Thông tin tài liệu
ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM a lu HOÀNG VĂN TRÌNH n n va p ie gh tn to PHÂN LẬP VÀ TỐI ƢU MỘT SỐ ĐIỀU KIỆN SINH TRƢỞNG CỦA VI KHUẨN PHẢN NITRATE HÓA TRONG MẪU NƢỚC THẢI TẠI TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM THÁI NGUYÊN d oa nl w KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC a lu : Chính qui f an nv Hệ đào tạo Chuyên ngành: Công nghệ sinh học oi lm ul Khoa : CNSH - CNTP : 2012 – 2016 at nh Khóa học z z om l.c gm @ an Lu Thái Nguyên – năm 2016 n va ac th si ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM HOÀNG VĂN TRÌNH a lu Tên đề tài: n n va KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC p ie gh tn to PHÂN LẬP VÀ TỐI ƢU MỘT SỐ ĐIỀU KIỆN SINH TRƢỞNG CỦA VI KHUẨN PHẢN NITRATE HÓA TRONG MẪU NƢỚC THẢI TẠI TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM THÁI NGUYÊN oa nl w Hệ đào tạo : Chính qui d Chuyên ngành: Công nghệ sinh học a lu f an oi lm Khóa học : CNSH - CNTP ul Khoa : K45 - CNSH nv Lớp : 2012-2016 at nh Giảng viên hƣớng dẫn: ThS Dương Mạnh Cường z z om l.c gm @ an Lu Thái Nguyên – năm 2016 n va ac th si LỜI CẢM ƠN Được đồng ý Ban Giám hiệu nhà trường, Ban Chủ nhiệm khoa Công nghệ Sinh học-Công nghệ Thực phẩm, thời gian thực tập tốt nghiệp, em tiến hành thực đề tài “phân lập tối ưu số điều kiện sinh trưởng vi khuẩn phản Nitrate hóa mẫu nước thải trường Đại Học Nông Lâm Thái Nguyên” Sau thời gian tham gia nghiên cứu thực đề tài, đến em hồn thành đề tài nghiên cứu Nhân dịp em xin bày tỏ lòng biết ơn tới: ThS Dương Mạnh Cường, a lu Khoa Công nghệ sinh học Công nghệ thực phẩm, Trường Đại học Nông Lâm n Thái Ngun ln tận tình hướng dẫn, giúp đỡ em thực đề tài n va p ie gh tn to Em xin gửi lời cảm ơn tới ThS Vi Đại Lâm giúp đỡ tạo điều kiện tốt cho em suốt trình thực đề tài oa nl w Em xin chân thành cảm ơn thầy cô Khoa Công nghệ Sinh Học Công nghệ Thực phẩm, Trường Đại học Nông lâm Thái Nguyên dạy dỗ, truyền đạt kiến thức kinh nghiệm nghiên cứu khoa học suốt thời gian học tập d Cuối em xin chân thành cảm ơn gia đình, bạn bè ln ủng hộ, động viên để em có tự tin học tập thực tập tốt nghiệp nv a lu f an Dù cố gắng nhiều, xong khóa luận khơng thể tránh khỏi thiếu sót at nh Em xin chân thành cảm ơn! oi lm ul hạn chế Kính mong nhận bảo, đóng góp ý kiến q Thầy Cơ toàn thể bạn z Thái Nguyên, ngày tháng năm 2016 z gm @ Sinh viên om l.c an Lu Hồng Văn Trình n va ac th si i DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 3.1 Các thiết bị sử dụng phịng thí nghiệm 20 Bảng 3.2 Các hóa chất sử dụng nghiên cứu 21 Bảng 4.1 Dấu hiệu phát triển dòng vi khuẩn môi trường Giltay 29 Bảng 4.2 Đặc điểm hình thái khuẩn lạc dịng vi khuẩn nghiên cứu 31 Bảng 4.3 Đặc điểm tế bào dòng vi khuẩn nghiên cứu 32 Bảng 4.4 Ảnh hưởng pH đến sinh trưởng dòng vi khuẩn A1 34 a lu Bảng 4.5 Ảnh hưởng pH đến sinh trưởng dòng vi khuẩn A2 36 n n va Bảng 4.6 Ảnh hưởng nhiệt độ đến sinh trưởng dòng vi khuẩn A1 37 Bảng 4.8 Ảnh hưởng nguồn carbon khác đến sinh trưởng dòng vi khuẩn A1 41 p ie gh tn to Bảng 4.7 Ảnh hưởng nhiệt độ đến dòng vi khuẩn A2 39 d oa nl w Bảng 4.9 Ảnh hưởng nguồn carbon khác đến sinh trưởng dòng vi khuẩn A2 42 f an nv a lu oi lm ul at nh z z om l.c gm @ an Lu n va ac th si 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.2237.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.66 ii DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 2.1 Chu trình nitơ tự nhiên(Alfred Brown, Heidi Smith, 2014) Hình 2.2 Q trình chuyển hóa nito nước(nguồn:acc-biotech.com) Hình 2.3 Hiện tượng tảo nở hoa (nguồn: vast.ac.vn) 10 Hình 2.4 Nguồn nước ô nhiễm suối sau khu ký túc K ao thủy sảnkhoa Chăn Nuôi Thú Y, trường Đại học Nông lâm Thái Nguyên (Chụp ngày 05/04/2016) 18 Hình 4.1 Các dịng vi khuẩn phản nitrate hóa mơi trường Giltay 27 a lu Hình 4.2 Dịng vi khuẩn phản nitrate hóa mơi trường chứa thuốc thử Diphenylamine 29 n n va Hình 4.4 Hình thái khuẩn lạc dòng vi khuẩn A1 A2 32 p ie gh tn to Hình 4.3 Các dịng vi khuẩn A1, A2,A3, A4 mơi trường đối chứng sau 120 nuôi cấy 30 Hình 4.5 Hình thái tế bào dịng vi khuẩn A1 A2 32 oa nl w Hình 4.6 Thử nghiệm khả hiếu khí, kỵ khí dịng vi khuẩn phân lập 34 Hình 4.7 Biểu đồ ảnh hưởng pH đến sinh trưởng dòng vi khuẩn A1 35 d a lu Hình 4.8 Biểu đồ ảnh hưởng pH đến sinh trưởng dòng vi khuẩn A2 36 f an nv Hình 4.9 Biểu đồ ảnh hưởng nhiệt độ đến sinh trưởng dòng vi khuẩn A1 38 oi lm ul Hình 4.10 biểu đồ ảnh hưởng nhiệt độ đến sinh trưởng dòng vi khuẩn A2 39 at nh Hình 4.11 Biểu đồ ảnh hưởng nguồn carbon khác đến sinh trưởng dòng vi khuẩn A1 42 z z Hình 4.12 Biểu đồ ảnh hưởng nguồn carbon khác đến sinh trưởng dòng vi khuẩn A2 42 om l.c gm @ an Lu n va ac th 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.99 si 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.2237.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.66 iii DANH MỤC TỪ, CỤM TỪ VIẾT TẮT a lu n Nghĩa đầy đủ CO2 Cacbonic N2 Nito NO2- Nitrit NO3- Nitrat NH4+ Amoni NH3 Amoniac O2 Oxy DO Dissolved Oxygen n va Từ thuật ngữ viết tắt p ie gh tn to d oa nl w f an nv a lu oi lm ul at nh z z om l.c gm @ an Lu n va ac th 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.99 si 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.2237.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.66 iv MỤC LỤC PHẦN MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục tiêu yêu cầu đề tài 1.2.1 Mục tiêu đề tài 1.2.2 Yêu cầu đề tài 1.3 Ý nghĩa đề tài 1.3.1 Ý nghĩa khoa học 1.3.2 Ý nghĩa thực tiễn a lu PHẦN 2: TỔNG QUAN TÀI LIỆU n n va 2.1 Cơ sở khoa học đề tài 2.1.2 Chuyển hóa nito tác hại việc dư thừa nito nước thải p ie gh tn to 2.1.1 Tổng quan chu trình nitơ tự nhiên 2.1.3 Xử lý nước thải giàu hợp chất chứa nitơ ứng dụng vi khuẩn phản nitrat hóa 12 oa nl w 2.1.4 Thực trạng nước thải trường Đại Học Nông Lâm Thái Nguyên 17 2.2 Tình hình nghiên cứu nước giới 18 d 2.2.1 Tình hình nghiên cứu nước 18 a lu nv 2.2.2 Tình hình nghiên cứu giới 19 f an PHẦN 3: ĐỐI TƢỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 20 oi lm ul 3.1 Đối tượng phạm vi nghiên cứu 20 at nh 3.1.1 Đối tượng nghiên cứu 20 z 3.1.2 Phạm vi nghiên cứu 20 z 3.2 Địa điểm thời gian tiến hành 20 @ gm 3.2.1 Địa điểm nghiên cứu 20 om l.c 3.2.2 Thời gian nghiên cứu 20 3.3 Dụng cụ, hóa chất 20 an Lu 3.3.1 Dụng vụ, thiết bị 20 3.3.2 Hóa chất sử dụng 21 n va ac th 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.99 si 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.2237.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.66 v 3.3.3 Môi trường sử dụng 22 3.4 Nội dung nghiên cứu 22 3.5 Phương pháp nghiên cứu 22 3.5.1 Phương pháp thu thập mẫu 22 3.5.2 Phương pháp Phân lập tuyển chọn vi khuẩn phản nitrate hóa 23 3.5.3 Phương pháp mơ tả đặc điểm hình thái, đặc điểm sinh học dịng vi khuẩn phản nitrate hóa 24 3.5.4 Phương pháp giữ giống 25 a lu 3.5.5 Phương pháp nghiên cứu tối ưu số điều kiện môi trường ni cấy đến sinh trưởng dịng vi khuẩn phản nitrate hóa 26 n PHẦN 4: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 27 va 4.1 Kết phân lập vi khuẩn nitrate hóa 27 n p ie gh tn to 4.2 Kết tuyển chọn dịng vi khuẩn có hoạt tính phản nitrate hóa (khử nitrate) 27 4.2.1 Tuyển chọn dịng vi khuẩn có hoạt tính phản nitrate hóa phản ứng với thuốc thử diphenylamine 28 oa nl w 4.2.2 Tuyển chọn dịng vi khuẩn có hoạt tính phản nitrate hóa dựa đặc điểm sinh trưởng dịng vi khuẩn 29 d 4.3 Kết Định danh sơ dòng vi khuẩn tuyển chọn 31 a lu nv 4.3.1 Đặc điểm hình thái khuẩn lạc 31 f an 4.3.2 Đặc điểm hình dạng tế bào 32 oi lm ul 4.3.3 Khả sinh trưởng mơi trường hiếu khí, kỵ khí 33 nh 4.4 Kết nghiên cứu tối ưu số yếu tố ảnh hưởng đến khả sinh trưởng vi khuẩn phản nitrate hóa 34 at 4.4.1 Ảnh hưởng pH đến sinh trưởng dòng vi khuẩn A1 A2 34 z z 4.4.2 Ảnh hưởng nhiệt độ đến sinh trưởng dòng vi khuẩn A1 A2 37 gm @ om l.c 4.3.3 Ảnh hưởng nguồn carbon khác đến sinh trưởng hai dòng vi khuẩn A1 A2 40 PHẦN KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 45 an Lu 5.1 Kết luận 45 n va ac th 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.99 si 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.2237.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.66 vi 5.2 Kiến nghị 45 TÀI LIỆU THAM KHẢO 46 I Tài liệu Tiếng Việt 46 II Tài liệu tiếng anh 46 III Tài liệu tham khảo từ Internet 47 a lu n n va p ie gh tn to d oa nl w f an nv a lu oi lm ul at nh z z om l.c gm @ an Lu n va ac th 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.99 si 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.2237.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.66 PHẦN MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề Ơ nhiễm mơi trường vấn đề nóng bỏng, đáng lo ngại quốc gia tồn giới nay, có Việt Nam Tình trạng nhiễm mơi trường sinh thái chủ yếu hoạt động sản xuất sinh hoạt người gây Vấn đề ngày trầm trọn đe dọa trực tiếp tới phát triển kinh tế - xã hội, tồn phát triển hệ tương lai Ơ nhiễm mơi trường bao gồm loại là: ô nhiễm không khí, ô nhiễm đất ô nhiễm nguồn nước Trong ba loại nhiễm nhiễm nước vấn đề nghiêm a lu trọng, đặc biệt khu vực tập trung đông dân cư khu công nghiệp Nguyên n n va nhân gây ô nhiễm môi trường nước chủ yếu nước thải sinh hoạt chưa qua xử lý tn to xử lý chưa triệt để, đổ môi trường gây ô nhiễm nguồn nước ao hồ sông suối xung quanh p ie gh Đặc trưng nước thải sinh hoạt chứa nhiều tạp chất khác nhau, khoảng 52% chất hữu cơ, 48% chất vô lượng lớn vi sinh vật (Trần văn oa nl w Nhân, Ngơ Thị Nga, 2002), hàm lượng nitơ nước thải cao, đổ môi trường nước kênh, mương, ao, hồ, sông suối tác động tiêu cực đến d a lu hệ sinh thái nước quần thể thủy sinh vật gây ảnh hưởng như: Hiện tượng f an nv phú dưỡng hệ sinh thái nước dẫn tới phát triển bùng nổ tảo vi sinh vật gọi tượng tảo nở hoa, làm cạn kiệt nguồn oxy nước, gây độc với hệ ul oi lm sinh thái nước, xâm nhập vào nước ngầm dạng ion nitrite nitrate người sử dụng nguồn nước ngầm sinh hoạt đun nấu,lượng chất xâm nh at nhập vào thể gây ảnh hưởng đến sức khỏe người hội chứng trẻ da xanh z z (methahemoglobin), nguy gây ung thư gm @ Để giải vấn đề trên, việc nghiên cứu ứng dụng vi sinh vật để xử lý nước bị ô nhiễm ngày phổ biến Các phương pháp vật lý, hóa học… gây tác om l.c dụng phụ, tác hại sau khơng an tồn thân thiện với mơi trường,ưu điểm việc sử dụng vi sinh vật giúp tăng cường khả phục hồi, khả tự làm an Lu mơi trường, có tính ổn định cao thân thiện với môi trường n va ac th 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.99 si 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.2237.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.66 33 4.3.3 Khả sinh trưởng mơi trường hiếu khí, kỵ khí Ngồi để định danh sơ dòng vi khuẩn A1, A2 thuộc dòng vi khuẩn chúng tối tiến hành nghiên cứu khả sinh trưởng hai điều kiện mơi trường kỵ khí hiếu khí hai dịng vi khuẩn A1 A2 Chúng tơi tiến hành ni cấy hai dịng vi khuẩn A1 A2 mơi trường giltay có pha agar dạng thạch đứng bán lỏng (0,5% Agar) Môi trường đổ vào ống nghiệm để thẳng đứng, dùng que cấy hình kim, sau lấy sinh khối vi khuẩn dòng A1, A2 đâm sâu vào giũa khối thạch bán lỏng, xuống tận sát đáy ống nghiệm, đường cấy thẳng, nhẹ nhàng, không gây nứt, vỡ môi trường a lu Sau 72 ni cấy mơi trường thạch đứng hai dịng vi khuẩn A1 A2 n n va sinh trưởng bề mặt sâu bên khối thạch đứng Điều chứng tỏ hai p ie gh tn to dòng vi khuẩn vi khuẩn kỵ khí khơng bắt buộc (Hình 4.6) d oa nl w f an nv a lu oi lm ul at nh z z om l.c gm @ an Lu n va ac th 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.99 si 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.2237.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.66 34 Hình 4.6 Thử nghiệm khả hiếu khí, kỵ khí dòng vi khuẩn phân lập Từ kết đặc điểm hình thái khuẩn lạc, đặc điểm hình thái tế bào khả sinh trưởng điều kiện hiếu khí kỵ khí mà chúng tơi nghiên cứu trên, so sánh với đặc điểm phân loại Martin Dworkin cs, (2002), dựa theo giáo trình vi sinh vật học(Nguyễn Lân Dũng cs, 2000), dựa theo giảng Thực Hành vi sinh ứng dụng (Nguyễn hồi hương, 2009) chúng tơi đưa kết luận kết định danh sơ sau: a lu - Dịng A1 có đặc điểm giống chi vi khuẩn Paracoccus - Dịng A2 có đặc điểm giống chi vi khuẩn Pseudomonas n 4.4 Kết nghiên cứu tối ƣu số yếu tố ảnh hƣởng đến khả sinh n va trƣởng vi khuẩn phản nitrate hóa tn to 4.4.1 Ảnh hưởng pH đến sinh trưởng dòng vi khuẩn A1 A2 p ie gh Để tối ưu pH môi trường dịng vi khuẩn A1 A2 chúng tơi tiến hành khảo sát ảnh hưởng pH đến sinh trưởng dịng A1 A2 cách ni cấy oa nl w hai dịng vi khuẩn mơi trường Giltay lỏng, PH 5,0; 6,0; 7,0; 8,0; 9,0 Ni cấy tĩnh kỵ khí nhiệt độ 300C, sau mốc thời gian 0h, 24h, 48h, 72h, d 96h, 120h,144h tiến hành đo OD620nm để xác định sinh khối tế bào Kết ghi a lu f an nv nhận bảng 4.4 bảng 4.5 thể qua hai biểu đồ hình 4.7 hình 4.8 Bảng 4.4 Ảnh hƣởng pH đến sinh trƣởng dòng vi khuẩn A1 48 72 96 120 144 0,349 0,646 0,734 0,641 0,512 1,017 0,968 0,860 0,723 1,241 1,179 1,044 0,809 1,336 1,249 1,138 0,885 0,941 1,045 0,943 0,823 0,126 pH=6 0,009 0,257 pH=7 0,010 0,378 1,048 pH=8 0,008 0,336 1,105 pH=9 0,009 0,290 0,768 0,843 z z @ om l.c 0,010 gm pH=5 at 24 nh Mật độ (OD620nm) oi lm ul Thời gian (h) Từ giá trị đo bảng 4.4 tiến hành vẽ biểu đồ thể ảnh an Lu hưởng pH đến sinh trưởng dòng vi khuẩn A1 qua biểu đồ sau: n va ac th 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.99 si 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.2237.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.66 35 a lu Hình 4.7 Biểu đồ ảnh hưởng pH đến sinh trưởng dòng vi khuẩn A1 n n va p ie gh tn to d oa nl w f an nv a lu oi lm ul at nh z z om l.c gm @ an Lu n va ac th 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.99 si 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.2237.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.66 36 Bảng 4.5 Ảnh hƣởng pH đến sinh trƣởng dòng vi khuẩn A2 Thời gian (h) Mật độ (OD620nm) pH=5 pH=6 pH=7 pH=8 pH=9 24 48 72 96 120 144 0,009 0,011 0,010 0,009 0,010 0,046 0,072 0,124 0,148 0,081 0,287 0,368 0,507 0,483 0,359 0,424 0,632 0,845 0,818 0,628 0,450 0,746 0,903 0,915 0,804 0,416 0,678 0,796 0,824 0,732 0,307 0,553 0,652 0,619 0,561 Từ giá trị đo bảng 4.5 tiến hành vẽ biểu đồ thể ảnh hưởng pH đến sinh trưởng dòng vi khuẩn A2 qua biểu đồ sau: a lu n n va p ie gh tn to oa nl w d Hình 4.8 Biểu đồ ảnh hưởng pH đến sinh trưởng dòng vi khuẩn A2 a lu f an nv Dựa vào bảng 4.4 bảng 4.5 (thể hai biểu đồ hình 4.7 4.8) ta thấy có khác giá trị mật độ tế bào dòng A1 A2 mức pH khác ul oi lm theo mốc thời gian đo,chúng nhận xét sau: hai dòng A1 A2 sinh trưởng tốt dải pH rộng từ PH=6 đến PH=9, sinh trưởng tốt hai giá trị pH=7 nh at pH=8 (từ trung tính đến kiềm) giá trị OD giảm rõ rệt pH giảm xuống z giá trị pH
Ngày đăng: 25/09/2023, 19:12
Xem thêm:
