CỔ -⁄ 3426 u x00 h ee terrae stqr: cage eer ne eer oe BO GIAO DUC VA ĐẢO TẠO 1 ĐẠT HỌC QUỐC GIÁ 'FP HCM TRƯỜNG ĐẠT HỌC SƯ PHAM KITA 1ÍCA CM ** LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP DE TAT:
CHIET TACH CURCUMIN
TU CU NGHE ( CURCUMA LONGA L | | | | | ’ ( | se vi _ eee ok ; | Phen Vác- wee oh: mine SN V4
Trang 2Shanh ban ludn van nay
- PTS Nguyén Van Diép da cho em nhitng ¥ kién dang gap qui bdu
- Me va gia đình dã hết lòng nuôi dạy con dn hoc và luôn giáp ht dòng tiên
eeu,
- Hun chủ nhiệm khoa Hóa, có Tĩnh, có Thảo, có Ngục Anh od Yer thas
Hinh và các thây cô đã nhiệt tình giúp đỡ, động viên và tạo điều kiện thuận Ít cla:
em làn tất luận văn
- Trung tam dịch vụ phân tích thí nghiệm thư viện Khoa lưu tổng lạm, thư
ven tring Dai hoc Su Pham , thư viện trường Đại học Tổng Hài
Lời cằm đơn sâu sắc nhất em xin gửi đến tất cả các: thấy có đã tận tắm través
dụt kiên thuếc và kinh nghiệm quí báu cho em suốt bốn ndm qua
Trang 3MUC LUC MG DAU TONG QUAN A Cay nghé | Mo ta cây
Il Phan bé- thu hai và chế hiển 111, Thanh phan hóa học
IV Tác dụng dưoc lý -kiểm nghiệm nghệ dùng làm dược liệu
V Công dung
BC
| Tinh chat vat ly
II Tinh chat hoa hoe I, Định danh IV Các phương pháp chiết tách V Các phương pháp tổng hựp VỊ Tác dụng dược lý và những ứng dung THỰC NGHIỆM
Trang 5phong phu, Trai dai tif Bắc vào Nam, đầu đâu ta cing thay thấp thoáng màu xanh vu những cánh đồng những rừng cây, thảm có, Từ ngàn xưa còn nyu) da bic khúi thác và sử dụng các loài thực vật khác nhau để phục vụ cho cude song cua minh Cong vdi su phát triển của khoa học kỹ thuat con nguéli ngiy cang phat hi¢n đước nhiều tác dung mới của cây cối trong tự nhiên, tìm ra biến phái: phái Wien những loại cây có ích chế ngự hoặc loại trừ những loài có húi nhằm đáp
ing nhu cau ngay càng cao trong cuộc sống và trong công nghiệp
Nghe -hay con gọi là uất kim ,khương hoàng (tên khoa học Curcamai Long | inn)-thuộc họ Gừng (zingihcraccac) - là một loại cây thông dụng và phó biến
không chỉ ở nước tà mà còn ở nhiều nước nhiệt đới khác trên thẻ giởi 1 châu ÁV,
chau Au sang chau Mỹ Latinh và cả ở châu Úc, Ở Việt Nam túi từ lầu nhân dân đủ truyền nhau hài thuốc chữa hệnh đau bao tử và chứng tích huyết bằng cách xát lát cú nghệ phơi khó rồi lây nước uống, hay thoá nghệ tưới lén chủ vét thương nlueu lán để tránh seo mau lên da non, Ngoai ra, ede hà nội H còn sử dung hé khí nâu nướng , Chỉ cắn cho một chút hột nghệ đã xay nhuyen vao noi carry hay thau bột đổ bánh xèo bánh khoái ngay lập tức thức ăn sẽ có mau vùng hát
dan cùng với mùi thơm nông nông của nghệ Chất đã nhuôm thức an chính là
curcimin - một loại phẩm màu thiên nhiên có trong thành phản của cú nghe
Curcumin duve sif dung rong rai dé nhudm vàng trong ch biện thức phám
cling ohv sin xual dược phẩm vì nó không có độc tính, ta lại nắm dite cong thite
củ tạo và Xuất xứ rõ ràng,
Nguài ra , curcumin còn được đùng làm phẩm nhuộm vàng cúc loại xi bong , te lua , thay thể các chất màu tổng hợp phải nhập từ nước ngoai đem lai hiệu qua kính tế do việc trích ly curycumin từ cú nghệ tướng đói dc thức hiển
va nguồn nguyên liệu- củ nghê- thì rẻ tiền và vô cùng đễ kiểm
[%o điều kiện trang thiết bị phòng thí nghiệm và thời gian chuân bi han hep
trong luận văn này chúng tôi đã tiến hành :
- Chiết tách curcumin từ hột củ nghệ bằng nhiều phương pháp khác nhau
nhim tim ra phương pháp cho hiệu xuất cao nhất ,
-| "nh danh curcumin bằng một số phương pháp phản tích hoa ly
-Rhiio sát sự thay đổi màu của nó trong các dung dịch có giá trì | HÀ | khát
nh
Trang 7
CÂY NGHỆ
Fên gọi khác : L'ất kim, Khương hoàng, Ngọc kim (Safran des Indes)
Trang 8A CÂY NGHỆ:
IL MÔ TẢ CÂY([1-2|:
Nghệ là một loài cây thảo cao từ 0,6 - Ì m.ụ, thân rẻ phát triển thùnh củ hình tru hoặc hơi đẹp , có những củ con mọc ngang to bằng ngón tay Rc củng móc
từ các củ đó mà ra, Lá hình trái xoan thon nhọn ờ hai đầu , hai mắt đéu nhận, dan ti +5 cm, rộng tới I8 cm, mép lá oho (cd Imm) | | | cudng fi ed be , be es ria
lòng
Huu tự mọc giữa các lá lên Cán hoa dài tới 20 em màng cụm hoa hình trụ
Irsac hình trứng dài, Mỗi hoa dài 3 em Lá bắc dạng màng gắn như rời nhàu [ 2 |
|.¡ bắc hữu thụ khum hình máng rộng , đầu tròn xanh lục nhạt, lá bắc hái thu le lớn , màu hơi tím nhạt [ E | Đài có ba răng tù không đều nhấn | 3 | Tràng ca phiên , cánh hoa ngoài màu xanh lục - vàng nhạt chía thành ba thủy thúy tren to hơn ; phiến caénh hoa trong cling chia ba thiy bai thiy hay ben đứng vớ
phang thiy đưới lớn hơn höm thành hình mắng sâu [ L | Bao phân nhàn có húi ti nhọn , chỉ nhị rời , hơi đài hơn bào phấn, Nhị lép hình bầu dục rêng cánh môi
tàng vàng Bầu có lông vòi nhấn , đầu nhụy hơi có lông mí nhuy lép hình chủy,
Qủii nang có bà ngắn , mở bằng bá van Hạt có áo hạt | 2 |
II PHÂN BỐ VÀ THU HÁI - CHẾ BIẾN SƠ BỘ :
Cây nghệ có nguồn gốc miễn nam Á châu Mọc hoàng dai và đước wong Khap nui trong nước ta để làm thuốc và làm gia vị,
Củn mọc và được trồng nhiều ở Ấn Độ Indonesia Campuchia Lao Trung
quốc „ Brasil và khắp các nước nhiệt đới | 4 |
Ra hoa vào tháng 8 [ 2 | mùa thu hoạch củ: tháng 11-Í (khi củ đái tà) | Ÿ |
Củ khô , béo mập năng và chắc , dài chừng 3 - 7 cm đường kinh Ì-3 cm
đòi khi còn lại vết tích các nhánh và rể phụ Có hai loại cú: loại tròn (hoác hình
trứng) và loại dài móng hơn hơi cong,
Mặt ngoài xám vàng hoặc xám nâu nhạt ,hẻ để đàng vét hệ nhân , hóng
Iya0t Vàng tươi hoặc vàng hung sẵm , Cất ngàng thấy rõ hai ving: vo va teu grits |
vũng vú chiếm nửa đường bán kính)
Nghệ có mùi thơm hắc đặc biệt, vị cay nóng và đắng | Sif dung cu thân tủ
và rẻ cú | 4 |
“Thân rễ (gọi là khương hoàng) : vị cay đắng tính ấm
Trang 9nứa xạch đất rồi đồ hoặc hấp trong 6 -12 git sau dé dui cho mie mide dem phos
nang hoae sdy khé [1 | IH THÀNH PHẦN HÓA HỌC | 1-6 |: Theo R.R, Paris va H, Moyse , người tú phân tích được trong cú ngÌịc có chư: : -Ä -lfl4 nước -ft - Ñ '% chảt vỏ cư - 40-4514 tỉnh bói, nhựa, canxi oxalat Nguài ra còn chát béo Hoạt chất của nghệ gồm 1/ Tỉnh dầu : chiếm từ l5 - 5,5 %4 Lũ chất lỏng màu vàng nhạt, thơm | E |
«Ư Thành phần chú yêu :ưong tính dâu nghề là những hớp chủ cclon cát
phản đoan ở nhiệt độ E14 -117”€ ( chiếm 58.1%),
Trong đó: turmecron chiếm 29,5 % ar-turmeron chiêm 23,6 % ( theo E.Gildmeister va F.R Hoffman ) Nguii ra còn có : 25 14 zingihcrcn 1 “% D-phellandren | ‘% eucalyptol 1 % borneol 0.6% sabinen
Acid valerianic va caprvic | 6 |
Với phương pháp sắc ký lớp mỏng hai chicu via dung moi benzen tren lp
mong silicagel, hién mau bing 2.4 DNP ; tinh dầu nghệ cho đến E2 vé1 chính ve
cuc via fft RE khác nhau | 7 |
« Một số hằng số vật lý của tính dấu nghệ | 6 | :
- T¡ trọng 0.938 - 0.967
- Chi sé khife xa on™ 1512-1517
- Nang sudt quay cute aj, -13" dén -25"
hoặc quay phải +2N"
- Chỉ xô acid 0.6 - 3.1
- Chi sé ester 6.5 - l6
Trang 10- Chi s6 ester (sau khi acctyl hóa) 28 - 53:
- Độ hoà tan tan trong 4 - 5 thể tích cổn 80% trong 0,5 -I thể tích cồn 90%
Từ vỏ củ nghệ (vẫn cạo hỏ đi ) „ người ta đã cất được từ 1.5 đến 2,1 %
tỉnh dầu có thành phần tương tự như tỉnh dầu cất từ củ nghệ , đo phần vỏ dày từ 0,5 - Imm trong đó trọng lượng lớp vỏ mỏng không đáng kể , còn phần củ
dính vào chiếm chủ yếu [ I |
2/ Các chất màu vàng goi chung la Curcumin [ 1 |: Chiếm 0,3%
Tinh thé nâu đỏ ánh tím , không tan trong nước ,tan trong rượu, cter ,
cloroform, dung dịch có huỳnh quang xanh lục nhạt
Tan trong acid (mầu đỏ tươi ) , trong kiểm ( màu đỏ máu rồi ngả tím ) wong chất béo (dùng để nhuộm chất béo)
Công thức Curcumin đã được xác định như sau: Hy€O OCH3 vo 1 V-onorbordhone P IV TAC DUNG ĐƯỢC LÝ - KIEM NGHIỆM NGHE DUNG LAM DUGC LIEU: l/ Tác dụng dược lý | 1] metyl carbinol ác L.2 Tác đi
Tinh dầu nghệ có tác dụng kháng trực khuẩn lao Mycobacterium
tuberculosis HyRV ở nồng độ 0,1ug/ml Nông độ tối thiểu ức chế đối với
Bacillus subtilis là 1/250, đối vai Candida albicans 1a 1/160
Theo Taniyama H và các cộng sự các cclon œ - Ÿ ctylenic trong hệ
thống vòng có khả năng khóa nhóm - SH của men, làm rối loạn chuyển hóa
cia men trong cơ thể vị trùng nói chung và vị trùng lao nói riêng Các ccton
loại này có nhiều trong nghệ (turmeron và ar- turmeron)
-Toan tinh đầu nghệ dù pha loãng cũng có tác dụng diệt nấm và sát trùng đối với hệnh nấm, với staphylcoc và vi trùng khác
-Tiêm tinh nghệ có khả năng thấm qua các màng tế hào đặc biệt là vỏ
Trang 11- Hénh nhân bị tiều đường nếu uống 10 ngày thuốc có nehe the luing
#alactoZ gidm.,
- Néu hàm lương urobilin trong nước tiều tăng thị uống thuốc long vá nga
xử „im
- Dùng nghệ trong những bệnh về gan và đường mật thì thầy chong het dau
(doi vai sói mật cấp tính chỉ có kết quả từ từ)
- Nghệ có tác dung phá ác huyết , huyết tích va len da chi huvet các hệnh xạn hậu (phụ nữ có thai không nén dùng)
- Có tắc dung chóng loét dạ dày, làm giám tct dịch vì, giun di eid coy
dịch vị và có tắc dụng chồng viêm
-Tác dung tốt khi điều trị vét bỏng , làm chóng lén da nón và khong dc sec
đói với những vết thương mới khỏi | 3 |
2./ Kiểm nghiệm nghệ dùng làm dược liệu | # Ị
¬ soa ra }
- Dưới ánh đèn tử ngoại bốt dược liệu có huỳnh quang mau sang kim te - Trỏn một ít bột được liệu với vài mÍ cơn ctylic rồi đỏ lén trên giày lọc Ek khỏ quét bỏ bột đi, trên giây còn lại vẻt vàng “Thém dung dich acid born | acid
ha nhẹ bằng acid clohidric màu vàng sẽ hóa thành màu nâu Sou de lar them duny dich amoniac, mau nau sẽ biên thành màu đen lục
2.3 Thử đỗ tình khiết
- Đỏ ảm không qua 13%
- Tro tồn phan khơng q M⁄:
- Trò không tàn trong HC| không quả 2%
- Tap chất hữu cư không quá 21
„3 Ái i | t
Theo phương pháp định lượng cao tan trong con
-(°än chính xác Sự bột dược liệu cho vào crlcn 2300 mị Them 1K) mt con fe nut kín
-Ngắm trong 24 giờ 6 giờ đầu lắc liên tục Lọc nhành
-Lav 235 mÍ dịch lọc cho vào mi bát (đã căn trước ) Lam bec het tren ne:
cach thuy đến khô Sây ở 100-105”€ đến khi khỏi lượng khong đe: cán và tình
ham lucing @ cao tan trong con,
Trang 12V, CÔNG ĐỤNG | 1 - 3]:
- Dùng làm thuốc kiện vị và lợi mật , chữa các bệnh đường mật và gan có
kết qủa tốt Còn dùng làm thuốc cẩm máu , chảy máu cam , thổ huyết , tiểu ra
mau
Liéu ding: mdi ngay 6 - 12g (s4c lay nuféc udng hodc vo viên)
- Đùng để chữa bệnh đau loét dạ dày , làm giảm tiết dịch vị , vàng da , phụ nữ sinh xong đau bụng , huyết ứ
Liểu dùng: 1 - 6 g/ngày, chia làm 2-3 lần - Giúp cho sự tiêu hóa , làm cho máu chạy đều
- Nhân dân ta dùng nghệ để chữa cúm , ho, điều trị vết bỏng , bôi vào các
vết thương , mụn nhọt mới khỏi cho chúng mau lên da non và không có sẹo
-Trong bài thuốc kinh nghiệm dân gian chữa điên cuồng , nghệ là thành phan chủ yếu ( 250 g nghệ tán nhỏ với 100g phèn chua , hòa với nước cháo viên thành viên , Uống 50 viên /ngày ,hết hai đơn thì khỏi )
-Trong khoảng 25 năm gần đây ,viện chống lao trung ương có theo đõi một số hệnh nhân lao đã dùng nghệ mà khỏi bệnh ( uống nước củ nghệ giã nhuyễn hoặc thái mỏng ăn cả miếng )
- Ngoài ra , nghệ còn được dùng làm gia vị ( bột carry : bột nghệ phơi khô , tán nhỏ trộn với các gia vị khác )
- Dùng làm thuốc nhuộm , dung dịch chỉ thị màu , giấy nghệ để xác định định tính acid boric và borat: do curcumin ( sẽ nói rõ ở phần Curcumin)
B CURCUMIN:
Công thức phân tử C;¡H;zyO,
Khối lượng phân tử 368,39
Thanh phan nguyént6 C 68,47%
H 5 47% 0 26,06 %
Công thức cấu tạo Curcumin (theo Kostaneski)
H os
od) ont beh debe ( \ on
1,7 - bis (4 - hidroxy - 3 - metoxypheny!l ) - 1,6 - heptadicn - 3,5 - dion
Trang 13- Ở dạng hội, tình thể mau vàng cam, khi kết tỉnh thành khối lăng kính có màu vàng đỏ | 9 |
- Điểm nóng chảy 183C
- Không tan trong nước, ít tan trong benzcn, cter (Độ hòa tan trong benzecn
là 0.058/100g benzen)-
Tan Wt trong cồn ( đặc biệt khi đun nóng ), trong acid acctic băng Dung
dịch curcumin màu vàng phát huỳnh quang yếu màu xanh lục nhạt
Tan trong kiểm cho mầu đỏ tím, cho với acid màu vàng sáng, trong H;S0a
đậm đặc cho mầu đỏ tươi [ 10 |
II TÍNH CHẤT HÓA HỌC ĐẶC TRƯNG:
I/ Thay đổi mau theo pH: | 11 |}
Curcumin duge pha trong EtOH twyét déi
- Trong môi trường acid yếu , không có hiện tượng thay đổi màu
- Trong môi trường acid mạnh (như H;SO¿ đậm đặc, axid percloric ,), dung địch có màu tím đỏ Dung dịch mầu tím đỏ này phân hủy khá nhanh nên
phổ hấp thu trong hình ! (đường c) chỉ là ước chừng ,
-Trong môi trường baz nhẹ , dung dịch curcumin có màu đỏ máu
Trang 14liỀng máy quang trắc phổ LIVISPILK, với nồng độ mẫu là 2.10`M , cuvct lem ,
dụng môi là ELOH tuyệt đốt, sự thay đổi mầu của cutcumin theo pH được cho
thay ở hình I:
- Đường a:curcumin
- Đường h: curcumin trong lượng dư kiểm
- Đường c ; curcumin trong acid mạnh - Đường d: curcumin trong kiểm loãng
- Đường c: phức Bc- curcumin
Theo SPICER va STRICKLAND) thì curcumin tổn tại ở dạng cnol như sau :
Heo pos
HO - cuống öcE dai / \ oH
Trong môi trường kiểm, thì sự mất hai proton của hai nhóm phenol sẽ làm
cho cộng hưởng dễ dàng hơn ; năng lượng cần hấp thu từ trạng thái cơ bản lên
trang thái kích thích thấp , do đó Àmyaạy tăng Dung dịch có màu sâu hưn, lức
chuyển sang màu đỏ
11300 OCH3
OCH}
ql og =
To CH*CH-C=CH-C=CH~Cl oO
Khi có lượng dư kiểm thì proton ở vị trí cnol cũng sẽ mất đi và gây cản trở
qúa trình cộng hưởng ,sự linh đông của các điện tử œ giảm, cho nên năng lượng
Trang 15Theo 2 tác giả thì đây là một quá trình thuận nghịch
Do đó , trong môi trường acid yếu thì hầu như không có sự thay đổi màu Trong môitrường acid mạnh , có sự phân ly proton mạnh dẫn đến sự tác kích
của proton vào nhóm carbonil tức thời xảy ra quá trình cộng hưởng như trên Dung dich có màu sâu hơn tức là màu tím đỏ và do là một quá trình thuận nghịch
nên dung dich mau tím đỏ sẽ dẫn dẫn nhạt mau di
2) Khả năng tạo phức:
Curcumin có khả năng tạo phức với một số kim loại nhờ vào hai đầu oxy
của nhóm f}- diceton
a/ Rosocyanin | 11 |:
Đây là một phức chất được tạo thành giữa curcumin và acid boric với sự hiện
điện của một acid vô cd bao gồm hai phân tử curcumin phối trí đầu oxy của hai
nhóm carbonil với một nguyên tử B Thực chất đây là một phức cation và dễ liên
kết với một đương lượng anion bat ky ,
Bằng các phương pháp nghiên cứu vật lý hiện đại, SPICER và STRICKLAND đã để nghị công thức của Rosocyanin như sau: kh “ey }meo + he „0 x K - yr Oo ' NH« own ror —
Rosocyanin 6 dang b6t mau xanh lá cây đậm , có ánh kim; phân hủy ở
Trang 16- Không tan trong nước và những dung môi không có proton như benzen eter, CCl,
- Tan trong alcol cho dung dich mau dé dd chỉ tan khoảng 0,01%
- "Tan rất tốt trong piridin và phcnol nóng chay (0,5-1%)
- Tan trong H;SO; đậm đặc hoặc AcOH bang, nhung c4c dung dich acid thi
không bến
- Khi có nước thì các dung dịch Rosocyanin sẽ bị phân hủy dẫn bởi kiểm
hoặc acid và cho trở lại curcumin,
- Trong acid , Rosocyanin cho mau dé sim đặc trưng
- Trong baz, thì cho mầu xanh lá cây
b/ Rubrocurcumin [ II | :
I.à một hợp chất màu đỏ có được khi curcumin phản ứng với acid boric với
xự hiện diện của acid oxalic Thành phần tỷ lệ là I:J:1 theo thứ tự curcumin : B:
acid oxalic ,
I3ựa vào kết qủa phân tích , phổ Il4 2 tác giả đã để nghị một cấu trúc
tương tự như của rosocyanin nhưng các phân tử curcumin được nối với một cầu boro-oxalat “CO I — 5-9 Heo ai X | Ạ v00, ok er Xã H Ô~o2o- z h Ỳ ah 7
Rubrocurcumin là môt chất hột màu đỏ đâm không có ánh kim Phân hủy ở
300” không qua giai đoạn nóng chảy
Trang 17
4000 7500 3022
Wave -/engt/: (A)
ii _ › thụ Ở nông đó 2.I() ` M của :
a/ Rubrocucurmin
b/ làosocyanin
- Độ hòa tan của ruhrocurcumin tương tự như của rosocyanin nhưng ở nhiệt độ cao từ 100 -150° C th) rubrocurcumin ít tan hdn wong alcol va phenol
- Tan ft trong các dung môi có hằng số điện môi thấp như eter , benzen
'Frong khi đó , rosocyanin thì hồn tồn khơng tan trong các dung môi này ,
- Các dung địch alcol của ruhrocurcumin giống như của rosocyanin , cũng
thay đổi mầu từ đỏ sang xanh lá cây trong môi trường baz
- Dung dịch rubrocurcumin trong môi trường kiểm thủy giải và phân hủy hoàn toàn trong vài phút Trong môi trường acid , dung dịch rubrocurcumin thủy giải nhanh hơn
c/ Tạo phức với kim loại đất hiếm :
Yb, La, Pr, Nd, Sm đều cho phản ứng tạo phức với curcumin ; tỈ lệ 1:1 [ 12 ]
Công thức tổng quát: | M( C›HqsO¿) Cl› 2HạO | Heo OCH, HO ,-eoœmc-ewo oH ö 4 to M 0n 4/™ cl Œ đ/ Một số phản ứng tạo phức B khác:
- Curcumin còn cho phản ứng tạo phức acid borinic R`(R) BOH Phức này
Trang 18Me a" “So” ¬> ơi K Một số chất điển hình đã được khảo sát, được trình bày trong bảng | R R' Ứn/c(?C) | Màu sản phẩm | | Phenil Phenil 255 Đỏ gạch
| Phcni 2-thienyl 217 Đỏ bordeaux
3 | 2-thienyl | 2- thieny! 220 Đỏ táo
-Ngoai ra , curcumin còn tạo phức với 10- boraxanthydrol anhydrid; phức
này có cấu trúc như sau :
— ^¬x⁄Z
Ss
Jo
La chat rfn , c6 Tye =245° C , c6 mau đỏ carmin va kém bén hơn các hợp
chat phife curcumin -acid borinic
3/ Phan ting acyl héa | 14 }
Trang 19Mo 2 {arctan |e) eneren}og 2 Hàng 2 : Một số dẫn xuất ester quan trong cia curcumin Tác chất Sản phẩm Ủ n/c
Clorur benzoyl Dibenzoyl curcumin 210
Clorur benzoyl Tribenzoyl curcumin 176-177
Anhydrid acctic Diavetyl curcumin 170 -171 Metylcloro format Dicarbometoxy curcumin [S50 Etyl cloro format Dicarboctoxy curcumin 149
4/ Phan ting Hydrogen héa :
Curcumin cho phan tng với hydro ở nhiệt độ thích hợp tạo thành sản phẩm
Tctrahydrocurcumin không màu với xúc tác Pt[ 15 |
_- a 12h, CH5CH;0D} CH,
2 2
% Phản ứng ghép cặp azo:
Phản ứng này được đặc trưng ứng dụng trong dệt nhuộm nhằm làm màu
Trang 20Bang 3: Mé1 sé ddn xudt azo ciia curcumin
Tac chat azo hóa Sản phẩm Ú nức c)
Benzen diazonium Bis- phenilazocurcumin I22(phânhủy ) 0 - nitrobenzen Bis - (o- nitrophenilazo)- I80(phân hủy) diazonium -curcumin m- nilrobenzen Bis -(m-nitrophenilazo)- 176(ph4n hủy) diazonium -CUfc1i1 p- niưobenzen Bis - (p- nirophenilazo)- I25(phân hủy) diazonium -curcumin o- metylbenzen Bis- (o- metylphenilazo)- 126 diazonium -curcumin m- metylbenzen Bis- (m- metylphenilazo) 130 diazonium “curcumin p- metylbenzen Bis- (n- mectylphenilazo) 168-169 diazonium -curcumin l- naptalen Bis-(1- naplilazo)- 194 diazonium -curcumin 6/ Phản ứng súc hợp aidol :
Trang 21HI ĐỊNH DANH CURCUMIN
Vào đầu TK 19, Vogel và Pellctier chiết được chat curcumin lin dau tién dưới dạng kết tỉnh từ củ nghệ - Curcuma longa Linn thuộc họ Gừng
(⁄ingihcraccac)
100 kg cd nghé cho 0,3- 0,5 kg curcumin
Đến năm 1953,Srinivasan đã dùng sắc ký cột silicagel để tách riêng và chứng mính rằng curcumin không phải là một chất mà là hỗn hợp của nhiều chất có công thức gần giống nhau
„ Cưwrcumin chính (còn gọi là Curcumin Ì)
Là 1 diceton đối xứng không no ,T,„.= 182 - I83'C , chiếm 60% = “Tmi=eCE
diferuloylmetan
1 ,7- bis (4- hydroxy -3- metoxyphenil) -1,6 - heptadien - 3,5 - dion « Curcumin II] (con goi la monodemetoxy - crucumin )
Tye: 168°C , chiếm 24%
yoni)
Trang 22«Curcumin II] (didemetoxy curcumin)
Thc 1 224°C , chiém 14%
“me
1,7- bis (4- hydroxyphenyl) -1,6 - heptadien - 3,5 - dion
„ Một số đồng phân của chúng chiếm 20L
Trước đây KOSTANESKI đã tìm thấy công thức của curcumin bằng chứng
minh tổng hợp được do kết hợp vanillin với acetylaceton Sản phẩm tạo thành chỉ
la curcumin I, Chi d€n gan đây mới tách ra được nhiều chất curcumin khác nhau |
6 |
L) Phổ tử ngoại ( 17]:
Curcumin va céc déng phan ( trong dung môi là ctanol ) có các mũi hấp thu
cực đại như sau
-Curcumin 429 nm -Monodemetoxy-curcumin 424 nm
-Didemetoxy curcumin 419 nm
2) Phổ hồng ngoại:
SPICER và STRICKLAND đã xác định curcumin tổn tại chủ yếu ở dạng cclo-cnol , có tạo cầu nổi hydrogen | 11 |
anonym Va
Curcumin dude khảo sát ở trạng thái rắn, cho thấy không có mũi hấp thu
Trang 23Y 0"0tựdo 1500 - 1600 cm | Y‹ +›;tạo nối H 1625 em ' Yous 1600 cm | Y thưm I6f)0 - | 500 cm | O ‹ 1/-+3t- (- tran] 962 em | 3) Sắc ký cột :
Ta cũng có thể dùng ở phương pháp nay dé tich ede curcumin
1I-NTZ.SCH đã dùng phương pháp: sắc ký cót silicagel với hệ duny mot dong
la Kutanel-Acid acetic -benzen-cter dầu hỏa- nước với tí lệ theo thứ tí là š Š 2 Š
-Š đẻ tích các curcumin ra,
Với ánh sáng thường thì tảt cú có màu vàng nhưng voi anh sang ngeur tim the curcumin T va II có huyoh quang mau vang Wii con curcumin LIE co mau ‘any luenhat [6]
SRINIVASAN cũng dùng sắc ký cót (silicagel) với dụng mỏi nÍứ trcn nhưng
le benzen và nước bằng nhau để tách cde curcumin uf dich chit benzen | EN | Ket qua thu dude như sau: -Vùng l:curcuminl : RÍ =l.27 -Vùng 2: curcumin l[ : R[ = 0,14 -Vùng 4: curcumin II; Rf= 0.09 -Vũng 3,5 và 6: chứa các đồng phân hình học của * chất trẻn 4/ Sắc ký bản mỏng:
Theo JANAKI va BOSE | 19 | thi phép sac ky bin mong vai ban mong duce trang Stlicagel , hé dung mdi 1a C,H, : CyH‹(JÁc ( tỉ lệ 7 ; 3 ) sẽ cho giá trị RÍ là
0.3 ; còn nước cái ong qua trình kết tỉnh thì cho các giá trị KI như sau : 00,2%
(curcumin ) 0.35 va 0,48 (ede đồng phân)
IV CÁC PHƯƠNG PHÁP CHIẾT TACH CURCUMIN :
l/ [Phương pháp lệ I dung mài [ 24 |:
Trang 24dich PhtOAc), bao hoa Sau dé co lap sin pham bằng cách lọc, ra vé | ĐH và
nức Nây khô ở R0ˆC Hòa tan két túa vào côn,
Phản hủy muối chì bằng khí H-Š rồi lọc Dich loc cho qua cot sac ky Cal, và na tin với 1 EtOH trong benzen Sau do lam bạy hơi dụng mi, thu đước cm im Hiệu suất là 0,3%,
Bang 5: Sa dé chiét tach curcumin - Phuong phdap hé | dung mes
2/ I'hưưng pháp hệ 2 dung môi [ 19 |
Hót nghệ sau khi xây khó được chiết hằng ctcr dau hoa trong binh Soxhlet trong I6 giờ để loại tĩnh dấu, Lấy phần bà chiết tiếp bằng ben/cn dc lúy chịit man Tica hành ba lần chiết với thời gian chict lan dt la 16.48 va 1N rẻ
Dich chiết được đem đuổi dung môi , thu được curcutn, hiệu sua! là |.Í?¿ Hung 6: Sơ độ chiết tách cụrctunin - Phưưưng pháp hệ 2 dụng mà!
Nam 1977 Nguyễn Khang ( Đại học [ước khoa Hà nội ) đã chúc tử hót cụ
nghe - sau khi đã lây cat tinh dau - bing benzen sau dé thu hoi duny mond ap xuất tháp và kết tỉnh lại bằng côn Etylic cho tới khi có đó cháy không thấy đói và củ cho một vết trên sắc ký lớp móng đã thủ được từ (0,76- 1.Í*2 curcumin | tinh
khicted T= 182 - 183°C
Néu chọn củ nghệ thu vào tháng |-2 có thể đạt tới |5 “+ curcumin | 1 |
Trang 25$ữ ĐÔ CHIẾT TÁCH CURCUMIN
PHƯƠNG PHÁP HỆ HAI DUNG MOI Bột nghệ
Chiết Soxhlet 16 gid
Trang 26$6 96 CHILT TACH CURCUMIN
PHUONG PHAP HE MOT DUNG MOI Bột nghệ Ngâm 24 giờ bằng EtOH Loc Ba Ngâm rửa với EtOH Loc Dich EtOH I IR Dich EtOH [ |
Thu hồi dung mdi
Sục Pb(OAc; bểo hòa Lọc | Rắn Dịch lọc Rửa, vắt cbr me Sấy ở 80° C Hòa tan trong cồn Sục HạS, Lọc Rắn Dung dịch | Sắc ký cột CaCO,
Rita gidi voi 1% EtOH trong CoH,
Trang 271d) curcumin dude ting dung nhiéu trong cudc s6ng nén song song vdi viéc
chiết tách curcumin từ củ nghệ người ta còn tim cách tổng hợp curcumin bing
nhiều phương pháp khác nhau
l/ Theo V Lamjpe [ 22 ]
Curcumin được tổng hợp từ các nguyên liệu ban đẩu là Clorur
Carhometoxyfcruloyl và muối Natri của Estcr Acctoacctic Có thể tóm tắt qua trình tổng hợp như sau: Với là = COOME 14300 "`8 t Ne-CH-CO-CHy CO, Et mì | ø H -€0-CH-CO-CH, co;Et | Thủy giải (loại - CO,E) ~CO-CH,-CO-CHy H |te Mr te poe Hy Pr a tet ema CURCUMIN
Bang 7: Ouy trinh téng hop curcumin theo V 2/ Theo FARBWERKE HOECHST | 23 |:
Phương pháp này chủ yếu dùng để tổng hợp các hợp chất I,3- diccton đổi
xứng Thường dùng vinylacctat (hoặc format, butyrat , hexanoal, palmitat) cho
phan tng vdi cdc clorur acid béo ,thdm Cé su hién dién cla AIC], hodc FeCh, trong CH Cl, hode CS;, Sau đó đem thủy giải hợp chất tạo thành thì nhận được
Trang 28Dé tng hdp curcumin , FARBWERKE HOECHST dùng 70 g carbometoxy feruloyl clorur trong 250 ml CS, tron vai We AICI, va Tg vinylacetat H R = CO¿yMe = CH—-COCI + CHy=CH-O-COCH3 (t) H Alct, | CS2 : cn cH -CHạ~Ñ—0- cect, a 41) h 5 nee} Thủy giải CURCUMIN Bang 8: Qui trình tổn curcumin theo Farbwer 3/ Theo FE Graf : bị từ vanillin va acetylaceton Có 2 phương pháp tổng hợp curcumin
3.1 Cho | kg vanillin vao trong 400 mi Me;SO ( DM§ ) rồi cho vào L bình
cầu chứa sẩn 233g B;O; và 330 mÌ acctylaccton ở 60°C Khuấy tăng nhiệt đô lên đến 80-85”C Ở nhiệt độ này thêm vào 20 ml đialylamin ; cách hốn giờ sau , thêm 60 mÌ nữa
Khi sản phẩm phản ứng trở nên đỏ sậm và sển sệt thêm 500 ml dung dịch
AcOH 5% và khuấy đều trong 30 phút Cuối cùng , ta thu được curcumin có 'T„¿ =
IR1- 183" [24]
32 Phương pháp này đơn giản hơn bằng cách chuyển hóa vanillin với acctylaccton có sự hiện diện của ByO¡ và một amin bậc H {| 25 |
Dun nóng chảy !5,2 g vanilin ở 120 ”C rồi cho vào 3,5g BạO, và 5g
acctylaceton Sau đó , thêm từng giot trong một phút đến hết I2 mÌ dialylamin và phan ứng được làm lạnh trong 30 phút bằng cách dùng thêm 15 ml acid acctic va 30 mÌ MeOH ở 30C Sau đó thêm tiếp 60 mÍ accton và 145 mÍ nước Để kết tỉnh hoàn toàn , người 1a cho thêm 45 mÌ nước vào Phương pháp sẽ thu được 5g
Trang 29VỊ, FÁC ĐỤNG DƯỢC LÝ VÀ NHỮNG ỨNG ĐỤNG : 1/ Tác dụng được lý:
-Nụhe là l trong nhiều loại cây làm thuốc có giá trị Dae bict ha curcumin dite ding lam thuốc thông mật ( dùng riệng hoặc dùng trong cú nghe ) phi
hep vei mudi mat (8 dang mudi Natit curcuminat- licu ding 24 mg/ky ! gáy có
hoop tthe ont, làm gia tăng sự chảy mật mà khong gay ro loan dung ke don ap sul
mun va he hap | 6 |
‘Curcumin con co Kha nang dict Khudn Qua nhicu cong trình nự hịc n cứu nei ti da chifng minh duve ring curcumin Eco the Khiing difde Tose hour ve Khuan, +i tring ohu tu cau khuan, Micrococcus pyogenes var aureus, ngan can dhiide su phat triển của trực khuẩn lao Mycohuctcrtum tuberculosis Ho KRY mong đó 3Š gr/mHl Ngoài ra còn có hiệu lực đói với Salmonella paratiphi dd nong đó 300 tứ mÌ , Siaphyllococux aureus ở nóng độ 50 pựr/ml.nâm Tryvchophyvton gvpcum «t none dO 25 pg/ml
2/ Ung dung:
Ih) bin chất không độc nên curcumin due Ứng dung nhiều trong các ngành
cong ngicp dét, thye pham, Dude pham như là 1 chất màu thiện nhiền
-Người ta dùng kết hợp curcumin với bixin theo tí lệ l/3 đến 3/1 nhàm táo mau vita ¥ cho cde loai bd , format magarin và các thực phảm me hove dau
khác | 26 |
-( u_rcumin còn được dùng như I chất kháng öoxid hóa trên các loài dau thức
vặt như dâu dừa , dầu phòng dau me , dau hat bong nhằm hảo quan dau khói hị
im [27]
-Diing true tiép dé nhuôm màu thực phảm để thức phẩm có màu đong nhất
tra khong gây đóng nhựa, sản phẩm được xứ lý bằng muối kém loi: kicm cua curcumin sau đó curcumin được phóng thích khỏi muối và bam vào săn phạm hing cách hóa acid nhẹ [ 28 |
( urcumin còn được sử dụng trong kem đánh rắng và nước súc ncng one
đưc chủ hấp phụ lén rên các chất hấp phú như ccllulo¿z , CÌMC và amvlopccun
nút sẽ cho thấy hiệu quá tây sạch bởi sự thay đùi màu sắc | 29 |
-Dtng lam chat mau trong banh agot carry md tac | @ | ưong nước gian khát, bịa và môi só loại thuốc [ 3U |
Trang 30tì vang thiên nhiên duy nhất dùng để nhuôm xưi hông vi mà khong dụng chat
cam mau Po]
Tuy nhiên, do có khả năng tạo phức với các nguyên tơ kim lồi dyười tà con dùng phức của curcumin với các kim loại khác nhau nhằm làm tầng đỏ cảm
niet vậi thay đổi mẫu sắc
Mót số kim loại được dùng như,
Al: cho mau nau Cr: cho mau den nau
So: cho mau do cam | 4 |
2 lrong hoa hoe phan tich :
2.2.1 Xác định H; tác chát thử là dung dịch alcol curcumin O.1%% | 32 | -IDung dịch thí nghiệm : lấy 5 ml dung dich mau sau khi da bie! cae thanh phan acid, dem acid hoa vai HCI] dam dac va lam boe het cho dén Khe tron met dia sứ, Hòa tan cặn trong HCI 3N
- Phương pháp tiên hành : lây 3 ml dung dịch trên thêm vào Š gió dụng dịch thử và làm bóc hơi đến khó Làm lạnh Nều trong mẫu có borat thy sé co mau đó xuất hiện, Làm ớt với 3 giot NaOH NO có sự thấy đổi mau từ đo
chuyen sang xanh,
Donhay: | ppm
Cac ion gay can rd 1a Fe Mo Ti, Nb.Ta va Z1 cần phải đước loại bo trước
bi Ợ Xa
Máu được đem khử nước bằng ucctal txopnropenvl, Horát trong moi trư‹ng
mức được xác định bằng phương pháp quang phổ với curcumin
- De xde dinh 1-5 ppg BI ml dung dich mau có chứa 5 my BA due tron với
2 ml AcOH , 3 ml acctat isopropenyl và 0.4 ml HCL Sau 30 phit, 4 mi hon hep HeSO4 S ACOH (1:1) va 4 mi dung dich 0.125 % curcumin trong AcOH dude them
vue Sau [giờ , thêm vào 25 mÌ dung dịch đêm {( 90m| E1OH 95% |Xtlự
\CONH, 135 ml AcOH ri pha loãng với nước đú thành HH) Pho hap thu dude do 3 bude séng 545 nm,
- He xdinh mau có hàm lương B ohé hon bag khong can phat dung duny
dịch đếm Dung dịch được pha loãng với 150 mi nue va chiét vai LO mt aceton
và 10ml CHCl, tong 30 gidy Pho hap thu dude do d bude song 545 am Phung
pháp này được dùng đẻ xác định hàm lương H từ ().[- 0,5 tự
2.2.2 Chat chi thi pH :
Trang 31
| Curcumin 0.1% ROH 90% 74-92 Vang - do nan
10.2 - 118 Ha nau vane cum
Bony Y: Su thay déi mau via curcumin theo pH
2 3La thuộc thứ là doi vai Zr, Ke, Mg
>) ức xúc định định tinh H BO) | 10 | -Lay 230g hột nghệ da sây khô đem ngắm với |0 mÍ nước Dơi làng suong
san Bố phản nước trong đi, Tiếp tục làm như vậy 3 lắn nữa
Bem say kho d E00 - {05 "C rồi ngâm với 100 ml con trong Ì nưaxv và lọc
[ung địch thu được gọi là củn nghề
- Giây lọc trắng đem tấm dung dịch côn nghệ ở trên rồi đẻ khó ở øt không
có hơi acid và amoniac tránh ánh sáng, Cất giây thành những dài dài 4) mm - rong 6 mm
Đó nhạy của giây được xác dinh nhv sau: hoa tan O.001g acid Kore trong
hon hap gồm 5ml nước và | ml acid clohidric r6i nhing gidy curcumin yao trong
dung dịch đó Sau | phút, lẫy giây ra và phơi kho, màu vàng phải chuycn thành man nau, Sau d6 lai tim dung dich amoniac vào giây , màu phái chúycn sang den
Trang 33A CHIẾT TÁCH CURCUMIN:
Chúng tôi đã tiến hành chiết tách curcumin từ hột nghẻ hằng hài phương phap khác nhau nhằm tìm ra phương pháp cho hiệu suất cáo nhúit
* CÁCH LÀM BỘT NGHỆ:
Mua nghệ tươi vẻ gọt bỏ vỏ , bào mồng và đem phơi didi anh nang mat tre
cho thất khô Xay nhuyễn thành bột
| k# nghệ tươi được khoảng 160-180 ¢ bot nghe dé noi kho rae
EL PHƯƠNG PHAP HE HAI DUNG MOL:
lL/ Cách Ï:
100 g¢ hột nghệ khơ được cho vào bình cầu có dung tích lÍ Thêm vào bình cau 425 mị n-hexan là dung môi để loại tỉnh dấu (mực dung mor cae gap dor bor
nhé) Đun hoàn lưu cách thuỷ trong 6 gid` Nhiệt đồ nước đước giữ trong khoang 75 - RUTC,, Để nguội, Lọc lây phan bà để riêng ra ngoài cho khó, dịch n- lịc xán thu được có màu vàng chanh
Phản bã sau khi khô lại đem chiết tiếp với 425 mÌ Tolucn đé tách lầy phan
mau Dựng cụ chiết giống như trên nhưng đun hoàn lưu cách dâu trong 3S giờ Nhiệt độ dấu được giữ cố dinh tit 115 -120'C be ngudi loc bd phan ba Dich
Toluen thủ được có màu đỏ ánh vàng ,
Cho dung dịch NaOH 0,2N vào dich Toluen tách lấy phần màu ra Sử dụng phéa hình qủa lê loại S00 mÌ để chiết Các chất trong phéu tách thành hài lớp
- [Dung dịch NaOH có mau dé mau (sam) nim phía dưởi - lịch Toluen ở lớp trên có màu nhạt dan
Chiết phần dung dịch NaOH ra rồi tiếp tục thêm từng lương nho dụng dịch NaOH t1 3N vào phêu Curcumin sẽ chuyển từ dịch Toluen sung dung dịch NaOH Mau của lớp Tolucn ngày càng nhạt dẫn - Chiết đến khí nào dụng dịch NaOH sau khi chiết không còn màu ( hoặc có màu vàng rất nhạt ) thì ngừng Lương
duns dich NaOH si dung khoang 1.2 - 1.31 Lop dung dich Toluen dem di chung
catup xuất thấp để thu hỏi dung môi ,
Acid hóa dung dịch NaOH chiết được bằng H:SO, đâm đạc Cho tưng giól H.SO¿ vào đụng dịch Khuẩy đều dung dịch sẽ nhạt màu dân dân: từ đó máu chuyển sang đồ cam rồi vàng cam - Đền khi môi trường chúych súng acid rõ thì nưưng lại ( can khoảng 5,5 ml acid ), Lie nay dung dịch có mâu vàng sửa dục
va bit dau xuất hiện ket tha Lam lạnh , có một lớp váng nói lén tren mau do cam Và một phần lắng xuống đáy Để lắng môi ngày - Dung dich co mau vàng
Trang 34Lục , rửa kết tủa bằng nước cãt cho đến khí hết tính acid (thứ dịch lọc bàng
qus tim: quy Khong doi mau) Hoda tan chat rin thu dude trong con tuyet doi dun
hong che dén khi vừa đủ tàn hoặc hơi dự Dung dịch có màu đó đậm Dudi bet
dun# môi cho đến khí bắt đầu xuất hiện tinh the mau vàng thì ngừng dun | be
yen cho kết tỉnh , ta thu dude curcumin tho mau dé cam Ket tinh bar trong hòn hei cOn - nude (PIG 1:1) ta duge curcumin tinh chat co mau vang cam 4 dane
Trang 36Chúng tôi đã tiến hành chiết tách 3 lẩn va thu dude kel qua sau Lint: 0.8873 g sin phẩm 2: 0.91162 3:1.1394 g L.ưdng curcumin trung bình trong cả 3 lần tách chiết là: 3 O.8873 + sk 16+ 1.1394 m 0.9794] => H=098% Cae
14) ø bột nghệ sau khí sây khô được cho vàu giấy lọc gói kín lạt và cửa
vao bình Soxhlet, [Dung môi chiết để loại tinh dau la eter dau hea (400 mil) chict
trane 1o giờ trên hếp cách cát, Sau khi chict cter dau hoa sc co mau vang chanh Để nguội
Lây gói hột nghệ ra phơi thật khô cho hay hơi hết dung môi rồi #ó: lại như cu Chiết tiếp lại bằng henZen (400 ml) vẫn trong bình Soxhlet để lây chảt màu Thới gián chiết là 16 giờ Dịch henzen chiết được có màu vàng nh cam
Thay henzen đã chiết được bằng henzcn mới Tiếp tục chiết lắn 3 lắn \
nhu vay nhung wong 48giớ Màu của dich benzen sau khi chiết lấn xua nhất hein và với lấn trước , Ở lắn chiết thứ 3 sau 30 giờ chiết thì dịch chiết chỉ có màu
vang rất nhạt , gần như không màu Hã khô màu vàng tát
Dich chiét ca cd ba lin dem chung cat thu hoi dung mdi 8 ap suat thap -ta
thay Ket tia mau nau cam oY uy xuat hién trong binh Chung cat cho đến khi còn khoan [50 ml dung méi thi ngtfng lai Lam bay hơi dụng mi - thủ được curcumin thé mau d6 cam He khé va két tinh lại lần nữa wong con tuvet doi
Trang 39lien
Kẻt qủa thu được L.3S79 g curcumin => H = 1.36 "4
Il PHUGNG PHAP HE MOT DUNG MOI:
[0# hột nghệ khó được ngâm với 400 mÌ còn tuyệt đối trong 34 gid Loe han ba dutge ngâm rửa với 200 mÌ ELOH, Lọc lắn nữa Hò phan ba di
Dich loc c6 mau dé sam dem di chifng cat ap suat thap dé tach bat dung mos
và tình dâu Đến khi dung dịch còn khoảng L/3 thị ngừng lạt Pung dich co may
dam hen,
Làm bay hơi dung môi, khi còn khoảng 100 mi thi ngifng Trony dung dịch
đa xuất hiện kết tủa màu vàng cam Đề yên cho kẻ! tính trong 36 giờ rối lọc Ket
tinh laa trong hỗn hợp côn - nước (1:1) rồi bằng con wyet do) Curcumin thu dite
Trang 40SƠ ĐỒ CHIẾT TÁCH CURCUMIN
PHƯƠNG PHÁP HỆ MỘT DUNG MÔI Bột nghệ Ngam trong 24h Loc Ba Ngâm rửa với EtOH I Dich EtOH | Dịch EtOH Curcumin Tách dung môi Kết tỉnh trong cồn-H;0 rồi trong cồn
Chúng tôi đã tiến hành chiết tách curcumin theo phương pháp này ba lin vis