Xác định thành phần hoá học tinh dầu cây đinh lăng (polyscias fruticóa (l ) harms) ở nghệ an và thanh hoá

Tr-ờng đại học vinh Khoa hóa học === === Nguyễn thị lan Xác định thành phần hoá học tinh dầu Cây đinh lăng (Polyscias fruticosa (L.) Harms) nghệ an hóa khóa luận tốt nghiệp đại học chuyên ngành hóa hữu Vinh, 2010 = = Tr-ờng đại học vinh Khoa hóa học === === Xác định thành phần hoá học tinh dầu Cây đinh lăng (Polyscias fruticosa (L.) Harms) nghệ an hóa khóa luận tốt nghiệp đại học chuyên ngành hóa hữu Ng-ời h-ớng dẫn: ThS Nguyễn thị chung Sinh viên thực hiện: Nguyễn Thị Lan Lớp: 47B - Hóa Vinh, 2010 = = Lời cảm ơn Luận văn đ-ợc hoàn thành phòng thí nghiệm hóa hữu cơ, khoa Hóa, tr-ờng Đại học Vinh; Trung tâm Kiểm định an toàn Thực Phẩm - Môi tr-ờng, tr-ờng Đại học Vinh Với lòng kính trọng biết ơn sâu sắc, xin chân thành cảm ơn: - ThS Nguyễn Thị Chung, cán giảng dạy khoa Hóa đà trực tiếp giao đề tài, tận tình h-ớng dẫn, giúp đỡ tạo điều kiện cho trình nghiên cứu hoàn thành luận văn - ThS Nguyễn Tiến C-ờng, môn Thực vật, khoa Sinh học, tr-ờng Đại học Vinh đà giúp định danh mẫu thực vật - Cô Lê Thị Thu Hiệp, cô Chu Thị Thanh Lâm cán phòng thí nghiệm đà tạo điều kiện giúp đỡ trình làm thí nghiệm, phân tích kết Nhân dịp này, xin gửi lời cảm ơn tới thầy cô khoa Hóa, gia đình, bạn bè đà quan tâm động viên giúp đỡ suốt trình học tập hoà thành luận văn Vinh, tháng năm 2010 Nguyễn Thị Lan MụC LụC Trang Mở đầu 1 Lý chọn đề tài NhiÖm vơ nghiªn cøu Đối t-ợng nghiên cứu PhÇn 1: Tỉng quan 1.1 Đặc điểm thực vËt hä nh©n s©m (Araliaceae) 1.2 Mét sè chi thuéc hä nh©n s©m (Araliaceae) 1.2.1 Chi Schefflera 1.2.2 Chi Dendropanax 1.2.3 Chi Polyscias 1.2.4 Chi Ancanthopanax 1.2.5 Chi Panax 1.2.6 Chi Arila 1.3 Mét sè c©y thuéc hä nh©n s©m 1.3.1 C©y ch©n chim leo (Schefflera elliptica Blume Harms) 1.3.2 C©y ch©n chim nói (Schefflera petelotii Merr) 1.3.3 C©y phong hà (Dendropanax chevalieri(Vig.) Merr.) 1.3.4 Cây đinh lăng trổ (Polyscias guifoylei Bail) 1.3.5 Cây ngũ gia bì (Acanthopanax aculeatum Seen) 1.3.6 C©y tam thÊt (Panax - gisneng (BURK) F.H Chen.) 1.3.7 C©y th«i hoang (Trewtia palmata Vis) 1.3.8 C©y nh©n s©m (Panax ginseng C.A Mey (P.schinseng Nees)) 1.4 Cây đinh lăng 1.4.1 Đặc điểm thực vật học 1.4.2 Ph©n bè, chÕ biÕn thu hái C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 1.4.3 Thành phần hóa häc 10 1.4.4 Tác dụng d-ợc lý 11 1.4.5 C«ng dơng vµ liỊu dïng 13 1.5 Thành phần hóa học đặc tính tinh dầu 14 1.5.1 Vài nÐt chung vỊ tinh dÇu 14 1.5.2 Trạng thái tự nhiên phân bố tinh dầu 14 1.5.3 TÝnh chÊt vËt lý cđa tinh dÇu 15 1.5.4 Thành phần hãa häc cđa tinh dÇu 16 1.5.5 øng dơng cđa tinh dÇu 17 PhÇn 2: Ph-ơng pháp nghiên cứu 18 2.1 Ph-ơng pháp lấy mẫu 18 2.2 C¸c ph-ơng pháp tách tinh dầu 18 2.3 Ph-ơng pháp ch-ng cất lôi n-ớc 19 2.4 Bảo quản tinh dầu 19 2.5 Ph-ơng pháp định l-ợng tinh dÇu 20 2.6 Các ph-ơng pháp xác định thành phần hóa học tinh dầu 21 2.6.1 Ph-ơng pháp sắc ký - khÝ 21 2.6.1.1 Bản chất ph-ơng pháp sắc ký - khÝ 21 2.6.1.2 ¦u điểm ph-ơng pháp 22 2.6.2 Ph-ơng pháp khối phổ 23 2.6.2.1 B¶n chất ph-ơng pháp 23 PhÇn 3: Thùc nghiƯm 26 3.1 Hãa chất, dụng cụ, thiết bị máy móc 26 3.1.1 Hãa chÊt 26 3.1.2 Dông cô 26 3.1.3 Thiết bị máy móc 26 3.2 Địa điểm, thời gian cách lấy mẫu 26 3.3 TiÕn hµnh ch-ng cÊt tinh dÇu 27 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 3.4 Định l-ợng tinh dầu 28 3.5 Xác định thành phần hóa học cđa tinh dÇu 28 PhÇn 4: Kết thảo luận 29 4.1 Xác định thành phần hóa học tinh dầu đinh lăng ph-ờng Trung Đô, thành phố Vinh, Nghệ An 29 4.1.1 Nguyªn liƯu thùc vËt 29 4.1.2 Xác định thành phần hóa học 29 4.2 Xác định thành phần hóa học tinh dầu đinh lăng thị trấn nông tr-ờng Thống nhất, Yên Định, Thanh Hóa 32 4.2.1 Nguyªn liƯu thùc vËt 32 4.2.2 Xác định thành phần hãa häc 32 4.3 NhËn xÐt chung 35 KÕt luËn 42 Tài liệu tham khảo 43 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Khóa luận tốt nghiệp Chuyên ngành hóa hu c Mở ĐầU Lý chọ đề tài Từ lâu, ng-ời đà biết sử dụng nguồn nguyên liệu có sẵn thiên nhiên, phải kể đến nguồn nguyên liệu từ thảo mộc đáng đ-ợc quan tâm Hiện nay, hợp chất thiên nhiên có hoạt tính sinh học đóng vai trò quan trọng cho ngành sản xuất thuốc chữa bệnh, thuốc bảo vệ thực vật, công nghệ thực phẩm, mỹ phẩmThảo d-ợc nguồn nguyên liệu trực tiếp gián tiếp dẫn đ-ờng việc tìm kiếm biệt d-ợc míi N-íc ta n»m vïng nhiƯt ®íi, cã khÝ hËu nãng Èm nªn hƯ thùc vËt rÊt phong phó đa dạng Theo số liệu thống kê nhất, thảm thực vật Việt Nam có 12.000 loài, có khoảng 3.200 loài đ-ợc sử dụng y học dân tộc 600 loài cho tinh dầu [1,2,6,7] Trong thập kỹ qua, việc nghiên cứu thành phần hóa học hoạt tính sinh học cỏ n-ớc ta có nhiều hạn chế, ch-a đáp ứng đ-ợc yêu cầu điều tra tài nguyên thiên nhiên nh- đóng góp vào việc định h-ớng sử dụng, bảo tồn phát triển tài nguyên thực vật cách hợp lý Nhiều loại cỏ xung quanh bình th-ờng phổ biến nh-ng lại tiềm ẩn hợp chất có giá trị mà ch-a đ-ợc khám phá Cây đinh lăng (Polyscias fruticosa (L.) Harms) thuéc hä nh©n s©m ph©n bè ë vùng nhiệt đới, đại diện vùng ôn đới Trong dân gian, loài đ-ợc sử dụng để chữa bệnh nh- mệt mỏi làm tăng sức dẻo dai thể, thấp khớp, đau nhức, ban sởi, ho máu, giải độc thức ănNgoài ra, loại đ-ợc trồng làm cảnh khắp n-ớc Tuy nhiên việc nghiên cứu thành phần hóa học loài hạn chế Trong thời gian có hạn, chọn đề tài Xác định thành phần hóa học tinh dầu đinh lăng (Polyscias fruticosa (L.) Harms) thuộc họ nhân sâm (Araliaceae) Nghệ An Thanh Hóa" nhằm mục đích xác định hàm l-ợng tinh dầu, định tính, định l-ợng thành phÇn hãa häc cđa nã, Sinh viên: Nguyễn Thị Lan - 47B Hóa Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Khóa luận tốt nghiệp Chuyên ngành hóa hữu qua góp phần tìm kiếm phát thêm hợp chất có giá trị cho ngành công nghiệp h-ơng liệu, y d-ợc, mỹ phẩm bổ sung kiện đinh lăng Nhiệm vụ nghiên cứu Trong luận văn có nhiệm vụ: - Thu mẫu cây, định danh mẫu thực vật - Tách bảo quản tinh dầu, xác định hàm l-ợng % so với mẫu t-ơi - Xác định thành phần hóa học tinh dầu Đối t-ợng nghiên cứu Tinh dầu phận thân đinh lăng (Polyscias fruticosa (L.) Harms) thuéc hä nh©n s©m (Araliaceae) ë NghƯ An vµ Thanh Hãa Sinh viên: Nguyễn Thị Lan - 47B Hóa Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Khóa luận tốt nghiệp Chun ngành hóa hữu PhÇn TổNG QUAN 1.1 Đặc điểm thực vật họ nhân sâm (Araliaceae) Họ nhân sâm họ t-ơng đối lớn có khoảng 70 chi với 850 loài, phân bố chủ yếu vùng nhiệt đới, với đại diện vùng ôn đới, chủ yếu vùng Đông Nam Số lớn chi loài gặp Đông Nam , châu úc châu Mỹ Các họ nhâm sâm chủ yếu gỗ nhỏ hay bụi, thảo nhiều năm có thân rễ, th-ờng mọc cách, đối, nguyên (Gtlibertia) th-ờng chẻ chân vịt Hoa tập hợp thành tán đơn, tán tập hợp thành cụm hoa chùm, Hoa nhỏ đều, l-ỡng tính giảm trở thành hoa đơn tính Đài có đài phần d-ới dính lại, phần dời thành mảnh nhỏ Tràng có - 10, cánh hoa, rời xếp xen kẻ với đài Nhị số cánh hoa xếp xen kẻ với cành, Ýt rÊt nhiÒu (40 ë Tupidanthus) Bao phÊn më dọc, màng hạt phân thành rÃnh lỗ, có hay rÃnh lỗ Bộ nhụy gồm - noÃn dính lại với làm thành bầu d-ới, nửa d-ới hay có số ô t-ơng ứng với số l-ợng noÃn hợp thành ô có hai noÃn, nh-ng có noÃn phát triển thành hạt noÃn không phát triển Số l-ợng ô bầu hay nhiều Vòi nhụy rời hay hoàn toàn dính lại với phần d-ới, phần rời nh-ng vòi nhụy ngắn Quả mọng hay hạch, song hun [8] 1.2 Mét sè chi thc hä nh©n s©m (Araliaceae) 1.2.1 Chi Schefflera Chi nµy cã 60 loµi, gåm mộc hay gỗ nhỏ có kép chân vịt có chét, gai, có cuống dài, cuống chét nhau, tròn, trơn tru, mép th-ờng nguyên Nhiều loài làm thuốc bổ mạch gân cốt, trừ phong, thấp khíp (S Octophylla Harms, S Sinh viên: Nguyễn Thị Lan - 47B Hóa Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Khóa luận tốt nghiệp Chuyên ngành hóa hữu Tonkinensis, S Vig Spesves, S Vig Snitidifolia Hams, S Vietnamensic Grush, Et Skvoorts) [2,3,8] 1.2.2 Chi Dendropanax Chi nµy cã 11 loài, th-ờng nhỡ, thân trơn tru, phiến tròn thon, có gân phụ xéo (4 - 20 cặp), nhỏ 15 Tán không lông, nhiều hoa nhỏ thụ tán chót, noÃn sào th-ợng buồng, mép không thuỳ Đ-ợc sử dụng làm thuốc bổ, trị suy nh-ợc thần khinh [2,3,8] 1.2.3 Chi Polyscias Chi có gần 100 loài, nh- chi Aralia nh-ng nhỏ, không gai, có chét sẻ sâu, cuống hoa có đốt Rễ dùng làm thuốc tăng sức dẻo dai thể, tăng biên độ tần số hô hấp [2,3,8,10] Việt Nam tìm thấy đ-ợc loài: Polyscias guifoylei (đinh lăng trổ hay đinh lăng vằn); poliscias ilicifolia (đinh lăng to hay ráng); polyscias balfouriana (đinh lăng tròn) Các loại không dùng làm thuốc Còn polyscias fruticosa (đinh lăng nhỏ) đ-ợc dùng làm thuốc 1.2.4 Chi Ancanthopanax Chi gồm loài, th-ờng nhỡ, thân trơn tru có gai nhọn, kép chân vịt - chét cuống chét ngắn Đ-ợc sử dụng làm thuốc bổ máu, chữa phong thấp [2,3,8,23] 1.2.5 Chi Panax Chi Panax gồm loài, điều thảo sống nhiều năm mang vòng, kép chân vịt Loài quan trọng tam thất (Panax, Pseudoginseng Wall) Một thuốc quý có tác dụng cầm máu, bổ tì, trị suy nh-ợc thần kinh [2,3,8] 1.2.6 Chi Arila Chi gồm 15 loài, th-ờng nhỡ mọc tựa, có kép lông chim th-ờng có gai nhọn Cây có cuống hay đơn chân chim (A armata, Wall Seem) Mọc n-ơng rẫy cũ đất tốt ven rừng, có thân rễ dïng lµm thuèc [2,3,8] Sinh viên: Nguyễn Thị Lan - 47B Hóa Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Khóa luận tốt nghiệp Chun ngành hóa hữu Hình 5: Sắc ký đồ tinh dầu đinh lăng phường Trung Đô, thành phố Vinh, Nghệ An Sinh viên: Nguyễn Thị Lan - 47B Hóa Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 30 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Khóa luận tốt nghiệp Chuyên ngành hóa hu c Theo kết phân tích cho thấy thành phần hóa học tinh dầu đinh lăng (Polyscias fruticosa (L.) Harms) hỗn hợp nhiều chất có 15 hợp chất đà đ-ợc xác định Kết đ-ợc trình bày bảng 2: Bảng 2: Thành phần hóa học tinh dầu đinh lăng (Polyscias fruticosa (L.) Harms) ph-ờng Trung Đô, thành phố Vinh, Nghệ An STT Hợp chất Hàm l-ợng % metylthymol ete 0,91  - tecpinen 0,73 ylangen 0,51  - copaen 0,24  - bourbonen 1,41  - elemen 2,37 gecmacren - D 24,84  - elemen 13,62 guaia - 3,7 - dien 1,04 10 iso leden 1,30 11  - caryophylen 2,77 12  - amophen 0,99 13  - farnesen 32,49 14 ∆ - cadinen 1,07 15 gecmacren - B 6,17 16 Ch-a xác định 3,58 17 Các chất khác 5,96 Sinh viên: Nguyễn Thị Lan - 47B Hóa Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 31 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Khóa luận tốt nghiệp Chuyên ngành hóa hữu Tõ b¶ng ta thÊy tinh dầu đinh lăng (Polyscias fruticosa (L.) Harms) ph-ờng Trung Đô, thành phố Vinh, Nghệ An có 15 hợp chất đà xác định chiếm 90,46% Thành phần tinh dầu chủ yếu hợp chất thuộc loại secquitecpen bao gåm  - farnesen (32,49%), gecmacren - D (24,84%), - elemen (13,62%) Ngoài có số hợp chất có thành hàm l-ợng t-ơng đối lớn nh-: gecmacren - B (6,17%) hợp chất ch-a xác định với hàm l-ợng 3,58% 4.2 Tinh dầu đinh lăng Yên Định, Thanh Hóa 4.2.1 Hàm l-ợng tinh dầu Mẫu nghiên cứu phần thân đinh lăng (Polyscias fruticosa (L.) Harms) đ-ợc thu hái vào lúc ngày 10 tháng 12 năm 2009 thị trấn nông tr-ờng Thống nhất, Yên Định, Thanh Hóa, với khối l-ợng 5kg Mẫu đ-ợc ch-ng cất ph-ơng pháp cất lôi n-ớc, tinh dầu thu đ-ợc chất lỏng màu vàng, suốt, nhẹ n-ớc, không tan n-ớc, có mùi thơm đặc tr-ng, hàm l-ợng tinh dầu là: 0,028% so với khối l-ợng nguyên liệu t-ơi 4.1.2 Xác định thành phần hóa học Thành phần hóa học tinh dầu đinh lăng Thanh Hóa đ-ợc xác định ph-ơng pháp sắc ký khí (GC) sắc ký khí - khối phổ ký liên hợp (GC/MS) Sắc ký đồ GC đ-ợc trình bày hình Sinh viờn: Nguyn Th Lan - 47B Hóa Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 32 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Khóa luận tốt nghiệp Chun ngành hóa hữu H×nh 6: Sắc ký đồ tinh dầu đinh lăng thị trấn nông tr-ờng Thống nhất, Yên Định, Thanh Hóa Sinh viên: Nguyễn Thị Lan - 47B Hóa Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 33 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Khóa luận tốt nghiệp Chuyên ngnh húa hu c Theo kết phân tích cho thấy thành phần hóa học tinh dầu đinh lăng (Polyscias fruticosa (L.) Harms) hỗn hợp nhiều chất có 15 hợp chất đà đ-ợc xác định Kết đ-ợc trình bày bảng 3: Bảng 3: Thành phần hóa học tinh dầu đinh lăng (Polyscias fruticosa (L.) Harms) thị trấn nông tr-ờng Thống Nhất, Yên Định, Thanh Hóa STT Hợp chất Hàm l-ợng % metylthymol ete 0,27  - tecpinen 1,43 ylangen 0,27  - bourbonen 0,7  - elemen 1,77 gecmacren - D 24,86  - elemen 14,29 guaia - 3,7 - dien 0,69  - caryophylen 0,74 10  - amophen 0,37 11  - farnesen 38,45 12 ∆ - cadinen 0,97 13 gecmacren - B 6,17 14  - cadien 0,13 15 Ch-a xác định 4,16 16 alloaromadendren 0,04 17 Các chÊt kh¸c 4,42 Sinh viên: Nguyễn Thị Lan - 47B Hóa Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 34 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Khóa luận tốt nghiệp Chun ngành hóa hữu Tõ b¶ng ta thấy tinh dầu đinh lăng (Polyscias fruticosa (L.) Harms) thị trấn nông tr-ờng Thống nhất, Yên Định, Thanh Hóa có 15 hợp chất đà xác định chiếm 91,42% Thành phần tinh dầu chủ yếu hợp chất thuộc loại secquitecpen bao gồm - farnesen (38,45%), gecmacren - D (24,86%),  - elemen (14,29%) Ngoài có số hợp chất có thành hàm l-ợng t-ơng đối lớn nh-: gecmacren - B (6,17%) hợp chất ch-a xác định với hàm l-ợng 4,16% 4.3 Nhận xét chung Từ kết nhận đ-ợc bảng bảng ta có so sánh thành phần hợp chất tinh dầu đinh lăng (Polyscias fruticosa (L.) Harms) Nghệ An Thanh Hóa qua bảng sau: Bảng 4: So sánh tỷ lệ % số hợp chất tinh dầu đinh lăng Nghệ An Thanh Hãa Hỵp chÊt NghƯ An Thanh Hãa  - farnesen 32,49 38,45 gecmacren - D 24,84 24,86  - elemen 13,62 14,29 gecmacren - B 6,17 6,17 Tõ b¶ng ta thấy thành phần tinh dầu đinh lăng ph-ờng Trung Đô, thành phố Vinh, Nghệ An thị trấn nông tr-ờng Thống nhất, Yên Định, Thanh Hóa giống Nh-ng thành phần tinh dầu đinh lăng thị trấn nông tr-ờng Thống nhất, Yên Định, Thanh Hóa có hàm l-ợng % lớn tinh dầu đinh lăng ph-ờng Trung Đô, thành phố Vinh, Nghệ An Điều phù hợp với hàm l-ợng Sinh viờn: Nguyn Thị Lan - 47B Hóa Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 35 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Khóa luận tốt nghiệp Chuyên ngành hóa hữu c tinh dầu thu đ-ợc ch-ng cất định l-ợng theo d-ợc điển Việt Nam I cho kết 0,026% ë NghƯ An vµ 0,028 % ë Thanh Hãa so với mẫu t-ơi Sự khác hàm l-ợng tinh dầu hàm l-ợng % thành phần tinh dầu đinh lăng không lớn song yếu tố nhđất đai, khí hậu, vị trí địa lý, tuổi câykhác Khối phổ đồ công thức số hợp chất có thành phần lớn tinh dầu đinh lăng Sinh viờn: Nguyn Thị Lan - 47B Hóa Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 36 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Khóa luận tốt nghiệp Chuyên ngành hóa hữu c Hình 7: Khối phổ đồ công thức  - farnesen Sinh viên: Nguyễn Thị Lan - 47B Hóa Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 37 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Khóa luận tốt nghiệp Chun ngành hóa hữu H×nh 8: Khèi phổ đồ công thức gecmacren - D Sinh viên: Nguyễn Thị Lan - 47B Hóa Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 38 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Khóa luận tốt nghiệp Chuyên ngành húa hu c Hình 9: Khối phổ đồ công thøc cña  - elemen Sinh viên: Nguyễn Thị Lan - 47B Hóa Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 39 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Khóa luận tốt nghiệp Chun ngành hóa hữu H×nh 10: Khèi phỉ ®å cđa Gecmacren - B Sinh viên: Nguyễn Thị Lan - 47B Hóa Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 40 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Khóa luận tốt nghiệp Chuyên ngành hóa hu c Hình 11: Khối phổ đồ chất ch-a xác định Sinh viờn: Nguyn Th Lan - 47B Húa Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 41 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Khóa luận tốt nghiệp Chun ngành hóa hữu KÕT LN §· tách xác định đ-ợc hàm l-ợng tinh dầu thân đinh lăng (Polyscias fruticosa (L.) Harms) ph-ờng Trung Đô, thành phố Vinh, Nghệ An 0,026%, thị trấn nông tr-ờng Thống nhất, Yên Định, Thanh Hóa 0,028% so với khối l-ợng mẫu t-ơi Tinh dầu thu đ-ợc chất lỏng màu vàng, suốt, nhẹ n-ớc, không tan n-ớc, có mùi thm đặc tr-ng Đà xác định thành phần hóa học tinh dầu đinh lăng (Polyscias fruticosa (L.) Harms) ph-ờng Trung Đô, thành phố Vinh, Nghệ An ph-ơng pháp GC GC/MS cho thấy tinh dầu hỗn hợp gồm có 15 hợp chất đà đ-ợc xác định Thành phần tinh dầu chủ yếu hợp chất thuộc loại secquitecpen bao gồm  - farnesen (32,49%), gecmacren - D (24,84%),  - elemen (13,62%), gecmacren - B (6,17%) Đà xác định thành phần hóa học tinh dầu đinh lăng (Polyscias fruticosa (L.) Harms) thị trấn nông tr-ờng Thống nhất, Yên Định, Thanh Hóa ph-ơng pháp GC GC/MS cho thấy tinh dầu hỗn hợp gồm có 15 hợp chất đà xác định Thành phần tinh dầu chủ yếu hợp chất thuộc loại secquitecpen bao gåm  - farnesen (38,45%), gecmacren - D (24,86%),  - elemen (14,29%), Gecmacren - B (6,17%) Sinh viên: Nguyễn Thị Lan - 47B Hóa Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 42 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Khóa luận tốt nghiệp Chuyên ngành húa hu c TàI LIệU THAM KHảO Tài liệu tiếng Việt Đỗ Tất Lợi (1977) Những thuốc vị thuốc Việt Nam Nhà xuất Y học Hà Nội Võ Văn Chi (1999) Từ điển thuốc Việt Nam Nhà xuất Y học Phạm Hoàng Độ Cây cỏ Việt Nam, tập Nhà xuất Trẻ Là Đình Mỡi cộng (2003) Tài nguyên tinh dầu Việt Nam Nhà xuất Khoa học Kỹ thuật D-ợc điển Việt Nam (1978), tập Nhà xuất Y học Hà Nội Võ Văn Chi, D-ơng Đức Tiến (1987) Phân loại thực vật, thực vật học bậc cao Nhà xuất ĐH THCN Đỗ Huy Bích, Bùi Xuân Ch-ơng (1980) Sổ tay thuốc Việt Nam Nhà xuất Y học Hà Nội Trần Hợp (1996) Phân loại thực vật học Nhà xuất ĐH THCN Lê Khả Kế (1973) Cây cỏ th-ờng thấy Việt Nam, tập Nhà xuất Khoa học Kỹ thuật Hà Nội 10 Đỗ Huy Bích cộng (2002) Cây thuốc động vật làm thuốc Việt Nam, tập Nhà xuất Khoa học Kỹ thuật 11 V-ơng Thừa Ân (1995) Thuốc quý quanh ta Nhà xuất Đồng Tháp 12 Nguyễn Tiến Bân (2000) Thực vật chí Việt Nam Nhà xuất Khoa học Kỹ thuật 13 Đỗ Huy Bích (1993) Tài nguyên thuốc Việt Nam Nhà xuất Khoa học Kỹ thuật Hà Nội 14 Võ Văn Chi (1998) Cây rau làm thuốc Nhà xuất Đồng Tháp 15 Võ Văn Chi, Trần Hợp (1999-2000) Cây có ích Việt Nam, tập 1,2 Nhà xuất Giáo dục Hà Nội Sinh viên: Nguyễn Thị Lan - 47B Hóa Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 43 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn