Nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính chống ung thư của hai loại xương quạt (Dianella ensifolia) và Côm Hải Nam (Elaeocarpus hainanensis)

Nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính chống ung thư của hai loại xương quạt (Dianella ensifolia) và Côm Hải Nam (Elaeocarpus hainanensis).Nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính chống ung thư của hai loại xương quạt (Dianella ensifolia) và Côm Hải Nam (Elaeocarpus hainanensis).Nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính chống ung thư của hai loại xương quạt (Dianella ensifolia) và Côm Hải Nam (Elaeocarpus hainanensis).Nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính chống ung thư của hai loại xương quạt (Dianella ensifolia) và Côm Hải Nam (Elaeocarpus hainanensis).Nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính chống ung thư của hai loại xương quạt (Dianella ensifolia) và Côm Hải Nam (Elaeocarpus hainanensis).Nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính chống ung thư của hai loại xương quạt (Dianella ensifolia) và Côm Hải Nam (Elaeocarpus hainanensis).Nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính chống ung thư của hai loại xương quạt (Dianella ensifolia) và Côm Hải Nam (Elaeocarpus hainanensis).Nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính chống ung thư của hai loại xương quạt (Dianella ensifolia) và Côm Hải Nam (Elaeocarpus hainanensis).Nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính chống ung thư của hai loại xương quạt (Dianella ensifolia) và Côm Hải Nam (Elaeocarpus hainanensis).Nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính chống ung thư của hai loại xương quạt (Dianella ensifolia) và Côm Hải Nam (Elaeocarpus hainanensis).Nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính chống ung thư của hai loại xương quạt (Dianella ensifolia) và Côm Hải Nam (Elaeocarpus hainanensis).Nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính chống ung thư của hai loại xương quạt (Dianella ensifolia) và Côm Hải Nam (Elaeocarpus hainanensis).Nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính chống ung thư của hai loại xương quạt (Dianella ensifolia) và Côm Hải Nam (Elaeocarpus hainanensis).Nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính chống ung thư của hai loại xương quạt (Dianella ensifolia) và Côm Hải Nam (Elaeocarpus hainanensis).Nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính chống ung thư của hai loại xương quạt (Dianella ensifolia) và Côm Hải Nam (Elaeocarpus hainanensis).Nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính chống ung thư của hai loại xương quạt (Dianella ensifolia) và Côm Hải Nam (Elaeocarpus hainanensis).Nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính chống ung thư của hai loại xương quạt (Dianella ensifolia) và Côm Hải Nam (Elaeocarpus hainanensis).Nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính chống ung thư của hai loại xương quạt (Dianella ensifolia) và Côm Hải Nam (Elaeocarpus hainanensis).Nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính chống ung thư của hai loại xương quạt (Dianella ensifolia) và Côm Hải Nam (Elaeocarpus hainanensis).Nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính chống ung thư của hai loại xương quạt (Dianella ensifolia) và Côm Hải Nam (Elaeocarpus hainanensis).Nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính chống ung thư của hai loại xương quạt (Dianella ensifolia) và Côm Hải Nam (Elaeocarpus hainanensis).Nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính chống ung thư của hai loại xương quạt (Dianella ensifolia) và Côm Hải Nam (Elaeocarpus hainanensis).Nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính chống ung thư của hai loại xương quạt (Dianella ensifolia) và Côm Hải Nam (Elaeocarpus hainanensis).

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ - BÁ THỊ CHÂM NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HĨA HỌC VÀ HOẠT TÍNH CHỐNG UNG THƯ CỦA HAI LOÀI XƯƠNG QUẠT (Dianella ensifolia) VÀ CÔM HẢI NAM (Elaeocarpus hainanensis) LUẬN ÁN TIẾN SĨ HÓA HỮU CƠ Hà Nội – 2023 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ - BÁ THỊ CHÂM NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HĨA HỌC VÀ HOẠT TÍNH CHỐNG UNG THƯ CỦA HAI LỒI XƯƠNG QUẠT (Dianella ensifolia) VÀ CƠM HẢI NAM (Elaeocarpus hainanensis) Chuyên ngành: Hóa hữu Mã số: 44 01 14 LUẬN ÁN TIẾN SĨ HÓA HỌC NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: PGS.TS Vũ Đình Hồng PGS TS Trịnh Thị Thủy Hà Nội - 2023 i LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan luận án: "Nghiên cứu thành phần hóa học hoạt tính chống ung thư hai loài Xương quạt (Dianella ensifolia) Cơm hải nam (Elaeocarpus hainanensis)" cơng trình nghiên cứu hướng dẫn khoa học tập thể hướng dẫn Luận án sử dụng thông tin trích dẫn từ nhiều nguồn tham khảo khác thơng tin trích dẫn ghi rõ nguồn gốc Các kết nghiên cứu công bố chung với tác giả khác trí đồng tác giả đưa vào luận án Các số liệu, kết trình bày luận án hoàn toàn trung thực chưa cơng bố cơng trình khác ngồi cơng trình cơng bố tác giả Luận án hồn thành thời gian tơi làm nghiên cứu sinh Học viện Khoa học Công nghệ, Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam Hà Nội, ngày tháng năm 20 Tác giả luận án (Ký ghi rõ họ tên) ii LỜI CẢM ƠN Luận án thực Viện Hóa học –Viện hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt nam Trong suốt thời gian học tập nghiên cứu Viện, tác giả nhận nhiều giúp đỡ quý báu thầy cô, nhà khoa học, đồng nghiệp Viện bạn bè gia đình Tơi xin trân trọng bày tỏ lời cám ơn sâu sắc tới PGS TS Vũ Đình Hồng PGS.TS Trinh Thị Thủy người thầy dành nhiều thời gian tâm huyết hướng dẫn bảo cho tơi tận tình khoa học chuyên môn Đồng thời thầy động viên tạo điều kiện thuận lợi để tơi hồn thành luận án Tơi xin chân thành cám ơn Ban lãnh đạo Viện Hóa học cán Viện hóa học quan tâm giúp đỡ tôi, tạo điều kiện tốt để tơi hồn thành luận án Tơi bày tỏ lòng biết ơn tới tập thể phòng Nghiên cứu hợp chất tự nhiên phịng Hóa sinh ứng dụng quan tâm giúp đỡ tạo điều kiện thuận lợi cho tơi q trình học tập nghiên cứu Tôi xin trân trọng cám ơn Ban lãnh đạo Học viện Khoa học Công nghệ tập thể cán thuộc Học viện giúp đỡ tạo điều kiện tốt cho tơi q trình học tập Cuối cùng, tơi xin bày tỏ lịng biết ơn chân thành sâu sắc tới tồn thể gia đình, bạn bè người thân quan tâm, khích lệ, dành thời gian cho tơi suốt thời gian học tập nghiên cứu Xin trân trọng cám ơn! Tác giả Bá Thị Châm iii MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN ii MỤC LỤC iii DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT vi DANH MỤC HÌNH viii DANH MỤC BẢNG xii MỞ ĐẦU CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Tổng quan chi Dianella 1.1.1 Đặc điểm thực vật 1.1.2 Công dụng y học cổ truyền 1.1.3 Thành phần hóa học .4 1.1.4 Hoạt tính sinh học 1.1.5 Tổng quan loài Dianella ensifolia 1.1.5.1 Đặc điểm thực vật 1.1.5.2 Ứng dụng y học cổ truyền .10 1.1.5.3 Thành phần hóa học 10 1.1.5.4 Hoạt tính sinh học .13 1.2 Tổng quan chi Côm (Elaeocarpus) 13 1.2.1 Đặc điểm thực vật 13 1.2.2 Ứng dụng y học cổ truyền 14 1.2.3 Thành phần hóa học .14 1.2.4 Hoạt tính sinh học 22 1.2.5 Tổng quan loài Elaeocarpus hainanensis .23 1.2.5.1 Đặc điểm thực vật 23 1.2.5.2 Thành phần hóa học hoạt tính sinh học 23 1.5 Về hoạt tính chống ung thư cucurbitane 25 CHƯƠNG 2: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 29 2.1 MẪU THỰC VẬT 29 iv 2.2 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 30 2.2.1 Phương pháp phân lập chất 30 2.2.2 Phương pháp xác định cấu trúc hóa học .30 2.2.3 Phương pháp thử nghiệm hoạt tính sinh học 31 2.2.3.1 Đánh giá hoạt tính gây độc tế bào 31 2.2.3.2 Phương pháp phân tích số lượng tế bào, chu trình tế bào, xác định cảm ứng tế bào chết theo chương trình apoptosis .33 2.2.3.3 Phương pháp xác định biểu số gen liên quan đến ung thư phương pháp Real-time PCR 34 CHƯƠNG 3: THỰC NGHIỆM 36 3.1 Loài Xương quạt (D ensifolia) .36 3.1.1 Chiết phân lớp hoạt chất 36 3.1.2 Chiết, tách hợp chất 36 3.1.3 Hằng số vật lý liệu phổ 41 3.2 Lồi Cơm hải nam (E hainanensis) .42 3.2.1 Chiết phân lớp hoạt chất 42 3.2.2 Chiết, tách chất .43 3.2.3 Hằng số vật lý liệu phổ .45 3.3 Thử hoạt tính chống ung thư 47 3.3.1 Các hợp chất phân lập từ loài Xương quạt 47 3.3.2 Các hợp chất phân lập từ lồi Cơm hải nam .48 4.1 Các kết nghiên cứu thành phần hóa học 49 4.1.1 Xác định cấu trúc hóa học chất phân lập từ loài Xương quạt (Dianella ensifolia) 49 4.1.2 Xác định cấu trúc hóa học chất từ lồi Côm hải nam (Elaeocarpus hainanensis) .75 4.1.2.1 Các hợp chất cucurbitacin 75 4.1.2.2 Các hợp chất olean triterpene .95 4.1.2.3 Các hợp chất khác .116 4.2 Kết nghiên cứu hoạt tính chống ung thư .119 4.2.1 Hoạt tính chống ung thư hợp chất phân lập từ Xương quạt 119 v 4.2.2 Hoạt tính chống ung thư hợp chất phân lập từ Côm hải nam 120 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 129 NHỮNG ĐÓNG GÓP MỚI CỦA LUẬN ÁN 131 CÁC CƠNG TRÌNH CƠNG BỐ CĨ LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN ÁN .132 TÀI LIỆU THAM KHẢO 133 PHỤ LỤC 146 vi DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT Kí hiệu Tiếng anh Diễn giải Carbon-13 Nuclear Magnetic Resonance Spectroscopy Phổ cộng hưởng từ hạt nhân cacbon 13 Proton Nuclear Magnetic Resonance Spectroscopy Phổ cộng hưởng từ hạt nhân proton 8505 Human undifferentiated thyroid carcinoma Ung thư biểu mô tuyến giáp khơng biệt hóa người A549 Human lung carcinoma Ung thư phổi người ATTC American Type Culture Collection Trung tâm lưu giữ chủng Hoa kỳ br broad COSY 13 C-NMR H-NMR H-1H-Correlation Spectroscopy Cq Phổ chiều thể tương tác proton carbon kế cận Cacbon không liên kết với hidro d doublet DCM Dichlomethan dd doublet of doublets Doublet doublet DEPT Distortionless Enhancement by Polarisation Transfer Phổ DEPT DMEM Dulbecco’s Modifile Eagle Medium dt doublet of triplets ESI-MS Electrospray Ionization Mass Spectra Phổ khối ion hóa phun mù điện tử Ethyl acetat Ethanol Hela Human cervix carcinoma Ung thư tử cung người Hep3B Human hepatocellular carcinoma Ung thư gan người HMBC Heteronuclear Mutiple Bone Connectivity Phổ tương tác dị hạt nhân qua nhiều liên kết HSQC Heteronuclear Single-Quantum Coherence Phổ tương tác dị hạt nhân qua liên kết EtOAc EtOH vii HR-ESI-MS High Resolution Electrospray Ionization Mass Spetrum Phổ khối lượng phân giải cao phun mù điện tử Huh-7 Human hepatocyte-derived carcinoma Ung thư gan người IC50 Inhibition concentration at 50% Nồng độ ức chế 50% Hằng số tương tác tính Hz J (Hz) Ung thư vú người phụ thuộc estrogen MCF-7 Human breast carcinoma m MeOH multiplet NOESY Nuclear Overhauser Enhancemen Phổ chiều thể tương tác Spectroscopy proton gần không gian OCI/AML3 Acute myeloid leukemia Ung thư bạch cầu nguyên bào tủy cấp tính OD RPMI RT-PCR Optical density Roswell Park Memorial Institute Real-time reverse transcription polymerase chain reaction Mật độ quang học q quartet quint quintet s singlet T24 Human urine bladder carcinoma Ung thư bàng quang người TLC Thin layer chromatography Sắc ký lớp mỏng SNU-1 Human gastric carcinoma Ung thư dày người  (ppm) ppm = part per million Độ dịch chuyển hóa học tính phần triệu Methanol viii DANH MỤC HÌNH Hình 1.1 Ảnh minh họa số lồi điển hình thuộc chi Dianella Hình 1.2 Cấu trúc số flavonoid tìm thấy chi Dianella Hình 1.3 Cấu trúc số quinone tìm thấy chi Dianella Hình 1.4 Cấu trúc số naphthalene tìm thấy chi Dianella .9 Hình 1.5 Cấu trúc hợp chất triterpenoid phân lập từ loài D ensifolia 11 Hình 1.6 Cấu trúc hợp chất khác phân lập từ lồi D ensifolia .12 Hình 1.7 Cấu trúc chất tinh dầu lồi D ensifolia 13 Hình 1.8 Một số lồi điển hình thuộc chi Cơm phân bố Việt Nam .14 Hình 1.9 Cấu trúc số terpenoid tìm thấy chi Elaeocarpus 17 Hình 1.10 Cấu trúc số alkaloid tìm thấy chi Elaeocarpus 18 Hình 1.11 Cấu trúc flavonoid tìm thấy chi Elaeocarpus 20 Hình 1.12 Cấu trúc chất khác tìm chi Elaeocarpus 21 Hình 1.13 Cấu trúc hóa học khung cucurbitane 25 Hình 1.14 Cấu trúc hóa học cucurbitacin có tác dụng gây độc tế bào ung thư 26 Hình 2.1 Ảnh tiêu Xương quạt (D ensifolia) .29 Hình 2.2 Ảnh lồi Cơm hải nam (E hainanensis) 29 Hình 3.1 Sơ đồ tạo cao chiết từ mẫu loài Xương quạt (D ensifolia) 39 Hình 3.2 Sơ đồ phân lập chất từ cặn chiết n-hexane buthanol loài Xương quạt 40 Hình 3.3 Sơ đồ phân lập chất từ cặn chiết ethyl acetat lồi Xương quạt 40 Hình 3.4 Sơ đồ phân lập chất từ cặn chiết dichloromethan loài Xương quạt 41 Hình 3.5 Sơ đồ tạo cao chiết từ lồi Cơm hải nam (E hainanensis) 44 Hình 3.6 Sơ đồ phân lập chất từ cặn chiết DCM lồi Cơm hải nam 45 Hình 3.7 Sơ đồ phân lập chất từ cặn chiết methanol lồi Cơm hải nam 45 Hình 4.1 Cấu trúc hóa học chất DN1 .50 Hình 4.2 Phổ CD hợp chất DN1 .51 Hình 4.3 Phổ HR-ESI-MS (negative) hợp chất DN1 51 Hình 4.4 Phổ 1H-NMR (500 MHz, CDCl3) hợp chất DN1 52 Hình 4.5 Phổ 13C-NMR (125 MHz, CDCl3) hợp chất DN1 52