Nghiên cứu hoàn thiện quy trình thu nhận sinh khối nấm linh chi thu thập từ rừng quốc gia pù huống, pù mát nghệ an

NHIỆM VỤ ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP 664 Họ Và Tên Sinh Viên : Phạm Thị Hoa Mã Số Sinh Viên : 0952040396 Khóa : 50 Ngành : Hóa Thực Phẩm 1.Tên Đề Tài “Nghiên cứu hồn thiện quy trình thu nhận sinh khối nấm linh chi thu thập từ rừng quốc gia Pù Huống, Pù Mát Nghệ An” Nội dung nghiên cứu - Nghiên cứu lựa chọn môi trường nhân giống cấp một, cấp hai phát triển hệ sợi nấm Linh chi - Xác định điều kiện, mơi trường ni cấy thể thích hợp 3.Họ tên cán hƣơngs dẫn : TS Lê Văn Điệp Ngày giao nhiệm vụ đồ án : Ngày tháng năm 2013 Ngày hoàn thành đồ án : Ngày tháng năm 2013 Ngày tháng năm 2013 Chủ nhiệm mơn (kí,ghi rõ họ tên) cán hướng dẫn (kí,ghi rõ họ tên) Sinh viên hồn thành đồ án nộp đồ án tốt nghiệp BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM TRƢỜNG ĐẠI HỌC VINH ĐỘC LẬP - TỰ DO - HẠNH PHÚC BẢN NHẬN XÉT ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP Họ tên sinh viên: Phạm Thị Hoa Khóa : Mã số sinh viên: 0952040396 50 Ngành : Công nghệ Thực phẩm Cán hướng dẫn : TS Lê Văn Điệp Cán duyệt: Nội dung nghiên cứu: Đề tài tiến hành với nội dung sau: - Nghiên cứu lựa chọn môi trường nhân giống cấp một, cấp hai phát triển hệ sợi nấm Linh chi - Xác định điều kiện, mơi trường ni cấy thể thích hợp Nhận xét cán hƣớng dẫn: Ngày tháng 12 năm 2013 Cán hướng dẫn (Ký, ghi rỗ họ tên) LỜI CẢM ƠN Em xin bày tỏ lòng cảm ơn sâu sắc đến thầy giáo TS Lê Văn Điệp, giảng viên khoa Hóa Học thầy giáo PGS.TS Trần Đình Thắng, phó trưởng khoa Hóa, Trường Đại học Vinh tận tình hướng dẫn giúp đỡ em suốt trình nghiên cứu hoàn thành đồ án tốt nghiệp Em xin chân thành cảm ơn thầy giáo khoa hóa học, thầy cán hướng dẫn thí nghiệm Phịng hóa thực phẩm Trường Đại học Vinh tạo điều kiện tận tình giúp đỡ em suốt trình nghiên cứu hồn thành đồ án tốt nghiệp Tơi xin gửi lời cảm ơn tới bạn lớp 50K - Hố Thực Phẩm chị Ngơ Thị Mai sinh viên lớp cao học khoa nông lâm ngư tạo điều kiện giúp đỡ tơi hồn thành đồ án Cuối cùng, tơi xin bày tỏ lịng biết ơn vơ hạn tới gia đình, người thân bạn bè động viên giúp đỡ suốt trình học tập làm đồ án tốt nghiệp Em xin chân thành cảm ơn! Nghệ An , ngày tháng 12 năm 2013 SVTH: Phạm Thị Hoa MỞ ĐẦU Lí chọn đề tài Trong năm gần ngành nuôi nấm phát triển mạnh mẽ nước, tổng loại nấm ăn nấm dược liệu năm 2006 ước tính đạt khoảng 1,5 triệu Nghề trồng nấm đời góp phần giải cơng ăn việc làm tăng thu nhập cho nhiều người nông dân nhiều hộ gia đình Với nguồn nguyên liệu chủ yếu phế thải từ công nghiệp nông nghiệp, ngành ni trồng nấm góp phần giải nạn nhiễm mơi trường xảy tồn cầu Đặc biệt nữa, nấm không nguồn dinh dưỡng an tồn cho người mà cịn xem nguồn dược liệu quí mà người sử dụng để chữa bệnh ngày phổ biến Ngày xu hướng sử dụng thảo dược thiên nhiên để trị bệnh trở nên phổ biến, việc tìm kiếm khả chữa trị từ loại thảo dược tiến hành nhiều nơi giới: Nhật Bản, Trung Quốc, Đài Loan, Malaysia, Thái Lan, ….Trong đó, nấm Linh chi đối tượng nghiên cứu nhiều quốc gia Đặc biệt nước vùng Châu Á, có nhiều tiềm nguồn dược liệu Trung Quốc quốc gia có lịch sử phát triển lâu đời, đồng thời nôi thuốc cổ truyền tiếng giới Ở Trung Quốc, Ganoderma lucidum nghiên cứu nhiều sử dụng thảo dược quý để trị bệnh có tác dụng bổ dưỡng, điều hoà huyết áp, chống lão hóa, kéo dài tuổi thọ,…Tác dụng Linh chi khẳng định xếp vào hàng “thượng dược” trị bách bệnh Những nghiên cứu gần cho thấy Linh chi cịn có khả giải độc chì, điều hòa huyết áp, làm giảm hàm lượng cholesterol máu….[11, 14] Tại thị trường Việt Nam, nhu cầu sử dụng nấm Linh chi làm thuốc chữa bệnh nước xuất ngày tăng Nhiều sở tiến hành nghiên cứu nuôi trồng, chế biến thăm dị hoạt chất sinh học có nấm Linh chi Các thành phần hóa học có nấm Linh chi phong phú bao gồm nhóm: acid béo, steroid, alcaloid, protein, polysaccharide…[22] Trong thành phần có tác dụng dược lý quý báu, đặc trưng cho nấm Linh chi phần lớn thuộc nhóm triterpenoid [10] Sản lượng C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Linh chi Ganoderma vào năm 2003 Trung Quốc 50.000 Riêng sản lượng Linh chi Việt Nam Trung tâm nấm Dược sản suất khoảng 22 tấn/năm, chiếm tới 99% tổng sản lượng nước [12] Nước ta có nhiều điều kiện thuận lợi để nuôi trồng nấm phát triển Với khí hậu nhiệt đới gió mùa điều kiện thích hợp cho ngành trồng nấm quanh năm, nguồn nguyên liệu dồi dào, lực lượng lao động đơng Trong trồng nấm khơng cần đất mà cần diện tích nhỏ, vốn đầu tư thấp, vịng quay ngắn, hiệu cao gấp chục lần so với lúa Nghệ An tỉnh có nhiều vườn quốc gia vườn Quốc gia Pù Mát, khu bảo tồn thiên nhiên Pù Huống khu bảo tồn thiên nhiên Pù Hoạt Đây vùng đánh giá có tính đa dạng sinh học cao Tại có chứa đựng nguồn lợi lớn đa dạng sinh học đặc biệt nguồn lợi nấm, từ lâu nguồn nấm linh chi sử dụng dược liệu chủ yếu dựa vào nguồn nấm mọc dại tự nhiên Tuy nhiên nguồn nấm tự nhiên bị khai thác cách chưa hợp lí trở nên ngày cạn kiệt khan Vì cần phải ni trồng nấm linh chi điều kiện nhân tạo, sử dụng nguồn nguyên liệu có tự nhiên phế thải sản xuất nông nghiệp làm chất để nuôi trồng nấm để đáp ứng nhu cầu sử dụng nấm bảo tồn tính đa dạng nấm linh chi tự nhiên nguồn nấm linh chi địa phương Chính chúng tơi chọn đề tài: “Nghiên cứu hồn thiện quy trình thu nhận khối nấm linh chi thu thập từ rừng quốc gia Pù Huống,Pù Mát Nghệ An” 1.2 Mục đích đề tài - Khảo sát mơi trường nhân giống cấp 1, mơi trường hạt cấp thích hợp cho hệ sợi nấm tăng trưởng tốt - Khảo sát môi trường nuôi trồng thể quan sát khẳ thể nấm Linh chi mùn cua cao su điều kiện Nghệ an 1.3 Nội dung nghiên cứu - Phân lập loài nấm linh chi thu hái - Nghiên cứu lựa chọn môi trường nhân giống cấp một, cấp hai phát triển hệ sợi nấm Linh chi Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an - Xác định điều kiện, môi trường ni cấy thể thích hợp 1.4 u cầu phạm vi nghiên cứu - Nghiên cứu môi trường nuôi cấy thể nấm linh chi theo hướng ứng dụng, bước đầu đánh giá khẳ sinh trưởng phát triển nấm Linh Chi điều kiện Nghệ An - Mẫu nấm thu thập vườn Quốc Gia Pù Hoạt, Phân lập, nhân ni, khảo sát q trình thể nấm Phịng thí nghiệm vi sinh vật Khoa Hoá Học, Trường Đại học Vinh Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Chƣơng TỔNG QUAN TÀI LIỆU Khái quát nấm trồng 1.1 Giới thiệu sơ lƣợc Theo khái niệm cũ,nấm loài thực vật lồi thực vật khác khơng có sắc tố xanh(chất diệp lục).tuy nhiên nghiên cứu ngày nhiều sinh lý biến dưỡng cho thấy nấm có nhiều điểm khác với thưc vật[8]: Khơng có lục lạp,khơng có phận phân hóa thành rễ,thân,lá,khơng có hoa,phần lớn khơng chứa cellulose tế bào,khơng có chu trình phát triển chung thục vật,nấm hấp thu chất dinh dưỡng cho thể từ thể khác hay đất qua bề mặt hệ sợi nấm.chính thế,tất hệ thống phân loại sinh giới coi nấm giới riêng,tương đương giới thực vật giới động vật Trong tự nhiên nấm đóng vai trị quan trọng máy tái chế sơ cấp Chúng tạo enzim để phân huỷ hợp chất hữu (thường cấu tử gỗ) Phần lớn nấm có khẳ sản sinh enzim phá huỷ nguyên liệu thực vật thuộc lớp nấm túi (Ascomycetes) nấm đảm (Basidomycetes) Nấm cư trú gỗ chết chủ yếu phân huỷ nhiều cấu tử gỗ, gây mục mạnh Hiện khoá phân loại nấm đại bao gồm ngành ngành phụ sau:  Ngành Nấm nhầy (Myxomycota)  Ngành Nấm thật (Eumycota)  Ngành phụ Nấm tiên mao (Mastigomycotina)  Ngành phụ Nấm tiếp hợp (Zygomycotina)  Ngành phụ Nấm túi (Ascomycotina)  Ngành phụ Nấm đảm (Basidiomycotina)  Ngành phụ Nấm bất toàn (Deuteromycotina) 1.2 Giá trị Nấm Nấm từ lâu biết đến nguồn dinh dưỡng giàu đạm, chất xơ, vitamin tất chất cần thiết cho tăng trưởng, phát triển sống người khoẻ mạnh Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Trong năm qua, châu Á nấm ăn nấm không ăn được sử dụng mục đích dinh dưỡng, bồi bổ khí huyết làm thuốc Người ta dùng tất phận nấm Ngoài giá trị dinh dưỡng, nấm cịn có khẳ phịng trị số bệnh Càng ngày người ta phát nhiều hợp chất có tính miễn dịch từ nấm Quá trình tìm kiếm dược phẩm miễn dịch diễn châu Á (nhất Trung Quốc, Nhật Bản) Phương Tây chưa trọng Dược phẩm miễn dịch xem chất có hiệu liệu pháp miễn dịch uống vào Có 50 lồi nấm xếp vào dạng nấm dược liệu có hoạt tính chữa bệnh in vitro hay mẫu động vật thí nghiệm Một số chất trích từ nấm chứng minh có hoạt tính tăng cường hệ miễn dịch tiềm năng, hoạt tính miễn dịch chống lại té bào ung thư hẳn hoạt dược tế bào chống ung thư Tất không độc, hiệu dễ dung nạp: bật có nhóm chất sau Lentinan, AHCC (trích từ nấm hương Lentinus edodes), Shizophyllan (Nấm chân chim Shizophyllum commune), Grifron – D (Nấm gà gỗ Grifola frondosa), PSP, PSK (Nấm vân chi Trametes versicolor) Các dịch trích chủ yếu chiết từ thể nấm sinh khối từ hệ sợi (Nuôi cấy lên men môi trường lỏng) Cả thành phần tế bào hợp chất biến dưỡng thứ cấp có tác dụng hệ miễn dịch tế bào chủ chữa nhiều bệnh khác Hướng kết hợp tác nhân có tiềm miễn dịch với liệu pháp chống ung thư giải phẫu, hoá trị, xạ trị, đạt bước tiến đáng kể Trung Quốc, Nhật Bản nơi mà nấm xem nguồn kháng ung thư hàng kỷ qua Hình thái hóa học nấm 2.1 Hình thái học nấm Tuyệt đại đa số nấm cấu tạo từ hệ sợi nấm(hyphae).sợi nấm có dạng ống chứa đầy tế bào chất dịch bào.sợi nấm có hai loại,một loại khơng có vách ngăn,nhiều nhân,một loại có vách ngăn,trên màng vách ngăn có lỗ thơng để truyền thơng tin trao đổi chất.vách tế bào cấu tọa chủ yếu kitin-glucan.sợi nấm phát triển từ bào tử hay từ đoạn sợi nấm có đặc điểm sinh trưởng phía ngọn,phân nhánh.sợi nấm nhiều năm tiếp xúc với hình thành khối gọi thể sợi nấm Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Đối với nấm đảm hình thành sợi nấm trải qua giai đoạn:  Sợi nấm sơ sinh: sau bào tử mầm, hình thành ống mầm phân nhánh thành sợi nấm Những sợi nấm thường khơng có vách ngăn có vách ngăn nhân  Sợi nấm song nhân: thể sợi nấm nhân hay khác nhân kết hợp với tạo nên sọi nấm có vách ngăn nhiều tế bào, tế bào chứa nhân gọi sợi nấm song nhân ( dicaryolic hyphae)  Sợi nấm thứ sinh: sợi nấm phân hóa kết thành thể gồm tán nấm, cuống nấm, mô nấm [6, 11, 12] Đối với nấm túi: sợi nấm song nhân sinh trước hình thành túi Sự hình thành thể nấm túi phối hợp sợi nấm cấp sợi nấm song nhân Một số lồi nấm có hình thái liên hợp dạng móc ( clamp connection), tế bào đỉnh sợi nấm ( nhân) mọc mấu nhỏ, hai nhân chui vào mẫu Mỗi nhân phân cắt thành 2, thành nhân, nhân giữ lại đỉnh tế bào, nhân chui vào mấu, nhân nằm gốc tế bào Tế bào đỉnh ban đầu xuất vách ngăn, chia thành tế bào Sau vách ngăn giũa mấu tế bào gốc bị khai thông, tế bào gốc tiếp nhận nhân từ mấu chuyển xuống trở thành tế bào song nhân Như từ tế bào song nhân trở thành tế bào song nhân tế bào cịn lưu lại móc [10] 2.2 Hình thái thể Tản hay thể nấm tế bào đơn hay dạng sợi kéo dài Phần lớn sợi phân nhánh Khi sợi nấm bện lại với tạo thành thể sinh bào tử, gọi thể hay tai nấm Đặc trưng nấm lớn có quan sinh sản bào tử kích thước lớn, nhìn thấy mắt thường, kết bện sợi nấm gặp điều kiện thuận lợi Thường có kiểu thể nhóm nấm lớn:  Kiểu 1: bào tử thường sinh thể hình cầu, nấm thuộc Gasteromycetes  Kiểu 2: bào tử sinh phần thể nấm Những nấm thuộc Basidiomycetes Có thể bào tử phần phiến hay khơng thuộc phiến ( aphyllophorales) Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Ở nhóm ta thường gặp hai kiểu thể sau: Quả thể lật ngược, phiến phía hay khơng có phiến, thường khơng có hình dạng đinh Chúng mỏng, dày đạt 2mm Quả thể thẳng đứng gặp nhóm Basidiomycetes hay discomycetes Các sợi nấm phủ lên mặt hay phần bên trên, Những kiểu thể khác phần chân nấm, mũ nấm, phiến nấm [2,3] 2.3 Các giai đoạn phát triển nấm 2.3.1 Giai đọan tăng trƣởng Giai đoạn thường dài, nấm giai đọan chủ yếu dạng sợi Sợi nấm (hypha) mỏng manh gồm nhân, có nguồn gốc từ bào tử khác nảy nầm phối hợp lại Hệ sợi nấm ( mycelium), gọi hệ sợi dinh dưỡng ( vegetative mycelium), len lỏi chất để rút lấy thức ăn thông qua màng tế bào Khi khối sợi đạt đén mức độ định số lượng, gặp điều kiện thách hợp chúng bện kết lại tạo thành thể nấm Trong trường hợp bất lợi hình thành bào tử tiềm sinh hay hậu bảo tử ( chlamydospore) 2.3.2 Giai đoạn phát triển Giai đoạn thường ngắn, lúc sợi nấm đan vào nhau, hình thành dạng đặc biệt gọi thể nấm hay tai nấm ( fruir body) Quả thể thường có kích thước lớn quan sinh sản nấm Trên thể có cấu trúc, nơi tập trung đầu sợi nấm, thụ tầm ( hymenium) Chính nhân tế bào nhạp lại thành Sau chia thành nhân hình thành bào tử hữu tính ( sexual spore), đảm bào tử ( basidiospore) nang bào tử ( ascospore) Khi tay nấm trưởng thành, bào tử phóng thích, chúng nảy nầm chu trình lại tiếp tục 2.4 Đặc điểm biến dƣỡng nấm Nấm chủ yếu sống dị dưỡng, lấy thức ăn từ nguồn hữu ( động vật thực vât) Nấm có hệ men ( enzim) phân giải tương đối mạnh, giúp chúng sử dụng dạng thức ăn phức tạp Dựa vào cách dinh dưỡng nấm, chia thành nhóm: Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Tốc độ sinh trƣởng phát triển nấm Linh chi (G lucidum) loại môi trƣờng 3.1 Tốc độ phát triển nấm Linh chi (G lucidum) môi trƣờng nhân giống cấp (môi tƣờng thạch) Kết đo dường kính hệ sợi lan mơi trường dinh dưỡng khác trình bày bảng 1.1 Bảng 3.1 Bảng tốc độ phát triển nấm Linh Chi Giá trị trung bình độ lệch chuẩn công thức Ngày Ngày Ngày Công thức 27,18  7,04 44,70  6,26 61,11  5,55 Công thức 24,73  0,86 50,16  4,22 82,71  5,70 Công thức 28,44  5,70 54,43  1,43 82,01  3,87 Công thức 21,38  0,56 32,22  5,98 49,45  6,38 Công thức 31  1,16 41,35  2,50 57,42  8,54 Hình 3.1 Sự sinh trưởng hệ sợi nấm G lucidum môi trường thạch sau ngày Từ kết ta có đồ thị thể tốc độ lan hệ sợi nấm sau Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Hình 3.2 Sự sinh trưởng hệ sợi nấm G lucidum môi trường thạch CHÚ Ý: CT1: Công thức CT2: Công thức CT3:Công thức Trên môi trường thạch, hệ sợi nấm G lucidum phát triển dạng hình rễ sớm tốc độ tương đối nhanh Trong trình theo dõi phát triển nấm linh chi, nhận thấy ngày đầu hệ sợi tăng trưởng chậm, ngày sau hệ sợi bắt đầu tăng trưởng nhanh Trên môi trường PGA, PGA +10% dừa PGA + 10% nước chiết Malt thấy xung quanh rìa cấy mẫu xuất màu trắng đục Trên môi trường dinh dưỡng khác hệ nhau, tốc độ sinh trưởng hệ sợi nấm G lucidum khác Trên môi trường PGA + 10% nước chiết malt tốc độ lan nhanh nhất, , mật độ hệ sợi nấm môi trường PGA, PGA + 10% nước dừa, PGA + 10% nước chiết malt, Mizuno, hệ sợi dày, hệ sợi phân nhánh nhô lên bề mặt thạch trông lớp Trên môi trường Czaper - dox hệ sợi nấm phát triển chậm mỏng Sau ta xử lí số liệu excel,tính giá trị trung bình sử dụng hàm EVERAGE tính độ lệch chuẩn sử dụng hàm STDEV cho thấy tốc độ tăng trưởng môi trường khác khác nhau.môi trường PGA bổ sung nước chiết malt, hệ sợi lan nhanh nhất, dày có xuất sắc tố sớm mơi trường cịn lại Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 3.2 Khảo sát ảnh hƣởng nhiệt độ lên sinh trƣởng phát triển hệ sợi nấm Linh chi (G lucidum Karst.) Kết đo đường kính hệ sợi lan mơi trường BTH hai mức nhiệt độ trình bày bảng 3.2 Bảng 3.2 Sự sinh trưởng hệ sợi nấm G lucidum nhiệt độ khác Thời gian Nhiệt độ ngày 27oC 4,73 ± 0,64a 6,96 ± 0,48b 8,37 ± 0,57a 30oC 5,1 ± 0,45a 7,77 ± 0,41a 8,85 ± 0,22a LSD0,05 0,41 0,46 0,87 CV% 2,39 1,78 2,89 Ghi chú: số liệu cột có chữ khác sai khác với pcông thức 5->công thức 3->công thức 3.4 Sự sinh trƣởng nấm Linh chi (G.lucidum) môi trƣờng giá thể mùn cƣa cao su Tại Việt nam có nhiều triển vọng cho việc trồng nấm linh chi nguồn nhân lực dồi dào, phế thải nông lâm, công, nghiệp cịn tồn đọng gây nhiếm mơi trường Như việc phát triển nghề trồng nấm nói chung nghề trồng nấm linh chi nói riêng, khơng cung cấp nguồn dược liệu q mà cịn góp phần làm môi trường sống, bảo vệ sức khỏe Mùn cưa cao su dùng làm giá thể có hàm lượng cacbon cao Tuy nhiên mùn cưa cao su nguyên liệu nghèo chất dinh dưỡng Do để nâng cao hiệu suất ni trồng nấm rút ngắn thời gian nuôi trồng phải phối trộn thêm nhiều chất bổ sung Chất bổ sung chủ yếu thường cám gạo, cám ngô, bột khoai, Các nguyên liệu cung cấp vitamin hay acid amin giúp hệ sợi nấm sinh trưởng nhanh Ngồi loại phân bón hóa học như: URÊ, DPA, NPK, sử dụng dụng nhiều nuôi trồng Thực tế cho thấy bổ sung người ta bổ sung nguồn nitơ với hàm lượng thấp lại có tác dụng rõ rệt phát triển nấm Chúng tiến hành khảo sát sinh trưởng nấm Linh chi (G lucidum) giá thể mùn cưa cao su, sử dụng bịch PP kích thước 15 x 25 chứa 1800 gam chất khơ với quy trình sau: Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an ống thạch Mùn cưa cao su - Loại bỏ dăm bào - Bảo quản giống: hệ sợi - Ngâm ngủ với nước vôi 0,5% nấm đầy ống nghiệm tiến hành - Thêm dinh dưỡng cấy chuyền giống qua ống Cơ chất trồng nấm nghiệm - Cấy hệ sợi nấm sang Vào túi màng mỏng PP môi trường lúa để tạo Hấp 1210C vòng 120 phút lượng giống lớn cho giai đoạn trồng mùn cưa cao su Bịch mùn cưa Cấy giống khử trùng Chai lúa giống Nuôi ủ sợi nấm cho đầy bịch Bịch phôi Tháo nút bơng Chuyển sang nhà ni trồng trì Độ ẩm 85-95% Quả thể nấm Nấm khơ Hình 3.7 Quy trình nuôi trồng nấm Ganoderma lucidum Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 3.4.1 Thời gian sinh trƣởng hệ sợi nấm Linh chi (Ganoderma lucidum) từ ni cấy đến lan ½ bịch Trong thời gian đầu, từ nuôi cấy đến hệ sợi lan ½ bịch có tốc độ sinh trưởng chậm, nhìn chung để dạt tới giai đoạn tất công thức nuôi cấy chênh lệch không đáng kể, ngoại trừ công thức (Mùn cưa cao su + 10% cám gạo + 7% cám ngô + 1% bột đậu tương + 1% bột nhẹ) công thức (Mùn cưa cao su + 7% cám gạo + 5% cám ngô + 1% CaCO3 + 0,5% Urê) (bảng 4.5) Ở giai đoạn tốc độ lan cơng thức cịn lại khơng có sai khác mặt ý nghĩa thống kê Chứng tỏ cơng thức nghiên cứu, hệ sợi mọc tốt giai đoạn đầu 3.4.2 Thời gian sinh trƣởng hệ sợi nấm từ cấy đến giai đoạn lan kín bịch Trong giai đoạn thứ từ cấy lúc hệ sợi lan kín bịch cơng thức khác thời gian hệ sợi lan khác có ý nghĩa thống kê Kết cho thấy, thời gian hệ sợi lan kín bịch CT4 (Mùn cưa cao su + 10% cám gạo + 7% cám ngô + 1% bột đậu tương + 1% bột nhẹ) ngắn nhất, trung bình 20 ngày Thời gian hệ sợi lan kín bịch cơng thức (Mùn cưa cao su + 7% cám gạo + 5% cám ngô + 1% CaCO3 + 0,5% Urê) chậm trung bình 30 ngày Hình 3.8 Hình thái thể nấm linh chi Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Bảng 3.4 Thời gian sinh trưởng hệ sợi từ cấy đến lan kín bịch Cơng thức Trung bình Độ lệch chuẩn Cơng thức 22.29 14.05 Công thức 23.02 14.58 Công thức 24.89 16.73 Công thức 19.71 12.14 Công thức 27.79 21.4 Đến giai đoạn thu hoạch được, vành tai nấm khơng cịn xuất viền trắng mà thay vào tồn bề mặt mũ nấm chuyển sang màu đỏ nâu Trên bề mặt mũ nấm phủ đầy lớp bào tử màu nâu đỏ lớp bụi đất đỏ bazan Kích thước thể trọng lượng giai đoạn đạt đến mức tối ưu, thời điểm cần để thu hoạch nấm nhằm đạt suất cao hiệu kinh tế Hình 3.9 Thời gian sinh trưởng phát triển qua giai đoạn nấm Ganoderma lucidu Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ KẾT LUẬN Kết nghiên cứu môi trường dinh dưỡng nuôi trồng thể nấm Linh chi Ganoderma lucidum Karst cho thấy:  Môi trường cấp I tốt cho trình nhân giữ giống môi trường PGA + 10% nước chiết Malt  Nhiệt độ thích hợp cho phát triển hệ sợi nấm môi trường cấp từ 27-30oC  Môi trường cấp II thích hợp mơi trường Lúa + mùn cưa 25% + 25% cám gạo  Thời gian cần thiết cho sinh trưởng phát triển nấm Linh chi Ganoderma lucidum nuôi trồng giá thể trường mùn cua cao su tháng kể từ ngày cấy giống  Môi trường sản xuất giống cho hiệu suất cao tiến hành nuôi trồng giá thể mùn cua cao su Môi trường (Mùn cưa cao su + 10% cám gạo + 7% cám ngô + 1% bột đậu tương + 1% đường + 1% bột nhẹ) Môi trường dinh dưỡng nuôi trồng đảm bảo độ dày kích thước tán nấm cao Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an KIẾN NGHỊ  Cần tiến hành nghiên cứu thêm thành phần hóa học nấm Linh chi thu hái mơi trường lỏng Nhằm tìm mơi trường tốt cho q trình nhân ni sinh khối, thu sinh khối cao hợp chất có hoạt tính sinh học cao  Do giống Nấm thu hái, phân lập từ tự nhiên nuôi trồng điều kiện phịng thí nghiệm khẳ thích nghi cịn thấp Dẫn đến suất hiệu suất q trình ni trồng thể nấm thể nấm Linh chi thấp so với số nghiên cứu số tác giả trước Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an TÀI LIỆU THAM KHẢO Cao Đăng Nguyên, Ngô Anh, Văn Thị Yến (2007), Nghiên cứu đặc trưng protein nấm Hồng chi (Ganoderma colossum fr.) C.f.baker) ni trồng thành công Thừa Thiên Huế, Báo cáo khoa học Hội nghị Khoa học sống toàn quốc, Trang: 348-350 Dương Đức Tiến, Võ Văn Chi (1978), Phân loại học thực vật - Thực vật bậc thấp Nhà xuất đại học trung học chuyên nghiệp, Hà Nội Đàm Nhận (1996), Nghiên cứu thành phần loài số đặc điểm sinh học nấm Linh chi (Ganodermataceae Donk) Việt Nam, Luận án PTS Khoa học Sinh học, Trường Đại học Khoa học Tự nhiên, ĐHQG Hà Nội, Hà Nội Hồ Sĩ Tráng (2004), Cơ sơ hoá học gỗvà cellulose, Tập Nhà xuất Khoa học Kỹ thuật, Hà Nội Lê Văn Liễu (1977), Một số nấm ăn nấm độc Nhà xuất Nông nghiệp, Hà Nội Lê Xuân Thám (1996), Nghiên cứu đặc điểm sinh học đặc điển hấp thu khoáng nấm Linh chi Ganoderma lucidum (Leyss.ex Fr).Karst Luận án phó tiến sỹ khoa học sinh học, Đại học Khoa Học Tự Nhiên, Đại học Quốc Gia Hà nội, Việt nam Lê Xuân Thám (1996), Nghiên cứu đặc điểm sinh học nấm Linh chi Ganoderma lucidum (Leyss ex Fr.) Karst kỹ thuật hạt nhân, Luận án PTS Khoa học Sinh học, Trường Đại học Khoa học Tự nhiên - ĐHQG Hà Nội, Hà Nội Lê Xuân Thám (1996), Nấm Linh chi - dược liệu quí việt nam Nhà xuất mũi cà mau Lê Xuân Thám (2005), Nấm Linh chi vàng - nấm Hoàng chi Báo khoa học phổ thông, số 31/05 (1154) 10 Lê Duy Thắng (2001), Kỹ thuật nuôi trồng nấm ăn, tập Nhà xuất Nông nghiệp Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 11 Hồ Sĩ Tráng (2004), Cơ sơ hoá học gỗvà cellulose, Tập Nhà xuất Khoa học Kỹ thuật, Hà Nội 12 Nguyễn Lân Dũng, 2001 Công nghệ nuôi trồng nấm, tập Nhà xuất Nông nghiệp, Hà nội 13 Nguyễn Hữu Đống (2003) Nuôi trồng chế biến nấm ăn nấm làm thuốc chữa bệnh Nhà xuất Nông nghiệp, Hà nội 14 Nguyễn Hữu Đống Đinh Xuân Linh (2000) Nấm ăn nấm dược liệu - công dụng công nghệ nuôi trồng Nhà xuất Hà nội 15 Nguyễn Hữu Đống, Nguyễn Thị Sơn Zani Federico (2002), Cơ sở khoa học công nghệ nuôi trồng Nhà xuất Nông nghiệp, Hà nội 16 Nguyễn Đức Lượng (2003), Vi sinh học công nghiệp, tập Nhà xuất Đại học Quốc Gia TP.HCM 17 Ngô Anh (1999), “Nghiên cứu họ nấm Linh Chi (Ganodermataceae Donk) Thừa Thiên Huế”, Báo cáo khoa học – Proceedings Hội nghị cơng nghệ sinh học tồn quốc, Hà Nội, tr 1043 – 1049 18 Ngô Anh, Trần Đình Hùng (2007), Nghiên cứu nấm dược liệu Thừa Thiên Huế quy trình cơng nghệ ni trồng lồi Xích chi, Tạp chí Nghiên cứu Phát triển - Sở Khoa học Công nghệ Thừa Thiên Huế, Số: 5(64), Trang: 9-14 19 Nguyễn Đức Lượng, Phan Thị Huyền Nuyễn Ánh Tuyết (2003), Thí nghiệm cơng nghệ sinh học, tập 2, thí nghiệm vi sinh vật học Nhà xuất Đại học Quốc Gia TPHCM 20 Nguyễn Phước Nhuận (2001), Giáo trình sinh hố học, phần Nhà xuất Đại học Quốc Gia TPHCM 21 Nguyễn Thị Chính, Kiều Thu Vân, Dương Đình Bi, Nguyễn Thị Đức Hiền (1999), “Nghiên cứu số hoạt chất sinh học tác dụng chữa bệnh nấm Linh chi (Ganoderma lucidum)”, Proceedings – Hội nghị cơng nghệ sinh học tồn quốc, Hà Nội, tr 956 – 963 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn