BỘ GIÁODỤCVÀ VÀĐÀOTẠO VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC CÔNGNGHỆVIỆTNAM VIỆNSINHTHÁIVÀTÀINGUYÊNSINHVẬT -VŨHƯƠNGGIANG NGHIÊN CỨU ĐẶC TÍNH SINH HỌC VÀ KHẢ NĂNGSỬDỤNGMỘTSỐLỒITRONGCHI NHÀU(MORINDAL.)ỞVIỆTNAM TĨMTẮTLUẬNÁNTIẾNSĨSINHHỌC Chun ngành:THỰC VẬT HỌCMãsố:62.42.01.11 HàNội,2015 Cơngtrìnhđược hồnthànhtại: ViệnSinhthái&Tàingunsinhvật ViệnHànlâmKhoahọcvàCơngnghệViệtNam Ngườih n g dẫnkhoahọc: PGS.TS.NinhKhắcBản PGS.TS.PhanVănKiệm Phản biện1:PGS.TS.TrầnThếBách Phảnbiện2:GS.TS.Nguyễn VănTuyến Phảnbiện3:TS.TrầnThịPhươngAnh LuậnánsẽđượcbảovệtrướcHộiđồngđánhgiáluậnáncấpViệnTạiViệnSin htháivà Tàinguyênsinhvật Vào hồi: giờ9 h 0 ngày19 tháng2 năm2016 Có thể tìm hiểu luận án tại: Thư viện Quốc giaThư viện ViệnSinhtháivàTàinguyênSinhvật MỞ ĐẦU Tínhcấpthiếtcủa luậnán LãnhthổViệtNamcótới3/4diệntíchlàrừngnúi,địa hìnhchiacắtnênđiềukiệnkhí hậu đa dạng, có nhiều tiểu vùng khí hậu đặctrưng.Theoướctính,ViệtNamcókhoảnggần13000lồithực vậtbậccaocómạchtrongđócókhoảnghơn4000lồiđượcsử dụnglàmthuốc Việcsửdụngcácsảnphẩmcónguồngốcthiênnhiênlàmdượcphẩmchữabện hđangngàycàngthuhútđượcsựquantâmcủacácnhàkhoahọccũngnhưcộngđồng bởinhiềuưuđiểmnhư íttácdụngphụ, dễhấpthuvàchuyểnhóatrongcơthểhơnsovớicácdượcphẩmtổnghợp MorindaL làchicósốlượnglồitươngđốilớn(hơn40lồi),mộtsốlồithểhiệnkhảnăng điều trị bệnh tốt, lồiMorinda citrifoliaL xem làmột vịthuốc có tác dụngnhuận tràng, lợi tiểu, điều hòa thần kinh, hạ huyết áp; lồiMoridaofficinalisF.C.Howđượcsửdụnglàmthuốcbổtrínão,ơnthậntrợdươn g, mạnh gân cốt, trừ phong thấp Hiện nay, hai loài sảnxuấtrộngrãitrênthịtrườngdướidạngthựcphẩmchứcnănghỗtrợđiềutrịcácbệnh vềtimmạch,xươngkhớp,taibiếnmạchmáunão,ungthư…Ởnướcta,chiMorindaL sử dụng chủ yếu theo kinh nghiệm tri thứcbảnđịamàítcónhữngnghiêncứumangtínhhệthống Luận án tập trung nghiên cứu đặc tính sinh học khả sửdụng 03 loài chi Nhàu (MorindaL.) Việt Nam gồm: Nhàu lôngmềm (Morinda tomentosaHeyne in Roth), Nhàu tán (Morinda umbellataL.) Nhàu dài (Morinda longifoliaCraib) dựa vào nghiên cứuvềthànhphầnlồi,trithứcbảnđịa,thànhphầnhóahọcvàhoạttínhsinhhọc,từđólựachọnlồicótriểnvọngđểtiến hànhnhângiống,tạonguồnngunliệuvàlàmcơsởkhoahọcchocácnghiêncứutiếptheo Mụctiêucủaluậnán Nghiêncứucáccơsởkhoahọcvềsinhhọc,hóahọcnhằmgópphầnkhaithác,ph áttriển,bảotồnvàsửdụngcóhiệuquảnguồntàingunvềcáclồitrongchiNhàu( MorindaL.)ởViệtNam Ýnghĩa luậnán Góp phần làm sở khoa học cho việc đánh giá tiềm triểnvọng khai thác, gây trồng sử dụng bền vững lồi chi Nhàu(MorindaL.)ởnướcta Nhữngđónggópmớicủa luậnán 4.1 Ghi nhận loài Nhàu dài (Morinda longifoliaCraib)cho HệThựcvậtViệtNam 4.2 Ghi nhận bổ sung thêm điểm phân bố loài chiNhàu(MorindaL.)ởViệtNam 4.3 Lần cung cấp số dẫn liệu thành phần hóa học chủyếu lồi: Nhàu lơng mềm (M tomentosa), Nhàu tán (MorindaumbellataL.), Nhàu dài (M longifolia) Việt Nam Đã phát vàcông bố 06 hợp chất từ tự nhiên Trong đó: 02 hợp chất từ lálồi Nhàu lơng mềm (M tomentosa) morintoside A morintoside B;02hợpchấtmớitừthânvàláloàiNhàután(M.umbellata)làumbellatolideAv àumbellatolideB;02hợpchấtmớitừthânloàiNhàuládài(M.longifolia)l àlongifolideAvàlongifolideB 4.4 Lầnđầutiênthửnghiệmhoạttínhsinhhọccácdịchchiếttừ4lồi:Bakíchlơng(M cochinchinensis),Nhàulơngmềm(M.tomentosa),Nhàután(M umbellata)và Nhàu dài (M longifolia) Việt Nam, đó, thử hoạttínhkhángvisinh vậtkiểmđịnh,hoạttínhchốngoxihóa,hoạttínhgâyđộctếbào cácdịng tế bào ung thư vú (MCF7), ung thư biểu mô (KB), ung thưphổi (LU-1) hoạt tínhức chế enzymeα-glucosidase chất phânlậptừlồiNhàulơngmềm(M.tomentosa) 4.5 Lần nghiên cứu khả nhân giống hom cành vàhạtcủalồiNhàulơng mềm(M tomentosa) Bốcụccủaluậnán Luậnán gồm119 trang, 45 bảng, 39 hình, 03 sơđồ và16 phụlục Luận án gồm phần: Mở đầu (02 trang); Chương 1: Tổng quantàiliệu(31trang);Chương2:Địađiểm,thờigian,nộ i dungvàphư ơng pháp nghiên cứu (12 trang); Chương 3: Kết nghiên cứu (72 trang);Kết luận, kiến nghị (02 trang); Danh mục cơng trình cơng bố củatácgiảcó liênquanđếnluậnán;Tàiliệuthamkhảo;Phụlục Chương 1.TỔNGQUANTÀILIỆU Phầntổngquantàiliệutậphợpcácnghiêncứutrongnướcvàquốctếvềcá cvấnđề: Tìnhhình cácnghiên cứu vềcáclồithuộcchiNhàu(MorindaL.) CơngdụngcủacáclồitrongchiNhàu(MorindaL.) CácnghiêncứuvềthànhphầnhóahọccủacáclồithuộcchiNhàu(MorindaL.) Các nghiên cứu hoạt tính sinh học (chống oxi hóa, gây độc tế bào,khángvisinhvậtkiểmđịnhvàứcchếenzymeαglucosidase)củacáclồithuộcchiNhàu(MorindaL.) Chương2.ĐỊAĐIỂM,THỜIGIAN,NỘIDUNGV ÀPHƯƠNGPHÁPNGHIÊNCỨU 2.1 Địa điểmvà thời giannghiêncứu Điều tra, nghiên cứu khảo sát số tỉnh Việt Nam như: Sơn La(Chiềng An), Hà Tĩnh (Kỳ Anh), Quảng Trị (Tà Long), Thừa Thiên Huế(PhúLộc, NamĐơng), KhánhHịa(NhaTrang) 2.2 Vậtliệunghiêncứu Đối tượng nghiên cứu loài đại diện chi Nhàu (MorindaL.) ởViệt Nam, bao gồm mẫu khô lưu giữ phòng tiêu thực vậtvà mẫu tươi thu Sơn La (Chiềng An), Hà Tĩnh (Kỳ Anh),Quảng Trị (Tà Long), Thừa Thiên Huế (Phú Lộc, Nam Đơng), KhánhHịa(NhaTrang) Các ngun liệu tiến hành thí nghiệm gồm hóa chất thiết bịcần thiết Viện Hóa học, Viện Hóa sinh biển Viện Cơng nghệ sinhhọc,ViệnHànlâmKH&CNVN 2.3 Nộidungnghiêncứu 2.3.1 Nghiên cứu đặc điểm sinh học, tri thức địa nhân giốngmộtsốloàithuộcchiNhàu(MorindaL.) 2.3.2 Nghiên cứu thành phần hóa học 03 lồi: Nhàu lơng mềm (M.tomentosa), Nhàu tán (M umbellata) Nhàu dài (M longifolia) ởViệtNam.Xácđịnh cấutrúchóahọccáchợpchấtphânlậpđược 2.3.3 Nghiên cứu hoạt tính sinh học (kháng vi sinh vật kiểm định, chốngoxi hóa,gây độc tế bào khả ức chế enzymeα-glucosidase) cácdịch chiết số hợp chất phân lập từ 04 loài: Ba kích lơng (M.cochinchinensis),Nhàulơngmềm(M.tomentosa),Nhàután(M.umbellat a)vàNhàuládài(M longifolia) ởViệtNam 2.4 Phươngpháp nghiêncứu - Phương pháp điều tra thực vật:Xác lập ô tiêu chuẩn khảo sát hiệntrạng khả tái sinh tự nhiên lồi Nhàu dài (M longifolia) ởThừaThiênHuếvàlồiNhàulơng mềm(M tomentosa)ởKhánhHịa - Phươngphápxácđịnhđặcđiểm táisinh - Phương phápđiềutracộngđồng - Phươngphápnhângiống:Sửdụnghomgiống(cóảnhhưởngcủacácnhân tố)vàhạt từ lồiNhàulơng mềm(M tomentosa) - Phương pháp phân lập xác định cấu trúc hoá học hợp chất:Phân lập phương pháp sắc ký lớp mỏng, sắc ký lớp mỏng điềuchế Xác định cấu trúc hoá học hợp chất kết hợp xác địnhgiữacácthôngsố vậtlý vớicácphươngphápphổ hiệnđại - Phương pháp đánh giá hoạt tính sinh học:Trong luận án này, dịchchiết thô chất phân lập thử nghiệm hoạt tính chống ơxi hóatheo phương pháp bảo vệ tế bào gan, gây độc tế bàoin vitro, kháng visinhvậtkiểmđịnh vàứcchếenzymα-glucosidase 2.5 Xửlýsốliệu:BằngcácphầnmềmnhưMicrosoftExcel,TableCurve2D Chương3.KẾTQUẢNGHIÊNCỨU 3.1 Nghiênc ứ u đ ặc đ i ể m s i n h h ọ c v p h â n b ố c ủ a m ộ t s ố l o i thuộcchiNhàu(MorindaL.)ở Việt Nam 3.1.1 Đặc điểm sinh học cácloài thuộc chi Nhàu (MorindaL.) ởViệtNam 3.1.1.1 ĐặcđiểmchungcủachiNhàu(MorindaL.)ởViệtNam ChiNhàu(MorindaL.)dạngdâyleo,bụiđứnghoặcgỗnhỏ.Phânnhánhtừnáchlá.Lá: Mọc đối; phiến thuôn dài (M longifolia, M citrifolia…)hoặc bầudục (M umbellata, M parvifolia), mép đơn nguyên uốn lượn Lákèm dạng rộng hình tim (M longifolia, M citrifolia…),dài nhọn,mỏng (M cochinchinensis, M officinalis)hoặc kèm (M.longissimi, M tomentosa…);tồnbộlákèmhợplạivàơmlấythân Hoa:Cụm hoa tán(M cochinchinensis, M officinalis…)hoặc hình đầu (M.citrifolia,M.tomentosa…);mọcởnáchlá hoặcởđầucành.Hoacócuống(M.longifolia,M.officinalis…)hiếmkhikhơngcuốn g(M.cochinchinensis).Hoalưỡngtính.Thùyđàingắn,lượnsóng.Trànghoamàu trắng,vàngnhạthoặchồngnhạt,hìnhphễuhoặc hình chng, bên họng tràng nhẵn(M.tomentosa,M.longifolia)hoặccónhiềulơng(M.citrifolia,M.parvif olia),thùy4-6,loerộngởphíađầuthùy.Có4-6nhịnhơlênkhỏiốngtràng (M longifolia, M villosa…)hoặc nằm phía họng tràng (M.tomentosa…),chỉnhịđính½hoặcđínhđáyốngtràng,baophấnđínhlưng.Bầ u1-2ơ,hiếmkhibầu4ơ,mỗiơchứatừ1-2nỗn Quả:Thườngdínhvớinhau thànhquảkép,gầnhìnhcầu(M.tomnetosa, M umbellata)hoặc hình trứng (M citrifolia, M longifolia…), phần bụngquảphẳng hoặccó rãnh Hạt:Hạtcứng,phơi nhỏ,lámầmhìnhthn 3.1.1.2.KhóađịnhloạicáclồithuộcchiNhàu(MorindaL.)ởViệtNam 1A Thân đứng2A.Tràngn hẵn 3A.Ốngtràngdài15mm,thùytràngdài6-7mm 1.M.tomentosa 3B Ống tràng dài hay 20 mm, thùy tràngdài hay mm4A.Ốngtràngdàihơnhaybằng30mm,thùytràngdàihơn11mm,đầunụhoa màutrắng-xanh 2.M.longissima 4B Ống tràng dài 20-25mm, thùy tràng dài 8-10 mm, đầu nụ hoa màutím .3.M.longifolia 2B.Tràngcólơng 5A.Cuốngcụmhoadài0-4mm 4.M.persicaefolia 6A.Đàikhơngcóthùy,cuốngládài7-8mm.4a.M.persicaefoliavar.oblonga6B Đài có thùy, cuống dài 1-3 cm 4b.M persicaefoliavar.pandurifolia5B Cuốngcụmhoadài 10-15 mm 5.M.citrifolia 1B Thânleo 7A.Cụmhoamọcđốidiệnlá 6.M.polyneura 6a.M polyneuravar.aspera 7B.Cụmhoamọcởnáchláhayđỉnhcành 8A Thùytràng dàibằng ốngtràng 7.M.officinalis 8B Thùy tràng dài ống tràng9A.Lákèmdạngmàngmỏng 10A Sốđôigânbên nhiềuhơn haybằng7 11A Ốngtràngdài 1-1,2mm, sốđôi gânbên10-13 8.M.v i l l o s a 11B.Ốngtràngdài1,5-2mm,sốđôigânbên7-10 9.M.cochinchinensis 10B.Sốđôigânbên4-5 10.M.parvifolia 9B.Lákèmkhôngdạng màngmỏng 12A.Sốđơigânbên íthơn7 .11.M.umbellata 12B Sốđơigânbên7-10 .11a.M.umbellatavar.tonkinensis 3.1.1.3 Mơtảcác lồitrongchiNhàu(MorindaL.)ởViệtNam Morinda citrifoliaL.(1753)–Nhàuláchanh Cây gỗ nhỏ, cao 7-10 m Thân cànhnhẵn.Phiếnláhìnhtráixoan,nhẵn.Kíchthước 12-30 cm x 6-15 cm Cólá kèm Cụmhoa hìnhđầu,mọcởnáchlá Hoa màu trắng, có lơng họng; nhị5, chỉnhị ngắn; bầu Cụm hìnhtrứnghoặccầu;hạtnhiều Hình3.2.Nhàuláchanh(M.citrifolia) chụptạiKỳAnh,HàTĩnh(ảnhVũHươngGiang) Sinhhọcvàsinhthái:Câymọcrảiráctrongrừngthườngxanh,rừngphụchồis aunươngrẫy.Câyrahoaquanhnăm Mẫu nghiên cứu:HÀ TĨNH, TNSV22-HT; NHA TRANG (PhúKhánh), 0000053452 (HN); KHÁNH HÒA (huyện đảo Trường Sa),0000053452(HN) Phân bố:Khá phổ biến Việt Nam Cịn có Ấn Độ, Mianma, cácnướcnhiệtđớiChâvàAustralia Giátrịsửdụng:Chữacaohuyếtáp,tiểuđường,nhứcmỏichântay,đaulưng,sà iuốnván,chữalỵ,ỉachảy,cảmsốtvàbồibổsứckhỏe MorindacochinchinensisDC.(1830)–Bakíchlơng Cây bụi trườn,thân phủ lơng dày màu vàng Lá kèm mỏng, dài nhọn, cólơng.Cụmhoatánmọcởđầucành(30-40hoa/cụm).Hoakhơngcuống.Qu ảkép,đườngkínhkhoảng0,6-1,0cm,khichíncómàu vàng Sinhhọcvàsinhthái:Mọcrảiráctrongrừngẩm,nơicónhiềnhsáng Phân bố:Kon Tum, Gia Lai, Đăk Lăk, LâmĐồng,KiênGiang.CịncóởC a m p u c h i a , TrungQuốc Mẫunghiêncứu:THỪATHIÊNHUẾ,TNSV13BM; ĐĂK LĂK, 0000053463 (HN);KONTUM,0000053458(HN) Giátrịsửdụng:Chữaphongthấp,gâncốtyếu,bổ trí não, chữa xuất tinh sớm, liệt dương, kinhnguyệtkhơngđều,phongthấp,huyếtápcao Hình3.4.Bakíchlơng(M.cochinchinensis) chụptạiNamĐơng,T.T.Huế(ảnhVũHươngGiang) MorindalongifoliaCraib (1932)-Nhàuládài Câygỗ,cao3-5m,cànhnhẵn.Phiếnláto,cỡ15-25x6-8cm;gânbêncó610đơi,cólákèmhìnhtim Cáccụmhoahìnhđầumọcởnáchlá.Hoamàutrắng,tràng 6,họngtràngnhẵn,nhị6.Bầudưới,1ơ.Quảkép hình trứng, đường kính 2,5-3cm, màu tím, rãnh sâu phần bụngquả.Hạtnhiều,hìnhbầudục,nhọn1đầu,màunâu đen Dạng sống sinh thái:S ố n g r ả i r c rừng thưa, rừng nghèo, ven sơng, ven suối,nơi có độ ẩm cao Ra hoa, từ tháng 3-9.Phânbố:ThừaThiênHuế Mẫunghiêncứu:THỪATHIÊNHUẾ,TNSV 10BM;MissouriBotanicalGardenHerbariumH AL10993(MO) Giá trị sử dụng:Dùng phần thân già chữavàngda(dântộcKatu–Thừa ThiênHuế) Hình3.6.Nhàuládài(M.longifolia) chụptạiNamĐơng,T.T.Huế(ảnhVũHươngGiang) MorindalongissimaY Z.Ruan(1999)–Nhóđơng Câygỗnhỏ,caotừ2-4m,phâncànhnhiều;cànhnonhơivng.Phiến láhìnhbầu dục,kíchthướclá12-18x8-10 cm; mặt dướihơicólơng;gânbên810 cặp Cụm hoa ngù nách Hoa màu trắng; tràng 4-5; nhịđínhở họngtràng,chỉnhịngắn Bầu4ơ.Quảkép hìnhcầuhoặctrứng Sinh học sinh thái:Mọc rải ráctrong rừng thường xanh thứ sinh,trênn n g r ẫ y v đ i c â y t r ụ i , độcao300800m.Rahoavàotháng45,quảgiàtồntạiđ ế n tháng12 Hình3.8.Nhóđơng(M.longissima) chụptạiChiềngAn,SơnLa(ảnhVũHươngGiang) Phânb ố : S n L a , L a i C h â u , N g h ệ A n , T h a T h i ê n H u ế , Q u ả n g Nam,QuảngNgãi.Cịncóở TrungQuốc Mẫunghiêncứu:SƠNLA, C-520 Giátr ị sửd ụ n g : R ễ làm thuốctrị vi ê m ga nở đồngbà o Thái(Sơn La)vàK’Dong(TràMy–QuảngNam) MorindaofficinalisF.C.How(1958)–Bakích Bảng3.4.Sựphânbốcủacáclồithuộc chiNhàuở ViệtNam MCF MC ML MLS MO MPV Vùng TL BS TL BS TL BS TL BS TL BS TL BS phânbố 1.K h u vựcTrungdumiềnnúi phíaBắc HàGiang + CaoBằng LaoCai + LaiChâu + + SơnLa © + C PhúThọ + C TháiNguyên + C BắcKạn + LạngSơn + QuảngNinh + C BắcGiang + HịaBình + 2.K h u vựcĐồngbằngSôngHồng VĩnhPhúc + C HàNội + + HàNam BắcNinh + NinhBình © + 3.KhuvựcBắcTrungbộ ThanhHóa © NghệAn + HàTĩnh © © QuảngBình © © © + QuảngTrị + © T.T.Huế © © + 4.KhuvựcNamTrungbộ QuảngNam + + QuảngNgãi + + KhánhHòa + NinhThuận + 5.Khu vựcTâyNguyên KonTum + + GiaLai + + C ĐăkLăk © + LâmĐồng + + 6.KhuvựcĐơngNamBộ BìnhBương + TâyNinh + © ĐồngNai + TP.HCM + 7.Khu vựcTâyNamBộ ĐồngTháp + AnGiang + KiênGiang + + Loài MP MT MU MV TL BS TL BS TL BS TL BS + + + + + + + + + + + + + © + © © + © C © + + + + + + + + + + + © + © C C + Chú thích:1 MCF:M citrifolia; MC:M cochinchinensis; ML:M longifolia; 4.MLS:M.longissima;5.MO:M.officinalis;6.MPV:M.parvifolia;7.MP:M.persicaefolia ;8.MT:M.tomentosa; 9.MU:M umbellata;10.MV:M villosa TL:Cácđiểm phânbốtheotàiliệuđã ghi nhận(kýhiệu+) BS: Các điểm phân bố theo nghiên cứu luận án (ký hiệuC)Cácđiểm phânbốđượcbổsungbởi luậnán(kýhiệu©) 3.1.3.1 LồiNhàuládài(M.longifolia) QuaBảng 3.6cho thấy,cây tái sinh chồitừgốc,rễ chânn ú i (OTC1) sườnn ú i ( O T C ) c h i ế m u t h ế h n s o v i c â y t i s i n h chồi từ hạt.Chất lượng tái sinh điểm có khác rõrệt Ở chân núi, tỷ lệ tốt (đạt 73,9%)có so với sườn núi(57,1%); tỷ lệ trung bình (23,9%) thấp sườn núi (33,3%).Như vậy, lồiM longifoliaphân bố chân núi bị tác động bởingoại cảnh so với sườn núi vàc ó k h ả n ă n g t i sinh chồi từ g ố c khỏe,ởđỉnhnúi(OTC3)chưathấyxuấthiệnloàinày Bảng3.6.ĐặcđiểmtáisinhvàchấtlượngtáisinhtựnhiêncủaloàiM.longifolia Nguồngốctáisinh OTC cấpI Gốc,rễ Số 34 16 % 73,9 76,2 Chấtlượngtáisinh Hạt Số 12 Tốt Tổng % 26,1 23,8 46 21 Số 34 12 % 73,9 57,1 Trung bình Số % 11 23,9 33,3 0 Xấu Số % 2,2 9,5 Đặc điểm phân bố:LoàiM longifoliađược phân bố theo kiểu thảmthực vật phục hồi sau nương rẫy, chủ yếu chân núi (OTC1) sườnnúi(OTC2),xuấthiện ởđộcaotừ100m–420mso vớimặtnướcbiển 3.1.3.2 LồiNhàulơngmềm(M.tomentosa): Bảng 3.8 cho thấy, khu vực, tái sinh chồi từ gốc, rễ chiếm ưuthế từ hạt Chất lượng tái sinh có khác LồiM.tomentosacó khả tái sinh chồi từ gốc khỏe Điều làm sởchokhảnăngnhângiốngbằnghìnhthứcgiâmhom Đặc điểm phân bố:LồiM tomentosađược phân bố kiểu thảmthực vật rừng phòng hộ ven biển, chủ yếu chân núi (OTC1) sườnnúi (OTC2),xuấthiệnởđộcaotừ20m–100msovớimặtnướcbiển Bảng3.8.ĐặcđiểmtáisinhvàchấtlượngtáisinhtựnhiêncủaloàiM.tomentosa Nguồngốctáisinh OTC cấpI Gốc,rễ Số 69 21 % 75,8 72,4 Chấtlượngtáisinh Hạt Số 22 Trung bình Số % % 73,6 21 23,1 51,7 20,7 0 Tốt Tổng % 24,2 27,6 91 29 Số 67 15 Xấu Số % 3,3 27,6 3.2 Điều tra tri thứcbản địa việc sửdụng cácloài Nhàu(MorindaL.) cộng đồng dân tộc tỉnh Thừa ThiênHuế,QuảngTrịvàKhánhHịa Kếtquảđiềutrachothấy,ởTàLong,ngườiVânKiềuchỉsửdụnglồiBa kích (M officinalis) làm thuốc Ở Cam Lâm, người Raglai sửdụnglồiNhàulơng mềm (M.tomentosa).ỞXnLộc,cótới03lồithuộcchiNhàu(M.cochinchinens is,M.longifolia,M.umbellata)đượcsửdụngchữabệnh.(Bảng3.10) Bảng3.10.ĐadạngvềbộphậnsửdụnglàmthuốctừcáclồiNhàu T T Lồinghiêncứu Bakíchlơng(M cochinchinensis) Nhàulá dài (M.longifolia) Ba kích (M.officinalis) Nhàulơngmềm (M.tomentosa) Nhàután (M.umbellata) Bộphận sửdụng Sốngườisửdụnglàmthuốctheotừngloài Ka tu % Vân Kiều % Raglai % Rễ 08 12,5 18 28,1 - - Gốcthân 12 18,8 36 55,4 - - Rễ - - 27 84,4 - - Vỏ,rễ - - - - 11 39,3 16 25,0 29 44,6 - - Lá,thân, rễ QuaquátrìnhkhảosáttrongcộngđồngcácdântộcKatu,BruVânKiềuvàRaglaitại khu vực nghiên cứu, thông qua phiếu điều tra thuthậpđư ợ c 9b i thuốc d â n g i a n t l o i : B a k í c h l n g (M cochinchinensis),Nhàuládài(M.longifolia),Bakích(M.officinalis),Nhàul ơngmềm(M.tomentosa),Nhàután(M.umbellata) (Chitiếtcácbàithuốcđượctrìnhbàytrongluậnánchính) 3.3 ThànhphầnhóahọccủamộtsốlồithuộcchiNhàu(MorindaL.)ởViệt Nam 3.3.1 LồiNhàulơngmềm(M.tomentosa) MT1 (new) MT2R = H MT4 MT5 (new)MT3R = C H MT8 MT7 MT6 MT9 MT10 MT11 MT12 Hình3.25.Tổnghợp cáchợp chấtphânlậptừlồiM.tomentosa Bằng phương pháp hóa học xác định hợp chất phân lậpđược là: morintoside A (MT1,chất mới), asperulosidic acid (MT2),daphylloside (MT3), asperuloside (MT4), morintoside B (MT5,chấtmới),dehydroepoxymethoxygaertneroside(MT6), (1R,6R,9R)6,9,11-trihydroxy-4-megastigmen-3-one (MT7),4-epiborreriagenin(MT8),transphytol(MT9),ursolicacidlactone(MT10),3β-hydroxyurs-12-en-28al(MT11),ursolicacid(MT12) 3.3.2 LồiNhàután(M.umbellata) Bằng phương pháp hóa học xác định hợp chất phân lậpđượclà:umbellatolideA (MU1,chấtm i ),umbellatolideB (M U2, chấtm i ),deacetylasperulosidic acid(MU3),4-epi- borreriagenin(MU4),1-C-syringyl-glycerol(MU5) MU2(new) MU1 (new) MU4 MU3 Hình 3.28.Tổng hợp hợp chất phân lập từloàiM.umbellata MU5 3.3.3 LoàiNhàuládài(M.longifolia) ML1 ML2 (new) ML3(new) 28 21 26 2325 18 17 11 15 10 HO 27 13 19 20 O O ML4 ML5 Hình3.31.TổnghợpcáchợpchấtphânlậptừlồiM.longifolia Bằng phương pháp hóa học xác định hợp chất phân lậpđượclà:cerbinal(ML1),longifolideA(ML2,chấtmới),longifolideB( ML3,chấtmới),5,8-epidioxyergosta-6,22-dien-3ol(ML4),oleanolicacid(ML5) 3.4 KếtquảđánhgiáhoạttínhsinhhọccủamộtsốlồithuộcchiNhàu 3.4.1 Kếtquảsàng lọchoạttínhcủa cácdịchchiếtthơ Sử dụng 04 mẫu dịch chiết thơ từ lồi:M tomentosa(MT),M.cochinchinensis(MC),M umbellata(MU) vàM longifolia(ML) đểtiếnhànhsànglọc,kếtquảchothấy:mẫuMTvàMCđềuthểhiệnhoạt tính chống oxi hóa tốt với giá trị ED 50thấp, đặc biệt mẫu MT MẫuMUbiểuhiệncóhoạttínhtrêndịngMCF7;mẫuMCbiểuhiệncóhoạttínhgâ yđộctrêndịngLU1.Khithửhoạttínhkháng7loạivisinhvậtkiểmđịnhtrêncácphiếnvilượng96 giếngchothấy,chỉcóhaimẫuMCvàMTthểhiệncóhoạttínhtrênchủngStaphy lococcusaureus 3.4.2 Kếtquảđánhgiáhoạttínhcủacáchợpchấtphânlậpđượctừmộtsốlồi Nhàu 3.4.2.1 Kếtquảđánhgiáhoạttínhgâyđộctếbào HợpchấtML5thểhiệncóhoạt tínhgâyđộctếbàotrêndịngKB 3.4.2.2 Kếtquảđánhgiáhoạttínhchốngoxihóa Tấtcảcácmẫuthínghiệmchưathểhiệncó hoạttínhchốngoxihóa 3.4.2.3 Đánhgiáhoạt tínhứcchếenzym α-glucosidaseglucosidase 50.96 Ứcchế(%) 60 50 40 23.8 30 19.42 18.22 19.5 17.1317.79 20 14.53 14.69 13.41 7.29 9.96 10 6.55 Hợp chất Hình 3.32.Mức độ ức chế enzymeα-glucosidase hợp chấtphânlậpđượctừlồiNhàulơngmềm(M.tomentosa) Kết Hình 3.32 cho thấy, tất hợp chất phân lập từ lồiM.tomentosađềuthểhiệncóhoạttính,trongđó,hợpchấtMT10thểhiệnhoạ t tính mạnh với phần trăm ức chế 23,8% nồng độ 50 µM,tiếp đến hợp chấtMT7(19,50%);MT12(19,42%);MT6(18,22%);thấpnhấtlàhợpchất MT9(6,55%) 3.5 NhângiốnglồiNhàulơngmềm(M.tomentosa)