Hợp tác nghiên cứu đặc điểm hình thái não bộ và hoạt động nhận thức trên bệnh nhân tâm thần phân liệt và động vật thực nghiệm các sản phẩm

BỘ KHOA HỌC VÀ CƠNG NGHỆ BỘ QUỐC PHỊNG HỌC VIỆN QUÂN Y NHIỆM VỤ HỢP TÁC QUỐC TẾ VỀ KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ THEO NGHỊ ĐỊNH THƯ HỢP TÁC NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM HÌNH THÁI NÃO BỘ VÀ HOẠT ĐỘNG NHẬN THỨC TRÊN BỆNH NHÂN TÂM THẦN PHÂN LIỆT VÀ ĐỘNG VẬT THỰC NGHIỆM CÁC SẢN PHẨM CỦA ĐỀ TÀI Cơ quan chủ quản: Bộ Quốc phòng Cơ quan chủ trì: Học viện Quân y Chủ nhiệm đề tài: PGS.TS Trần Hải Anh 9776-1 Hµ néi - 2013 DANH MỤC CÁC SẢN PHẨM CỦA ĐỀ TÀI TT Tên sản phẩm Số lượng Báo cáo tóm tắt 01 Mơ hình gây bệnh TTPL khỉ 01 Mơ hình gây bệnh TTPL chuột 01 Báo cáo tác dụng thuốc lên trí nhớ, hành vi mơ hình động vật gây bệnh TTPL 01 Một số biến đổi gen DISC1 bệnh nhân tâm thần phân liệt 01 Ghi Báo cáo phân tích biến đổi hình thái não bệnh nhân TTPL phim MRI 01 Bài báo khoa học 15 Đào tạo thạc sỹ 03 Đã bảo vệ Đào tạo tiến sĩ 02 Đã bảo vệ BỘ KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ BỘ QUỐC PHÒNG HỌC VIỆN QUÂN Y NHIỆM VỤ HỢP TÁC QUỐC TẾ VỀ KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ THEO NGHỊ ĐỊNH THƯ HỢP TÁC NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM HÌNH THÁI NÃO BỘ VÀ HOẠT ĐỘNG NHẬN THỨC TRÊN BỆNH NHÂN TÂM THẦN PHÂN LIỆT VÀ ĐỘNG VẬT THỰC NGHIỆM Cơ quan chủ quản: Bộ Quốc phịng Cơ quan chủ trì: Học viện Quân Y Chủ nhiệm đề tài: PGS.TS Trần Hải Anh Chun đề: MƠ HÌNH GÂY BỆNH TÂM THẦN PHÂN LIỆT TRÊN KHỈ Hà Nội - 2012 MỤC LỤC GIỚI THIỆU ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Đối tượng nghiên cứu 1.1 Thí nghiệm 1: đánh giá ảnh hưởng PCP MAP lên hành vi khỉ 1.2 Thí nghiệm 2: đánh giá ảnh hưởng Ketamin lên hành vi khỉ Ghi phân tích hành vi khỉ KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU Kết thí nghiệm Kết thí nghiệm 14 2.1 Kết vận động khỉ 14 2.2 Kết hành vi xã hội khỉ 15 KẾT LUẬN 19 TÀI LIỆU THAM KHẢO 20 GIỚI THIỆU Bệnh nhân tâm thần thể nhiều tổn thương hành vi như: rối loạn kỹ xã hội (ví dụ như: tránh tiếp xúc xã hội, tảng lờ môi trường xung quanh, cô lập.v.v ) vấn đề phổ biến bệnh nhân tâm thần Dẫu chế thần kinh rối loạn bệnh tâm thần chưa rõ rang (8) Hiện có hai giả thuyết thần kinh hóa học chấp nhận cách rộng rãi bệnh tâm thần là: giả thuyết hệ Dopamine giả thuyết hệ N-methyl-D-aspartate (NMDA) Những giả thuyết dựa quan sát chất đối kháng thụ cảm thể NMDA glutamate (Phencyclidine (PCP), Ketamin) methamphetamine (MAP) hay amphetamine, tác nhân gây nên tăng giải phóng dopamine tạo nên nhiều triệu chứng tương tự triệu chứng tâm thần người (4,7,17,28,31,32) Trên động vật hai triệu chứng gây nên bất thường hành vi như: tăng cường vận động, điều hòa, hành vi lặp lại, lắc đầu liên tục, rút lui khỏi tương tác xã hội, mà tương ứng với triệu chứng bệnh tâm thần (5,9,21,23,24,29,30) Đặc biệt, sử dụng liều thấp kéo dài PCP ketamin tạo nên thay đổi chuyển hóa hóa chất thần kinh não chuột ,, tương tự thay đổi vùng prefrontal người (26) Dấu phần lớn nghiên cứu điều tra tác dụng tâm thần PCP, Ketamin MAP sử dụng loài gặm nhấm (1, 6,19, 29) có vài nghiên cứu thực loài linh trưởng ( 10, 12, 21) Trên loài linh trưởng phần lớn nghiên cứu tập trung nghiên cứu tác dụng cấp tính PCP, Ketamin hành vi cá nhân tập nhận thức (10,12,14,30) Một vài nghiên cứu điều tra tác dụng bán trường diễn PCP, Ketamin động vật linh trưởng ghi nhận sử dụng bán trường diễn PCP gây nên khuyết thiếu tập mà liên quan đến vùng vỏ não trán trước (18) Trong nghiên cứu để thành lập mơ hình bệnh tâm thần động vật việc sử dụng Ketamin bán trường diễn, PCP liều thấp trường diễn mà cho gây nên biến đổi hoác chất thần kinh loài gặm nhấm (26), ảnh hưởng bán trường diễn Ketamin, trường diễn PCP cấp tính MAP hành vi xã hội khỉ điều tra ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Đối tượng nghiên cứu Nghiên cứu chia thành phần 1.1 Thí nghiệm 1: đánh giá ảnh hưởng PCP MAP lên hành vi khỉ Nghiên cứu sử dụng khỉ (macaca fuscata, đực cái) cân nặng từ đến 9kg Toàn khỉ chia thành hai nhóm: Nhóm đối chứng (3 con) nhóm PCP (3 con) Khỉ thuộc nhóm PCP tiêm trường diễn PCP với liều 0,3mg/kg /ngày thời gian tháng (tiêm bắp thịt) Khỉ thuộc nhóm đơi tiêm thêm MAP với liều 2.0mg/kg (tiêm bắp thịt) ngày kiểm tra hành vi Khỉ thuộc nhóm đối chứng cúng nhận lượng tương ứng nước muối sinh lý MAP PCP hòa tan trước tiêm nước muối sinh lý 0,9%, PCP tiêm ngày buổi chiều lúc 16 MAP tiêm vào buổi sáng 45 phút trước kiểm tra hành vi Sau bảy tháng sử dụng PCP hành vi khỉ phân tích 1.2 Thí nghiệm 2: đánh giá ảnh hưởng Ketamin lên hành vi khỉ Nghiên cứu sử dụng khỉ (macaca mulusta, đực cái) cân nặng từ đến 6kg Toàn khỉ chia thành cặp Khỉ thuộc nhóm PCP tiêm Ketamin với liều 0,3mg/kg /ngày thời gian 14 ngày (tiêm bắp thịt) Vận động cá nhân khỉ phân tích trước, sau tiêm thuốc, Hành vi xã hội khỉ phân tích trước, sau tiêm thuốc Ghi phân tích hành vi khỉ Một chuồng lớn tạo chuồng nối với sử dụng để phân tích hành vi khỉ Trong chuồng có vách ngăn cách chuồng trung tâm hai chuồng bên, vách dỡ bỏ bắt đầu kiểm tra hành vi khỉ Đỉnh chuồng lớn bao phủ miếng nhựa suốt mà cho phép việc ghi hành vi khỉ máy quay CCD đặt đỉnh chuồng khỉ Trước kiểm tra hành vi, khỉ đặt vào hai chuồng bên có đến lần gặp để làm quen Thí nghiệm : khỉ đặt vào chuồng bên, (16 sau tiêm PCP với khỉ thuộc nhóm PCP, 45 phút sau tiêm MAP với khỉ thuộc nhóm PCP+MAP) khỉ có 10 phút để làm quen, sau vách ngăn dỡ bỏ vòng 60 phút Máy quay CCD gắn đỉnh trần nhà gửi tín hiệu hình ảnh khỉ tới máy tính tín hiệu phân tích tự động tức sử dụng phần mềm thương mại (PrimateScan PrimateSocialScan cơng ty Clever Sys, Mỹ) Tín hiệu cất giữ ổ cứng máy tính để phần tích tự động phân tích kiểm tra mắt thường Phần mềm phân tích hành vi phát nhiều 15 loại hành vi xã hội hành vi cá nhân khỉ chuồng Bảng Phân loại định nghĩa hành vi xã hội khỉ 1) Grooming: khỉ cầm rẽ lông khỉ khác 2) Mounting: khỉ cưỡi lên khỉ khác 3) Bidirectional approach: hai khỉ tiến lại gần 4) Unidirectional directional approach: khỉ tiếp cận khỉ khác 5) Leaving: khỉ rời xa khỉ khác 6) Following: khỉ theo sau khỉ khác 7) Proximity: khoảng cách hai khỉ nhỏ 60cm Thí nghiệm 2: + Vận động cá nhân ghi lại trước, sau tiêm thuốc Ketamin 10 phút, sau tiêm thuốc Ketamin 14 ngày: khỉ cho vào buồng lớn, tồn q trình vận động khỉ đựợc máy quay CCD gắn đỉnh trần nhà ghi lại gửi tới máy tính tín hiệu ghi lại phân tích sau sử dụng phần mềm phần mềm thương mại Mỹ (Anymaze, công ty Stoeling, Mỹv Các thông số vận động khỉ bao gồm: quãng đường, vận tốc vận động trung bình khỉ chuồng thí nghiệm (toàn chuồng lớn) khu vực trung tâm (chuồng nhỏ giữa) + Hành vi xã hội khỉ ghi lại trước tiêm thuốc sau 14 ngày tiêm thuốc: hai khỉ đôi cho vào buồng lớn, tồn q trình tương tác khỉ đựợc máy quay CCD gắn đỉnh trần nhà ghi lại gửi tới máy tính tín hiệu ghi lại phân tích sau sử dụng phần mềm phần mềm nguồn mã mở (Kinovea), quan sát mắt thường Các hành vi xã hội nghiên cứu phân loại định nghĩa thí nghiệm Các loại hành vi xã hội khỉ liệt kê bảng Định nghĩa chi tiết hành vi ghi nhận báo trước (15,17,21,24) Table 2: Phân loại định nghĩa hành vi khỉ mà phân tích Hành vi ghi điện Hành vi khỉ đối tác tế bào thần kinh - Tiếp cận (Approaching1): Khỉ ghi - Tiếp cận (Approaching2): Khỉ đối tác tiếp cận khỉ ghi tiếp cận khỉ đối tác - Rời (Leaving1): Khỉ ghi rời xa khỉ đối tác - Rời (Leaving2): Khỉ đối tác rời xa khỉ ghi - Rẽ lông (Groom1): Khỉ ghi rẽ lông - Rẽ lông (Groom2): Khỉ đối bắt chấy cho thân tác rẽ lơng bắt chấy cho - Chuyển động xung quanh (Moving around1): Khỉ ghi chuyển động qua lại thân - - Chuyển động xung quanh (Moving around2): Khỉ đối tác Xung quanh khỉ đối tác chuyển động qua lại xung quanh khỉ ghi - Tiếp xúc (Contact): Hai khỉ ngồi gần nhau, khoảng cách hai khỉ nhỏ 10cm, hai khỉ hành vi xã hội - Giao tiếp (Communication): Hai khỉ thể chuỗi hành vi xã hội bao gồm: Rẽ lông cho nhau, mấp máy môi, đe dọa, đánh nhau…sau chúng đối mặt với - Gần gũi ( Proximity): Khoảng cách hai khỉ từ 10 đến 60 cm Kết hành vi nhóm, trước sau tiêm thuốc phân tích thống kê sử dụng 2-tailed unpaired t-test Hành vi khỉ nhóm phân tích thống kê sử dụng one-way analysis of variance (ANOVA) Tất khác biệt thống kê đặt mức p