Đồ án tốt nghiệp khảo sát tối ưu hóa một số thông số của quá trình lên men bioethanol từ vỏ chuối bằng phương pháp sscf sử dụng saccharomyces cerevisiae kết hợp với pichia anomala

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHỆ TP HỒ CHÍ MINH ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP u iệ il Tà KHẢO SÁT TỐI ƯU HÓA MỘT SỐ THƠNG SỐ CỦA Q TRÌNH LÊN MEN BIOETHANOL TỪ VỎ CHUỐI BẰNG PHƯƠNG PHÁP SSCF SỬ DỤNG SACCHAROMYCES CEREVISIAE KẾT HỢP VỚI PICHIA ANOMALA U H CÔNG NGHỆ SINH HỌC TE Ngành: CH Chuyên ngành: CÔNG NGHỆ SINH HỌC Giảng viên hướng dẫn: Th.S Trần Thị Tưởng An Sinh viên thực hiện: Đoàn Thị Diễm Phương MSSV: 1151110026 Lớp: 11DSH01 TP Hồ Chí Minh, 2015 LỜI CAM ĐOAN Tơi xin cam đoan rằng, đồ án tốt nghiệp “Khảo sát tối ưu hóa số thơng số q trình lên men bioethanol từ vỏ chuối phương pháp SSCF sử dụng Saccharomyces cerevisiae kết hợp với Pichia anomala.”là cơng trình nghiên cứu thực cá nhân tôi, thực sở nghiên cứu lý thuyết, kiến thức dựa hướng dẫn Th.S Trần Thị Tưởng An Các số liệu sử dụng đồ án trung thực có nguồn gốc cụ thể, rõ ràng Nội dung đồ án có kham khảo sử dụng tài liệu thông tin đăng tải sách, tác phẩm, tạp chí trang web theo danh mục tài liệu đồ án u iệ il Tà CH TE U H LỜI CẢM ƠN Lời em xin cảm ơn Ban giám hiệu trường Đại học Cơng Nghệ Thành Phố Hồ Chí Minh, Ban chủ nhiệm khoa Khoa Công Nghệ Sinh Học - Thực Phẩm- Môi Trường tạo điều kiện cho em thực khóa luận Em xin cảm ơn tồn thể thầy cô Bộ môn Công Nghệ Sinh Học truyền đạt kiến thức kỹ chuyên sâu để em hồn thành khóa luận Trong suốt khoảng thời gian làm khóa luận tốt nghiệp phịng thí nghiệm Năng Lượng Sinh Học – Đại học Bách Khoa Tp.Hồ Chí Minh Em xin chân thành gửi lời cảm ơn đến: Th.S Trần Thị Tưởng An, trường Đại học Bách Khoa Tp.Hồ Chí Minh Cơ ln ln theo sát, tận tình bảo, truyền đạt kiến thức, kinh nghiệm chuyên Tà môn, hướng dẫn, động viên em suốt trình em thực đề tài iệ il Em xin gửi lời cảm ơn đến anh, chị làm việc phịng thí nghiệm u nhiệt tình hỗ trợ em suốt thời gian làm việc TE U lúc em cảm thấy khó khăn H Cảm ơn bố mẹ, người luôn bên cạnh động viên tinh thần em Cuối cùng, cảm ơn tất bạn phịng thí nghiệm người bạn CH bên cạnh giúp đỡ em việc Một lần em xin chân thành cảm ơn Đoàn Thị Diễm Phương Đồ án tốt nghiệp MỤC LỤC  LỜI CẢM ƠN .2 MỤC LỤC i DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT iv DANH MỤC CÁC BẢNG v DANH MỤC HÌNH ẢNH vi LỜI MỞ ĐẦU .8 Đặt vấn đề Mục tiêu đề tài Nội dung nghiên cứu iệ il Tà Bố cụ 10 U H u TE CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 11 CH 1.1 Giới thiệu bioethanol 11 1.1.1 Các hệ bioethanol .14 1.1.2 Khái niệm .11 1.1.3 Nguồn nguyên liệu lignocellulose để sản xuất bioethanol 15 1.1.4 Ứng dụng lợi ích hạn chế Bioethanol 17 1.1.5 Quy trình sản xuất bioethanol từ nguồn lignocellulose 18 1.1.6 Tình hình sản xuất tiêu thụ Bioethanol Việt Nam giới 26 1.1.7 Tình hình nghiên cứu bioethanol Việt Nam giới 30 1.2 Giới thiệu chuối sứ i Đồ án tốt nghiệp 1.2.1 ối 1.2.2 Thành phần hóa học giá trị dinh dưỡng vỏ trái chuối 1.2.3 Tình hình sản xuất, diện tích sản lượng chuối Việt Nam .2 1.2.4 Tình hình sản xuất sản lượng chuối giới .4 1.3 Giới thiệu chủng nấm men lên men bioethanol 1.3.1 Chủng nấm men Saccharomyces cerevisiae 1.3.2 Chủng nấm men Pichia anomala 2.1 Thời gian địa điểm nghiên cứu 2.3 Vật liệu .9 Tà Nguyên vật liệu 2.3.2 Hóa chất sử dụng .9 2.3.3 Thiết bị iệ ứu .10 u H Phương pháp .11 TE U 2.4 il 2.3.1 Bố trí thí nghiệm 11 2.4.2 Tiến hành thực 12 2.5 CH 2.4.1 Phương pháp phân tích 15 2.5.1 Phương pháp vi sinh 15 2.5.2 Phương pháp hóa lý 17 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 24 3.1 Khảo sát giống nấm men 24 3.1.1.1 Nấm men Saccharomyces cerevisiae 24 3.1.1.2 Nấm men Saccharomyces cerevisiae 25 3.2 Khảo sát số thành phần hóa học vỏ chuối khô 27 3.3 Khảo sát tiền xử lý nguyên liệu acid acetic 4% .28 ii Đồ án tốt nghiệp 3.4 Khảo sát thủy phân lên men đồng thời (SSCF) 29 3.4.1 Khảo sát thời gian lên men 30 3.4.2 Khảo sát nhiệt độ lên men .34 3.4.3 Khảo sát tỷ lệ nấm men .37 3.4.4 Khảo sát tỷ lệ enzyme 40 3.4.5 Khảo sát ảnh hưởng pH .42 CHƯƠNG 4: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 47 TÀI LIỆU THAM KHẢO 48 u iệ il Tà CH TE U H iii Đồ án tốt nghiệp DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT PL Phụ lục SSF Simultaneous saccharification and fermentation SSCF Simultaneous sacchrification and cofermentation CT Cơng thức PT Phương trình SHF Separate hydrolysis and fermentation Đường hóa thành phần cellulose TE U H HF 3,5 – dinitrosalycylic acid u SA Pichia anomala iệ DNS Saccharomyces cerevisiae il PA Tà SC Lên men hexose CH PF Lên men pentose HPLC High-performance liquid chromatography SDA Sabouraud Dextroe Broth SDB Sabouraud Dextroe Agar iv Đồ án tốt nghiệp DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1 Thông số bioethanol so với xăng 12 Bảng 1.2 Ước tính chi phí sản xuất bioethanol so với xăng 12 Bảng 1.3 Ưu điểm nhược điểm phương pháp tiền xử lý 20 Bảng 1.4 Một số nhà máy sản xuất bioethanol hoạt động Việt Nam [34] 28 Bảng 1.5 Một số cơng trình nghiên cứu bioethanol từ phụ phẩm trái giới 30 Bảng 1.6 Tình hình nghiên cứu sản xuất bioethanol từ vỏ chuối Bảng 3.1 Bố trí nghiệm thức thí nghiệm 14 Tà Bảng 3.1 Thành phần hóa học vỏ chuối .27 iệ il Bảng 3.2 Một số thành phần hóa học vỏ chuối khô sau tiền xử lý với acid acetic 4% 29 u CH TE U H v Đồ án tốt nghiệp DANH MỤC HÌNH ẢNH Hình 1.1 Nguồn nguyên liệu sản xuất bioethanol 11 Hình 1.2 Giá dầu năm năm gần .13 Hình 1.3 Quy trình chuyển đổi sinh khối lignocellulose thành bioethanol 19 Hình 1.4 Tiền xử lý lignocellulose giải phóng cellulose .20 Hình 1.5 Chuối sứ Hình 1.6 Saccharomyces cerevisiae .5 Hình 1.7 Pichia anomala Hình 3.1 Nấm men Saccharomyces cerevisiae 24 Hình 3.2 Nấm men Pichia anomala 24 Tà Hình 3.3 Đường cong sinh trưởng Saccharomyces cerevisiae môi trường SDB iệ il .25 Hình 3.4 Đường cong sinh trưởng Pichia anomala môi trường SDB .26 u H Hình 3.6a Thay đổi độ cồn theo thời gian lên men .32 TE U Hình 3.6c Sự thay đổi đường khử theo thời gian lên men 32 Hình 3.6d Sự thay đổi hàm lượng cellulose theo thời gian lên men 33 CH Hình 3.7a Sự thay đổi nồng độ cồn theo nhiệt độ lên men 35 Hình 3.7b.Sự thay đổi mật độ tế bào theo nhiệt độ lên men 35 Hình 3.7c Thay đổi hàm lượng đường khử cellulose theo nhiệt độ lên men 36 Hình 3.8a Thay đổi độ cồn theo tỷ lệ nấm men 38 Hình 3.8b Thay đổi mật độ tế bào theo tỷ lệ nấm men 38 Hình 3.8c Sự thay đổi đường khử cellulose theo tỷ lệ nấm men 39 Hình 3.9b Thay đổi mật độ tế bào theo tỷ lệ enzyme 41 Hình 3.9c Sự thay đổi đường khử cellulose theo tỷ lệ enzyme 41 Hình 3.10a Sự thay đổi độ cồn theo pH 43 Hình 3.10b Thay đổi mật độ tế bào theo pH 43 Hình 3.10c.Sự thay đổi đường khử cellulose theo pH 44 Hình 3.11a Sự thay đổi độ cồn theo tốc độ khuấy đảo .45 vi Đồ án tốt nghiệp Hình 3.11b Sự thay đổi mật độ tế bào theo tốc độ khuấy đảo 45 Hình 3.11c Sự thay đổi hàm lượng đường khử cellulose theo tốc độ khuấy đảo .46 u iệ il Tà CH TE U H vii Đồ án tốt nghiệp Cách dựng đường chuẩn glucose - Cân xác g glucose hịa tan 200 mL nước cất - Hút 1, 2, 3, 4, mL dung dịch đường glucose vào bình định mức 50 mL, thêm nước cất đến vạch mức Các dung dịch pha có nồng độ glucose 0,1; 0,2; 0,3; 0,4; 0,5 mg/mL - Hút mL dung dịch glucose nồng độ vào ống nghiêm, thêm 3mL thuốc thử DNS - Mẫu trắng: Hút mL nước cất cho vào ống nghiệm, thêm mL thuốc thử DNS - Nung cách thủy hỗn hợp 15-20 phút Làm lạnh nhanh đo OD bước Từ giá trị OD, vẽ đồ thị đường chuẩn glucose u iệ il U H Đồ thị đường chuẩn glucose 0.9 0.8 0.7 0.6 0.5 0.4 0.3 0.2 0.1 y = 1.863x - 0.1153 R² = 0.9822 CH TE Hàm lượng đường khử (mg/mL) - Tà sóng 540 nm 0.1 0.2 0.3 Mật độ quang OD 0.4 0.5 0.6 Đồ án tốt nghiệp Cách dựng đường chuẩn cellulose - Dung dịch cellulose chuẩn (20 mg/mL): cân xác 1g cellulose hịa tan 50 mL nước cất - Hút 1, 2, 3, 4, 5, 6, mL dung dịch cellulose vào bình định mức 100 mL, thêm nước cất đến vạch mức Các dung dịch pha có nồng độ cellulose 0,2; 0,4; 0,6; 0,8; 1,0; 1,2; 1,4 mg/mL - Cho 5mL thuốc thử anthrone vào ống nghiệm chứa 0.5mL dung dịch - Mẫu trắng: Hút 0.5 mL nước cất cho vào ống nghiệm, thêm 5mL thuốc thử anthrone - Nung cách thủy phút Làm lạnh nhanh đo OD bước sóng 630nm Từ giá trị OD, vẽ đồ thị đường chuẩn cellulose il Tà iệ Đồ thị đường chuẩn cellulose 1.8 1.6 1.4 1.2 0.8 0.6 0.4 0.2 u y = 1.3455x + 0.0069 R² = 0.992 CH TE U H Hàm lượng cellulose (mg/mL) - 0.2 0.4 0.6 0.8 Mật độ quang OD 1.2 1.4 1.6 Đồ án tốt nghiệp PHỤ LỤC B KẾT QUẢ XỬ LÝ SỐ LIỆU 1.1 Khảo sát thời gian lên men 1.1.1 Hàm lượng đường khử ANOVA Table Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 12649,4 15 843,291 Within groups 16,0729 32 0,502279 Total (Corr.) 12665,4 47 1678,93 0,0000 Multiple Range Tests Tà Thời gian( giờ) Count Mean Homogeneous Groups il 11,8787 X 18,2517 X 10 18,624 15 23,0793 X 20 30,737 X 25 34,3157 X 30 34,405 X 35 39,4683 X 40 46,5897 X 45 50,7763 X 50 51,0807 XX 55 51,957 X 60 57,7723 X 65 59,1143 X 70 62,8517 X 75 61,058 X u iệ CH TE U H X Đồ án tốt nghiệp 1.1.2 Hàm lượng cellulose ANOVA Table Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 9289.07 15 619.271 Within groups 16.4654 32 0.514544 Total (Corr.) 9305.54 47 1203.53 0.0000 Multiple Range Tests Thời gian(giờ) Count Mean Homogeneous Groups 75 X 70 65 38.0867 XX 60 38.8533 X 55 42.4467 X 50 44.8467 X 45 44.8733 X 40 45.89 X 35 51.1133 X 30 54.2133 X 25 61.4233 X 20 61.7567 X 10 67.4633 X 15 68.58 X 75.9167 X 76.09 X Tà 31.2 u iệ il 37.3433 X CH TE U H Đồ án tốt nghiệp 1.2 Nhiệt độ lên men 1.2.1 Hàm lượng đường khử ANOVA Table Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 65.3192 21.7731 133.63 0.0000 Within groups 1.30347 0.162933 Total (Corr.) 66.6227 11 Multiple Range Tests Nhiệt độ (0C) Count Mean Homogeneous Groups 40.3967 X 35 Room 45.2467 X 30 46.6967 Tà 40 44.1567 X iệ il u X U H TE 1.2.2 Hàm lượng cellulose Source CH ANOVA Table Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 486.435 162.145 Within groups 0.820067 0.102508 Total (Corr.) 487.255 11 1581.77 0.0000 Multiple Range Tests Nhiệt độ (0C) Count Mean Homogeneous Groups 35 31.02 X 40 35.1333 X 30 37.4 X room 48.24 X Đồ án tốt nghiệp 1.2.3 Nồng độ cồn ANOVA Table Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 0,803333 0,267778 80,33 Within groups 0,0266667 0,00333333 Total (Corr.) 0,83 11 0,0000 Multiple Range Tests Nhiệt độ (0C) Count Mean Homogeneous Groups 3,16667 X 30 3,33333 X 40 3,43333 X 35 Tà room 3,86667 X il iệ 1.3 Khảo sát tỷ lệ nấm men u 1.3.1 Hàm lượng đường khử of Df Squares F-Ratio P-Value CH Sum Mean 0,0000 TE Source U H ANOVA Table Square Between groups 110,086 27,5216 34,61 Within groups 7,9524 0,79524 Total (Corr.) 118,039 14 10 Multiple Range Tests SC:PA Count Mean Homogeneous Groups 2:3 44,96 X 3:2 45,6767 X 1:1 45,6933 X 4:1 50,58 1:4 51,2767 X X Đồ án tốt nghiệp 1.3.2 Hàm lượng cellulose ANOVA Table Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 31,0247 7,75617 Within groups 2,6834 10 0,26834 Total (Corr.) 33,7081 14 28,90 0,0000 Multiple Range Tests Tỷ lệ nấm men SC:PA Count Mean Homogeneous Groups 1:4 31,13 X 4:1 31,5267 X 3:2 33,9533 X 2:3 Tà 34,3533 X 1:1 3 il u H ANOVA Table U Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value TE Source X iệ 1.3.3 Nồng độ cồn 34,4 0,0491667 Within groups 0,0283333 10 0,00283333 Total (Corr.) 0,225 14 17,35 CH Between groups 0,196667 0,0002 Multiple Range Tests Tỷ lệ nấm men SC:PA Count Mean Homogeneous Groups 3:2 3,63333 X 2:3 3,66667 X 4:1 3,68333 X 1:1 3,83333 X 1:4 3,93333 X Đồ án tốt nghiệp 1.4 Khảo sát tỷ lệ enzyme Hàm lượng đường khử ANOVA Table Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 43,0676 10,7669 Within groups 3,94547 10 0,394547 Total (Corr.) 47,0131 14 27,29 0,0000 Multiple Range Tests Tỷ lệ (%) Count Mean Homogeneous Groups 16,4967 X 0,3 18,1167 X 0,5 18,3833 X 0,7 20,72 0,9 20,9967 X il Tà 0,1 u iệ X U H TE 1.4.2 Hàm lượng cellulose Source CH ANOVA Table Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 156,215 39,0538 Within groups 3,43527 10 0,343527 Total (Corr.) 159,651 14 113,68 0,0000 Multiple Range Tests Tỷ lệ enzyme (%) Count Mean Homogeneous Groups 0,9 28,1333 X 0.7 29,2633 X 0.5 30,08 0,3 32,1733 X 0,1 37,2733 X X Đồ án tốt nghiệp 1.4.3 Nồng độ cồn ANOVA Table Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 2,20933 0,552333 Within groups 0,0466667 10 0,00466667 Total (Corr.) 2,256 14 118,36 0,0000 Multiple Range Tests Tỷ lệ enzyme (%) Count Mean Homogeneous Groups 3,06667 X 0,1 3,63333 X 0,5 0,7 0,7 Tà 0,3 3,93333 X il X 4,1 X u iệ 4,06667 CH TE 1.5.2 Hàm lượng đường khử U H 1.5 Khảo sát ảnh hưởng pH ANOVA Table Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 21,4682 10,7341 Within groups 4,24167 0,706944 Total (Corr.) 25,7098 Multiple Range Tests pH Count Mean Homogeneous Groups 5,5 35,21 X 4,5 31,47 X 33,8333 X 15,18 0,0045 Đồ án tốt nghiệp 1.5.3 Hàm lượng cellulose ANOVA Table Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 8,97402 4,48701 Within groups 2,16087 0,360144 Total (Corr.) 11,1349 12,46 0,0073 Multiple Range Tests Homogeneous Groups 5,5 35,85 X 4,5 37,88 X 38,0467 X U H ANOVA Table u 1.4.2 Nồng độ cồn iệ il Tà pH Count Mean Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value TE Source 0,474444 Within groups 0,08 0,0133333 Total (Corr.) 1,02889 Multiple Range Tests pH Count Mean Homogeneous Groups 4,5 3,43333 X 4,06667 X 5,5 4,16667 X 35,58 CH Between groups 0,948889 10 0,0005 Đồ án tốt nghiệp 1.6 Ảnh hưởng tốc độ khuấy đảo 1.6.1 Hàm lượng đường khử ANOVA Table Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value 0,0000 Between groups 171,674 57,2245 Within groups 1,45927 0,182408 Total (Corr.) 173,133 11 313,72 Multiple Range Tests Tốc độ khuấy đảo Count Mean Homogeneous Groups 100 150 il 19,3567 X 200 29,4133 Tà 50 23,6133 X X u iệ 27,0167 X U H TE 1.6.2 Hàm lượng cellulose Source CH ANOVA Table Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 123,176 41,0588 Within groups 5,6858 0,710725 Total (Corr.) 128,862 11 57,77 Multiple Range Tests Tốc độ khuấy đảo Count Mean Homogeneous Groups 200 39,2533 X 150 39,6467 X 100 45,1733 X 50 46,41 X 11 0,0000 Đồ án tốt nghiệp 1.6.3 Nồng độ cồn ANOVA Table Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 0,877292 0,292431 Within groups 0,0783333 0,00979167 Total (Corr.) 0,955625 11 29,87 Multiple Range Tests Homogeneous Groups 50 3,6 X 100 3,85 X 150 200 Tà Tốc độ khuấy đảo Count Mean 4,06667 X il X u iệ 4,13333 CH TE U H 12 0,0001 Đồ án tốt nghiệp PHỤ LỤC C BẢNG KẾT QUẢ KHẢO SÁT THỦY PHÂN VÀ LÊN MEN SSCF Bảng Kết khảo sát thời gian lên men Thời Hàm lượng Hàm lượng Độ cồn (%) Mật độ tế pH gian đường (giờ) (mg/mL) khử cellulose bào 106(cfu/ml) (mg/mL) 11,88 ± 0,94 75,92 ± 0,26 0,73 3,32 5,0 ± 0,1 18,25 ± 0,41 76,09 ± 0,99 1,28 4,77 5,0 ± 0,1 10 18,63 ± 0,38 67,46 ± 0,47 1,54 6,36 4,9 ± 0,1 15 23,08 ± 0,94 1,72 7,32 5,0 ± 0,1 20 30,74 ± 1,11 1,83 7,86 4,9 ± 0,1 25 34,32 ± 0,89 61,42 ± 0,79 2,31 8,18 4,9 ± 0,1 30 34,41 ± 0,45 54,21 ± 0,83 2,57 10,2 4,9 ± 0,1 35 39,47 ± 0,78 51,11 ± 0,37 2,87 10,5 4,9 ± 0,1 40 46,59 ± 0,86 45,89 ± 0,84 3,07 11,0 4,9 ± 0,1 45 50,78 ± 0,36 44,87 ± 0,93 3,47 CH 11,4 4,9 ± 0,1 50 51,08 ± 0,89 44,85 ± 0,61 3,03 11,3 4,8 ± 0,1 55 51,96 ± 0,93 42,45 ± 0,82 3,01 10,8 4,9 ± 0,1 60 57,77 ± 0,25 38,85 ± 0,79 2,98 9,86 4,8 ±0,1 65 59,11 ± 0,19 38,09 ± 0,67 2,89 9,41 4,7 ± 0,1 70 62,01 ± 0,59 37,34 ± 0,64 2,81 9,59 4,8 ± 0,1 75 61,85 ± 0,38 31,20 ± 0,70 2,79 9,41 4,7 ± 0,1 Tà 68,58 ± 0,54 il 61,76 ± 0,79 u iệ TE U H 13 Đồ án tốt nghiệp Bảng Kết khảo sát nhiệt độ lên men Nhiệt độ Hàm lượng Hàm lượng Độ cồn (%) Mật độ tế đường khử cellulose bào (mg/mL) (mg/mL) 106(cfu/ml) Phòng 45,25 ± 0,25c 48,04 ± 0,11d 3,16 ± 0,06a 10,5 300C 46,70 ± 0,60d 37,40 ± 0,37c 3,33 ± 0,06b 11,4 350C 44,16 ± 0,25b 31,02 ± 0,32a 3,86 ± 0,06c 11,9 400C 40,40 ± 0,40a 37,95 ± 0,39b 3,43 ± 0,06b 11,5 Bảng Kết khảo sát tỷ lệ nấm men Tà Mật độ Đường khử Cellulose (%) (mg/mL) (mg/mL) Nồng độ cồn (%) u iệ il SC:PA tế bào 106(cfu/ ml) 47,5 ± 0,98a 34,4 ± 0,40b H 3,83 ± 0,06b 10,0 1:4 51,28 ± 0,99b 31,13 ± 0,62a 3,93 ± 0,06c 15,0 4:1 50,58 ± 0,75b 31,53 ± 0,07a 3,68 ± 0,03a 7,55 2:3 44,96 ± 0,69a 34,35 ± 0,88b 3,67 ± 0,06a 9,68 3:2 45,68 ± 0,99a 33,96 ± 0,17b 3,63 ± 0,16a 8,14 CH TE U 1:1 Bảng Kết khảo sát tỷ lệ enzyme đến trình SSCF Tỷ lệ Hàm lượng Hàm lượng Nồng độ cồn Mật độ tế bào (%) 106(cfu/ml) 37,27 ± 0,16d 2,36 ± 0,06b 12,02 18,12 ± 0,42b 32,17 ± 0,82c 3,06 ± 0,06a 11,20 0,5 18,38 ± 0,82b 30,08 ± 0,66b 3,93 ± 0,06c 15,31 0,7 20,72 ± 0,57c 29,26 ± 0,66b 4,06 ± 0,06d 17,06 0,9 21,00 ± 0,75c 28,23 ± 0,44a 4,10 ± 0,10d 17,18 enzyme đường (%) (mg/mL) (mg/mL) 0,1 16,5 ± 0,47a 0,3 khử cellulose 14 Đồ án tốt nghiệp Bảng Kết khảo sát ảnh hưởng pH pH Hàm lượng Hàm đường lượng Nồng độ cồn Mật độ tế bào khử cellulose (%) 106(cfu/ml) (mg/mL) (mg/mL) 4,5 31.47 ± 0,90a 37,88 ± 0,41a 3,43 ± 0,05a 10,96 33,83 ± 0,58b 32,17 ± 0,82b 4,06 ± 0,11b 12,02 5,5 35,21 ± 0,98b 30,08 ± 0,66b 4,16 ± 0,15b 17,35 Bảng Kết khảo sát ảnh hưởng tốc độ khuấy đảo Tốc độ Hàm lượng Hàm lượng Nồng độ cồn Mật độ tế bào Tà (vòng/phút) đường 106(cfu/ml) 46,41 ± 0,23a 3,60± 0,10a 10,0 45,17 ± 0,26b 3,85 ± 0,05b 12,0 15,0 il (mg/mL) (%) khử cellulose (mg/mL) 100 23,62 ± 0,46b 150 27,02 ± 0,51c 39,65 ± 1,01b 4,06 ± 0,15c 200 29,41 ± 0.48d 39,25 ± 1.30b 4,13 ± 0,05c u 19,36 ± 0,17a U iệ 50 H CH TE 17,0  Ghi chú: Các giá trị trung bình lần lặp lại, cột giá trị có chữ thể khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê mức độ tin cậy 95% 15