Thông tin tài liệu
VIỆNHÀNLÂMKHOAHỌCVÀCÔNGNGHỆVIỆT NAM HỌCVIỆNKHOAHỌCVÀCÔNGNGHỆ …… ….***………… DIỆPTHỊLAN PHƯƠNG NGHIÊNCỨUTỔNGHỢP VÀ KHẢO SÁT HOẠT TÍNH SINH HỌC CỦA ALPHITONIN,MAESOPSINVÀMỘTSỐ DẪNXUẤTCỦACHÚNG Chunngành:HóaHữucơMã số: 62.44.01.14 TĨMTẮTLUẬNÁNTIẾNSĨHỐHỌC HÀNỘI– 2015 Cơng trình hồn thành tại: Học viện Khoa học Côngnghệ– ViệnHànlâmKhoa họcvà Côngnghệ ViệtNam Người hướngdẫn khoahọc: TS.NGUYỄNQUỐCVƯỢNG PGS.TS.TRỊNHTHỊTHỦY Phản biện 1:PGS TS Phan Minh GiangPhảnbiện2:PGS TS Trần Việt HùngPhản biện 3:PGS.TSTrầnThu Hương Luận án bảo vệ trước Hội đồng chấm luận án tiến sĩ, họp tạiHọc viện Khoa học Công nghệ - Viện Hàn lâm Khoa học CơngnghệViệtNamvào hồi09giờ00’, ngày25 tháng01 năm2016 Có thểtìmhiểuluậnántại: - Thư viện Học việnKhoahọc Côngnghệ - ThưviệnQuốc giaViệtNam A GIỚITHIỆULUẬNÁN Đặtvấnđề Các thuốc tác động đến hệ miễn dịch thuốc có giá trị khikích thích hệ miễn dịch hay ức chế hệ miễn dịch điều hịa miễndịch.Vớihoạ tt í nh kíc hthí ch h ệ m i ễ n dị c h , chúngt ă ngsứ c đ ề kh ng củacơthểvàv i h o t t í n h ứ c c h ế m i ễ n d ị c h c h ú n g l m c t h ể t h í c h nghi dần với mơi trường sống Các thuốc kích thích miễn dịch sửdụng phòng điều trị nhiễm virus HIV, viêm gan B, viêmphổi, lao, cúm gà…(Ví dụ interferon alpha, beta gamma….) Cácthuốc ức chế miễn dịch sử dụng sau phẫu thuậtđ ể t r n h s ự đ o thải quan ghép như: gan, thận, da, xương…, dùng để điều trịcácbệnhdosựquámẫncủahệmiễndịchnhưbệnhnhượccơ,luputbanđỏ,thấpkhớpthểnhẹ,tiểu đường…(vídụcyclosporine,prednisone,azathioprin …) Những loại thuốc tổng hợp, sinh tổnghợp có nguồn gốc từ thiên nhiên, đó, loại thuốc sau ưachuộng sử dụng tác dụng phụ Ở nước ta, loạithuốc ức chế miễn dịch phải nhập hoàn toàn, giá thành thuốc rấtcao gánh nặng khó vượt qua bệnh nhân, người cónhucầusử dụng Các kết nghiên cứu nhóm nghiên cứu GS Trần Văn Sungcho thấy hai hợp chất alphitonin-4-O-β-D-glucopyranoside (TAT6) vàmaesopsin4-O-β-D-glucopyranoside(TAT2)đượcphânlậptừdịchchiết butanolcủalácâyChayBắcbộ(Artocarpus tonkinensisA Chev.)cóhoạttínhứcchếmiễndịchtuy yếuhơncyclosporinAnhưngkhơnggây tác dụng phụ, cyclosporin A gây độc cho cơquan nội tạng, gan, thận, tiêu hóa, thần kinh… Các hợp chất auronol vàcả auronol glycoside nhóm chất gặp có hàm lượng thấp trongtự nhiên, lần giới hoạt tính sinh học hợpchấtauronolglucoside nàyđượccơngbố Hoạttính ứcchếmiễndịchcủahaiauronolg l u c o s i d e TAT6 v TAT2đ ợ c g i ả t hi ế t d o p h ầ n đ n g t r o n g ph â n t c ó k h ả n ă n g t h ấm vàomàng tế bào pháth u y t c d ụ n g c ủ a c c a g l y c o n e T n g t ự , c c hoạtchất dượcchứanhóm nitrile(-CN), đượcđưa vàosửd ụ n g l â m sàng ngày nhiều Do nhóm phân tử nhỏ có khả tạo liênkết hydro với amino acid, protein H 2O nên nhóm nitrile(-CN) có khả thấm qua màng tế bào; số trườnghợp, nhóm có tác dụng thay phần đường phân tửglucoside Nhằm tìm kiếm hợp chất có hoạt tính hệ miễn dịch, từphát mở đường auronol glucoside tính chất hợpchất mang nhóm nitrile chúng tơi chọn đề tài: “Nghiên cứu tổng hợp vàkhảosáthoạttínhsinhhọccủaalphitonin,maesopsinvàmộtsốdẫnxuất củachúng” Đối tượngnghiêncứuvànhiệmvụ củaluậnán Đốitượngnghiêncứu:cáchợpchấtAlphitonin-4-O-β-Dglucopyranoside,Maesopsin-4-O-β-Dglucopyranoside,alphitoninvàmaesopsin Các nhiệmvụ luậnán - Phânlập2hợpchấtalphitonin-4-O-β-Dglucoside(TAT6)vàmaesopsin4-O-β-Dglucoside(TAT2)từlácâyChayBắcbộ(ArtocapustonkinensisA.Chev.) - Nghiên cứu tổng hợp auronol alphitonin maesopsin vàmột số dẫn xuấtnitrile củachúng - Nghiên cứu phản ứng glucoside hóa tổng hợp alphitonin-4-O-β-Dglucoside - Khảo sát hoạt tính kích thích tế bào lympho hoạt tính độc tế bàocủa sản phẩmtổnghợpđược Ýnghĩakhoahọcvànhữngđónggópmới củaluậnán 3.1 Ý nghĩa khoa họccủaluậnán Đề tài nghiên cứu phân lập, tổng hợp khảo sát hoạt tính sinhhọc auronol, auronol glucoside lớp chất gặp có hàmlượngthấptrongtựnhiên,theođịnhhướngứcchếmiễndịchtừlácây Chay Bắc Bộ, thuốc dân gian sử dụng thành công điềutrịmột sốbệ nh dosựquámẫncủahệ miễndịc hnhưnhượccơ, lup ut banđỏ… 3.2 Nhữngđóng gópmớicủa luậnán Đâylà cơngtrình đầutiênđã nghiêncứu thànhcơngcácnộidung: - Đã xây dựng quy trình tổng hợp hợp chất alphitonin-4-O-βD-glucopyranoside từ alphitonin hợp chất bán tổng hợp từtaxifolin flavonol phân lập từ rễ Thổ phục linh (Smilax glabraWall ex Roxb.) Kết nghiên cứu tổng hợp thành công alphitonin-4-O-β-Dglucopyranoside cho phép tiến hành nghiên cứu vềhoạttính sinh học củamộtsố hợpchấttổnghợp - Đãnghiêncứuphảnứngtổnghợptồnphầnmethoxyauronolalphitonin đưaraphươngpháptổnghợpngắngọncácaurone,vớihiệusuấtcao,làchấttrunggianchìakhóatrongtổnghợptồn phầnauronol - Đã nghiên cứu tổng hợp dẫn xuất nitrile alphitonin vàmaesopsin auronol gặp tự nhiên Trong maesopsin(AgTAT2)đãđượcphânlậptừlácâyChayBắcBộ(ArtocapustonkinensisA Chev.) Ngồi tổng hợp dẫn xuất nitrile củaauronol glucosidemaesopsin-4-O-β-D-glucopyranoside - Đã khảo sát hoạt tính kích thích tế bào lympho hoạt tính gây độctế bào hợp chất tổng hợp dòng tế bào thườngNIH/3T3v d ò n g tếb o u ng thưM C F , L U , K B H e p G Kế t quảkhảosátchothấydẫnxuấtalphitonin-4-O-acetonitrile có hoạt tínhkícht h í c h t ế bà ol ym ph o m n h n h ấ t v i S C 50=1 1, µ g / m l ; h ầ u h ế t cáchợpchấtthuđượcđềucóhoạttínhứcchếyếuvớitếbàothườngvà dịngtế bào ungthư kiểmđịnh Bốcục luậnán Luận án gồm 172 trang với 20 bảng số liệu, 128 hình, 145 tài liệutham khảo phân bố sau: Mở đầu (2 trang), Chương Tổngquan(38trang),Chương2.Đối tượng,mụctiêuvàphươngpháp nghiên cứu (5 trang), Chương 3.Thực nghiệm (29 trang), Chương Kêtq u ả thảo luận (79 trang), Kết luận kiến nghị (2 trang), Các cơng trìnhđã cơng bố liên quan đến luận án (1 trang), Tàil i ệ u t h a m k h ả o ( trang)và phụlụcphổ B NỘIDUNGLUẬNÁN CHƯƠNG1.TỔNGQUAN Trêncơsởnghiêncứutàiliệu,phầntổngquancủaluậnántrìnhbàycác nộidungsau: - Cáchợpchất flavonoid - Hoạt tínhsinh họccủaaurone auronol - Tổnghợpaurone - Tổnghợpauronol - Các phươngpháptổnghợpglycoside - Hợpchấtchứanitriletronghóadượcvàphươngpháptổnghợpdẫnx uấtnitrile CHƯƠNG2.ĐỐITƯỢNG,MỤCTIÊUVÀPHƯƠNGPHÁPNGHIÊN CỨU 2.1 Đốitượngnghiêncứu Maesopsin-4-O-β-Dglucopyranoside(116) Alphitonin-4-O-β-D- glucopyranoside (125) Maesopsin(98) Alphitonin (82) 2.2 Mụctiêu Nghiêncứutổnghợpcácauronolalphitonin(AgTAT6),maesopsin(Ag-TAT2),cácauronol glucosidealphitonin-4-O-β-Dglucopyranoside (TAT6) maesopsin-4-O-β-D-glucopyranoside (TAT2) số cácdẫn xuất nitrile chúng Khảo sát hoạt tính sinh học chất tổnghợpđược 2.3 Phươngpháp nghiêncứu Chương trình bày phương pháp sử dụng trìnhnghiên cứu bao gồm: phương pháp phân lập hợp chất, phương pháptổng hợp hữu cơ bản, phương pháp tổng hợp hữu đặc thù, phươngpháp theo dõi trình phản ứng, phương pháp tinh chế, phương phápphổ xác định cấu trúc, phương pháp ni cấy tế bàoin vitro,xác địnhhoạt tính gây độc tế bào tế bàoin vitrovà phương pháp phân lập tế bàolympho,xác định khả năngkích thíchtếbào lympho CHƯƠNG3.THỰCNGHIỆM 3.1 Phânlậpvàtổnghợpcácauronolvà auronol glucoside 3.1.1 Phânlậpmaesopsin4-O-β-D-glucopyranoside(116)vàalphitonin4-O-β-D-glucopyranoside(125);điềuchếmaesopsin(98) * Phân lập maesopsin 4-O-β-D-glucopyranoside (116) alphitonin4-O-β-D-glucopyranoside(125) Haihợpchấtmaesopsin4-O-β-D-glucopyranoside(116)vàalphitonin-4O-β-D-glucopyranoside (125) phân lập từ 10 kg lácây Chay Bắcbộ bằngcácphươngphápthườngquysửdụngSKCtrêndiaion, silica gel pha thường, pha đảo sephadex thu g116và0,03 g125 Chất116 ESI-MS(m/z):449[M-H]ˉ H-NMR( 0 M H z , D M S O ) : δ ( p p m ) , ( O H ) , , , , ( × OH),6,93/6,91(2H,d,J=8 , Hz,H-2′,6′),6,56/6,54(2H,d,J=8,5 Hz,H-3′,5′),6,00(1H,d,J=1,7Hz,H-5),5,93(1H,d,J=1,7Hz,H7),5,20,5,13,5,06,5,01(4×OH),4,97/4,90(1H,d,J=7,5Hz,H-1′′), 4,59/4,50(1×OH),3,64/3,63(1H,brm,Ha-6′′),3,48(1H,m,Hb-6′′), 3,29-3,20(m,H- 3′′, H-5′′,H-2′′,H-4′′),2,96và2,90(2H,2 × d,J= 13,5Hz,CH2-10) 13 CNMR( M H z , D M S O ) : δ ( p p m ) , / , ( C = O ) , , (C-8),1 , ( C - ) , , / , ( C 4),155,9(C-4′),131,3(C-2′), 124,2/124,17(C-1′),114,7/114,6(C-3′),105,6/105,5(C2),102,0/101,8 (C-9),99,5/99,3(C-1′′),95,8/95,3(C-5),91,7/91,5(C-7),77,2/77,1(C5′′),76,8/76,7(C-3′′),73,0/72,9(C-2′′),69,3/69,2(C-4′′),60,4/60,3(C6′′),40,5(C-10) Chất125 ESI-MS(negative):m/z=465[M-H]ˉ 1H-NMR(500MHz,CD OD):δ(ppm)6,66/6,67(1H,2×d,J=2,5 Hz,H2′),6,57/6,55(1H,2×d,J=8,5Hz,H-5′),6,52/6,51(1H,2× dd,J = , , , H z , H 6′),6,00/5,98(1H,2×d,J=1,2Hz,H-5), 5,88/5,87(1H,2×d,J=1,2Hz,H-7),4,88(1H,tínhiệuchồngchập,H-1′ ′),3,88(1H,brd,J=12,5Hz,Hb-6′′),3,70(1H,m,Ha-6′′),3,53 (1H,dd,J=8,0,9,0Hz,H-2′′),3,48(1H,m,H-3′′),3,43(2H,m,H-4′′ vàH-5′ ′), 3,04 (2H, m,CH2-10) C-NMR (125 MHz, CD3OD):δ( p p m ) 196,0/195,8( C = O ) , 13 174,9/174,7( C - ) , , / , ( C - ) , , / , ( C 4),145,6/145,5 (C-3′),145,1(C-4′),126,5/126,4(C-1′),123,1/123,0(C-6′),118,7/118,6 (C-2′),1 , / 1 , ( C - ′ ) , , / , ( C ) , , / , ( C - ′ ′ ) , 101,7/101,5( C - ) , 9 , / , ( C - ) , , / , ( C 7),78,3/78,2(C-5′′), 77,3( C - ′ ′ ) , , / , ( C - ′ ′ ) , , ( C - ′ ′ ) , , ( C - ′ ′),42,3/42,2(C10) * Điềuchếmaesopsin Kết phân lập hai hợp chất auronol glucoside alphitonin-4-O-β-Dglucopyranoside (125) maesopsin-4-O-β-D-glucopyranoside (116)từlá Chay Bắc (A Tonkinensis) cho thấy hợp chất auronolglucoside maesopsin-4-O-β-D-Glc (116) có hàm lượng lớn lácâyChayBắcbộ( > 0,07%).Vìvậyhợpchấtmaesopsin-4-O-β-D-Glc (116)đã đượcsử dụnglà nguồn cungcấpauronolmaesopsin (98) Hình 3.2 Sơ đồtổnghợpmaesopsin(98) Maesopsin(98) ESI-MS(m/z): 286,9[M-H]ˉ 1H-NMR(500MHz,CD OD):δ(ppm)7,02(2H,d,J=9,0Hz,H3 2′,H-6′),6,59(2H,d,J=8,5Hz,H-3′,H-5′),5,78(1H,brs,H-7),5,74(1H,b r s, H-5), 3,08 (2H,brs, CH2-10) 13C-NMR( M H z , C D OD):δ ( p p m ) , ( C = O ) , , ( C 8), 171,0 (C-6), 159,7 (C-4), 157,2 (C-4′), 132,5 (C-2′,C-6′), 125,9 (C-1′), 115,7( C - ′ , C - ′ ) , , ( C - ) , , ( C - ) , , ( C 5),91,1(C-7), 42,1(C-10) 3.1.2 Bántổnghợpalphitonin Alphitonin (82) nghiên cứu tổng hợp theo phươngpháp Kielhmann phản ứng đồng phân hóa taxifolin tácdụng nhiệt Phương pháp thể nhiều ưu điểm ngun liệutừnguồnthựcvậttrong nước,phảnứngchỉcó1bướcvàsửdụngdungmơi nước thân thiện với môi trường Hợp chất đầu taxifolin đượcđiều chế từ astilbin có hàm lượng cao (~ 1%) rễ Thổ phục linh(S glabra) Các bước phân lập astilbin, điều chế taxifolin phản ứngđồngphân hóataxifolin trình bàytrongsơđồsau: Hình3.3 Sơ đồtổngquátbán tổnghợp alphitonin (82)
Ngày đăng: 30/08/2023, 20:46
Xem thêm:
