Tiếp tục nghiên cứu bào chế viên nén clarithromycin giải phóng kéo dài 24 giờ khoá luận tốt nghiệp dược sĩ

BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI ĐỖ HÀ PHƯƠNG TIẾP TỤC NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ VIÊN NÉN CLARITHROMYCIN GIẢI PHĨNG KÉO DÀI 24 GIỜ KHỐ LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ HÀ NỘI – 2023 BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI ĐỖ HÀ PHƯƠNG Mã sinh viên: 1801548 TIẾP TỤC NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ VIÊN NÉN CLARITHROMYCIN GIẢI PHĨNG KÉO DÀI 24 GIỜ KHỐ LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ Người hướng dẫn: GS.TS Nguyễn Ngọc Chiến Nơi thực hiện: Viện Công nghệ Dược phẩm Quốc Gia HÀ NỘI – 2023 LỜI CẢM ƠN Với lòng kính trọng lịng biết ơn sâu sắc, em xin gửi lời cảm ơn chân thành đến thầy GS.TS Nguyễn Ngọc Chiến, người thầy tận tình dạy, truyền đạt kinh nghiệm quý báu để em hồn thành khóa luận tốt nghiệp Em xin gửi lời cảm ơn chân thành tới thầy TS Trần Ngọc Bảo động viên, giúp đỡ tạo điều kiện thuận lợi cho em suốt trình làm thực nghiệm Em xin chân thành cảm ơn tồn thể thầy giáo, anh chị kĩ thuật viên, bạn sinh viên khóa K73 em sinh viên khóa K74, K75 nghiên cứu khoa học thực khóa luận Viện Cơng nghệ Dược phẩm Quốc Gia Khoa Bào chế Công nghệ Dược phẩm, giúp đỡ tạo điều kiện thuận lợi cho em trình làm thực nghiệm hồn thành khóa luận Em gửi lời cảm ơn tới Ban giám Hiệu nhà trường, Phòng Đào tạo phịng ban khác, thầy cán nhân viên trường Đại học Dược Hà Nội dạy bảo, tạo điều kiện giúp đỡ em suốt trình học tập nghiên cứu Cuối cùng, em xin bày tỏ biết ơn sâu sắc vơ hạn tới gia đình, người thân bạn bè ln động viên, khuyến khích giúp đỡ em suốt thời gian qua Hà Nội, ngày 01 tháng 06 năm 2023 Sinh viên Đỗ Hà Phương MỤC LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC CÁC BẢNG DANH MỤC CÁC HÌNH ẢNH VẼ, ĐỒ THỊ ĐẶT VẤN ĐỀ .1 CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1.Đại cương Clarithromycin 1.1.1 Công thức cấu tạo 1.1.2 Tính chất lý hóa .2 1.1.3 Độ ổn định 1.1.4 Đặc điểm dược động học .3 1.1.5 Dược lý chế tác dụng 1.1.6 Chỉ định, liều dùng cách dùng 1.1.7 Một số chế phẩm chứa Clarithromycin thị trường 1.2.Thuốc giải phóng kéo dài 1.2.1 Khái niệm .5 1.2.2 Ưu nhược điểm thuốc giải phóng kéo dài .5 1.2.3 Một số hệ thuốc giải phóng kéo dài chế giải phóng dược chất 1.2.4 Sơ lược hệ cốt thân nước giải phóng kéo dài 1.2.5 Một số tá dược thường sử dụng hệ cốt thân nước giải phóng kéo dài.…… .7 1.3.Một số nghiên cứu dạng thuốc giải phóng kéo dài chứa Clarithromycin 10 CHƯƠNG : NGUYÊN LIỆU, THIẾT BỊ, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .12 2.1.Nguyên vật liệu, thiết bị 12 2.1.1 Nguyên vật liệu 12 2.1.2 Thiết bị nghiên cứu .13 2.1.3 Đối tượng nghiên cứu 13 2.2.Nội dung nghiên cứu 13 2.3.Phương pháp nghiên cứu 14 2.3.1 Phương pháp định lượng Clarithromycin 14 2.3.2 Phương pháp bào chế viên nén Clarithromycin 500 mg GPKD .15 2.3.2.1 Phương pháp đánh giá độ ổn định CLR mơi trường thử hịa tan… 15 2.3.2.2 Phương pháp đánh giá tương tác dược chất với tá dược 15 2.3.2.3 Phương pháp bào chế viên nén Clarithrmycin 500 mg GPKD dạng cốt thân nước quy mô 50 viên/ lô quy mô 2000 viên/lô .15 2.3.3 Phương pháp đánh giá chất lượng kiểm sốt quy trình .18 2.3.3.1 Phương pháp đánh giá chất lượng 18 2.3.3.2 Phương pháp kiểm soát số giai đoạn quy trình sản xuất lơ 2000 viên …………………………………………………………… ………….21 2.3.4 Phương pháp đánh giá độ ổn định 22 2.3.5 Phương pháp xử lý số liệu 22 CHƯƠNG : THỰC NGHIỆM, KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 23 3.1.Kết thẩm định phương pháp định lượng dược chất viên nén Clarithromycin 500 mg GPKD 23 3.2.Nghiên cứu độ ổn định dược chất môi trường tương tác dược chất với tá dược 24 3.2.1 Kết đánh giá độ ổn định theo thời gian CLR môi trường… 24 3.2.2 Kết đánh giá tương tác CLR với tá dược 24 3.3.Kết xây dựng công thức viên nén CLR 500 mg GPKD dạng cốt thân nước quy mô 50 viên/ lô 26 3.3.1 Đánh giá độ hòa tan viên nén đối chiếu Klacid®MR 500 mg .26 3.3.2 Khảo sát ảnh hưởng số yếu tố thuộc công thức đến khả kiểm sốt giải phóng 27 3.3.2.1 Ảnh hưởng tỷ lệ tá dược A đến q trình giải phóng dược chất 27 3.3.2.2 Ảnh hưởng tỷ lệ hạt/ hạt HPMC K100LV đến q trình giải phóng dược chất 28 3.3.2.3 Ảnh hưởng tỷ lệ tá dược B đến trình kiểm sốt giải phóng 31 3.4.Kết bào chế viên nén CLR 500 mg GPKD 24 quy mô 2000 viên/ lô ……… 34 3.4.1 So sánh kết lô 50 viên lô 2000 viên 34 3.4.2 Kết kiểm soát giai đoạn bào chế 36 3.4.2.1 Kết kiểm soát giai đoạn tạo hạt 36 3.4.2.2 Kết kiểm soát giai đoạn trộn hoàn tất 37 3.4.2.3 Kết kiểm soát giai đoạn dập viên 38 3.4.2.4 Kết kiểm soát giai đoạn bao 39 3.5.Đánh giá sơ độ ổn định viên nén Clarithromycin 500 mg GPKD 24 giờ… 41 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT 43 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT ALG : Alginat BP : Dược điển Anh (British pharmacopoeia) CLR CQ : Clarithromycin : Gôm hạt điều CT ĐC : Công thức : Đối chiếu DĐVN EtOH GPDC : Dược điển Việt Nam V : Ethanol : Giải phóng dược chất GPKD HL : Giải phóng kéo dài : Hàm lượng HPLC HPMC MCC MeOH Mgst NaCMC : Sắc ký lỏng hiệu cao (High performance liquid chromatography) : Hydroxy carboxy methyl celulose : Cellulose vi tinh thể : Methanol : Magnesi stearat : Natri carboxy methyl cellulose NaLS PEG : Natri lauryl sulfat : Polyethylen glycol PEO PVP RSD SD SDPD TCCS TKHH : Polyethylen oxyd : Polyvinyl pyrolidon : Độ lệch chuẩn tương đối : Độ lệch chuẩn : Sodium Dihydrogen Phosphate Dihydrat : Tiêu chuẩn sở : Tinh khiết hóa học USP : Dược điển Mỹ (United states pharmacopeia) DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 2.1 Nguyên liệu hóa chất dùng nghiên cứu 12 Bảng 2.2 Thiết bị sử dụng nghiên cứu 13 Bảng 2.3 Công thức dự kiến viên nén Clarithromycin 500 mg GPKD 24 15 Bảng 3.1 Kết thẩm định phương pháp định lượng CLR .23 Bảng 3.2 Kết thử độ ổn CLR môi trường 24 24 Bảng 3.3 Kết đánh giá tương tác CLR với tá dược .25 Bảng 3.4 Công thức khảo sát tỷ lệ tá dược A 27 Bảng 3.5 Cơng thức khảo sát tỷ lệ hạt/ ngồi hạt HPMC K100 LV 29 Bảng 3.6 Kết F2 thử hòa tan từ mẫu viên chứa tỷ lệ HPMC K100LV hạt/ ngồi hạt mơi trường pH 6,8 29 Bảng 3.7 Kết thử hòa tan CT P8 môi trường pH 4,5 30 Bảng 3.8 Công thức khảo sát ảnh hưởng tỷ lệ tá dược B (ngồi hạt) đến kiểm sốt giải phóng CLR .31 Bảng 3.9 Kết thử hòa tan từ mẫu viên tỷ lệ Tá dược B khác môi trường pH 6,8 .32 Bảng 3.10 Kết thử hòa tan CT P10, P11 P12 môi trường pH 4,5 33 Bảng 3.11 Kết hệ số tương đồng CT P11 lô môi trường đệm phosphat pH 6,8 .35 Bảng 3.12 Kết hệ số tương đồng CT P11 lô môi trường đệm acetat pH 4,5 35 Bảng 3.13 Kết độ ẩm cốm lô 36 Bảng 3.14 Kết phân bố kích thước hạt lơ cốm .36 Bảng 3.15 Kết khối lượng riêng biểu kiến lô .37 Bảng 3.16 Kết đo độ trơn chảy 37 Bảng 3.17 Hàm lượng CLR 10 vị trí khác sau trộn hoàn tất 38 Bảng 3.18 Kết lực gây vỡ viên trình dập viên thời điểm 38 Bảng 3.19 Kết đồng khối lượng trình dập viên 39 Bảng 3.20 Kết kiểm sốt khối lượng viên bao q trình bao viên .39 Bảng 3.21 Kết đánh giá độ đồng khối lượng sau trình bao 39 Bảng 3.22 Kết định lượng hàm lượng CLR viên nén sau dập sau bao 40 Bảng 3.23 Kết thử hịa tan cơng thức lô môi trường pH 6,8 40 Bảng 3.24 Kết thử hịa tan cơng thức lơ môi trường pH 4,5 41 Bảng 3.25 Kết định lượng viên nén sau tháng lão hóa cấp tốc 42 Bảng 3.26 Kết thử hịa tan lơ sau tháng lão hóa cấp tốc 42 DANH MỤC CÁC HÌNH ẢNH VẼ, ĐỒ THỊ Hình 1.1 Cơng thức cấu tạo Clarithromycin Hình 1.2 Phản ứng phân hủy CLR mơi trường pH thấp Hình 1.3 Đồ thị biểu diễn hấp thu dược chất từ dạng thuốc Hình 1.4 Cơng thức hóa học HPMC Hình 2.1 Quy trình bào chế viên nén Clarithromycin 500 mg lơ 2000 viên 16 Hình 2.2 Dụng cụ chứa viên q trình hịa tan (sinker) 20 Hình 2.3 Sơ đồ vị trí lấy mẫu sau trộn hoàn tất .21 Hình 3.1 Đồ thị biểu diễn % CLR cịn lại môi trường thời điểm 24 Hình 3.2 Đồ thị biểu diễn tỷ lệ % CLR giải phóng từ viên Klacid®MR 500 mg mơi trường đệm acetat pH 4,5 đệm phosphat pH 6,8 .26 Hình 3.3 Đồ thị biểu diễn tỷ lệ % CLR giải phóng từ mẫu viên chứa tỷ lệ tá dược A khác đệm phosphat pH 6,8 28 Hình 3.4 Đồ thị biểu diễn tỷ lệ % CLR giải phóng từ mẫu viên chứa tỷ lệ HPMC K100LV hạt/ngoài hạt đệm phosphat pH 6,8 .29 Hình 3.5 Đồ thị biểu diễn tỷ lệ % CLR giải phóng CT P8 đệm phosphat pH 4,5 .31 Hình 3.6 Đồ thị biểu diễn tỷ lệ % CLR giải phóng từ mẫu viên tỷ lệ tá dược B khác đệm phosphat pH 6,8 33 Hình 3.7 Đồ thị biểu diễn tỷ lệ % CLR giải phóng từ CT P10, P11 P12 đệm phosphat pH 4,5 .34 Hình 3.8 Đồ thị biểu diễn tỷ lệ % CLR giải phóng CT P11 lô đệm phosphat pH 6,8 35 Hình 3.9 Đồ thị biểu diễn tỷ lệ % CLR giải phóng từ CT P11 lô đệm acetat pH 4,5 35 Hình 3.10 Đồ thị biểu diễn tỷ lệ % CLR giải phóng lơ đệm phosphat pH 6,8 40 Hình 3.11 Đồ thị biểu diễn tỷ lệ % CLR giải phóng lơ đệm phosphat pH 4,5 41 ĐẶT VẤN ĐỀ Clarithromycin (CLR) kháng sinh macrolid bán tổng hợp có nguồn gốc từ erythromycin ổn định cao so với erythromycin môi trường acid CLR thuộc nhóm sinh dược học II, hấp thu nhanh qua đường tiêu hóa chuyển hóa lần đầu qua gan mạnh khả hòa tan nước phụ thuộc vào pH, sinh khả dụng đường uống thấp khoảng 55%, thời gian bán thải CLR ngắn (3 – giờ) nên cần phải dùng thuốc nhiều lần ngày [19] Để khắc phục nhược điểm trên, viên nén giải phóng kéo dài chứa CLR (tên biệt dược: Klacid®MR, Abbvie) phát triển nhằm mục đích tăng sinh khả dụng, giảm số lần dùng thuốc ngày để nâng cao hiệu điều trị thuốc nghiên cứu dạng thuốc giải phóng kéo dài chứa CLR cần thiết Hiện nay, thị trường Việt Nam, dạng thuốc giải phóng kéo dài chứa CLR hạn chế, chủ yếu nhập từ nước ngồi Trước đó, nhóm nghiên cứu chúng tơi tiến hành bào chế thành công viên nén CLR 500 mg GPKD 24 quy mơ phịng thí nghiệm dựa hệ cốt alginat Tuy nhiên, tương kỵ CLR acid citric đặt nhiều khó khăn triển khai sản xuất Để khắc phục nhược điểm trên, nhóm nghiên cứu tiến hành đề tài “Tiếp tục nghiên cứu bào chế viên nén Clarithromycin giải phóng kéo dài 24 giờ’’ dựa hệ cốt thân nước HPMC với mục tiêu sau: Xây dựng công thức bào chế viên nén CLR 500 mg GPKD 24 quy mô 50 viên/ lô Bào chế viên nén CLR 500 mg GPKD 24 quy mô 2000 viên/ lô Bước đầu đánh giá độ ổn định viên nén CLR GPKD Bảng 3.17 Hàm lượng CLR 10 vị trí khác sau trộn hoàn tất % hàm lượng CLR cốm so với quy định Vị trí Lơ Lơ Lô 97,20 99,52 97,45 95,92 98,87 99,66 95,30 97,28 98,51 101,14 99,95 101,05 95,42 102,82 97,97 96,91 97,83 98,10 103,98 98,71 104,77 94,28 98,53 101,80 101,02 97,71 96,88 10 101,49 103,07 102,37 XTB±SD 98,27±3,34 99,43±2,02 99,86±2,56 RSD (%) 3,39 2,03 2,56 Nhận xét: Q trình trộn lơ tương đối đồng khối lượng 3.4.2.3 Kết kiểm sốt giai đoạn dập viên a Hình thức viên Cả lơ, viên nén bao phim màu trắng, bóng, hình trụ lồi, cứng, chắc, thành cạnh viên lành lặn, không bị sức b Lực gây vỡ viên Tiến hành đánh giá lực gây vỡ viên theo phương pháp mục 2.3.3.2 thu kết bảng: Bảng 3.18 Kết lực gây vỡ viên trình dập viên thời điểm Viên Lô Lô Lô Đầu Giữa Cuối Đầu Giữa Cuối Đầu Giữa Cuối 16,6 16,4 17,5 18,5 18,6 16,5 16,8 17,3 17,9 17,4 15,8 17,3 15,8 16,8 17,5 15,8 18,4 18,8 16,3 17,4 18,2 16,4 15,9 18,7 17,3 18,8 16,8 18,3 16,4 18,5 17,5 17,7 16,4 16,4 16,4 17,7 18,7 18,1 16,3 17,8 18,4 17,6 15,9 16,5 18,3 XTB 17,82 17,72 17,56 17,62 17,88 17,6 17,3 18,1 17,9 SD 0,72 0,72 0,86 0,77 0,70 0,82 0,72 0,66 0,74 RSD (%) 3,99 4,05 4,89 4,38 3,94 4,66 4,14 3,64 4,16 38 Nhận xét: Lực gây vỡ viên lơ đạt q trình dập viên c Khối lượng viên Bảng 3.19 Kết đồng khối lượng trình dập viên Viên 10 phút đầu Lô Lô Sau 30 phút Lô Lô Lô 10 phút cuối Lô Lô Lô Lô 0,9872 0,9718 0,9833 0,9813 0,9837 0,9784 0,9859 0,9856 0,9796 0,9716 0,9822 0,9902 0,9881 0,9829 0,9876 0,9821 0,9871 0,9883 0,9786 0,9765 0,9783 0,9701 0,9828 0,9878 0,9807 0,9723 0,9761 0,9720 0,9756 0,9769 0,9788 0,9881 0,9840 0,9856 0,9862 0,9762 0,9790 0,9896 0,9913 0,9768 0,9760 0,9645 0,9813 0,9797 0,9898 0,9819 0,9831 0,9769 0,9749 0,9819 0,9763 0,9838 0,9743 0,9834 0,9748 0,9726 0,9687 0,9837 0,9779 0,9823 0,9886 0,9733 0,9800 0,9832 0,9815 0,9820 0,9864 0,9760 0,9697 0,9678 0,9836 0,9706 10 0,9762 0,9773 0,9783 XTB 0,978 0,978 0,985 0,996 0,9832 0,9943 0,976 0,9838 0,9885 0,9802 0,9857 0,9719 0,9847 0,9785 0,9803 0,9801 0,9776 0,9800 0,9795 0,9812 0,9794 0,9841 0,9810 0,9821 SD 0,006 0,031 0,006 0,006 0,005 0,007 0,008 0,005 0,007 RSD (%) 0,561 3,166 0,646 0,566 0,519 0,671 0,786 0,547 0,689 Nhận xét: Cả lô đạt đồng khối lượng trình dập viên 3.4.2.4 Kết kiểm soát giai đoạn bao a Hình thức Viên bao hình trụ lồi, màu trắng, cứng, không bị bong mặt, sức cạnh b Đồng khối lượng Tiến hành đánh giá độ đồng khối lượng viên bao phương pháp mục 2.3.3.1 thu kết bảng 3.20 3.21 sau: Bảng 3.20 Kết kiểm soát khối lượng viên bao trình bao viên Ban đầu 10 phút 15 phút 30 phút Lô 0,9798±0,005 0,9804±0,007 0,9878±0,012 1,001±0,008 Lô 0,9839±0,006 0,9878±0,003 0,9908±0,003 1,016±0,010 Lô 0,9888±0,010 0,9896±0,011 0,9967±0,007 1,012±0,009 Nhận xét: Sau khoảng 30 phút, độ dày màng bao tăng khoảng 2% so với khối lượng viên ban đầu Bảng 3.21 Kết đánh giá độ đồng khối lượng sau trình bao Khối lượng viên (g) Lô Lô Lô 1,009±0,01 1,010±0,01 1,010±0,005 Nhận xét: Khối lượng viên sau bao lô đạt c Định lượng hàm lượng CLR viên 39 Tiến hành định lượng viên bao sau dập viên bao viên theo phương pháp mục 2.3.3.1, thu kết bảng 3.22 sau: Bảng 3.22 Kết định lượng hàm lượng CLR viên nén sau dập sau bao % hàm lượng CLR so với quy định Lô Lô Sau dập Sau bao 98,75±2,16 98,82±2,18 Sau dập Lô Sau bao 103,27±1,73 102,83±1,61 Sau dập Sau bao 98,75±0,65 99,21±0,66 Nhận xét: Cả lô đạt hàm lượng CLR so với quy định, hàm lượng có thay đổi không đáng kể trước sau bao d Thử độ hịa tan Tiến hành thử hịa tan lơ môi trường đệm phosphat pH 6,8 đệm acetat pH 4,5 phương pháp mục 2.3.3.1, thu kết bảng 3.23, 3.24 hình 3.10, 3.11 sau: Bảng 3.23 Kết thử hòa tan lô môi trường pH 6,8 Thời gian (giờ) % CLR giải phóng (n=3, XTB ±SD) Lơ Lơ Lô Đối chiếu 10,57±1,12 11,40±1,25 15,54±1,28 9,77±0,58 22,48±3,03 26,34±1,51 32,42±2,90 20,8±1,61 46,40±1,91 48,63±2,24 55,17±2,00 43,29±2,51 12 67,05±1,84 65,42±1,77 66,70±1,70 59,82±2,66 16 74,56±4,12 68,83±4,09 71,70±0,39 69,12±2,67 20 82,37±1,03 78,74±1,53 74,18±0,54 75,47±3,25 24 89,61±2,45 79,88±3,48 76,73±1,04 80,52±3,15 F2 (so với ĐC) 61,97 69,96 56,45 lô % CLR giải phóng 100 lơ lơ Đối chiếu 80 60 40 20 0 12 Thời gian (giờ) 16 20 24 Hình 3.10 Đồ thị biểu diễn tỷ lệ % CLR giải phóng lơ đệm phosphat pH 6,8 40 Bảng 3.24 Kết thử hịa tan lơ mơi trường pH 4,5 % CLR giải phóng (n=3, XTB ±SD) Thời gian (giờ) Lô Lô Lô Đối chiếu 14,71±0,41 15,81±2,03 15,43±1,02 9,16±0,94 23,94±0,41 22,76±0,87 29,52±4,58 19,58±0,34 38,91±0,27 37,60±0,01 44,12±1,04 43,71±1,36 12 51,19±1,36 49,51±0,48 60,51±2,84 60,97±1,20 16 61,86±1,20 60,43±0,48 71,92±2,64 72,16±1,11 20 70,56±1,11 68,63±1,24 82,59±3,91 79,70±1,71 24 77,74±1,68 77,08±0,54 89,75±3,22 84,89±1,68 F2 (so với viên ĐC) 55,64 52,59 64,91 Lô Lô Lô đối chiếu % CLR giải phóng 100 80 60 40 20 0 12 16 Thời gian (giờ) 20 24 Hình 3.11 Đồ thị biểu diễn tỷ lệ % CLR giải phóng lơ đệm phosphat pH 4,5 Nhận xét: Từ kết thử hòa tan môi trường pH 6,8 4,5 cho thấy, lơ có F2 so với viên đối chiếu lớn 50 hệ số tương đồng lô với môi trường không Điều giải thích yếu tố ảnh hưởng đến kết thử hịa tan trình tạo hạt lượng dung mơi pha tá dược dính có khác nhau, tốc độ cánh cắt cánh đảo thay đổi tùy thuộc vào tính chất khối ẩm, thời gian nhào ẩm khác lơ… Từ dẫn đến tính chất khối bột thu sau nhào, tính chất cốm sau sấy 3.5 Đánh giá sơ độ ổn định viên nén Clarithromycin 500 mg GPKD 24 Tiến hành đánh giá độ ổn định viên nén CLR 500 mg điều kiện lão hóa cấp tốc theo phương pháp mục 2.3.4 41 Sau tháng để điều kiện lão hóa cấp tốc (40±20C/ 75±5%) tủ vi khí hậu, Tiến hành lấy viên nén lô đánh giá tiêu, thu kết sau: ➢ Hình thức: viên nén bao phim màu trắng, hình trụ lồi, cứng, chắc, thành cạnh viên lành lặn, không bị sức ➢ Định lượng: kết định lượng bảng 3.25 sau: Bảng 3.25 Kết định lượng viên nén sau tháng lão hóa cấp tốc % CLR so với quy định Lô Lô Ban đầu Sau tháng Ban đầu Sau tháng 98,82±2,18 99,21±0,65 100,13±0,78 99,65±1,13 ➢ Thử hịa tan mơi trường đệm pH 6,8 đệm pH 4,5 thu kết bảng 3.26 sau: Bảng 3.26 Kết hệ số tương đồng thử hịa tan lơ sau tháng lão hóa cấp tốc Mơi trường pH 6,8 Lơ pH 4,5 pH 6,8 Lô pH 4,5 Thời điểm F2 (so với viên ĐC) Ban đầu 61,97 Sau tháng 58,1 Ban đầu 55,64 Sau tháng 54,81 Ban đầu 69,96 Sau tháng 65,2 Ban đầu 52,59 Sau tháng 54,7 F2 (Ban đầu- tháng) 70,27 91,13 79,75 88,7 Nhận xét: Sau tháng lão hóa cấp tốc, lơ lơ có hình thức, định lượng thử hịa tan mơi trường gần khơng có thay đổi đáng kể Tuy nhiên thử hịa tan mơi trường pH 6,8 pH 4,5 lơ có thay đổi, hệ số tương đồng thử hịa tan lơ môi trường pH 6,8 pH 4,5 thời điểm ban đầu sau tháng lão hóa cấp tốc đạt 70 Kết luận: Viên nén Clarithromycin 500 mg GPKD ổn định tháng lão hóa cấp tốc 42 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT Kết luận ➢ Đã xây dựng công thức viên nén Clarithromycin 500 mg GPKD 24 quy mô 50 viên/ lô ➢ Đã bào chế viên nén Clarithromycin 500 mg GPKD 24 quy mô 2000 viên/ lơ với cơng thức thành phần quy trình bào chế sau: Thành phần Khối lượng (mg) Clarithromycin 500 HPMC K100LV 64 Trong hạt HPMC K4M 30 Tá dược A 64 Lactose monohydrat 57 HPMC E6 20 Tá dược dính Ethanol 40% Vừa đủ HPMC K100LV 125 Tá dược B 75 Tá dược Magnesi stearat 10 Talc 35 Màng bao Opadry II 20 Tổng 1000 Kết viên bào chế có % giải phóng dược chất tương đồng với viên đối chiếu Klacid®MR mơi trường đệm phosphat pH 6,8 đệm acetat pH 4,5 ➢ Đánh giá sơ độ ổn định lô tháng điều kiện lão hóa cấp tốc (40±20C/ 75±5%), kết viên nén CLR ổn định sau tháng lão hóa cấp tốc Đề xuất ➢ Tiếp tục theo dõi độ ổn định điều kiện lão hóa cấp tốc (40±20C/ 75±5%) điều kiện dài hạn (30±20C/ 75±5%) ➢ Nâng cấp quy mô sản xuất lớn 43 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt Bộ môn Bào chế - Trường Đại học Dược Hà Nội (2021), Bào chế sinh dược học 2, Nhà xuất Y học, Hà Nội, tr 157 Bộ môn Bào chế - Trường Đại học Dược Hà Nội (2020), Bào chế sinh dược học 1, Nhà xuất Y học, Hà Nội, tr 21-22 Bộ môn Bào chế - Trường Đại học Dược Hà Nội (2005), Một số chuyên đề bào chế đại, Nhà xuất Y học, Hà Nội, tr 130-154 Bộ Y tế (2018), Dược thư quốc gia Việt Nam, Nhà xuất Y học, Hà Nội, tr 404-406 Bộ Y tế (2017), Dược điển Việt Nam V tập I, Nhà xuất Y học, Hà Nội, tr 271-274 Bộ Y tế (2017), Dược điển Việt Nam V tập II, Nhà xuất Y học, Hà Nội, tr Nguyễn Thị Diệu (2022), "Nghiên cứu bào chế viên nén Clarithromycin 500 mg giải phóng kéo dài 24 giờ", Khóa luận Tốt nghiệp Dược sĩ, Trường Đại học Dược Hà Nội, Hà Nội Tiếng Anh Conti S, Maggi L, et al (2007), "Matrices containing NaCMC and HPMC: Dissolution performance characterization", 333(1-2), pp 136-142 Convention United States Pharmacopoeia (2021), The United States Pharmacopoeia 44- National Formulary 44 (USP 44- NF 39), pp 975-983 10 De Guzman Gerard Q, Ecalne Jan Karlo T, et al "Formulation, bioequivalence and in vitro-in vivo correlation studies of a cashew gum-based clarithromycin sustained-release tablet", pp 11 Erah PO, Goddard AF, et al (1997), "The stability of amoxycillin, clarithromycin and metronidazole in gastric juice: relevance to the treatment of Helicobacter pylori infection", 39(1), pp 5-12 12 Fujiki Sadahiro, Iwao Yasunori, et al (2011), "Stabilization mechanism of clarithromycin tablets under gastric pH conditions", 59(5), pp 553-558 13 Mahalingan K, Rajarajan S, et al (2009), "Formulation and evaluation of clarithromycin extended release tablets", 1(3), pp 97 14 Manani Rebecca O (2014), A comparative study of the in vitro dissolution profiles of commercially available clarithromycin oral dosage forms in Nairobi county, Kenya 15 Manohari Packiaraj Jeyachandran, Seshadri Venkateswaran Chidambaram, et al (2017), "Extended release tablet formulation of a macrolide antibiotic", 7(03), pp 8009-19 16 Nair Anroop B, Shah Jigar, et al (2021), "Clarithromycin solid lipid nanoparticles for topical ocular therapy: Optimization, evaluation, and in vivo studies", 13(4), pp 523 17 Rane Manish, Parmar Jayesh, et al (2010), "Hydrophilic matrices for oral extended release: influence of fillers on drug release from HPMC matrices", 42(4), pp 41-5 18 19 20 21 22 23 Salem Isam Ismail (1996), "Clarithromycin", Analytical Profiles of Drug Substances and Excipients, Elsevier, 24, pp 45-85 Shilakari Asthana Gyati, Sharma Parveen Kumar, et al (2016), "In vitro and in vivo evaluation of niosomal formulation for controlled delivery of clarithromycin", 2016, pp Siepmann Juergen, Peppas Nicholas A %J Advanced drug delivery reviews (2012), "Modeling of drug release from delivery systems based on hydroxypropyl methylcellulose (HPMC)", 64, pp 163-174 Tiwari Sandip B DiNunzio James, el al., (2011), "Drug - polymer matrices for extened release", Controlled release in oral drug delivery, Springer, United States, pp Wen Hong, Park Kinam (2011), Oral controlled release formulation design and drug delivery: theory to practice, John Wiley & Sons, Wilson Clive G Crowley Patrick J (2011), Controlled release in oral drug delivery, Springer, United States, pp 131-137 PHỤ LỤC Phụ lục 1: Tiêu chí kết thẩm định phương pháp định lượng HPLC Phụ lục 1.1 Các tiêu chí thẩm định phương pháp định lượng CLR Tính tương thích hệ thống: Tiến hành tiêm lặp lại lần dung dịch CLR chuẩn có nồng độ 125 µg/ml qua hệ thống sắc ký theo điều chọn Độ lặp lại hệ thống biểu thị độ lệch chuẩn tương đối RSD Yêu cầu độ lặp lại diện tích pic nhỏ 2,0%, thời gian lưu nhỏ 1,0% hệ số bất đối xứng khoảng 0,8 – 1,5 Độ đặc hiệu: Để chứng minh có mặt tá dược dung môi pha động không ảnh hưởng đến phương pháp phân tích Khảo sát mẫu gồm: mẫu placebo, mẫu chuẩn mẫu thử, ghi lại thời gian lưu CLR Yêu cầu sắc ký đồ mẫu placebo không thấy xuất pic lạ thời điểm trùng với thời gian lưu CLR Độ tuyến tính: Khảo sát phụ thuộc tuyến tính diện tích pic nồng độ CLR cách pha dãy dung dịch chuẩn CLR có nồng độ từ 54 đến 700 µg/ml pha động, dung dịch đệm pH 4,5 dung dịch đệm pH 6,8 Độ lặp lại: Chuẩn bị mẫu dung dịch thử có nồng độ CLR khoảng 120 µg/ml chạy sắc ký theo điều kiện sắc ký chọn Xác định nồng độ dung dịch từ phương trình hồi quy tuyến tính Yêu cầu hàm lượng dược chất nằm khoảng 90,0% - 110,0% với độ lệch chuẩn RSD nhỏ 2% Độ đúng: Tiến hành xác định độ phương pháp thêm chuẩn Thêm lượng CLR chuẩn vào mẫu placebo để thu mẫu placebo thêm chuẩn có hàm lượng tương ứng 80%, 100%, 120% so với hàm lượng ghi nhãn Yêu cầu phần trăm tìm lại mẫu mức nồng độ nằm khoảng 98-102% Phụ lục 1.2 Các kết thẩm định phương pháp định lượng HPLC Phụ lục 1.2.1 Tính tương thích hệ thống phương pháp định lượng STT Thời gian lưu (phút) Diện tích pic (mAU.s) Hệ số bất đối xứng 5,176 37,11 0,961 5,175 37,07 0,968 5,179 37,2 0,939 5,179 36,6 0,958 5,180 36,6 0,961 5,181 37,4 0,962 XTB±SD 5,178±0,002 37,00±0,3277 0,958±0,0099 RSD 0,05 0,886 1,038 a Sắc ký đồ mẫu chuẩn b, Sắc ký đồ mẫu thử c Sắc ký đồ mẫu placebo Phụ lục 1.2.2 Sắc ký đồ mẫu chuẩn (a), mẫu thử (b) mẫu placebo (c) Phụ lục 1.2.3 Sự phụ thuộc tuyến tính nồng độ CLR diện tích pic Nồng độ CLR Diện tích pic (mAU.s) (mg/ml) Pha động Đệm pH 4,5 Đệm pH 6,8 0,700 194,8 197,3 199,1 0,560 157,3 159,7 159,4 0,280 78,2 78,8 81,3 0,140 39,5 40,4 41,4 0,054 15 15,6 15,9 Diện tích pic (mAU.s) 250 y = 277.68x + 0.2573 R² = 0.9999 200 150 100 50 0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7 0.8 0.7 0.8 Nồng độ (mg/mL) a) Môi trường Pha động 250 y = 280.54x + 0.5219 R² = 0.9999 Diện tích pic (mAU.s) 200 150 100 50 0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 Nồng độ (mg/ml) b) Môi trường đệm acetat pH 4,5 Diện tích pic (mAU.s) 250 y = 280.9x + 1.4558 R² = 0.9999 200 150 100 50 0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7 0.8 Nồng độ (mg/ml) c) Môi trường đệm phosphat pH 6,8 Phụ lục 1.2.4 Đồ thị biểu diễn phụ thuộc diện tích pic nồng độ CLR mơi trường pha động (a), môi trường đệm pH 4,5 (b) môi trường đệm pH 6,8 (c) Phụ lục 1.2.5 Độ lặp lại phương pháp định lượng CLR STT Diện tích pic (mAU.s) Nồng độ mẫu thử (mg/ml) Phần trăm hàm lượng (%) 36,2 121,46 101,2 35,6 119,45 99,5 35,7 119,78 99,8 36,2 121,46 101,2 35,9 120,46 100,4 35,7 119,78 99,8 XTB 100,3 SD 0,7 RSD (%) 0,7 Phụ lục 1.2.6 Độ phương pháp HPLC % chuẩn Lượng chuẩn thêm vào thêm vào Diện tích pic Lượng % Tìm (mAU.s) chuẩn tìm lại lại (mg) (mg) 80 100 120 5,02 29,7 4,98 99,2 XTB = 99,3 % 5,02 29,9 5,01 99,9 RSD = 0,5 % 5,02 29,6 4,96 98,9 6,24 37,3 6,26 100,3 XTB = 100,2% 6,24 37,1 6,22 99,8 RSD = 0,4 % 6,24 37,4 6,27 100,6 7,50 44,3 7,43 99,1 XTB = 99,6 % 7,50 44,8 7,52 100,2 RSD = 0,6 % 7,50 44,4 7,45 99,4 Phụ lục 2: Bảng kết bào chế viên nén Clarithromycin 500 mg GPKD 24 Phụ lục 2.1 % CLR giải phóng từ viên đối chiếu Klacid®MR 500 mg mơi trường đệm acetat pH 4,5 đệm phosphat pH 6,8 (n=6) Thời điểm (giờ) % CLR giải phóng (n=6, XTB ± SD) Đệm pH 4,5 Đệm pH 6,8 9,16 ± 0,94 9,77 ± 0,58 19,58 ± 0,34 20,8 ± 1,61 43,71 ± 1,36 43,29± 2,51 12 60,97 ± 1,2 59,82 ± 2,66 16 72,16 ± 1,11 69,12 ± 2,67 20 79,70 ± 1,71 75,47 ± 3,25 24 84,89 ± 1,68 80,52 ± 3,15 Phụ lục 2.2 Kết thử độ hòa tan từ mẫu viên chứa tỷ lệ tá dược A khác môi trường đệm phosphat pH 6,8 Thời gian % CLR giải phóng (n=3, XTB ± SD) P1 P2 P3 P4 Đối chiếu Klacid®MR (giờ) 36,2±0,41 25,75±2,05 22,43±0,04 20,66± 1,51 9,77 ± 0,58 45,21±0,32 35,45±1,82 35,57±1,07 28,37±1,84 20,8 ± 1,61 69,74±0,13 53,29±1,73 51,38±1,51 47,08±3,03 43,29± 2,51 12 83,10±0,85 66,36±2,52 57,38±0,06 56,57±3,23 59,82 ± 2,66 16 86,35±0,44 74,74±4,57 64,77±0,28 60,81±3,58 69,12 ± 2,67 20 89,36±1,77 78,71±2,45 68,82±0,71 63,34±2,92 75,47 ± 3,25 24 87,52±1,00 82,8±4,89 69,38±0,8 64,75±2,85 80,52 ± 3,15 F2 33,91 50,52 50,85 50,43 Phụ lục 2.3 Kết thử hòa tan từ mẫu viên chứa tỷ lệ HPMC K100LV hạt/ngoài hạt mơi trường pH 6,8 % CLR giải phóng (n=3, XTB ±SD) Thời P2 P5 P6 P7 P8 Đối chiếu 25,75 14,61 12,79 12,11 10,85 9,77 ±2,05 ±1,86 ±1,63 ±0,95 ±1,19 ±0,58 35,45 ±1,82 31,00 ±1,86 29,36 ±1,18 31,27 ±0,63 24,12 ±1,38 20,8 ±1,61 53,29 56,72 ±1,24 57,76 ±0,22 48,09 ±3,08 43,29 ±1,73 55,72 ±1,67 ±2,51 66,36 72,82 70,49 69,22 65,36 59,82 ±2,52 ±4,27 ±2,83 ±4,27 ±4,08 ±2,66 16 74,74 ±4,57 76,08 ±1,08 80,54 ±1,24 81,27 ±0,12 76,41 ±2,90 69,12 ±2,67 20 78,71 ±2,45 82,61 ±0,68 83,60 ±0,35 83,33 ±0,56 81,56 ±2,17 75,47 ±3,25 24 82,8 82,55 87,77 83,96 84,43 80,52 ±4,89 ±0,77 ±4,83 ±0,12 ±0,76 ±3,15 50,52 51,9 51,55 50,95 64,84 gian (giờ) 12 F2