Enzyme phổ biến trong Sinh học phân tử

NONG LAM UNIVERSITY IN HO CHI MINH CITY FACULTY OF BIOLOGICAL SCIENCES ENZYME PHỔ BIẾN TRONG SINH HỌC PHÂN TỬ NHÓM Ho Chi Minh, 19-03-2023 THÀNH VIÊN NHÓM 2: Đặng Thị Bảo Quyên - 21126482 Dương Võ Phương Ngân - 21126413 Lý Gia Hân - 21126325 Trang Thị Tường Vi - 21126236 Phan Minh Ngọc - 21126426 Nguyễn Thị Mỹ Ngọc - 21126425 NỘI DUNG 1.DNA POLYMERASE 2.RNA POLYMERASE 3.LIGASE 4.PHOSPHATASE, KINASE 5.NUCLEASE 01 DNA POLYMERASE DNA POLYMERASE Các enzyme DNA polymerase tạo phân tử DNA cách lắp ráp nucleotide, đơn phân DNA Các enzyme cần thiết để tái DNA thường làm việc theo nhóm lúc để tạo hai phân tử DNA “con” giống hệt từ phân tử DNA “mẹ” ban đầu ==> Một phân tử DNA ban đầu thơng qua với tế bào Bằng cách này, thông tin ditruyền truyềntừ hệ sang hệ khác DNA POLYMERASE Xúc tác phản ứng hình thành polymer cách tập hợp dNTP Không thể tổng hợp chuỗi polynucleotide từ đầu (de novo) Xúc tác gắn nucleotide vào đầu 3’-OH primer có sẵn Hầu hết polymerase dùng SHPT có nguồn gốc từ vi khuẩn từ virus kí sinh chúng DNA POLYMERASE prokaryote Ở vi khuẩn có loại DNA polymerase: Pol I, Pol II Pol III Cả loại có hoạt tính xúc tác kéo dài 5’-3’ với tốc độ khác hoạt tính 3’-5’ exonuclease Pol III phức hợp enzyme điều khiển q trình tái DNA polymerase sử dụng hoạt tính 3’-5’ exonuclease để cắt nucleotide tổng hợp trình chép) DNA Pol I cịn có hoạt tính 5’-3’ exonuclease E coli gồm phần phân đoạn lớn đoạn Klenow có hoạt tính 5’-3’ polymerase 3’-5’ exonuclease, phân đoạn nhỏ có hoạt tính 5’-3’ exonuclease DNA POLYMERASE prokaryote T4 DNA polymerase thực khuẩn thể cần khuôn primer để hoạt động -3’-5’ exonuclease khơng có dNTPs -5’-3’ polymerase có dNTPs Có thể sử dụng T4 DNA polymerase kỹ thuật nick translation hay gắn nhãn đầu 3’ DNA sợi đôi DNA polymerase thực khuẩn thể T7 cơng cụ lí tưởng cho việc giải trình tự DNA Dạng chỉnh sửa enzyme có tốc độ polymer DNA POLYMERASE prokaryote Terminal deoxynucleotidyl transferase (TdT) xúc tác việc bổ sung homopolymer vào đầu 3’-OH DNA không cần khuôn mẫu TdT sử dụng dán nhãn DNA với nucleotide biến đổi (ddNTP, DIG-dUTP), kéo dài primer giải trình tự DNA TdT cần DNA primer sợi đơn có Mg2+, chấp nhận DNA sợi đơi primer có Co2+