Khảo sát thành phần hóa học các phân đoạn b d cao n butanol của lá cây chùm ruột phyllanthus acidus l skeels sinh trưởng ở bình thuận

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH Trần Đình Thơng KHẢO SÁT THÀNH PHẦN HÓA HỌC CÁC PHÂN ĐOẠN B-D CAO n-BUTANOL CỦA LÁ CÂY CHÙM RUỘT (PHYLLANTHUS ACIDUS (L.) SKEELS) SINH TRƯỞNG Ở BÌNH THUẬN LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC VẬT CHẤT Thành phố Hồ Chí Minh – 2022 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH Trần Đình Thơng KHẢO SÁT THÀNH PHẦN HÓA HỌC CÁC PHÂN ĐOẠN B-D CAO n-BUTANOL CỦA LÁ CÂY CHÙM RUỘT (PHYLLANTHUS ACIDUS (L.) SKEELS) SINH TRƯỞNG Ở BÌNH THUẬN Chun ngành : Hóa hữu Mã số : 8440114 LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC VẬT CHẤT NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: TS BÙI XUÂN HÀO Thành phố Hồ Chí Minh – 2022 i LỜI CAM ĐOAN Tơi: Trần Đình Thơng học viên cao học chun ngành hóa hữu khóa 30.2 Tơi xin cam đoan luận văn: “Khảo sát thành phần hóa học phân đoạn B-D cao n-butanol chùm ruột (Phyllanthus acidus (L.) Skeels) sinh trưởng Bình Thuận” cơng trình nghiên cứu riêng tơi hướng dẫn TS Bùi Xuân Hào Tất số liệu kết phân tích luận văn Thạc sĩ trung thực chưa cơng bố cơng trình nghiên cứu TpHCM, ngày 28 tháng 04 năm 2022 Tác giả luận văn TRẦN ĐÌNH THƠNG ii LỜI CẢM ƠN Để có kết học tập ngày hơm nay, tơi xin chân thành bày tỏ lịng biết ơn đến q Thầy Cơ phịng thí nghiệm Hợp chất thiên nhiên nói riêng q Thầy Cơ khóa Hóa – trường Đại học Sư phạm Thành phố Hồ Chí Minh tận tâm giảng dạy, truyền thụ cho nhiều kiến thức khoa học quý báu suốt thời gian học tập trường Tôi xin gửi lời cảm ơn tới Phòng Sau Đại học - trường Đại học Sư phạm Thành phố Hồ Chí Minh tạo điều kiện thuận lợi hỗ trợ cho trình học tập trường Đặc biệt, tơi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc chân thành tới TS Bùi Xuân Hào, người tận tình hướng dẫn tơi hồn thành cơng trình nghiên cứu khoa học Thầy khơng giúp tơi có thêm kiến thức khoa học mà cịn giúp tơi tinh thần suốt q trình nghiên cứu khoa học kinh nghiệm quý báu lời nói động viên cách chân thành Tôi xin cảm ơn bạn phịng thí nghiệm Hợp chất thiên nhiên – trường Đại học Sư phạm Thành phố Hồ Chí Minh bạn khóa 30.1 30.2 ln hỗ trợ, giúp đỡ động viên tôi gặp khó khăn suốt q trình làm đề tài nghiên cứu khoa học Tôi xin cảm ơn quý Thầy Cô phản biện dành thời gian đọc đóng góp ý kiến cho nghiên cứu khoa học Mặc dù cố gắng nhiều trình làm luận văn chắn khơng tránh khỏi sai sót, kính mong q Thầy Cơ tận tình bảo Cuối xin cảm ơn đến gia đình đồng hành nguồn động viên to lớn suốt trình học tập TpHCM, ngày 28 tháng 04 năm 2022 Học viên cao học TRẦN ĐÌNH THƠNG iii MỤC LỤC Trang phụ bìa Lời cam đoan i Lời cảm ơn ii Mục lục iii Danh mục ký hiệu chữ viết tắt v Danh mục bảng vi Danh mục hình vii Danh mục sơ đồ viii Danh mục phụ lục ix MỞ ĐẦU Chương TỔNG QUAN 1.1 Giới thiệu chi Phyllanthus 1.2 Mô tả chùm ruột (Phyllanthus acidus (L.) Skeels) 1.2.1 Giới thiệu chung Phyllanthus acidus (L.) Skeels 1.2.2 Mô tả Phyllanthus acidus (L.) Skeels 1.3 Nghiên cứu thành phần hóa học hoạt tính sinh học Chùm ruột 1.3.1 Thành phần hóa học 1.3.2 Công dụng 10 1.3.3 Dược tính 10 Chương THỰC NGHIỆM 12 2.1 Hóa chất, thiết bị, phương pháp 12 2.1.1 Hóa chất 12 2.1.2 Dụng cụ 12 2.1.3 Phương pháp tiến hành 12 2.2 Quy trình phân lập hợp chất từ cao n-butanol 13 2.2.1 Nguyên liệu 13 2.2.2 Điều chế cao phân đoạn n-butanol 13 2.2.3 Quy trình phân lập 134 iv Chương KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 20 3.1 Khảo sát cấu trúc 20 3.1.1 Khảo sát cấu trúc hợp chất PA.01 20 3.1.2 Khảo sát cấu trúc hợp chất PA.02 22 3.1.3 Khảo sát cấu trúc hơp chất PA.04 25 3.1.4 Khảo sát cấu trúc hợp chất PA.05 30 3.1.5 Khảo sát cấu trúc hơp chất PA.06 35 3.1.6 Khảo sát cấu trúc hơp chất PA.07 40 Chương KẾT LUẬN – KIẾN NGHỊ 45 4.1 Kết luận 45 4.2 Kiến nghị 46 TÀI LIỆU THAM KHẢO 47 PHỤ LỤC PL1 v DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU VÀ CHỮ VIẾT TẮT Ac : Acetone br : Broad Bu : n-butanol C : Chloroform 13 C-NMR : Carbon (13) Nuclear Magnetic Resonance COSY : Correlation Spectroscopy d : Doublet dd : Doublet of doublet DMSO : Dimethyl sulfoxide EA : Ethyl acetate H : n-hexane : Proton Nuclear Magnetic Resonance H-NMR HMBC : Heteronuclear multiple-bond correlation spectroscopy HSQC : Heteronuclear single-quantum correlation spectroscopy Hz : Hertz IC50 : Inhibitory Concentration 50% J : Coupling constant m- : Meta m : Multiplet Me : Methanol o- : Ortho p- : Para s : Singlet SKC : Sắc ký cột SKLM : Sắc ký lớp mỏng t : Triplet W : H2O  : Chemical shift vi DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 2.1 Kết sắc ký cột silica gel cao n-butanol 14 Bảng 2.2 Kết sắc ký cột silica gel phân đoạn B 14 Bảng 2.3 Kết sắc ký cột silica gel phân đoạn C 15 Bảng 2.4 Kết sắc ký cột silica gel phân đoạn C4 16 Bảng 2.5 Kết sắc ký cột silica gel phân đoạn D 17 Bảng 2.6 Kết sắc ký cột silica gel phân đoạn D5 17 Bảng 3.1 So sánh liệu phổ 1H-NMR 13 C-NMR PA.01 quercetin 21 Bảng 3.2 So sánh liệu phổ 1H-NMR 13 C-NMR PA.02 với kaempferol PA.01 23 Bảng 3.3 So sánh liệu phổ 1H-NMR 13C-NMR PA.04 kaempferol 3-O-(2-α-L-rhamnopyranosyl)-β-D-glucuronopyranosyl methyl ester 28 Bảng 3.4 So sánh liệu phổ 1H-NMR 13 C-NMR PA.05 kaempferol 3-neohesperidoside 33 Bảng 3.5 So sánh liệu phổ 1H-NMR kaempferol 13 C-NMR PA.06 3-O-α-L-rhamnopyranosyl-(1→2)-β-D- galactopyranoside 38 Bảng 3.6 So sánh liệu phổ 1H-NMR kaempferol 13 C-NMR PA.07 3-O-β-D-(2-O--D-rhamnopyranosyl)- glucuronopyranoside 43 vii DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 1.1 Lá Chùm ruột mọc Bình Thuận Hình 1.2 Một số hợp chất phân lập từ Chùm ruột Hình 1.3 Một số hợp chất phân lập từ Chùm ruột (tiếp theo) Hình 1.4 Một số hợp chất phân lập từ Chùm ruột (tiếp theo) Hình 3.1 Cấu trúc hóa học hợp chất PA.01 20 Hình 3.2 Một số tương quan HMBC hợp chất PA.01 20 Hình 3.3 Cấu trúc hóa học hợp chất PA.02 22 Hình 3.4 Cấu trúc hóa học hợp chất PA.04 27 Hình 3.5 Tương quan HMBC COSY hợp chất PA.04 27 Hình 3.6 Cấu trúc hóa học hợp chất PA.05 32 Hình 3.7 Tương quan HMBC COSY hợp chất PA.05 32 Hình 3.8 Cấu trúc hóa học hợp chất PA.06 37 Hình 3.9 Tương quan HMBC COSY hợp chất PA.06 37 Hình 3.10 Cấu trúc hóa học hợp chất PA.07 42 Hình 3.11 Tương quan HMBC COSY hợp chất PA.07 42 viii DANH MỤC SƠ ĐỒ Sơ đồ 2.1 Điều chế cao n-butanol từ chùm ruột 13 Sơ đồ 2.2 Quy trình phân lập hợp chất từ cao n-butanol chùm ruột 18 PL56 2’/6’ 6‴ 3’/5’ 4’2 2’/6’ 1’ 3’/5’ 10 6‴ 1″ 1‴ Phụ lục 25a Phổ HMBC PA.06 Methanol-d4 PL57 5‴ 2‴ 2″ 4″ 3‴ 6″ 3″ 6a″ b 5″ 6″ 5‴ 4″ 3‴ 2‴ 4‴ 3″ 5″ 2″ 1″ 1‴ Phụ lục 25b Phổ HMBC PA.06 Methanol-d4 4‴ PL58 2’/6’ 6‴ 3’/5’ 1″ 1‴ 6‴ 6″ 1‴ 1″ 3’/5’ 2’/6’ Phụ lục 26a Phổ HSQC PA.06 Methanol-d4 PL59 5‴ 2‴ 2″ 4″ 3‴ 6b″ 3″ 6a″ 5″ 4‴ 6″ 5‴ 4″ 3‴ 2‴ 4‴ 3″ 5″ 2″ Phụ lục 26b Phổ HSQC PA.06 Methanol-d4 PL60 Phụ lục 27a Phổ Mass PA.07 Methanol-d4 PL61 Phụ lục 27b Phổ Mass PA.07 Methanol-d4 2’/6’ 3’/5’ 1″ 1‴ 6‴ PL62 Phụ lục 28a Phổ 1H-NMR PA.07 Methanol-d4 5‴ 2‴ 3‴ 2″ 3″ 4″ 5″ 4‴ 6‴ PL63 Phụ lục 28b Phổ 1H-NMR PA.07 Methanol-d4 6″ 2’/6’ 1’ 3’/5’ 6‴ PL64 Phụ lục 29 Phổ 13C-NMR PA.07 Methanol-d4 PL65 2’/6’ 3’/5’ 6‴ 1″ 1‴ 6‴ 1‴ 1″ 3’/5’ 2’/6’ Phụ lục 30a Phổ COSY PA.07 Methanol-d4 PL66 5″ 2‴ 3‴ 5‴ 1″ 2″ 3″ 4″ 4‴ 1‴ 1‴ 1″ Phụ lục 30b Phổ COSY PA.07 Methanol-d4 PL67 6‴ 2’/6’ 3’/5’ 86 1″ 1‴ 6‴ 1″ 1‴ 10 3’/5’ 1’ 2’/6’ Phụ lục 31a Phổ HMBC PA.07 Methanol-d4 PL68 1‴ 2‴ 5‴ 5″ 4″ 2″ 3‴ 3″ 5‴ 3‴ 2‴ 4″ 4‴ 5″ 3″ 2″ 1″ 1‴ Phụ lục 31b Phổ HMBC PA.07 Methanol-d4 4‴ PL69 6‴ 2’/6’ 3’/5’ 86 1″ 1‴ 6‴ 1″ 1‴ 3’/5’ 2’/6’ Phụ lục 32a Phổ HSQC PA.07 Methanol-d4 PL70 2‴ 5‴ 3‴ 2″ 3″ 5″ 4″ 5‴ 3‴ 2‴ 4″ 4‴ 5″ 3″ 2″ Phụ lục 32b Phổ HSQC PA.07 Methanol-d4 4‴