Nghiên cứu hoàn thiện quy trình nhân giống in vitro và trồng thử nghiệm cây hoa chuông sinningia speciosa tại đà nẵng

ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM KHOA SINH – MÔI TRƯỜNG *** LÂM THỊ HỒNG NGÁT NGHIÊN CỨU HỒN THIỆN QUY TRÌNH NHÂN GIỐNG IN VITRO VÀ TRỒNG THỬ NGHIỆM CÂY HOA CHUÔNG SINNINGIA SPECIOSA TẠI ĐÀ NẴNG KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐÀ NẴNG - Năm 2015 ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM KHOA SINH – MÔI TRƯỜNG *** LÂM THỊ HỒNG NGÁT NGHIÊN CỨU HỒN THIỆN QUY TRÌNH NHÂN GIỐNG IN VITRO VÀ TRỒNG THỬ NGHIỆM CÂY HOA CHUÔNG SINNINGIA SPECIOSA TẠI ĐÀ NẴNG KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐÀ NẴNG - Năm 2015 LỜI CAM ĐOAN Tơi cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng Tôi Các số liệu, kết nêu khóa luận trung thực chưa cơng bố cơng trình khác Tác giả Lâm Thị Hồng Ngát LỜI CẢM ƠN Trong suốt thời gian thực khóa luận này, tơi xin chân thành cảm ơn quý thầy cô môn Công nghệ sinh học, Khoa Sinh – Môi trường, Trường Đại học Sư phạm – Đại học Đà Nẵng Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến TS Võ Châu Tuấn – Thầy giáo tận tình hướng dẫn, giúp đỡ tơi q trình thực đề tài Và xin gửi lời cảm ơn chân thành đến Ths Bùi Thị Thơ người giúp đỡ nhiều việc trau dồi kiến thức kĩ thực hành thí nghiệm suốt q trình làm khóa luận Cuối cùng, tơi xin cảm ơn gia đình, bạn bè ln bên, động viên khích lệ vật chất tinh thần để đạt kết tốt Một lần xin chân thành cảm ơn ! Đà Nẵng, tháng năm 2015 Sinh viên thực Lâm Thị Hồng Ngát DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT 2,4-D : diclorophenoxyacetic acid AC : active carbon (than hoạt tính) BA : 6-benzyl adenine BAP : – benzyl amino purine B5 : Gamborg (1968) cs : cộng CW : coconut water (nước dừa) IBA : indole 3-butyric acid KIN : kinetin ĐHST : điều hòa sinh trưởng MS : Murashige Skoog (1962) NAA : α-naphthalen acetic acid TDZ : thidiazuron DANH MỤC CÁC BẢNG Tên bảng Bảng Ảnh hưởng loại mẫu vật đến khả phát sinh 3.1 chồi in vitro hoa chuông sau tuần nuôi cấy Ảnh hưởng KIN NAA đến khả sinh trưởng 3.2.1 3.2.2 3.3 chồi in vitro hoa chuông Ảnh hưởng KIN IBA đến khả sinh trưởng chồi in vitro hoa chuông Ảnh hưởng hàm lượng đường saccharose đến khả tạo rễ in vitro hoa chuông sau tuần nuôi cấy Trang 21 23 25 26 Ảnh hưởng loại chất đến khả sống sót 3.4 sinh trưởng hoa chuông in vitro giai đoạn 28 sau tuần Ảnh hưởng loại chất, dinh dưỡng đến khả 3.5.1 sinh trưởng hoa chuông sau giai đoạn 31 3.5.2 Ảnh hưởng loại chất, dinh dưỡng đến khả hoa hoa chuông sau giai đoạn 33 DANH MỤC CÁC HÌNH ẢNH Hình Tên hình Trang 2.1 (a) Cây hoa chng ngồi tự nhiên, (b) Chồi hoa chng 18 3.1 Ảnh hưởng loại mẫu vật đến khả phát sinh chồi in vitro hoa chuông sau tuần nuôi cấy (a): thân không mắt 3.2.1 (b): cuống 22 (c): Ảnh hưởng KIN NAA đến khả sinh trưởng chồi in vitro hoa chuông sau tuần nuôi cấy (a) MS + 0,25 mg/L KIN + 0,1 mg/L NAA 24 (b) MS + 0,25 mg/L KIN + 0,25 mg/L NAA (c) MS + 0,25 mg/L KIN + 0,5 mg/L NAA 3.2.2 Ảnh hưởng KIN IBA đến khả sinh trưởng chồi in vitro hoa chuông sau tuần nuôi cấy (a) MS + 0,25 mg/L KIN + 0,1 mg/L IBA 26 (b) MS + 0,25 mg/L KIN + 0,25 mg/L IBA (c) MS + 0,25 mg/L KIN + 0,5 mg/L IBA 3.3 Ảnh hưởng hàm lượng đường saccharose đến khả tạo rễ in vitro hoa chuông sau tuần nuôi cấy (a) MS + 1,5% saccharose 27 (b) MS + 2% saccharose (c) MS + 2,5% saccharose 3.4 Ảnh hưởng giá thể đến khả sống sót sinh trưởng hoa chng vườn ươm sau tuần (a) Cát + xơ dừa (1:1) (b) Cát + xơ dừa + trấu hun (1:1:1) (c) Cát + xơ dừa + phân chuồng hoai mục (1:1:1) (d) Cát + xơ dừa (1:2) (e) Trấu hun + phân chuồng hoai mục (1:1) 30 (f) Cát + trấu hun + phân chuồng hoai mục (1:1:1) 3.5.1 Ảnh hưởng loại chất, dinh dưỡng đến khả sinh trưởng hoa chuông sau giai đoạn (a) Cát + xơ dừa + phân chuồng hoai mục (1:1:1) (b) Cát + xơ dừa + phân chuồng hoai mục (1:1:1) + NPK 32 (c) Cát + xơ dừa + phân vi sinh (1:1:1) + NPK (d) Cát + xơ dừa + phân trùn quế (1:1:1) + NPK (e) Cát + xơ dừa + bón phân bón 3.5.2 Ảnh hưởng loại chất, dinh dưỡng đến khả hoa hoa chuông sau giai đoạn (a) Cát + xơ dừa + phân chuồng hoai mục (1:1:1) (b) Cát + xơ dừa + phân chuồng hoai mục (1:1:1) + NPK (c) Cát + xơ dừa + phân vi sinh (1:1:1) + NPK (d) Cát + xơ dừa + phân trùn quế (1:1:1) + NPK (e) Cát + xơ dừa + bón phân bón 34 MỤC LỤC MỞ ĐẦU 1 Đặt vấn đề Mục tiêu đề tài Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài 3.1 Ý nghĩa khoa học 3.2 Ý nghĩa thực tiễn Chương TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Giá trị kinh tế nghề trồng hoa 1.2 Nghiên cứu nhân giống in vitro thực vật 1.2.1 Các yếu tố ảnh hưởng đến nhân giống in vitro 1.2.1.1 Môi trường nuôi cấy 1.2.1.2.Điều kiện nuôi cấy 1.2.1.3 Các chất điều hòa sinh trưởng thực vật 1.2.2 Các nghiên cứu nhân giống hoa kĩ thuật nuôi cấy in vitro 1.2.2.1 Các nghiên cứu giới 1.2.2.2 Các nghiên cứu nước 1.3 Nghiên cứu trồng chăm sóc ngồi tự nhiên 11 1.3.1 Các nhân tố ảnh hưởng tới sinh trưởng phát triển hoa trồng tự nhiên 11 1.4 Giới thiệu hoa chuông 13 1.4.1 Đặc điểm sinh học giá trị sử dụng 13 1.4.2 Những nghiên cứu hoa chuông 14 Chương ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 18 2.1 Đối tượng nghiên cứu 18 2.3 Phương pháp nghiên cứu 18 2.3.1 Phương pháp nhân nhanh chồi in vitro 19 2.3.2 Phương pháp phát triển chồi in vitro 19 2.3.2 Phương pháp tạo rễ in vitro 19 2.3.3 Phương pháp đưa đất 19 2.3.4 Phương pháp xử lí thống kê 20 Chương KẾT QUẢ VÀ BIỆN LUẬN 21 3.1 Ảnh hưởng loại mẫu vật đến khả phát sinh chồi in vitro hoa chuông 21 3.2 Ảnh hưởng chất ĐHST đến khả sinh trưởng chồi in vitro hoa chuông 23 3.2.1 Ảnh hưởng KIN NAA đến khả sinh trưởng chồi in vitro hoa chuông 23 3.2.2 Ảnh hưởng KIN IBA đến khả sinh trưởng chồi in vitro hoa chuông 24 3.3 Ảnh hưởng hàm lượng đường saccharose đến khả tạo rễ in vitro hoa chuông 26 3.4 Ảnh hưởng loại chất đến khả sống sót sinh trưởng hoa chuông in vitro giai đoạn 28 3.5 Ảnh hưởng loại chất, dinh dưỡng đến khả sinh trưởng hoa hoa chuông sau giai đoạn 30 3.5.1 Ảnh hưởng loại chất, dinh dưỡng đến khả sinh trưởng hoa chuông sau giai đoạn 30 3.5.2 Ảnh hưởng loại chất, dinh dưỡng đến khả hoa hoa chuông sau giai đoạn 32 3.6 Xây dựng quy trình nhân giống in vitro trồng sản xuất hoa chuông 35 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 37 a b c d e f Hình 3.4 Ảnh hưởng giá thể đến khả sống sót sinh trưởng hoa chng vườn ươm sau tuần (a) Cát + xơ dừa (1:1); (b) Cát + xơ dừa + trấu hun (1:1:1); (c) Cát + xơ dừa + phân chuồng hoai mục (1:1:1); (d) Cát + xơ dừa (1:2); (e) Trấu hun + phân chuồng hoai mục (1:1); (f) Cát + trấu hun + phân chuồng hoai mục (1:1:1) Như giá thể cát + xơ dừa + phân chuồng hoai mục (1:1:1) hoa chng có khả sinh trưởng tốt (11,68 lá, dài 5,51cm, rộng 4,15cm, có màu xanh nhạt) (Hình 3.4c) 3.5 Ảnh hưởng loại chất, dinh dưỡng đến khả sinh trưởng hoa hoa chuông sau giai đoạn 3.5.1 Ảnh hưởng loại chất, dinh dưỡng đến khả sinh trưởng hoa chuông sau giai đoạn Cây hoa chuông sau sinh trưởng tuần tuổi trồng loại giá thể với chế độ phân bón khác Sau tuần trồng cho kết trình bày bảng 3.5 Cây hoa chng sinh trưởng tốt điều kiện nhà lưới chế độ dinh dưỡng nghiên cứu Kết cao kết nghiên cứu Lã Thị Thu Hằng tỉnh Thừa Thiên Huế vụ Đông Xuân năm 2009-2010 Theo Lã Thị Thu Hằng, giá thể đất phù sa + phân chuồng hoai mục + trấu 30 hun (tỷ lệ 1:1:1) cho kết cao với 8,13 lá/cây, dài 5,13 cm rộng 4,02 cm, có đường kính tán 24,23 cm; theo nghiên cứu chúng tôi, hoa chuông phát triển tốt giá thể cát + xơ dừa + phân trùn quế (1:1:1) bón bổ sung phân NPK (17-12-7+TE) hoa chng có 11,91 lá, dài 13,55 cm, rộng 10,01 cm Bảng 3.5.1 Ảnh hưởng loại chất, dinh dưỡng đến khả sinh trưởng hoa chng sau giai đoạn Kích thước Giá thể chất Cát + xơ dừa + phân chuồng hoai mục (1:1:1) Đường Số (lá) kính tán Chiều dài Chiều rộng (cm) (cm) 6,06e 4,33e 7,16e 14,86e 9,10d 6,71d 9,15d 23,46d 11,63c 8,61c 11,11b 27,92b 13,55a 10,01a 11,91a 29,52a 12,18b 9,11b 10,17c 25,73c (cm) Cát + xơ dừa + phân chuồng hoai mục (1:1:1) + NPK Cát + xơ dừa + phân vi sinh (1:1:1) + NPK Cát + xơ dừa + phân trùn quế (1:1:1) + NPK Cát + xơ dừa + bón phân bón Chú thích: Các chữ khác cột sai khác có ý nghĩa thống kê với p