0786 nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính sinh học của loài nguyệt quế (murraya paniculata (l) jack) và loài tràm bông đỏ (callistemon citrinus (curt

BỘGIÁODỤCVÀĐÀOTẠO VIỆNHÀNLÂMKHOAHỌCVÀ CƠNGNGHỆVIỆTNAM HỌCVIỆNKHOAHỌCVÀCƠNGNGHỆ PHẠMNGỌCKHANH NGHIÊNCỨUTHÀNHPHẦNHĨAHỌCVÀHOẠTTÍNH SINHHỌCCỦALỒINGUYỆTQUẾ (Murraya paniculata(L.) JACK)V À L O À I TRÀMBƠNGĐỎ(Callistemoncitrinus(CUR TIS)SKEELS)ỞVIỆTNAM LUẬNÁNTIẾNSỸHĨAHỌC HàNội,2015 BỘGIÁODỤCVÀĐÀOTẠO VIỆNHÀNLÂMKHOA HỌCVÀCƠNG NGHỆVIỆTNAM HỌCVIỆNKHOAHỌCVÀCƠNGNGHỆ PHẠMNGỌCKHANH NGHIÊNCỨUTHÀNHPHẦNHĨAHỌCVÀHOẠTTÍNH SINHHỌCCỦALỒINGUYỆTQUẾ (Murraya paniculata(L.) JACK)V À L O À I TRÀMBƠNGĐỎ(Callistemoncitrinus(CUR TIS)SKEELS)ỞVIỆTNAM LUẬNÁNTIẾNSỸHĨAHỌC Chunngành:HóahọccáchợpchấtthiênnhiênMã sốchunngành:6 4 Ngườihướngdẫnkhoahọc:1.PGS.TS.NguyễnMạnhCường 2.GS.TS.YoungHoKim HàNội,2015 MỤCLỤC Trang LỜICAMĐOAN LỜICÁMƠN DANHMỤCCÁCKÝHIỆUVÀCHỮVIẾTTẮT DANHMỤCCÁCBẢNGDANH MỤCCÁCHÌNHDANHMỤCC ÁCSƠĐỒ MỞĐẦU CHƯƠNG1:TỔNGQUAN 1.1 KHÁIQUÁTVỀHỌCAMCHANHRUTACEAEVÀCHIMURRAYA 1.1.1 GiớithiệutổngquanvềhọCamchanhRutaceaevàchiMurraya 1.1.2 TìnhhìnhnghiêncứuvềhóahọccủachiMurrayatrênthếgiới 1.1.2.1 CáchợpchấtcoumarintừchiMurraya 1.1.2.2 Cáchợpchấtalkaloid 11 1.1.2.3 Cáchợp chấtflavonoid 14 1.1.2.4 Tinhdầu 15 1.1.2.5 Cáchợp chấtkhác 15 1.1.3 Hoạttínhsinhhọccủacácdịchchiếtvàhợpchấtphânlậptừchi Murraya 1.2 KHÁIQUÁTVỀHỌSIMMYRTACEAEVÀCHICALLISTEMON 15 1.2.1 GiớithiệutổngquanvềhọSimMyrtaceaevàchiCallistemon 20 1.2.2 CácnghiêncứuvềthànhphầnhóahọccủachiCallistemontrênthế giới 1.2.2.1 Tinhdầu 20 1.2.2.2 Cáchợpchấtflavonoid 23 1.2.2.3 Cáchợpchấttriterpenoid 23 1.2.2.4 Cáchợpchấtpolyphenol 24 22 1.2.3 CácnghiêncứuvềhoạttínhsinhhọccủachiCallistemontrênthếgiới 1.3 GIỚITHIỆUTỔNGQUANVỀCÁCPHƯƠNGP H Á P 27NGHIỆMHOẠTTÍNHSINHHỌCTRONGLUẬNÁN 20 T H Ử 25 1.3.1 Phương phápthửđộctếbào 27 1.3.2 Phương phápthửnghiệmtácdụnggiãnmạch 28 1.3.3 Phươngphápứcchếenzymeepoxidehydrolasehòatan(sEH) 29 1.3.4 Phương phápxácđịnhhoạttínhkhángviêmquayếutốNO 30 CHƯƠNG2:THỰCNGHIỆMVÀPHƯƠNGPHÁPNGHIÊNCỨU 32 2.1 Đốitượngvàphươngphápnghiêncứu 32 2.1.1 Thumẫucây,xácđịnhtênkhoahọcvàphươngphápxửlýmẫu 33 2.1.2 Phươngphápphânlậpcáchợpchấttừ cácdịchchiết 33 2.1.3 Các phươngphápxácđịnhcấutrúc hóahọccáchợpchất 33 2.2 Phươngphápthửnghiệmhoạttínhsinhhọc 33 2.2.1 Phươngphápđánhgiá hoạttínhgâyđộctếbào 34 2.2.2 Phươngphápthửtác dụnggiãn mạch 35 2.2.3 Phươngphápthửhoạttínhứcchếenzymethủyphânepoxidehịatan 36 2.2.4 Phươngphápthử hoạttínhkhángviêm 37 2.3 Xửlýmẫuthực vậtvà chiếttách 38 2.3.1 CâyNguyệtquếMurrayapaniculata 38 2.3.1.1 Phânlậpcácchấttừcặndịchchiếtchloroform 39 2.3.1.2 Phânlậpcácchấttừcặndịchchiếtn-hexane 40 2.3.2 CâyTràmbông đỏCallistemoncitrinus 40 2.3.2.1 Phânlậpcác chấttừcặndịchchiếtDCM 41 2.3.2.2 Phânlậpcácchấttừcặn dịchchiếtEtOAc 43 2.3.2.3 Phânlậpcácchấttừcặn dịchchiếtn-hexane 44 2.4 THƠNGSỐHĨA LÝVÀDỮKIỆNPHỔCÁCCHẤT 45 2.4.1 Từ lồiNguyệtquếMurrayapaniculata 45 2.4.2 Từ lồiTràmbơngđỏCallistemoncitrinus 46 CHƯƠNG3:KẾTQUẢVÀTHẢOLUẬN 50 3.1 THÀNHPHẦNHĨAHỌCLỒiNGUYỆTQUẾMurrayapaniculata 50 3.2 THÀNHPHẦNHĨAHỌCLỒITRÀMBƠNGĐỎCallistemon 67 citrinus 3.3 KẾTLUẬNVỀXÁCĐỊNHCẤUTRÚCCÁCHỢPCHẤT 140 3.4 ĐÁNHGIÁ TÁCDỤNGSINHHỌC 3.4.1 Khảosáthoạttínhđộctếbàocủacácdịchchiếtcâytrêndịngtế bàoung thưganHepG2 3.4.2 Tácdụnggiãnmạchcủacác hợpchấtcoumarin 3.4.3 TácdụngứcchếenzymesEHcủacáchợpchấtcoumarintừloàiNguyệtquếM 142 142 143 147 urraya paniculata 3.4.4 TácdụngứcchếenzymesEHcủacáchợpchấtchiếttáchtừlồi Tràm 149 bơngđỏCallistemoncitrinus 3.4.5 Tácdụngkhángviêmcủacác hợpchấtphânlậptừlồiTràmbơngđỏ 150 Callistemoncitrinus KẾTLUẬN 153 CÁCCƠNGTRÌNHĐÃCƠNGBỐLIÊNQUANĐẾNLUẬNÁN 155 TÀILIỆUTHAMKHẢO 157 PHỤLỤC 160 LỜICAMĐOAN Tơixincamđoan: Đâylàcơngtrìnhnghiêncứucủariêngtơi Cácsốl iệ u kếtquảthuđượctrongluậnán làhồn to àn t r u n g t hự c vàchưa đ ượcaicơngbốtrongbấtkỳcơngtrìnhnàokhác Tácgiảluậnán PhạmNgọcKhanh LỜICẢMƠN Luận án hồn thành Viện Hóa học Hợp chất thiên nhiên, ViệnKhoahọcvàCơngnghệViệtNam Với kính trọng, lịng biết ơn chân thành sâu sắc nhất, tơi xin bày tỏ lịngbiết ơntới PGS.TS Nguyễn Mạnh Cường GS.TS Young HoK i m l n h ữ n g n g i thầy hướng dẫn tận tình tạo điều kiện giúp đỡ thời gian thực hiệnluận án Tôi xin trân trọng cảm ơn quan tâm giúp đỡ Ban lãnh đạo Viện Hóa họcvà Viện Hóa học hợp chất thiên nhiên tạo điều kiện giúp đỡ tơi hồn thànhluận án Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn tới tập thể cán Phịng Hoạt chất sinh học,Viện Hóa học hợp chất thiên nhiên giúp đỡ nhiệt tình suốt thời gianthựchiệnlu ận án.Tơixing ửi lờicámơnđặcbiệttớiTh.S.HồViệt Đứcchosựgiú pđỡqbáucủaThạcsỹtrongqtrìnhtơithựchiệnluậnánnày Tơi cám ơn đề tài nghiên cứu số 104.01-2010.25 quỹ Phát triểnKhoa học Công nghệ Quốc gia (NAFOSTED) đề tài Hợp tác Nghị định thư ViệtNam – Hàn Quốc số 52/2011/NĐT Bộ Khoa học Công nghệ (MOST) tài trợchocác nghiêncứutrongluậnánnày Tôixinchânthànhcảmơnđếncácđồngnghiệp,bạnbègầnxađãcổvũ,động viêntơihồnthànhtốtluậnánnày Cuối cùng, tơi xin gửi lịngk í n h t r ọ n g v s ự b i ế t n s â u s ắ c đến gia đình tơi, t i , đếnbốmẹ đẻ vàbốmẹ chồngtôi, đếnchồng vàc o n gái người đ ã k h n g ngạikhókhăn,vấtvả,đãlngiúpđỡtơi,tạođiềukiệnchotơithựchiệntốtluận án Tơixintrântrọngcảmơn! HàNội,ngày tháng năm2015 Tácgiảluậnán PhạmNgọcKhanh DANHMỤCCÁCKÝHIỆU,CÁCCHỮVIẾTTẮT H-NMR ProtonNuclearMagnetic ResonanceS p e c t r o s c o p y H-1H-COSY H- 1H-Correlation Spectroscopy 13 C-NMR Carbon13NuclearMagnetic ResonanceSpectroscopy Phổcộnghưởngtừhạtnhân proton Phổtươngtác proton Phổcộnghưởngtừhạtnhân cacbon13 s Singlet d Doublet t Triplet q Quartet dd doubletdoublet dt doublettriplet b(br) Broad m Multiplet J(Hz) HằngsốtươngtáctínhbằngHz δ(ppm) (ppm=partpermillion) Độdịchchuyểnhóahọctính bằngppm(phầntriệu) AUDA 12-[[(tricyclo[3.3.1.13,7]dec1-ylamino)carbonyl]amino]dodecanoicacid BuOH CC chấtchuẩndươngchothử nghiệmứcchếenzymesEH Butanol ColumnChromatography Sắckýcột CTCT Côngthứccấutạo CTPT Côngthức phântử DEPT DistortionlessEnhancement byPolarisationTransfer DMSO EtOAc PhổDEPT Dimethylsulfoxide CH3COOCH2CH3 Etylaxetat ESI-MS ElectronS p r a y IonizationMassSpectroscopy Hep-G2 Humanh e p a t o c e l l u l a r carcinoma Phổkhốiionhóabằngphunmùđiệntử HMBC HeteronuclearMultipleBond Tếbàoung thưganngười Phổtươngtác dịnhânquanhiều