PHÂN LẬP VÀ TUYỂN CHỌN NẤM MỐC CÓ KHẢ NĂNG SINH HOẠT CHẤT KHÁNG KHUẨN SỐNG CỘNG SINH VỚI HẢI MIÊN Ở VÙNG BIỂN HÀ TIÊN

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ VIỆN NGHIÊN CỨU VÀ PHÁT TRIỂN CÔNG NGHỆ SINH HỌC LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH VI SINH VẬT HỌC PHÂN LẬP VÀ TUYỂN CHỌN NẤM MỐC CÓ KHẢ NĂNG SINH HOẠT CHẤT KHÁNG KHUẨN SỐNG CỘNG SINH VỚI HẢI MIÊN (SPONGE) Ở VÙNG BIỂN HÀ TIÊN, KIÊN GIANG Cần Thơ, Tháng 11/2016 TÓM TẮT Việt Nam với đường bờ biển dài 3260km, có khí hậu nóng ẩm, mưa nhiều, điều kiện thuận lợi cho sử phát triển hệ động thực vật biển phong phú, có Hải miên Hiện nay, Hải miên lồi sinh vật biển quan tâm nhờ khả sản sinh hợp chất hóa học có giá trị, phục vụ cho ngành nghiên cứu khoa học Hải miên biết đến vật chủ cộng đồng vi sinh vật chức vi sinh vật cộng sinh Hải miên gồm thu dinh dưỡng, trao đổi chất, xử lý chất thải, sản sinh chất chuyển hóa thứ cấp, … Nhiều nghiên cứu ra, vi sinh vật cộng sinh Hải miên (trong có nấm mốc) có hoạt tính đối kháng vi sinh vật cao vi sinh vật cộng sinh nguồn khác Nấm mốc vai trò quan trọng việc tái chế chất dinh dưỡng hệ sinh thái, phân hủy xác chết động vật mô thực vật, đặc biệt khả sản xuất chất chuyển hóa hoạt tính sinh học Đề tài “Phân lập tuyển chọn nấm mốc có khả sinh chất kháng khuẩn sống cộng sinh với Hải miên vùng biển Hà Tiên, Kiên Giang" thực nhằm mục đích tuyển chọn củng nấm mốc có khả sinh hoạt chất kháng khuẩn Từ khóa: Hải miên, kháng khuẩn, nấm mốc, phân lập i MỤC LỤC TÓM TẮT .i MỤC LỤC ii DANH SÁCH BẢNG iv DANH SÁCH HÌNH v DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT .vi CHƢƠNG GIỚI THIỆU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục tiêu đề tài CHƢƠNG LƢỢC KHẢO TÀI LIỆU 2.1 Giới thiệu chung Hải miên 2.2.2 Xạ khuẩn (vi khuẩn sợi) 2.2.3 Nấm mốc 2.3 Những nghiên cứu nấm mốc cộng sinh Hải miên nƣớc 2.3.1 Ngoài nước 2.3.2 Trong nước 2.4 Giới thiệu vi sinh vật gây bệnh 2.4.1 Bacillus cereus 2.4.2 Candida albicans 10 2.4.3 Escherichia coli 10 2.4.4 Salmonella eterica 11 CHƢƠNG 3: PHƢƠNG TIỆN VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 12 3.1 Phƣơng tiện thí nghiệm 12 3.1.1 Địa điểm thời gian nghiên cứu 12 3.1.2 Vật liệu thí nghiệm 12 3.1.3 Thiết bị, dụng cụ 12 3.2 Phƣơng pháp nghiên cứu 13 3.2.1 Môi trường 13 3.2.2 Phân lập nấm mốc 14 ii 3.2.3 Quan sát khuẩn lạc 15 3.2.4 Kiểm tra khả sinh hoạt chất kháng khuẩn nấm sợi 16 3.2.5 Sơ tuyển nấm mốc 19 CHƢƠNG 4: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 20 4.1 Kết phân lập chủng nấm mốc từ hải miên 20 4.1.1 Kết phân lập từ mẫu Hải miên 20 4.1.2 Kết quan sát khuẩn lạc 20 4.1.3 Kết quan sát kính hiển vi 24 4.2 Kết thử nghiệm hoạt tính kháng khuẩn 27 CHƢƠNG 5: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 33 5.1 Kết luận 33 5.2 Kiến nghị 33 TÀI LIỆU THAM KHẢO 34 PHỤ LỤC iii C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an DANH SÁCH BẢNG Bảng Môi trường Glucose Peptone Yeast Extract Agar (GPY) 13 Bảng Môi trường Gause 13 Bảng Môi trường Luria Bertani (LB) Agar 14 Bảng Môi trường Trypton Soya Agar (TSA) 16 Bảng Môi trường DifcoTM Mueller Hinton Agar (MHA) .16 Bảng Số lượng mẫu Hải miên thu thập 20 Bảng 7: Đặc điểm khuẩn lạc dòng nấm phân lập 20 Bảng 8: Đặc điểm quan sát kính hiển vi 24 Bảng 9: Kết khảo sát khả kháng khuẩn phương pháp đục lỗ 28 Bảng 10: Kết kháo sát khả kháng khuẩn trung bình mạnh .30 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn iv C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an DANH SÁCH HÌNH Hình Hải miên .3 Hình 2: Khuẩn lạc nấm dòng HD24aG 23 Hình 3: Khuẩn lạc nấm dịng HD14eLB .24 Hình Bào tử nấm quan sát qua kính hiển vi (độ phóng đại 400 lần) 27 Hình 5: Khảo sát kháng khuẩn phương pháp đục lỗ 31 Hình 6: Khuẩn lạc nấm dòng HD24cG Hình 7: Khuẩn lạc dịng ND8aG .2 Hình 8: Khuẩn lạc dịng ND2aLB Hình 9: Khuẩn lạc dòng ND2cLB Hình 10: Khuẩn ty dịng ND2aLB Hình 11: Khuẩn ty bào tử dịng ND5bLB Hình 12: Khuẩn ty dịng HD27aG Hình 13: Khuẩn ty dòng HD24aG Hình 14: Dịng ND8G (số 3) HD16cG (số 4) kháng nấm men Candida Hình 15: Dịng HD16dG kháng vi khuẩn Salmonella enterica chủng Hình 16: Dịng HD27 aG kháng vi khuẩn Bacillus cereus chủng Hình 17: Dịng HD23aLB kháng vi khuẩn Bacillus chủng Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn v C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT B1 Bacillus cereus chủng B2 Bacillus cereus chủng C Candida albicans E1 Escherichia coli chủng E2 Escherichia coli chủng GPY Glucose Peptone Yeast Extract Agar G1 Gause1 KS Kháng sinh ml Milliliter LB Luria Bertani Agar PTN Phịng thí nghiệm S1 Salmonella enterica chủng S2 Salmonella enterica chủng VSV Vi sinh vật Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn vi C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an CHƢƠNG GIỚI THIỆU 1.1 Đặt vấn đề Những năm trở lại đây, bất lợi mơi trường thói quen sinh hoạt không hợp lý người tạo nên điều kiện thuận lợi để vi khuẩn biến đổi cách khó kiểm sốt, đặc biệt nhóm vi sinh vật gây bệnh Điều dẫn đến việc xuất bệnh ngày nhiều quan trọng vi sinh vật kháng lại loại kháng sinh nhạy cảm trước Trước tình hình trên, nhiều cơng trình nghiên cứu thực nhằm mục đích tìm kiếm loại kháng sinh chống lại vi sinh vật gây bệnh người động vật trọng Phần lớn hợp chất có hoạt tính sinh học ly trích từ động thực vật, nhiên, hiệu mang lại không mong muốn trình thực gặp nhiều khó khăn, việc khai thác số lượng lớn hủy hoại môi trường sinh thái Do vậy, hướng nghiên cứu việc tìm hiểu ứng dụng tiềm từ sinh vật biển ý Trong số tất sinh vật biển điều tra, Hải miên (ngành Porifera) công nhận nguồn giàu nguyên liệu tự nhiên từ biển, với khoảng 4851 hợp chất tìm Hải miên (Sponge) biết đến loài sinh vật có sức đề kháng cao, có khả kháng lại chất độc hại, phân bố rộng rãi tìm thấy khắp vùng nhiệt đới, ơn đới, vùng cực nơi có điều kiện sống khắc nghiệt khác Ở số loài Hải miên, lượng vi sinh vật cộng sinh chiếm tới 60% sinh khối (108-1010 vi khuẩn/mỗi gram trọng lượng Hải miên) (Wilkinson, 1978 a, b, c), nồng độ gấp 2-3 lần so với lượng vi sinh vật nước biển (Friedrich et al., 2001), nhà khoa học cho thấy vi sinh vật cộng sinh Hải miên bền vững theo không gian thời gian Những nghiên cứu hoạt tính sinh học cho thấy hợp chất chiết xuất từ sinh vật biển thể hoạt tính sinh học, ví dụ nhóm chất chống viêm, diệt tế bào ung thư, ức chế miễn dịch, chống vi rút, chống sốt rét, Các hợp chất định hướng vào nghiên cứu sâu hoạt tính sinh học nhằm tìm kiếm tác nhân hỗ trợ điều trị bệnh hiểm nghèo Vi sinh vật sống cộng sinh với loài sinh vật biển nhà nghiên cứu quan tâm môi trường biển nơi sinh sống đa dạng loài vi sinh vật khác Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an nhau, nhiều nhóm có khả sinh hoạt chất kháng khuẩn Hơn nữa, nghiên cứu đối tượng chưa công bố rộng rãi Nấm mốc cộng sinh Hải miên nguồn nguyên liệu tuyệt vời cho chất chuyển hóa hoạt chất sinh học, thuốc chất dẫn thuốc Hiện nay, nước cịn cơng trình nghiên cứu Hải miên, phần nhỏ đa dạng nấm mốc cộng sinh Hải miên biết đến mối quan hệ hải miên nấm mốc Do cần cơng trình nghiên cứu, tìm hiểu, phân lập vi sinh vật có khả sinh hoạt chất kháng khuẩn Hải miên để đưa vào ứng dụng thực tiễn Vì vậy, đề tài “Phân lập tuyển chọn nấm mốc có khả sinh hoạt chất kháng khuẩn sống cộng sinh Hải miên vùng biển Hà Tiên, Kiên Giang” thực với mục đích bổ sung làm phong phú thêm cho nghiên cứu trước đó, đồng thời ứng dụng vào thực tiễn từ giá trị đạt cơng trình nghiên cứu 1.2 Mục tiêu đề tài Phân lập 50 dòng nấm mốc cộng sinh Hải miên tuyển chọn 10 dịng có khả sinh hoạt chất kháng khuẩn Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an CHƢƠNG LƢỢC KHẢO TÀI LIỆU 2.1 Giới thiệu chung Hải miên Hình Hải miên (*Nguồn: https://kofegeek.wordpress.com/2012/02/20/real-spongebob-dont-use-pants/) Với 70% diện tích bề mặt bao phủ nước, biển môi trường sống đầy tiềm để khám phá tính chất sinh hóa mới, nhiên phần nhỏ tính chất biết đến Sinh vật biển từ lâu mục tiêu ý cho việc tìm hợp chất từ vi sinh vật biển, chủ yếu nấm vi khuẩn (Faulkner 1998) Đến 100 chất chuyển hóa từ nấm có nguồn gốc từ biển mơ tả (Biabani Laatsch, 1998) Trong bối cảnh đó, Hải miên biết đến nguồn nguyên liệu dồi hoạt chất sinh học mà ngành Công nghệ sinh học quan tâm đến (Wang 2006; Blunt et al., 2007) Hải miên động vật sống lâu ổn định, chúng tồn 700 – 800 triệu năm với tốc độ sinh trưởng khác tùy loài Mặc dù Hải miên người biết đến từ văn minh không công nhận sinh vật đa bào độc lập đến Robert Grant lần quan sát hình thái học sinh lý học độc đáo Hải miên đặt tên Porifera vào kỷ 19 (Grant, 1836) Kể từ đó, nghiên cứu tất khía cạnh sinh học, sinh thái học, phân loại hóa học Hải miên thu hút hàng trăm nhà khoa học tồn giới, nhiều người số dành nghiệp đời để nghiên cứu nhóm Hải miên sinh vật đa bào, khơng xương sống, sống dị dưỡng, thức ăn chủ yếu phiêu sinh môi trường nước mặn hay nước khắp khu vực (Taylor et al, 2007) Hải miên khơng có mơ hồn chỉnh có loại tế bào khác Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Trong 18 dịng nấm có hoạt tính kháng khuẩn trung bình mạnh, số dịng có khả kháng khuẩn tốt ND7aG, ND7bG, ND8G, HD13bG, HD16bG, HD16cG, kháng mạnh với dịng HD16bG kháng nấm men Candida tốt với đường kính vịng vơ khuẩn 23mm, dòng HD16dG kháng Salmonella enterica tốt với đường kính vịng vơ khuẩn 22mm; đặc biệt có dịng nấm có khả kháng lại tất vi khuẩn gây bệnh ND7bG, HD13bG, HD16cG, dòng ND8aLB kháng 6/7 dòng vi khuẩn gây bệnh dòng ND8G kháng 5/7 dòng vi khuẩn gây bệnh Hình 5: Khảo sát kháng khuẩn phƣơng pháp đục lỗ Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 31 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an (Dòng nấm HD13bG (số 5) Dòng nấm ND7bG (số 7) tạo vịng vơ khuẩn với nấm men Candida albicans) Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 32 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an CHƢƠNG 5: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 5.1 Kết luận Từ 23 mẫu Hải miên thu thập vùng biển Hà Tiên, Kiên Giang phân lập 70 dòng nấm mốc, có 38/65 (58,4%) dịng có khả kháng vi khuẩn kiểm định Bằng phương pháp đục lỗ thạch, dựa vào đường kính vịng vơ khuẩn thu dịng nấm mốc có khả sinh hoạt chất kháng khuẩn mạnh (đường kính vịng vơ khuẩn >16mm), bao gồm: ND7aG, ND7bG, ND8G, ND8bLB, HD16bG, HD16cG, HD16dG dịng nấm mốc có khả kháng lại tất dòng vi khuẩn gây bệnh: ND7bG, HD13bG, HD16cG Đa phần chủng nấm có khả sinh hoạt chất kháng khuẩn mạnh có khuẩn lạc hình trịn gần trịn, mép hình tia, bề mặt khuẩn lạc mơ, dạng mặt nhung mịn, bào tử hình trịn, màu nâu, nâu đen Dựa vào q trình quan sát đại thể vi thể đặc điểm dịng nấm mốc, cho dịng nấm mốc cho hoạt tính kháng khuẩn tốt thuộc Họ Aspergillus 5.2 Kiến nghị Tiếp tục tiến hành thử nghiệm hoạt tính kháng khuẩn dịng nấm phân lập với vi sinh vật gây bệnh khác Định danh dịng nấm có hoạt tính kháng khuẩn mạnh kháng lại dòng vi khuẩn gây bệnh: ND7bG, HD13bG, HD16cG Nghiên cứu phương pháp tinh để tăng hoạt tính kháng khuẩn nấm mốc mạnh ứng dụng mà nấm Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 33 mốc mang lại C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt Bùi Xuân Đồng (2004) Nguyên lý phòng chống nấm mốc mycotixin NXB Khoa học Kỹ thuật Hà Nội Đặng Vũ Hồng Miên (1999) Bảng phân loại loài nấm mốc thường gặp NXB Khoa học Kỹ thuật Hà Nội Lê Xuân Phương (2001) Vi sinh vật công nghiệp NXB Xây dựng ĐH Đà Nẵng Lương Đức Phẩm (2007) Công nghệ vi sinh vật NXB Nông nghiệp Nguyễn Thành Đạt (2005) Cơ sở sinh học vi sinh vật Tập 1, NXB Y học, Hà Nội Nguyễn Văn Bá, Cao Ngọc Điệp, Nguyễn Văn Thành (2005) Nấm học NXB ĐH Cần Thơ Trần Thị Thanh (2007) Công nghệ vi sinh NXB Giáo Dục Trang web http://text.123doc.org/document/3856531-phan-lap-tuyen-chon-vi-sinh-vat-lienket-hai-mien-co-hoat-tinh-doi-khang-voi-mot-so-vi-sinh-vat-kiem-dinh.htm (ngày 18/11/2016) http://oca.org.vn/bvct/chi-tiet/232/ket-qua-nghien-cuu-cac-chat-co-hoat-tinhsinh-hoc-tu-sinh-vat-bien-viet-nam-o-vien-hoa-sinh-bien-giai-doan-2010-2015.html (ngày 18/11/2016) Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 34 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Tiếng Anh Bo Ding, Ying Yin, Fengli Zhang, Zhiyong Li (2009) Recovery and Phylogenetic Diversity of Culturable Fungi Associated with Marine Sponge Clathrina liteoculcitella and Holoxea sp in the South China Sea Mar Biotechnol 13:173-721 Blehert DS, Hicks AC, Berh M, Meteyer CU, Berlowski –Zier BM, Buckles EL, Cloman JT, Darling SR, Gargas A, Niver R, Okoniewski JC, Rudd RJ, Stone WB (2009) Science 227-323 Blunt JW, Copp BR, Hu WP, Munro MH, Northcote PT, Prinsep MR (2007) Marine natural products Nat Prod Rep 24:31-86 Blunt, J.W.; Copp, B.R.; Munro, M.H.G.; Northcote, P.T.; Prinsep, M.R Marine natural products Nat Prod Rep 2010, 27, 165–237 15 Blunt, J.W.; Copp, B.R.; Munro, M.H.G.; Northcote, P.T.; Prinsep, M.R Marine natural products Nat Prod Rep 2011, 28, 196–268 16 Blunt, J.W.; Copp, B.R.; Keyzers, R.A.; Munro, M.H.G.; Prinsep, M.R Marine natural products Nat Prod Rep 2012, 29, 144–222 Mar Drugs 2014, 12 456717 Blunt, J.W.; Copp, B.R.; Keyzers, R.A.; Munro, M.H.G.; Prinsep, M.R Marine natural products Nat Prod Rep 2013, 30, 237–323 18 Blunt, J.W.; Copp, B.R.; Keyzers, R.A.; Munro, M.H.G.; Prinsep, M.R Marine natural products Nat Prod Rep 2014, 31, 160–258 Bridge PD, Newsham KK (2009) Soil fungal community composition at Mars Oasis, a southern maritime Antarctic site, assessed by PCR amplification and cloning Fungal Ecol 2: 66-74 Chen BE, Zhang SL (2006) Antimicrobial characteristics of marine fungi Asperillus sp MF 134 J Huaqiao Univ 27:307-309 E B G Jones, J Sakayaroj, S Suetrong, S Somrithipol and K L Pang,Fungal Diversity, 2009, 35, 1–187 Gao Q, YAng ZL (2010) Ectomycorrhizal fungi associated with two species of Kobresia in an alpine meadow in the eastern Himalaya Mycorrhiza 20:281-287 Gao Z, Li B, Zheng C, Wang G (2008) Molecular detection of fungal commu in the Hawaiia marine sponges Sberites zeteki and Mycale armata Appl Environ Microbiol 74:6091-6101 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 35 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Han XX, Xu XY, Cui CB, Gu QQ (2007) Diketopiperazines produced by marine-derived Asperillus fumigatus H1-04 and their antiumor activities Chin I Med Chem 17: 155-159 Jutta Wiese (2011) Phylogenetic Identification of Fungi Isolated from the Marine Sponge Tethya aurantium and Identification of Their Secondary Metabolites Mar Durgus 9:561-585 Jan Vicente, Allison Stewart, Bongkeun Song, Russell T Hill, Jeffrey L Wright (2012) Biodiversity of Actinomycetes Associated with Caribbean Sponges and Their Potetial for Natural Product Discovery Mar Biotechnol 15:413-424 Katia D, Teresa APRS, Ana CF, Armando CD (2012) Analytical techniques for discovery of bioactive compounds from marine fungi, Trends Analy Chem p.34 Kennedy J, Baker P, Piper C, Cotter PD, Walsh M, Mooij MJ, Bourke MB, Rea MC, O'Connor PM, Ross RP, Hill C, O'Gara F,Marchesi JR, Dobson AD (2008) Isolation and analysis of bacteria with antimicrobial activities from the marine sponge Haliclona simulans collected from Irish waters Laport, M.; Santos, O.; Muricy, G Marine sponges: Potential sources of new antimicrobial drugs Curr Pharma Biotechnol 2009, 10, 86–105 Li CS, Li XM, Gao SS, Lu YH, Wang BG (2013) Cytotoxic anthranilic acid derivatives from deep sea sedimet-derived fungus Penicillium paneum SD-44 Mar Drugs 11: 3068-3076 Li Q, Wang G (2009) Diversity of fungal isolates from three Hawaiin marine sponges Microbiol Res 164: 231-235 Liu WC, Li CQ, Zhu P, Yang JL, Heng KD (2010) Phylogenetic diversity of culturable fungi associated with into marine sponges: Haliclona simulans and Gelliodes carnosa, collected from the Hainan Island coastal waters of the South China Sea Fungal Div 42:1-15 Logan, N A., & Rodrigez-Diaz, M (2006) Bacillus spp and Related Genera In S H Gillespie, & P M Hawkey (Eds.), Principles and Practice of Clinical Bacteriology (2nd ed., pp 139-158) West Sussex, England, UK: John Wiley and Sons Ltd Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 36 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Lee O O., Wong Y H., Qian P Y., 2009 Inter- and intraspecific variations of bacterial communities associated with marine sponges from San Juan island, Washington Appl Environ Microbiol., 75(11): 3513-3521 López-Martínez, R (2010) Candidosis, a new challenge Clinics in Dermatology, 28 (2), 178-184 doi:DOI: 10.1016/j.clindermatol.2009.12.014 Ryan, KJ, & Ray, CG (Eds.) (2004) Sherris Medical Microbiology: An Introduction to Infectious Disease.(Fourth Edition ed ) New York : McGraw-Hill Marlene Heriquez, Karen Vgara, J Norambuena, A Beiza, F Maza, P Ubilla, I Araya, Renato Chavez, Aurelio San-Martin, Jose Darias, Maria J Darias, Inmaculada Vaca (2013) Diversity of cultivable fungi associated with Antarctic marine sponges and screening for their antimicrobial, antitumoral and antioxidant potential World J Microbiol Biotechnol 30: 65-76 Michael W Taylor, Regina Radax, Doris Steger, and Michael Wagner (2007) Sponge-Associated Microorganisms: Evolution, Ecology, and Biotechnological Potential Mojtaba Mohseni, Hamed Norouzi, Javad Hamedi, Aboulghasem Roohi (2013) Screening of Antibacterial Producing Actinomycetes from Sediments of the Caspian Sea Spring Vol 2, No Murray, P R., Baron, E J., Jorgensen, J H., Landry, M L., & Pfaller, M A (Eds.) (2007) Manual of Clinical Microbiology (9th ed.) American Society of Microbiology Press Quanzi Li, Guangyi Wang (2007) Diversity of fungal isolates from three Hawaiian marine Sponges Microbiological Research 164: 233-241 Shen S, Li W, Ouyang MA, Wu ZL, Lin QY, Xie LH (2009) Identification of two marine fungi and evaluation of their antivirus and antiumor activities Microbial 49: 1240-1246 Sirisha et al., 2013 Sirisha B., R Harith, YSYV Jagan Mohan, K Siva Kumar, T Ramana (2013) Bioactive compounds from marine actinomycetes isolated from the sediments of bay of Bengal IJPCBS 2013, 3(2): 257-264 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 37 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Shuo Shen, WeiLi, Jian Wang (2014) Antimicrobial and antitumor activities of crude secondary metabolites from a marine fungus Penicillium Oxalium 312F1 African Journal of Microbiology Research (Vol 8) pp 1480-1485 Grant RE (1836) Animal Kingdom In: Todd RB, ed The cyclopaedia of anatomy and physiology Volume London: Sherwood,Gilbert, and Piper Pp 107– 118 Hooper JNA, Van Soest RWM, eds (2002) Systema Porifera: a guide to the classification of Sponges volumes New York: Kluwer Academic/PlenumPublishers 1718 p Rigby JK, Kaesler RL (2003) Treatise on Invertebrate Paleontology, Part E, Porifera (Revised) vol 2: Introduction to the Porifera Lawrence, Kansas: Geological Society of America xxvii+349 p WEST E, Hoetjes P (1981) The intrasponge fauna of Spheciospongia vesparia (Porifera, Demospongiae) at Curacao and Bonaire Mar Biol 62: 139-151 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 38 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an PHỤ LỤC 1.MÔI TRƢỜNG Pha chế: Cân hóa chất đong nước biển, khuấy cho hịa tan hóa chất Chình pH đến 8,0 ± 0,1 Bổ sung agar vào mơi trường, rót 300 ml mơi trường vào bình có dung tích 500 ml Khử trùng môi trường nồi khử trùng nhiệt ướt nhiệt độ 121oC 20 phút, sau khử trùng xong, môi trường để nguội khoảng 60oC cho vào mơi trường 300 µg kháng sinh loại (streptomycin amicillin), lắc cho kháng sinh hòa tan hết đổ môi trường vào đĩa petri, đĩa khoảng 15-20 ml môi trường Mở nắp đĩa để môi trường tự đông hạn chế nước đọng bề mặt đĩa, bật UV 15p sau đóng nắp đĩa, úp ngược lại cho vào túi nilon buộc chặt bảo quản nhiệt độ phịng CÁC HÌNH ẢNH Hình 6: Khuẩn lạc nấm dịng HD24cG Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Hình 7: Khuẩn lạc dịng ND8aG Hình 8: Khuẩn lạc dịng ND2aLB Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Hình 9: Khuẩn lạc dịng ND2cLB Hình 10: Khuẩn ty dòng ND2aLB Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Hình 11: Khuẩn ty bào tử dịng ND5bLB Hình 12: Khuẩn ty dòng HD27aG Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Hình 13: Khuẩn ty dịng HD24aG Hình 14: Dịng ND8G (số 3) HD16cG (số 4) kháng nấm men Candida Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Hình 15: Dịng HD16dG kháng vi khuẩn Salmonella enterica chủng Hình 16: Dòng HD27 aG kháng vi khuẩn Bacillus cereus chủng Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn