Thông tin tài liệu
BỘGIÁODỤCVÀĐÀOTẠOTR ƯỜNGĐẠIHỌCCẦNTHƠ LÊUYỂNTHANH PHÂNLẬPVIKHUẨNXanthomonasspp GÂYBỆNHĐỐMLÁTRÊNCÂYHOAHỒNG (Rosaspp.)VÀCÂYỚT(Capsicumspp.)TẠITỈNHĐ ỒNGTHÁPVÀTUYỂNCHỌNVIKHUẨNĐỐIK HÁNGPHỊNGTRỊBỆNH LUẬNÁNTIẾNSĨ CHUNNGÀNH:CƠNGNGHỆSINHHỌC MÃSỐ:62420201 NĂM2022 BỘGIÁODỤCVÀĐÀOTẠOTR ƯỜNGĐẠIHỌCCẦNTHƠ LÊUYỂNTHANHM ÃSỐNCS: P0915008 PHÂNLẬPVIKHUẨNXanthomonasspp GÂYBỆNHĐỐMLÁTRÊNCÂYHOAHỒNG (Rosaspp.)VÀCÂYỚT(Capsicumspp.)TẠITỈNHĐ ỒNGTHÁPVÀTUYỂNCHỌNVIKHUẨNĐỐIK HÁNGPHỊNGTRỊBỆNH LUẬNÁNTIẾNSĨ CHUNNGÀNH:CƠNGNGHỆSINHHỌC MÃSỐ:62420201 NGƯỜI HƯỚNG DẪNTS NGUYỄN ĐỨC ĐỘTS.TRẦNĐÌNHGIỎ I CHẤPTHUẬNCỦAHỘIĐỒNG Luậná n với tựa đề “Phân lậpvi k h u ẩ n Xanthomonasspp gây bệnh đốmlá hoa hồng (Rosaspp.) ớt (Capsicumspp.) tỉnh đồng tháp tuyểnchọn vi khuẩn đối kháng phòng trị bệnh”, nghiên cứu sinh Lê Uyển Thanh thực hiệntheo hướng dẫn TS Nguyễn Đức Độ TS Trần Đình Giỏi Luận án báo cáovà Hội đồng đánh giá luận án tiến sĩ thông qua ngày:// Luận án đượcchỉnhsửatheogópývàđượcHộiđồngđánhgiáluậnánxemlại ThưKý TS.TrươngThịBíchVân Ngườihướngdẫn1 Ngườihướngdẫn2 TS.NguyễnĐứcĐộ TS.TrầnĐìnhGiỏi ChủtịchHộiđồng PGS.TS.NguyễnVănThành LỜI CẢMTẠ Xingửilờicảmơnchânthànhđến Ban Giám Hiệu trường Đại Học CầnT h , V i ệ n N g h i ê n c ứ u v P h t t r i ể n C ô n g n g h ệ sinh học, Khoa Sau Đại học, khoa Nơng nghiệp, phịng Đào tạo, phòng Quản lý Khoahọc phòng ban chức khác trường Đại học Cần Thơ tạo điều kiệnthuậnlợichotơiđượchọctập,nghiêncứutạitrường Xinbàytỏlịngbiếtơnsâusắcđến TS Nguyễn Đức Độ TS Trần Đình Giỏi tận tình hướng dẫn, ln đồng hành, hỗtrợvàđộngviêntơihồn thànhluậnánnày Cảm ơn Q Thầy, Cơ thuộc Viện Nghiên cứu Phát Triển Công Nghệ Sinh Họctrường Đại học Cần Thơ, Bộ môn Bảo vệ Thực vật - Khoa Nông nghiệp trường Đại họcCần Thơ truyền dạy kiến thức, động viên, khuyến khích cho tơi thời gian họctậpnghiêncứutạitrường Chân thành cảm ơn anh, chị học viên cao học, nghiên cứu sinh ngành Công nghệsinh học đồng hành, trao đổi, động viên cho suốt thời gian học tập, nghiêncứuvàhoàn thành luậnánnày Đặc biệt cảm ơn bạn Tô Lan Phương, em Trần Thanh Tùng, Thị Dim, Nguyễn HồngQ,NgơThịHồngHươngđãgiúpđỡtơitrongthờigiantơi thựchiệnluậnánnày Tơi xin gửi lời cảm ơn đặc biệt tới chủ đất canh tác huyện Châu Thành ThànhphốSaĐéc,tỉnhĐồngThápđãhỗtrợkhuthínghiệmngồiđồngruộng Tơi xin bày tỏ lịng biết ơnchânt h n h t r n g Đ i h ọ c Đ n g T h p , c c đ n g n g h i ệ p , cho phép, hỗ trợ tạo điều kiện thuận lợi cho tơi hồn thành hoạt động giảngdạy,họctậpvànghiêncứucủamình Cuốicùng,tơixincảmơngia đìnhquantâm,độngviênvàhỗtrợtơihồnthànhnhiệm vụtrongcơngtác,họctậpvàthựchiệnluậnán LêUyểnThanh TĨMTẮT Luận án “Phân lập vi khuẩnXanthomonasspp gây bệnh đốm hoahồng (Rosaspp.) ớt (Capsicumspp.) tỉnh Đồng Tháp tuyển chọn vi khuẩnđối kháng phòng trị bệnh” thực từ tháng năm 2016 đến tháng năm 2021dựa thực trạng việc lạm dụng thuốc trừ bệnh hoạt chất hóa học gây ranhững tác động bất lợi, kiểm soát sinh học trở thành biện pháp quan tâmtrongquảnlý bệnhhạicâytrồng Với mục đích tìmr a t c n h â n s i n h h ọ c c ó t i ề m n ă n g t r o n g p h ò n g t r ị b ệ n h đ ố m l vi khuẩn hoa hồng ớt, nghiên cứu thực nhằm hai mụctiêu: (i) Phân lập xác định dòng vi khuẩnXanthomonasspp gây bệnh đốmlá hoa hồng giống hồng lửa (Rosaspp.) ớt (Capsicumspp.); (ii) Tuyểnchọn dịng vi khuẩn có khả kiểm sốt bệnh đốm vi khuẩn doXanthomonasspp gây Luận án phân lập dòng vi khuẩn gây bệnh, đánhgiá khả gây hại, xác định đặc điểm qua phân tích sinh hóa, kỹ thuật phântíchMALDI-TOF-MSvàphântíchsinh họcphântử.Kếtquả đãghinhậndịngXanthomonas euvesicatorialà tác nhângây bệnhđốmlá trênc â y h o a h n g q u a p h â n tích MALDI-TOF-MS MLSA; Trong đó, xác địnhXanthomonasspp gây bệnhđốml trênc â y ớtd ự a tr ên đặ cđ iể m s i n h h ó a T r ê n m ộ t sốd ò n g vik h u ẩ n g â y bệnhđượcchọn,hiệuquảđốikháng,kiểmsốtbệnhcủacácdịngvikhuẩnđượcphânlậptừcơ chất vùng rễ hoa hồng, đất vùng rễ trồng ớt, đất vùng sinh thái địađược sàng lọc đánh giá điều kiệnin vitro, nhà lưới đồng Qua sàng lọcin vitro, kết ghi nhận ba dòng BR16, BR37, BR88 (từ chất vùng rễ hoa hồng)vàbadòngT265,X61,G24(từđấtvùngsinh tháibảnđịa)thểhiệnsựđốikhángtriểnvọng với ba dòngXanthomonas euvesicatoria(XR13, XR9, XR18) gây bệnh đốml hoa hồng Đồng thời, ba dòng BP11, BP49, BP103 (từ đất vùng rễ ớt) vàG24,T11,T188(từ đất vùngs inh t h i bảnđịa)cókhả năngđốikhángtriểnvọng đố ivớibadịngXanthomonasspp (XP17, XP7, XP1) gây bệnh ớt Các dòng vikhuẩn đối kháng triển vọng xác định qua kỹ thuật phân tích MALDI-TOF-MS, cácdịng BP49,X61đượcxácđịnhđếnlồiB subtilis, ghi nhận dịng BR16, BR37,BR88, BP11, BP49, BP103, X32, X61, G24 thuộc chiBacillus, dòng T11 thuộc chiEnterobacter,dòng X16 thuộc chiSerratia.Mộtsố dòng đượctiếptụcxácđ ị n h q u a phân tích sinh học phân tử đăng ký “accession number” loàiB velezensisMW677565 (BR16),B subtilisMW828613 (BR37),B amyloliquefaciensMW828656(BR88),B velezensisOM017175 (BP103),Paenibacillus elgiiMZ841643 (T265),B.subtilisMZ841644 (G24) Ở điều kiện nhà lưới đồng, với hiệu giảm bệnh,giảm số bệnh số AUDPC cao nhất,B amyloliquefaciensMW828656 (BR88)vàB velezensisOM017175 (BP103) ghi nhận hiệu kiểm soát bệnh cao nhấttrênđốitượngcâychủtươngứng,vàđặcbiệtlàB.subtilisMZ841644(G24)phânlậ ptừđấtvùngsinhtháibảnđịađạthiệuquảkiểms o t bệnhcaonhấttrêncảhailoạicây chủ Nhìn chung, nghiên cứu ghi nhậnXanthomonas euvesicatoriagây bệnh đốm látrên hoa hồng vàXanthomonasspp gây bệnh đốm ớt Bên cạnh đó,nghiên cứu cịn ghi nhậnB velezensis(BR16),B subtilis(BR37, BP49, X61),Bacillusspp (BP11, X32),Enterobacterspp (T11), Serratiaspp (X16) có khả đối khángđáng kể, tuyển chọn đượcB amyloliquefaciensBR88,B velezensisBP103,B.subtilisG24 có khả kiểm sốt bệnh hiệu Các dịng vi khuẩn có thểđược sửdụngnhưtácnhânsinhhọc phịngtrịbệnhđốmlátrêncâyhoa hồngvàcâyớt Từ khóa: Đốm lá,Xanthomonas, vi khuẩn đối kháng, hoa hồng, ớt, hiệuquảkiểmsoát ABSTRACT This thesis, with the title of “Isolation ofXanthomonasspp causing leaf spot onrose (Rosaspp.) and pepper (Capsicumspp.) in Dong Thap province and selection ofantagonistic bacteria for prevention and control of these diseases” was carried out fromSeptember 2016 to september 2021 based on the fact with the adverse effects caused bytheabuseofchemicalfungicides, biologicalcontrol isbecomingthe preferred methodtomanageplantdiseases With the aim of finding potential biological agents in the prevention and treatmentofbacterialleafspotonroseandpepper, thisstudywasexecuted with tw oo bjectives: (i) The first was isolation and identification of bacterial strainXanthomonasspp causingleafspotdiseaseonRosaspp andCapsicumspp.; (ii) The second was selection ofbacterial isolates capable of controlling leaf spot caused byXanthomonasspp In thesis,pathogenic strainswereisolated,evaluatedfortheirvirulence,andidentifiedthroughbiochemistry, MALDI-TOF-MS analysis and molecular analysis technique The resultshowthatXanthomonaseuvesicatoriacausingtheleafspotonrose.Meanwhile,Xantho monasspp causing leaf spot on pepper based on biochemical characteristics.Against some selected pathogenic strains, the antagonistic and disease control effects ofisolates from the rhizosphere substrates of rose, rhizosphere soil of pepper, and soil ofnative ecological area were screened and evaluated underin vitro, net-house and fieldconditions Throughin vitroscreening, three isolates with BR16, BR37, BR88 (fromrhizobacteria soil of rose) and three isolates with T265, X61, G24 (from the soil of thenativeecologicalarea)showedpotentialantagonismtoXanthomonas euvesicatoria(XR13, XR9, XR18) which causing leaf spot on rose, and three isolates with BP11,BP49, BP103 (from rhizobacteria soil of pepper) and three isolates with G24, T11, T188(fromthenativeecologicalarea)havepotentialantagonisticabilitya g a i n s t Xanthomo nasspp (XP17, XP7, XP1) which causing leaf spot on pepper PotentialantagonisticisolatesarealsoidentifiedthroughMALDI-TOFMStechnique,t w o isolates of BP49, X61 were identified belong toB subtilis, and the other isolates (BR16,BR37, BR88, BP11, BP49, BP103, X32, X61, G24) are belong toBacillusgenus, theT11 isolate belongs toEnterobactergenus, and X16 isolate belongs toSerratiagenus.Identifying by molecular technique and depositing “accession number” asB velezensisMW677565 (BR16),B subtilisMW828613 (BR37),B amyloliquefaciensMW828656(BR88),B velezensisOM017175 (BP103),Paenibacillus elgiiMZ841643 (T265),B.subtilisMZ841644( G ) w e re performed Int h e nethouseandf i e l d c o n d i t i o n s , w i t h thehighestefficiencyindiseasereduction,severity indexreductionandAUDPCindex, B.amyloliquefaciensMW828656(BR88)andB.velezensisOM017175(BP103),showed the highest disease control effects on the host plant, respectively Especially,B.subtilisMZ841644 (G24) achieved the disease control efficiency on both host plants Ingeneral,t h e t h e s i s r e c o r d e d X a n t h o m o n a s a x o n o p o d i s c a u s i n g l e a f s potonr o s e and Xanthomonasspp causing leaf spot on pepper Besides,B velezensis(BR16),B subtilis(BR37, BP49, X61),Bacillus spp.(BP11, X32),Enterobacter spp.(T11),Serratia spp (X16) get potential antagonistic ability, andB amyloliquefaciensBR88,B velezensisBP103,B subtilisG24 with the most effective disease control ability were selected.These isolates can be used as biological agents for the prevention and control of the leafspotdiseaseonroseandpepper Keywords: Leaf controlefficiency spot,Xanthomonas, antagonistic bacteria, rose, pepper,
Ngày đăng: 21/08/2023, 21:21
Xem thêm:
