Viêm vừa là phản ứng bảo vệ của cơ thể nhằm chống lại yếu tố gây bệnh, vừa là phản ứng bệnh lý vì quá trình viêm gây ra tổn thương và rối loạn chức năng cơ quan trong cơ thể, đặc biệt là hệ cơ xương khớp, có thể ở mức độ rất nặng nề nguy hiểm.1 Thoái hóa khớp là tình trạng thoái triển của khớp, xảy ra chủ yếu ở người cao tuổi và đặc trưng bởi tình trạng tổn thương ở sụn khớp, quá sản tổ chức xương ở bờ khớp tạo các gai xương, tình trạng xơ xương dưới sụn và các biến đổi về hóa sinh và hình thái của màng hoạt dịch và bao khớp.2 Thoái hóa khớp thường có hiện tượng viêm thứ phát tại khớp, gây ảnh hướng nhiều đến cuộc sống người bệnh, bởi các triệu chứng viêm đau, hạn chế vận động, trường hợp nặng có thể có biến dạng khớp, liệt do chèn ép tủy cổ, rễ thần kinh ngoại vi. Bệnh gặp ở mọi quốc gia, chủng tộc và vùng địa lý với tỷ lệ khoảng 0,5 1% dân số và 10% ở nhóm người trên 60 tuổi.2,3 Ước tính có khoảng 240 triệu người trên toàn thế giới mắc bệnh viêm khớp có triệu chứng, bao gồm 10% nam giới và 18% phụ nữ từ 60 tuổi trở lên.4 Theo thống kê của Bộ Y tế Việt Nam về cơ cấu bệnh tật và tử vong trên toàn quốc năm 2014, bệnh xương khớp và mô liên kết chiếm tỷ lệ 3,85%, tỉ lệ chết 0,24%, trong đó các bệnh khác của cột sống đứng hàng thứ 9 với tần suất mắc bệnh là 181 ca100.000 dân
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƯỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH DƯƠNG THỊ MINH THƯ NGHIÊN CỨU TÁC DỤNG KHÁNG VIÊM VÀ BƯỚC ĐẦU XÂY DỰNG TIÊU CHUẨN CƠ SỞ VIÊN HOÀN CỨNG TỪ VỎ THÂN CÂY GÒN (CEIBA PENTANDRA (L.)) ĐỀ CƯƠNG THẠC SĨ Y HỌC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH - NĂM 2023 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƯỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH DƯƠNG THỊ MINH THƯ NGHIÊN CỨU TÁC DỤNG KHÁNG VIÊM VÀ BƯỚC ĐẦU XÂY DỰNG TIÊU CHUẨN CƠ SỞ VIÊN HỒN CỨNG TỪ VỎ THÂN CÂY GỊN (CEIBA PENTANDRA (L.)) CHUYÊN NGÀNH: Y HỌC CỔ TRUYỀN MÃ SỐ: 327224617 ĐỀ CƯƠNG THẠC SĨ Y HỌC NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: TS.DS NGUYỄN NGỌC CHƯƠNG TS.BS NGUYỄN NGÔ LÊ MINH ANH THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH - NĂM 2023 MỤC LỤC DANH MỤC CÁC BẢNG iii DANH MỤC CÁC BIỂU ĐỒ, HÌNH ẢNH .iv MỞ ĐẦU CHƯƠNG I TỔNG QUAN .6 1.1 Tổng quan Họ Bombacaceae Ceiba pentandra (L.) 1.2 Cây gòn (Ceiba pentandra (L.)) 11 1.3 Viêm theo quan điểm Y học đại Y học cổ truyền .19 1.4 Một số phương pháp đánh giá tác dụng kháng viêm in vitro 26 1.5 Tổng quan phương pháp bào chế viên hoàn .30 1.6 Tiêu chuẩn chất lượng 34 CHƯƠNG 2: NỘI DUNG CƠ BẢN CỦA ĐỀ ÁN 37 2.1 Nhiệm vụ cụ thể 38 2.2 Giải pháp để thực đề án 46 2.3 Tổ chức thực đề án 47 2.4 Dự kiến kết đề án .54 CHƯƠNG 3: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 58 TÀI LIỆU THAM KHẢO .59 i DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT Chữ viết tắt ABTS COX DPPH DĐVN V DMSO Tên tiếng Anh 2,20 -azinobis (3ethylbenzthiazolin-6 sulfonic acid) Cyclooxygenase 2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl Dược điển Việt Nam Dimethyl sulfoxide Dmax FBS HCL H2SO4 IC50 IL-8 LPS MTT NO NOS NaNO2 NSAIDS OD UV PVP PEG PG-A2 PG-H2 PL TT g YHCT 5-LOX Tiếng Việt Fetal bovine serum Acid hydrochloric Acid sulfuric 50% Inhibition concentration Interleukin Lipopolysaccharide 3- (4,5- dimethylthiazol - 2- yl) 2,5 - diphenyl tetrazolium bromid Nitric oxyd NO synthase Liều cao bơm qua kim đầu tù không làm chết chuột Huyết thai bò Nồng độ ức chế 50% Natri nitrit Non-steroidal antiinflammatory drugs Optical Density Ultraviolet Polyvinylpyrrolidone Polyethylene glycol Prostagladin A2 Prostagladin H2 Thuốc chống viêm không steroid Mật độ quang Tia tử ngoại Phụ lục Thuốc thử Gram Y học cổ truyền 5-lypooxygenase ii iii DANH MỤC CÁC BẢ Bảng 1.1 Đặc điểm hình thái giúp phân biệt họ Bombacaceae Việt Nam23 Bảng 1.2 Độ đồng khối lượng theo số viên hoàn 34 Bảng 1.3 Độ đồng khối lượng theo số gam viên hoàn .35 Bảng 1.4 Độ đồng khối lượng theo số gói viên hồn .35 Y Bảng 2.1 Độ đồng khối lượng tính theo số viên hồn 44 Bảng 2.2 Công việc phải làm thời gian thực (trình bày theo sơ đồ Gantt)49 Bảng 2.3 Độ ẩm bột vỏ thân gòn 54 Bảng 2.4 Độ tro bột vỏ thân gòn 54 Bảng 2.5 Hàm lượng chất chiết bột vỏ thân gòn 55 Bảng 2.6 Hiệu suất chiết dược liệu vỏ thân Gòn phương pháp ngấm kiệt 55 Bảng 2.8 Ức chế sinh NO, hoạt tính độc tế bào, IC50 cao cồn 70% cao nước vỏ thân gòn 55 Bảng 2.10 Tiêu chuẩn sở viên hồn cứng vỏ thân Gịn .56 Bảng 2.11 Tiêu chuẩn định tính viên hồn cứng từ thân Gòn thuốc thử56 Bảng 2.12 Kết SKLM dịch chiết 57 Bảng 2.13 Liều dùng viên hoàn cứng từ vỏ thân gòn (Ceiba pentandra L) 57 iv DANH MỤC CÁC BIỂU ĐỒ, HÌNH Ả Hình 1.1 Cây Gịn ( Ceiba pentandra (L.)) 13 Hình 1.2 Một số chất phân lập từ Ceiba pentandra (L.) .14 Hình 1.3 Cơ chế hình thành NO 29 Hình 1.4 Quy trình phản ứng Nitrit với thuốc thử Griess .30 Hình 1.5 Quy trình phản ứng kiểm tra độc tính phương pháp so màu MTT .30 Y Hình 2.1 Quy trình tiến hành đề án .37 v MỞ ĐẦU Tên đề án Nghiên cứu tác dụng kháng viêm bước đầu xây dựng tiêu chuẩn sở viên hoàn cứng từ vỏ thân Gòn (Ceiba pentandra (L.)) Người thực Người thực hiện: Dương Thị Minh Thư Người hướng dẫn: TS.DS Nguyễn Ngọc Chương TS.BS Nguyễn Ngô Lê Minh Anh Đơn vị thực hiện: Trường Đại học Y dược Hồ Chí Minh Lý thực đề án Viêm vừa phản ứng bảo vệ thể nhằm chống lại yếu tố gây bệnh, vừa phản ứng bệnh lý trình viêm gây tổn thương rối loạn chức quan thể, đặc biệt hệ xương khớp, mức độ nặng nề nguy hiểm Thối hóa khớp tình trạng thối triển khớp, xảy chủ yếu người cao tuổi đặc trưng tình trạng tổn thương sụn khớp, sản tổ chức xương bờ khớp tạo gai xương, tình trạng xơ xương sụn biến đổi hóa sinh hình thái màng hoạt dịch bao khớp Thối hóa khớp thường có tượng viêm thứ phát khớp, gây ảnh hướng nhiều đến sống người bệnh, triệu chứng viêm đau, hạn chế vận động, trường hợp nặng có biến dạng khớp, liệt chèn ép tủy cổ, rễ thần kinh ngoại vi Bệnh gặp quốc gia, chủng tộc vùng địa lý với tỷ lệ khoảng 0,5- 1% dân số 10% nhóm người 60 tuổi.2,3 Ước tính có khoảng 240 triệu người tồn giới mắc bệnh viêm khớp có triệu chứng, bao gồm 10% nam giới 18% phụ nữ từ 60 tuổi trở lên Theo thống kê Bộ Y tế Việt Nam cấu bệnh tật tử vong toàn quốc năm 2014, bệnh xương khớp mô liên kết chiếm tỷ lệ 3,85%, tỉ lệ chết 0,24%, bệnh khác cột sống đứng hàng thứ với tần suất mắc bệnh 181 ca/100.000 dân.5 Các bệnh lý viêm xương khớp làm gia tăng gánh nặng kinh tế cho bệnh nhân hệ thống chăm sóc sức khỏe với chi phí liên quan đến viêm khớp Hoa Kỳ ước tính lên đến gần 200 tỷ la năm.6,7 Nitric oxyd (NO) chất trung gian gây viêm thúc đẩy tiến triển bệnh thối hóa khớp Việc sản xuất q nhiều NO đẩy nhanh trình tổn thương phá hủy tế bào sụn khớp Tổng hợp NO tế bào sụn xúc tác nitric oxide synthase cảm ứng (iNOS) đích điều trị bệnh thối hóa khớp.8 Trên lâm sàng, lựa chọn điều trị thối hóa khớp bao gồm việc thay đổi lối sống, phương pháp điều trị dùng thuốc không dùng thuốc, nhằm giải triệu chứng (sưng đau khớp, cứng khớp,…) người bệnh Các khuyến nghị từ hiệp hội lớn giới cho nên sử dụng thuốc chống viêm steroid không steroid (NSAID) phần liệu pháp dược lý.9 Tuy nhiên, thuốc cịn nhiều tác dụng khơng mong muốn sử dụng lâu dài Đặc biệt, đối tượng người cao tuổi gây biến cố bất lợi lên quan như: tim mạch, tiêu hóa, xương khớp,… 10,11 Vì vậy, việc nghiên cứu để tìm thuốc từ dược liệu có nguồn gốc tự nhiên, an tồn có hiệu điều trị, gây tác dụng khơng mong muốn mục tiêu bác sĩ lâm sàng Theo quan điểm Y học cổ truyền (YHCT), Thối hóa khớp mô tả phạm vi chứng Tý, tùy thuộc vào nguyên nhân, chế bệnh sinh mà có pháp trị phù hợp.12 Có nhiều vị thuốc, thuốc Y học cổ truyền mang lại hiệu tốt điều trị viêm thối hóa khớp nghiên cứu lâm sàng chứng minh thực nghiệm.13–15 Một số vị thuốc có khả ức chế sản sinh NO tế bào RAW nghiên cứu như: Hồng cầm, Bạch thược, Dâu tằm, Tía tơ,… 16–19 Trong đó, vỏ thân Gịn vị đắng, tính hàn có số tác dụng nhiệt giải độc, hoạt huyết, huyết, thống 20 Vị thuốc người dân đồng sông Cửu Long sử dụng để chữa trật khớp, bong gân hay gãy xương cẳng tay, cẳng chân đạt hiệu định, 20 từ cho thấy tiềm điều trị bệnh xương khớp dược liệu Trên giới có nhiều cơng trình nghiên cứu phân tích thành phần hóa học Gịn để khảo sát tác dụng chống viêm, giảm đau, giảm tổn thương thận, bảo vệ gan, hạ huyết áp hạ đường huyết người bệnh đái tháo đường type 21–25 Tuy nhiên, Việt Nam Gòn chưa thực quan tâm nghiên cứu ứng dụng làm thuốc chống viêm xương khớp Trước thực trạng đó, nghiên cứu tác dụng kháng viêm từ dịch chiết vỏ thân Gòn Việt Nam cần thiết Các cao chiết từ nhiều dung môi chiết xuất khác đánh giá tác dụng kháng viêm in vitro cao chiết có tác dụng mạnh tiếp tục nghiên cứu bào chế viên hoàn cứng Trong năm gần đây, công nghệ dược bào chế YHCT có bước phát triển vượt bậc, chế phẩm YHCT đưa vào nghiên cứu, sản xuất cung cấp phục vụ cho công tác điều trị Bào chế viên hồn cứng có ưu điểm thể tích gọn nhẹ dễ vận chuyển bảo quản, sử dụng đơn giản, đặc biệt đảm bảo độ ổn định hoạt chất dễ bào chế phù hợp sản xuất với quy mô nhỏ Việc quản lý chất lượng thuốc cách xây dựng số tiêu kiểm tra chất lượng góp phần thúc đẩy khả ứng dụng viên hoàn cứng bào chế từ vỏ thân Gịn Vì chúng tơi triển khai đề án: “Nghiên cứu tác dụng kháng viêm bước đầu xây dựng tiêu chuẩn sở viên hoàn cứng từ vỏ thân Gòn (Ceiba pentandra (L.))” với mục tiêu: Mục tiêu đề án 4.1 Mục tiêu chung Đánh giá tác dụng kháng viêm in vitro bước đầu xây dựng tiêu chuẩn sở viên hoàn cứng bào chế từ cao chiết vỏ thân Gòn (Ceiba pentandra (L.)) 4.2 Mục tiêu cụ thể