PHÂN LẬP VÀ TUYỂN CHỌN MỘT SỐ DÒNG NẤM MỐC TRONG HẢI MIÊN Ở VÙNG BIỂN HÀ TIÊN TỈNH KIÊN GIANG

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ VIỆN NGHIÊN CỨU VÀ PHÁT TRIỂN CÔNG NGHỆ SINH HỌC LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC CHUYÊN NGÀNH VI SINH VẬT HỌC PHÂN LẬP VÀ TUYỂN CHỌN MỘT SỐ DÒNG NẤM MỐC TRONG HẢI MIÊN Ở VÙNG BIỂN HÀ TIÊN, TỈNH KIÊN GIANG Cần Thơ, 12/2015 TÓM TẮT Nấm mốc nhóm vi sinh vật có hoạt tính kháng sinh cao, có nhiều dịng nấm mốc ứng dụng rộng rãi đời sống Đề tài “Phân lập tuyển chọn số dòng nấm mốc hải miên vùng biển Hà Tiên, tỉnh Kiên Giang” nhằm mục đích phân lập tuyển chọn dòng nấm mốc sản sinh hợp chất có khả kháng khuẩn Trong phạm vi khảo sát đề tài phân lập 33 dòng nấm mốc môi trường phân lập Glucose Peptone Yeast Extract Agar, Gause 1, Luria Bertani Agar Trong có 22 dịng có nguồn gốc từ Hịn Rễ Lớn, dịng có nguồn gốc từ Hịn Núi Đèn, dịng có nguồn gốc từ Hịn Kiến Vàng dịng có nguồn gốc từ Hịn Rễ Nhỏ Các dịng nấm mốc sau phân lập tiến hành khảo sát khả sinh hoạt tính kháng khuẩn với dịng vi sinh vật kiểm định Dựa vào đường kính vịng vơ khuẩn chọn 18 dịng nấm mốc tạo vịng vơ khuẩn đĩa petri trãi vi khuẩn kiểm định Trong có 12 dịng có nguồn gốc từ Hịn Rễ Lớn, dịng có nguồn gốc từ Hịn Núi Đèn, dịng có nguồn gốc từ Hịn Kiến Vàng Từ khóa: Hải miên, hoạt tính kháng sinh, nấm mốc, phân lập, vùng biển Hà Tiên i MỤC LỤC TÓM LƢỢC i MỤC LỤC ii DANH SÁCH B ẢNG iv DANH SÁCH HÌNH v DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT vi CHƢƠNG I: GIỚI THIỆU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục tiêu đề tài CHƢƠNG II: LƢỢC KHẢO TÀI LIỆU 2.1 Giới thiệu chung hải miên 2.2 Giới thiệu chung nấm mốc 2.2.1 Hình thái c nấm mốc 2.2.2 Khuẩn lạc nấm mốc 2.2.3 Cấu tạo nấm mốc 2.2.4 Đặc điểm sinh lý, sinh hóa 2.2.5 Phân loại nấm mốc 2.2.6 Các hình thức sống sinh sản nấm mốc 2.2.6.1 Hình thức sống nấm mốc 2.2.6.2 Sinh sản nấm mốc 2.2.7 Chất kháng sinh từ nấm sợi 12 2.2.7.1 Những đặc điểm chất kháng sinh 12 2.2.7.2 Khả sinh kháng sinh nấm sợi 13 2.2.8 Vai trò ứng dụng nấm mốc 15 CHƢƠNG III: PHƢƠNG TIỆN VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 17 3.1 PHƢƠNG TIỆN THÍ NGHIỆM .17 3.1.1 Địa điểm thời gian nghiên cứu 17 ii 3.1.2 Vật liệu thí nghiệm 17 3.1.3 Dụng cụ, thiết bị 17 3.1.4 Môi trường .17 3.2 PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 18 3.2.1 Phân lập nấm mốc 18 3.2.1.1 Thu mẫu 19 3.2.1.2 Phương pháp phân lập 19 3.2.1.3 Quan sát khuẩn lạc 19 3.2.2 Kiểm tra khả kháng khuẩn nấm sợi 22 3.2.2.1 Nguyên tắc .22 3.2.2.2 Tiến hành thí nghiệm 22 3.2.2.3 Kiểm tra kết 22 3.3 SƠ TUYỂN NẤM MỐC 22 CHƢƠNG IV: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN .23 4.1 Kết phân lập dòng nấm mốc từ hải miên 23 4.1.1 Kết phân lập từ mẫu hải miên 23 4.1.2 Kết quan sát khuẩn lạc 23 4.2 Kết thử nghiệm hoạt tính kháng sinh 29 4.2.1 Kết thử nghiệm hoạt tính kháng khuẩn 29 4.2.2 Tuyển chọn dịng nấm có khả tạo hoạt tính kháng khuẩn cao 32 CHƢƠNG V: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 35 5.1 Kết luận 35 5.2 Kiến nghị .35 TÀI LIỆU THAM KHẢO 36 PHỤ LỤC iii C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an DANH SÁCH BẢNG Bảng 1: Môi trường Glucose Peptone Yeast Extract Agar (GPY) 18 Bảng 2: Môi trường Gause 18 Bảng 3: Môi trường Luria Bertani Agar (LB) 19 Bảng 4: Nấm mốc phân lập từ hải miên .23 Bảng 5: Đặc điểm khuẩn lạc dòng nấm mốc phân lập .24 Bảng 6: Đặc điểm hiển vi dòng nấm phân lập .27 Bảng 7: Kết thí nghiệm theo dõi khả đối kháng VSV kiểm định môi trường LB 30 Bảng 8: Các dòng nấm mốc đường kính vịng vơ khuẩn mơi trường LB 32 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn iv C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an DANH SÁCH HÌNH Hình 1: Hải miên Hình 2: Khuẩn ty nấm mốc có vách ngăn .3 Hình 3: Khuẩn lạc nấm mốc Hình 4: Một số dạng khuẩn lạc nấm Hình 5: Cấu tạo tế bào đỉnh sợi nấm Fusarium Hình 6: Nấm mốc số nông sản sản phẩm Hình 7: Bảo tử túi (b) nấm Mucor circinelloides a cuống bào tử túi Hình 8: Nấm Aspergillus với khuẩn ty, bào tử, cọng bào tử, túi thể bình 10 Hình 9: Nấm Penicillium với cọng bào tử, đính bào tử, cán, thể bình vẽ, thể bình 11 Hình 10: Sinh sản hữu tính nấm Penicillium vermiculatus 12 Hình 11: Mẫu hải miên 19 Hình 12: Khuẩn lạc dịng GL3 24 Hình 13: Khuẩn lạc dịng L2 24 Hình 14: Khuẩn lạc dòng L3 26 Hình 15: Khuẩn lạc dòng L10 26 Hình 20: Vịng vơ khuẩn dịng GL6 tạo vi khuẩn E.coli chủng 30 Hình 21: Vịng vơ khuẩn dịng L5 (phía bên trái) chủng L10 30 Hình 22: Các dịng nấm mốc – YL3; – YL6; – YD1; – YV1 tạo vịng vơ khuẩn vi khuẩn Edwarsiella ictaluri chủng 33 Hình 23: Các dịng nấm mốc – L1; – LD1; – LV3; – L1 tạo vịng vơ khuẩn nấm men Candida albicans 33 Hình 24: Cọng bào tử bào tử dòng LD1 33 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn v C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT CKS Chất kháng sinh GPY Glucose Peptone Yeast Extract Agar G1 Gause LB Luria Bertani Agar mL Milliliter NST Nhiễm sắc thể PTN Phịng thí nghiệm VSV Vi sinh vật NC & PT CNSH Nghiên cứu Phát triển Công nghệ Sinh học Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn vi C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an CHƢƠNG I: GIỚI THIỆU 1.1 Đặt vấn đề Trong lịch sử, vi sinh vật nguyên nhân giết chết nhiều người giới Cho đến năm 1928, penicillin kháng sinh Alexander Fleming phát cứu sống nhiều người mở đường để tiêu diệt vi sinh vật Nhưng theo quy luật phát triển chọn lọc tự nhiên tượng kháng kháng sinh ngày trở thành mối lo sợ, số lồi vi sinh vật có khả thích nghi nhanh với môi trường cách đột biến sản sinh enzyme phù hợp chống thuốc, đặc biệt vi khuẩn Trong năm gần đây, nhiều nghiên cứu việc kháng kháng sinh số vi sinh vật gây bệnh người động vật trọng Việc ly trích hợp chất có hoạt tính sinh học cao từ động vật, thực vật nghiên cứu nhiều Tuy nhiên, nghiên cứu gặp nhiều khó khăn mang lại kết khơng mong muốn Với tình hình này, việc tìm vi sinh vật bên loài sinh vật biển nhà nghiên cứu quan tâm Hải miên (Sponge) động vật đa bào, biết đến khả lọc nhiều nước đặc biệt chất độc hại lưu tồn nước Hải miên đại diện cho lồi sinh vật biển có sức đề kháng cao, có khả kháng độc mạnh Sự phân bố chúng đa dạng, chúng sống nhiều nguồn nước khác điều kiện khắc nghiệt, số lượng loài lớn vật chủ lý tưởng nhiều vi sinh vật cộng sinh bên trong, đặc biệt nấm mốc Vì vậy, hải miên xem tiềm sinh học lớn Hiện nay, nước cịn cơng trình nghiên cứu hải miên, nên cần nghiên cứu tìm hiểu, phân lập vi sinh vật có hoạt tính kháng sinh hải miên để ứng dụng Vì vậy, đề tài “Phân lập tuyển chọn số dòng nấm mốc Hải miên vùng biển Hà Tiên, tỉnh Kiên Giang” thực 1.2 Mục tiêu đề tài Phân lập tuyển chọn số dòng nấm mốc diện bên hải miên có khả kháng khuẩn Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an CHƢƠNG II: LƢỢC KHẢO TÀI LIỆU 2.1 Giới thiệu chung hải miên Hình 1: Hải miên (*Nguồn: http://www.apacy.com/sea-sponge) Hải miên (Phylum Porifera) động vật sống lâu ổn định, chúng tồn 700 ÷ 800 triệu năm với vận tốc sinh trưởng khác tùy lồi Hải miên động vật khơng xương sống, đa bào, thức ăn chủ yếu phiêu sinh môi trường nước biển nước Hải miên khơng có mơ hồn chỉnh có loại tế bào khác với chức khác thực chức bình thường thể Bên cạnh đó, chúng sản xuất chất trao đổi để xua đuổi ngăn cản lồi ăn thịt, cạnh tranh khơng gian với lồi khơng cuống khác để liên lạc hay chống lại nhiễm bệnh Hải miên vật chủ cộng đồng vi sinh vật lớn vai trò vi sinh vật thay đổi theo nguồn dinh dưỡng cộng sinh, hỗ sinh với hải miên, nguồn giàu sản phẩm tự nhiên có giá trị polyketide, nonribosomal peptide, alkaloid nhằm xua đuổi ngăn chặn động vật ăn thịt, tranh giành khơng gian với lồi khơng cuống (sesile) khác, để liên lạc bảo vệ không bị nhiễm bệnh Rất nhiều hợp chất có hoạt tính độc tế bào (cytotoxic), kháng khuẩn, kháng nấm, kháng virus chống viêm Hải miên có cộng đồng vi sinh vật đa dạng mơ chúng Sự đa dạng giải thích thay đổi điều kiện lý, hóa, sinh hải miên, ảnh hưởng đến sinh thái vi sinh vật chiếm đến 50% thể tích hải miên số lớn ÷ Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an lần so với lượng vi khuẩn nước biển (Wang, 2006) cộng đồng đặc hiệu cho hải miên 2.2 Giới thiệu chung nấm mốc 2.2.1 Hình thái nấm mốc Nấm mốc vi sinh vật nhân thật, thể tản, tế bào khơng có diệp lục tố, sống dị dưỡng (hoại sinh, ký sinh, cộng sinh) Phần lớn nấm có cấu tạo hình sợi phân nhánh, tạo thành hệ sợi chằng chịt phát triển nhanh gọi khuẩn ty (sợi nấm) Sợi nấm khơng có vách ngăn hay có vách ngăn Sợi nấm thường có hình trụ Đường kính kích thước khác tùy tường lồi, thơng thường t ữ àm, cú n 1mm Chiu dài sợi nấm tới vài chục centimet Nấm mốc có loại khuẩn ty với chiều ngang ca khun ty thay i t ữ 10 àm Hình 2: Khuẩn ty nấm mốc có vách ngăn ngang Hệ sợi nấm mốc có số ăn sâu vào chất hút thức ăn làm nhiệm vụ nuôi dưỡng gọi khuẩn ty chất hay khuẩn ty dinh dưỡng Những lông tơ màu trắng, mọc thành lớp sợi mềm mang cuống bào tử làm nhiệm vụ sinh sản gọi khuẩn ty khí sinh Màu sắc bào tử đặc trưng cho màu sắc khuẩn lạc nấm mốc già Phần lớn nấm sợi không màu, suốt, số nấm, sợi nấm mang sắc tố có màu sáng hay màu tối Một số sắc tố tiết bên ngồi mơi trường làm thay đổi màu quanh mơi trường có nấm phát triển Một số nấm tiết chất hữu tạo nên tinh thể bề mặt khuẩn lạc Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt Bùi Xuân Đồng (2004) Nguyên lý phòng chống nấm mốc & mycotoxin NXB Khoa học Kỹ thuật Hà Nội Cao Ngọc Điệp, Nguyễn Văn Thành (2010) Giáo trình Nấm học Đặng Vũ Hồng Miên (1999) Bảng phân loại loài nấm mốc thường gặp NXB Khoa học Kỹ thuật Hà Nội Lê Xuân Phương (2001) Vi sinh vật công nghiệp NXB Xây dựng ĐH Đà Nẵng Lương Đức Phẩm (2007) Công nghệ vi sinh vật NXB Nông Nghiệp Lương Đức Phẩm, Hồ Sưởng (1978) Vi sinh tổng hợp NXB Khoa học Kỹ thuật Hà Nội Nguyễn Đức Lượng, Nguyễn Chúc, Lê Văn Việt Mẫn (2001) Thực tập vi sinh vật học Trường Đại học Kỹ Thuật Thành phố Hồ Chí Minh Nguyễn Lân Dũng (1983) Một số sản phẩm vi nấm NXB Khoa học Kỹ thuật Hà Nội Nguyễn Lân Dũng, Nguyễn Đình Quyến, Phạm Văn Ty (1998) Vi sinh vật học NXB Giáo Dục Nguyễn Lân Dũng Vi sinh vật tổng hợp NXB Khoa học Kỹ thuật Hà Nội Nguyễn Thành Đạt (2005) Cơ sở sinh học vi sinh vật Tập 1,2 NXB Y học, Hà Nội Nguyễn Xuân Thành, Nguyễn Như Thành, Dương Đức Tiến (2004) Vi sinh vật nông nghiệp NXB Đại học Sư Phạm Trần Thị Thanh (2007) Công nghệ vi sinh NXB Giáo Dục Tiếng anh Bo Ding, Ying Yin, Fengli Zhang, Zhiyong Li 2009 Recovery and Phylogenetic Diversity of Culturable Fungi Associated with Marine Sponge Clathrina luteoculcitella and Holoxea sp in the South China Sea Mar Biotechnol 13: 713 – 721 Bhat KM, Hay AJ, Claeyssens M, Wood TM 1990 Study of the mode of action and site-specificity of the endo-(1-4)-beta-D-glucanases of the fungus Penicillium Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 36 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an pinophilum with normal, 1-3H-labelled, reduced and chromogenic cello oligosaccharides Biochem J 266: 371-378 Blehert DS, Hicks AC, Behr M, Meteyer CU, Berlowski-Zier BM, Buckles EL, Coloman JT, Darling SR, Gargas A, Niver R, Okoniewski JC, Rudd RJ, Stone WB 2009 Science 227 – 323 Blunt JW, Copp BR, Hu WP, Munro MH, Northcote PT, Prinsep MR 2007 Marine natural products Nat Prod Rep 24: 31 – 86 Bridge PD, Newsham KK 2009 Soil fungal community composition at Mars Oasis, a southern maritime Antarctic site, assessed by PCR amplification and cloning Fungal Ecol 2: 66 – 74 Bugni PS, Ireland CM 2004 Marine-derived fungi: a chemically and biologically diverse group of microorganisms Nat Prod Rep 21: 143 – 163 Chen BE, Zhang SL 2006 Antimicrobial characteristics of marine fungi Aspergillus sp MF 134 J Huaqiao Univ 27: 307 – 309 Coker PS, Radecke J, Guy C, Camper ND 2003 Potato disc tumor induction assay: a multiple mode of drug action assay Phytomed 10: 133 – 138 Coral G, Burhan A, Unaldi M, Guvenmez H 2002 Some properties of crude carboxymethyl cellulase of Aspergillus niger Z10 wild-type strain Turk J Biol 26: 209-213 Dahot M, Noomrio M 1996 Microbial production of cellulase by Aspergillus fumigatus using wheat straw as a carbon sourc., J Islamic Acad Sci 9: 119 -124 Frisvad JC, Samson RA 2004 Polyphasic taxonomy of Penicillium subgenus Penicillium: A guide to identification of food and air-borne terverticillate Penicillia ans their mycotoxins Stud Mycol 49: – 174 Gao Q, Yang ZL 2010 Ectomycorrhizal fungi associated with two species of Kobresia in an alpine meadow in the eastern Himalaya Mycorrhiza 20: 281 – 287 Gao Z, Li B, Zheng C, Wang G 2008 Molecular detection of fungal commu in the Hawaiian marine sponges Suberites zeteki and Mycale armata Appl Environ Microbiol 74: 6091 – 6101 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 37 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Grasso S, Bruni V, Maio G 1997 Marine fungi in Terra Nova Bay New Microbiol 20: 371 – 376 Han XX, Xu XY, Cui CB, Gu QQ 2007 Diketopiperazines produced by marinederived Aspergillus fumigatus H1-04 anf their antiumor activities Chin I Med Chem 17: 155 – 159 Jan Vicente, Allison Stewart, Bongkeun Song, Russell T Hill, Jeffrey L Wright 2012 Biodiversity of Actinomycetes Associated with Caribbean Sponges and Their Potential for Natural Product Discovery Mar Biotechnol 15: 413 – 424 Jutta Wiese 2011 Phylogenetic Identification of Fungi Isolated from the Marine Sponge Tethya aurantium and Identification of Their Secondary Metabolites Mar Durgus 9: 561 – 585 Li CS, Li XM, Gao SS, Lu YH, Wang BG 2013 Cytotoxic anthranilic acid derivatives from deep sea sedimet-derived fungus Penicillium paneum SD-44 Mar Drugs 11: 3068 – 3076 Li Q, Wang G 2009 Diversity of fungal isolates from three Hawaiin marine sponges Microbiol Res 164: 231 – 235 Liu WC, Li CQ, Zhu P, Yang JL, heng KD 2010 Phylogenetic diversity of culturable fungi associated with two marine sponges: Haliclona simulans and Gelliodes carnosa, collected from the Hainan Island coastal waters of the South China Sea Fungal Div 42: – 15 Marlene Heríquez, Karen Vgara, J Norambuena, A Beiza, F Maza, P Ubilla, I Araya, Renato Chávez, Aurelio San-Martín, José Darias, María J Darias, Inmaculada Vaca 2013 Diversity of cultivable fungi associated with Antarctic marine sponges and screening for their antimicrobial, antitumoral and antioxidant potential World J Microbiol Biotechnol 30: 65 – 76 Mojtaba Mohseni, Hamed Norouzi, Javad Hamedi, Aboulghasem Roohi 2013 Screening of Antibacterial Producing Actinomycetes from Sediments of the Caspian Sea Spring Vol 2, No Quanzi Li, Guangyi Wang 2007 Diversity of fungal isolates from three Hawaiian marine sponges Microbiological Research 164: 233 – 241 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 38 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Raper K B, Fennell D L 1965 The Gennus Aspergillus, Baltimore USA William and Wilkins, Preston street baltimore Md 21202 USA p.570 Robert A Samson and Ellen S.Hoekstra, Jens C Frisvad and Filtenborg 1996 Introduction to Food- borne Fungi Centraalbureau voor Schimmelcutues Baarl Delftm (3,4) 52- 83 Sambrook J and Russell D.W 2001 Molecular Cloning: A Laboratory Manual, rd ed, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor New York Shen S, Li W, Ouyang MA, Wu ZL, Lin QY, Xie LH 2009 Identification of two marine fungi and evaluation of their antivirus anf antiumor activities Microbial 49: 1240 – 1246 Shuo Shen, WeiLi, Jian Wang 2014 Antimicrobial and antitumor activities of crude secondary metabolites from a marine fungus Penicillium Oxalicum 312F1 African Journal of Microbiology Research (Vol 8) pp 1480 – 1485 Thomas J Montville & Karl R Matthew 2005 Food Microbiology an Introduction Asm Press pp 272-276 Verschuere L., Rombaut G., Sorgeloos P and Verstraete W 2000 Probiotic bacteria as biological control agents in aquaculture Microbiology & Molecular Biology Reviews Vol.64 pp 655-671 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 39 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an PHỤ LỤC MÔI TRƢỜNG 1.1 Mơi trƣờng Glucose Peptone Yeast Extract Agar thích hợp cho nhiều loài nấm mốc Bảng 9: Thành phần môi trƣờng Đường D-glucose 1,0 g Peptone 0,5 g Yeast Extract 0,1 g NaCl 3g Agar 15 g Nước biển lít pH 8,0 Pha chế: Cân hóa chất, khuấy đến hịa tan chất Sau chỉnh pH đến 8,0 ± 0,1 Bổ sung agar vào môi trường, rót 300 mL vào bình chứa có dung tích 500 mL Đem khử trùng nồi hấp nhiệt độ 121 oC/20 phút Sau lấy ra, môi trường để nguội khoảng 45 oC ± o C cho 300 µg loại kháng sinh (streptomycin ampicilin) vào mơi trường, lắc cho kháng sinh hịa tan hết đổ vào đĩa petri, đĩa 15 – 20 mL thạch Mở nắp đĩa để thạch đơng tự nhiên, bật UV 15 phút sau đóng nắp, lật ngược đĩa cho vào túi nylong buộc chặt, bảo quản nhiệt độ phịng khơng q 10 ngày 1.2 Môi trƣờng GAUSE Bảng 10: Thành phần môi trƣờng Tinh bột 20 g KNO3 1g K2 HPO 0,5 g MgSO4 7H2 O 0,5 g Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn Chuyên ngành Vi sinh vật hoc Viện NC&PT Công nghệ Sinh học C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an NaCl 0,5g FeSO 0,01g Difco-Bacto agar pH 15g 7,2 – 7,4 1.3 Môi trƣờng LB Bảng 11: Thành phần môi trƣờng Tryptone 10g Yeast Extract 5g Sodium chloride 10g Agar 7g pH 7.2 (*Nguồn: Sambrook and Russell, 2001, Gerhardt et a., 1994) 1.4 Môi trƣờng LB lỏng Bảng 12: Thành phần môi trƣờng Tryptone 10g Yeast Extract 5g NaCl 10g pH 7,2 Hình đại thể, vi thể dòng nấm mốc phân lập đƣợc Hình 25: Bào tử cuống bào tử dòng GL2 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn Chuyên ngành Vi sinh vật hoc Viện NC&PT Công nghệ Sinh học C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Hình 26: Bào tử cọng bào tử dịng GL3 Hình 27: Cuống bào tử dịng GL3 Hình 28: Khuẩn ty dòng GV1 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn Chuyên ngành Vi sinh vật hoc Viện NC&PT Công nghệ Sinh học C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Hình 29: Bào tử khuẩn ty dịng GL5 Hình 30: Cọng bào tử dịng GL5 Hình 31: Khuẩn ty dòng L1 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn Chuyên ngành Vi sinh vật hoc Viện NC&PT Công nghệ Sinh học C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Hình 32: Cọng bào tử dịng L1 Hình 33: Cọng bào tử dòng L10 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn Chuyên ngành Vi sinh vật hoc Viện NC&PT Công nghệ Sinh học C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Hình 34: Cọng bào tử thể bình dịng L2 Hình 35: Cọng bào tử thể bình dịng L2 Hình 36: Cọng bào tử bào tử dòng L3 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn Chuyên ngành Vi sinh vật hoc Viện NC&PT Công nghệ Sinh học C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Hình 37: Khuẩn ty dịng L5 Hình 38: Cọng bào tử bào tử dịng L5 Hình 39: Khuẩn\ lạc dòng GL1 Phƣơng pháp thử nghiệm hoạt tính kháng sinh nấm mốc Ni vi sinh vật kiểm định (VSV kiểm định): Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn Chuyên ngành Vi sinh vật hoc Viện NC&PT Công nghệ Sinh học C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Chuẩn bị môi trường LB lỏng ống nghiệm 10 mL, hấp khử trùng 121 o C/20 phút Để môi trường nguội tự nhiên, sau cấy ni tăng sinh vi sinh vật kiểm định, ủ 24 ÷ 72 28 o C ÷ 30 oC (thích hợp với loại vi sinh vật) Thử hoạt tính kháng sinh: Trên đĩa thạch LB pha chế nước cất, dùng micropipet hút 100 µL dịch nuôi tăng sinh VSV kiểm định, trãi que cấy Mỗi dòng nấm cần thử nghiệm loại VSV kiểm định, đĩa thạch trải VSV kiểm định thử nghiệm bốn dòng khác Dùng kim cấy lấy khuẩn ty bào tử nấm mốc (bao gồm thạch) cấy trực tiếp vào đĩa trãi VSV kiểm định, ủ 24 ÷ 48 nhiệt độ 28 oC ÷ 30 o C thích hợp cho loại VSV kiểm định Sau quan sát ghi nhận kết dòng nấm tạo vịng vơ khuẩn (+), tiến hành đo đạc đường kính vịng vơ khuẩn Hình ảnh dịng nấm tạo vịng vơ khuẩn VSV kiểm định Hình 40: Các dòng nấm mốc – GV1 (9 mm) ; – GL5 (19 mm); – GL2 (20 mm); – GL4 ( – ) tạo vịng vơ khuẩn vi khuẩn Edwarsiella ictaluri chủng Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn Chuyên ngành Vi sinh vật hoc Viện NC&PT Công nghệ Sinh học C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Hình 41: Các dịng nấm mốc – LV2 (–); – L9 (8 mm); – L8 (–); – GL1 (–) tạo vịng vơ khuẩn vi khuẩn Salmonella enterica Hình 42: Các dòng nấm mốc – YL1 (20 mm); – YD2 (18 mm); – YL4 (20 mm); – YL5 ( 18 mm) tạo vịng vơ khuẩn vi khuẩn Salmonella enterica Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn Chuyên ngành Vi sinh vật hoc Viện NC&PT Công nghệ Sinh học C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Hình 43: Các dịng nấm mốc – L1 (19 mm); – LD1 (20 mm); – LV3 (–); – L10 (19 mm) tạo vịng vơ khuẩn vi khuẩn Candida albicans Hình 44: Các dịng nấm mốc – YD3 (10 mm); – L5 (18 mm); – GD1 (–); – L7 (–) tạo vịng vơ khuẩn vi khuẩn Candida albicans Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn Chuyên ngành Vi sinh vật hoc Viện NC&PT Công nghệ Sinh học C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn