Lê phan khánh linh nghiên cứu sàng lọc in silico các hợp chất tự nhiên tiềm năng có tác dụng ức chế protein tead khóa luận tốt nghiệp dược sĩ

BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI LÊ PHAN KHÁNH LINH NGHIÊN CỨU SÀNG LỌC IN SILICO CÁC HỢP CHẤT TỰ NHIÊN TIỀM NĂNG CÓ TÁC DỤNG ỨC CHẾ PROTEIN TEAD KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ HÀ NỘI - 2023 BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI LÊ PHAN KHÁNH LINH Mã sinh viên: 1801378 NGHIÊN CỨU SÀNG LỌC IN SILICO CÁC HỢP CHẤT TỰ NHIÊN TIỀM NĂNG CÓ TÁC DỤNG ỨC CHẾ PROTEIN TEAD KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ Người hướng dẫn: PGS TS Nguyễn Thu Hằng TS Thân Thị Kiều My Nơi thực hiện: Bộ môn Dược liệu Khoa Dược liệu - DHCT HÀ NỘI - 2023 LỜI CẢM ƠN Với lịng biết ơn kính trọng, tơi xin gửi lời cảm ơn đến PGS.TS Nguyễn Thu Hằng - Trưởng Bộ môn Dược liệu, Trường Đại học Dược Hà Nội - người trực tiếp hướng dẫn, dìu dắt tơi từ ngày đầu nghiên cứu, giúp tơi hồn thành khóa luận Tơi xin gửi lời cảm ơn tới: TS Thân Thị Kiều My - Giảng viên Bộ môn Dược liệu ThS Nguyễn Văn Phương - Giảng viên Bộ môn Dược liệu, người thầy sẵn sàng giúp đỡ, giải đáp thắc mắc, khó khăn mà tơi gặp phải Ban Giám hiệu phịng ban, thầy cô giáo, cán nhân viên trường Đại học Dược Hà Nội, người dạy bảo với nhiều kiến thức suốt năm học Các anh chị, bạn làm thực nghiệm mơn Dược liệu ln nhiệt tình giúp đỡ tạo điều kiện thuận lợi cho suốt trình làm nghiên cứu thực nghiệm Bạn làm khóa luận khóa 73, bạn Lê Thị Vân Anh em Phí Ngọc Trâm, Phan Thị Vân Anh nhóm nghiên cứu mơn Dược liệu, tất giúp đỡ, động viên, hỗ trợ nhiều Cuối cùng, tơi xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc tới gia đình, người thân bạn bè ln khích lệ, giúp đỡ cổ vũ suốt thời gian qua Do kiến thức thân cịn giới hạn nên luận văn khơng tránh khỏi hạn chế thiếu sót Tơi mong nhận góp ý, chỉnh sửa quý thầy cô, bạn bè Tôi xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, ngày tháng năm 2023 Sinh viên Lê Phan Khánh Linh MỤC LỤC DANH MỤC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC CÁC BẢNG DANH MỤC CÁC HÌNH ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan protein TEAD 1.1.1 Tổng quan đường Hippo 1.1.2 Tổng quan protein TEAD tương tác YAP/TAZ-TEAD 1.1.3 Một số chất ức chế tương tác YAP/TAZ-TEAD 1.2 Tổng quan mối quan hệ định lượng cấu trúc-tác dụng hợp chất (Quantitative Structure-Activity Relationship - QSAR) 1.2.1 Khái niệm ngun lý chung mơ hình QSAR 1.2.2 Xây dựng đánh giá mơ hình 1.3 Tổng quan kỹ thuật docking phân tử (Molecular docking) 11 1.4 Ứng dụng sàng lọc ảo nghiên cứu phát triển thuốc 13 CHƯƠNG NGUYÊN LIỆU, THIẾT BỊ, PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 16 2.1 Nguyên liệu, thiết bị nghiên cứu 16 2.1.1 Cơ sở liệu 16 2.1.2 Thiết bị phần mềm 16 2.2 Nội dung nghiên cứu 16 2.3 Phương pháp nghiên cứu 16 2.3.1 Xây dựng mơ hình QSAR 17 2.3.2 Phương pháp xác định miền cấu trúc ứng dụng mơ hình (Applicability domain) 21 2.3.3 Kỹ thuật Docking phân tử 21 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 23 3.1 Kết xây dựng mơ hình 23 3.1.1 Mơ hình mạng neuron nhân tạo (Artificial neuron network-ANN) 23 3.1.2 Mơ hình máy vector hỗ trợ (Support vector machine - SVM) 26 3.1.3 Mơ hình k lân cận gần (k-nearest neighbours - kNN) 28 3.1.4 Lựa chọn mơ hình tốt 31 3.2 Kết ứng dụng mơ hình QSAR để sàng lọc hợp chất tự nhiên tiềm ức chế protein TEAD 32 3.3 Kết docking phân tử 33 3.4 Bàn luận 35 3.4.1 Về tính nghiên cứu 35 3.4.2 Về phương pháp sàng lọc ảo 36 3.4.3 Về kết sàng lọc ảo 39 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT 41 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC DANH MỤC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT ANN Artificial Neural Network (Mạng neuron nhân tạo) CSDL Cơ sở liệu kNN k-nearest neighbours (k lân cận gần nhất) MAD Mean Absolute Deviation MLP Multilayer Perceptron MLR Multiple Linear Regression (Hồi quy đa biến tuyến tính) Principal Component Analysis (Phân tích thành phần chính) Partial Least Squares (Bình phương tối thiểu phần) PCA PLS QSAR RMSE Quantiative Structure-Activity Relationship (Tương quan định lượng cấu trúc-tác dụng) Root Mean Squared Error STT Số thứ tự SVM Support Vector Machine TAZ (Vec-tơ hỗ trợ) Transcriptional co-activator with PDZ-binding motif TEAD Transcriptional enhanced associate domain TLTK Tài liệu tham khảo TSPT Tham số phân tử YAP Yes associated protein DANH MỤC CÁC BẢNG STT Tên bảng Trang Bảng 3.1 Kết dự đoán nội giá trị LogIC50 mơ hình M18 24 Bảng 3.2 Kết dự đốn ngoại giá trị LogIC50 mơ hình M18 25 Bảng 3.3 Kết khảo sát ảnh hưởng thông số C, ε γ lên chất lượng mô hình 26 Bảng 3.4 Kết dự đốn nội giá trị LogIC50 mơ hình M28 27 Bảng 3.5 Kết dự đốn ngoại giá trị LogIC50 mơ hình M28 28 Bảng 3.6 Kết dự đoán nội giá trị LogIC50 mơ hình M52 29 Bảng 3.7 Kết dự đốn ngoại giá trị LogIC50 mơ hình M52 30 Bảng 3.8 Thông số thống kê mô hình M18, M28, M52 31 Bảng 3.9 Kết ứng dụng mơ hình M18 để sàng lọc hoạt tính ứng 32 chế protein TEAD hợp chất CSDL Ái lực liên kết với đích hợp chất tự nhiên tiềm từ 33 Bảng 3.10 CSDL2 có tác dụng ức chế protein TEAD DANH MỤC CÁC HÌNH STT Tên hình Trang Hình 1.1 Tóm tắt đường Hippo Hình 1.2 Mơ hình tương tác YAP/TAZ-TEAD Hình 1.3 Bề mặt liên kết YAP/TAZ-TEAD Hình 1.4 Cấu trúc hóa học Verteporfin Hình 1.5 Cấu trúc 3D phức hợp TEAD-VGLL4 Hình 1.6 Cấu trúc hóa học K-975 Hình 1.7 Sơ đồ tóm tắt bước xây dựng mơ hình QSAR Hình 1.8 Tóm tắt quy trình docking 13 Hình 2.1 Mô hệ thống sàng lọc ảo hợp chất tự nhiên có tác dụng ức chế protein TEAD 17 Hình 2.2 Vai trò tốc độ học mạng neuron nhân tạo 19 Hình 3.1 Ảnh hưởng thơng số số neuron lớp ẩn 23 Hình 3.2 Ảnh hưởng thơng số momentum 23 Hình 3.3 Ảnh hưởng thơng số tốc độ học 23 Hình 3.4 Đồ thị biểu diễn thay đổi thơng số mơ hình theo giá trị k 29 Hình 3.5 Cấu trúc 2-D mơ tương tác protein TEAD hoạt chất 35 ĐẶT VẤN ĐỀ Theo thống kê Tổ chức y tế giới (WHO), ung thư trở thành bệnh gây chết người hàng đầu giới với 10 triệu ca tử vong năm 2020 [95] Các bệnh ung thư thường gặp bao gồm: ung thư vú, ung thư phổi, ung thư buồng trứng, ung thư cổ tử cung ung thư tuyến tiền liệt Dự kiến số lượng bệnh mắc ung thư năm tăng lên 70% hai thập kỷ tới [13] So với giới Việt Nam thuộc nhóm nước có tỷ lệ mắc cao với nhiều loại ung thư Ước tính có khoảng 150-200 nghìn bệnh nhân phát ung thư, 70 nghìn trường hợp tử vong với xu hướng gia tăng nhanh số ca mắc năm gần Các thuốc điều trị ung thư gặp nhiều vấn đề liên quan đến độc tính tỷ lệ kháng thuốc hóa trị, xạ trị cao Trước tình hình đó, việc nghiên cứu phát triển thuốc chống ung thư mối quan tâm hàng đầu giới khoa học nước quốc tế [13] Việc hiểu biết kiến thức liên quan đến chế hình thành khối u, xâm lấn, di khả kháng phương pháp điều trị thực cần thiết phát triển thuốc chống ung thư Gần đây, đường tín hiệu Hippo mà đặc biệt yếu tố phiên mã - protein TEAD (Transcriptional enhanced associate domain) phát có đặc tính vai trị riêng biệt chế hình thành khối u Đột biến thay đổi biểu thành phần cốt lõi đường Hippo tương tác YAP/TAZTEAD có khả ảnh hưởng đến di căn, xâm lấn tế bào ung thư ác tính [7],[29] Ý nghĩa sinh học việc ức chế tương tác YAP/TAZ-TEAD nhận nhiều quan tâm năm gần đích phát triển thuốc nhiều tiềm Bên cạnh thuốc có nguồn gốc tổng hợp hóa học, thuốc điều trị ung thư có nguồn gốc tự nhiên đóng vai trị quan trọng Hiện nay, nhà khoa học giới tiếp tục nỗ lực tìm kiếm thuốc chống ung thư có nguồn gốc tự nhiên nhiều hợp chất giai đoạn thử nghiệm lâm sàng Hướng tìm kiếm, sàng lọc thuốc nói chung thuốc chống ung thư nói riêng từ hợp chất tự nhiên hướng cho nhiều kết tích cực [8] Tuy nhiên, nghiên cứu phát triển thuốc công việc gian nan, tiêu tốn nhiều thời gian, công sức tiền bạc tỷ lệ thất bại lớn Một thách thức lớn trình tìm kiếm hợp chất có hoạt tính sinh học mong đợi từ thư viện khổng lồ hợp chất Hiện nay, với thành tựu vượt bậc khoa học máy tính hiểu biết ngày sâu sắc lĩnh vực sinh học phân tử, phương pháp sàng lọc ảo - in silico với trợ giúp máy tính ngày ứng dụng rộng rãi giúp tiết kiệm đáng kể thời gian chi phí trình nghiên cứu phát triển thuốc [44] So với phương pháp thực nghiệm truyền thống, phương pháp sàng lọc ảo có ưu vượt trội giúp thiết kế phân tử thuốc mới, giải thích chất phân tử tương tác thuốc cho phép dự đốn hoạt tính sinh học hợp chất thơng qua việc sử dụng mơ hình tốn học Trong năm gần đây, giới, phát triển phương pháp sàng lọc ảo đem lại nhiều thành tựu đáng kể Tại Việt Nam, có nhiều nghiên cứu ứng dụng sàng lọc ảo nghiên cứu phát triển thuốc mới, nhiên chưa có nghiên cứu sàng lọc hợp chất tự nhiên để tìm kiếm thuốc điều trị ung thư nhắm tới đích protein TEAD Vì đề tài khóa luận “ Nghiên cứu sàng lọc in silico hợp chất tự nhiên có tiềm ức chế protein TEAD ” tiến hành với hai mục tiêu sau: Xây dựng đánh giá mơ hình tốn học biểu diễn mối quan hệ định lượng cấu trúc hóa học-tác dụng ức chế protein TEAD hợp chất Ứng dụng mơ hình xây dựng kỹ thuật docking phân tử để sàng lọc hợp chất có hoạt tính ức chế protein TEAD 20 3,411 [34] 0,123 [34] 0,083 [34] 0,305 [34] 21 22 23 24 0,902 [34] 0,568 [34] 0,399 [34] 0,891 [34] 25 26 27 28 2,647 [34] 0,130 [34] 0,878 [34] 0,131 [34] 29 30 31 32 0,139 [34] 0,766 [34] 4,569 [34] 0,354 [34] 33 34 35 36 77,960 [34] 70,750 [34] 105,020 [34] 62,210 [34] 37 38 39 40 16,250 [34] 5,740 [34] 2,470 [34] 41 42 PHỤ LỤC Kết dự đoán LogIC50 243 hoạt chất từ CSDL mơ hình M18 Zin C LogIC50 Zin C LogIC50 ZINC000077266065 0.097 ZINC000077262723 0.955 ZINC000085435985 0.15 ZINC000008792596 0.956 ZINC000040309958 0.153 ZINC000077263456 0.957 ZINC000040312581 0.202 ZINC000040309643 0.962 ZINC000070671991 0.205 ZINC000085435993 0.966 ZINC000049543474 0.205 ZINC000085877092 0.966 ZINC000079190744 0.213 ZINC000096221946 0.968 ZINC000031157241 0.22 ZINC000096115084 0.97 ZINC000100768766 0.234 ZINC000001640064 0.977 ZINC000077261786 0.252 ZINC000065249330 0.977 ZINC000077261742 0.261 ZINC000077263448 0.984 ZINC000001321707 0.278 ZINC000096115008 0.991 ZINC000005370225 0.295 ZINC000002096445 0.993 ZINC000100259432 0.306 ZINC000100144206 1.001 ZINC000100079029 0.332 ZINC000096115213 1.003 ZINC000040312883 0.338 ZINC000096115214 1.003 ZINC000035598217 0.367 ZINC000096116021 1.011 ZINC000013372606 0.376 ZINC000096116020 1.011 ZINC000015262953 0.376 ZINC000077262909 1.014 ZINC000218058705 0.397 ZINC000008926309 1.025 ZINC000013397330 0.401 ZINC000040310282 1.052 ZINC000085875915 0.408 ZINC000040309433 1.056 ZINC000077263332 0.41 ZINC000077263203 1.059 ZINC000085469137 0.417 ZINC000077263577 1.06 ZINC000077261739 0.43 ZINC000037514731 1.081 ZINC000096114393 0.431 ZINC000012419101 1.083 ZINC000002090410 0.437 ZINC000012419104 1.083 ZINC000096533297 0.441 ZINC000077262697 1.093 ZINC000077261711 0.457 ZINC000040313011 1.107 ZINC000012028895 0.462 ZINC000077262728 1.113 ZINC000014822012 0.474 ZINC000077263095 1.13 ZINC000011764739 0.474 ZINC000077262713 1.138 ZINC000079190851 0.475 ZINC000085875097 1.147 ZINC000096115028 0.493 ZINC000238734149 1.155 ZINC000004626059 0.505 ZINC000062001813 1.16 ZINC000040312741 0.506 ZINC000079191031 1.168 ZINC000077265375 0.514 ZINC000004040778 1.185 ZINC000096115978 0.519 ZINC000004040780 1.185 ZINC000096221788 0.521 ZINC000008879197 1.188 ZINC000085878694 0.523 ZINC000096116155 1.2 ZINC000077263113 0.523 ZINC000085435993 1.201 ZINC000096221777 0.529 ZINC000142857948 1.213 ZINC000040310101 0.532 ZINC000014756913 1.215 ZINC000096115185 0.533 ZINC000004098629 1.224 ZINC000085877011 0.533 ZINC000049543671 1.235 ZINC000077031606 0.533 ZINC000096112870 1.241 ZINC000079194193 0.534 ZINC000040308974 1.243 ZINC000085877669 0.535 ZINC000040310308 1.254 ZINC000085875369 0.546 ZINC000096296236 1.282 ZINC000096221773 0.549 ZINC000000851795 1.293 ZINC000077262878 0.555 ZINC000253499835 1.301 ZINC000085879358 0.563 ZINC000001073544 1.303 ZINC000096221768 0.566 ZINC000011866706 1.304 ZINC000077265083 0.568 ZINC000096115871 1.314 ZINC000012296355 0.573 ZINC000077263554 1.318 ZINC000005207895 0.581 ZINC000079193183 1.324 ZINC000096222293 0.584 ZINC000014805993 1.328 ZINC000040312805 0.589 ZINC000014644928 1.349 ZINC000039943325 0.591 ZINC000014759024 1.355 ZINC000020465276 0.603 ZINC000001132967 1.361 ZINC000040310209 0.61 ZINC000002091227 1.37 ZINC000077263153 0.612 ZINC000253504326 1.388 ZINC000096112896 0.616 ZINC000253504319 1.388 ZINC000085879408 0.629 ZINC000014644232 1.405 ZINC000096115506 0.633 ZINC000049172003 1.406 ZINC000070633540 0.64 ZINC000096222706 1.427 ZINC000096221064 0.642 ZINC000049543136 1.433 ZINC000096116543 0.642 ZINC000036023037 1.442 ZINC000040313267 0.667 ZINC000096296362 1.448 ZINC000013334742 0.673 ZINC000085877032 1.458 ZINC000077263225 0.673 ZINC000036376038 1.458 ZINC000079193858 0.679 ZINC000096116523 1.459 ZINC000096116052 0.683 ZINC000013481876 1.463 ZINC000044887771 0.686 ZINC000031157241 1.479 ZINC000096112881 0.695 ZINC000015674988 1.494 ZINC000036369811 0.703 ZINC000012296453 1.523 ZINC000096115196 0.713 ZINC000096113728 1.53 ZINC000012296672 0.717 ZINC000253411990 1.53 ZINC000085877378 0.725 ZINC000014806962 1.532 ZINC000085877372 0.725 ZINC000011764690 1.533 ZINC000014820536 0.737 ZINC000079196993 1.535 ZINC000036370064 0.753 ZINC000040309232 1.537 ZINC000238739150 0.753 ZINC000004082429 1.541 ZINC000004041582 0.756 ZINC000085858903 1.557 ZINC000059086766 0.76 ZINC000036370081 1.565 ZINC000095910485 0.776 ZINC000096296300 1.566 ZINC000002094395 0.777 ZINC000009418722 1.571 ZINC000004081922 0.782 ZINC000077261923 1.608 ZINC000107430830 0.783 ZINC000096269405 1.62 ZINC000096269338 0.795 ZINC000085541933 1.624 ZINC000004090480 0.8 ZINC000004084698 1.663 ZINC000085435958 0.802 ZINC000004084704 1.663 ZINC000014811646 0.811 ZINC000064758994 1.668 ZINC000005027654 0.813 ZINC000070665261 1.676 ZINC000000034129 0.818 ZINC000008964893 1.687 ZINC000085436220 0.824 ZINC000014644235 1.688 ZINC000004085465 0.836 ZINC000013461250 1.695 ZINC000072324587 0.859 ZINC000013461252 1.695 ZINC000096116545 0.86 ZINC000005205909 1.707 ZINC000096296048 0.876 ZINC000004062182 1.71 ZINC000079194749 0.878 ZINC000008793771 1.725 ZINC000096269326 0.88 ZINC000077261586 1.74 ZINC000014779297 0.88 ZINC000014779587 1.746 ZINC000085879283 0.885 ZINC000085879401 1.779 ZINC000077263439 0.885 ZINC000011865244 1.791 ZINC000077266760 0.888 ZINC000004098252 1.834 ZINC000077263503 0.895 ZINC000014758832 1.834 ZINC000077262900 0.897 ZINC000049171131 1.848 ZINC000085875160 0.902 ZINC000085880038 1.849 ZINC000100001828 0.909 ZINC000012296560 1.852 ZINC000085876429 0.911 ZINC000012296307 1.854 ZINC000008964853 0.915 ZINC000096113782 1.86 ZINC000077265475 0.918 ZINC000096113783 1.86 ZINC000077262445 0.919 ZINC000005205849 1.869 ZINC000013340180 0.92 ZINC000014728037 1.871 ZINC000015707420 0.926 ZINC000000870981 1.887 ZINC000096221607 0.928 ZINC000000870982 1.887 ZINC000008917027 0.932 ZINC000013327574 1.892 ZINC000005014179 0.935 ZINC000096221479 1.905 ZINC000077263628 0.941 ZINC000005206319 1.914 ZINC000096296045 0.942 ZINC000085878694 1.918 ZINC000001584603 0.948 PHỤ LỤC Kết Docking phần mềm AutoDock Vina 243 hoạt chất từ CSDL Zin C Điểm số doking Zin C Điểm số doking ZINC000077266065 -6.0 ZINC000077262723 -5.4 ZINC000085435985 -5.7 ZINC000008792596 -6.3 ZINC000040309958 -5.4 ZINC000077263456 -6.2 ZINC000040312581 -7.5 ZINC000040309643 -6.1 ZINC000070671991 -6.8 ZINC000085435993 -7.1 ZINC000049543474 -7.4 ZINC000085877092 -6.8 ZINC000079190744 -6.5 ZINC000096221946 -6.4 ZINC000031157241 -6.2 ZINC000096115084 -7 ZINC000100768766 -7.1 ZINC000001640064 -5.7 ZINC000077261786 -5.8 ZINC000065249330 -6 ZINC000077261742 -6.0 ZINC000077263448 -6.4 ZINC000001321707 -7.6 ZINC000096115008 -8 ZINC000005370225 -7.5 ZINC000002096445 -5 ZINC000100259432 -6.1 ZINC000100144206 -6 ZINC000100079029 -7 ZINC000096115213 -6.6 ZINC000040312883 -5.5 ZINC000096115214 -5.8 ZINC000035598217 -7.3 ZINC000096116021 -5.1 ZINC000013372606 -6.9 ZINC000096116020 -5.7 ZINC000015262953 -6.5 ZINC000077262909 -6 ZINC000218058705 -7.7 ZINC000008926309 -7.4 ZINC000013397330 -8.3 ZINC000040310282 -6.6 ZINC000085875915 -8.1 ZINC000040309433 -7.5 ZINC000077263332 -5.6 ZINC000077263203 -7.2 ZINC000085469137 -6.7 ZINC000077263577 -5.5 ZINC000077261739 -5.4 ZINC000037514731 -6.6 ZINC000096114393 -5.4 ZINC000012419101 -7.2 ZINC000002090410 -6.2 ZINC000012419104 -8.9 ZINC000096533297 -7.5 ZINC000077262697 -6.1 ZINC000077261711 -5.7 ZINC000040313011 -5.9 ZINC000012028895 -6.3 ZINC000077262728 -7.4 ZINC000014822012 -6 ZINC000077263095 -6.8 ZINC000011764739 -8.4 ZINC000077262713 -7.5 ZINC000079190851 -7.8 ZINC000085875097 -5.8 ZINC000096115028 -7.7 ZINC000238734149 -6.7 ZINC000004626059 -5.7 ZINC000062001813 -7.8 ZINC000040312741 -6.3 ZINC000079191031 -5.4 ZINC000077265375 -7.8 ZINC000004040778 -7.4 ZINC000096115978 -7.1 ZINC000004040780 -7.1 ZINC000096221788 -5.9 ZINC000008879197 -7.9 ZINC000085878694 -8.3 ZINC000096116155 -6.4 ZINC000077263113 -6.6 ZINC000085435993 -7.1 ZINC000096221777 -5.2 ZINC000142857948 -6.3 ZINC000040310101 -5.8 ZINC000014756913 -6.3 ZINC000096115185 -7.7 ZINC000004098629 -7.2 ZINC000085877011 -6.8 ZINC000049543671 -6.4 ZINC000077031606 -6.6 ZINC000096112870 -6.7 ZINC000079194193 -6.5 ZINC000040308974 -5.7 ZINC000085877669 -8.4 ZINC000040310308 -6.5 ZINC000085875369 -6.1 ZINC000096296236 -5.5 ZINC000096221773 -5.6 ZINC000000851795 -7.4 ZINC000077262878 -5.6 ZINC000253499835 -6.1 ZINC000085879358 -6.5 ZINC000001073544 -6.5 ZINC000096221768 -5.7 ZINC000011866706 -6.2 ZINC000077265083 -6 ZINC000096115871 -7.2 ZINC000012296355 -5.5 ZINC000077263554 -6 ZINC000005207895 -8.9 ZINC000079193183 -6.4 ZINC000096222293 -5.2 ZINC000014805993 -6.4 ZINC000040312805 -7.1 ZINC000014644928 -7.3 ZINC000039943325 -5.2 ZINC000014759024 -5.9 ZINC000020465276 -6 ZINC000001132967 -5.8 ZINC000040310209 -7.8 ZINC000002091227 -5.8 ZINC000077263153 -5.4 ZINC000253504326 -7.5 ZINC000096112896 -7.3 ZINC000253504319 -7.9 ZINC000085879408 -6.9 ZINC000014644232 -6.1 ZINC000096115506 -7.8 ZINC000049172003 -5.8 ZINC000070633540 -6.6 ZINC000096222706 -6.8 ZINC000096221064 -5.7 ZINC000049543136 -8 ZINC000096116543 -7.5 ZINC000036023037 -5.5 ZINC000040313267 -8.8 ZINC000096296362 -7.4 ZINC000013334742 -5.6 ZINC000085877032 -6.4 ZINC000077263225 -5.6 ZINC000036376038 -6.1 ZINC000079193858 -6.4 ZINC000096116523 -7.2 ZINC000096116052 -9.2 ZINC000013481876 -6.3 ZINC000044887771 -7 ZINC000031157241 -8.1 ZINC000096112881 -7.9 ZINC000015674988 -6.7 ZINC000036369811 -7.7 ZINC000012296453 -5.2 ZINC000096115196 -7.6 ZINC000096113728 -6 ZINC000012296672 -8.8 ZINC000253411990 -6.4 ZINC000085877378 -6 ZINC000014806962 -5.9 ZINC000085877372 -7.1 ZINC000011764690 -6.2 ZINC000014820536 -6.1 ZINC000079196993 -6.5 ZINC000036370064 -5.3 ZINC000040309232 -8.7 ZINC000238739150 -7.2 ZINC000004082429 -6.5 ZINC000004041582 -8.4 ZINC000085858903 -6.3 ZINC000059086766 -8.3 ZINC000036370081 -6.1 ZINC000095910485 -6.2 ZINC000096296300 -6.2 ZINC000002094395 -6.8 ZINC000009418722 -6.5 ZINC000004081922 -6.3 ZINC000077261923 -5.6 ZINC000107430830 -5.8 ZINC000096269405 -8.1 ZINC000096269338 -6.9 ZINC000085541933 -7.1 ZINC000004090480 -7.2 ZINC000004084698 -6.6 ZINC000085435958 -5.8 ZINC000004084704 -7.3 ZINC000014811646 -6.9 ZINC000064758994 -7.3 ZINC000005027654 -5.2 ZINC000070665261 -7.3 ZINC000000034129 -8 ZINC000008964893 -8.2 ZINC000085436220 -6.8 ZINC000014644235 -5.8 ZINC000004085465 -6 ZINC000013461250 -6.2 ZINC000072324587 -8.9 ZINC000013461252 -6.6 ZINC000096116545 -7.9 ZINC000005205909 -8.7 ZINC000096296048 -5.7 ZINC000004062182 -5.7 ZINC000079194749 -7.2 ZINC000008793771 -6.3 ZINC000096269326 -5.7 ZINC000077261586 -6.7 ZINC000014779297 -6.3 ZINC000014779587 -5.9 ZINC000085879283 -6.3 ZINC000085879401 -5.7 ZINC000077263439 -6.1 ZINC000011865244 -6.2 ZINC000077266760 -7 ZINC000004098252 -6.4 ZINC000077263503 -5.8 ZINC000014758832 -6.7 ZINC000077262900 -5.4 ZINC000049171131 -6.7 ZINC000085875160 -6.2 ZINC000085880038 -6 ZINC000100001828 -6.4 ZINC000012296560 -5.8 ZINC000085876429 -8.2 ZINC000012296307 -7 ZINC000008964853 -7.5 ZINC000096113782 -6.7 ZINC000077265475 -7.5 ZINC000096113783 -7.3 ZINC000077262445 -6.1 ZINC000005205849 -9.2 ZINC000013340180 -7.9 ZINC000014728037 -6 ZINC000015707420 -6.1 ZINC000000870981 -5.8 ZINC000096221607 -6.4 ZINC000000870982 -5.6 ZINC000008917027 -7.2 ZINC000013327574 -6.8 ZINC000005014179 -5.5 ZINC000096221479 -8.8 ZINC000077263628 -6.1 ZINC000005206319 -8.9 ZINC000096296045 -6.5 ZINC000085878694 -8.4 ZINC000001584603 -5.6