Phân lập và xác định cấu trúc hợp chất pterocarpan, flavonoit từ nấm phellinus igniarius ở việt nam

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC VINH NOYTHAVANH PHATTHANA PHÂN LẬP VÀ XÁC ĐỊNH CẤU TRÚC HỢP CHẤT PTEROCARPAN, FLAVONOIT TỪ NẤM PHELLINUS IGNIARIUS Ở VIỆT NAM LUẬN VĂN THẠC SĨ HÓA HỌC Vinh, 2017 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC VINH NOYTHAVANH PHATTHANA PHÂN LẬP VÀ XÁC ĐỊNH CẤU TRÚC HỢP CHẤT PTEROCARPAN, FLAVONOIT TỪ NẤM PHELLINUS IGNIARIUS Ở VIỆT NAM CHUYÊN NGÀNH: HÓA HỮU CƠ Mã số: 60.44.01.14 LUẬN VĂN THẠC SĨ HÓA HỌC Người hướng dẫn khoa học: PGS.TS HOÀNG VĂN LỰU Học viên thực hiện: Noythavanh Vinh, 2017 LỜI CẢM ƠN Luận văn thực phịng thí nghiệm chun đề Hố hữu khoa Hố, Viện Hàn Lâm - Viện Khoa học Cơng nghệ Việt Nam Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn chân thành sâu sắc đến PGS TS Hoàng Văn Lựu giao đề tài, tận tình hướng dẫn, tạo điều kiện suốt trình thực luận văn Tôi xin chân thành cảm ơn GS TS Trần Đình Thắng giúp đỡ bảo tận tình cho tơi hồn thành luận văn TS Đỗ Ngọc Đài giúp thu mẫu thực vật PGS.TS Ngô Anh (Khoa Sinh-Trường Đại học Khoa học Huế) giúp định danh mẫu thực vật Nhân dịp này, xin gửi lời cảm ơn đến thầy cô, cán bộ mơn Hố Hữu cơ, Khoa Hố học, anh chị nghiên cứu sinh, học viên cao học, bạn sinh viên phịng nghiệm chun đề Hóa Hữu Cơ, gia đình người thân động viên giúp đỡ tơi hồn thành luận văn Vinh, tháng 08 năm 2017 Học viên Noythavanh Phatthana MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN MỤC LỤC DANH SÁCH BẢNG Error! Bookmark not defined DANH MỤC CÁC KÍ HIỆU, CÁC CHỮ CÁI VIẾT TẮT MỞ ĐẦU 1 Lí chọn đề tài: Nhiệm vụ nghiên cứu Đối tượng nghiên cứu: CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 Một số hợp chất có hoạt tính sinh học nấm 1.2 Phellinus igniarius 16 1.2.1 Đặc điểm phân bố 16 1.2.2 Thành phần hóa học 17 Chương 19 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU VÀ THỰC NGHIỆM 19 2.1 Phương pháp nghiên cứu 19 2.1.1 Phương pháp lấy mẫu 19 2.1.2 Phương pháp phân tích, phân tách hỗn hợp phân lập hợp chất 19 2.1.3 Phương pháp khảo sát cấu trúc hợp chất 19 2.2 Hoá chất, dụng cụ thiết bị 20 2.2.1 Hoá chất 20 2.2.2 Dụng cụ thiết bị 20 2.3 Nghiên cứu hợp chất 20 2.3.1 Phân lập hợp chất 20 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Chương 23 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 23 3.1 Xác định hợp chất A 23 3.2 Xác định hợp chất B 33 KẾT LUẬN 40 TÀI LIỆU THAM KHẢO 41 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an DANH MỤC CÁC KÍ HIỆU, CÁC CHỮ CÁI VIẾT TẮT CC: Column Chromatography (Sắc kí cột) FC: Flash Chromatography (Sắc ký cột nhanh) TLC: Thin Layer Chromatography (Sắc kí lớp mỏng) IR: Infrared Spectroscopy (Phổ hồng ngoại) MS: Mass Spectroscopy (Phổ khối lượng) EI-MS: Electron Impact-Mass Spectroscopy (Phổ khối va chạm electron) ESI-MS: Electron Spray Impact-Mass Spectroscopy (Phổ khối lượng phun mù electron) H-NMR: Proton Magnetic Resonance Spectroscopy (Phổ cộng hưởng từ hạt nhân proton) 13 C-NMR: Carbon Magnetic Resonance Spectroscopy (Phổ cộng hưởng từ hạt nhân cacbon-13) DEPT: Distortionless Enhancement by Polarisation Transfer HSQC: Heteronuclear Single Quantum Correlation HMBC: Heteronuclear Multiple Bond Correlation COSY: Correlation Spectroscopy s: singlet br s: singlet tù t: triplet d: dublet dd: dublet duplet dt: dublet triplet m: multiplet TMS: Tetramethylsilan DMSO: DiMethylSulfoxide Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an MỞ ĐẦU Lí chọn đề tài: Nấm phân bố giới phát triển nhiều dạng, môi trường sống khác Đa phần sống cạn, số loài lại tìm thấy nước Trên giới ước tính, nấm có khoảng 1,5 triệu lồi Tuy nhiên phát nghiên cứu 7% Gần đây, Schmit Mueller ước tính có khoảng 712.285 loài nấm phát nghiên cứu Việt Nam vùng nhiệt đới với địa hình đa dạng, khí hậu phức tạp, hệ thực vật nấm đa dạng Theo tổng hợp từ nguồn nguyên liệu nhiều tác giả Việt Nam có khoảng 22.000 lồi nấm Ngồi loại nấm vùng ơn đới, gặp lồi nấm phân bố vùng ôn đới rừng vùng núi vừa núi cao Sapa - Phansipang, Tam Đảo – Vĩnh Phúc, Ba Vì – Hà Nội, Pù Mát – Nghệ An, Bạch Mã – Bình Trị Thiên, Đà Lạt - Lâm Đồng Cụ thể như: Thelephora nigrescens Bres., Thelephora palmatae (Scop.) Fr., Flammulina velutipes (Curt.: Fr.) P Karst., Gomphus floccosus (Schw.) Sing., Gomphus glutinosus (Pat.) Petersen, Tremella mesenterica Petz.: Fr., Cortinarius violaceus (L.: Fr.) Fr., Stropharia aeruginosa (Curtis: Fr.) Quel., Trametes versicolor (L.: Fr.) Pilat, Aleuria aurantia (Pers.: Fr.) Fuck Đó nguồn tài ngun q giá, khơng sử dụng làm thức ăn có thành phần dinh dưỡng cao, mà nguồn dược liệu quý phục vụ cho sức khỏe đời sống người Tuy nhiên, nguồn tài nguyên thiên nhiên phong phú nước ta chưa nghiên cứu cách hoàn chỉnh Chi Trametes có khoảng 50 lồi có nghiên cứu chúng Chính chúng tơi lựa chọn đề tài " Phân lập xác định cấu trúc hợp chất pterocarpan, flavonoit từ nấm Phellinus Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an igniarius Việt Nam" nhằm góp phần phục vụ cho cơng tác điều tra định hướng sử dụng hợp chất hoá học chi Trametes sp vào thực tiễn sống Nhiệm vụ nghiên cứu - Lấy mẫu - Ngâm mẫu - Chung cất thu hồi dung môi phần cao đặc - Chiết phần cao đặc với dung môi khác để thu dịch chiết tương ứng - Sử dụng phương pháp sắc ký cột, sắc ký lớp mỏng kết tinh phân đoạn để phân lập hợp chất từ dịch chiết - Xác định thành phần hoá học phương pháp phổ: Phổ cộng hưởng từ hạt nhân 1H-NMR,13C-NMR, DEPT, HMBC HSQC va COSY Đối tượng nghiên cứu Đối tượng nghiên cứu loài nấm thượng hoàng (Phellinus igniarius) thuộc chi Phellinus thu mẫu Nghệ An Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 Một số hợp chất có hoạt tính sinh học nấm Nấm nguồn dinh dưỡng thực phẩm chức quan trọng Chúng sản sinh hàng loạt hợp chất chuyển hóa bậc hai có cấu trúc hóa học đặc biệt có hoạt tính sinh học quan tâm Chính vậy, nấm nguồn ngun liệu tiềm cung cấp hợp chất dẫn đường có giá trị [1,2] Một số loài nấm sử dụng thuốc cổ truyền Trung Quốc, Hàn Quốc, Nhật Bản số quốc gia Châu Á dùng để điều trị số bệnh bao gồm ung thư, viêm loét miệng, đau dày, rối loạn tiêu hóa, bệnh bạch huyết Đặc biệt hợp chất polysaccarit (β-glucan) hợp chất nhận ý đặc biệt Một số polysaccarit protein-polysaccarit, krestin phân lập từ Coriolus versicolor, mesima từ Phellinus linteus, lentinan từ Lentinus edodes, Schizophylan từ Schizophyllum commune, sử dụng điều trị ung thư [3-6] Tuy nhiên, có chứng chứng minh cho thấy polysaccarit có vai trị gây tác dụng hoạt tính sinh học nấm Gần đây, nghiên cứu cấu trúc hoạt tính sinh học hợp chất sản sinh từ loài nấm tự nhiên dịch chiết ni cấy lồi nấm cho thấy chúng có hoạt tính sinh học đa dạng khả chống oxi hóa khử, chống ung thư, chống tiểu đường kháng viêm Hợp chất betulinans A and B phân lập từ dịch chiết metanol thể nấm Lenzites betulina có khả ức chế oxi hóa chất béo [7] Cấu trúc chúng xác định dựa sở gia trị phổ thu 2,5-diphenyl-3,6-dimetoxy-p-benzoquinon 2-phenyl-3-metoxy-[1H-2enzopyran][4,3-e][p]benzoquinon Khả ức chế oxi hóa chất béo betulinans A B với giá trị IC50 values 0,46 2,88 µg/mL, tương ứng Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Các hợp chất hai dẫn xuất indol có khả thu gom gốc tự do, phân lập từ dịch chiết MeOH Agrocybe cylindracea Cấu trúc hợp chất xác định 6-hydroxy-1H-indole-3carboxaldehyde 6-hydroxy-1H-indole-3-acetamide, tương ứng Hợp chất có khả chống lại oxi hóa chất béo thử nghiệm vi thể gan chuột với giá trị IC50 4,1 3,9 µg/mL, tương ứng [8] Hai hợp chất peptit tylopeptins A (5) B (6) phân lập từ dịch chiết metanol thể nấm Tylopilus neofelleus [9] Cấu trúc chúng xác định peptaibol sở 14 amino axit Mặc khác peptit chứng minh hoạt tính kháng vi sinh vật chủng Gram(+), khơng có hoạt tính kháng nấm kháng vi sinh vật chủng Gram-(-) Tylopept in A (5): Ac-L-Trp-L-Val-L-Aib-D-Iva-L-Ala-L-Gln-L- AlaL-Aib-L-Ser-L-Aib-L-Ala-L-Leu-L-Aib-L-Gln-L-Leuol Tylopept in B (6): Ac-L-Trp-L-Val-L-Aib-L-Aib-L-Ala-L-Gln-L-Ala-L-Aib-L-Ser-L-Aib-LAla-L-Leu-L-Aib-L-Gln-L-Leuol inoscavin A (7), methylinoscavin A (8), inoscavin B (9), methylinoscavin B (10), inoscavin C (11), methylinoscavin C (12), inoscavin D (13), methylinoscavin D (14), phelligridin F (15), davallialactone (16), methyldavallialactone (17), phelligridin D (18), interfungin A (19), interfungin B (20), interfungin C (21) phân lập từ dịch chiết metanol thể nấm Inonotus xeranticus (Hymenochaetaceae) có khả thu gom gốc tự [10-14] Các hợp chất thể khả Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Hình 3.13: Phổ HSQC hợp chất A Hình 3.14: Phổ HSQC hợp chất A Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 32 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 3.2 Xác định hợp chất B Phổ 1H-NMR cho thấy tín hiệu proton olefinic H-3 (δH 6,66 ppm, s, ); tín hiệu proton thơm vịng A: H-6 (δH 6,37 ppm,d, J=2Hz), H-8 (δH 6,49 ppm,d, J=2Hz) Vùng tín hiệu proton thơm vịng B( khơng thay thế): H-2’, 6’(δH 7,88 ppm,d, J=8Hz), H-3’, 5’(δH 7,54 ppm,m,); H-4’(δH 7,50 ppm,m, ) Phổ 1H-NMR cịn cho thấy tín hiệu singlet nhóm metoxy δH 3,88 ppm (7-OCH3) (Bảng 3.1) Phổ 13 C-NMR kết hợp với phổ DEPT (Bảng3.1), cho thấy tín hiệu 16 nguyên tử cacbon: cacbon cacbonyl δC(ppm): 182,50 (C=O); mười hai cacbon thơm δC(ppm): 162,23 (C-5); 98,22 (C-6); 165,64 (C-7); 92,70 (C-8); 157,82 (C-9); 105,74 (C-10); 131,83 (C-1’); 126,30 (C-2’,6’); 129,09 ( C-3’,5’); 126,30 (C-4’) hai cacbon olefin δC(ppm): 164,0 (C-2) 105,9 (C-3); cacbon nhóm metoxy δC(ppm): 55,82 Phổ HSQC hợp chất A ta thấy có tương quan (tương tác C H gắn trực tiếp lên nó) giữa: H-6 H 6,37 ppm C-6 C 98,2 ppm; H-8 H 6,49ppm C-8 δC(ppm) 92,70; H-2’,6’ δH 7,88 ppm C-2’,6’ δC 126,30 ppm ; H-3’,5’ δH 7,54 ppm C-3’,5’ δC 129,09ppm; (7-OCH3) δH 3,88ppm (7-OCH3) δC(ppm) 55,82 ppm; giũa H-3 δH 6,66 ppm C-3 δC(ppm) 105,90 Bảng 3.2 Kết phổ 1H-NMR, 13C-NMR DEPT hợp chất B Cacbon DEPT 13 H-NMR C-NMR δC(ppm) Thực nghiệm δC(ppm) Tài liệu [ CDCl3 Thực nghiệm ] Tài liệu [ ] CDCl3 C 164,00 164,0 CH 105,90 105,9 C=O 182,50 182,5 C-OH 162,23 162,2 CH 98,22 98,2 6,66,s 6,67 6,37 ,d, J=2Hz 6,39 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 33 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an C-OCH3 165,64 165,6 CH 92,70 92,7 C 157,82 157,8 10 C 105,74 105,7 1’ C 131,83 131,9 2’ CH 7,88 ,d, J=8Hz 7,89, J=7,8Hz 126,30 126,3 3’ CH 7,54 ,m 7,54 129,09 129,1 4’ CH 7,50 ,m 7,52 126,30 126,3 5’ CH 7,54 ,m 7,54 129,09 129,1 6’ CH 7,88 ,d, J=8Hz 7,89 126,30 126,3 3,88 3,89 55,82 55,9 6,49,d, J=2Hz 7-OCH3 6,51 Kết hợp phổ MS, 1H-NMR, 13C-NMR, DEPT, HMBC, HSQC COSY so sánh với tài liệu tham khảo [8] cho phép xác định cấu trúc hợp chất B 5hydroxy-7methoxy-flavon Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 34 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Hình 3.15: Phổ 1H-NMR hợp chất B Hình 3.16: Phổ giãn 1H-NMR hợp chất B Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 35 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Hình 3.17: Phổ 13C-NMR hợp chất B Hình 3.18: Phổ 13C-NMR hợp chất B Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 36 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Hình 3.19: Phổ HMBC hợp chất B Hình 3.20: Phổ HMBC hợp chất B Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 37 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Hình 3.21: Phổ HMBC hợp chất B Hình 3.22: Phổ HSQC hợp chất B Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 38 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Hình 3.23: Phổ HSQC hợp chất B Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 39 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an KẾT LUẬN Nghiên cứu thành phần hoá học dịch chiết nấm Phellinus igniarius Việt Nam thu số kết sau: Nấm Phellinus igniarius chiết với dung môi metanol ngày, cất thu hồi dung môi thu cao metanol thô (121g) Bằng phương pháp phân bố cao metanol nước chiết với dung môi chọn lọc chưng cất chân không thu cao etyl axetat cao butanol Phân lập hợp chất từ cao etyl axetat phương pháp sắc ký thu hợp chất A , hợp chất B Sử dụng phương pháp phổ đại: phổ cộng hưởng từ hạt nhân 1H-NMR, 13CNMR, DEPT, HMBC HSQC để xác định cấu trúc hợp chất tách Các kết phổ xác định: hợp chất A Pterocarpin ; hợp chất B 5-hydroxy7methoxy-flavon Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 40 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt Nguyễn Tiến Bân (chủ biên) (2003), Danh mục loài thực vật Việt Nam, Nhà xuất Nông nghiệp, Hà Nội Nguyễn Tiến Bân (2000), Họ Na (Annonaceae), Thực vật chí Việt Nam, Flora of Vietnam, Nhà xuất Khoa học Kỹ thuật, Hà Nội Vũ Văn Chuyên, Lê Trần Chấn, Trần Hợp (1987), Địa lý họ Việt Nam, Nhà xuất Khoa học Kỹ thuật, Hà Nội Nguyễn Thượng Dong người khác (2006), Nghiên cứu thuốc từ thảo dược, Nhà xuất Khoa học Kỹ thuật, Hà Nội Trần Đình Đại (1998), Khái quát hệ thực vật Việt Nam Hội thảo Việt-Đức Hoá học hợp chất thiên nhiên, Hà Nội, 16-18 April, tr 17-27 Nguyễn Văn Đàn, Nguyễn Viết Tựu (1985), Phương pháp nghiên cứu hoá học thuốc, Nhà xuất Y học, Hà Nội Phạm Hoàng Hộ (1992), Cây cỏ Việt Nam, Montreal Trần Văn Sung (2002), Phổ cộng hưởng từ hạt nhân hoá hữu cơ, Nhà xuất Đại học Quốc gia Hà Nội Đào Hữu Vinh, Nguyễn Xuân Dũng, Trần Thị Mỹ Linh, Phạm Hùng Việt (1985), Các phương pháp sắc ký, Nhà xuất Khoa học Kỹ thuật, Hà Nội Tiếng Anh Zjawiony JK Biologically active compounds from aphyllophorales (polypore) fungi J Nat Prod 2004;67:300-10 Berger KJ, Guss DA Mycotoxins revisited: part II J Emerg Med 2005;28:175- 83 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 41 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Yamasaki A, Shoda M, Iijima H, Nagai S, Wada J, Suzuki H,Chikazawa N, Tasaka T, Kameda C, Tanaka H, et al Aprotein-bound polysaccharide, PSK, enhances tumor suppressioninduced by docetaxel in a gastric cancer xenograft model.Anticancer Res 2009;29:843-50 Li G, Kim DH, Kim TD, Park BJ, Park HD, Park JI, Na MK,Kim HC, Hong ND, Lim K, et al Protein-bound polysaccharide from Phellinus linteus induces G2/M phasearrest and apoptosis in SW480 human colon cancer cells.Cancer Lett 2004;216:175-81 Zhou LD, Zhang QH, Zhang Y, Liu J, Cao YM The shiitake mushroomderived immuno-stimulant lentinan protects against murine malaria bloodstage infection by evoking adaptive immune-responses Int Immunopharmacol 2009;9:455-62 Kumari M, Survase SA, Singhal RS Production of schizophyllan using Schizophyllum commune NRCM Bioresour Technol 2008;99:1036-43 Lee IK, Yun BS, Cho SM, Kim WG, Kim JP, Ryoo IJ, Koshino H, Yoo ID Betulinans A and B, two benzoquinone compounds from Lenzites betulina J Nat Prod 1996;59:1090-2 Kim WG, Lee IK, Kim JP, Ryoo IJ, Koshino H, Yoo ID New indole derivatives with free radical scavenging activity from Agrocybe cylindracea J Nat Prod 1997;60:721-3 Lee SJ, Yun BS, Cho DH, Yoo ID Tylopeptins A and B, new antibiotic peptides from Tylopilus neofelleus J Antibiot (Tokyo) 1999;52:998-1006 10 Kim JP, Yun BS, Shim YK, Yoo ID Inoscavin A, a new free radical scavenger from the mushroom lnonotus xeranticus Tetrahedron Lett 1999;40:6643-4 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 42 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 11 Lee IK, Seok SJ, Kim WK, Yun BS Hispidin derivatives from the mushroom Inonotus xeranticus and their antioxidant activity J Nat Prod 2006;69:299-301 12 Lee IK, Yun BS Hispidin analogs from the mushroom Inonotus xeranticus and their free radical scavenging activity Bioorg Med Chem Lett 2006;16:2376-9 13 Lee IK, Jung JY, Seok SJ, Kim WG, Yun BS Free radical scavengers from the medicinal mushroom Inonotus xeranticus and their proposed biogenesis Bioorg Med Chem Lett 2006; 16:5621-4 14 Lee IK, Yun BS Highly oxygenated and unsaturated metabolites providing a diversity of hispidin class antioxidants in the medicinal mushrooms Inonotus and Phellinus Bioorg Med Chem Lett 2007;15:330914 15 Lee IK, Han MS, Lee MS, Kim YS, Yun BS Styrylpyrones from the medicinal fungus Phellinus baumii and their antioxidant properties Bioorg Med Chem Lett 2010;20:5459- 61 16 Lee IK, Lee JH, Yun BS Polychlorinated compounds with PPAR-γ agonistic effect from the medicinal fungus Phellinus ribis Bioorg Med Chem Lett 2008;18:4566-8 17 Lee SJ, Yeo WH, Yun BS, Yoo ID Isolation and sequence analysis of new peptaibol, boletusin, from Boletus spp J Pept Sci 1999;5:374-8 18 Hwang JS, Song KS, Kim WG, Lee TH, Koshino H, Yoo ID Polyozellin, a new inhibitor of prolyl endopeptidase from Polyozellus multiplex J Antibiot (Tokyo) 1997;50:773-7 19 Lee HJ, Rhee IK, Lee KB, Yoo ID, Song KS Kynapcin-12, a new pterphenyl derivative from Polyozellus multiplex, endopeptidase J Antibiot (Tokyo) 2000;53:714-9 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 43 inhibits prolyl C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 20 Kim SI, Park IH, Song KS Kynapcin-13 and-28, new benzofuran prolyl endopeptidase inhibitors from Polyozellus multiplex J Antibiot (Tokyo) 2002;55:623-8 21 Yun BS, Lee IK, Kim JP, Yoo ID Curtisians A-D, new free radical scavengers from the mushroom Paxillus curtisii J Antibiot (Tokyo) 2000;53:114-22 22 Lee IK, Jung JY, Kim YS, Rhee MH, Yun BS p-Terphenyls from the fruiting bodies of Paxillus curtisii and their antioxidant properties Bioorg Med Chem 2009;17:4674-80 23 Yun BS, Lee IK, Kim JP, Yoo ID Two p-terphenyls from mushroom Paxillus panuoides with free radical scavenging activity J Microbiol Biotechnol 2000;10:233-7 24 Yun BS, Lee IK, Kim JP, Yoo ID Leucomentin-5 and -6, two new leucomentin derivatives from the mushroom Paxillus panuoides J Antibiot (Tokyo) 2000;53:711-3 25 Yun BS, Kang HC, Koshino H, Yu SH, Yoo ID Suillusin, a unique benzofuran from the mushroom Suillus granulatus J Nat Prod 2001;64:12301 26 Lee IK, Kim SE, Yeom JH, Ki DW, Lee MS, Song JG, Kim YS, Seok SJ, Yun BS Daldinan A, a novel isoindolinone antioxidant from the ascomycete Daldinia concentrica J Antibiot (Tokyo) 2012;65:95-7 27 Lee IK, Yun BS, Han G, Cho DH, Kim YH, Yoo ID Dictyoquinazols A, B, and C, new neuroprotective compounds from the mushroom Dictyophora indusiata J Nat Prod 2002; 65:1769-72 28 Kim YH, Yun BS, Ryoo IJ, Kim JP, Koshino H, Yoo ID Methoxylaricinolic acid, a new sesquiterpene from the fruiting bodies of Stereum ostrea J Antibiot (Tokyo) 2006;59: 432-4 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 44 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 29 Lee IK, Jang YW, Yu SH, Yun BS New triterpene glucosides, oligoporins A-C, from Oligoporus tephroleucus protect DNA from Fenton reaction Bioorg Med Chem Lett 2007;17:4906-9 30 Jang YW, Lee IK, Kim YS, Lee S, Lee HJ, Yu SH, Yun BS Xylarinic acids A and B, new antifungal polypropionates from the fruiting body of Xylaria polymorpha J Antibiot (Tokyo) 2007;60:696-9 31 Lee IK, Ki DW, Kim SE, Yeom JH, Kim YS, Yun BS Pistillarin salt, a dicatecholspermidine family member from Gomphus floccosus, inhibits DNA single strand breakage by the Fenton reaction J Korean Soc Appl Biol Chem 2011;54:312-5 32 Lee IK, Jung JY, Yeom JH, Ki DW, Lee MS, Yeo WH, Yun BS Fomitoside K, a new lanostane triterpene glycoside from the fruiting body of Fomitopsis nigra Mycobiology 2012;40:76-8 33 Bhattarai G, Lee YH, Lee NH, Lee IK, Yun BS, Hwang PH, Yi HK Fomitoside-K from Fomitopsis nigra induces apoptosis of human oral squamous cell carcinomas (YD-10B) via mitochondrial signaling pathway Biol Pharm Bull 2012;35: 1711-9 34 Kang HS, Jun EM, Park SH, Heo SJ, Lee TS, Yoo ID, Kim JP Cyathusals A, B, and C, antioxidants from the fermented mushroom Cyathus stercoreus J Nat Prod 2007;70: pp.1043-1045 35 Wu, Xiuli, et al “[Studies On Constituents Of Cultures Of Fungus Phellinus Igniarius].” Zhongguo Zhong Yao Za Zhi = Zhongguo Zhongyao Zazhi = China Journal Of Chinese Materia Medica 36.7 (2011): 874-880 MEDLINE Complete Web 13 May 2015 39 Tuzz-Ying Song, Hung-Chi Lin, Nae-Cherng Yang, Miao-Lin Hu, Antiproliferative and antimetastatic effects of the ethanolic extract of Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 45 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn