Xây dựng quy trình vi nhân giống cây lan hoàng nhạn aerides houlletiana

BAN QUẢN LÝ KHU NÔNG NGHIỆP CÔNG NGHỆ CAO TP.HCM TRUNG TÂM ƯƠM TẠO DOANH NGHIỆP NÔNG NGHIỆP CÔNG NGHỆ CAO BÁO CÁO NGHIỆM THU NHIỆM VỤ KHOA HỌC VÀ CƠNG NGHỆ XÂY DỰNG QUY TRÌNH VI NHÂN GIỐNG CÂY LAN HỒNG NHẠN (Aerides houlletiana) Cơ quan chủ trì nhiệm vụ: Trung tâm Ươm tạo Doanh nghiệp Nông nghiệp Công nghệ cao Cơ quan quản lý nhiệm vụ: Ban Quản lý Khu Nông nghiệp Công nghệ cao Chủ nhiệm nhiệm vụ: KS Phạm Trần Thủy Tiên Thời gian thực nhiệm vụ: 12 tháng Thành phố Hồ Chí Minh, năm 2022 BAN QUẢN LÝ KHU NÔNG NGHIỆP CÔNG NGHỆ CAO TP.HCM TRUNG TÂM ƯƠM TẠO DOANH NGHIỆP NÔNG NGHIỆP CÔNG NGHỆ CAO BÁO CÁO NGHIỆM THU NHIỆM VỤ KHOA HỌC VÀ CƠNG NGHỆ (Đã chỉnh sửa theo góp ý Hội đồng) XÂY DỰNG QUY TRÌNH VI NHÂN GIỐNG CÂY LAN HOÀNG NHẠN (Aerides houlletiana) CƠ QUAN QUẢN LÝ NHIỆM VỤ CƠ QUAN QUẢN LÝ NHIỆM VỤ CƠ QUAN CHỦ TRÌ NHIỆM VỤ KT GIÁM ĐỐC PHĨ GIÁM ĐỐC CHỦ NHIỆM NHIỆM VỤ KT Giám đốc Phó Giám đốc Huỳnh Quang Tuấn KS Phạm Trần Thủy Tiên Thành phố Hồ Chí Minh, năm 2022 ii THƠNG TIN NHIỆM VỤ Tên nhiệm vụ: Xây dựng quy trình vi nhân giống lan Hoàng nhạn (Aerides houlletiana) Chủ nhiệm nhiệm vụ: KS Phạm Trần Thủy Tiên Ngày, tháng, năm sinh: 13/12/1995 Học vị: Kỹ sư Nam/Nữ: Nữ Chuyên ngành: Công nghệ sinh học Năm đạt học vị: 2017 Chức vụ: Chun viên Phịng Hỗ trợ Cơng nghệ Tế bào Thực vật Tên quan công tác: Trung tâm Ươm tạo Doanh nghiệp Nông nghiệp Công nghệ cao Địa quan: Ấp 1, xã Phạm Văn Cội, huyện Củ Chi, Tp.HCM Điện thoại quan: 028 62646103 Mobile: 0366 626 621 Fax: 028 62646104 Email: thuytienpt1312@gmail.com Địa nhà riêng: 217 đường Nhuận Đức, tổ 5, ấp Bàu Cạp, xã Nhuận Đức, huyện Củ Chi, Tp HCM Cơ quan chủ trì: Trung tâm Ươm tạo Doanh nghiệp Nơng nghiệp Cơng nghệ cao Điện thoại: 028.62646103 Fax: 028.62646104 E-mail: info@abi.com.vn Website: www.abi.com.vn Địa chỉ: ấp 1, xã Phạm Văn Cội, huyện Củ Chi, Tp HCM Họ tên thủ trưởng tổ chức: Vương Thị Hồng Loan Số tài khoản: 3713.0.1101853 Kho bạc Nhà nước quận 10, Thành phố Hồ Chí Minh Thời gian thực nhiệm vụ: 12 tháng (từ tháng 12/2021 đến tháng 12/2022) Kinh phí duyệt: 215.259.000 đồng Kinh phí cấp: 215.259.000 đồng (Theo Hợp đồng số 12/HĐNVNCKHVCN2021 ngày 20 tháng 12 năm 2021 Mục tiêu 2.1 Mục tiêu tổng quát Xây dựng quy trình vi nhân giống Lan Hồng Nhạn đạt hế số nhân giống cao, giống sinh trưởng đồng đáp ứng tiêu chuẩn giống cho sản xuất iii 2.2 Mục tiêu cụ thể Xây dựng quy trình vi nhân lan Hoàng nhạn từ giai đoạn tạo nguồn mẫu ban đầu đến giai đoạn tạo PLBs từ gốc nhân chồi từ chồi đỉnh in vitro Cụ thể: Xác định thời gian nồng độ chất khử trùng phù hợp để khử trùng mẫu phát hoa chồi đỉnh Xác định nồng độ chất điều hòa phù hợp để tạo chồi từ mẫu in vitro Xác định nồng độ chất điều hòa phù hợp đến khả tái sinh PLBs Xác định nồng độ chất điều hòa phù hợp đến khả nhân chồi từ đỉnh sinh trưởng Nội dung thực TT Nội dung thực Thí nghiệm 1: Khảo sát ảnh hưởng thời gian khử trùng đến khả tạo nguồn mẫu in vitro từ phát hoa chồi đỉnh Lan Hồng Nhạn Thí nghiệm 2: Khảo sát ảnh hưởng chất điều hòa tăng trưởng đến khả bật chồi từ mẫu in vitro Thí nghiệm 3: Khảo sát ảnh hưởng chất điều hòa sinh trưởng đến khả tái sinh PLBs Thí nghiệm 4: Khảo sát ảnh hưởng chất điều hòa đến khả nhân chồi từ chồi đỉnh in vitro Sản phẩm nhiệm vụ: Kết cần đạt Xác định thời gian khử trùng phù hợp để tạo nguồn mẫu in vitro Xác định nồng độ chất điều hòa phù hợp để bật chồi từ mẫu in vitro Xác định nồng độ chất điều hòa sinh trưởng để tái sinh PLBs Xác định nồng độ chất điều hòa đến khả nhân chồi từ chồi đỉnh in vitro Báo cáo trình bày khoa học, số liệu phân tích phần mềm xử lý thống kê hội đồng thơng qua Quy trình vi nhân giống lan Hoàng nhạn từ giai đoạn tạo nguồn mẫu ban đầu đến giai đoạn tạo PLBs từ nhân chồi từ chồi đỉnh trình bày dạng sơ đồ khối có diễn giải rõ ràng, dễ hiểu (xem phần 3.5.2, trang 48) iv 20 bình PLBs lan Hồng nhạn in vitro, bình có cụm PLBs có màu xanh, cụm có kích thước cm 150 bình chồi lan Hồng nhạn in vitro với tiêu: Mỗi bình cụm chồi Chồi có – lá, chiều cao cm v TÓM TẮT NỘI DUNG NGHIÊN CỨU Lan Hoàng nhạn (Aerides houlletiana) loài lan gặp có tự nhiên, đồng thời màu sắc hương thơm hoa đậm đà, quyến rũ Trên thị trường giống lan Hoàng Nhạn có giá trị kinh tế cao Trong tự nhiên phát triển chậm, khó nhân giống Kết nghiên cứu năm thứ cho thấy, xây dựng quy trình vi nhân giống lan Hồng nhạn (Aerdes houlletiana) từ tạo nguồn mẫu in vitro đến giai đoạn nhân chồi Sử dụng chồi đỉnh để tạo nguồn mẫu in vitro phương pháp khử trùng kép có hiệu cao so với sử dụng phát hoa, khử trùng lần dung dịch NaClO 2,5% 10 phút, khử trùng lần dung dịch NaClO 1,25% phút cho hiệu khử trùng đạt 93,3% Hình thành chồi từ chồi đỉnh đạt 100% 29,3 ngày môi trường MS bổ sung BA 2,0 mg/L, đường sucrose 30 g/L, agar 8,25 g/L, pH 5,8 PLBs tạo từ mẫu phiến đạt 80% sau 44 ngày môi trường MS bổ sung TDZ 1,0 mg/L NAA 1,0 mg/L, đường sucrose 30 g/L, agar 8,25 g/L, pH 5,8 Nhân chồi chồi đỉnh đạt hệ số nhân 4,3 lần với chiều cao trung bình 1,5 cm/chồi tuần môi trường MS bổ sung BA 1,0 mg/L NAA 0,1 mg/L, đường sucrose 30 g/L, agar 8,25 g/L, pH 5,8 vi MỤC LỤC DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT i DANH MỤC BẢNG ii DANH MỤC HÌNH, ĐỒ THỊ iii MỞ ĐẦU CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 Giới thiệu lan Hoàng nhạn 1.2 Tình hình nghiên cứu nước 1.3 Hiện trạng cơng trình nghiên cứu liên quan đến đề tài CHƯƠNG NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 11 2.1 Nội dung nghiên cứu 11 2.2 Thời gian địa điểm nghiên cứu 11 2.3 Vật liệu nghiên cứu 11 2.3.1 Nguồn giống: 11 2.3.2 Dụng cụ, hóa chất, thiết bị 12 2.4 Phương pháp nghiên cứu 12 2.4.1 Thí nghiệm 1: Khảo sát ảnh hưởng thời gian khử trùng đến khả tạo nguồn mẫu in vitro từ phát hoa chồi đỉnh Lan Hoàng Nhạn 12 2.4.2 Thí nghiệm 2: Khảo sát ảnh hưởng chất điều hòa sinh trưởng thực vật đến khả bật chồi lan Hoàng nhạn 15 2.4.3 Thí nghiệm 3: Khảo sát ảnh hưởng chất điều hòa sinh trưởng thực vật đến khả hình thành PLBs 17 2.4.4 Thí nghiệm 4: Khảo sát ảnh hưởng chất điều hòa sinh trưởng thực vật đến khả nhân chồi từ chồi đỉnh in vitro 19 2.5 Phương pháp xử lý số liệu 20 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 21 3.1 Ảnh hưởng thời gian khử trùng đến khả tạo nguồn mẫu in vitro từ phát hoa chồi đỉnh Lan Hoàng Nhạn 21 vii 3.2 Ảnh hưởng chất điều hòa sinh trưởng thực vật đến khả bật chồi từ mẫu in vitro 25 3.3 Ảnh hưởng chất điều hịa sinh trưởng thực vật đến khả hình thành PLBs từ mẫu in vitro 32 3.4 Ảnh hưởng chất điều hòa sinh trưởng thực vật đến khả nhân chồi từ chồi đỉnh in vitro 38 3.5 Sản phẩm nhiệm vụ 47 3.5.1 Số lượng bình chồi, bình 47 3.5.2 Quy trình nhân giống 48 CHƯƠNG KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 51 4.1 Kết luận 51 4.2 Đề nghị 51 TÀI LIỆU THAM KHẢO 52 PHỤ LỤC viii DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT VIẾT TẮT THUẬT NGỮ BA N – – Benzyladenine MS Murashige and Skoog ½ MS Mơi trường MS giảm ½ khống đa lượng NAA α – Naphthaleneacetic acid TDZ Thidiazuron HSN Hệ số nhân i DANH MỤC BẢNG Bảng 2.1 Các nghiệm thức khảo sát ảnh hưởng thời gian khử trùng đến khả tạo nguồn mẫu in vitro từ phát hoa chồi đỉnh Lan Hoàng Nhạn 14 Bảng 2.2 Các nghiệm thức khảo sát ảnh hưởng chất điều hòa đến khả bật chồi lan Hoàng nhạn 16 Bảng 2.3 Các nghiệm thức khảo sát ảnh hưởng chất điều hịa sinh trưởng thực vật đến khả hình thành PLBs 18 Bảng 2.4 Các nghiệm thức ảnh hưởng chất điều hòa sinh trưởng thực vật đến khả nhân chồi từ đoạn thân mang chồi đỉnh 20 Bảng 3.1 Ảnh hưởng thời gian khử trùng đến khả tạo nguồn mẫu in vitro từ phát hoa chồi đỉnh Lan Hoàng Nhạn 21 Bảng 3.2 Ảnh hưởng chất điều hòa sinh trưởng thực vật đến khả bật chồi từ mẫu chồi in vitro sau tuần nuôi cấy 26 Bảng 3.3 Ảnh hưởng chất điều hòa sinh trưởng thực vật đến khả bật chồi từ mẫu chồi in vitro sau tuần nuôi cấy 27 Bảng 3.4 Ảnh hưởng chất điều hòa sinh trưởng thực vật đến khả bật chồi từ mẫu chồi in vitro sau tuần nuôi cấy 28 Bảng 3.5 Ảnh hưởng nồng độ chất điều hòa sinh trưởng thực vật đến khả hình thành PLBs từ mẫu in vitro sau tuần 32 Bảng 3.6 Ảnh hưởng nồng độ chất điều hịa sinh trưởng thực vật đến khả hình thành PLBs từ mẫu in vitro sau tuần 33 Bảng 3.7 Ảnh hưởng chất điều hòa sinh trưởng thực vật đến khả nhân chồi từ chồi đỉnh in vitro sau tuần 38 Bảng 3.8 Ảnh hưởng chất điều hòa sinh trưởng thực vật đến khả nhân chồi từ chồi đỉnh in vitro sau tuần 39 Bảng 3.9 Ảnh hưởng chất điều hòa sinh trưởng thực vật đến khả nhân chồi từ chồi đỉnh in vitro sau tuần 42 ii sang môi trường nảy chồi (môi trường nảy chồi: MS có bổ sung đường sucrose 25 g/L, agar 8,25 g/L, BA 2,0 mg/L) thời gian tuần Nuôi cấy điều kiện nhiệt độ: 25 ± 2oC, cường độ chiếu sáng: 2000 lux, thời gian chiếu sáng: 12h/ngày Bước 3: Tạo PLBs từ mẫu lan Hoàng nhạn cm Hình 3.21 PLBs tạo từ mẫu lan Hoàng nhạn Phiến lan Hoàng nhạn cắt với kích thước 0,5 x 0,5 cm cấy chuyền mẫu in vitro sang môi trường tạo PLBs (môi trường tạo PLBs: MS có bổ sung đường sucrose 30 g/L, agar 8,25 g/L, TDZ 1,0 mg/L NAA 1,0 mg/L) Nuôi cấy điều kiện nhiệt độ: 25 ± 2oC, cường độ chiếu sáng: 2000 lux, thời gian chiếu sáng: 12h/ngày Bước 3: Nhân chồi từ chồi đỉnh cm Hình 3.22 Cụm chồi lan Hồng nhạn nhân từ chồi đỉnh Chồi tách để lộ chồi đỉnh cắt chồi đỉnh với kích thước mm cấy chuyền chồi đỉnh sang môi trường nhân chồi (mơi trường nhân chồi: MS có bổ sung đường sucrose 30 g/L, agar 8,25 g/L, BA 1,0 mg/L NAA 0,1 mg/L) thời gian tuần Nuôi cấy điều kiện nhiệt độ: 25 ± 2oC, cường độ chiếu sáng: 2000 lux, thời gian chiếu sáng: 12h/ngày 50 CHƯƠNG KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 4.1 Kết luận Xây dựng quy trình vi nhân giống lan Hoàng nhạn (Aerdes houlletiana) từ tạo nguồn mẫu in vitro đến giai đoạn nhân chồi Sử dụng chồi đỉnh để tạo nguồn mẫu in vitro phương pháp khử trùng kép có hiệu cao so với sử dụng phát hoa, khử trùng lần dung dịch NaClO 2,5% 10 phút, khử trùng lần dung dịch NaClO 1,25% phút cho hiệu khử trùng đạt 93,3% Hình thành chồi từ chồi đỉnh đạt 100% 29,3 ngày môi trường MS bổ sung BA 2,0 mg/L, đường sucrose 30 g/L, agar 8,25 g/L, pH 5,8 PLBs tạo từ mẫu phiến đạt 80% sau 44 ngày môi trường MS bổ sung TDZ 1,0 mg/L NAA 1,0 mg/L, đường sucrose 30 g/L, agar 8,25 g/L, pH 5,8 Nhân chồi chồi đỉnh đạt hệ số nhân 4,3 lần với chiều cao trung bình 1,5 cm/chồi tuần môi trường MS bổ sung BA 1,0 mg/L NAA 0,1 mg/L, đường sucrose 30 g/L, agar 8,25 g/L, pH 5,8 4.2 Đề nghị Tiếp tục thực hiện giai đoạn nghiên cứu để hoàn thiện quy trình vi nhân giống lan Hồng nhạn 51 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt Kha Nữ Tú Uyên, Nguyễn Thị Hồng Tú, Vương Thị Hồng Loan, Nguyễn Thị Điệp, Phạm Đình Dũng (2015) Khảo sát khả phát sinh Protocorm like bodies trực tiếp từ phát hoa lan Renanthera sp Tạp chí Khoa học Đại học Sư phạm TP HCM Nguyễn Văn Việt, Bùi Văn Thắng, Nguyễn Thị Hường, & Nguyễn Thị Thu Hằng (2016) Ứng dụng kỹ thuật nuôi cấy in vitro nhân giống Quế lan hương (Aerides odorata Lour.) Tạp chí Khoa học Công nghệ Lâm nghiệp, 6, 162-169 Nguyễn Thị Pha, Trần Thị Xuân Mai, Lê Thị Mai Trang, Nguyễn Thị Liên (2011) Nuôi cấy mầm ngủ phát hoa Lan Hồ Điệp (Phaleenopsis sp.) Tạp chí Khoa học trường Đại học Cần Thơ, 20b 12 -20 Nguyễn Thị Sơn, Nguyễn Quang Thạch, Nguyễn Thị Lý Anh, Hoàng Thị Nga, Hồng Thị Ánh Ngụt (2014) Nhân dịng vơ tính Lan Hồ điệp Phalaenopsis sogoyukidian Tạp chí Khoa học phát triển, tập 12, số 8: 1283 1293 Tiếng Anh Ashok, N (2019) In vitro Seed Germination, Protocorm Formation and Plantlet Regeneration in Aerides ringens Fisher Plant Tissue Cult & Biotech, 29(1), 49-62 Azharia, K., Suwirmen, & Zozy, A N (2019) Callus Induction of Aerides odorata Lour by Adding 2,4 Dichlorophenoxyacetic Acid (2,4-D) Jurnal Biologi Universitas Andalas, 7(2), 109-117 Hongthongkham, J., & Bunnag, S (2014) In vitro Propagation and Cry op reservation of Aerides odorata Lour (Orchidaceae) Pakistan Journal of Biological Sciences, 17(5), 608-618 Hongthongkham, J., Khonkayan, S., Rattanasuk, S., & Promwong, R (2017) In vitro Mass Propagation of Wild Orchid, Aerides odorata Lour for 52 Sustainable Conservation at Roi Et Province Journal of Science and Technology, 6(2), 1-9 Hongthongkham, J., Promwong, R., & Rattanasuk, S (2017) Micropropagation and Conservation of Aerides falcata Lindl & Paxton by Artificial Seed Technique Journal of Food Health and Bioenvironmental Science, 10(3), 187-201 10 Huidrom Sunitibala, D., Sanglakpam Irabati, D., & Thingbaijam Dikash, S (2013) High Frequency Plant Regeneration System of Aerides odorata Lour Through Foliar and Shoot Tip Culture Notulae Botanicae Horti Agrobotanici Cluj-Napoca, 41(1), 169-176 11 Nattha, N., Nipawan, H., & Arak, T (2018) Effects of Plant Growth Regulator on Tissue culture of Aerides houlletiana Rchb.f Agricultural Sci J., 49(1), 291-293 Tài liệu Internet 12 Orchidcambodia (n.d.) Retrieved from https://www.orchidcambodia.com/aerides-houlletiana.html 13 Cẩm nang phân loại hoa lan Việt Nam (n.d.) Retrieved from https://caykieng.farmvina.com/phan-loai-hoa-lan/ 14 Báo khuyến nông (n.d.) Retrieved from https://baokhuyennong.com/hoalan-hoang-nhan/ 15 Viện nghiên cứu rau ăn (n.d.) Retrieved from http://www.favri.org.vn/index.php/vi/26-sa-n-pha-m-khoa-ha-c-ca-ng-ngha/hoava-ca-y-ca-nh/quy-tra-nh-va-tia-n-ba-ka-thua-t/146-quy-trinh-nhan-gi-ng-hoalan-h-di-p-b-ng-k-thu-t-nuoi-c-y-mo-t-bao 16 Hội hoa lan Việt Nam (n.d.) Retrieved from http://www.hoalanvietnam.org/6B1_lrvnaz/lan-rung-vn-ad-hlvn.html 53 PHỤ LỤC MÔI TRƯỜNG Bảng thành phần mơi trường khống MS Đa lượng lít (mg/l) 100 lít (g/l) CaCl2 332,02 33,20 KH2PO4 170,00 17,00 KNO3 1900,00 190,00 MgSO4.7H2O 370,00 37,00 NH4NO3 1650,00 165,00 Vi lượng lít (mg/L) 200 lít (mg/l) CoCl2.6H2O 0,025 5,00 CuSO4.5H2O 0,025 5,00 H3BO3 6,20 1240,00 KI 0,83 166,00 MnSO4.H2O 16,90 3380,00 Na2MoO4.2H2O 0,25 50,00 ZnSO4.7H2O 8,6 1720,00 lít (mg/L) 200 lít (mg/L) Glycine 2,00 0,40 Myo-Inositol 100,00 20,00 Nicotinic acid 0,50 0,10 Pyridoxine HCl 0,50 0,10 Thiamine HCl 0,10 0,02 Vitamine Hút chai dung dịch mẹ pha sẵn Hút chai dung dịch mẹ pha sẵn Hút chai dung dịch mẹ pha sẵn Hút chai dung dịch mẹ pha sẵn Pha riêng FeNaEDTA: cân 2,78g FeSO4.7H2O hoà tan với 3,73g Na2EDTA.2H2O 1.000 mL dùng cho 100 lít mơi trường ni cấy 54 PHỤ LỤC XỬ LÝ SỐ LIỆU Thí nghiệm 1: Ảnh hưởng thời gian khử trùng đến khả tạo nguồn mẫu in vitro từ phát hoa chồi đỉnh Lan Hoàng Nhạn Tỷ lệ mẫu Summary Statistics for Ty le mau sach Nghiem thuc TN1 Count Average C1 33,3333 C2 53,3333 C3 66,6667 C4 53,3333 C5 93,3333 C6 60,0 P1 26,6667 P2 46,6667 P3 46,6667 P4 60,0 P5 60,0 P6 66,6667 Total 36 55,5556 Standard deviation 11,547 11,547 11,547 11,547 11,547 11,547 11,547 11,547 20,0 11,547 19,1899 ANOVA Table for Ty le mau sach by Nghiem thuc TN1 Source Sum of Squares Df Mean Square Between groups 9688,89 11 880,808 Within groups 3200,0 24 133,333 Total (Corr.) 12888,9 35 Coeff of variation 34,641% 21,6506% 17,3205% 21,6506% 12,3718% 0% 43,3013% 24,7436% 24,7436% 33,3333% 0% 17,3205% 34,5419% F-Ratio 6,61 P-Value 0,0001 Multiple Range Tests for Ty le mau sach by Nghiem thuc TN1 Method: 95,0 percent DUNCAN Nghiem thuc TN1 Count P1 C1 P2 P3 C2 C4 C6 P5 P4 P6 C3 C5 Mean 26,6667 33,3333 46,6667 46,6667 53,3333 53,3333 60,0 60,0 60,0 66,6667 66,6667 93,3333 Homogeneous Groups X XX XX XX XX XX XX XX XX X X X Tỷ lệ mẫu nhiễm Summary Statistics for Ty le mau nhiem Nghiem thuc TN1 Count Average C1 66,6667 C2 46,6667 C3 6,66667 C4 46,6667 C5 6,66667 C6 6,66667 P1 73,3333 P2 53,3333 P3 33,3333 P4 40,0 Standard deviation 11,547 11,547 11,547 11,547 11,547 11,547 11,547 11,547 11,547 20,0 55 Coeff of variation 17,3205% 24,7436% 173,205% 24,7436% 173,205% 173,205% 15,7459% 21,6506% 34,641% 50,0% P5 P6 Total 3 36 20,0 6,66667 33,8889 11,547 25,6657 ANOVA Table for Ty le mau nhiem by Nghiem thuc TN1 Source Sum of Squares Df Mean Square Between groups 19588,9 11 1780,81 Within groups 3466,67 24 144,444 Total (Corr.) 23055,6 35 0% 173,205% 75,735% F-Ratio 12,33 P-Value 0,0000 Multiple Range Tests for Ty le mau nhiem by Nghiem thuc TN1 Method: 95,0 percent Duncan Nghiem thuc TN1 Count C6 P6 C3 C5 P5 P3 P4 C4 C2 P2 C1 P1 Mean 6,66667 6,66667 6,66667 6,66667 20,0 33,3333 40,0 46,6667 46,6667 53,3333 66,6667 73,3333 Homogeneous Groups X X X X XX XX XX XX XX XXX XX X Tỷ lệ mẫu chết Summary Statistics for Ty le mau chet Nghiem thuc TN1 Count Average C1 C2 C3 26,6667 C4 C5 C6 33,3333 P1 P2 P3 20,0 P4 P5 20,0 P6 26,6667 Total 36 10,5556 Standard deviation 0 11,547 0 11,547 0 0 11,547 13,9272 ANOVA Table for Ty le mau chet by Nghiem thuc TN1 Source Sum of Squares Df Mean Square Between groups 5988,89 11 544,444 Within groups 800,0 24 33,3333 Total (Corr.) 6788,89 35 Multiple Range Tests for Ty le mau chet by Nghiem thuc TN1 Method: 95,0 percent Duncan Nghiem thuc TN1 Count C4 C5 C2 P4 C1 P1 P2 P5 P3 Mean 0 0 0 20,0 20,0 Homogeneous Groups X X X X X X X X X 56 Coeff of variation % % 43,3013% % % 34,641% % % 0% % 0% 43,3013% 131,942% F-Ratio 16,33 P-Value 0,0000 P6 C3 C6 3 26,6667 26,6667 33,3333 XX XX X Thí nghiệm 2: Ảnh hưởng chất điều hòa sinh trưởng thực vật đến khả bật chồi từ mẫu in vitro Tỷ lệ mẫu hình thành sau tuần Summary Statistics for ty le mau bat choi nghiem thuc Count Average C1 30,7872 C2 50,7685 C3 39,2315 C4 39,2315 C5 26,5651 DCC DCP P1 P2 26,5651 P3 26,5651 P4 26,5651 P5 26,5651 Total 36 24,4037 Standard deviation 7,31299 0 0 0 0 0 16,0923 ANOVA Table for ty le mau bat choi by nghiem thuc Source Sum of Squares Df Between groups 8956,67 11 Within groups 106,96 24 Total (Corr.) 9063,63 35 Coeff of variation 23,7533% 0% 0% 0% 0% % % % 0% 0% 0% 0% 65,942% Mean Square 814,243 4,45665 F-Ratio 182,70 Minimum 26,5651 50,7685 39,2315 39,2315 26,5651 0 26,5651 26,5651 26,5651 26,5651 P-Value 0,0000 Multiple Range Tests for ty le mau bat choi by nghiem thuc Method: 95,0 percent Duncan nghiem thuc Count DCP P1 DCC P4 P5 C5 P2 P3 C1 C3 C4 C2 Mean 0 26,5651 26,5651 26,5651 26,5651 26,5651 30,7872 39,2315 39,2315 50,7685 Homogeneous Groups X X X X X X X X X X X X Thời gian mẫu hình thành sau tuần Summary Statistics for thoi gian mau bat choi nghiem thuc Count Average Standard deviation C1 32,6667 2,08167 C2 29,0 1,0 C3 28,3333 1,52753 C4 27,3333 1,1547 C5 25,6667 0,57735 DCC 0 DCP 0 P1 0 P2 37,6667 0,57735 57 Coeff of variation 6,37245% 3,44828% 5,39127% 4,22451% 2,24942% % % % 1,53279% Minimum 31,0 28,0 27,0 26,0 25,0 0 37,0 P3 P4 P5 Total 3 36 37,3333 36,3333 35,0 24,1111 0,57735 1,52753 1,73205 14,6634 1,54647% 4,2042% 4,94872% 60,816% ANOVA Table for thoi gian mau bat choi by nghiem thuc Source Sum of Squares Df Mean Square Between groups 7494,89 11 681,354 Within groups 30,6667 24 1,27778 Total (Corr.) 7525,56 35 F-Ratio 533,23 37,0 35,0 34,0 P-Value 0,0000 Multiple Range Tests for thoi gian mau bat choi by nghiem thuc Method: 95,0 percent Duncan nghiem thuc Count DCC DCP P1 C5 C4 C3 C2 C1 P5 P4 P3 P2 Mean 0 25,6667 27,3333 28,3333 29,0 32,6667 35,0 36,3333 37,3333 37,6667 Homogeneous Groups X X X X XX X X X X XX X X Tỷ lệ mẫu hình thành sau tuần Summary Statistics for ty le tai sinh PLBs nghiem thuc Count Average CT1 CT10 39,2315 CT11 26,5651 CT12 42,7007 CT13 35,0094 CT14 17,71 CT15 39,2315 CT16 46,9228 CT17 63,4349 CT18 46,9228 CT2 CT3 CT4 CT5 26,5651 CT6 30,7872 CT7 43,0772 CT8 26,1543 CT9 43,0772 Total 54 29,2994 Standard deviation 0 13,9739 7,31299 15,3373 6,66087 6,66087 0 0 7,31299 6,66087 22,6503 6,66087 19,8903 ANOVA Table for ty le tai sinh PLBs by nghiem thuc Source Sum of Squares Df Mean Square Between groups 18512,2 17 1088,95 Within groups 2455,94 36 68,2205 Total (Corr.) 20968,2 53 Multiple Range Tests for ty le tai sinh PLBs by nghiem thuc Method: 95,0 percent Duncan nghiem thuc Count Mean CT3 CT4 Homogeneous Groups X X 58 Coeff of variation % 0% 0% 32,7251% 20,8887% 86,6025% 0% 14,1954% 0% 14,1954% % % % 0% 23,7533% 15,4626% 86,6025% 15,4626% 67,8865% F-Ratio 15,96 Minimum 39,2315 26,5651 26,5651 26,5651 39,2315 39,2315 63,4349 39,2315 0 26,5651 26,5651 39,2315 39,2315 P-Value 0,0000 CT1 CT2 CT14 CT8 CT11 CT5 CT6 CT13 CT15 CT10 CT12 CT9 CT7 CT18 CT16 CT17 3 3 3 3 3 3 3 3 0 17,71 26,1543 26,5651 26,5651 30,7872 35,0094 39,2315 39,2315 42,7007 43,0772 43,0772 46,9228 46,9228 63,4349 X X X XX XX XX XXX XXX XXX XXX XX XX XX X X X Thời gian mẫu hình thành sau tuần Summary Statistics for Thoi gian mau tai sinh Nghiem thuc TN2 Count Average C1 34,3333 C2 29,3333 C3 28,6667 C4 27,3333 C5 26,3333 P1 43,0 P2 39,0 P3 38,0 P4 36,3333 P5 35,3333 ĐCC 40,0 ĐCP 47,0 Total 36 35,3889 Standard deviation 1,52753 1,1547 1,52753 1,1547 1,1547 2,64575 1,0 1,0 1,52753 1,52753 2,0 6,42885 ANOVA Table for Thoi gian mau tai sinh by Nghiem thuc TN2 Source Sum of Squares Df Mean Square Between groups 1393,89 11 126,717 Within groups 52,6667 24 2,19444 Total (Corr.) 1446,56 35 Multiple Range Tests for Thoi gian mau tai sinh by Nghiem thuc TN2 Method: 95,0 percent Duncan Nghiem thuc TN2 Count C5 C4 C3 C2 C1 P5 P4 P3 P2 ĐCC P1 ĐCP Mean 26,3333 27,3333 28,6667 29,3333 34,3333 35,3333 36,3333 38,0 39,0 40,0 43,0 47,0 Homogeneous Groups X XX XX X X X XX XX X X X X 59 Coeff of variation 4,4491% 3,93648% 5,32858% 4,22451% 4,38494% 6,15291% 2,5641% 2,63158% 4,2042% 4,32318% 0% 4,25532% 18,1663% F-Ratio 57,74 P-Value 0,0000 Thí nghiệm 3: Ảnh hưởng chất điều hòa sinh trưởng thực vật đến khả hình thành PLBs từ mẫu in vitro Tỷ lệ mẫu hình thành PLBs từ Summary Statistics for ty le mau tai sinh PLBs nghiem thuc Count Average Standard deviation CT1 0 CT10 39,2315 CT11 26,5651 CT12 39,2315 CT13 35,0094 7,31299 CT14 46,9228 6,66087 CT15 46,9228 6,66087 CT16 50,7685 CT17 63,4349 CT18 54,9906 7,31299 CT2 0 CT3 0 CT4 0 CT5 0 CT6 26,5651 CT7 30,7872 7,31299 CT8 0 CT9 39,2315 Total 54 27,7589 21,9698 Coeff of variation % 0% 0% 0% 20,8887% 14,1954% 14,1954% 0% 0% 13,2986% % % % % 0% 23,7533% % 0% 79,145% ANOVA Table for ty le mau tai sinh PLBs by nghiem thuc Source Sum of Squares Df Mean Square Between groups 25083,3 17 1475,49 Within groups 498,347 36 13,843 Total (Corr.) 25581,6 53 F-Ratio 106,59 Minimum 39,2315 26,5651 39,2315 26,5651 39,2315 39,2315 50,7685 63,4349 50,7685 0 0 26,5651 26,5651 39,2315 P-Value 0,0000 Multiple Range Tests for ty le mau tai sinh PLBs by nghiem thuc Method: 95,0 percent Duncan nghiem thuc Count CT1 CT4 CT2 CT3 CT8 CT5 CT6 CT11 CT7 CT13 CT12 CT10 CT9 CT15 CT14 CT16 CT18 CT17 Mean 0 0 0 26,5651 26,5651 30,7872 35,0094 39,2315 39,2315 39,2315 46,9228 46,9228 50,7685 54,9906 63,4349 Homogeneous Groups X X X X X X X X XX XX X X X X X XX X X Thời gian mẫu hình thành PLBs từ Summary Statistics for thoi gian mau tai sinh PLBs nghiem thuc Count Average Standard deviation CT1 0 CT10 3,75268 0,0467475 60 Coeff of variation % 1,24571% Minimum 3,72569 CT11 CT12 CT13 CT14 CT15 CT16 CT17 CT18 CT2 CT3 CT4 CT5 CT6 CT7 CT8 CT9 Total 3 3 3 3 3 3 3 3 54 4,0129 3,98244 3,9316 3,93012 3,89405 3,84298 3,801 3,75553 0 0 3,98853 3,91705 3,83178 2,59115 0,0379446 0,0326569 0,0257812 0,0429246 0,0103515 0,0123282 0,0167615 0,0380498 0 0 0,0370561 0,0695547 0,0379532 1,85094 0,945567% 0,820023% 0,655743% 1,0922% 0,265828% 0,320799% 0,440977% 1,01317% % % % % 0,929068% 1,77569% % 0,990485% 71,4331% ANOVA Table for thoi gian mau tai sinh PLBs by nghiem thuc Source Sum of Squares Df Mean Square Between groups 181,543 17 10,679 Within groups 0,0336762 36 0,000935451 Total (Corr.) 181,576 53 3,97029 3,95124 3,91202 3,90533 3,88499 3,83586 3,78419 3,7297 0 0 3,95124 3,85015 3,79549 F-Ratio 11415,85 P-Value 0,0000 Multiple Range Tests for thoi gian mau tai sinh PLBs by nghiem thuc Method: 95,0 percent Duncan nghiem thuc Count CT3 CT8 CT5 CT2 CT4 CT1 CT10 CT18 CT17 CT9 CT16 CT15 CT7 CT14 CT13 CT12 CT6 CT11 Mean 0 0 0 3,75268 3,75553 3,801 3,83178 3,84298 3,89405 3,91705 3,93012 3,9316 3,98244 3,98853 4,0129 Homogeneous Groups X X X X X X X X XX X X X X XX XX XX X X Thí nghiệm 4: Ảnh hưởng chất điều hòa sinh trưởng thực vật đến khả nhân chồi từ chồi đỉnh in vitro Hệ số nhân chồi tuần Summary Statistics for He so nhan Nghiem thuc TN4 Count C1 C10 C11 C12 C13 C14 C2 C3 Average 1,0 2,46667 3,06667 3,26667 1,73333 2,73333 1,46667 2,06667 Standard deviation 0,11547 0,11547 0,11547 0,11547 0,11547 0,11547 0,11547 61 Coeff of variation 0% 4,68122% 3,76533% 3,5348% 6,66173% 4,22451% 7,87296% 5,58726% C4 C5 C6 C7 C8 C9 Total 3 3 3 42 2,46667 2,46667 1,66667 4,26667 3,26667 2,66667 2,47143 0,11547 0,11547 0,11547 0,11547 0,11547 0,11547 0,837908 ANOVA Table for He so nhan by Nghiem thuc TN4 Source Sum of Squares Df Between groups 28,439 13 Within groups 0,346667 28 Total (Corr.) 28,7857 41 4,68122% 4,68122% 6,9282% 2,70633% 3,5348% 4,33013% 33,9038% Mean Square 2,18762 0,012381 F-Ratio 176,69 P-Value 0,0000 Multiple Range Tests for He so nhan by Nghiem thuc TN4 Method: 95,0 percent Duncan Nghiem thuc TN4 Count C1 C2 C6 C13 C3 C5 C4 C10 C9 C14 C11 C8 C12 C7 Mean 1,0 1,46667 1,66667 1,73333 2,06667 2,46667 2,46667 2,46667 2,66667 2,73333 3,06667 3,26667 3,26667 4,26667 Homogeneous Groups X X X X X X X X X X X X X X Chiều cao chồi tuần Summary Statistics for chieu cao choi nghiem thuc Count Average C1 2,5 C10 1,5 C11 1,33333 C12 1,2 C13 1,83333 C14 1,4 C2 2,06667 C3 1,73333 C4 1,5 C5 1,6 C6 1,86667 C7 1,1 C8 1,4 C9 1,5 Total 42 1,60952 Standard deviation 0,1 0,057735 0,057735 0,11547 0,057735 0,1 0,11547 0 0,362787 ANOVA Table for chieu cao choi by nghiem thuc Source Sum of Squares Df Between groups 5,28286 13 Within groups 0,113333 28 Total (Corr.) 5,39619 41 Mean Square 0,406374 0,00404762 Multiple Range Tests for chieu cao choi by nghiem thuc Method: 95,0 percent Duncan nghiem thuc Count Mean C7 1,1 Coeff of variation 4,0% 0% 4,33013% 0% 3,14918% 0% 5,58726% 3,33087% 0% 6,25% 6,1859% 0% 0% 0% 22,54% Homogeneous Groups X 62 F-Ratio 100,40 Minimum 2,4 1,5 1,3 1,2 1,8 1,4 2,0 1,7 1,5 1,5 1,8 1,1 1,4 1,5 1,1 P-Value 0,0000 C12 C11 C14 C8 C9 C10 C4 C5 C3 C13 C6 C2 C1 3 3 3 3 3 3 1,2 1,33333 1,4 1,4 1,5 1,5 1,5 1,6 1,73333 1,83333 1,86667 2,06667 2,5 X X XX XX XX XX XX X X XX X X X Hệ số nhân chồi tuần Summary Statistics for He so nhan Nghiem thuc TN4 Count C1 C10 C11 C12 C13 C14 C2 C3 C4 C5 C6 C7 C8 C9 Total 42 Average 1,0 2,46667 3,06667 3,26667 1,73333 2,73333 1,46667 2,06667 2,46667 2,46667 1,66667 4,26667 3,26667 2,66667 2,47143 Standard deviation 0,11547 0,11547 0,11547 0,11547 0,11547 0,11547 0,11547 0,11547 0,11547 0,11547 0,11547 0,11547 0,11547 0,837908 ANOVA Table for He so nhan by Nghiem thuc TN4 Source Sum of Squares Df Between groups 28,439 13 Within groups 0,346667 28 Total (Corr.) 28,7857 41 Mean Square 2,18762 0,012381 Coeff of variation 0% 4,68122% 3,76533% 3,5348% 6,66173% 4,22451% 7,87296% 5,58726% 4,68122% 4,68122% 6,9282% 2,70633% 3,5348% 4,33013% 33,9038% F-Ratio 176,69 P-Value 0,0000 Multiple Range Tests for He so nhan by Nghiem thuc TN4 Method: 95,0 percent Duncan Nghiem thuc TN4 Count C1 C2 C6 C13 C3 C5 C4 C10 C9 C14 C11 C8 C12 C7 Mean 1,0 1,46667 1,66667 1,73333 2,06667 2,46667 2,46667 2,46667 2,66667 2,73333 3,06667 3,26667 3,26667 4,26667 Homogeneous Groups X X X X X X X X X X X X X X Chiều cao chồi tuần Summary Statistics for Chieu cao choi Nghiem thuc TN4 Count Average C1 2,9 Standard deviation 0,1 63 Coeff of variation 3,44828% C10 C11 C12 C13 C14 C2 C3 C4 C5 C6 C7 C8 C9 Total 3 3 3 3 3 3 42 1,9 1,73333 1,6 2,23333 1,8 2,46667 2,13333 1,9 2,0 2,26667 1,5 1,8 1,9 2,00952 0,057735 0,057735 0,11547 0,057735 0,1 0,11547 0 0,362787 ANOVA Table for Chieu cao choi by Nghiem thuc TN4 Source Sum of Squares Df Mean Square Between groups 5,28286 13 0,406374 Within groups 0,113333 28 0,00404762 Total (Corr.) 5,39619 41 Multiple Range Tests for Chieu cao choi by Nghiem thuc TN4 Method: 95,0 percent Duncan Nghiem thuc TN4 Count C7 C12 C11 C14 C8 C9 C10 C4 C5 C3 C13 C6 C2 C1 Mean 1,5 1,6 1,73333 1,8 1,8 1,9 1,9 1,9 2,0 2,13333 2,23333 2,26667 2,46667 2,9 Homogeneous Groups X X X XX XX XX XX XX X X XX X X X 64 0% 3,33087% 0% 2,58515% 0% 4,68122% 2,70633% 0% 5,0% 5,09427% 0% 0% 0% 18,0534% F-Ratio 100,40 P-Value 0,0000