eennell, 1966 va khod phan loai "Aspergillus and related telemorphs” cita S S Tzean, J L Chen, G
Y Liou, C C Chea, W H Hsu (Dai loan) Dé phan loai chi Penicilliwn ching t6i
cũng dùng khóa phân loại "Penicillium and related telemorphs” của các tác giả trên
[10]
HILL 3 Kết quả và thảo luận
1H1.1.3.1 Tại kho nguyên liệu
-_ Số lượng bào tử nấm mốc trong không khí
Trong không khí, tại kho nguyên liệu, 9 chùng nấm mốc được phân lập, các chủng được ký hiệu từO, - Oạ Qua phân loại, chùng có ký hiệu O; và O, là cùng một loài Kết quả được trình bày tại bang 1
Bảng 1: Số lượng bào tử nấm mốc trong m` không khí (ai kho nguyên liệu Kíhiệu | Sốlượng mốc | Tỷ lệ% Tên khoa học chủng | (bào từẩm) Oo 337.5 36 Penicillium levitum 9; 103 1 Curvularia pallescens O;+O, 253 27 ‘Aspergillus fumigatus 0; T§ 8 Aspergillus niger Os 375 4 Myrothecium verrucaria 0; 4 5 Fusarium fusarioides 9; 375 4 Choanephora trispora 9; 4 5 ‘Aspergillus asperescens Tổng 9375 100
Trang 24Từ những số liệu ở bảng 1 và bảng 2 cho ta thấy: Ngay từ khâu đầu tiên trong quá trình sản xuất giầy, kho nguyên liệu đã bị nhiễm rất nhiều nấm mốc Trong không
khí, đó là hốn hợp bào từ của nhiều loài nấm mốc khác nhau thuộc nhiều chỉ khác
nhau trong dé 2 loai Penicillium levitum và Aspergillus fumigatus c6 tin số bắt gặp
cao nhất Trên bể mặt nguyên liệu và bể mặt giá nguyên liệu, xác xuất bắt gặp nấm
méc chit yéu 2 chi Aspergillus va Penicillium Diéu ody duve gidi thich là do trên mỗi loại cơ chất khác nhau (nguyên liệu) có sự thích ứng khác nhau giữa các loài nấm mốc, kho nguyên liệu là sự tập hợp của rất nhiều loại nguyên liệu vải, da nên trên mối loại nguyên liệu đó có những khu hệ nấm mốc khác nhau, chúng sinh sống trên đó rồi phát tần bào từ vào trong không khí, từ đó không khí trong kho nguyên liệu là hón hợp
bào tử của nhiều loài
Bảng 2: Số lượng bào tử nấm mốc trên các giá để nguyên liệu Kíhiệu | Sốlượngmốc | Tỷ lệ% Tên khoa học chủng | (bào từx 10°/dm?) Ni 410.5 36 ‘Aspergillus asperesceas N 330.5 29 Penicillium nalgiovensis N; 5 5 Penicilliwn pusillum Ny 30 7 Penicillium fellutanum Ns 171 15 ‘Aspergillus fumigatus Ne 9 8 ‘Aspergillus oryzae Tổng 1140 100
Từ những số liệu ở bảng 1 và bảng 2 cho ta thấy: Ngay từ khâu đầu tiên trong quá trình sản xuất giầy, kho nguyên liệu đã bị nhiễm rất nhiều nấm mốc Trong không
khí, đó là hốn hợp bào từ của nhiều loài nấm mốc khác nhau thuộc nhiều chỉ khác
nhau trong đó 2 loài Øenicillim levinon và Aspergillus fumigatus c6 tin số bắt gặp
cao nhất Trên bể mặt nguyên liệu và bể mặt giá nguyên liệu, xác xuất bắt gặp nấm
méc chit yéu 2 chi Aspergillus va Penicillium Diéu ody duve gidi thich là do trên mỗi loại cơ chất khác nhau (nguyên liệu) có sự thích ứng khác nhau giữa các loài nấm mốc, kho nguyên liệu là sự tập hợp của rất nhiều loại nguyên liệu vải, đa nên trên mối loại nguyên liệu đó có những khu hệ nấm mốc khác nhau, chúng sinh sống trên đó rồi phát tần bào từ vào trong không khí, từ đó không khí trong kho nguyên liệu là hón hợp
bào tử của nhiều loài
1I1.1.3.2 Trên dây chuyên sản xuất
- Số lượng bào tử của nấm mốc trong không khí ai phân xướng pha cất Trong không khí, tại phân xưởng pha cắt, 9 chùng nấm mốc được phân lập, các chủng được ký hiệu từ M:- Mạ Qua phân loại, chủng có kí hiệu M, và Mạ thuộc cùng
Trang 25mdi loài, chủng có kí hiệu là Mẹ, Myo chura xéc định được rõ loài Kết quả được trình bày tại bằng 3
- Số lượng bào tử của nấm mốc trong không khí tại phân xưởng may
Trong không khí, tại phân xưởng may, 5 chủng nấm mốc được phân lập, các chủng được ký hiệu từ K,- K; Chùng có kí hiệu là K; có hình dạng giống với chùng có ki bigu Mo, chùng có kí hiệu K, có hình dạng giống với chủng có kí hiệu M; Kết quả
được trình bày tại bằng 4
Bảng 3: Số lượng bào từ của nấm mốc trong không khí tại phân xưởng pha cất Kihigu [ Sốlượng mốc | Tỷ lệ% Tên khoa học chủng | (bào từấm) M BS 12 Aspergillus oryzae M, 122.5 20 Penicillium oxalicum M; 30.5 5 Penicillium steckii Ma M, 115 29 Curvularia eragrostidis M, 36.5 6 Curvularia brachyspora M 36.5 6 Cladosporium nigrellum M 18 3 Penicillium ochro - chioron M 36.5 6 Aspergillus sp Mic 79.5 13 Penicillium sp Tổng 612 100 ảng 4: Số lượng bào tử của nấm mốc trong không khí tại phân xưởng may Kíbhiệu | Sốlượng mốc | Tỷ lệ% Tên khoa học chủng | (bào từấm) K 103 36 Curvulatia eragrostidis K 28.5 10 Penicillium oxalicum K 74.5 26 Penicillium sp K 28.5 10 | Aspergillus sp K; 5L5 18 ‘Aspergillus asperescens Tổng 286 100
Trang 26hệ thống thông gió không có, đó là môi trường thuận lợi cho các loại nấm mốc phát triển Khi nguyên liệu được đưa sang phân xưởng pha cắt tồi đến phân xưởng may, trên đường đi, một phản bào từ rơi vãi, hơn nữa phân xưởng pha cắt và phân xưởng may lại có hệ thống thông gió nên số lượng bào tử trong không khí giảm hơn so với kho nguyên liệu là lẽ đương nhiên
- Số lượng bào tử nấm mốc (rong không khí tai dây chuyền sản xuất giầy
vải, giây da
Trong không khí, tại dây chuyên sản xuất giầy vải, giầy da, 21 chùng nấm mốc đã được phân lập, các chùng được kí hiệu tir T, -T,, Qua phân loại, chủng có kí hiệu là T, và T; thuộc cùng một loài, chủng có kí hiệu Tụ; và T» thuộc cùng một loài Kết quả được trình bày ở bảng 5
Bảng 5: Số lượng bào tử nấm mốc trong Im` không khí tai đây chuyền sản
xuất giây vải, giấy da
Kíhiệu | Sốlượng mốc | Tỷ lệ% Téa Khoa hoc chủng | (bao tirfm’) Tat: 90 27 Curvularia eragrostidis Ts 16 3 | Aspergillus T1 3 6 Penicillium Ts 16 3 Curvularia brachyspora Ts 16 3 Emericellopsis terricola Tr 3 6 Penicillium baarnense Ts 3 6 Penicillium lapidosum To 16 3 Cercospora gerberae
Tis 16 3 Memnoniella echinata
Tụ 16 3 Penicillium ochro - chloron
Trang 27Từ những 6 ligu tréa ta thay 3 chi Aspergillus, Penicillium va Curvularia via là những chỉ thường bắt gặp nhiều nhất trong không khí
- Số lượng bào tử nấm mốc trên dây chuyển sản xuất giầy da
Trên bê mặt các thiết bị của dây chuyển sản xuất giẩy da, 4 chủng nấm mốc được phân lập, các chùng được ký hiệu từM, - Mụ Chùng có kí hiệu là E, có hình thái giống chủng có kí hiệu là Mu Kết quả được trình bày tại bảng 6
8ảng 6: Số lượng bào tử nấm mốc trên đây chuyên sắn xuất giầy da Kihieu | Sốlượng mốc | Tỷ lệ% Tên khoa học chủng | (bào từdm”) E, 182.5 25 Penicillium sp E, 182.5 25 Penicillium implicatum E, 182.5 25 Penicillium humuli E, 182.5 25 Aspergillus sp Tổng 730 100
- Số lượng bào tử nấm mốc trên đây chuyên sản xuất giầy vai
Trên bể mặt các thiết bị của dây chuyên sản xuất gidy vải, 8 chủng nấm mốc được phân lập, các chủng được ký hiệu từQ, - Q„ Kết quả được trình bày tại bảng 7
ảng 7: Số lượng bào tử nấm mốc trên đây chuyên sản xuất giầy vải Kíhiệu | Sốlượng mốc | Tỷ lệ% Téa Khoa hoc chủng | (bào từdm”) Qa 1560 26 Penicillium sp a 480 8 “Aspergillus oryzae Q; 480 8 ‘Aspergillus aculeatus Q, 1020 17 ‘Aspergillus sp Q; 480 8 Penicillium humuli Q 480 8 ‘Aspergillus sp a 480 8 Penicillium sp $ 1020 17 ‘Aspergillus asperescens Tổng 6000 100
Từ những số liệu ở bảng 6 và 7 cho ta thấy: 2 chỉ Aspezgilluø và Penicillium
thường có mặt trên các thiết bị của dây chuyền sản xuất giầy vải, giầy da Sự có mặt
Trang 28113.3 Tai phòng lu kho
- Số lượng bào tử nấm mốc trong không khí
Trong không khí, tại phòng lưu kho, 14 chủng nấm mốc đã được phân lập, các chủng được kí hiệu từ Lụ - Lụ Qua phân loại, chủng có kí hiệu là L, và Lạ thuộc cùng một loài, chủng có kí biệu L„ và Lị; thuộc cùng một loài, chủng có kí hiệu L„ và 1; thuộc cùng một loài Kết quả được trình bày ở bảng 8
8ảng 8: Số lượng bào tử nấm mốc trong Im” không khí tai phòng lưu kho Kíhiệu | Sốlượng mốc | Tỷ lệ Téa Khoa hoc chủng | (bao tirfm’) 1 ILS 13 Curvularia brachyspora 1ÿ TT ‘Aspergillus aculeatus 1ÿ TT Penicillium steckit 1+L; 60 ‘Aspergillus oryzae TrrTz 3L5 Penicillium oxalicum Ly 146 17 Curvularia eragrostidis 1ý 26 ‘Aspergillus sp 12+L„ 180.5 21 Cladosporium aigrellum Le 77 ‘Aspergillus sp Lu 345 Penicillium sp Ty 1 Penicillium oxalicum Tổng 859 100 - Số lượng bào tử nấm mốc trên giầy vải chưa xử lý Từ 5 mẫu
lấy vải, lấy tại phòng lưu kho, chúng tôi đã phân lập được 26 chủng tấm mốc, các chủng được kí hiệu từ V, - V„; Qua phân loại, chủng có kí hiệu là V; và V, ở mẫu giấy vải số 2 thuộc cùng một loài, ching có kí hiệu là Vụ, và Vụu, Vụ; và Vụ ở mẫu giảy vải số 4 thuộc cùng một loài, chủng có kí hiệu là V;,, V„„, và V„„ thuộc cùng một loài Kết quả được trình bày ở bảng số 9
Trang 29Vs 18 Aspergillus arenarius Tổng 36 3 Ve 38 Aspergillus arenarius Vị 0.64 Penicillium sp Tổng 4.44 4 Ve 18 Penicillium roseo - purpurewm Vo 90 Aspergillus arenarius Vụ 120 Aspergillus restrictus Vat Vu 10.2 Burotium chevalieri Vụ 24 Aspergillus oryzae
Vụ+Vụy 22 Penicillium oxalicum
Vis 48 Penicillium nalgiovensis
Vụ 06 Penicillium baarnense
Vụ 06 Curvularia eragrostidis
Tổng 248.8
5 Vụ 6 Penicillium sp
Vint Viet Veg | 12.9 Penicillium oxalicum
Van 108 Aspergillus arenarius
Ven 30 Aspergillus zonatus
Ves 0.45 Aspergillus niger
Vis 0.45 Cladosporium nigre lum
Tổng 157.8
Từ những số liệu ở bảng trên cho ta thấy ở mỗi mẫu giảy vải có số lượng và thành phần loài nấm mốc khác nhau do bởi mmức độ nhiễm mốc và kiểu loại gidy vai khác nhau Aspergilhø arenarkø và Asperailluz zonatus là 2 loài thường gặp trên những mẫu giầy vai bị nhiễm mốc, ngoài ra còn có một số loài thuộc chi Penicillium,
Curvularia va Eurotium
Trang 30Tir6 mau gidy da, lấy tại phòng lưu kho, chúng tôi đã phân lập được 14 chùng nấm mốc, các chủng được kí hiệu từ D, - D„„ Qua phân loại, chủng có kí hiệu là D; và
D, ở mẫu giảy da số 2 thuộc cùng một loài Kết quả được trình bẩy ở bảng 10
Bảng 10: Số lượng bào tứ nấm mốc trên giầy da chưa sử lý Thứtự | Kíhiệuchùng | CFUx Tên khoa học mẫu 10% 1 D, 134 Emeticellopsis terticola D; 200 Penicillium brefeldianum Tổng 334 2 D;+D, 317 Penicillium implicatum D; 24 Penicillium roseo - purpureum Tổng 3194 3 De 19 Penicillium oxalicum D; 44 Cladosporium nigrellum D; 06 Aspergillus fumigatus D; 2.5 Penicillium nalgiovensis Tổng 94 4 De 65 Emericellopsis terricola Du 13 Penicillium implicatum Tổng 78 5 De sim Aspergillus oryzae Ds 09 Penicillium oxalicum Tổng 36 6 Du 2.8 ‘Aspergillus oryzae Khác với giấy vải, loại nấm mốc chủ yếu phát triển trên gidy da [A céc loài
thude chi Penicillium dic biet là Đenicilliem bnplicanen, ngoài ra còn có các loài thuộc chỉ Aspergillus abu Aspergillus oryzae, Aspergillus fumigatus va chỉ
Emericellopsis
HLL
-_ Các loài thuộc chi Penicillium
Miu tả đặc điểm phân loại của các chủng nấm mốc phân lập được
Penicillium baarnense: Khuẩn lạc trên môi trường Czapek mọc chậm, đường kính khuẩn lạc 2,3 - 3cm sau 2 tuần nuôi cấy ở nhiệt độ 24 - 26°C, khuẩn lạc mỏng,
trung tâm có khía, bể mặt bằng phẳng, lúc đầu có mẩu trắng sau có mầu nhạt do có
các quả thể, giọt tiết nhiêu, mặt trái không mầu đến mầu vàng nhạt Chởi đôi khi một tầng, thường phân nhánh I - 2 - 3 Metulae có kích thước 10 - 20u x 2,2 - 3,0 Thể bình xếp chặt có kích thước 8 - 10, x 22 - 2,8u Bào từ hình elip, có kích thước 3,0 -
Trang 313,5 x 2,5 - 2,8, doi khi lên tới 7 - 8ụ.x 3,5 - 4,54, nhấn Quả thể hình cầu có kích
thước 100 - 2001, nang bào tử túi L0 - 12, có 8 bào từ túi Bào tử túi hình elip tròn
5,0 - 5,5 x 4,0 - 4,5: doi khi tới 6,0 - 6,5, có hai gờ xích đạo nổi tõ khoảng 0,5 -
1,00, chúng thường kết hợp với nhau chặt tới mức như một gờ, bể mặt lôi, ráp
Penicillium brefeldianum: Hé soi nam và khuẩn lạc phụ thuộc nhiều vào môi trường nuôi cấy Khuẩn lạc có mầu trắng, kem , hỏng đào, nâu nai, mầu lông chuột hoặc mâu lục nhạt đến lục xám Chổi một tầng Thể bình có khích thước 2,5 - 3 x 7 - 104, dạng ống Cuống sinh bào từ ngắn, phỏng nhẹ ở đỉnh, có nhánh bên, kích thước 3 -4x 5 - 150
Penicillium fellutanwn: Khuẩn lạc trên môi trường Czapek mọc chậm, đường kính khuẩn lạc 2 -2,5cm sau 12 -24 ngày ở nhiệt độ phòng, bẻ mặt khuẩn lạc dai,
mép mong, trung tâm phỏng cao, có mầu lục lơ, lục vàng, giọt tiết ít hoặc không có,
mặt trái mầu kem đến mầu hỏng da hoặc tím đỏ nhạt Giá bào từ trần phỏng ở đỉnh có
kích thước 4,0 - 5,0 Chổi 1 tầng, hiếm khi có nhánh Thể bình 6 - 8.x 1,5 - 2,2 Bào
tử hình elip đến gần cầu 2,5 - 3,0, vách dày, nhắn hoặc ráp
enicilliien lomuli: Khuẩn lạc trên môi trường Czapek mọc chậm, đường kính khuẩn lạc 2 - 2,3cm sau 10 ngày ở 24°C Khuẩn lạc nhiều rãnh, phỏng cao, mặt khuẩn lạc nhiều bụi phấn, có mầu da bò đến da bò hỏng nhạt, không phân vùng, không giọt tiết, mặt trái cùng mầu khuẩn lạc, thạch không mảu Chởi 1 ting được sinh ra từ các sợi ngang hoặc có các chổi tế có nhánh gồm 2 - 3 metulae Metulae có kích thước 20 -
25x 22 - 3,3u Thể bình 10 - L5, x 2,5 - 3,5ụ Bào từ nhắn, lúc đầu hình elip sau
hình gần cầu và cầu, kích thước 3,0 - 4,0 - 4,5I
PeniciHuzn implicatum: Khuẩu lạc trên môi trường Czapek mọc chậm, đường kính khuẩn lạc 1,5 - 2cm sau hai tuần ở nhiệt độ 24°C Mặt khuẩn lạc chặt, dai, dạng nhung, nhiều bào từ, có mnầu lục tối Giọt tiết có nhưng ít, mầu vàng hoặc nâu đỏ Mặt trái khuẩn lạc và thạch xung quanh có mmảu vàng đến da cam đến nâu đỏ Chéi Í tầng, hiếm phân nhánh Thể bình có kích thước 12x x 2,0 - 2,3 Bào từ hình clip, kích
thước 2,5 - 3,0 x 2,0 - 2,53, gần cầu 2,5 - 3,0ụ có thể tới 4,5 - 5,00, vách dầy, bề mặt
nhấn hoạc rấp nhẹ
PeniciHuzm lapidosem: Khuẩn lạc trên môi trường Czapek mọc rộng, đường kính khuẩn lạc 5 - ốcm sau 2 tuần ở nhiệt độ phòng Khuẩn lạc bằng phẳng hoặc có tãnh nhẹ, có mau da cam vang, lic già mầu đỗ nhạt, có thể quả mầu nâu da cam, mặt trái có mầu đỏ da cam đến nâu đỏ khi già, giọt tiết nhiều Thể quả hình cầu, gần cầu
300 - 3500, rất cứng, lấy ra rất khó Chởi ít, L tầng, kích thước 10 - 20 x 2,5 - 3,0
Trang 32enicilliien levinem: Khuẩn lạc trên môi trường Czapek mọc khá chậm, đường, kính khuẩn lạc 3 - 4 cm sau hai tuần ở 23°C, thường mỏng, trung tâm cao hơn, có các khía đồng tâm, bẻ mặt khuẩn lạc có dạng nhung, mâu trắng sau có mầu da bò nhạt đến
đa ở vùng mép, lúc già thỉnh thoảng có chó có mầu vàng hay mầu hoa huệ, bào từ ít
Thể quả ít, nằm sâu trong hệ sợi nấm, không phát triển các túi bào tử và các bào tử túi
khi trưởng thành không làm ảnh hưởng đến bể mặt khuẩn lạc Giọt tiết ít, mặt trái khuẩn lạc có mầu vàng đến da bò sẫm Chởi nhỏ, cấu tạo đơn giản Thể bình có 4 - 3 cái trên một vòng, xắp xếp dị thường, thường đứng thành đôi một hay đơa độc, kích thước thay đổi 7 - l2 x 22 - 3,3, đỉnh hẹp tố rệt Bào từ hình cầu, gần cầu, ovaL
hoặc hình thoi, dày,nhắn, kích thước thay đổi 4,0 - 6p va thường từ 3,0 - 8,0
Penicillium nalgiovensis: Khuda lac trén moi trường Czapek mọc chậm, đường, kính khuẩn lạc 3 - 3,3 cm sau hai tuần ở 24°C, bẻ mặt khuẩn lạc bằng phẳng hoặc dạng len, phía sâu có khía nhẹ, lúc đầu mầu trắng, về sau có mầu lục vàng nhạt và thường có mầu đa hoặc hỏng nhạt, vùng mép không mầu Giọt tiết nằm sâu trong khuẩn lạc, có mầu sáng hoặc mầu rượu vang đỏ, mặt trái khuẩn lạc có mầu da cam đến mầu tối, thạch xung quanh khuẩn lạc có mẩu tương tự Cấu trúc sinh bào từ thường là dạng
nhánh được tạ nên từ sợi khí sinh Có metulae, thể bình hiếm khi có nhánh Metulae có
kích thước 8 - l2 x 2 - 3u Thể bình 8 - 10 x 2 Bào từ hình cảu, gần cầu 32 - 3,6, bề mặt nhắn hoặc hơi xốp
Penicillium ochro — chloron: Khuẩn lạc mọc nhanh trên môi trường Czapek, đường kính khuẩn lạc 4,0 — 5,0 cm sau hai tuần ở nhiệt độ 2 5°C, bẻ mặt khuẩn lạc xốp, lúc đầu trắng sau có mầu hỏng nhẹ rồi đến mầu da bò, mặt trái có mầu da bò đến mầu
da Chổi thường tập trung ở vùng mép nhiều hơn vùng trung tâm, kích thước thay đổi,
có 2,3,4 metulae, giữa nhánh và metulae thường khó phân biệt, kích thước 10 - 204: x
2,0 - 2,3, bề mặt ráp Thể bình chặt nhưng tế ở đỉnh, có kích thước 7,5 - 8,5) x 2,001,
đỉnh thể bình hẹp Bào tử hình elip, một đầu nhọn có kích thước 3/0 - 3,3u x 2,0 - 2,5, nhấn hoặc rắp nhẹ
Đenicilliien oxalicusm: Khuẩn lạc trên môi trường Czapek mọc rộng, đường kính khuẩn lạc 3,5 - 5,0 cm sau hai tuần, bề mặt khuẩn lạc bằng phẳng, có đạng nhung với nhiều bào từ hình thành ở các lớp sâu, có màu xanh lục lơ, khi già chuyển thành màu xám đậm , không có giọt tiết, mặt trái không màu hoặc có thể màu vàng Chởi hai tầng không đối xứng, hiếm khi thấy một tảng Có 2 - 3 metulae hoặc metulae và nhánh ở cùng một mức Metulae có kích thước 15 - 20x 3,3 - 3,8 Thể bình có kích thước 9 ~ 13x 3 - 3, với đỉnh thon nhọn Bào từ hình elip, nhãn có kích thước 4,5 - 6,3 x 3-4
Penicillium pusillum: Khuẩn lạc trên môi trường Czapek mọc chậm, đường
kính khuẩn lạc khoảng lcm sau 12 ngày nuôi cấy, khuẩu lạc có mầu xám xanh với các
Trang 33sợi trắng đến tím đỏ, mỏng và dai, mặt trấi có mầu tím sẫm đến tím nâu với sắc tố khuyếch tần vào môi trường Chổi thường 1 tảng, đôi khi có các metulae trộn lẫn với
các thể bình Thể bình hình trục, có kích thước 10 - 15 Jx 1,8 -2,0 Bào từ nhắn, lúc đầu hình trứng, sau hình cầu hoặc gần cảu, kích thước 2,0 - 2,5
Penicillium roseo - pøpureum: Khuẩn lạc trên môi trường Czapek mọc rất chậm, đường kính khuẩn lạc 1,5 - 2cm sau hai tuần ở nhiệt độ 24°C, khuẩn lạc có mầu
trắng xám đến mầu da hoặc hỏng nhạt, sau có mầu lục của đậu Hà Lan Giọt tiết ít
hoặc không có, mầu hỏng đến mầu tím đỏ Mặt trái khuẩn lạc có mầu da cam đỏ với
môi trường thạch xung quanh có mầu tương tự nhưng nhạt hơn Chổi một tảng Thể bình có kích thước 6 - 7u x 1,5 - 2,0 Bào tử hình cầu, gần cầu, kích thước 2,0 - 2,5JL,
bề mặt rap nhẹ
Peniciliien steci Khuẩn lạc trên môi trường Czapek mọc khá chậm, đường kính khuẩn lạc đạt 2cm sau hai tuần ở 25°C Mặt khuẩn lạc dạng nhung hoặc sợi nhẹ,bằng phẳng hoặc có tãnh, mép khuẩn lạc có mầu trắng, mầu xanh lục, mầu xám
đậm, có nhiều bào từ Chổi 2 tầng, có 3 - 5 metulae, kích thước metulae I2 - L5JL x 2,8
- 3,0ụ Thể bình 8,0 - I0 x 1,8 - 2,2) Bào từ hình cầu, gần cầu, nhỏ 2,0 - 2,5u, bể
mặt nhắn hoặc tấp nhẹ
-_ Các loài thuộc chỉ Áspergillus
Aapergillus aculeatus: Khuẩn lạc mâu nâu đen, đường kính khuẩn lạc khoảng
3,5cm sau 2 tuần nuôi cấy trên môi trường Czapek ở 25°C Khôngsinh giọt tiết Sắc tố
hoà tan màu vàng nhạt Mặt sau khuẩn lạc từ không mầu đến mầu vàng nhạt Đầu cuống sinh bào từ hình cầu hoặc gần cầu, kích thước 35 - 1001 Thể bình 6.0 - 10,0: x
3,73 Bào tử hình cầu, gần cảu, trứng, có gai, kích thước 3,5 - 5,010
Aspergillus arenarius: Khuẩn lạc mầu lục vàng xăm, đường kính khuẩn lạc
khoảng I,0cm sau 2 tuần nuôi cấy trên môi trường Czapek ở 25°C Giọt tiết ít Mặt sau
khuẩn lạc có mầu vàng nâu xẫm Đầu cuống sinh bào tử kiểu xoắn hình thìa, kích
thước 7 - LIụi Metulae có kích thước 6 - L0 x 3,3 - 4,4)u Thể bình có kích thước 5,0 - 6,3 x 2,0 -2,5I.Bào tử cầu, gần cầu, kích thước 2,2 - 2,8, bể mặt nhãn, vách đầy
Aaperaillus asperescens: Khuẩn lạc mâu vàng, lục nâu sẵm, đường kính khuẩn
lạc khoảng 2,5cm sau 2 tuần nuôi cấy trên môi trường Czapek ở 25°C Giọt tiết nhiều,
giọt nhỏ, mầu sáng đến vàng Sắc tố hoà tan từ không mầu đến mầu vàng nhạt Mặt sau khuẩn lạc từ mầu vàng đến mầu da cam Đầu cuống sinh bào từ có hình bán cầu
đến cầu, kích thước 9 - 15) Metulae có kích thước 6 - 9J x 3 -3,5JL Thể bình có kích
thước 7,5 - 9u x3 - 3,3ụ Bào từ hình elip đến hình cảu, bẻ mặt nhắn đến ráp, kích
thước 4 -6JLx 3,5 - 4,30
Aspergillus fumigatus: Khuẩn lạc mâu lục xám, đường kính khuẩn lạc khoảng
Trang 34Không sinh sắc tố hoà tan Mặt sau khuẩn lạc không mầu đến mầu vàng Đầu cuống
sinh bào tử trần có hình bình, kích thước 20 - 30 Thể bình có kích thước 6 - 8x2 -
3u Bào từ hình cầu, hơi cảu, bề mặt hơi ráp, kích thước 2 - 3,50
Aspergillus niger: Khuda lac mâu nâu tối, nâu đen, đường kính khuẩn lạc khoảng 4,8cm sau 2 tuần nuôi cấy trên môi trường Czapek ở 25°C Không sinh giọt tiết, không tiết sắc tố hoà tan Mặt sau khuẩn lạc có mầu vàng ngà Đầu cuống sinh
bào từ hình cầu, kích thước 16 - 80 Metulae 5,6 - 38u x 3,8 - L3ụ Thể bình 3,6 -
14,3ux2,4 - 520 Bào từ cầu, gần cầu, bề mặt gai ráp, kích thước 3,2 - 4,8)
Aspergillus oyzae: Khuda lac mau nâu vàng, đường kính khuẩn lạc khoảng
3,5cm sau 2 tuần nuôi cấy trên môi trường Czapek ở 2 5°C Không sinh giọt tiết, không
tiết sắc tố hoà tan, mặt sau khuẩn lạc không màu Đầu cuống sinh boà từ gần cảu, kích
thước 40 - 75L Metulae 8,0 - 12,0 x 4,0 - 5,0 Thé bioh 8,0 - 10,0, x 3,0 - 3,5
ào từ hình elip, cầu, hoặc gần cầu, kích thước 4,5 - 10,0
Aspergillus restrictus: Khuẩn lạc màu lục, đường kính khuẩn lạc khoảng 1,0cm sau 2 tuần nuôi cấy trên môi trường Czapek ở 235% Không sinh giọt tiết Không hình thành sắc tố hoà tan Mặt sau khuẩn lạc có mầu lục nhạt hoặc lục tối Đầu cuống sinh
bào tử có hình bình, bán cầu, kích thước 6 - 12 Thể bình có kích thước 5,5 - 10 x 2
~3,3u Bào tử hình trụ, elip hay hình quả lê, bẻ mặt ráp, kích thước 4 - 3Jt x 3 - 3,3 - 6x4ụ
Aspergillus sydowi: Khuda lac mau lục xanh, đường kính khuẩn lạc khoảng
4,0cm sau 2 tuần nuôi cấy trên môi trường Czapek 6 25°C Giọt tiết nhiều, có mau
rượu vang đỏ Không sinh sắc tố hoà tan Mặt sau khuẩn lạc có màu đỏ rượu vang
Đầu cuống sinh bào từ trần có hình gần cầu, kích thước 15 - 20 Metulae có kích
thước ố - 7u x2 - 3u Thể bình có kích thước 7 - 10x 2 - 3u Bào tử có hình cầu, gần
cầu, bẻ mặt ráp, kích thước 2,5 - 3,3Jt
Aspergillus zonatus: Kbudn lac mau nâu vàng, đường kính khuẩn lạc khoảng
6,5cm sau 2 tuần nuôi cấy trên môi trường Czapek ở 25°C Không sinh giọt tiết Mặt
sau khuẩn lạc có mầu nâu nhạt Đầu cuống sinh bào từ có hình cầu hoặc bán cầu, kích
thước 20 - 40 Metulae có kích thước 6,5 - 8,0 x 2,5 - 3,0 Thể bình 7,0 - 9,0 -
13,01 2,6 Bao tir binh oval, kich thuve 2,8 - 3,4 x 2,2 -2,8u
- Các loài thuộc chỉ Cuvularia
Cuwularia brachyspora: Khuda lạc đẩy, màu nâu đen hoặc nâu sáng, bể mặt
khuẩn lạc dạng nỉ hoặc đôi khi xốp Sợi nấm gần như trong suốt hoặc nâu, nhắn Hạch nấm đen, hình trụ Cuống sinh bào từ trản, đơn độc hoặc từng nhóm, thẳng hoặc khúc khuỷ, có mầu nâu, gần đỉnh nhạt hơn Bào từ sinh ra tạo thành cụm ở đỉnh cuống, thường hơi cong, có hình elip hoặc hình thoi tròn nhưng thường không đối xứng, 3 vách ngăn, vách giữa dày hơn, tối hơn, kích thước 19 -26 x 10-14
Trang 35Cuvularia eragrostidis: Khuẩ lạc đen, diy, soi nấm mâu nâu đến mầu nhạt Hach adm mầu đen, hình trụ Cuống sinh bào từ mọc đơa độc hoặc trong nhóm ở tận cùng bay ở bên cạnh sợi nấm, dạng thẳng, hoặc khúc khuỷ Bào từ bình clip, thường có ba vách ngăn, vách giữa ở giữa bào từ, thường dài, đối xứng, kích thước 22 - 33 x 10
-L8u hoặc có thể lên tới 18 - 37x LÍ -2000
Cuvularia pallescens: Khuẩn lạc không chặt, mẫu nâu, nâu xám như tóc Sợi nấm chìm, phân nhánh, ngăn vách, có mầu nâu nhạt, nhãn Hạch nấm không có Giá bào từ trần đơn độc hoặc thành nhóm, đơn giảa hoặc phân nhánh, thẳng hoặc cong, phỏng ở đỉnh Bào tử thẳng hoặc cong nhẹ, có 3 vách ngăn ngang, hình clip 21 - 32x
8- 1Iụ,
~ Một số loài thuộc các chỉ khác
Fusarium fusarioides: Khuẩu lạc mâu trắng sau trở thành mâu đỏ đến hỏng, tốc độ phát triển 3 - 3 cm sau hai tuần, khuẩn lạc khô Khuẩn lạc trở nên tối mâu hơn sau 10 - 14 ngày với sự với sự bình thành của các bào tử áo có mầu nâu Các bào từ nhỏ được hình thành từ các tế bào sinh bào từ trần hướng ngọn, hình chuỳ bay hình chuỳ ngược Bào từ nhỏ, khô, hình quả lẽ đến chuỳ với đỉnh tròo, thường một vách ngăn, kích thước 13 - 15 x 3 - 4,5 Các bào từ lớn bình thành từ các thể bình từ cuống sinh
bào từ trên mặt thạch, hình thùng Bào từ lớn hình thoi, đỉnh nhọn đến tròn, có 4 - 6 vách ngăn, kích thước 40 - 55 x 3 - Ốụu
Emericellopsis terricola: Khuda lac trên môi trường OA có mâu hồng, ẩm ướt, đường kính khuẩn lạc từ 4 - 7cm sau 2 tuần ở nhiệt độ 24°C, Bào từ túi hình clip, có kích thước 6,3 - 8,5 x 4,1 - 3 Bào từ trần hình clip, có kích thước 4,7 - 8,0 2,1 -
32_
Cladosporium nigrellum: Khuda lạc ướt, mẫu nâu vàng sẵm đến nâu đen, dạng nhung Cuống sinh bào từ trả, khúc khuỷ, mầu nâu đỏ, gản đỉnh nhạt, kích thước 250ụ x 5 - 9p Bào từ đơn giản hoặc từng chuối phân nhánh, có bình trụ, binh elip, hình thoi hoặc hình hạt chanh, có từ 0 - 3 vách ngăn, nhấn, kích thước 5 - L5 x 4 - 7ị Memnoniella echinata: Khuda lạc có mâu đen, đạng bạt, mặt trấi mẫu vàng đến qâu xám Giá bào tử trần có kích thước 70 -90/u x 3 -5Ju, lúc đầu trong suốt, sau mầu vàng lục, đôi khi ráp Thể bình hình trứng ngược đến clip, mầu vàng lục nhạt, có kích thước 7 - 10ụ x 3 - 4u Bào từ thành chuối, bình cảu bơi khuyết, ở dưới bào từ lúc đầu nhấn về sau ráp, có mnầu xám vàng lục tối, kích thước 3 -6)¿
Cercospora gerberac: Khuẩu lạc sinh sản lưỡng tính Giá bào từ trần trong bó giá, có kích thước 70 - 170 x 4 - 5u Bào tử trong suốt, có 8 - 30 vách ngăn, kích
thước 80 - 3804 x 3 - 4u
Trang 36đơn giản, khi chín vỏ nang bào từ nứt đôi Giá bào từ trần không có có, bào từ trần
mầu tối, có vạch với các sợi Sporangiola có ít bào từ, hình elip, không có lõi, sinh ra trên đỉnh bọng của các giá bào từ trần phân nhánh Bào tử trần nhắn hoặc có vạch Dị tan, bào từ tiếp hợp sinh ra giữa các dây treo
Myrothecium verrucaria: Khuẩn lạc trên môi trường thạch khoai tây với hệ sợi nấm xốp bông và các khối bào từ trần trên đệm gid mau lục đen hoặc đen Sợi nấm nhấn, không mầu, kích thước 1,5 - 3\ Đệm nấm thường chỉ có một lớp mỏng Giá bào
từ trần tạo thành cụm trong đệm giá hoặc thành cụm nhỏ, ngăn vách không mầu, có 2 -
4 nhánh ở đỉnh giá bào tử trần hoặc đôi khi có vách ngang dưới đỉnh, phân nhánh 2 đến 3 lần, kích thước 2 - 3u x 12 - 300 Thể bình thành cụm 3 - 6 cái trên đỉnh các nhánh tận cùng hình trụ tròn đầu, đôi khi gần hình chuỳ, không mầu, mầu tối ở xung quanh lố đỉnh, kích thước 1,5 - 2,5„ x 10 - L5 Bào từ trần hình elip, không ngăn vách, nhãn, một đầu nhọn, một đầu bẹt, kích thước 2 - 3,5 x 6 - 81, tao thành khối mầu đen Các sợi nấm ở dìa đệm nấm phân nhánh, cong, có một nốt sản
Euotiem chevalieri: Khuẩn lạc lục sáng hoặc vàng nâu, đường kính khuẩn lạc khoảng 2,5cm sau 2 tuần nuôi cấy trên môi trường Czapek ở 25°C Mặt sau khuẩn lạc
mầu đỏ da cam đến nâu Đầu cuống sinh bào từ hình cầu, kích thước 25 - 35 Thể
bình 5,0 - 7,0u x 3,0 - 3,3ụ Bào tử trần hình oval đến elip, bề mặt có gai Bào từ túi
hình hạt đậu, kích thước 4,6 - 5,0 x 3,4 -3,8ui, bê mặt ráp, 2 gờ xích đạo mỏng, uốn
cong
THL1.4 Kết luận
HHI.1.4.1 LIT chùng nấm mốc đã được phân lập từ không khí, trên bể mặt nguyên liệu, trên bể mặt giá để nguyên liệu, trên bể mặt thiết bị, trên các sản phẩm giầy vải, giy da tại kho nguyên liệu, phân xưởng pha cất, phân xưởng may, trên day chuyên sản xuất giày vải, trên dây chuyên sản xuất giy da, tại phòng lưu kho ở công ty giầy da Hà Nội Dựa vào các đặc điểm hình thái khuẩn lạc, đặc điểm nuôi cấy trên các môi trường, hình thái cuống sinh bào từ và hình dạng bào tử, 108 chủng đã xác
định được tên loài và chỉ Số còn lại không thể xác định được do có các đặc điểm khác
với các lồi đã mơ tả HƠI các loài nấm mốc khác nhau tập trung chủ yếu vào 3 chi: Aspergillus, Penicilliwn, Trong không khí tại các phân xưởng có hón hợp các loại bào tử của Curvularia
111.1.4,3, Teen bé mit aguyén liệu có các loài nấm mốc tập trung chủ yếu vào 2
chi: Aspergillus, Penicillium
THL.1.4.4, Các sản phẩm giây vải thường nhiễm các loài nấm mốc thuộc chiAspergillus
Trang 37111.1.4.5 Các sản phẩm giảy da thường nhiễm các loài nấm mốc thuộc chỉ Penicillium
111.1.4.6 Tình hình ô nhiễm nấm rất nặng nể ở tất cả các khâu sản xuất, lưu kho, trong không khí cũng như trên nguyên liệu và máy móc nhiễm Đó là nguyên
nhân nhiễm nấm mốc trên sản phẩm
TH2 Các hoá chất sử dụng và công nghệ liên quan
IL2.1 TÔng quan
Vấn đề chống mốc cho các sản phẩm ngành da-giẩy từ lâu đã được các nước có
nên công nghiệp da-giẩy phát triển hết sức quan tâm, có rất nhiều công trình được
nghiên cứu ngăn chặn sự phá hoại của nấm mốc đối với các sản phẩm ngành da-giảy 'Việc dùng hoá chất, các phương pháp sinh học, các biện pháp vật lý phụ trợ như dụng cụ sấy, phụ tẩm hoá chất, máy làm lạnh, máy chiếu tỉa từ ngoại để diệt khuẩn đã và đang được áp dụng như là một công cụ hữu hiệu nhất để ngăn chặn sự phá hoại của
nấm mốc
Có nhiêu phương pháp để chấng sự phá hoại của nấm mốc, như dùng hoá chất băng việc phối hợp giữa các chất phenol và azole hoặc hợp chất motpholine để bảo vệ đa tươi và da thành phẩm, chống được sự phá hoại của vi khuẩn khi lưu trữ và bảo quản da tươi cũng như da thành phẩm trong một thời gian dài Điểm ưu thế của phương pháp này là đã phát hiện ra các hợp chất azole như benzimidazole, imidazole, triazole va din xuất của morpholine khi dùng phối hợp với các hợp chất phenol bảo
quản tốt da tươi và da thành phẩm trong suốt quá trình sản xuất và lưu kho Chỉ cần dùng
tối thiểu một chất triazole hoặc benzimidazole hoặc imidazole hoặc din xuất của morpholine phối hợp với hợp chất phenol cũng đủ để bảo vệ da tươi và da thành phẩm
trong sản xuất và lưu kho
Phương pháp dùng các hoá chất để tiêu diệt nấm mốc bằng cách sử dụng hón hợp 2-(thiocianometylthio) benzothiazole (TCMTB) và 3-iodo-2-propynyl-N- butylcatbamate (IPBC) với một số phụ gia như polyoxyetylene triglyceride, polyalkylene glycol ether, xanthan gum và dipropylene glycol dưới dạng sữa làm
thuốc diệt nấm Hỗn hợp được thêm một mol polyoxyetylene triglyceride để trộn IPBC
và TCMTB sau đó thêm dung dịch chứa xanthan gum trong dipropylene glycol Thành phần hón hợp này rất phù hợp cho việc bảo quản trong công đoạn thuộc xanh cũng như trong công đoạn thuộc da Phương pháp này cũng nói lên rằng thành phản các hoá chất
trên đặc biệt hữu hiệu trong công nghiệp sản xuất da thuộc, ngoài ra còn thể ấp dụng
trong sơn nước, keo nước và có thể nói rằng hốn hợp này diệt mốc cũng rất hiệu quả đối với một số lĩnh vực khác như ngăn chặn sự phá hoại của nấm mốc trên các loại nguyên vật liệu và thành phẩm là vải sợi, keo dần và mỹ phẩm
Trang 38hợp chất polyme siloxane và silane như trialkoxysilane để bảo quản các nguyên vật liệu vô cơ, hữu cơ bằng cách tẩm vào các nguyên vật liệu này với các chất trên trong
cơng đoạn hồn tất để có một tính chất đặc biệt trong quá trình bảo quản nguyên vật
liệu chống lại sự tác động của môi trường, đây là biện pháp sinh thái nhằm cách ly
nguyên vật liệu với bào từ nấm và độ ẩm trong môi trường có thể áp dụng trong phần
hoàn thiện khi sản xuất giảy da, nhưng các thiết bị ngâm tẩm có cấu tạo ra sao thì chưa thấy các tác giả đẻ cập đến; hoặc là phương pháp phun sấy và các biện pháp cô lập hơi dung môi bay ra môi trường khi phua thì chưa thấy đề tài nêu ra
Phương pháp sử dụng hoá chất được sử dụng trong bảo quản da nguyên liệu
cũng đã được Viện nghiên cứu Da giẩy nghiên cứu năm 1977, nhưng chỉ áp
dụng để chống các vi khuẩn thâm nhập vào da tươi nguyên liệu, chưa quan tâm
đến công nghệ chống mốc da thành phẩm và lưu kho ngay trong các cơng đoạn
thuộc
;HỊ2.2 Hố chat diét ndm méc
H12.2.1 O-phenylphenol(O PP} va muối kim loai kiém Na-OPP
OPP hoặc muối kim loại kiểm của nó (Na-OPP) ở dạng chất khử trùng kết hợp với andehit và nitơ để kháng khuẩn, có thể dùng để pha vào các dung địch nước như: keo nước, chất phân tán keo, dung dịch đậm đặc, các loại chất phụ gia, dung dịch
huyền phù, dung dịch màu, men gốm sứ, xi giảy, sáp nhữ tương ở đây chỉ quan tâm đến công dụng ngành công nghiệp Da-giảy
Dac tinh hoa hoc cia OPP
1 Thành phẩn: 2-phenyphenol, ortho-phenylphenol
2 Đặc điểm: đạng vảy, không màu, có mùi nhẹ của phenol Hoặc
dang tỉnh thể, mầu hơi vàng
3 Hầm lượng TK: 99.5% mio
4 Điểm chẩy: 56°C min
5 Trọng lượng riéog: 1.26 g/em*(6 20°C) 6 Trong lugng (flakes):6 50kg fm?
7 Ap suất hơi: ~0.0007 mbar (ở 20°C); Lmnbar (ở 100°) 8 Điểm sôi: ~286°C (ở 1013mbar)
Trang 3913 Thời hạn sử dụng: 2 năm trong điều kiện bảo quản tốt Đặc tính hoá học của Na-OPP
1 Thành phẩu: Natri-2-phenyphenolate
2 Đặc điểm: dạng vấy, màu hơi vàng, là muối ngậm nước 3 Hầm lượng TK: 99.5% mio C,,H,NaO.4H,O (Na-OPP.4H,0) 4 Trọng lượng(flakes):400-450kg (m? 5 Độ tan - Trong nước: 1200g/L - Isopropanol: 1300g/1 - Etylic: 2000g/1 6 pH: ~L1.1-11.8(dung địch nước 2 %)
7 Độ bên: không quá PH=14
8 Thời bạn sử dụng: 2 năm trong điều kiện bảo quản tốt
Cách sử dụng OPP và Na-OPP
Các sảa phẩm không chứa balogen như OPP và Na-OPP đặc biệt có tác dụng tiêu điệt các loại vi khuẩn, nấm men, nấm mốc (xem bảng L)
Trước khi sử dụng OPP và Na-OPP, cản phải hoà tan hoặc trong dung địch xút chứa một chút alcohoL (ahư glycol), hoặc bốn hợp nước/alcohol Để pha được dung địch 30% trong dung địch xút cản Lkg OPP hoa tan trong 1.85L nước và 0.3kg xút 50% Không cản phải pha sắn dung địch này vì nó sẽ chuyển đản thành dung địch như Na-OPP, đương nhiên nó dễ dàng tan trong nước
Trong các dung dịch nước có pH<9, độ tan cia OPP là rất nhỏ nếu như muốn có một dung địch OPP đậm đặc để bảo quản tốt nhất da nguyên liệu thì rất khó, điều đó cũng đúng với Na-OPP Thậy vậy, nếu pH<9, dung dịch Na-OPP sẽ giải phóng ra OPP, trường hợp nầy adi lên tầng, ChỈotocrcsol(CMC) hoặc muối natti- chlorophenolate, được dùng hoặc riêng hoặc phối hợp với OPP, Na-OPP, hoặc có thể phối hợp với một số chất hoạt hoá khác thì hiệu quả diệt mốc mới tốt
OPP và Na-OPP có sự bền nhiệt cao, tuy nhiên sự giải phóng các phản từ phenol tu do trong quá tình sản xuất như sấy keo là không thể tránh khỏi, các phân tir phenol boat tính rất dễ bay hơi Nếu như pH của dung địch>9, sẽ giảm sự phóng thích các phần từ phenol
OPP và Na-OPP cũng có thể kết hợp với nhau trong các sản phẩm tắn như: keo bột, mực ia cũng như ở các sản phẩm chau chuốt OFP, Na-OPP cũng có trộn và agbiên lẫn với bột để cho vào các sản phẩm rắn
Trang 40Bang 11 Nong 46 nhé nhat (mg/l) chéng duoc céc loại nấm mốc của OPP, Na-OPP (trong moi trường agar-agar) Vi khuẩn
Aeromonas puactata 200 | Leuconnostoc 100-200
Bacillus mycoides 100-300 | Proteus mirabilis 200
Bacillus subtilis 100-200 | Pseudomonas aeruginosa 1500
Desulfovibrio desulfuricans 50 | Pseudomonas flourescens 1000
Bate robacter aerogenes 200 | Staphylococus aureus 200-300
Escherichia coli 200
Nấm men
Candida albicans 200 | Saccharomyces bailii 100
Candida kruseL 200 | Torula rubra 100
Rhodotorula mucilaginosa 100 | Torulautilis 100-200
‘Saccharomyces cerevisiae 200
Nấm mốc
Alternaria teauis 100-200 | Mucor racemosus 200
‘Aspergillus flavus 100 | Penicilium brevicaule 35
‘Aspergillus niger 30-100 | Penicilium citrinum 35
Aspergillus terrues 200 | Penicilium digitatum 35
‘Aspergillus ustus 150 | Penicilium funiculosum 73
Aureobasidium pullulans 35 | Enicilium glaucum 30
Cephaloascus fragrans 200 | Penicilium italicum 35
Cephaloascus pilifera 100 | Phanerochaete sanguinea 100
Ceratomium globosum 50-100 | Phialophora fastigiata 200
Cladosporium berbarum 60 | Coriolus versicolor 65
‘Cladosporium sphaerospermum 40 | Rhizopus stolonifer 200
Gliocladium vireas 200 | Stereum sang uinolentum 100 Lentious tigriaus 100 | Trichloderma viride T5
Trichlophyton 30
mentagrophytes
Những lưu ý đối với các sản phẩm OPP, Na-OPP
OPP va Na-OPP là các sản phẩm ở dạng tắn, phải tránh tiếp xúc với da Cẩn thận khi vận chuyển, sử dụng, tránh hít phải bụi của chúng Có thể tham khảo nhưu lưu ý trên nhãn bao bì, và công nhân phải đeo đẩy đủ bảo hộ lao động như quản áo, găng tay, khẩu trang nếu bị dây vào da, phải rừa ngay chó da đó bằng xà phòng và xối thật nhiều nước, nếu bị bán vào mắt, thì phải rim sạch bằng nước, nếu không khỏi thì phải đến bác sĩ ngay, quản áo nhiễm bẩn phải bỏ ra ngay