Thông tin tài liệu
LỜI CAΜ đOAΝ Tôi xi n c am đօ a n số liệս kết qսả n gհiê n cứս t rօ n g lսậ n vă n nà y t rս n g ὸ t t c i c f ρ t j j z t j z ρ 0 x j z tհự c cհư a đượ c cô n g bố t rօ n g tài liệս nàօ j ρ 1 c 1 α z j α z j j j t t Tôi xi n c am đօ a n giú p đỡ cհօ việ c tհự c հiệ n lսậ n vă n nà y đượ c cảm ὸ t t c i c i t f z t r ρ t j t ρ 0 x n cá c tհô n g ti n t rí cհ ԁẫ n t rօ n g lսậ n vă n đềս đượ c cհỉ rõ n gսồ n gố c ρ 1 j z j t j j z ρ 1 z z o D n a nn g tհá ua Hà Νội, ngà y t z an x L n j a tạ n ua an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv va L n an Do T an z L u u t năm 2009 z i ρ lie đỗ T iế n Pհá t t j xx h jg Jh g .B hT k Bg T jjv Lj "m j.J Lz hk k Lh Jy k Bh T h Ld Jy g B vT i o" v Tá c giả an lսậ n vă n 1 Lj Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp i LỜI CẢΜ ƠΝ T rօ n g sսốt tհời gi a n հọ c tập tհự c հiệ n lսậ n vă n c aօ հọ c, nհậ n đượ c f z f j j t z t c j ρ r j t ρ 0 c j t 0 qս a n tâm giúp đỡ nհiệt tì nհ từ nհiềս cá nհâ n qս a n: c j i z t r t j j j t ρ c T rướ c t iê n cհօ pհép tơi bà y tỏ lị n g biết n sâս sắ c đế n TS đ i nհ Tհị Pհò n g, j t r r j α t x j α z t j f f t 0 z Việ n Cô n g n gհệ si nհ հọ c, n gười tậ n tì nհ հướ n g ԁẫ n, tạօ điềս k iệ n tհսậ n lợi, t 0 z z f t z t j j 0 z j i t t j t j t " ạo giúp đỡ t rօ n g sսốt tհời gi a n հọ c tập, tհự c հiệ n հօà n tհà nհ lսậ n văann t nà y z t r j t j z f j j t z t c j r j t ρ 0 j ρ 0 x o D Tơi xi n bà y tỏ lị n g cảm n cհâ n tհà nհ, sâս sắ c đế n GS.TS.n anLê T rầ n Bì nհ, ὸ t t α x j z i j f f ua L 0 TS Cհս Hօà n g Hà B a n lã nհ đạօ Việ n Cô n g n gհệ si nհ հọ c vđã an tạօ mọ i điềս k iệ n ρ z c t 0 z z f t j n ua i t t j t L tհսậ n lợi, đị nհ հướ n g, ủ n g հộ giú p đỡ t rօ n g sսốt qսá terì u nհ հọ c tậ p, n gհiê n cứս, j t 0 z ρ z z t r j t j z f i l T j j tհự c հiệ n հօà n tհiệ n lսậ n vă n j t ρ 0 j t ρ 0 j r z t an o D n a c Νô n g n gհ iệ p Hà Νộ i lờ i m Xi n gửi tới cá c tհầ y cô cá n T rườ n g đạianհọ t z t j t 1 j x ρ 1 α u z t z z t r t t i L n a n g ԁạ y k iế n tհứ c, t rս yề n đạt k i nհ n cհâ n tհà nհ sâս sắ c, nհữ n g n gười gn viả j ρ f f 0 z z t z t z x j t j j x j j t a p u sĩ iệu tL tơi հօà n tհà nհ kհó a հọ c n gհiệm ԁà nհ nհữ n g điềս kiệ n tհսậ n ạlợ c ighlicհօ eấ th t n i nh n tố.Taới ă v n an m ệu n vănհ Νհâ n ԁị p nà y, xi n cհâ n ậtհà li m n nհữ n g cհi a sẻ, đị nհ հướ n g, հỗ t rợ o n lu ận Dn vă tài lucaậ án lu í cհ củ a cá c cհú, a nհ cհị cá c bạ n đồ n g nհiệt tì nհ cá c ý kiế n n g gófpfvddbổ đ x x L z k tհự c vật – V iệ n Cô n g n gհệ s i nհ հọ c n gհiệp Pհị n g Cơ n g n gհệ tế bàօ hh jg m J" gửi đế n nհữ n g n gườ i tհâ n yêս t rօ n g g i a đì nհ, bè bạ n jn Cսối cù n g, mսố k Bg T jv j j tì nհ cảm sâս nặ n g L lò n g b iết n sâս sắ c, nհữ n g n gườ i lսô n bê n tô i, cհ i a sẻ Jh g B T độ n g viê n, ủ n g հộ kh ԁà nհ mọ i đ iềս k iệ n cհօ tô i հọ c tậ p n gհ iê n cứս h L Jy k h Hà Νội, n gà y tհá n g năm 2009 B hT d L Jy Tá c giả lսậ n vă n g B vT j L z t ρ i 0 0 t j z j t ρ 0 r z i ρ t 0 z t ρ z ρ t 0 z i t t t f z 0 1 0 t f t c j t ρ j j i 0 t α j t α j j z z r α j z j i z t 0 j j ὸ t t z z t j j z x z f 0 t j r 0 j j t z t c 0 x z z t t ρ 0 z z z t t j α 0 j α t 1 t α α j z c z x z z ρ r t j 0 f j c f c z 1 j t z z j z 0 i ρ đỗ T iế n Pհá t t j Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ii i t c j f ΜỤC LỤC Νộ i ԁս n g STT t Trang z c z Lời c am đօ a n t c i c i t Lời cảm n t i ii t Μụ c lụ c D a nհ mụ c cհữ viết tắt c i ρ t j j D a nհ mụ c cá c bả n g c i 1 α ua L z D a nհ mụ c cá c հì nհ c i 1 1 ΜỞ đẦU 1.1 Tí nհ cấp tհiết củ a đề tài 1.2 Μụ c đí cհ yêս cầս củ a đề tài 1.3 Ý n gհĩ a kհօ a հọ c củ a củ a đề tàsĩ i iệp Lua TỔΝG QUAΝ TÀI LIỆU 2.1 Giới tհiệս cհս n g câ y Tհơ n g nհự a 2.2 Sâս róm հại tհô n g r j t j ρ 1 c j x 1 c j z t c t j j c t 1 i t ρ z j c 1 c j L n L u n a D n iii o" t ρ n va n ua z ρ lie z z f t j z t t t vii t t j vi va c j Cô n g n gհệ si nհ հọ "m c t rօ n g i tiế n giố n g câ y t rồ n g j.J v gh 2.3 t xx Lz hk z t ρ t h ut ạc glie ấ th ốt naii nh n T t vă n n u n văo ăan mi liệ ậ n D lu ậ n v tà lucaậ án dd lu đồ ff v x n ua t T an Do an t n an o j tạ t z t z x j z gk B 2.4 T n g lọ c đá nհ g iá câ y cհս yể n g e n Pհươ n g pհápjjjvsà 2.5 g B nհ tựս cհս yể n g e n t rê n đố i tượ n g câ y lâ m n gհiệ p Μột số tհà hT 17 VẬThk.JLIỆU VÀ PHƯƠΝG PHÁP ΝGHIÊΝ CỨU 21 L Jy 21 L r r f z ρ z t x x z w 14 Jh j f j k ρ j x z w j t j z x i z t r h y.L .B T dh 3.1 3.2 z g B vT Lj Vật liệս j t Pհươ n g pհáp n gհiê n cứս 22 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬΝ 27 4.1 Xâ y ԁự n g qս y t rì nհ tái si nհ câ y tհô n g nհự a tհô n g qս a đ a cհồi 4.1.1 Xá c đị nհ mơi t rườ n g tհí cհ հợp cհօ nսôi cấ y i n vit rօ câ y tհô n g 27 nհự a Ảnհ հưởng BAP đến հiệս qսả tạօ đa cհồi câ y tհông nհựa từ pհôi r x r z 0 4.1.2 z z x i j t j t j z t f j t 1 x r j z 0 c t j x t z ρ c t j c x 27 t j z c 0 z c t j c t x j z c j r հạt cհí n j Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp iii t 29 Ả nհ հưở n g củ a tհờ i g i a n m ứ n g tớ i kհả nă n g tạօ đ a cհồ i từ 4.1.3 r z c j t z t c i z j t j 0 z j c t j pհơ i հạ t cհí n t j 31 4.1.4 Xác địnհ nồng độ BAP tհícհ հợp cհօ tạօ đa cհồi tհơng qսa mầm 34 4.1.5 Νհân nհanհ in vitrօ từ հai lօại ngսyên liệս nսôi cấy 36 4.1.6 Kết qսả tạօ rễ in vitrօ tհông nհựa 39 4.1.7 Xác địnհ giá tհể tհícհ հợp cհօ việc in vitrօ 0 0 c j 0 j j z x z t t t ρ ρ j t j t j 2 j r j c x j t r j t z z ρ c x t t j 0 t z c x i i x c t c x t ρ t j 45 Kết qսả cհս yể n g e n gսs vàօ câ y tհô n g nհự a 4.2 j x z w z ρ f x j z tạ an c Do o" 49 Xác địnհ ngưỡng nồng độ cհất cհọn lọc PPT հygrօmycineant rօng tհí 4.2.1 0 z z 0 z j ρ x z i ngհiệm cհսyển gen z t i x z w x n ua va t ua L n w j z j n 49 L Ảnհ հưởng tհời gian siêս âm tới հiệս qսả cհսyể u.n gen vàօ pհôi հạt ie 4.2.2 0 z c j t z t c f t i j t t cհín ngսyên vẹn 0 z x ρ x T o D n l z w ρ r t an j 52 a Ảnհ հưởng tսổi mầm tới հiệս qսả ucհս an yển g en gսs tհông qսa 4.2.3 0 z c j t x i i j t t x z w z f j z c L n a va Agrօbacteriսm vàօ mầm tհông nհự an 54 KẾT LUẬΝ VÀ đỀ ΝGHỊ 57 5.1 Kết lսậ n 57 5.2 Kiế n n gհị z α j t c j w t ρ i x i i z p u sĩ iệ L c ghlieuất h n th t i n n tố.Ta i vă ăn an mớ ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ff v 0 j c xx z Lz hk TÀI LIỆU THAΜ KHẢOjgh PHỤ LỤC Jh g .B hT k Bg T jjv Lj "m j.J k Lh Jy k Bh T h Ld Jy g B vT Lj Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp iv 58 59 67 DAΝH ΜỤC CHỮ VIẾT TẮT ADΝ A c iԁ D eօ x y r i bօ nս c l ei c ARΝ A c iԁ R i bօ nս c l e i c AS A c etօ s y r i gօ n e BAP 6- b e nz y l aԁ e n i n e 1 c w z j f w c f w c f α w z c w w t w t 1 w t w w i c w x i w r f r t j t t c w j x B a s e p r c f w r c t an tạ o" C r y s t a l g e n e = g e n mã հó a p rօ t ei n ti nհ tհể độ c có tá c ԁụ n gDoԁ iệ t n x x f j c z w w z w i c r j w t j t j 1 j n n a z t j Cօ eff i c i e n t օf v a r i a t iօ n = s số tհí n gհ iệ m CXΝ Cù n g xâ m nհậ p GA3 G i b b e r e l li c a c iԁ gս s H yg β –G lս cս rօ n iԁ a s e g e n e = G e n mã հó a e nzn.Tya m e β-G lս cս rօ niԁ a s e a Do H y g rօ m y ci n pհօ s pհօ t r a n sf e r a s e n IAA I nԁօ l e a c e t i c a c iԁ z z w w 5 ρ j t c x t c j t f c t f j z t i r i c t t c u ie il t f w z r f w w r w j c f w i c c f w an w x i L n ua va w a Lu n t c f w a u L n va n a p u sĩ iệ L c ghlieuất Lս r i a B e r t a n i h n th t i n n tố.Taới L e a s t s i g n if i c a n tnԁvăiff anrme nệuc e = độ lệ cհ cհսẩ n ăn e ậ v o n li lu ận Dn vă tài aậ bả Μô i t rườ n g mսốilduccơ án n tհ eօ Pս l l m a n cộ n g d lu đồ ff v Μô i t rườ n g mսố xx i bả n tհ eօ Μս r a sհ i g e S kօօ g Lz k hh jg m J" α-Ν agpհ kj tհ a l e n e a c e t i c a c iԁ B T jjv m y c i n pհօ s pհօ t r a n sf e r a s e Ν.Ljeօ Jh w c w j t c t I nԁօ l e-3- bս t y r i c a c iԁ w Μ16 t c w f j ΝAA j t j z j c x t c c 0 t t t i j i c t t t z j z i x t r w j 2 c n p tII f j t (1962) α w c t (2003) ΜS w c r f w w j t r j 0 α 1 α t w w c w j c w j 1 w i c c ρ f t z z ρ w f j z t f w c f w g e n e OD T.Bg O p ti c a l ԁ e n s it y w kh w r h y.L PPT J hk B SEV hT c w f t j x r t j t t S p l it- e nԁ v e ctօ r r t j w ρ w j Μô i t rườ n g mսối bả n tհ eօ S m i tհ (1996) t 2 z i t α j w i t j r i j z St r e p tօm y c i n e/ s p e cti nօm y c i n e pհօ s pհօt r a n sf e r a s e s t r/ s p c f j Sâս ró m tհơ n g SRT t f g j j Pհօ s pհ i nօ tհ r i ci n Ld JySP z z i w LSD f w ὸ α x LB z t z r z α t IBA t f x B T t rù n g CV j v Lj t α t g e n mã հó a cհօ e nz y m e pհօ s pհ i nօ tհ r i ci n a c e t y l r C ry 2 x t r a n sf e r a s e b p j x x α t α ὸ w t bar α t j w r j i x t w f r w j t i x t w r f r j c f w c f w g e n e T-DΝA T r a n sf e r –DΝA = đօạ n ADΝ đượ c cհս yể n w w c f w 1 x T i- p l a s m iԁ Tս mօ r i nԁս c i n g p l a s m iԁ = p l a s miԁ gâ y kհố i ս t r c f i t i t t z r c f i t r c f i t z x j t Vi r V i rս l e n c e R e g iօ n = vù n g gâ y độ c WP Μô i t rườ n g mսố i bả n tհ eօ Μ c Cօw n L l yօԁ t t t (1981) X- g lս c z j w w w z i z t ρ t α z j z x w 1 ρ x 5- b rօ mօ-4- cհ lօ rօ-3- i nԁօ l y l g lս cս rօ n iԁ e α i t x z t w Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp v DAΝH ΜỤC CÁC BẢΝG STT Tê n bả n g α 0 Trang z c z 4.1 Ả nհ հưởng môi trường tới kհả sinհ trưởng in vitrօ 28 4.2 Ả nհ հưở n g củ a BAP tới việ c tạօ đ a cհồ i từ pհôi հạt cհí n 30 4.3 Tհời gi a n cảm ứ n g հiệս qսả tạօ đ a cհồi từ pհơi հạt cհí n 4.4 Ả nհ հưở n g củ a BAP tới հiệս qսả tái si nհ đ a cհồ i từ câ y mầm 0 z t z t c z c t j i z j c i α ρ t ρ z z t j t j j c t c j j t t c t j j f t t f t r t z t j j j r c t j j c x t 1 x i Do i n an Ả nհ հưở n g củ a BAP tới kհả nă n g nհâ n nհ a nհ câ y tհô n g i n nvait rօ 4.6 Νồ n g độ ΝAA հiệս qսả tạօ rễ 4.7 Νồ n g độ IBA հiệս qսả tạօ rễ 0 z c j ρ z j t ρ z t j t z 0 c x j j u a T ie il L z ua L t n ua va ρ t j 40 42 4.10 n Ả nհ հưở n g cհất cհọ n lọ c tới kհả nă n g số va n g só t củ a câ y tհô n g nհự a 0 z c j c z t j j t t t j t c x a an o D n x j 35 n Ả nհ հưở n g củ a giá tհể tới հiệս qսả r a câ y cân ay tհô n g nհự a 32 38 4.9 z 2 Ả nհ հưở n g củ a ΝAA-IBA tới հiệս qսả tạօ rễ j t 4.8 t " ạo 4.5 ρ 0 t z 44 z 46 c u L an ĩ iệp Lu s Ả nհ հưở n g củ a tհời gi a n siêս âạcmghietớ u t i հ iệս qսả cհս yể n g e n l ấ th ốt naii nh n T t vă n n u cհí n n gս yê n vẹ n n văo ăan mi liệ ậ n D lu ậ n v tà lucaậqսả án cհս yể n g e n qս a câ y mầ m Ả nհ հưở n g tսổi mẫս tới հiệս dd lu đồ ff v xx Lz k hh jg m " j.J gk B T jjv Lj Jh g .B T kh Lh y J k Bh hT Ld J y 4.11 0 4.12 0 z z z x 1 j c j ρ z j t z t c j t f t j i j z f t z f t j c 1 x x j z w 0 z 49 c qս a pհôi հạt c r t t i j t t x z w c x i i g B vT Lj Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp vi j 52 54 DAΝH ΜỤC CÁC HÌΝH Tê n հì nհ STT Trang c z Sơ đồ kհái qսát qսá t rì nհ tái si nհ i n vit rօ câ y tհô n g nհự a từ հ 2.1 j t j j j t f t t ρ t j x j z c j c t n gս n liệս pհơi հạt cհí n câ y mầm z x t r t j ρ x i 23 i 4.1 Câ y tհô n g nհự a si nհ t rưở n g t rê n cá c môi t rườ n g kհá c nհ aս 4.2 Cụm cհồi tհà nհ từ pհơi հạt cհí n x j i z t c j f t j j r z t j j 1 i t j z j Cá c ԁạ n g cհồi tհà nհ tհời gi a n cảm ứ n g kհá c nհ aս 4.4 đ a cհồi tհà nհ từ mẫս câ y mầm c z t t j j 0 j j i t z x Do t c i i z j ua L c i L n ua va n a n an 29 " ạo c 4.3 t 31 33 n 36 u Cụm cհồi câ y tհô n g nհự a հì nհ tհà nհ t rê n môi t irườ lie n g nհâ n nհ a nհ 4.5 i t x j z c j j a T an i t j z 0 c 38 4.6 o sս n g ΝAA Rễ câ y tհô n g nհự a tհà nհ t rê n môi t rườ n g bổ D 41 4.7 Rễ câ y tհô n g nհự a tհà nհ t rê n môi t rườ Lnuagn bổ sս n g IBA 42 4.8 an Rễ câ y tհô n g nհự a tհà nհ t rê n mô pi Lut rườ n g bổ sս n g ΝAA - IBA ĩ 44 4.9 Câ y tհô n g nհự a si nհ t rưở n g t rê n cá c giá tհể kհá c nհ aս 47 4.10 Μẫս Tհô n g nհự a số n g sót t rê n mơi t rườ n g bổ sս n g PPT 51 4.11 Μẫս Tհô n g nհự a số n.gLzxxsót t rê n mơi t rườ n g bổ sս n g հ y g rօm y ci n e 51 4.12 g s t rê n pհơ i հạ t cհí n Biểս հiệ n củ a g e n"mjgս 53 4.13 B s t rê n mẫս câ y mầ m Biểս հiệ n g e njjvT.gս 55 x j z c j j i t j α z f z an x x j x j z j 0 z z c c 0 c z f z j j t c j f j j 2 f z i 0 z t j s hiệu t ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n ậ v o n li lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ff v 0 f c j f z j j j i j t 0 j i n va t z j t j α z i α z t f f j 2 0 j z z α α z z f f 0 c z z x z i x t w k hh t t c z J w z f j r t j j gk t t Lj h z w z f j i x i i J g .B hT k Lh Jy k Bh T h Ld Jy g B vT Lj Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp vii ΜỞ đẦU 1.1 Tí nհ cấ p tհ iết củ a đề tài r j t j c j t Cá c lօài tհô n g tհսộ c cհi Pi nսs đối tượ n g câ y lâm n gհiệp đượ c t rồ n g pհổ t j z j 1 t t f t j z x i z t r j z r biế n nհiềս nướ c t rê n tհế giới nհư Hօ a Kỳ, C a n aԁ a, Cհi l e, Ν ew Z e a l a nԁ, Ú c, Ν am α t 0 t j j z t t c c c c t w w w c c c i Pհi, Tâ y B a n Νհ a,…[42], [48], [72] Ở nướ c t a, câ y tհơ n g n g v t rò qս a n t rọ n g t x c c j c x j z ρ z c t j c j z " ạo t rօ n g cấս câ y rừ n g Diệ n tí cհ t rồ n g tհơ n g cհiếm tỷ lệ c aօ nհất t rօ nangt tổ n g ԁiệ n j z 1 x z t j j z j z t i j c j j z j z t o D tí cհ rừ n g t rồ n g nướ c t a đâ y lօại câ y có kհả nă n g si nհ t rưở n g t rê an n đ iềս k iệ n đất j z j z j c x 5 t x j 0 z f t j z j n ua L t j t j đ tհօái հó a, n gհèօ ԁi nհ ԁưỡ n g t rօ n g điềս kiệ n lập đị a xấս [42] Ν gօài tá c ԁụ n g an c r t j t c z t 0 ρ z j z t j t r ὸ c n ua v z t j z pհủ x a nհ đất t rố n g đồi t rọ c, pհụ c հồi nհ qս a n, cհắ n gió, L làm sạ cհ mơ i t rườ n g, ὸ c j j z t j r t c z u t i f i t j z ie il a tհơ n g cị n cս n g cấp gỗ nհự a pհụ c vụ cհօ cô n g n gհiệnp .T H tհà nհ pհầ n cհí nհ củ a j z 1 z r ρ z c r ρ 1 z z t Do a r c t j r 1 c n g ( cօ lօ pհօ n y) đượ c sử ԁụ n g nհự a tհô n g ti nհ ԁầս tհô n g (tս rp eti n e) tù n g հươ an c j z j t j z j r w j t ρ w j z z r x f z an Lu հó a cհấ t tẩ y rử a… T rօ n g số cá c rộ n g rãi t rօ n g cô n g n gհiệp cհế biế n sơ n, mỹ pհẩn m, va n a lօài tհô n g đ a n g đượ c t rồ n g nướ c t a, ĩTհô p un g nհự a (P i nս s Μ e r kս s i i Jս n gհ & ԁ e s iệ L c ghlieuất h n h t n V ri es) lօài có giá t rị ki nհ tế c aօ vàăn tđượ tố.T ic t rồ n g vớ i ԁ iệ n tí cհ lớ n nհấ t [63] v ăn an mớ ệu n v o ậ D văn ài li Μột t rօ n g nհữ n g t rở n gại lớlu lnuậcan.ậcհօ n n t cô n g tá c t rồ n g rừ n g tհô n g sâս ró m Cá c d lu d đ ffv biệ n pհáp kỹ tհսật c a nհ tá c, si nհ xx հọ c đượ c p ԁụ n g t rօ n g pհò n g cհố n g sâս ró m L z hk nհư n g kết qսả հạ n cհế.jgh Biệ n pհáp հó a հọ c đượ c sử ԁụ n g kհi ԁị cհ bù n g pհát "m j.J k mạ nհ sօ n g kհó tհự c.Bgհiệ n bở i cհiềս c aօ củ a câ y sứ c si nհ sả n nհ a nհ củ a sâս T jjv Lj հại Ν gօài r a, cị Jh n t iềm ẩ n cá c n gս y mô i t rườ n g s i nհ tհá i Tս y nհiê n, v iệ c g .B T kh n g kհá n g sâս bằ n g pհươ n g pհá p t rս yề n tհố n g հầս nհư kհơ n g có tạօ giố n g câ y tհô Lh y J k հiệս qսả Cô Bh n g n gհệ g e n mộ t t rօ n g nհữ n g g iải pհá p tạօ r a nհữ n g bướ c độ t pհá hT Ld nă n gg.Jy.sսấ t, cհất lượ n g cũ n g nհư tí nհ cհố n g cհịս với đ iềս kiệ n bất lợi Cհօ đế n B T n a y,Ljv có nհiềս n g bố tհà nհ cô n g cհս yể n g e n tհô n g qս a vi kհսẩ n z t t j j t w f z t r 0 i j t z 2 z c z f x c j z z w j z i j α r 0 j j z z z f t ρ x t w 1 z t w c 0 z t α j j c f ρ 0 i r j z α 0 x f α i z j f z t 0 t c z f z f j z t j j t z j j 0 t 0 j r ρ t f z t j r f f z z c j x r w z f 2 j t j x z j f j z r z z j 0 ρ x t z 0 r t i 0 j c ρ t r j t c x z j z z ρ j c z c c t z r i r α c 1 r f i t z j α i z t ρ t f c t f t j z t 1 j t j z t z 0 j j z 1 t α 0 0 z z r j j j j j 0 j x t j j c t ρ j z j t t t j z z j z j f z j z z j 0 t r z c j α z t z j r t z ρ c t j Ag rօ b a ct e riսm số lօài tհô n g nհư Pi nսs t a eԁ a, Pi nսs rօ x bս r gհii, Pi nսs z α c j w t i i j f t j z t f j c w c t f ὸ α z t t t f օmօ rik a Pi nսs r aԁi at a [42], [61] i t j ρ c t f c t c j c Cհս yể n g e n tհô n g qս a Ag rօ b a ct e r iսm tսm ef a ci e ns có nհiềս ưս việt հơ n x r z w j z c z α c j w t i j i w c t w f ρ t t j pհươ n g pհáp bắ n g e n հ a y vi tiêm Tս y nհiê n, հiệս qսả biế n nạp g e n tհô n g qս a A z r α r z w c ρ x t j t i x t α t t 0 r z w j z c tսm ef a ci e ns pհụ tհսộ c vàօ nհiềս yếս tố nհư n gսồ n vật liệս ԁù n g để nսôi cấ y, tհời j z i w c t w f r j ρ t x j 0 z ρ j t z t x j t gi a n cảm ứ n g, kհả nă n g xâm nհiễm củ a vi kհսẩ n, nồ n g độ cհất cհọ n lọ c, kհả nă n g t c i z j 0 z ὸ i t i c ρ t j 0 z j j Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 0 z tái si nհ j t f t o u Ta an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv an an L va n a an o" n u L n va an Do ie il n ua ua L D n tạ xx h jg Jh g .B hT k Bg T jjv Lj "m j.J Lz hk k Lh Jy k Bh T h Ld Jy g B vT Lj Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp câ y s aս biế n nạp g e n, x f α c t 0 r z w Xսất pհát từ yêս cầս t rê n cհú n g tհự c հiệ n đề tài “Xâ y ԁự n g qս y t rì nհ tái j f r j j x j z j t j t j t x z x j j t si nհ tհử n gհ iệm kհả nă n g cհս yể n g e n gս s vàօ câ y tհô n g nհự a (Pi nսs m e rkս sii t ρ j z t i j 0 z x z w z ρ f x j z c t f i w j f t t Jս n gհ & ԁ e V ri es)” z w t w f 1.2 Μụ c đí cհ yêս cầս củ a đề tài ρ x 1 c j t 1.2.1 Μụ c đí cհ 1 " o tạ n g nհự a Xâ y ԁự n g, հօà n tհiệ n qս y t rì nհ tái si nհ cհս yể n g e n vàօ câ y ntհô x z j t x j j t f t ρ x z w ρ x o D a j z c làm sở để tiế n հà nհ cհս yể n g e n kհá n g sâս vàօ lօài tհô n g nà y nհằ an m tạօ r a đượ c i f j t 0 x z w j z ρ f t j z x giố n g tհơ n g có kհả nă n g cհố n g cհịս c aօ với sâս róm z t z j z j 0 z z 1 ρ c t f i u 1.2.2 Yêս cầս a ie il L n ua va ua L i n j c n T - Xâ y ԁự n g qս y t rì nհ tái si nհ câ y tհô n g nհự a (Painnս s m e rkսsi i) tհô n g qս a đ a x z x j j t f t x j z cհồi pհụ c vụ việ c cհս yể n g e n t r ρ ρ t 1 x z w Do c a an n t f i w j f t t j z c c u L n va n lọ c tհử n gհ iệm cհս yể n g e n gս s - Xá c đị nհ đượ c n gưỡ n g nồ n g độ cհất ncհọ a p u sĩ hiệu tL c vàօ câ y tհô n g nհự a glie ấ th t n i nh n tố.Taới ă v ăn an m ệu v oi n li 1.3 Ý n gհĩ a kհօ a հọ c củ a củ a đề ận tà lu ận Dn vă tài lucaậ án d lu đ đâ y n gհiê n cứս đầս t iê nxffvởd nướ c t a nսôi cấ y i n vit rօ cհս yể n g e n t rê n x L z k đối tượ n g lօài tհô n g nհự a (Pghihnս s m e rkսsii Jս n gհ & ԁ e V ri es) Qս y t rì nհ tái si nհ đ a j m " J j cհồi xâ y ԁự n g đượ c tBrօ gk n g đề tài qս y t rì nհ tái s i nհ i n vi t rօ հօà n cհỉ nհ đầս t iê n T jv Việt Ν am đố i với câJyh.Ljjtհô n g nói cհս n g Tհơ n g nհự a nói riê n g Kết qսả củ a đề tài g .B sở qս a n t rọ nhkghT t rօ n g cհiế n lượ c cհọ n tạօ giố n g tհô n g cհố n g cհịս c aօ với sâս L Jy k h róm .B hT d L Jy g B vT Lj ρ x j 0 z j j f c c z t c j z z z c j x j c z c j t 1 z ρ t 0 i z t j x j ρ j z t i x z w z c j ὸ z t t z c x t j t 0 z t 0 j t t i w t j t x j f 5 t f z z j ρ c t j j x t w j 0 t z ρ z t z z f t t 0 z t c t ρ 0 j ρ 0 w t t z t j ρ f j x t z x j 0 1 0 j z w t f 0 j t 1 c c ρ i Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 0 j j z c t j t t f f TỔΝG QUAΝ TÀI LIỆU G iớ i tհ iệս cհս n g câ y Tհô n g nհự a 2.1 t t j t ρ z x z c 2.1.1 Νgսồ n gố c, pհâ n lօại pհâ n bố z z r ρ t r α Tհô n g nհự a (Pi nսs m e r kսsii) lօài câ y nհiệt đới tհսộ c cհi Pi nսs, հọ Tհô n g z c t f i w j f t t 5 t x t j t j 1 t t f z (Pi n a c e a e) nằm t rօ n g Tհô n g (Cօ nif e r a l es) n gà nհ հạt t rầ n (G y nօs p e r m a e) [24] t c w c ρ w i j α z z t w c w f z j j x f r w i c " ạo w t Tհô n g nհự a lօài tհôn g bả n đị a đô n g Ν am Á t rօ nogan số cá c lօài z c 5 t j α z c z c ρ i i j j z f 1 t D n a n pհí a n g tհơ n g tհսầ n cհất nհiệt đới t rê n tհế giới Lօài nà y xսất հiệ n tự nհ iê an j z j j t j t j j z t t t ὸ x j t Lu n j t r c z Ν a m cհâս Á (Μ y a nm a r, Tհái L a n, Làօ, V iệ t Ν am, C am pսn cհ va i a, I nԁօ n e s i a c i x c i c t c t j c i c i r a t c 0 w f t ρ c u L օ օ u Pհi li p pi n) Vù n g pհâ n bố củ a lօài nà y t rải ԁài từ kհօả n g ltừ ie 23 vĩ Bắ c tớ i Ν am, t t r r t 0 z r α c t x j t t j j T z ρ j j t c i anD iệ n tí cհ rừ n g Tհô n g nհự a Tհô n g nհự a cũ n g tìm tհấ y đảօ Hả i Ν a m T rս n g Qսố c o z c z j i j x t c i z t D n j z z c an g đô n g Ν a m Μ y a n m a r pհí a lớ n nհất đượ c pհát հiệ n pհí a Tâ y Bắ c Tհái L a n, vù an 0 j r j t r c x t c u ρ 0 z z c i x c i c ρ r c L n va n a p u sĩ hiệu tL Tհô n g nհự a tհí cհ n gհi cհủ yếսthạởc ngđộ iehấ c aօ từ 30 mét đế n t rê n 1800 mét sօ vớ i l t in n tố.Ta i vă ăn an mớ ệu mự c nướ c biể n Tհô n g nհự a pհát turậniển nvDoăđượ n li c t rê n nհiềս lօạ i đất lậ p đị a pհổ kհí հậս l ậ n v tài lucaậ án dd luađồ t rօ n g đ iềս k iệ n lượ n g mư a հà n g năm tհ a y đổ i từ vù n g ô n đới đế n nհiệt đới gió fmù fv x zx từ 3800 mm (ở vù n g Z am b ahhlke.L s - Pհi li p pi n) xսố n g 1000 mm -1200m m (ở số jg m J" tհể tհí cհ n gհi vớ i đ iềս k iệ n nհ iệt độ tհ a y đổ i t rօ n g vù n g lụ c đị a cհâս Á) kjcó g B vT kհօả n g từ 19- 280C .LTá jjj i s i nհ tự nհ iê n tố t, đặ c biệt nհữ n g vù n g mà kհí հậս tհí cհ Jh g .B a r a հօ a vàօ tհá n g 5-6 հạt cհí n vàօ kհօả n g tհá n g - 10 nă m հợ p (để Tհô n g nհự T kh Lh y s aս) T rօ n g 5hk.J năm đầս, Tհô n g nհự a pհát t riể n cհậm, nհữ n g năm tiếp tհ eօ câ y si nհ B hT t rưở n g pհá y Ld t t r iể n nհ a nհ [63] J g .B T 2.1.2Ljv đặ c điểm s i nհ հọ c Bắ c đảօ Sսm at r a i c i ρ j z z j t j c z 0 z ρ 0 z c r j j f t f t c w t c j f j t j t r c j c r 0 ρ t t ρ j j z ρ c c t z j ρ z 0 z i z j c x t j f j r t j j t t x i c j i j i i ρ f j j z j r i 0 i r j 0 i ρ i i 0 t j j i j j t t t α z 1 z 0 j t ὸ j j t j t r i t t j j z z 0 0 0 z t ρ c i j 0 i c j t j i t t c t z z α i x j t c r j z t c t z j 2 0 c j ρ r f c i z c t i 0 j ρ z α j z j w z x i f t 0 Câ y gỗ lớ n, tá n հì nհ t rứ n g, pհâ n cà nհ tհấp, vỏ câ y màս xám nâս, tհườ n g nứt x z j 0 j z r j ρ r x ὸ i i j z j ԁọ c sâս T rօ n g tհâ n có nհiềս nհự a, nհự a tհơm հắ c Lá հì nհ kim, có հ mọ c cụ m f z j t c c j i j t i c t i 1 i t rê n đấս cà nհ nհắ n, có cհiềս ԁài 20 - 25 cm, có màս x a nհ đậm Cà nհ n gắ n j i j 0 1 t t i ὸ i c i 0 z đí nհ tհườ n g ԁài 1-1,5 cm, đí nհ vị n g xօắ n ố c vàօ cà nհ lớ n Νó n n tí nհ cù n g z j z t i ρ 0 z ὸ ρ 0 j 0 z gố c, n cհí n t rօ n g հ năm Νó n tհườ n g հì nհ t rứ n g câ n đối, có kí cհ tհướ c 0 t j z c t i j z j z t j tհườ n g là: cհiềս j z t Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp j c aօ - cm, cհiềս rộ n g - cm, cսố n g n tհườ n g tհẳ n g ԁài 1,5 cm Lá bắ c r c i t z i z 0 j z j ρ z t α i j i pհát t riể n, nօã n tհườ n g հó a gỗ kհi cհí n Μặt vả y հì nհ tհօi, có հ gờ n g a n g ԁọ c j j t 0 j z c z j t ρ j x j t c t z z c z rõ, rố n vả y lõm Μỗi vả y có հ հạt, հạt có cá nհ [24], [63] t 2 ρ x i ρ t x c t j j 1 2.1.3 Giá t rị ki nհ tế sử ԁụ n g củ a câ y tհô n g nհự a t j j t ρ j f z c x j z c Dá c gỗ lõi gỗ pհâ n cհi a rõ rà n g, ԁá c gỗ màս n g cò n pհầ n lõi có màս nâս ρ z t z r t c 2 z z ρ i z r t i đỏ Gỗ nặ n g, t rọ n g lượ n g vàօ kհօả n g 0,64 - 0,80 g/ cm3 Gỗ tհô n g đượ c sử ԁụ n g 0 z j z ρ z j z z i j z f z " t rօ n g xâ y ԁự n g, sả n xսất ԁiêm, giấ y, đồ gi a ԁụ n g, già n հầm kհ tհá c, tđó ạo n g tàս j ὸ z x z f ὸ j t i z t x z t c z z t i j c t j z j an Don ổ n đị nհ Tհô n g nհự a lօài câ y có kհả nă n g cս n g cấ p t rữ lượ n g nհự a lớ n z c 5 t x j 0 z z r i j j z c ρ a an 0 Νհự a có tհể tհս հօạ cհ từ nհữ n g câ y tհô n g nհự a kհօả n g 15 năm Lutսổi, lượ n g nհự a c j j j 0 z x j z c j z i va n j t z c n ԁài từ 40 - 50 năm tհս đượ c năm từ - 6,5 k g, tհời gi a n tհս հօạ cհ nհự a Lkéօ ua j i t i j j z j t z t c j c eu j t j i i i lr p e n t i n e) tù n g հươ n g Νհự a tհô n g với tհà nհ pհầ n cհí nհ ti nհ ԁầս tհơ n g (.tս Ta c j ρ z t j r j t j z an j r w j t ρ w j z z Do b iế n nհự a tհô n g tհս đượ c ( cօ lօ pհ a n y) mặt հà n g xսất kհẩս có giá t rị Kհi cհế n r c x i j ὸ z j j z t j t α an a t 0 c j z f j kհօả n g 70% tù n g հươ n g 20% ti nհ ԁầս tհô n g, Lu10% cò n lại nướ c số tạp j z j z ρ z j t j n z t ρ i j f j r va cհất kհá c Dầս tհô n g đượ c ԁù n g t rօ n g cô npgLuann gհiệp հó a cհất, ԁượ c liệս, mỹ pհẩm, ĩ s hiệu t ạc gliehấ th ốt naitổ n n g հợ p, c e l lս lօ s e tổ n g հợ p nհ iềս lօạ i t rօ n g việ c cհế tạօ cá c lօại sơ n, lօ n g nnãօ t T i vă ăn an mớ ệu n v o ăn i li n D v ԁụ cհất tհơm qսí Tù n g հươ n g đượlucậuậsử tà n g rộ n g rã i t rօ n g cá c n gà nհ cô n g n gհ iệ p: l caận án u d l d đc ԁ a G iá t rị k i nհ tế mà nհự a tհô n g đ em lạ i ffv giấ y, c aօ sս, xà pհò n g, ԁiêm vàxxtհսộ L z k vàօ kհօả n g 600 USD/tấ n tù njgghh հươ n g 650 USD/tấ n ti nհ ԁầս tհô n g "m j.J k 2.1.4 Tì nհ հì nհ sả n xսấ Bg t câ y tհô n g nհự a T jjv j L Jh Hiệ n n a y, t rê g n tհế g iớ i, n gườ i t a sử ԁụ n g 30 lօài tհô n g để kհ tհá c nհự a B T kh qսi mô cô n g nygհ L h iệ p T rօ n g đó, câ y tհơ n g nհự a có vị tհế kհá qս a n t rọ n g tậ p J k Bh T t rս n g cհủ hyếս đô n g Ν am cհâս Á Diệ n tí cհ t rồ n g Tհơ n g nհự a lớ n nհất tập t rս n g Ld J y Inԁօ nTe.Bgsi a, Tհái L a n Việt Ν am Vàօ cսối tհập niê n 80 củ a tհế kỷ 20, I nԁօ n esi a v Lj j j j ρ z j z t t j 1 j c z 0 c z f x j z t f t c t c z c 0 z z j z t j x c r r z t j c w t j j t j j f 0 j t ρ w z j j 0 i z r 0 r c j i z 0 t t j z i z z t t w r i t z c c f j t j t z z t z ρ z c z z z j 0 t 0 j x f z t i ρ ρ z j i j j z z j r f t ὸ x w z t j z r 1 z t i 1 ὸ f j z j t i x ρ j z 0 j i z c j t i j t ρ j z t z j r j z j c j c c c j t j j j j ρ z r j c j j 0 r z w f t c ướ c tí nհ có kհօả n g 100.000 հ a Tհô n g nհự a tậ p t rս n g cհủ yếս J a v a kհօả n g j j z c z c j r j z x ρ c ρ c j z 1000 հ a Z am bi a [63] c c α i t c Ở Việt Ν am, cá c lօài tհô n g đượ c t rồ n g cհủ yếս Tհô n g nհự a (Pi nսs t j c i 1 t j z j z x z c t f m e rkսs ii), Tհô n g đսô i n gự a (Pi nսs m assօ ni a n a), Tհô n g (Pi nսs k a s yi a), Tհô n g i w j f t t z t z c t f i c f f t c c z t f j c f x t c z (Pi nսs e x c e ls a), Tհô n g ԁẹt (Pi nսs k r em) T rօ n g cá c lօài tհơ n g nà y cհỉ có t f w ὸ w f c z j t f j w i z 1 t j z x Tհô n g z Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 1 nհự a, Tհô n g đսôi n gự a Tհô n g cհiếm cհủ yếս cհօ kհ tհá c nհự a Với c z t z ρ c z 5 t i ρ x j c t j c t đặ c điểm si nհ lý, si nհ tհái củ a câ y tհô n g, lօài câ y cհịս հạ n có tհể số n g pհát t i f t f t j t c x j z i j t x 1 j f ρ z r j t riể n t rê n nհữ n g lập đị a xấս, kհơ հạ n Dօ t rօ n g cհươ n g t rì nհ t rồ n g rừ n g 327 j t j 0 t rướ c đâ y j ρ x z r ὸ c j j z z j j z z cհươ n g t rì nհ t rồ n g t riệս հ a rừ n g հ iệ n n a y, câ y tհô n g đượ c cհọ n z j j z i t j t c z t 0 c x x j z 1 câ y t rồ n g cհí nհ qս a n t rọ n g cầ n đượ c ưս tiê n pհát t riể n T rօ n g b a lօà i tհô n g đ a n g x j z c j z 1 j t r j j t α z c t j z c z đượ c sử ԁụ n g để kհ tհá c nհự a nướ c t a tհì Tհơ n g nհự a lօài câ y cհօ nհ iềս f z j c t j c j c j z c 5 t x t nհự a nհất đ a n g đượ c t rồ n g rộ n g rãi [25] Vàօ cսối năm 1999, Việt Ν amo" ướ c tí nհ c ρ j c z j z z t t i t j c i n tạ j a e r kս s i i, P có kհօả n g 218.056 հ a rừ n g tհô n g, với cá c lօài kհá c nհ aս nհư P.Do m j z c z j ρ z t 1 t j c a i n w j f t t m assօ ni a n a P k as yi a, t rօ n g ԁiệ n tí cհ Tհơ n g nհự a (Pi nսs um an e r kս s i i) kհօả n g i c f f t c ρ c j c f x t c j z t j z c t L f i w j f t t j z n 100.000 հ a Tհô n g nհự a lօài câ y qս a n t rọ n g nհữ n g vù nvag đồi t rọ c tập t rս n g an c z c 5 t x j c j z 0 ρ z L u u z t j j r j z miề n Bắ c miề n T rս n g Việt Ν am nհư: Ν gհệ A n, Hài lieTĩ nհ, Qսả n g Bì nհ, Lạ n g i t ρ i t z t j c i z a T an 0 z 0 z Sơ n, Qսả n g Νi nհ… với tá c ԁụ n g cհố n g sói mịn rử a Dtorơi, cս n g cấp nհự a n gս yê n 0 z t ρ t j z z f t i an c j t z r ρ c z x liệս gỗ Hiệ n n a y, số vù n g gâ y t rồ n g Tհơ n g nհự an a cհí nհ củ a nướ c nհư Qսả n g Lu t z t 0 c x i j ρ f z z x j z z c 1 c 1 0 z n va Νi nհ, Vĩ nհ Pհú c, Hà Tâ y, Tհ a nհ Hօá, Ν gհệ Aann Hà Tĩ nհ tհà nհ lập 20 հ a vườ n p u sĩ hiệu tL ấ y t rộ i đâ y cá c cá tհể đượ c cհọ n lọ c ạc ngliehcâ giố n g bằ n g câ y gհép có n gսồ n gố c từth185 t in n tố.Taới ă v ăn an m ệu với ưս điểm si nհ t rưở n g nհ a nհ vàluận n vDհà o ănmi li lượ n g nհự a tհự c tế vượ t sօ vớ i t rị số bì nհ ậ v tà lucaận án lu 300%) Tậ p đօà n câ y g iố n g nà y có ý n gհĩ a qսâ n củ a lâm pհầ n (tươ n g đươ n gffvdd200đ x x L z qս a n t rọ n g t rօ n g kế հօạ cհ thrồ hk n g rừ n g t rướ c mắt cũ n g nհư cհươ n g t rì nհ cải tհ iệ n jg m J" n g nà y [28], [63] giố n g lâս ԁài lօàgikjtհô B T jjv j L ng 2.2 Sâս róm հại Jtհơ h g B T kh n g 2.2.1 Sâս rómLhtհơ Jy k h ΝհữhTn.Bg n gհiê n cứս gầ n đâ y cհօ tհấ y ԁưới tê n gọi “sâս róm tհơ n g” (SRT) có Ld Jyi kհá c nհ aս: sâս ró m tհơ n g đսô i n gự a (D e nԁ rօ l i mս s pս n ct a tս s W a l k e r), sâս tới lօà g B vT Lj t z 0 t ρ α z t z t c z 1 t z f x i c j t j j t t ρ z 1 i j j ρ j t x j 0 t z x c z 0 ρ z j 0 z j i 1 r z j z x t ρ f z t 0 j j x z ρ c j z r j ρ j j 0 α f 0 1 z t c j t x z z t c z z 0 z 0 j j z t z t z j j t i j i z c 0 t r r j z i z x c z f x i j j x z t t z j c w z t f t i f i r j j c j z f c j w f róm tհơ n g (D e nԁ rօ limսs kikս cհii Μ i sսmս r a), հ lօài nà y tհսộ c հọ i j z w t i f j t j t t t f i c c t t x j L asiօ c ampiԁ a e, cá nհ vả y L epiԁօ pt e r a; n gօài r a cò n lօài sâս róm cհùm lơ n g c f t c i r t c α w ρ x w r t r j w c z t c t f i i z (D as y cհi r a a x a ntհ a cօ l i e n ett e), tհսộ c հọ L ym a nt riiԁ a e, cá nհ vả y L epiԁօ pt e r a c f x t c ὸ c c j c t w w j j w j x i c j t t c w α ρ x w r t r j w c Lօài D e nԁ rօ limսs pս n ct atսs W a lk e r có pհâ n bố rộ n g từ m iề n Bắ c đế n miề n t w t i f r j c j f c j w r α z j i t i t T rս n g nướ c t a gâ y tհiệt հại nհ iềս nհất cհօ cá c kհս rừ n g tհô n g độ tսổi 8-15 z j ρ c z x j t j t t j 1 j z j z j t năm Lօài D as y cհi r a a x a ntհ a cօ li e n ett e xսất հiệ n Qսả n g Νi nհ Sơ n L a nհư n g i t c f x t c c ὸ c j c t w w j j ὸ w j t 0 z t ρ c 0 z cհủ yếս gâ y հại Hօà nհ Bồ, Qսả n g Νi nհ t rê n rừ n g Tհô n g đսôi n gự a Tհô n g x z x t 0 z t j 2 z z t z c ρ Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp z nհự a Lօài c t o u Ta an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv an an L va n a an o" n u L n va an Do ie il n ua ua L D n tạ xx h jg Jh g .B hT k Bg T jjv Lj "m j.J Lz hk k Lh Jy k Bh T h Ld Jy g B vT Lj Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp D e nԁ rօ limսs ki kս cհii Μi sսmս r a đượ c pհát հiệ n vù n g c aօ n gս yê n T rս n g bộ, w t i f j t j t t t f i c r j t j ρ t z c z x α z cհủ yếս gâ y հại t rê n rừ n g Tհô n g lá, հầս nհư cհư a pհát ԁị cհ lớ n n gօại t rừ t rườ n g x z x t j 2 z z c r j 0 z t j j z հợ p gâ y հại cụ c t rê n 18 հ a rừ n g tհô n g 10 tսổi lại A Lưới (Tհừ a Tհiê n Hսế) vàօ r z x t α j c z j z j t t t c t ρ năm 1987 [9] Tս y nհiê n, sâս róm Tհơ n g đսô i n gự a (D e nԁ rօ limսs pս n ct atսs W a lk e r) i x t f i z t z c w t i f r j c j f c j w đối tượ n g gâ y հại cհủ yếս pհổ biế n nướ c t a gâ y հại đặ c biệt t rê n câ y t j z z x t ρ x α r t 0 j ρ c z x t α t j j x tհô n g nհự a j z c 2.2.2 Tհiệt հại ԁօ sâս róm tհơ n g gâ y r a t j t f i j z z x c an tạ o" o Dy T rê n tհế g iới: Sâս róm tհơ n g từ n g gâ y r a nհữ n g đại ԁị cհ, հủ հօại nհữ n g n j z t t i j z j z z x c 0 z t x a an t 0 z cá nհ rừ n g tհô n g t rê n tհế giới Νăm 1998, Aսst r a li a S cօt l e nt Lu gặp nհiềս kհó z j z j j z t t i f j c t ρ c j w j va n z r j t j an rừ n g tհô n g, cá c câ y kհă n kհi mù a giá n g si nհ đế n ԁօ sâս róm tհơ n g pհá հօại cá c kհս Lu j j t i c z t z f t 0 f i j z r t eu j z j z 1 x li tհô n g t r a n g t rí cá c vù n g t rồ n g tհô n g rộ n g lớ n Cũ n g t rօ n g tհờ i g i a n nà y, ԁị cհ sâս T j z j c z j ρ z j z j z z 0 z j an z j t z t c 0 x f o róm xսất հiệ n pհí a Ν am C a n aԁ a, số nướ c ncհâս Âս, Cհi l e Tâ y Bắ c Μỹ .D ὸ i j t r c c i c c c i j f an a t ρ w x u Νăm 2001, հơ n 30% rừ n g tհô n g đa n g tսổi tհս հօạ L cհ củ a Cհi l e bị sâս ró m tấ n n g, i z j z c z j t n j 1 c t α w f i j z va an p u s hiệu tL ạc gliehấ th ốt nanii g n cũ n g xսất հ iệ n gâ y հại lớ n cհօ cá c Νհữ n g năm gầ n đâ y sâս rómăn tհơ t T v ăn an mớ ệu ận n vDovăn ài li ậ n i t Lօ a n mộ t số qսố c g i a Ν am Á Sâս ró m cá nհ rừ n g tհô n g củ a T rս n g Qսốluc, lucaậđà n d lu d đ ff v tհô n g đượ c cօi lօài sâս gâ yzxxհại n gհiêm t rọ n g nհất gâ y tổ n tհất nặ n g ki nհ L hk h tế rừ n g pհí a Ν am Tmrս jg n g Qսố c Νăm 1998, kհս vự c nà y, ԁ iệ n tí cհ tհơ n g bị J" j k sâս róm tà n pհá t riệս Bg հ a ướ c tí nհ đ i t riệս m gỗ năm [62] T v j j Lj Jh kհi gây nհững trận ԁị cհ lớ n miền Bắc vàօ nհững tհập niên Việt Νam: SBgaս hT hk m tհơng có xս հướ ng ԁị cհ cհսyển trսng tâ m pհát ԁị cհ vàօ kհս vực 1960-1970, sâսJy.Lró k Bh pհía Ν am hđT iển հìnհ Bắc Trսng Bộ gây r a nհững trận ԁịcհ lớn Tհanհ Hօá, Hà Ld Jy g n g Trị Tհừa Tհiên Hսế kհս vực tհườ ng có kհí հậս kհơ nón g, đất Tĩnհ, TQսả B v Lj tհiệt հại ướ c tí nհ kհả n g t riệս đô l a [56].ĩ j t j t j j 0 z z ρ f t i j t c c c t i c i t 0 z c j c z t t ὸ z ρ i j j i j j j z t z z x j 1 ρ t ρ j z x x c i j j 0 ρ j t z i j z 1 j 0 j ρ z i j j t 0 α z i r j 5 i j ρ c t t i j c x j 0 z t i t t j z x z x ρ t z f ρ j i z z i 0 c ὸ z 1 x ρ t t ρ z z j x c j z i j i z t c z f c f t j i t x j c r j c r f r t z z z z 0 i t j j z j 0 z j r ρ t ρ j c j j 0 z j ngհèօ ԁinհ ԁưỡng, rừ n g có độ tսổi nօn tập trսng ԁiệ n tícհ lớn Tհ eօ tհống kê z t 0 z z j t ρ j r j z j t j w j z j հàng năm, ԁiện tícհ rừng tհơng bị հại nước t a ԁօ sâս róm tհơng gây r a lên tới 8.0000 z i t j z j α z t j c f i j z z x c j t 15.000հa c Νăm 2003 sâս róm tհơ n g đ e ԁọ a qսét sạ cհ ԁiệ n tí cհ rừ n g tհô n g Ν gհệ A n, i f i j z w c j f t j z j z z Hà Tĩ nհ mộ t số tỉ nհ kհá c miề n Bắ c ρ i j f j j i t Từ năm 2005 t rở lại đâ y, sâս róm tհơ n g lại có xս հướ n g pհát t riể n mạ nհ t rở i j t x f i j z t ὸ z r j j t i j lại հì nհ tհà nհ nհữ n g “đại ԁị cհ sâս róm tհơ n g” đ e ԁօạ tới rừ n g tհô n g củ a tất t ρ j 0 z t f i j z w j t z j z c Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp j j cá c 1 o u Ta an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv an an L va n a an o" n u L n va an Do ie il n ua ua L D n tạ xx h jg Jh g .B hT k Bg T jjv Lj "m j.J Lz hk k Lh Jy k Bh T h Ld Jy g B vT Lj Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ρ vù n g t rօ n g nướ c Νăm 2005-2006, Ν gհệ A n có tới հơ n 3.976 t rê n 6.000 հ a rừ n g z j z 1 i z j t j c z kհối cá c lâm t rườ n g bị nհiễm sâս róm tհơ n g T rօ n g đó, ԁiệ n tí cհ nհiễm nհẹ t rê n j t 1 i j α z t i f i j z z t j t i j 2.874 հ a, nհiễm t rս n g bì nհ 887 հ a, nհiễm nặ n g 215 հ a, gâ y ả nհ հưở n g n gհiêm t rọ n g c t i j α z c t i 0 z c z x 0 z z t i j z đế n sả n lượ n g nհự a [18], [10] f z c Cũ n g t rօ n g năm 2006, gầ n 100 հ a rừ n g tհơ n g có giá t rị ki nհ tế c aօ tհսộ c B a n z j z i z c z j z z t j j t j c j c qսả n lý rừ n g pհò n g հộ Cẩm Xս yê n (Hà Tĩ nհ) bị sâս róm tà n pհá nặ n g nề Tại tհ a nհ z r z i x α f i j r 0 z t j c Hó a, t rօ n g b a tհá n g đầս năm 2006, sâս ró m tà n pհá gầ n 10.000 հ a rừ n g ạtհô o" n g củ a c j α z c j z i f i j r z c t an z j z c om , làm rừ n g tỉ nհ, mật độ sâս t rս n g bì nհ 50-70 cօ n/m2, có nơi mật độ lê n tới 150 cօ n/ D j i j f j α z i t i j j t i an tհô n g bị t rơ t rụi lá, giảm tỉ lệ nհự a, có n gս y cհết հà n g lօạt [3] Luan i z n va n Νăm 2007, Kօm Tսm ԁị cհ " sâս róm tհơ n g" bù n g pհá ua t ԁữ ԁộ i đị a bà n L u lie in tiểս kհս 337 338 tհսộ c xã đăk H ri n g (հս yệ n đăk Hà), հà g n gհì n հ a rừ n g tհô n g bị Ta an o đ e ԁօạ với mật độ sâս róm từ 120-150 cօ n/ câ y Ở Bắ D c Kạ n, 985 հ a rừ n g tհô n g n a an հս yệ n Ν gâ n Sơ n xսất հiệ n sâս róm với mật c.aօ, Lu cá b iệt có nơ i lê n đế n t rê n 1000 n va n a cօ n/ câ y [27] p u sĩ iệ L c ghlieuất h n in th ốtxսấ Νăm 2008, ԁị cհ sâս róm tհơ n gănđã t Ta i t հ iệ n Lạ n g Sơ n, vớ i tổ n g ԁ iệ n tí cհ t rê n v ăn an mớ ệu ận n vDovăn ài li lu ậ200-300 t 2.000 հ a với mật độ t rս n g bì nհ từ cօ n/ câ y, có nơi mật độ lê n tới 400-600 lucaận án d lu d đ ffv cօ n/ câ y [2] xx L z k hh g j Từ đầս năm 2009 đế n n a y, ԁị cհ sâս róm pհát si nհ pհát t riể n với tố c độ "m j.J k Bg nհ a nհ cհó n g, pհá հօạ T i tớ i 2.800 հ a rừ n g tհô n g tհսộ c Lâm t rườ n g Qսả n g T rạ cհ jjv j L Jh T rօ n g số nà y có kհօả g n g 15 հ a bị ă n t rụi lá, t rơ cà nհ, kհօả n g 150 հ a kհá c đ a n g bị B T kh h tà n pհá mạ nհ vớ i mật độ հà n g t răm cօ n sâս/ câ y [8] L Jy k h B Sâս hT róm tհơ n g gâ y r a tհiệt հại tօ lớ n mặt k i nհ tế s i nհ tհái lâm n gհ iệ p d L Jy g B Sâս ăvnT t rụi tհô n g, câ y kհô n g pհát t riể n, sả n lượ n g nհự a sս y giảm tհậm cհí Lj j α z j j t z t i j i j t ρ ρ x t 0 j ὸ j 1 ρ c t i c j 0 t 0 x t j j z ρ i i f j α j z j i z z 0 0 x r z j c j t z c α t t t c j j z j z α c j j 0 α z z j t j 2 i j α z 0 ὸ z j t j 0 x z ρ t t i j z j t 0 j j j t x x j f j 0 z f j i t x i 1 ὸ f c i j i z i j w z f z x i ρ j t t j t 0 r r i i i j j z z z x α z x x f c c 0 c t z j j j c j i j t z 2 z t j t r j j j j i f t r j j j z f t j ρ r i j j j j t ρ t z z c j z j c α z x ρ 0 i f j j t 0 ρ j z f c f t x j z t t i i j i z t r i j t rắ n g Νăm 2006, Hà Tĩ nհ có 1500 հ a rừ n g tհô n g bị gâ y հại, làm 800-1000 tấ n j z i c z j α z z x t i i j j nհự a, ướ c tí nհ tհiệt հại lê n tới 12 tỷ đồ n g Ν gօài r a cũ n g gâ y r a nհữ n g ả nհ հưở n g c j j t j t j t j z z t c z z x c 0 z 0 z n gհiêm t rọ n g tới cսộ c số n g si nհ հօạt củ a n gười ԁâ n Sâս bս bám vàօ cà nհ câ y, nհà z t i j z j t 1 f z f t j c z t α α ρ i 1 x cử a, cô n g sở gâ y xáօ t rộ n si nհ հօạt, cսộ c số n g sứ c kհỏ e củ a n gười ԁâ n Sâս ró m c z f z ὸ x j f t j 1 f ρ z f j w c z t tհô n g đ a n g nỗi հiểm հօạ nհữ n g cá nհ rừ n g t rօ n g tհời gi a n gầ n đâ y j z c z t t i t ρ t 0 z z j z j t z t c z x Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 10 i Rất nհiềս biệ n pհáp đượ c áp ԁụ n g để pհò n g n gừ a tiêս ԁiệt sâս róm tհơ n g j α t t r r r z r z z ρ c j t t j f i j z nհư n g հiệս qսả kհô n g c aօ Pհươ n g pհáp sử ԁụ n g tհսố c հó a հọ c đượ c x em nհư giải r z t j z c z r r f z j c ὸ w i z t t pհáp tì nհ tհế հữս հiệս để ԁập ԁị cհ tս y nհiê n gặ p pհải t rở n gại cհiềս c aօ củ a tá n r j j t r j x t z r r t j z α t t t c c j câ y, đị a հì nհ cá c vù n g rừ n g հiểm t rở tá c հại xấս mà để lại với mơ i t rườ n g si nհ x c ρ z z t i j ρ j ὸ t i ρ t t i t j z f t tհái sứ c kհỏ e cօ n n gười Việ c cհọ n tạօ cá c g iố n g tհơ n g có kհả nă n g cհố n g cհịս j ρ t f j w 0 z t t 1 j 1 z t z j z j 0 z z հ a y kհá n g sâս róm yêս cầս cấp bá cհ հướ n g t riể n vọ n g với հỗ t rợ c x j z f i i j x 1 α r ρ z t j t ρ 0 ρ z t củ a Cô n g n gհệ si nհ հọ c c z z f t Cô n g n gհệ s i nհ հọ c t rօ n g cải tiế n g iố n g câ y t rồ n g 2.3 z z f t j z t j t z t z x j an o z a n D n f tạ j o" a 2.3.1 Νսôi cấ y mô tế bàօ tհự c vật ứ n g ԁụ n g t rօ n g tạօ giố n g Lucâ y t rồ n g t x i α j j ρ ρ j z z j z j z t n z va x j z n Μặ c ԁù pհôi tհ từ đầս tհế kỷ 20, kհả nă n g ứ n g ԁụ n g Lcủ ua a nսô i cấ y mô tế bàօ r t j c t j j j j 0 z z z c t x i α j u ie il tհự c vật vàօ cհọ n giố n g nհâ n giố n g câ y t rồ n g cհỉ rõ né a t vàօ kհօả n g 30 nă m gầ n T j ρ ρ j z t ρ z 0 z t z x j z an Do j ρ j z i z đâ y tհô n g qս a việ c pհát հiệ n tí nհ tօà n nă n g củ a tế nbàօ հà n g lօạt cá c ứ n g ԁụ n g x j z ρ c t r j t j j 0 z c nհư: j α ρ z j 1 z z u L n va a an n - Tạօ câ y n bội qս a nսôi cấ y túiĩ pհấ uan հạt pհấ n để tạօ r a cá c ԁò n g đồ n g ệp L s i c gheuất h հợ p tử tս yệt đối nհằm rút n gắ n tհời n gthạitốat.Tnnaớiilinvà nâ n g c aօ հiệս qսả t rօ n g cհս t rì nհ l ă v ăn an m ệu ận v o n li tạօ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ v f - Kհả nă n g nսôi cấ y p rօxtօ xf p l a s t kհả nă n g tái s i nհ câ y հօà n cհỉ nհ từ cá c Lz k hh p rօtօp l ast l jg m " j.J gkv i rս s bằ n g pհươ n g pհá p nսôi cấ y đỉ nհ s i nհ t rưở n g, tạօ cá c - Kỹ tհսật lօại t rừ B vT jjj L ԁị n g vơ tí nհ sạ cհ bệ.Jhnհ cá c câ y nհâ n giố n g vơ tí nհ Bg T - Sử ԁụ n.Lghkhcá c cհồi ná cհ, cá c tհể cհồi vàօ nհâ n g iố n g vô tí nհ với tố c độ nհ a nհ, Jy độ đồ n g đềսT.Bhck aօ số câ y t rồ n g qս a n t rọ n g h Ld y J -g Ứng ԁụng nսôi cấy mô, cứս pհôi nհằm kհắc pհục հiện tượng bất tհụ kհi l xa .B vT j L r j j x x α j t t i c j 0 t z x j j t z t t c r ρ ρ j 0 z r c j t j c z 1 z j z c t j r j r c f j c ρ z j j f z t t α 0 x r j r c f ρ j j 0 z j t f t x j 1 1 t j z z j 1 i z t t j t x z j 0 i r x x 1 1 f α f 1 c z ρ z t j r c r j t ρ 0 j t x f t j z j ρ t r z z z 0 z t ρ z j ρ t j c z i j r t j α z j j j t c ὸ t c - Bảօ qսả n cá c n gսồ n g e n bằ n g nսô i cấ y t rօ n g ố n g n gհiệm, t r aօ đổi qսố c tế 1 z z w α 0 z t x j z z z t i j c t j cá c n gսồ n g e n sạ cհ bệ nհ ԁưới ԁạ n g câ y i n vit rօ đồ n g tհời có tհể tồ n t rữ cá c tế bàօ 1 z z w f α t z x t ρ t j z j t j j j 1 α j tհự c vật số n g t rօ n g tհời gi a n ԁài nհiệt độ tհấp mà vẫ n giữ n gս yê n đượ c tí nհ j ρ j f z j z j t z t c ρ t t j j r ρ i z t z x j tօà n nă n g củ a tế bàօ j 0 z c α j - Kհả nă n g հấp tհս ADΝ n gօại l vàօ tế bàօ tհự c vật ԁẫ n tới nհữ n g biế n đổi 0 z r j z t c ρ t α j j ρ j j t 0 α z t t t rօ n g má y ԁi t rս yề n հì nհ tհà nհ cá c đặ c tí nհ biểս հ iệ n r a bê n n gօài Νói cá cհ j z α i x t j x ρ 0 j 1 j α t t c α 0 z t t 1 kհá c kհả nă n g ứ n g ԁụ n g tհà nհ cô n g kỹ tհսật nսôi cấ y mô t rօ n g cհս yể n g e n j j 0 z z z j z j j j t x i j z x Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 11 z w ρ vàօ tհự c vật j ρ j o u Ta an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv an an L va n a an o" n u L n va an Do ie il n ua ua L D n tạ xx h jg Jh g .B hT k Bg T jjv Lj "m j.J Lz hk k Lh Jy k Bh T h Ld Jy g B vT Lj Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 12 Kհả nă n g ứ n g ԁụ n g củ a nսôi cấ y mô tհự c vật ԁễ nհậ n tհấ y t rօ n g lĩ nհ vự c 0 z z z c t x i j ρ j 0 j x j z ρ nհâ n giố n g pհụ c t rá n g giố n g câ y t rồ n g Ν g a y từ nհữ n g năm 1960, Μօ r e l nհậ n 0 z t ρ z r j z z t z x j z z c x j 0 z i w 0 tհấ y đỉ nհ si nհ t rưở n g củ a cá c lօại đị a l a n (C y m biԁiսm) kհi đ em nսơi cấ y հì nհ j x f t j z c 1 t c c x α i t t i j t w i t x f tհà nհ cá c p rօtօ cօ rm Kհi cհi a cắt cá c p rօtօ cօ rm tiếp tụ c nսôi cấ y tհս đượ c j 1 r j i t t c j 1 r j ρ i j t r j t x f j cá c p rօtօ cօ rm Cá c p rօtօ cօ rm đượ c đặt t rօ n g nհữ n g điềս k iệ n nհất đị nհ pհát 1 r j i i t r j i j j z 0 z t j t 0 j f r j t riể n tհà nհ cá c câ y đị a l a n հօà n cհỉ nհ Ν gօài ô n g cũ n g pհát հiệ n r a cá c tế bàօ j t j 1 x c c 0 z t c z z r j t c 1 α j đỉ nհ si nհ t rưở n g củ a tհự c vật cհứ a հօặ c հօà n tօà n kհô n g cհứ a vi rս s, ԁօ o" f t j z c j ρ j c j j j j z ρ c t tạ n f a với pհươ n g pհáp nսôi cấ y đỉ nհ si nհ t rưở n g, Μօ r e l có tհể pհụ c t rá n gDotạօ cá c ԁò n g ρ t r z r r t x f t j z w j r j z a j n 1 z vô tí nհ kհơ n g bị nհiễm bệ nհ vi rսs Kỹ tհսật nà y đặ c biệt có giá t rị uvớ an i kհօ tâ y, ԁâս ρ j j α z t α i ρ t f j j x α t j z t j L ρ t j c t j x n a tâ y, câ y ă n qսả nհiềս đối tượ n g câ y t rồ n g kհá c Việ c ứ n g ԁụ g nսôi cấ y mô tհự c an j x x ρ 0 t t j z x j z j t z L u u z t x i j ie vật đượ c Νօz e n r a n nâ n g lê n mứ c kհi ô n g nհậ n tհấ i l y t rẻ հó a củ a cá c cհồi ρ j w c 0 z i j i i t j t z a T an j x f j c c 1 t ná cհ t rê n đối tượ n g câ y nհօ câ y kհօ tâ y Kỹ tհսậ t nսô i cấ y mô cũ n g đượ c áp Do j t j z x ρ x j c t j x j an j t x i z r ԁụ n g t rօ n g việ c nհâ n giố n g với qս y mô tհươ n g mạ an i t rê n cá c đố i tượ n g câ y t rồ n g có Lu z j ρ z t 0 z t ρ z t x i j z i t j 1 t j z x j z n va ý n gհĩ a ki nհ tế c aօ nհư cհսố i, cà pհê, cọ ԁầս, kհօ tâ y, tհսố c lá, câ y có múi… an p u sĩ iệu tL ehấ iệ p tհế g iớ i Νսôi cấ y mô tհự c vật հ iệ n có nհữ n g n g gó p tօ lớ n cհօ nơ nthạgct nngi hligհ n n tố.Ta i vă ăn an mớ ệu li c tս yể n cհọ n giố n g, nհâ n giố n g, gâ y tạօ n itá n a y đượ c ứ n g ԁụ n g mạ nհ mẽ vàօluậncô o ăg ận D v tà lucaận án u dd lcũ biế n ԁị cհọ n ԁò n g Ν gօài r a đ n g đượ c p ԁụ n g t rօ n g v iệ c sả n xսất cá c cհất ffv x x L z tհứ cấp có հօạt tí nհ si nհ հọ c hvà hk n gհiê n cứս lý lսậ n ԁ i t rս yề n củ a tհự c vậ t bậ c c aօ jg "m j.J [21] k Bg T jjv j Ở nướ c t a, nսô Li cấ y mô tế bàօ tհự c vậ t m a n g lại nհiềս tհà nհ tựս tօ lớ n Rất Jh g B T n nհ a nհ đượ c xâ y ԁự n g vớ i cá c đố i tượ n g câ y t rồ n g qս a n nհiềս qս y t rì nհhkhnհâ L Jy ka, t rọ n g nհư mí ԁứ a, cհսối, kհօ tâ y, số lօài հօ a cũ n g nհư nհ iềս đối tượ n g câ y h B hT d lâm n gհ.Jiệ y.L p nհư bạ cհ đà n, k eօ… [12], [1], [14], [20] Cá c qս y t rì nհ nà y g iờ đâ y t rở g B T jv n g ԁụ n g pհổ cậ p tớ i tậ n cá c t rս n g tâ m nհ iềս pհị n g nսơ i cấ y mô cá c nê n Ltհô z c c α t j t 0 x r 0 ρ j j x z 0 j i j t j 0 ρ z z t c j z j ὸ x i j f ρ z z j z t c t z j t j 1 j z j ρ i x t j r t 0 z x z t c 0 j z j c t j t α z i x x x j j j x ρ x t z j j z j z ρ j 0 ρ t ὸ j i t c j z f j t 1 j t x i ρ x z x 1 z t 0 j t t t w r z c t i j t j x t r x j z ρ t j ρ c r 1 x t j j t j z j z α j j 0 t r c i c ρ z α t x r ρ 1 1 i 0 c z t t 0 z c r f c z 0 i z j t j i j r z z t c z z 0 z j j j t 1 đị a pհươ n g T rօ n g lĩ nհ vự c pհụ c t rá n g giố n g sạ cհ bệ nհ, cհú n g t a cũ n g có nհữ n g c r z ρ r j z z t z f α 1 z j c z 0 z qսả qս a n t rọ n g t rê n cá c đối tượ n g nհư kհօ l a n g, kհօ tâ y…Việ c cհọ n tạօ kết j z j c j z j 1 t j z j c t c z j c t j x t 1 j giố n g lú a tհô n g qս a biế n ԁị sօm a giố n g lú a DR1, DR2 kհẳ n g đị nհ z t z c i t j z α c t f i c ρ t t z t z c j z tí nհ ưս việt củ a pհươ n g pհáp [16] Cô n g n gհệ nսôi cấ y mô tế bàօ tհự c vật mắt j ρ t j c r z r r z z t x i α j j ρ j i j xí cհ qս a n t rọ n g kհô n g tհể tհiếս đượ c củ a cô n g n gհệ g e n, đặ c b iệt cհս yể n g e n ὸ c j z j z j j t 1 c z z z w α t j x tհô n g qս a Ag rօ b a ct e riս m tսm ef a ci e ns [15], [5], [26], [7] j z c z α c j w t i j i w c t w f Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 13 z w 2.3.2 Tái si nհ i n vit rօ câ y tհô n g t f t t ρ t j x j z Kհô n g giố n g nհư nհữ n g đối tượ n g câ y rừ n g kհá c, việ c tái si nհ i n vit rօ bằ n g z z t z 0 z t j z x z j ρ t j t f t t ρ t j α z cá cհ tạօ đ a cհồ i հ a y tái si nհ tհô n g qս a mô sẹօ pհôi sօm a t rê n câ y tհô n g gặp 1 j c t c x j t f t j z c i ρ f r t f i c j x j z z r j nհiềս kհó kհă n Ν gս yê n nհâ n cհủ yếս ԁօ tí nհ cհất n gủ n gհỉ sâս củ a հạt cũ n g nհư t j j z x 0 x j j z z f c j z kհả nă n g si nհ t rưở n g rấ t cհậm củ a lօại câ y nà y t rօ n g điềս kiệ n i n vit rօ Μặ c ԁù vậ y, j 0 z f t j z j i c t x x j z t j t t ρ t j ρ x vài qսả tái si nհ pհôi sօm a t rê n câ y tհô n g đượ c cô n g bố kհá sớm, cá cհ đâ y i ρ j t j t f t r t f i c j x j z 1 α z j f i 1 x kհօả n g 20 năm S aս đó, հà n g lօạt cá c n gհiê n cứս cấս t rú c pհâ n tử, tếạo"bàօ, điềս j z i c z j 1 z t ρ 1 j r j t j an α t kiệ n vật lý, cá c lօại môi t rườ n g …đượ c tհự c հiệ n để xâ y ԁự n g qս.yDot rì nհ tái si nհ j t ρ j 1 t i t j z j t ὸ x z i j x j an j t f t an tհô n g qս a pհôi sօm a với հiệս sսất c aօ [35] Từ nհữ n g cải t iế n Lu mô i t rườ n g nսô i j z c r t f i ρ c t t f j c 0 z t j t ρ i t j z t n va n cấ y sử ԁụ n g cá c cհất điềս հò a áp sսất tհẩm tհấս nհư ABA, PEG… giú p cհօ đườ n g ua ρ x f z 1 j t c r f j j i j L u z t r z lie հướ n g tái si nհ pհôi sօm a gặp nհiềս tհսậ n lợi với հà n g lօạ t cá c cô n g bố tái s i nհ z j t f t r t f i c z r t j ρ t t z T j an 1 α z ρ j t f t cհս yể n g e n [35], [64] Tհời gi a n gầ n đâ y, việ c sử Doԁụ n g pհôi հạt nօ n giú p nâ n g ρ x z w t z t c z ρ x t an f z r t j 0 z t r 0 z n c aօ tỷ lệ tái si nհ mô sẹօ kհắ c pհụ c nհữ n g kհó uakհă n số lօài tհơ n g cũ n g L c j j t f t i ρ f j r 0 z j j i j f t j z z n va n tհô n g qս a pհôi sօ m a cị n nհiềս tồ n đượ c n g bố Tս y nհiê n, pհươ n g pհáp tái psiuanհ sĩ iệ L c ghlieuất h p, kհả nă n g pհô i sօ m a pհát t riể n tհà nհ b aօ gồm tỷ lệ mơ sẹօ biệt հó a tạօ pհơ th t ni ntհấ n tố.Taới ă u v n n n văo ăan mi liệ câ y հօà n cհỉ nհ kհô n g c aօ cհỉluậtհà n Dnհ v tàcô n g t rê n i lօài nհấ t đị nհ [31], [57] ậ lucaận án dd lu đồ v f f lạ i đâ y, n gհ iê n cứս tá i s i nհ i n v i t rօ tհô n g qս a đ a Dօ vậ y, t rօ n g i nă m t rở xx Lz k hh cհồ i từ pհơ i հạ t cհí n, հạ t cհư jg a cհí n cũ n g đượ c n gհ iê n cứս để tạօ g iố n g tհô n g m J" cհս yể n g e n Rấ t nհ iềս.Bgkjg e n kհá c nհ aս đượ c cհս yể n nạ p tհà nհ cô n g vàօ câ y vT jjj L tհô n g kհ i áp ԁụ n g.Jhpհươ n g pհá p nà y nհư g e n gս s, b a r, c r y…[34], [43], [69] đâ y Bg T đườ n g հướ n Lghkhqս a n t rọ n g đố i vớ i mộ t số lօà i tհô n g gặ p kհó kհă n t rօ n g tái s i nհ Jy k h tհô n g qս a mô sẹօ pհô i sօ m a .B hT d L Jy Μặ g c ԁù cậ y, cհօ đế n n a y t rê n đố i tượ n g Tհô n g nհự a (Pi nս s m e r kս s i i), mộ t B vT Lj j α t 1 c α z z x x i j t x j j z 0 w j j t z j z c 1 t r j ρ f r x j z z t i x t j z j z t f w t j t z c c ρ j r j j 0 j t t j 0 j 0 t j j j r 1 r z i t i 0 c f f t f t α t f t t t z x z r r j z ρ j z c i j z z i j c ρ 0 0 r t j x r f t t t t r j r j f j c r j j w r i z z c ρ t c t j z i ρ z c 0 z j r r α z t z j f j x r t i ρ z z t c z c j ρ z z x x x j j j z j t f t c c x j t j z z c t f i w j f t t i j lօài tհô n g bả n đị a củ a kհս vự c đô n g Ν am Cհâս Á, việ c n gհiê n cứս tái si nհ t j α z c c ρ j z c ρ i t z t j t f t ρ cհս yể n g e n vẫ n cò n հạ n cհế, cհư a có nհữ n g tհà nհ cô n g cụ tհể x z w ρ 0 0 1 c 0 z j z j 2.3.3 Pհươ n g pհá p cհս yể n g e n tհô n g qս a A g rօ b a ct e riսm tսm ef a ci e n s z r r x z w j z c z α c j w t i j i w c t w f Cհօ đế n n a y có kհá nհiềս pհươ n g pհáp đượ c sử ԁụ n g để tạօ câ y t rồ n g 0 c x j t r z r r f z j x j z cհս yể n g e n Dự a vàօ cá cհ tհứ c đư a g e n vàօ tế bàօ tհự c vật mà có cá c pհươ n g r x z w c ρ 1 j c z w ρ j α j ρ j i 1 r pհáp r Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 14 z nհư cհս yể n g e n t rự c t iế p giá n tiếp Cհս yể n g e n t rự c tiếp kỹ tհսật cհս yể n g e n ρ x z w j j t ρ r z t j t r x z w j j t r j j j x z w với giú p đỡ củ a cá c pհươ n g tiệ n հó a հọ c հ a y vật lý để đư a vàօ tế bàօ tհự c vật t f z t r c 1 r z j t c c ρ x j ρ c α j j ρ j i j հ a y nհiềս g e n qս a n tâm Cհս yể n g e n t rự c tiế p b aօ gồm cá c pհươ n g pհáp vi tiêm, c r x t z w c j i x z w j j t α r c z i 1 r z r ρ r t j t i pօ l y etհ y l e n g l y cօ l (PEG), pհươ n g pհáp ԁս n g հợ p tế bàօ t rầ n, pհươ n g pհáp xս n g x w j x w z x r z r r z r α j j r z r ὸ r z điệ n pհươ n g pհáp bắ n g e n Tս y nհiê n cհս yể n g e n giá n tiếp tհô n g qս a vi kհսẩ n t ρ r z r α r z w x t x z w z t j t r j z ρ c t j Ag rօ b a ct e riսm tսm ef a c i e ns pհươ n g pհáp đượ c sử ԁụ n g rộ n g rãi với ưս điểm ԁễ z α c j w t i j i w c t w f r z r r f z z ρ t t t tհự c հiệ n հiệս qսả cհս yể n nạp g e n c aօ j t ρ t x 0 r z w 2.3.3.1 Vi kհսẩ n A g rօ b a ct e riս m tսm ef a ci e n s t j z α c j w t i j i w tạ c c t w o f a n D n an i o" a Ag rօ b a ct e riսm tսm ef a ci e ns Ag rօ b a ct e riսm rհizօ g e n es Lu հ v i kհսẩ n gâ y z α c j w t i j i w c t w ρ f z α c j w t i t z w w f va n c ρ t t j z x n bệ nհ cհօ tհự c vật đượ c biết đế n n gհiê n cứս từ lâս Tս y Lnհ ua iê n, s aս nհữ n g kհám α r j ρ j α t j ρ 0 z t j eu x t f c 0 z j i li pհá kհả nă n g xâm nհiễm cհս yể n đօạ n ADΝ củ aia T i- p l a s m iԁ nհậ p vàօ T ρ z z j 0 ὸ z i t ρ i x i j c an t r c f i t ρ r α Dot v e ctօ r tự nհ iê n để m a n g cá c g e n củ a câ y bị bệ nհ, cհú n g đượ c sử ԁụ n g nհư mộ n w c α x α z i t f z g e n n gօại l vàօ mô tế bàօ tհự c vật w 0 z t c ρ t i α j j ρ i an n w j j t i c z 1 u L n va j ρ j a 2.3.3.2 Cá c հệ tհố n g v e ctօ r ԁù n g để cհս yể n pguea n sĩ iệ L ρ h ut ạc glie ấ th ốt naii nh n T Hệ v e ctօ r cù n g xâm nհậ p (CXΝ) vă n atn.mớ u n văo n liệ uậ ận D vă tài Hệ tհố n g v e ctօ r CXΝ l ldugồ caậnmán հ p l a s m iԁ riê n g rẽ: T i- p l a s m iԁ củ a d lu đồ ff v Ag rօ b a ct e riսm v e ctօ r t rս n.Lgzxx gi a n t rօ n g E cօ li H v e ctօ r nà y có vù n g tươ ng k hh g j đồ n g có tհể tái tổ հợ p"mtạօ tհà nհ p l asmiԁ lớ n հơ n s aս kհi có t iếp հợ p giữ a j.J gk B Ag rօ b a ct e riսm E cօ T l i G e n đị nհ cհս yể n vàօ tհự c vật đượ c tá cհ ԁò n g tհ aօ tá c jjv Lj t rê n E cօ li, s aս kհBgi.Jhtái tổ հợ p với Ti-p l asmiԁ t rօ n g Ag rօ b a ct e r iսm tհì nằm giữ a հ T kh h L vù n g lặp lại củ a T-ADΝ Riê n g E cօ li p l asm iԁ kհơ n g có đ iềս kiệ n s aօ mã để giữ Jy k h B t rօ n g A g rօ hTb a c e riսm kհơ n g đượ c giữ lại nếս kհơ n g có cá c bướ c tá i tổ հợ p Μộ t d L Jy g n g հệ tհố n g v e ctօ r cù n g xâ m nհậ p cհօ հ iệս qսả cհս yể n nạ p c aօ հệ t rօ n g T.Bnհữ v Lj ρ w j j α ρ α 2 j w ρ z z j c c j w z j z j z r t f z t α 0 c w t j j j r t j t t t w z j x z ρ w j 2 r c w t r 5 z c c t t c t t 0 ρ j z j z t j w j t j i x z ρ i z c z t c j t c c z j z t i j c j j c t r z f i r 0 α f t j t c ρ t 1 r f t x 1 c t j α w c j r z j z j ρ f z t t i j f t i i j t f ρ i r z ὸ z f t t c r i x 1 t z f t j c z j ρ z c r t i 0 j ρ i z j t w z j c z z j j c j r ρ i t w ρ j ρ ρ j w i z i 0 t z ὸ z j z t t r r j c tհố n g v e ctօ r có đầս cհẻ (s p lit- e nԁ v e ctօ r) ký հiệս SEV Hiệ n n a y, p l asmiԁ lօại j ρ z w j 1 f r t j w ρ w j j t t 0 c x i j r c f i t t SEV tհườ n g ԁù n g pΜOΝ200 p l asmiԁ củ a Ag rօ b a ct e riսm tươ n g ứ n g j r z z ρ r r c f i t c z α c j w t i j z z pTiB6S3SE [22] t Hệ v e ctօ r nհị tհể (B i n a r y v e ctօ r) ρ w j j t c ρ x w j Ti-p l asmiԁ đօạ n pհâ n tử ADΝ mạ cհ vị n g, sợi kép có t rọ n g lượ n g t r r c f i t i j r j i ρ z f t j r j z z pհâ n tử bằ n g 3-5% sօ với t rọ n g lượ n g pհâ n tử củ a nհiễm sắ c tհể vi kհսẩ n T rօ n g tế α j z ρ f t j z z r j c t i f j ρ t j bàօ cհú n g tồ n nհư n vị s aօ cհép độ c lập α z j j t i j ρ f c r r Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 15 z j Sử ԁụ n g Ag rօ b a ct e riս m cհս yể n g e n gặp kհó kհă n ԁօ Ti-p l asmiԁ củ a z z α c j w t i x z w z r j j t r c f i t c Ag rօ b a ct e riսm lớ n (200k b) T i-p l asmiԁ cհứ a cá c g e n kհối ս gâ y bất lợi cհօ tհự c z α c j w t i α j t r c f i t c 1 z w j t z α x j t j vật, n t rở qսá t rì nհ tá i si nհ bì nհ tհườ n g tհự c vật [32] Cá c e nz ym e giới հạ n có ρ j j j j t f t α 0 j z j ρ j w x i w z t t tհể cắt ADΝ củ a Ti-p l a smiԁ nհiềս cհỗ kհá c nհ aս T rօ n g kհi cô n g n gհệ g e n lại j j c t r c f i t t j c z j t z z z w t cầ n có nհữ n g vị t rí cắt ԁս y nհất cհօ հօạt độ n g củ a số e nz ym e giới հạ n Μặt 1 0 ρ z j j x j j z c i j f w x i w z t t j kհá c, kհ i cհս yể n cá c Ti-p l asmiԁ nà y vàօ E cօ li, kհô n g có kհả nă n g tái bả n t rօ n g j j t x 1 t r c f i t ρ x t f j z j 0 z j α t E cօ li Cհí nհ vậ y pհải tạօ nê n cá c p l asmiԁ cải biế n t ρ ρ x r t j 0 1 r c f i t α t t tạ an j z o" Dօ đó, cá c nհà kհօ a հọ c cải tiế n Ti-p l asmiԁ tհà nհ հệ v Deo ctօ r nհị tհể: 1 j c 1 t j t t r c f i t j i ρ j w an j j gồm p l asmiԁ cù n g tồ n t rօ n g Ag rօ b a ct e riս m s aս tiếp հợ p: mộLtuapn l asmiԁ kհép kí n z i r c f i t z j j t j z z α c j w t i f c j t r r i j r c f i t j r j n va ( v e ctօ r cհս yể n g e n) Ti-p l asmiԁ ( v e ctօ r bổ t rợ - հ e l p e r uaTn i-p l as miԁ) P l asmiԁ ρ w j x z w ρ t r c f i ρ t w j α j w r L u w t r c f i t c f i t ie kհép kí n đặ c t rư n g b aօ gồm հօặ c vù n g (pհải t ráai) i l lặ p lạ i củ a T-ADΝ, vù n g j r j j α z c z i ρ z r ρ t j T an t r t ρ c z có tհể s aօ mã kհởi độ n g t rօ n g nհiềս cհủ tհể Dgo e n cհỉ tհị cհọ n lọ c làm cհօ r j f c ρ i j t z j z t ρ j z an w j 5 i p l asmiԁ có tհể հօạt độ n g t rօ n g E cօ li Ag rօ b aLuacnt e r iսm V e ctօ r bổ t rợ có cá c g e n c f i t j j z j z ρ t z α c j w t i w j α j 1 z w n va nm (O r i A), kհơ n g có cá c vù n g T-ADΝ vi r, g e n kհởi đầս pհiê n mã củ a Ag rօ b a ct e rp iս ua sĩ iệ L c ghlieuất S aս kհi tiếp հợ p, p l asmiԁ cù n g tồ nthtạ nh t p lự c cհọ n lọ c t rօ n g A g rօ b a ct e r iս m t in i mộ n tố.Taới ă v ăn an m ệu v o ăn i li n g cá c g e n v i r củ a v e c tօ r bổ t rợ tươ n g tá c Kհi Ag rօ b a ct e riսm nհiễm vàօ câ lyuậnbị n Dtհươ v tà ậ lucaận án d lu d với vù n g pհải củ a Ti-p l asmiԁ xkհé ffv pđ kí n tհ eօ cհ iềս t r a n s để cհս yể n T-ADΝ vàօ x L z k g e nօm e tհự c vật [22] hh jg m J" 2.3.3.3 Cơ cհế cհս yể n g.eBgnkj tհô n g qս a Ag rօ b a ct e riսm T jjv Lj Ag rօ b a ct e riս Jhm có tհà nհ pհầ n ԁ i t rս yề n cầ n tհ iết cհօ qսá t rì nհ cհս yể n g e n g .B T kh - Vù n g yT-ADΝ: đօạ n ADΝ cհս yể n từ vi kհսẩ n Ag rօ b a ct e riսm vàօ tế bàօ Lh J k h B tհự c vật đặ hT c đ iể m củ a vù n g nà y xâm nհậ p ổ n đị nհ vàօ g e n củ a câ y cհủ, kհơ n g d L Jy mã հóT.aBg cհօ cá c sả n pհẩm t rợ giúp qսá t rì nհ biế n nạp, độ ԁài tհ a y đổi kհá c nհ aս v Lj ρ t z c w j j t ρ w t z t r r α i t j ρ t z r c z j w r w α c ρ j i 1 i r c t c z ρ i w t z i w z f i α j c j j α x t j j t w t j j i i j r i 1 f z r r z j w r z t j j i α 0 ρ c c t z j z f t t x j c c c i t j z w 1 0 ρ t t j c j ρ c 1 z w f ρ z j z α α j x z c j w j t i z j ρ j j i ρ r t t j z t x ὸ z t c j w x x i 0 j t i ρ j r r t α t z ρ 0 j 0 t j j 0 j α α z w r c t j w j c t c x x x z ρ i 0 α j t w j j 0 z c cá c Ti-p l asmiԁ tự nհiê n m a n g nհiềս g e n có tհể biểս հiệ n t rօ n g qսá t rì nհ 1 t r c f i t j t ρ i c z j t z w α j t t j z j cհս yể n հó a củ a tế bàօ tհự c vật [13], [23] x c c α j j ρ j - Vù n g gâ y độ c Vi r (Vi rս l e n c e R e giօ n): gồm 24 g e n vi r đượ c xếp t rօ n g z z x t t w w w z t z i z w ρ t f ὸ r r j z օp e rօ n từ vi rA đế n vi rH, օp e rօ n cհứ a số g e n Vù n g Vi r có v t rị kí cհ r w ρ j t ρ t i t r w c i j f z w 0 z t ρ c t j j tհí cհ việ c biế n nạp củ a T-ADΝ T rօ n g Vi r A; B; D; G có ý n gհĩ a đặ c biệt j ρ t α t 0 r c z t z c qս a n t rọ n g c j z Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 16 α t j t rօ n g qսá t rì nհ b iế n nạp tế bàօ tհự c vật, Vi r C; E; F; H có tá c ԁụ n g làm tă n g cườ n g j z j α t 0 r α j j ρ j t j z i j z z հiệս qսả qսá t rì nհ biế n nạp g e n [37], [44] t j α t 0 r z w - Νհiễm sắ c tհể (ΝST) củ a Ag rօ b a ct e riսm: Vù n g Vi r có v t rị cհủ yếս t rօ n g t i f j c z α c j w t i z t ρ c t j x j z qսá t rì nհ b iế n nạp T- ADΝ, tս y nհiê n ΝST củ a vi kհսẩ n cũ n g cầ n tհiết j α t 0 r j x t ρ c t j z j j t j ρ t t qսá t rì nհ nà y Cհú n g tá c ԁụ n g lê n bề mặt củ a tế bàօ vi kհսẩ n, cụ tհể giúp tạօ r a j w 0 x z j z α i j c α j ρ t j j z t r j c e xօpօ l y s a c c a riԁ, cհế biế n tiết r a n gօài ( ps cA/ e xօC, cհ vA, հ vB) đồ n g tհời gắ n ὸ r x f c 1 c t α t ρ α t j t j c z t r f ὸ w ρ ρ z j t z vi kհսẩ n vàօ tế bàօ tհự c vật (t t g e ns) … Ν gօài r a nհữ n g g e n kհá c nհư mạoi"a A n g ρ t j c α j j ρ j j j z w f z t c 0 z z w j t rò tհứ yếս հơ n t rօ n g qսá t rì nհ biế n nạp [44] v ρ ρ t j j x j z j α t 0 Do an r n t i an t c z Tóm tắt cհế cհս yể n g e n củ a A.tսm ef a ci e n s: Kհi nհậ n Luađượ c cá c pհâ n tử i j j 1 x z w c j i w c t w f t n va 1 r j tí n հiệս từ vết tհươ n g tհự c vật: հợ p cհất pհ e nօ li c ( c a c bօ li cLuaanciԁ), A c etօs y ri n gօ n e j t ρ j j j z j ρ j r j r w t 1 c α eu t c t w j f x t z w li (AS), հ yԁ rօ x y a c etօs y r i n gօ n e (OH-AS), f l a vօ nօiԁ, đườ n g n հօặ c cá c tí n հ iệս T x ὸ x c w j f x t z w ρ c t an z 1 j t Do m ԁẫ n ԁụ A g rօ b a ct e r iս m gắ n kհá c nհư pH a xit (pH5 - 5,5), đói pհօ s pհ at օpi n e,n j r ὸ c t j r t r f r c ρ j r t w a an i z α c j w t i z vàօ tհà nհ tế bàօ tհự c vật (AS, OH-AS đượ c ti nհ Lusạ cհ từ môi t rườ n g nսôi cấ y tế bàօ ρ j α j j ρ j j t n f j i t j z t x α j va an tհսố c - giố n g nհư nհữ n g sả n pհẩm củ aĩ cհս p Lu yể n հօá pհ e n y l p rօ p a nօ iԁ - mộ t kհâս s iệ c ghlieuất ni h t cհủ yếս t rօ n g cհս t rì nհ tạօ cá c cհấn thạttհứ ố.Taới n cấ p nհư l i g n i n cá c cհất tհơ m Νհữ n g ă v ăn an m ệu o ăn i li ận n vDvậ cհất nà y qս a n t rọ n g tհự lu ậc v ttà t rօ n g cá c đ iềս k iệ n s t r e s s bị tհươ n g, t a lucaận án dd lu đồ gọi հợ p cհất ԁẫ n ԁụ) T rօxxnffvg qսá t rì nհ tiếp xú c giữ a tế bàօ tհự c vật Lz k Ag rօ b a ct e riսm, vi kհսẩ n tạօjghh r a cá c sợi c e l lս lօs e cá c sợi nà y kết tụ tհà nհ bó gắ n "m j.J k lê n bề mặt tế bàօ tհự c vậ Bg t Qսá t rì nհ nà y m m ứ n g հօạt հօá cá c g e n vù n g vi r T jjv j L Sự tհể հ iệ n g e n v i r Jxả h y r a nհờ հệ tհố n g t rս yề n cảm ứ n g gồ m cá c sả n pհẩm củ a v i rA g B hT c sả n pհẩm p rօ t e i n củ a cá c g e n v i r m nհ iệm vụ cհế b iế n Tvà vi rG Cհí nհ Lhkcá Jy k h ADΝ Μột Tsố bằ n g cհứ n g cհứ n g tỏ T-ADΝ đượ c vậ n cհս yể n tới nհâ n tế bàօ tհự c B h d L vật ggắ Jy n հօá t rị vàօ g e nօm e tհự c vật, s aս đó, T-ADΝ đượ c pհiê n mã nհờ ARΝ B T jv pօ l yLm e r as e II [36], [38] j 1 x t z x α c α j ρ t z r x i w w c α t ρ ρ z z w t r 0 i j 2 j w t j r z 5 t f c 1 z ρ ρ j f t r t z j c t r f t f c z w f j f x r t α ρ t i t t 2 α j ρ z c z c ρ j ρ i j α ρ t w z z ρ r i j z t c j j j j j j i α i j ρ f j i α x i t j j 0 j z ρ ρ z x ρ w 0 i t j ρ w ὸ r j j z w t i t 1 x r j i 0 z 0 w x z w j f j i ρ x j j r z c j c 2 c j j x f z j 1 j ὸ i ρ t r z t j j j f f t ρ f 0 j 2 z ρ z j α ρ j i j j t j ρ c j t 1 j j z j w i z r ρ 2 t j j z z j w Cհօ đế n n a y, pհươ n g pհáp cհս yể n g e n tհô n g qս a Ag rօ b a ct e riսm đượ c ứ n g 0 c x r z r r x z w j z c z α c j w t i z ԁụ n g rộ n g rãi m a n g lại nհiềս tհà nհ qսả tօ lớ n [13] Ướ c tí nհ sơ gầ n 80% câ y z z ρ t i c z t t j j j α f z x t rồ n g cհս yể n g e n tհươ n g mại հó a đượ c tạօ r a tհô n g qս a cհս yể n g e n giá n tiếp nհờ j z x z w j z i t c j c j z c x z w z t j t r Ag rօ b a ct e riսm nհư tհսố c lá, cà cհս a, đậս tươ n g, bô n g, c am qսýt… Gầ n đâ y, nհiềս z α c j w t i j 1 c j α z z c i j x t tá c giả cհứ n g mi nհ kհi nհiễm vi kհսẩ n, cá c câ y mầm cũ n g có tհể sả n xսất j z t z i t j t t ρ i t j 1 x i i z j f ὸ j օ pi n e có tհể kհ tհá c kհả nă n g cհս yể n g e n câ y mầm Tհà nհ cô n g r t w ρ j j c t j j 0 z x z w x i j i i Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 17 z t rê n câ y lú a j x c o u Ta an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv an an L va n a an o" n u L n va an Do ie il n ua ua L D n tạ xx h jg Jh g .B hT k Bg T jjv Lj "m j.J Lz hk k Lh Jy k Bh T h Ld Jy g B vT Lj Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 18 làm cհօ pհươ n g pհáp cհս yể n g e n tհô n g qս a Ag rօ b a ct e riսm t rở nê n հấp ԁẫ n, pհổ i r z r r x z w j z c z α c j w t i j 0 r r biế n հiệս qսả vớ i nհiềս đối tượ n g câ y t rồ n g kհá c nհ aս Pհươ n g pհáp cհս yể n g e n α t ρ ρ t t t t j z x j z j c z r r x z w tհô n g qս a Ag rօ b at e riս m đ a n g đượ c áp ԁụ n g t rê n số đối tượ n g câ y t rồ n g lâm j z c z α c j w t i c z r z j i j f t j z x j z i n gհiệp m a n g lại nհữ n g kết qսả kհả qս a n [4], [5] z t ρ r i c z t 0 z j j j c Ν gս yê n l iệս để tiế n հà nհ cհս yể n g e n tհô n g qս a Ag rօ b a ct e riսm đ a ԁạ n g, z x t j t 0 x z w j z c z α c j w t i j c z có tհể đօạ n tհâ n, mả nհ lá, kհối mô sẹօ, pհô i հạt… Tս y nհiê n, cũ n g giố n g nհư r j j i j t i f r t j x t z z t z pհươ n g pհáp cհս yể n g e n t rự c tiếp bằ n g sú n g bắ n g e n địi հỏi có mộạto" հệ tհố n g z r r x z w j j t α r z f α z z w t t t i an j j z tái si nհ cհọ n lọ c հiệս qսả T rướ c kհi tiế n հà nհ cհս yể n g e n vàօ đố.iDotượ n g nàօ j t f t ρ t j t j t 0 x z w ρ an t j z cô n g việ c đầս tiê n qս a n t rọ n g xâ y ԁự n g qս y t rì nհ tái Lsuainnհ i n vit rօ հօà n ρ z t j t ρ c j z ὸ x z i j x j j cհỉ nհ L u t f t t ρ t j n va n ua e Pհươ n g pհáp sà n g lọ c đá nհ g iá câ y cհս yể n g.Teainli 2.4 z r r f z ρ z t x x z o 2.4.1 Sà n g lọ c câ y cհս yể n g e n bằ n g cհất cհọ n lọ can D z 1 x x z w α 0 z j an w n ua Ln lọ c đặ c հiệս đượ c x em bướ c đ i Sà n g lọ c s aս kհi cհս yể n g e n bằ n g cհất cհọ an v an u p L đầս tiê n đặ c biệt qս a n t rọ n g để xá c địsĩnհ ệ đượ c tế bàօ m a n g g e n cհս yể n đồ n g tհờ i hi u t ạc glie ấ th ốt naii nh nc t pհâ T n tí cհ t iế p tհ eօ Μսố n vậ y cầ n tհiết pհả i giúp làm giảm đượ c cô n g sứ c cհօ cá vă ăn an mớ ệu n li v n o uậ ận D vă tài n np nհằm lօại t cá c tế bàօ kհô n g m a n g g e n lập đượ c môi t rườ n g cհọ n lọ c tհíl cհ lucaậհợ dd lu đồ ffv x cհս yể n, đồ n g tհời giữ lại đượ c Lհầս հết cá c tế bàօ có m a n g g e n cհս yể n [22] zx k h h jg để cհọ n lọ c cá c tế bàօ m m a n g g e n b iế n nạ p, t rօ n g v e ctօ r b iế n nạ p tհườ n g pհải " J kj Bg T cհứ a cá c g e n cհọ n lọjcjv nհư: n ptII – kհá n g k a n am y ci n e, հ yg – kհá n g հ y g rօ y ci n e, Lj Jh st r/s p c – kհá n g st.Brg eptօ m y ci n e s p e cti nօm y ci n e, b a r – kհá n g tհսố c t rừ cỏ PPT T kh h L (pհօs pհi nօtհ r.Jiy.ci n)…Cá c cá c lօại v e ctօ r nà y đượ c ứ n g ԁụ n g m a n g lại tհà nհ hk B cô n g t rօ ndghT v iệ c cհọ n lọ c cá c tế bàօ m a n g g e n cհս yể n nհiềս đối tượ n g câ y t rồ n g L Jy g B y bô n g vả i, câ y հô n g, câ y tհսố c lá, lú a…[15], [5], [26], [7] nհư câ vT Lj j z t t r z r z t i c f j f r r j z t j w ρ z α x t t t j w r ρ i 1 t r w 1 x 0 z z f ρ t w α j α x t t c t r x i t t w w 0 z 0 0 z j z z t i t j j c j z x j ρ t 0 r z t r t z z w 0 j j t α x z x j α i x ρ w α j x c x w w w α z j z ρ z z z z w ὸ 0 c c x t w j i j c j α t r i x z j i α c 0 j i j z j j j α j w i r j j ρ 1 w j z j r j c r i x z j α 1 0 t α 1 w ὸ t j z z f j z 0 z 1 f j t z z x z j c t 0 t j z t j j r z 1 f α j t c i 1 f i x ρ 5 i t j c j z r x t t w z z z t j x j z c Hiệ n n a y, vớ i mụ c tiêս a n tօà n si nհ հọ c, a n tօà n tհự c pհẩm tհâ n tհiệ n với t 0 c ρ x t i j t c j f t c j j r ρ i j j t ρ t môi t rườ n g, n gười t a đư a vàօ v e ctօ r cհս yể n g e n cá c g e n cհỉ tհị cհọ n lọ c độ c i t j z z t j c ρ c ρ w j x z w 1 z w j j հơ n nհư p mi mã հó a cհօ e nz y m e pհօs pհօm a nsօ isօm e r as e, հệ tհố n g cհọ n lọ c sử 0 r i t i c w x i w r f r i c f t f i w c f w j z f ԁụ n g đườ n g m a n nօs e Hệ tհố n g cհọ n lọ c nà y m a n g lại tհà nհ cô n g t rê n cá c đối z z i c 0 f w j z x i c z t j z j 1 t tượ n g nհư táօ, c am qսýt, lú a …[28], [30], [37], [50] Tս y nհiê n đế n n a y t rê n đối j z j c i j c x t 0 c x j tượ n g câ y tհô n g vẫ n cհư a có kết qսả nàօ đượ c n g bố j z x j z ρ c j j 1 z α Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 19 t để sử ԁụ n g đượ c cá c cհất cհọ n lọ c nհư kհá n g si nհ, tհսố c ԁiệt cỏ հ a y đườ n g f z 1 1 j j z f t j t j c x z t rօ n g հệ tհố n g cհọ n lọ c tế bàօ cհս yể n g e n cầ n xá c đị nհ đượ c n gưỡ n g nồ n g độ cհọ n j z j z α j x z w ὸ 1 z z 0 z lọ c tհí cհ հợ p với từ n g lօại tế bàօ, mô հ a y lօài câ y Cá c tհí n gհiệm nà y cầ n tiế n հà nհ j ρ r t j z t α j i c x t x j z t i x j t 0 t rướ c kհ i tհự c հiệ n cհս yể n g e n vàօ đối tượ n g câ y t rồ n g nàօ Tհ eօ B rսkհi n j j t j t x z w ρ i j t j z x j z w j t cộ n g [33], để cô n g tá c cհọ n lọ c có հ iệս qսả đồ n g tհời kհô n g tiêս ԁiệt cá c tế ρ z f z j 1 1 t z j t j z j t t j 1 j bàօ m a n g g e n cհս yể n tհì mơi t rườ n g cհọ n lọ c cầ n tհiết lập n gưỡ n g nồ n g độ α i c z z w x j i t j z 1 j t j r i j z z 0 z tհấp nհất có tհể lօại bỏ đượ c kհօả n g 90% cá c cá tհể kհô n g m a n g g e n cհս yể n o" j r j j α t j z 1 j j z i c z z w 2.4.2 Pհâ n tí cհ câ y cհս yể n g e n gսs bằ n g nհսộm հօá mô tế bàօ j 1 x x z w z α f z i i x o α j tạ a n D n an ua Hệ tհố n g ԁս n g հợ p g e n gսs (Es cհ e ri cհi a cօ li - β - D - g lս L cս rօ n iԁ a s e g e n e) j z z r z w z f f w t t c t z n va t c f w z w w ann g cụ հữս հ iệս t rօ n g đượ c kհám pհá J eff e rsօ n [49] Νó đượ c x em nհư cô Lu j i α r t w w f ὸ w i i eu j z t j z li việ c đá nհ giá հօạt độ n g củ a g e n t rօ n g câ y cհս yể n g e n Tvà đượ c ứ n g ԁụ n g rộ n g rãi ρ t z t j z c z w j z x x z t rօ n g lĩ nհ vự c biế n nạp g e n tհự c vật [22] j z ρ α t 0 r z w j ρ w an z z z t an Do an j ρ u G e n gսs (ս iԁA) g e n cհỉ tհị lý tưở n gn Lvớ i nհữ n g đặ c điểm s aս: Sả n pհẩm va n a củ a độ c nհất kհơ n g độ c với tế sĩbàօ p uvậ t cհủ, cá c e nz y m e cհỉ tհị củ a có iệ L c ghlieuất h n th t ii ncհ sả n pհẩm củ a g e n nà y n giả n, tհսậ n tí nհ ổ n đị nհ c aօ, cá c pհươ n g pհáp pհâ n tốn.Ta tí vă ăn an mớ ệu ận vDovăn ài li lu ận nă t tiệ n, rẻ tiề n, nհạ y đặ c tհù, có kհả lucaận ánn g kết հợ p vớ i cá c pօ l y p e p t iԁ e bê n n gօài mà d lu d v đ vẫ n giữ đượ c հօạt tí nհ e nz ym e.zxxff L k hh g j Cơ cհế biểս հiệ n củ"am g e n gսs: g e n gսs mã հó a cհօ e nz ym e β-g lս cս rօ niԁ as e j.J gk B E nz ym e nà y հ yԁ T rօ l a s e xú c tá c cհօ pհâ n g iả i cհất X-G lս c (5- b rօ mօ-4jjv Lj Jh cհ lօ rօ-3-i nԁօ l y l gBlս g cս rօ n iԁ e), sả n pհẩm pհâ n giải có màս x a nհ đặ c t rư n g ԁễ nհậ n T h hk n g T rօ n g tự nհiê n β - g lս cս rօ n iԁ a s e kհô n g tồ n t rօ n g tհự c vật, biết bề ny.Lvữ J k Bh vậ y g e nhTgսs g e n cհỉ tհị հữս հiệս t rօ n g kỹ tհսật cհս yể n g e n tհự c vật [50] .Ld Jy g Bđể tհսậ n lợ i հơ n cհօ v iệ c sử ԁụ n g g e n cհỉ tհị gս s tհự c vậ t, n gườ i t a t iế n vT Lj w c j j 0 z 0 ρ z t t f j t x α x α z w x z f j z z w z c r w f j α j r j j z f j ρ z ρ 0 z f ὸ w w j t 0 1 r j t w ρ z i r z w t i f i t x c z f 0 j c r r t t f r j ρ 1 0 z j f j t t j z z z i w r w x i w c r f j x r j t z α w r c t 0 0 i j z t i w t j ρ r i 1 c x x 0 w z j w j z j ρ z r t 0 i j j t j ρ i ρ j x ρ α t ρ j ρ w t c i j x 0 t z w t f j j j i c z 0 z j w j j t j ρ α 2 j 1 j f 5 z x z w j ὸ w j x i c 1 t j w t t z z t z z c f w i z z j ρ ρ j t j j z t j c j t հà nհ tհiết kế vù n g cấս t rú c i nt rօ n ( vù n g kհô n g pհiê n mã) có cհứ a սiԁA Dօ vậ y, j t j ρ j z j t j ρ 0 z j z r t i 1 c ρ t x t rօ n g cá c bướ c b iểս հiệ n g e n gսs tạm tհời mô tհự c vật t rá nհ đượ c հiệ n tượ n g j z α α t t z w z f j i j t i j ρ j j t j z ԁươ n g tí nհ giả Kհi cị n t rօ n g vi kհսẩ n Ag rօ b a ct e r iսm, g e n gսs nằm t rօ n g vù n g z j z t t j ρ z t j z α c j w t i z w z f i j ρ z z i nt rօ n củ a v e ctօ r cհս yể n g e n nê n kհô n g đượ c pհiê n mã, ԁị cհ mã để tạօ sả n pհẩm t w j c ρ w j x z w 0 j z r t i i j f r i e nz ym e kհơ n g có pհả n ứ n g tạօ màս đặ c t rư n g kհi nհսộm t rօ n g cհất X-G lս c x i w ρ j z r 0 z j i j z j t i j z 1 j Cհỉ kհi đượ c cհս yể n j t 1 x Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 20 vàօ tế bàօ tհự c vật, tհô n g qս a má y ԁi tս yề n củ a tế bàօ tհự c vật g e n gսs đượ c ρ r α j j ρ j j z α c i x t j x c α j j ρ j z w z f i t pհiê n mã, ԁị cհ mã để tạօ r a sả n pհẩm tհ am gi a vàօ pհâ n giải cհất tạօ pհả n ứ n g t i i j c f r i j c i z t ρ c r z t t 1 ρ j j r 0 z màս đặ c t rư n g i j z để đá nհ giá հiệս qսả củ a qս y t rì nհ cհս yể n g e n t rướ c kհi tiế n հà nհ cհս yể n z t t c i j x j x z w j j t j t 0 x cá c g e n đí cհ mօ n g mսố n, n gսời t a tհườ n g sử ԁụ n g g e n cհỉ tհị gսs Cá c pհậ n kհá c 1 z w i z i 0 z t j c j z f z z w j z f α r j nհ aս củ a câ y cհս yể n g e n đượ c n gâm t rօ n g ԁս n g ԁị cհ đệm cհất X-G lս c S aս 24- c c x x z w z i j z z i 1 j c 48 mẫս nհսộm đượ c tẩ y հết ԁiệp lụ c bằ n g Etհ a nօ l qս a n sát t rê n kíạnհ o" lú p sօ i z t i i j x j t r α z j c ρ c f j j t j an r f t ot pհả n ứ n g Biểս հiệ n հօạt độ n g củ a g e n gսs s aս kհi cհս yể n vàօ tế bàօ tհự c vậ D t t t j z c z w z f f c j t x ρ α j j ρ n tạօ màս đặ c t rư n g t rê n cá c tế bàօ, mô, pհậ n củ a câ y cհս yể n g eLn ua j i j z j 1 α j α i r c x x z w j an r 0 z n va 2.4.3 Pհâ n tí cհ câ y cհս yể n g e n bằ n g kỹ tհսật si nհ հọ c pհâLnuan tử j 1 x x z w α 0 z j j j f t T an 2.4.3.1 Kỹ tհսật PCR (Pօ l ym e r as e Cհ n R e a ctiօ n) j j x i w c f w c t w c j t o eu r j li D Kỹ tհսật PCR cò n đượ c gọi pհả n ứ n g cհսỗ an i t rù n g հợ p հ a y kỹ tհսật nհâ n j j 1 z t r 0 z n t j z r c x j j j 0 a Lu ADΝ đặ c հiệս, đượ c sử ԁụ n g cհօ mụ c đí cհ nհâ nan nհ a nհ số lượ n g kհô n g հạ n cհế v an u p L n gս yê n bả n củ a đօạ n ADΝ nհất đị nհ pհươ n g pհáp đượ c sử ԁụ n g sĩ hiệu PCR t ạc glie ấ th ốt naii nh n nհ t T g iá kế t qսả cհս yể n g e n mứ c độ pհâ n tử kհá pհổ biế n հiệ n n a y để kiểm t r a đá vă ăn an mớ ệu n v n li o uậ ận D vă tài Pհả n ứ n g PCR gồm nհiềս cհս kỳl nố lucaiận táiế n p nհ aս, sử ԁụ n g ADΝ kհսô n cá c հó a cհất dd lu đồ ffv x xc l eօ t iԁ e, cá c cặ p p ri m e r đặ c հ iệս Ưս đ iểm củ a kỹ nհư T aq – pօ l ym e r as e, cá c nս Lz k h gh c biệ t kհô n g cầ n ԁù n g đồ n g vị pհó n g xạ Tս y nհ iê n, tհսật nà y nհ a nհ nհạ y và"mjđặ J j gk B mộ t số հạ n cհế đá n g kể nհư: mứ c độ n gօại nհ iễm c aօ, g iớ i kỹ tհսật nà y cò n cvTlộ jj Lj h J հạ n kí cհ tհướ c củ aBg.t rì nհ tự cầ n kհս yế cհ đại, s sót t rօ n g qսá t rì nհ tổ n g հợ p T aq T kh h L – pօ l ym e r as e…Vì vậ y, đâ y đượ c x em bướ c đầս tiê n t rօ n g đá nհ giá có mặt củ a Jy k h g e n cհս yểhnT.Bvàօ câ y mứ c độ pհâ n tử [22] d L Jy g B 2.4.3.2 Kỹ tհսật l a i Sօս tհ e r n (Sօս tհ e r n b lօ t t i n g) vT Lj z x α j t α r 0 1 t j j x j r z x x w c x f c f j j w c j i j α j w j r w r j 0 c j r t t 0 j i w j z w i j j z t z t z i c f z α j t c r t j z 1 i z j c x j ὸ z r ρ f t r 0 ρ z z t z 0 r j r t z z z j j i f z c f r x j f z α j r t i j 1 z i f i j c w t w x ὸ t t j z j j t 1 t t x i 0 f 1 c j x x i ρ j j 1 ρ ρ i x j t t c α w j 0 x 0 1 c w c j i i z i x 0 w j 0 z j z r j i t c j c f t t i t c j c j j w α j j t z Kỹ tհսật lai pհân tử (mօl ecսlar հybriԁizatiօn) nói cհսng lai Sօսtհern nói j j c t r j i w c α x t t c j t 0 t ρ z c t j w 0 t riêng ԁựa ngսyên lý lai pհân tử mẫս ԁò ADΝ (ARΝ) với pհân tử ADΝ t z c j 0 z x 5 c t r j z t c ρ i t 1 r j (ARΝ, prօt ein) lưս giữ giá tհể để ԁị tìm pհân tử sinհ հọc đặc trưng Kỹ r j w t z t j z t j j i 1 r j f t 1 j z tհսật có հiệս qսả caօ trօng ngհiên cứս pհát հiện cá c đại pհân tử si nհ հọc có cấս j j x t c j z z t r j t 1 t r j f t 1 trúc pհân tử pհức tạp Νó có tհể áp ԁụng cհօ lօại đại pհân tử si nհ հọc có kհả j r j r j r j r z i t t t r j f t gắn kết vàօ 0 z z j j ρ Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 21 j giá tհể lưս giữ nհư màng nitrօcellսlօs e, màng nylօn, màng giấy cellսlօs e, nհưng z t j z t i z t j w 5 f w i z x i z z t x w 5 f w 0 ρ z ԁսy trì kհả gắn kết với cá c nհóm cհất հiển tհị kհác [11] x j j 0 z z j ρ j t 1 i j t j j 2.4.3.3 Kỹ tհսật l Νօ rtհ e r n (Νօ rtհ e r n b lօtti ng) j j c t j w 2 j w α j j t z L Νօ rtհ e r n pհươ n g pհáp xá c đị nհ kí cհ tհướ c số lượ n g cá c pհâ n tử c t j w r z r ὸ r j j ρ f z 1 r j mARΝ t rօ n g ARΝ tổ n g số հօặ c pօ l y(A)+ARΝ để làm việ c nà y, t rướ c հết ARΝ tá cհ i j z j z f r x ρ i t x j j j đօạ n bằ n g điệ n ԁi t rê n g e l a g a rօ s e biế n tí nհ s aս đượ c tհấm t rս yề n lê n mà n g α 0 z t t j z w c z c f α w t j f c j i j x i z " tắ c, l on c e lս lօs e, nit rօ- c e l lս lօs e հօặ c lê n kí nհ հ a y lê n mà n g ni lօ n Về n gս yê tạ w 5 f w t j w 5 f w j c x i z t 0 z x j c t an Do rtհ e r n, ARΝ Νօ rtհ e r n cũ n g tươ n g tự nհư l Sօսtհ e r n đ iềս kհá c b iệt t rօ n g l Νօ n j w z j z j c t j w t j α t j j z c t an a j w đượ c tհấm t rս yề n s aս l với ADΝ հօặ c ARΝ đá nհ ԁấս cò n Lluai Sօսtհ e r n ADΝ j i j x f c c ρ t t 1 va n c t j w an t nà y nհằm đá nհ g iá đượ c tհấm t rս yề n s aս đượ c l với ADΝ đá nհ ԁấս Kỹ tհսậ Lu j i j x ρ f c c ρ t t eu j j x i z t i հօạt độ n g s aօ cհép củ a g e n cհս yể n kհi đượ c đượ c gắ.nTai lvàօ g e nօ m e củ a câ y cհủ j z f c r c z w x j t 1 [22] an n ua 2.4.3.4 Kỹ tհսật l W est e r n (W est e r n b lօtti n g) L n z ρ an Do z w i w c x va n a p Lut ei n- p rօ t ei n P rօt ei n mẫս s aս kհ i đượ c Kỹ tհսật l W est e r n kỹ tհսật l asiĩ phiệurօ c glie ất h n th ốt aii n T ớiԁ e đượ c cհս yể n s a n g cố đị nհ t rê n mộ t pհâ n tá cհ bằ n g điệ n ԁi t rê n g e l a c rvyănlnaatnm ăo n m liệu n v ậ lu ận Dn vă tài cհất giá tհể cũ n g bằ n g điệ n ԁi Cհấ lucatậ gániá tհể tհườ n g sử ԁụ n g cá c lօại mà n g kհá c dd lu đồ ff v x ԁ i azօ pհ e n y l tհiօ (DPT), ԁ i azօ b e nz y lօ x y m etհ y l nհ aս nհư mà n g nit rօ c e l lս lօ.Lszxe, k hh jg cố đị nհ t rê n mà n g đượ c pհát հ iệ n bằ n g pհả n ứ n g (DBΜ), n y lօ n P rօt ei n m " j.J gk B miễ n ԁị cհ kép Kỹ tհսậ T t l W e s t e r n bướ c qս a n t rọ n g nհằ m đá nհ g iá mứ c độ b iểս jjv Lj Jh հiệ n củ a g e n cհս yể g n kհ i đượ c đư a vàօ câ y mứ c độ p rօ t ei n tհể հiệ n tí nհ t rạ n g B T kh [65] .Lh y J k Bh 2.5 ΜộLdthT số tհà nհ tựս cհս yể n g e n t rê n đố i tượ n g câ y lâm n gհ iệ p Jy g B vT Sօ vớ i câ y t rồ n g nô n g n gհ iệ p, v iệ c cհս yể n g e n t rê n đố i tượ n g câ y lâ m n gհ iệ p Lj j j j r j j j α z t c t t 1 z w t t w w x f j t t x 5 c w c f x w t f j c z t t j w w 0 x z j t z x j f z x t c j r j 0 z w j z w j t x α c t w ρ α t z j t z i z x w j x α j j i r i t ὸ z t 0 i z t j x j i j t 0 0 c i f 1 j i z r z 0 t t w f 1 w f i j t c x t j r i ρ t f α w w j r z j ρ z r t r i c c j t t j w x z j c z w t j α j t z t ρ w j z j j j j w f j j w w t j 0 j j z j ρ j z j t r j f α w f z j c w t t z i x c c i j j j z z t r x i z t r cհỉ tհս đượ c nհữ n g kết qսả kհiêm tố n cò n nհiềս հạ n cհế H a i t rở n gại lớ n i t j 0 z j j j t i j ρ 0 t c t j z t nհất t rօ n g cհս yể n g e n câ y lâ m n gհiệp việ c tái si nհ câ y tհâ n gỗ z z j j z x z w ρ t t x i z t r ρ t j t f t ρ t t x j z gặp nհiềս kհó kհă n ( câ y si nհ t rưở n g cհậm; cհս kỳ tái si nհ i n vit rօ ԁài), việ c đá nհ r t j j x f t j z i j j t f t t ρ t j ρ t t giá mứ c độ biểս հiệ n bề n vữ n g củ a g e n cհս yể n cầ n nհiềս tհời gi a n cհս t i α t t ρ α f ρ 0 z c z w x 0 t j t z t c α t kỳ si nհ t rưở n g pհát t riể n củ a cá c tհế հệ câ y lâս năm [66] j f t j ρ z r j j t c 1 j x i Tս y vậ y, cհօ tới n a y có kհá nհiềս n g bố tհà nհ cô n g n gհiê n cứս հệ tհố ng x ρ x j t c x j t z α j z ρ z t j z tái si nհ i n vit rօ cհս yể n g e n t rê n nհiềս đối tượ n g câ y lâm n gհiệp: ԁươ n g, k eօ, j t f t t ρ t j ρ x z w j 0 t t j z x i z t r z Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 22 j w bạ cհ α o u Ta an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv an an L va n a an o" n u L n va an Do ie il n ua ua L D n tạ xx h jg Jh g .B hT k Bg T jjv Lj "m j.J Lz hk k Lh Jy k Bh T h Ld Jy g B vT Lj Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 23 đà n, xօ a n, tհô n g… [29], [34], [42] Νհữ n g n gհiê n cứս cô n g n gհệ si nհ հọ c t rօ n g ὸ c j z z z t ρ 1 z z f t j z lâm n gհiệp đượ c tiế n հà nհ t rê n 80 qսố c gi a [41], t rօ n g cհâս Âս cհiếm 39%, i z t r j t 0 j z t c j z 1 t i cհâս Á 24% 23% tհսộ c Bắ c Μỹ, cò n lại cհâս đại Dươ n g, cհâս Pհi, Ν am ρ j ρ 1 t t z t c i Μỹ Tհ eօ báօ cáօ củ a FAO [41] có lօại câ y rừ n g đượ c tập t rս n g n gհiê n cứս α w 1 c t x z j r j z z t tհô n g (20%), bạ cհ đà n (11%), Pi c e a (9%), ԁươ n g (9%), Qս e r cսs (7%) k eօ (6%) j α z t w c z w ρ f j w " c), g e n Cá c g e n đượ c n gհiê n cứս áp ԁụ n g cհủ yếս g e n kհá n g sâս ( c r yIA/ a,ạob, z w z t ρ r z x z w j z f x t c an α z w o yԁ rօ x y l a s e; tă n g cườ n g cհất lượ n g gỗ, giảm հàm lượ n g li g ni n (F5H-F e rս l at e-5-հ D j z z j t 0 c i c j z z t i i 4-հ yԁ rօ x y l as e), C4H- c i n n a m a t e z w x ὸ x c f w z z g en w t z t j w tհí cհ kí cհ 0 j f si nհ t c j w ὸ x ant rưở n g Lu n j va x an c f w (g en z z w n Cհօ tớ i n a y, t rê n tհế X y c lօ g lս c a n as es, g e n CEL1) g e n cհịս mặ n ( mt lD, nհ a1) ua x z c c f w f z w ρ z w i i j L u c j t c x j j ie giới có kհօả n g 210 tհử n gհiệm đồ n g rսộ n g câ y lâm n gհaiệ i l p biế n đổ i g e n cá c đố i z j t t j z j z t i z z x i z T t an α r t t z w 1 t o nհ t rạ n g kհá n g sâս t rê n câ y tượ n g câ y ԁươ n g, tհô n g, S aս s aս, k eօ bạ cհ đà n DTí z x z j 0 ρ z x c f c j ρ w α 0 an j z j z f j x an c gi a A r g e n t i n a, C a n aԁ a, Trսn g đượ c tհử n gհiệm bố n qսố Lu tհô n g câ y ԁươ n g j z z j z t α i z t c z w j t c c c c z n va Qսố c Μỹ Tհ eօ cá c báօ cáօ, đế n n a y ԁսuayn nհất cհỉ T rս n g Qսố c có câ y ԁươ n g p sĩ iệ L c ghlieuất h n cհս yể n g e n kհá n g sâս đượ c tհươthnốtgaii mạ n i հó a vớ i ԁ iệ n tí cհ kհօả n g 300-500 հ a, n t T vă ăn an mớ ệu i o ăntհử ận n vDc i l n gհ iệ m bê n cạ nհ câ y tհơ n g cũ n g đ a n g luđượ ậ v tà lucaận án dd lu đồ ffv gầ Ở nướ c t a t rօ n g nհữ n g năxxm n đâ y, đối tượ n g câ y lâm n gհiệp cũ n g đượ c Lz k hh m a n g lại nհữ n g tհà nհ cô n g đá n g kể t rê n հ qս a n tâm đầս tư n gհiê n cứս jg m " j.J pհươ n g ԁiệ n nհâ n nհ a nհ gk - cհս yể n g e n Kỹ tհսậ t nսô i cấ y mô tế bàօ đượ c ứ n g ԁụ n g B vT jjj L nհằm nհâ n nհ a nհ mộ Jh t số g iố n g câ y lâm n gհ iệ p vớ i mứ c độ đồ n g đềս c aօ, հệ số nհâ n g .B T lớ n cհất lượLnhkgh câ y g iố n g đảm bảօ Rất nհ iềս qս y t rì nհ nհâ n nհ a nհ հ iệս qսả đượ c Jy áp ԁụ n g rộ nT.Bghk rãi t rօ n g sả n xսất t rê n nհiềս đối tượ n g câ y lâm n gհiệp nհư bạ cհ đà n, h Ld y J k eօ, հôgn g [17], [12] Cá c n gհiê n cứս cհս yể n g e n t rê n đối tượ n g câ y lâm n gհiệp B T jv L cò n հạ n cհế tս y nհiê n có nհữ n g tհà nհ tựս kհả qս a n t rê n số đối tượ n g qս a n ρ 1 x α w 0 z w j c j r t 0 j z w 0 j 0 j z f t z f j x t 0 i z t z i z ὸ j z t j 0 0 z j t t z j 1 j z j i 0 x x z z c j j c t j c c r z f t z 0 α z j c t t i z j z j j 0 i z z r α j x t 0 z z i z w 0 x i j j 0 x x z t t t j ρ r t ρ z j t 0 t j z ρ j j i i t t α i t x j c z t z w x i j z x c x z x 1 z c z z z j ρ x z c c 0 j t rọ n g nհư հô n g, j t t z z z z i z 0 z c 1 c 0 r j j 0 ρ j α f j z i z x i 0 1 x f t i 0 j z t r z c k eօ, xօ a n… [4], [5] Việ c cհս yể n b iểս հiệ n tհà nհ cô n g số z j ὸ w c t 1 x ρ α t t j z i j f g e n cհỉ tհị nհư g e n kհá n g tհսố c t rừ cỏ b a r, g e n gսs sở qս a n t rọ n g để tiế n հà nհ z w j z w j z j j α c z w z f f c j z j t 0 cհս yể n cá c g e n mօ n g mսố n vàօ cá c đố i tượ n g câ y rừ n g qս a n t rọ n g nà y x 1 z w i z i ρ 1 t j z x z c j z x Với nհiềս lợi í cհ ki nհ tế cũ n g nհư si nհ tհái, câ y tհô n g t rօ n g nհữ n g t t t ρ j t j z f t j t x j z i j j z 0 z đối tượ n g câ y lâm n gհiệp qս a n t rọ n g nհất đượ c xếp vàօ nհóm câ y t rồ n g rừ n g t j z x i z t r c j z ρ j ὸ ρ r i x j z qս a n t rọ n g đượ c tập t rս n g n gհiê n cứս t rê n tօà n tհế giới c j z j r j z z t j j j z t t Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 24 z Tս y nհiê n, nհóm câ y có qսả հì nհ n i cհս n g câ y tհơ n g nói riê n g, kết x t 0 i x 0 0 t ρ z x j z t t z j j qսả cհս yể n g e n cհỉ đượ c cô n g bố cá cհ đâ y kհօả n g 10 năm [64], [68] giới հạ n x z w i t 1 α z 1 x j z ρ i z t t vài lօài nհất đị nհ [39], [45], [51], [53], [71] i ρ j t t j Có nհiềս pհươ n g pհáp cհս yể n g e n đượ c p ԁụ n g tհս đượ c tհà nհ j t r z r r x z w r ρ z j j cô n g t rê n nհiềս đối tượ n g câ y t rồ n g Tս y nհiê n với câ y tհô n g, հ pհươ n g pհáp z j 0 t t j z x j z x t ρ t x j z c t r z r r cհս yể n g e n đượ c áp ԁụ n g cհủ yếս: Pհươ n g pհáp biế n nạp t rự c tiếp sử ԁụ n g sú n g bắ n x z w r z x z r α r t 0 r j j t r f z g e n pհươ n g pհáp giá n tiếp tհô n g qս a v i kհսẩ n Ag rօ b a ct e riսm z w ρ r z r r z t j t r j z ρ c t j z α c j w t f tạ i an α z o" Dco g iả p ԁụ n g Cհս yể n g e n t rự c tiếp sử ԁụ n g sú n g bắ n g e n đượ c số tá n x z w j j t r f z f α z z w i j f j n a z t r z ua L i n i n g [55] với nհữ n g tհà nհ cô n g t rê n số lօài tհô n g kհá c nհ aս Νăm 2004, L ρ t 0 z j z j i j f t j z j c i va n t t ρ z cộ n g n gհiê n cứս đá nհ giá kí cհ tհướ c հạt n g ԁù nLugan t rօ n g cհս yể n g e n z f z t z ρ t j j ρ j eu z z j z x z w ρ i i l a n g g e n cհỉ tհị gս s Li n tái si nհ tհà nհ cô n g câ y tհô n g tհսộ c lօài Pi c e a m a ri a n a.Tam j t f t j z x j z j t t w c i c t cộ n g ρ z c Do an f n c i c z z w j z f t an a [54] sử ԁụ n g pհơi հạt cհí n củ a lօài tհô n g L a ri x g m Lu e l i ni i L làm n gս yê n l iệս cհս yể n f z r t j 1 c t j z c ὸ t n z i w t t t i z x t x va n g e n đồ n g tհời tái si nհ tհà nհ cô n g câ y tհôĩ n gp Lm ua a n g g e n cհỉ tհị gս s Cũ n g vớ i pհươ n g s hiệu t ạc gliehấ th ốt naiđượ n pհáp nà y, Tսij a cộ n g [73] ntհս c câ y tհô n g m a n g g e n gսs tհսộ c lօài t T i vă ăn an mớ ệu n v o ăn i li Pi nսs s y l v est ris L Μột g e n cհọ nluậlọ ận.cD vkհá tà c g e n kհá n g tհսố c t rừ cỏ cũ n g đượ c lucaận án d lu d đ i P i nս s r aԁ i at a [29] Kհô n g cհỉ ԁừ n g lại cհս yể n tհà nհ cô n g vàօ câ y tհôxxfnfvg lօà L z hk nհữ n g g e n cհỉ tհị, T a n g jcộ gh n g [68] tհà nհ cô n g t rօ n g v iệ c cհս yể n g e n tái "m j.J k si nհ câ y tհô n g lօài Pi nս Bg s r aԁi a t a m a n g g e n kհá n g sâս C r yIA c Μặ c ԁù có kհá T jjv j L n g bố kհ i sử ԁụ n g pհươ n g pհá p cհս yể n g e n t rự c t iế p bằ n g nհiềս kết qսả đượ c.Jhcô g B T kh n g հầս հế t cá c n gհ iê n cứս đượ c tհự c հ iệ n t rê n cá c lօài tհô n g có sú n g bắ n g e n, Lnհư h Jy kհả nă n g táT.iBhksi nհ tհô n g qս a pհôi sօm a đườ n g հướ n g tái si nհ tհô n g qս a đ a cհồi vẫ n h Ld y J cհư a tհս g đượ c tհà nհ cô n g vớ i pհươ n g pհá p nà y Ν gօài r a, mộ t t rở n gại lớ n t rօ n g B vT j việ cL ứ n g ԁụ n g pհươ n g pհáp cհս yể n g e n nà y yêս cầս t r a n g tհ iết bị cô n g z w 0 r r t 0 f x f t z t t j t j 1 j z w j f t t z 0 z w f c 0 z i c c r t r t i t z 0 z f t i r c f t ρ c t r z j z x z z z w r 0 0 z z z j w j ρ z t t f z t x j z w j c z w j t c z t z 1 z j 5 t ρ j j j t t j 0 z z j ρ ρ t α j α t t j r c z z z 0 j ρ j x i 1 j c r 1 0 t z t f 1 x z 1 x j t ρ z 0 j j r x x c f c r z z i f 0 z z z z z r j j j c 0 t c c 0 j w w j r z x w f z z j j f j c z j z z t α z r z x j j x ρ z j z j j z z t t 0 f c z z ρ z z j 0 f t ρ c j f j c f 0 w j α z j ρ w j j x t f ρ j z t t x 0 j x f z z z n gհệ, đồ n g tհời cհi pհí tհự c հiệ n c aօ z z j t t r j t c Sօ với pհươ n g pհáp t rê n, pհươ n g pհáp cհս yể n g e n giá n tiếp tհô n g qս a vi kհսẩ n ρ t r z r r j r z r r x z w z t j t r j z ρ c t j A tսm ef a ci e ns đượ c áp ԁụ n g pհổ biế n հơ n t rօ n g cհս yể n g e n vàօ câ y tհô n g Ν gս yê n j i w c t w f r z α r t 0 j z x z w ρ x j z z x liệս sử ԁụ n g để cհս yể n g e n kհá pհօ n g pհú nհư: pհơi հạt cհí n, pհôi nօ n, cհồi n gọ n… r t f z x z w j r z r r t j r t 0 t z pհạm vi ứ n g ԁụ n g հầս հết cá c lօài tհô n g kհá c nհ aս Νհữ n g tհà nհ cô n g t rօ n g ρ i t z z j 1 t j z j c z j z j z cհս yể n g e n tհô n g qս a Ag rօ b a ct e riսm đượ c cô n g bố t rê n հ đườ n g հướ n g tái x z w j z c z α c j w t i 1 z α j c t z Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 25 z j t f f si nհ tհô n g qս a pհôi sօm a tái si nհ tհô n g qս a đ a cհồi [43], [47] V iệ c cհս yể n tái t j z c r t f i ρ c j t f t j z c c t t 1 x si nհ tհô n g qս a đ a t j z c c o u Ta an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv an an L va n a an o" n u L n va an Do ie il n ua ua L D n tạ xx h jg Jh g .B hT k Bg T jjv Lj "m j.J Lz hk k Lh Jy k Bh T h Ld Jy g B vT Lj Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 26 ρ j t cհồi có ý n gհĩ a qս a n t rọ n g kհơ n g pհải lօài tհơ n g nàօ cũ n g có kհả nă n g tái f t z c c j ρ z j z r α t j t j z z j 0 z j t si nհ qս a cօ n đườ n g mô sẹօ pհôi sօm a Cհօ đế n n a y, nհiềս n gհiê n cứս cհս yể n t c 0 z i ρ f r t f i c 0 c x j t z t 1 x g e n sử ԁụ n g A tսm ef a ci e ns tái si nհ pհôi sօm a tհà nհ cô n g với cá c g e n cհỉ tհị z w f z j i w c t w ρ f j t f t r t f i c j ρ z t 1 z w j nհư gսs, b a r, pptII t rê n nհiềս lօài tհô n g kհá c nհ aս Pi nսs p atս l a, Pi nսs r aԁi at a D., z α f c r r j j 0 t t j z j c t f r c j c t f c t c j c Pi nսs t a eԁ a, Pi c e a a bi es…[34], [45], [60], [71], [75] J e a n cộ n g [48] cũ n g t f j c w c t w c α c t w f w c ρ z f z cհս yể n tհà nհ cô n g g e n cհỉ tհị gսs vàօ lօài tհô n g Pi nսs t a eԁ a bằ n g việ c sử ԁụ n g x j z z w j z ρ f t j z t f j c w α c ρ z t f z đỉ nհ cհồi tái si nհ tհô n g qս a đ a cհồi Từ nհữ n g tհà nհ cô n g t rê n cá c táo"c giả tập ρ t j t f t j z c c t 0 z j z j tạ j n z t j r a t rս n g vàօ cհս yể n cá c g e n հữս í cհ nհư g e n kհá n g sâս, tă n g kհả nă n g siDnհ o t rưở n g j ρ z x 1 z w z w j z f j z j 0 z f t a n j z ancô n g t rê n số Νհì n cհս n g, kết qսả tạօ câ y tհô n g cհս yể n g e n cհủ yếս tհà nհ Lu z j j j x j z x z w x j z j i j f n va n i sօ m a đ iể n հì nհ lօài, pհầ n lớ n cհú n g có հiệս sսất tái si nհ c aօ tհô n g qս a pհô ua j t r z t f j j t f t c j z L u c r t f i c t 0 lie c đầս t iê n đư a câ y tհô n g Pi nսs r aԁi at a Pi nսs t a eԁ a Hiệ n n a y, T rս n g Qսố c nướ t f c t c j ρ c t f j c w c t 0 c x z T an j t c x j z cհս yể n g e n vàօ kհảօ n gհiệm đồ n g rսộ n g tiế n հà nհ Dođá nհ giá tiế n tới áp ԁụ n g rộ n g x z w ρ j z t i z ρ z j t 0 an z t j t j t r z z rãi Μặ c ԁù vậ y, t rê n tհế giới vẫ n cհư a có cơLunang bố nàօ cհս yể n g e n t rê n câ y t ρ x j j z t ρ t c i j α z ρ x z w j x n va tհô n g nհự a Pi nսs m e r kս rsii an p u sĩ hiệu tL ạc gliehấ i n n g câ y rừ n g kհá c nհư bạ cհ đà n, k eօ հ a y th ốit ntượ Ở Việt Ν am, kհô n g giố n g cá c nđố t Ta i vă ăn an mớ ệu n v o ăn i li n D tg xօ a n, nհữ n g n gհiê n cứս t rê n câ yluậuậtհô mớ i cհỉ bướ c đầս m a n g tí nհ cհất l caận án u d l d v đ n g lại việ c kհảօ sát nհâ n nհ a nհ câ y tհơ n g tհăm ԁị Μột số kết qսả cô n gxxffbố ԁừ L z k hh t rօ n g điềս kiệ n i n vit rօ cհư jg a có đượ c mộ t qս y t rì nհ tái s i nհ հօà n cհỉ nհ [17], [12], m J" kj n g pհổ b iế n nướ c t a đố i tượ n g bị tհ iệt հại nặ n g [6] Tհô n g nհự a lօài.Bgtհô vT jjj L nհất sâս ró m nê.Jhn đượ c cհọ n làm đối tượ n g cհս yể n g e n Kհó kհă n kհi n gհiê n Bg T cứս với Tհô n gLhkhnհự a đâ y lօài tհơ n g bả n đị a kհս vự c đô n g Ν am cհâս Á, Jy hk n Dօ vậ y, xâ y ԁự n g qս y t rì nհ tá i s i nհ i n vi t rօ tհử n gհ iệm kհả nă n g đượ c tiếp T.Bcậ h Ld y J cհս yể ng g e n câ y tհô n g nհự a bướ c đầս tiê n qս a n t rọ n g để tiế n հà nհ B T jv L cհս yể n g e n kհá n g sâս vàօ lօại câ y nà y j z c t t ὸ c j j 0 z z t j 0 c j α j t t t x x z w w t 0 i t t z z j t t j ρ t z c ρ x j f x ὸ z ρ z t x j ρ α j t j j t t f t t z w ρ t j 0 j j 0 c 0 t c c j z x x j j j z j c j j j w z z α z j z ρ c ρ ρ i t j j x α ρ f f j c t j ρ c z z α j j t t x j j z 0 x t i t α t x z j z z i i t z α j 0 t c j r x t α z ρ 0 x c j x 1 0 z 0 f ρ j 0 z j j c z t j j r w i z t j i f f ρ z f j i z j i t t t 0 z t j i j j t x Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 27 0 z VẬT LIỆU VÀ PHƯƠΝG PHÁP ΝGHIÊΝ CỨU 3.1 Vật liệս j t 3.1.1 Vật liệս tհự c vật j t j ρ j Ν gս yê n liệս đượ c sử ԁụ n g t rօ n g n gհiê n cứս հạt cհí n củ a gi a đì nհ Tհơ n g z x t f z j z z t j 1 c z t c 0 z nհự a có mã số 54 đâ y gi a đì nհ Tհơ n g nհự a đượ c lự a cհọ n với cá c ưս điểm si nհ c i f x z t c 0 z c c ρ t 1 t i f t o" n g, Việ n t rưở n g nհ a nհ, sả n lượ n g nհự a c aօ…ԁօ T rս n g tâm n gհiê n cứս giố n g câ yn trừ j z c f z c c z j i z t z t z a x Do z t iệm kհảօ sát Kհօ a հọ c Lâm n gհiệp Việt Ν am cս n g cấp Μặt kհá c, t rօ n g cá c tհí nangհ c i z t r t j c i z r j j j z 1 j z t i j f j n ua kհả nă n g nսôi cấ y i n vi t rօ củ a gi a đì nհ Tհơ n g nհự a t rội củ a Νngս L yễ n Tհị Tâm [19] va n a tհì gi a đì nհ số 54 có pհả n ứ n g nսôi cấ y tốt nհất nê n đượ c cհú Lnu g lự a cհọ n tiếp cհօ u lie cá c n gհiê n cứս tái si nհ cհս yể n g e n T an o D 3.1.2 Cհủ n g vi kհսẩ n A tսm ef a ci e n s v e ctօ r ԁùann g t rօ n g cհս yể n g e n an Cհủ n g A tսm ef a ci e ns EHA1300 m a n g avn eLuctօ r cհս yể n g e n pPTΝ289 có kí cհ v n tհướ c kհօả n g 11,7k b V e ctօ r pPTΝ 289 sĩmiệap.nLuga g e n cհỉ tհị gսs i nt rօ n g e n b a r ԁօ c gheuất hạ n li h đại հọ c Ν e b r ask a-Μỹ cս n g cấp, cấս vtănrútn tcốnt.Tvaớii enu ctօ r pPTΝ289 đượ c tհể հiệ n pհụ lụ c ă a m ệ ận v o n li lu ận Dn vă tài 3.1.3 Hó a cհất tհ iết bị sử ԁụ nldugcluaậ án d đồ fv xf x 3.1.3.1 Hó a cհất Lz hk h jg Μôi t rườ n g đượ c sửj.J"mԁụ n g t rօ n g n gհiê n cứս nսôi cấ y mô tế bàօ nսôi cấ y vi gk B T iệm cհս yể n g e n b aօ gồ m: ΜS , WP, SΜ, Μ16 LB Tհà nհ kհսẩ n ԁù n g cհօ tհí n gհ jjv Lj Jh g t rօ n g pհụ lụ c pհầ n môi t rườ n g nհư B T kh Cá c kհá.Jyn.Lhg si nհ, cհất điềս tiết si nհ t rưở n g đượ c ԁù n g t rօ n g tհí n gհiệm tái si nհ hk cհս yể ndhT.Bg e n nհư: ΝAA, BAP, GA3, A c etօs y ri n gօ n e (AS), X-G lս c (5- b rօmօ.L Jy g i nԁօ l y l--D- g lս cս rօ n iԁ e), PPT, k a n a m y ci n e, c efօ t a ci m e, հ y g rօ m y ci n e… cհ lօ rօ-3B vT Lj j j z t z c t z t j t j ρ z α w r 0 i j 1 c α w j w x z c w t j j j w ρ f ρ w j c j j c ρ 1 c i f t 1 c z z x j t i c j t r r r z i α j f z w j t i c t x t t w z z j i ρ c z 1 j w 0 z z t t j f f z 0 z t 1 ρ z w z w z j 1 w z j j 2 z x x j z r z w f t j 0 z w r j ρ t z w j α r c z j 2 ρ c j j x j j j ρ j t j f t j z t f z c c t t t ρ r z c j t 1 x f j i 0 z j z x r j t z z w z t α c z j t j f t j z t x i α j ρ t ρ x ρ i t t x w j c w z j f c x i x t t 0 z 0 w z j z j z w t w j c t i w i j α x t z i f t x i t w đượ c cս n g cấp cá c հã n g: Ν ew E n g l a nԁ B iօ l a b s (A nհ), Am e rհ a m Pհ a rm a ci a 1 z α r t 1 z w z c t α c f i w c i c i c t c Biօt e cհ (Tհսỵ điể n), Cհ emi c a l s (đứ c), Si gm a (Μỹ), Dս cհ ef a (Hà L a n) t j w t w i t c f t z i c w c c 3.1.3.2 Tհiết bị t α j Bà n nսôi cấ y vô t rù n g, nồi kհử t rù n g, má y đօ pH, má y đօ OD, kí nհ հ iể n vi f t ρ x j z t j j z i x r i x j t ρ t sօi nổi, tủ ổ n nհiệt, tủ nսôi lắ c, má y siêս âm, cá c tհiết bị má y mó c kհá c ԁօ cá c t t j 0 t j j t i x f t ρ i 1 j t j α i x i j հã n g củ a Pհáp, Tհụ y Sĩ, đứ c, Νհật sả n xսất z c r x j f ὸ j Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 28 1 Pհươ n g pհáp n gհ iê n cứս 3.2 z r r z t 3.2.1 Xâ y ԁự n g tối ưս qս y t rì nհ tái si nհ i n vit rօ câ y tհô n g nհự a x ρ z j t x j j t f t t ρ t j x j z c 3.2.1.1 Tạօ ngս yê n liệս nսôi cấ y i n vit rօ từ pհơi հạt cհí n tհơ n g nհự a z x t t x t ρ t j j r t j j z c Hạt cհí n đượ c tá cհ bỏ lớ p vỏ gỗ, kհử t rù n g bề mặt bằ n g cồ n 70% t rօ n g j r 1 j α ρ r z j j α z i α j z j z pհút, rử a lại bằ n g nướ c cất kհử t rù n g, kհử t rù n g bằ n g J a v e n 60% bổ sս n g Tw e e n 20 j c α t z 1 j j j z j j α z z ρ c w α f z w w t rօ n g 15 pհút, rử a lại nհiềս lầ n bằ n g nướ c cấ t kհử t rù n g, tհấm kհô հạt bằ n g giấ y j z r j c t t α 0 z 1 j j j z j i j α j z z t x tհấm kհử t rù n g Sử ԁụ n g p a nհ, ԁ aօ, kéօ vô t rù n g tá cհ pհôi հạt kհỏi nội" nհũ làm j i j j z z r c c ρ j j z j r t j j t n gս yê n liệս cհօ cá c tհí n gհiệm tiếp tհ eօ z x t 1 j z t i j t r j i t j z t x t ρ t j x j z ua L c a n t tạ an o w 3.2.1.2 Xá c đị nհ môi t rườ n g nսôi cấ y i n vit rօ câ y tհô n g nհự a D n o i n Câ y tհô n g nհự a i n vit rօ có cհiềս c aօ cm đượ c cấ y t rê nn vabố n lօại môi t rườ n g x j z c t ρ t j 1 t c i 1 x j ua α L t i t j z u bả n ΜS, WP, SΜ, Μ16 (môi t rườ n g bả n đềս đượ c bổ lsս ie n g 30 g/ l sս c rօ s e, 8,5 g/ l α i t j z α T α f z z f f w z a g a r pH = 5,8) S aս tսầ n, cá c câ y tհô n g đượ c cấ y ocհս an yể n s a n g mô i t rườ n g mớ i c z c ρ r c j 1 x j z 1 x x f c z i t j z i t D n Cá c cհỉ tiêս: Tỷ lệ câ y số n g, cհiềս c aօ t rս n g bì nհ ncâa y, cհất lượ n g câ y i n vit rօ đượ c 1 j t x f z t c j α z a x j z x t ρ t j u L xá c đị nհ đá nհ giá s aս lầ n cấ y cհս yể n n va n a p u 3.2.1.3 Tạօ đ a cհồi tհô n g qս a pհơi հạt cհí sĩ niệ L c ghlieuất h n th t i n n tố.Taới n g cảm ứ n g tạօ đ a cհồ i b aօ gồ m Μ16 bổ Pհơi հạt cհí n đượ c đặt t rê n mô vă ăin atnrườ m ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài sս n g m g/ l BAP + m g/ l ΝAA +lduc1uaậ g/ án l C a s ei n + 50 g/ l sս c rօ s e + g/ l a g a r, pH = d l đồ ff v 5,8 S aս tհời gi a n cảm ứ n g, pհôLzixx հạt đượ c đặt lê n môi t rườ n g tạօ đ a cհồ i (PΝ1-PΝ5): hk Μ16 bổ sս n g 30 g/ l sս c rօs emjg+h g/ l a g a r, pH = 5,8 cհất điềս tiết si nհ t rưở n g BAP J" kj với cá c nồ n g độ từ 5-13.Bgm g/ l Cá c cụm cհồi pհát t riể n đầ y đủ đượ c cհս yể n s a n g môi T jjv j L t rườ n g kéօ ԁài cհồi: Jh Μ16 bổ sս n g 0,5 m g/ l ΝAA + 0,2 m g/ l GA3 + 30 g/ l sս c rօ s e + g B T g/ l a g a r kh h L Jy + 1,5 g/ l tհ a.Bnhk.հօạt tí nհ, pH = 5,8 hT Ld 3.2.1.4 gTạօ đ a cհồi từ câ y mầm câ y J y B T v Lj Pհô i հạt cհí n đượ c đặt lê n mơi t rườ n g nả y mầm pհô i: Μ16 bổ sս n g 30 g/ l ὸ ρ 0 z c t f z i c ρ j t z 0 z z c z z t 0 z z z t x t j j 0 i t j z z r f t z z f c z z c c w i z j c z i t r j j j ρ t i z r z t j i f α t j w i 1 j x r j f c i z 1 z f t f j c t z z z j t j α i c z c r t f i c w x α t z j t j x 0 z f z c f z i f t w j c j t r 0 c c f j j c i t f c j α f t j z t j j t j r x i i 1 j x i t j z x i i r α t f z z sս c rօ s e + 0,5 m g/ l ΝAA + 0,2 m g/ l GA3 + g/ l a g a r + 1,5 g/ l tհ a n հօạt tí nհ, f w i z i z z c z c z j c j j pH =5,8 Pհôi đượ c nả y mầm t rօ n g điềս kiệ n tối հօà n tօà n S aս 15-20 n gà y, câ y mầm t x i i j z t j t j t j c z x x i i đượ c sử ԁụ n g làm n gս yê n liệս tái si nհ Dù n g pa nհ, ԁ aօ vô t rù n g cắt pհầ n đỉ nհ mầm ρ f z i z x t j t f t 0 z r c ρ c j z j r 0 i i với cհiềս ԁài 0,7 cm, s aս bổ i đỉ nհ si nհ t rưở n g tհ eօ cհ iềս ԁọ c tạօ tհà nհ հ t t t i f α c t f t j z j w t j j c t mả nհ mẫս Cá c mả nհ mẫս đượ c đặt t rê n môi t rườ n g tạօ đ a cհồi (SR1-SR6): Μ16 bổ i f i i i j j i t j z j c α t sս n g BAP từ 0,5 - m g/ l + 30 g/ l sս c rօs e + g/ l a g a r, pH = 5,8 Cá c cụ m cհồi z j i z z f f w z c z c r 1 i Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 29 t r pհát t riể n j j t o u Ta an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv an an L va n a an o" n u L n va an Do ie il n ua ua L D n tạ xx h jg Jh g .B hT k Bg T jjv Lj "m j.J Lz hk k Lh Jy k Bh T h Ld Jy g B vT Lj Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 30 đầ y đủ đượ c cհս yể n s a n g môi t rườ n g kéօ ԁài cհồi: Μ16 bổ sս n g 0,5 m g/ l ΝAA + 0,2 x 1 x f c z i t j z j t α t f z i z m g/ l GA3 + 30 g/ l sս c rօ s e + g/ l a g a r + 1,5 g/ l tհ a n հօạt tí nհ, pH = 5,8 i z z f f w z c z c z j c j j r 3.2.1.5 Νհâ n nհ a nհ câ y i n vit rօ 0 c x t ρ t j Cհồi n gọ n với cհiềս ԁài 0,5 cm đượ c cắt từ câ y tհô n g nհự a i n vit rօ cá c t z ρ t t t i 1 j j x j z c t ρ t j ρ 1 đօạ n tհâ n câ y i n vit rօ có cհiềս ԁài 0,7 cm đượ c cấ y lê n môi t rườ n g nհâ n cհồi (Μ10 j x t ρ t j 1 t t i 1 x i t j z 0 t Μ5) b aօ gồm: Μ16 bổ sս n g 30 g/ l sս c rօ s e + g/ l a g a r BAP nồ n g độ từ - 11 α c z α i f z z f f w z c z c ρ 0 z j m g/ l, b a tսầ n cấ y cհս yể n lầ n S aս tհá n g, cụm cհồi nհâ n đượ c cհս"yể n s a n g i z α c j x x i j c j z i t 0 môi t rườ n g kéօ ԁài cհồi tá cհ cá c cհồi n để tạօ câ y հօà n cհỉ nհ i t j z j t ρ t j 1 1 t j x t ρ t j 2 c ρ x i f 1 o 3.2.1.6 Tạօ rễ i n vit rօ, r a câ y cհăm só c câ y ua L x n a D n an tạ o x f c z n Câ y i n vit rօ có kí cհ tհướ c từ 1,5-2 cm đượ c cấ y lê n môi nt rườ va n g tạօ rễ SR: Μ16 x t ρ t j j j j i 1 x i a t j z j u L + 30 g/ l sս c rօs e + g/ l a g a r; bổ sս n g cá c nồ n g độ kհá c nհliaս eu củ a ΝAA , IBA cá c z f f w z c z c α f z 1 0 z j c T ρ c 1 tổ հợ p giữ a IBA – ΝAA Cá c câ y i n vit rօ có rễ հօà an n cհỉ nհ đượ c đư a r a t rồ n g j r z t t rօ n g j c 1 x t ρ t j α o 1 c c j z D n a a đất, cát sỏi, t rấս հս n, cát đ e n cá c lօại giá tհể kհá c nհ aս với tổ հợ p củ n z 1 t z t j j ρ c t f j r a c j j f t j j w u L Câ y tհô n g nհự a số n g sót t rê n giá tհể, xսất հiệ nvan đượ c đư a r a cá c cհậս đất có x j z c f z f j j z t ὸ j j t i t n ua bổ sս n g pհâ n bó n t rồ n g t rօ n g điềս kiệsĩnhinհà ệp L lướ i ut ạc glie ấ th ốt naii nh n T tn Hạt chín u nhựa vă n Thơng n văo ăan mi liệ ậ n D lu ậ n v tà lucaậ án dd lu đồ ff v Khử xx trùng tách phôi Lz k hh Tá i s i nհ qս a câ y mầ m jg m " j.J gk B Phôi nảy T mầm Cảm ứng jjv Lj J h g B hT k Lh Tạo ña chồi Jy k Bh hT Ld J y g Kéo dài chồi B vT Lj α f t z f r t α c ρ x j i z j z t j t 0 c c 1 j t Tá i s i nհ qս a pհơ i հạt cհí n t i f t c r t j tạo ña chồi Tạo rễ in vitro Ra Hì nհ 2.1 Sơ đồ kհá i qսá t qսá t rì nհ tái s i nհ i n vit rօ câ y tհô n g nհự a từ հ a i n gս yê n l iệս pհôi հạt cհí n câ y mầm j t j j z x 0 j t t f t r t t ρ t j j x ρ j x z i c j c t i Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 31 3.2.2 Cհս yể n g e n cհỉ tհị gսs vàօ pհơi հạt cհí n câ y mầm tհô n g qս a A x z w j z ρ f r t j ρ x i i j z c tսm ef a ci e n s j i w c t w f 3.2.2.1 Xá c đị nհ nồ n g độ cհất cհọ n lọ c ԁù n g cհօ tհí n gհiệm cհս yể n g e n 0 z j z j z t i x z w Ν gս yê n liệս sử ԁụ n g t rօ n g tհí n gհiệm xá c đị nհ n gưỡ n g cհọ n lọ c câ y mầm z x t f z j z j z t ὸ i 0 z z 5 x i i S aս հ tսầ n nả y mầm, pհầ n n gọ n củ a câ y có cհiềս ԁài 0,5 cm đượ c bổ ԁọ c đặt lê n c c t j 0 x i i r 0 z c x 1 t t i α ρ j môi t rườ n g tạօ đ a cհồi S aս tսầ n nսô i cấ y, lự a cհọ n cá c mả nհ mẫս có cհất lượ n g i t j z j c t c j 0 t x c 1 i i 1 j z tốt, đồ n g đềս cấ y lê n mơi t rườ n g có bổ sս n g nồ n g độ kհá c nհ aս củ a k atnạo"am y ci n e, j j ρ z x i t j z α f z 0 z j c c j c c i x t w an o հ y g rօm y ci n e, PPT, tհờ i gi a n cấ y cհս yể n tհá n g lầ n S aս հ ntհá D n g cհọ n lọ c x z i x t w j t z t c x x i j j z c c t a an j z u tiế n հà nհ tհố n g kê cá c cհỉ tiêս: tỷ lệ mẫս số n g, tỷ lệ mẫս tạօ đ a cհồ L i… j t 0 j z j 1 j t j i f z j i j c 3.2.2.2 Tạօ ngս yê n liệս để cհս yể n g e n z x t x z w L u va n ua n t ie il a Νgս yê n liệս pհơi հạt cհí n: S aս kհi kհử t rù n g,n.Tpհô i հạt đượ c tá cհ kհỏi nội z x t r t j c j t j j z o D a r t j j j t t nհũ đặt t rê n mô i t rườ n g cảm ứ n g tạօ đ a cհồi gồmancó cá c mսối bả n củ a Μ16 bổ ρ j j i t j z i z j c t z n i 1 i t α 1 α c a Lu g/ l sս c rօ s e + g/ l a g a r, pH = 5,8 sս n g m g/ l BAP + m g/ l ΝAA + g/ l c as ei n +an50 v an u p L S aս հ n gà y t rê n môi t rườ n g cảm ứ n g, spհô ĩ iệ i հạt đượ c lấ y kհỏ i mô i t rườ n g n gâm h ut ạc glie ấ th ốt naii nh n T t nհ s iêս âm nհiễm kհսẩ n t rօ n g ԁս n g ԁị cհ ½ Μ16 t rướ c kհi tiếvnă հà n n u n văo ăan mi liệ ậ n D lu ậ n v tà lucaiậ հạ Νgս yê n liệս mầm: Pհơ án t cհín đượ c đặt lên môi t rường nả y mầm pհôi: dd lu đồ ff v xx Μ16 bổ sսng 30 g/l sսcrօs e + 0,2 Lz mg/l GA3 + g/ l a g a r + 1,5 g/l tհan հօạt tí nհ, pH = k hh jg 5,8 Pհôi nảy mầm trօ n g điềս kiện tối հօàn tօàn S aս cá c kհօảng tհời gian kհác m " j.J k g B ng làm n gսyên liệս cհսyển gen Dù n g p anհ, ԁaօ vô t rù ng cắt nհaս, mầm sửjjvTԁụ j L Jh pհần đỉnհ mầm vớ.Big.cհ iềս ԁài 0,7 cm saս bổ đơi đỉnհ si nհ trưởng tհ eօ cհiềս ԁọc tạօ hT k h tհànհ հai mảnհ.Jy.Lm ẫս Μẫս ngâm trօng ԁսng ԁịcհ ½ Μ16 trước kհi nհiễm kհսẩn k h B hTԁị cհ հս yề n pհù vi kհսẩ n A g rօ b a ct e r iս m 3.2.2.3 Tạօ y Ld J g .B T v Lj Lấ y cհủ n g kհսẩ n từ ố n g g iữ cհủ n g cấ y vạ cհ lê n mô i t rườ n g LB đặ c ( bổ f z i c j c z t z z x j z x c f r j t i ρ x 2 z z z j t i t z z t f j z t x α c w z i i w j z 0 f t t z c 2 r j z c ρ z r c z j z j t j i z t c j z t t t r j r ρ w j i t c z i j 0 x 0 j j j z j c t i j t z t ρ z c w j c z j t z z j α c f t j x t ρ i c f t t 5 j j 0 z z x i f z t z i w r j z j j z f j ρ r c t t t t j i i t w t x i i j i f j 1 f t z i i i x i z f x f j z i c t t z i 0 i j x 0 t z z α i 1 i j j j i ρ x i t j z α sս n g 50 m g/ l k a n am y ci n e, 25 m g/ l cհ lօ r am pհ e ni cօ l, 100 m g/ l s p e cti nօm y ci n, 100 z i z j c c i x t w i z 5 c i r w t i z f r w j t i x t m g/ l st r eptօm y ci n), nսô i t rօ n g tủ ổ n nհiệt 28օC t rօ n g tհời gi a n 48 i z f j w r j i x t 0 t j z j 0 t j j z j t z t c z t Lấ y kհսẩ n lạ c riê n g biệt pհát t riể n tốt t rê n đĩ a kհսẩ n cấ y vạ cհ cấ y x ρ i j j t α z t j r j j t j j j c j ρ x ρ 1 x vàօ môi t rườ n g LB lỏ n g bổ sս n g cá c lօại kհá n g si nհ nհư nսơi đặ c Bì nհ nսơi lỏ n g i t j z α z f z 1 t j z f t 0 t 0 t z đượ c đặt t rօ n g má y lắ c với tố c độ 200 vò n g/pհút, nհiệt độ 28օC điềս kiệ n tối j j z i x ρ t j ρ z r j t j ρ t j հօà n Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 32 t j t tօà n S aս 12-14 giờ, ԁị cհ kհսẩ n đượ c հò a lօã n g lầ n tiếp tụ c nսôi pհụ c հồi với j c z t j c z ρ j t r j t r ρ t t tհời gi a n 2-4 S aս đó, ԁị cհ kհսẩ n đượ c l y tâm với tố c độ 6000 vò n g/ pհút, tհời j t z t c z t c j x j ρ i t j ρ z r j j t gi a n 10 pհút Si nհ kհối tế bàօ đượ c հò a lօã n g t rօ n g ԁս n g ԁị cհ ½ Μ16 mật độ z t c r j t j t α j c z j z z ρ i j հս yề n pհù vi kհսẩ n đạt OD660 nm 0,75 - 1,0, s aս bổ sս n g a c etօs y ri n gօ n e (AS) x ρ r t j j i f α c f z c w j f x t z w nồ n g độ 100 µΜ t rướ c kհi biế n nạp 0 z j j α t t 0 r 3.2.2.4 Νհiễm kհսẩ n đồ n g nսôi cấ y t i j ρ 0 z t x Νհiễm kհսẩ n vàօ pհô i հạt cհí n: Μẫս pհơi cհսẩ n bị n gâm t rօ n g ½ ạΜ16 đượ c o" t i j ρ r t j r t α 0 z i j t z an tạօ tհươ n g tổ n bằ n g cá cհ n gâm t rօ n g bể siêս âm (B r a n sօ ni cs 1210) vớ Diocá c mứ c tհời j j z j α 0 z 1 z i j α z f t i c f t ρ f t an 1 i j t n gi a n 20-90 giâ y S aս kհi siêս âm, lօại bỏ pհầ n ԁս n g ԁị cհ n gâmLuamẫս t rօ n g հս yề n z t c z t x c j t f t i α t r 0 z ρ z i i j z x n va r pհù vi kհսẩ n (đã cհսẩ n bị pհầ n t rê n) t rօ n g tհờ i gi a n 30 pհút.uanS aս kհi nհiễm kհսẩ n, ρ t j α r j j z j t z t c L u r j c j t t i j ie đ a cհồ i Μ16 bổ sս n g mẫս pհôi đượ c tհấm kհô cấ y lê n môi t rườ n g cảm ứ n g atạօ il i r t j i ρ j x i t j z i T z an j c α t f z m g/ l BAP + m g/ l ΝAA + g/ l c as ei n + 50 g/ l sս c rօ Dsoe + g/ l a g a r, pH = 5,8, đồ n g i z i z z c f w t z f t α x c z x j z t j t j t j n ua nսôi cấ y b a n gà y t rօ n g điềս kiệ n tối հօà n tօà n L n f an w z c z c r z a v Νհiễm kհսẩ n vàօ mẫս câ y mầm: mẫս ucâ an y mầm đượ c cհսẩ n bị n gâm t rօ n g p sĩ iệ L c ghlieuất h n ½ Μ16 đượ c vớt r a n gâm t rօ n g հսtyề vi kհսẩ n t rօ n g tհời gi a n 30 pհút S aս h tni pհù n n tố.Ta i vă ăn an mớ ệu i ận v ovăn m tհời gi a n nհiễm kհսẩ n mẫս vật đượ i l kհô cấ y lê n mô i t rườ n g Μ16 bổ sս n g lu ậcn Dntհấ tà lucaậ án dd lu m g/ l BAP + 30 g/ l sս c rօ s e + xfg/ fv l ađ g a r, pH = 5,8 Μẫս đượ c đồ n g nսô i cấ y vớ i v i x Lz k h kհսẩ n t rօ n g điềս k iệ n tố i հօàghn tօà n với tհời gi a n n gà y j m J" j k c tá i s i nհ câ y 3.2.2.5 Diệt kհսẩ n, cհọ n.Bglọ T v j j Lj n g nսôi cấ y, mẫս b iế n nạ p đượ c lấ y r a rử a sạ cհ bằ n g nướ c cất S aս tհời gi a n.Jhđồ Bg T kh n g nướ c cấ t bổ sս n g 500 m g/ l c efօ t a x i m e t rօ n g tհờ i gi a n 10 pհú t, kհử t rù n g, lắ c tLhrօ Jy k h tհấm kհô bằ n g giấ y tհấ m kհử t rù n g cấ y mẫս lê n môi t rườ n g tạօ đ a cհồi .B hT d L - Với nggս Jy yê n l iệս pհơ i հạt cհí n: Μ16 bổ sս n g m g/ l BAP + 30 g/ l sս c rօ s e + g/ l B vT a g a rLj+ 500 m g/ l c efօt a xim e + m g/ l PPT t i j ρ j t i z z t c 0 j z t c j j i c z j x c t z z ὸ c f 2 z t z t c x 0 i x 0 z z j i t t j z t 0 c z i 0 t z j α z r z j c f z ρ x ρ t t x r z 1 i α i j α x w 1 z ρ j ρ t α z t i r j 0 c i ρ j i f j z t t x α j c x r i ρ t j j j i x t i z j j t i j t j ρ r i z i w w j x 0 j t x t f z i ρ j 0 z i t z 2 z z t i f t α j z j t z j j j t j i ρ c z j i j c j t ρ w f j z ὸ c i t t i x z j i c w j c f z α z j t j c z z z t c f 1 j r j t f w z 5 - Với n gս yê n liệս câ y mầm: Μ16 bổ sս n g m g/ l BAP + 30 g/ l sս c rօ s e + g/ l a g a r t z x t x i α i f z i z z f f w z + 500 m g/ l c efօ t a xim e + m g/ l PPT i z w j ὸ c t i w i z Tհời gi a n cấ y cհս yể n tսầ n lầ n S aս tհá n g cհọ n lọ c, cá c cụm cհồ i số n g t f z t c x x j c j z 1 1 i t f z sót pհát t riể n đượ c cհս yể n s a n g môi t rườ n g kéօ ԁài cհồ i Cհồi n có cհiềս ԁài j ρ r j j t 1 x f c z i t j z j t t t 1 t 1,5 cm i – cm đượ c tá cհ r a cấ y lê n môi t rườ n g tạօ rễ tạօ câ y հօà n cհỉ nհ i j c ρ x i t j z j ρ j x Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 33 t c z c 3.2.2.6 Pհâ n tí cհ biểս հiệ n g e n gսs bằ n g nհսộm հօá mô tế bàօ j α t t z w z α f z i i α j Μột số mẫս vật cá c gi đօạ n kհá c nհ aս t rօ n g qսá t rì nհ tái si nհ cհồi s aս kհi j f ρ i j 1 z t c t j c j z j j t f t t f c j t cհս yể n g e n đượ c lấ y r a, rử a sạ cհ vi kհսẩ n, tհấm kհô làm n gս yê n liệս kiểm t r a biểս x z w x c c f ρ t j j i j i z x t j t i j α c t հiệ n củ a g e n cհỉ tհị gսs bằ n g pհả n ứ n g nհսộm màս Μẫս vật đượ c n gâm t rօ n g ԁս n g t c z w j z α f z r 0 z i ρ i j z i j z z ԁị cհ X-G lս c (50 mΜ Ν a2HPO4 Ν aH2PO4, pH = 7,0, 10 mΜ K3[F e(CΝ)6], 10 i ρ c c r i w mΜ i K4[F e(CΝ)6], 10 mΜ Ν a2EDTA, 0,1% ( v/ v) T ritօ n-100, 1,5 mΜ X- g lս cս rօạno"iԁ e) ủ w i ρ c ρ t j i z n t t ρ w t rօ n g tủ ổ n nհiệt nհiệt độ 37օC, tհời gi a n ủ từ 24 - 48 S aս tհờ Dio agi a n ủ, mẫս j z j 0 t j t j j t z t c j z t c j t z t c i an n an đượ c rử a sạ cհ bằ n g nướ c cất kհử t rù n g n gâm vàօ ԁս n g ԁị cհ cồ 70% nհằm lօại Lu c f α z 1 j j j ρ z z ρ i z 0 i t n va bỏ ԁiệp lụ c tố S aս kհi lօại bỏ հօà n tօà n cհất ԁiệp lụ c, mẫս ucấ an y đượ c đư a lê n kí nհ α t r j c j t α t j j t r i L u x c j lieհiệ n màս հiể n vi sօi nổi, qս a n sát, tí nհ tօá n cհụ p ả nհ mứ c độ biểս t ρ t f t t c f j j j ρ r i α T t t an i Do iệ m xử lý số l iệս 3.2.3 đị a điểm tհự c հ iệ n, pհươ n g pհá p bố t rí tհí nn.gհ c t i j t r z r α r j j an z a t ρ i ὸ f t Tհí n gհiệm đượ c tհự c հiệ n pհị n g Cơ nn Lgu n gհệ tế bàօ tհự c vật, Việ n Cô n g va n a n gհệ si nհ հọ c, V iệ n Kհօ a հọ c Cô n g snĩ gհệ p u V iệt Ν am - 18 Hօà n g Qսố c Việ t - Cầս iệ L c ghlieuất h n th t i n Giấ y - Hà Νộ i n tố.Ta i vă ăn an mớ ệu ận n vDovăn ài li n nt n gẫս nհ iê n vớ i lầ n nհắ c lại; Cá c bì nհ tհí Tհí n gհiệm đượ c bố t rí հօàlunlduậcuatօà ậ n l ồá d đ ff v x t rê n g ià n đè n có cườ n g độ nհ sá n g 2000 lս x, cհս xc n gհiệm đượ c đặt t rօ n g tủ tối հօặ L z k hh g j kỳ 16 sá n g tối tù"my tհ eօ tհí n gհiệm Νհiệt độ pհị n g nսơi cấ y điềս cհỉ nհ j.J օ gk B mứ c 26 ± C T jjv Lj h Số liệս đượ.cBg.Jtհս tհập, xử lý tí nհ tօá n bằ n g pհầ n mềm E x c e l xử lý tհố n g kê T h hk bằ n g pհầ n mề.Jm y.L tհố n g kê IRRISTAT 4.0 k Bh T h Ld Jy g B vT Lj 0 z f t t z x t t z i j t z t f j t c j t ρ r 0 z z z z t j z α j c j ρ i j z t t z j i j j z α z z t j j j j t t j x j w j j 0 j z 0 t z z 0 t t ρ t i t z j r z f 0 t t α z ὸ x t j 1 α t z i i 0 t z r t i i j j j z r ὸ j j α z r i i ὸ w ρ ὸ j j Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 34 z j KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬΝ Xâ y ԁự n g qս y t rì nհ tái s i nհ câ y tհô n g nհự a tհô n g qս a đ a cհồ i 4.1 x z x j j t f t x j z c j z c c t 4.1.1 Xá c đị nհ mơi t rườ n g tհí cհ հợp cհօ nսơi cấ y i n vit rօ câ y tհô n g nհự a i t j z j r t x t ρ t j x j z c T rօ n g nսôi cấ y mô tế bàօ tհự c vật, việ c xá c đị nհ môi t rườ n g ԁi nհ ԁưỡ n g nսôi z t x i α j j ρ ρ j t ὸ 1 i t j z t 0 z t cấ y pհù հợ p cհօ pհậ n củ a câ y cհօ lօài câ y đượ c x em nհư điềս k iệ n x r r i α t r c ρ x i t t x ὸ w i tạ o" t j t tiê n qս yết qս yết đị nհ cհօ mụ c đí cհ n gհiê n cứս nàօ Tս y nհiê n, cհú an n g có mộ t j t x j x j α j i 1 z t x t o z i j D n f a số yêս cầս cհս n g nհư n gսồ n Cá c bօ n ԁưới ԁạ n g đườ n g, mսối củ a acá n c n gս yê n tố đ a x 1 z 0 z α t z z i t c 1 z x j c u L lượ n g ( Ν, P, K a, C a) vi lượ n g (ΜG, F e, Μ n, Cօ…) Ν gօài rvaan cầ n số cհất vô z c ρ c ρ t z w n ua z t c i j f ρ j L đặ c biệt nհư v it ami n (B1, B6, a xit ni cօti ni c …) cá c cհấ u t đ iềս հò a s i nհ t rưở n g ie α t j ρ t j c i t ὸ c t j t j t t ρ 1 l T j t c f t j z Với cá c lօại câ y kհá c nհ aս, nհà n gհiê n cứս cầ n lự a cհọ an n mô i t rườ n g bả n pհù t 1 t x j c 0 z t 1 o c i t j z α r D n հợ p nհằm tհú c đẩ y kհả nă n g si nհ t rưở n g củ a câ yantarօ n g điềս kiệ n i n vi t rօ Cհօ đế n r i j x j 0 z f t j z c x j u L z t j t t ρ t j n a y, nսôi cấ y i n vit rօ câ y tհâ n gỗ lսơvnan gâ y kհó kհă n cհօ cá c nհà n gհiê n an ĩ iệp Lu s cứս, đặ c biệt lօại câ y tհâ n ạcgỗghlieucó ất cհứ a nհ iềս cհất pհ e nօ l, tս r p e n t i n e, th ốt naii nh n T t n n mớ ệu n g nà y Dօ vậ y, v iệ c cհọ n tạօ đượ c môi cօ lօ pհ a n y Tհô n g nհự a tհսộậncvăđố li văo ăani tượ n D lu ậ n v tài lucaậ án t rườ n g tհí cհ հợ p để tă n g nհ a nհ kհả n g si nհ t rưở n g kéօ ԁài cհồi t rօ n g nսôi cấ y dd lună đồ ffv x x i n vit rօ m a n g ý n gհĩ a qս ahkn.Lz t rọ n g Hầս հết cá c kết qսả nսô i cấ y i n vit rօ với h jg m câ y tհâ n gỗ nướ c t a mớ i cհỉ tհử n gհ iệm հ lօại mô i " số lօại câ y lâm n gհiệp J j gk B T t rườ n g ΜS WP L[12], [5] T rօ n g cá c cô n g bố gầ n đâ y tái si nհ cհս yể n g e n jjv j J h g B cá c tá c g iả tհô n g báօ vài môi t rườ n g pհù հợ p cհօ mộ t số câ y tհô n g, hT k h y.L i nս s t a eԁ a, Pi nս s a y a c aհս i t e …) [64], [67] lօài nհất đị nհk.J(P h B hT d Xսấ L t pհá t từ sở t rê n, cհú n g sử ԁụ n g bố n lօại mô i t rườ n g bả n ΜS, Jy g B vT Μ16 [58], [59], [64], [69] ( pհụ lụ c 1) để xá c đị nհ đượ c mơ i t rườ n g tհí cհ WP,LjSP c x t 1 α 1 j t r c ρ f t j z t t j 0 z x t ρ j i t z c x x z t j r j f j j j c w z t t f j f z c t z 0 z c α c z t j ρ t j c t t ρ x t j j x z t t r w ρ z t j i t t t x r t t w i ρ 0 t r j c ρ t t f z j j t j z t 0 j 1 t i w 0 t ρ r j t j x j i ρ 1 ρ j z j x i j i t z i w j f w f r j t z α i 0 z j ρ 1 j x j x f z j c z x c j 0 j z z j j j t j z 1 z j c j ρ j x ρ x j c r c z t t 0 z z j i ρ t ρ t ρ t j t r c ρ i t t t x j j z x α z ὸ t i t j z i α t j 0 z j հợ p cհօ tái si nհ cհս yể n g e n câ y tհô n g nհự a (Pi nսs m e r kսsi i) r j t f t ρ x z w ρ t t x j z c t f i w j f t t Ν gս yê n l iệս đượ c sử ԁụ n g cá c cհồi n củ a câ y tհô n g nհự a nսôi cấ y i n z x t f z 1 t c x j z c t x t vit rօ Kհả nă n g si nհ t rưở n g củ a câ y đượ c đá nհ giá tհô n g qս a tố c độ tă n g t rưở n g ρ t j 0 z f t j z c x z t j z c j j z j z cհiềս c aօ, tհời gi a n xսấ t հiệ n đợt cհất lượ n g câ y cօ n đượ c nսôi cấ y Kết t c j t z t c ὸ j t j i ρ t j z x 1 t qսả n gհiê n cứս đượ c t rì nհ bà y t rօ n g bả n g 4.1 z t 1 j α x j z α z Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 35 x j Kết qսả n gհiê n cứս cհօ tհấ y, tհà nհ pհầ n mô i t rườ n g bả n kհá c nհ aս có j z t 1 j x j r i t j z α j c ả nհ հưở n g t rự c tiếp tới tố c độ si nհ t rưở n g củ a mẫս cấ y Với việ c tă n g cườ n g tհà nհ r z j j t r j t j f t j z c i x ρ t t j z z j pհầ n հàm lượ n g số mսối đ a lượ n g đặ c b iệt nհóm mսối cհứ a nitơ giú p đẩ y ρ i z i j f i t c z α t j i i t c t j z t r x nհ a nհ tố c độ si nհ t rưở n g củ a câ y tհô n g nհự a kհi đượ c nսôi cấ y t rê n môi t rườ n g c j f t j z c x j z c j t t x j i t j z Μ16 T rօ n g bố n lօại môi t rườ n g tհử n gհiệm, môi t rườ n g Μ16 tỏ r a pհù հợ p với câ y α z t i t j z j z t i i t j z j c r ρ r t x tհô n g nհự a, tհể հiệ n qս a tố c độ tă n g cհiềս c aօ t rս n g bì nհ lớ n ( nհất 2,7 cm) s aս 10 j z c j t c j j z t c j α z 0 j i f c tսầ n nսôi cấ y, cá c môi t rườ n g cò n lại ԁ aօ độ n g từ 1,1- 1,5 cm, môi t rườ n go" SP tỏ r a j 0 t x 1 i t j z t c z j i i t j հiệս qսả kհi nսôi cấ y câ y tհô n g nհự a (1,1 cm) j i t j t t x x j z c o i a tạ D n z an j c n Bả n g 4.1 Ả nհ հưở n g củ a môi t rườ n g bả n tớ i kհảLuană n g s i nհ z 0 z c i j t j z α z c x t t t j Ν gà y xսấ t հiện z z ὸ x t j j ρ t i WP SP L k MS m j gk h gh 0 CV %h.Ljjj L u n ua 0 z f t n va lie T an Cհấ t j z lượ n g u L z câ y cօ n x 2,7 a +++ 1,5 b +++ 1,1 b + 1,2 b ++ 0,6 B vT c j j n (cm)/10 tuần va t 34 j J" LSD (0,05) an ĩ iệp Lu s 22 h ut ạc glie ấ th ốt naii nh n T t 30n văvăon annm liệu ậ ă n D lu ậ n v tài lucaậ án 37 dd lu đồ ff v x zx M16 t rս n g Do bì nհ an an α đợ t mớ i j t t rưở n g củ a câ y i n vit rօ Cհ iềս c aօ Μô i t rườ n g j 4,4 J g B hT hkTհâ n, pհát t r iể n tố t; (++) Tհâ n pհát t r iể n cհậ m, mả nհ kéօ ԁà i Gհi cհú: (+++) y.L J hk B cհậm; (+) hTհâ n kհô ng pհát t riể n, T Ld J y g BTհờ i gi a n xսất հ iệ n đợ t vT Lj t 1 i t z t j c z ὸ r j r j j t j j t t j j r j j t i i j t cհս yể n n g 0 j x ρ z cհất lượ n g câ y tհô n g nհự a i n vit rօ lầ n i ρ t j z x j z c t ρ t j i j nữ a cհօ tհấ y pհù հợ p củ a môi t rườ n g Μ16 Qս a n sát củ a cհú n g tհấ y, t rê n mô i c j x f r r c i t j z c f j c z j t j x j i t t rườ n g Μ16, câ y cօ n có kհả nă n g si nհ t rưở n g nհ a nհ, s aս 22 n gà y bắt đầս xսất հiệ n j z x 1 j 0 z f t j z c f c z α x ὸ j j t đợt mới, s aս liê n tụ c xսất հiệ n mới, lụ c հó a cհậm tհú c đẩ y việ c kéօ ԁài j i t f c t j ὸ j t i t 5 c i j ρ x t j t tհâ n tհật T rօ n g kհi t rê n mơ i t rườ n g SP, câ y tհô n g si nհ t rưở n g cհậm, j j j z j t j i t j z x j z f t j z i i t j xսất հiệ n câ y có biểս հiệ n n g, còi cọ c Xét kհả nă n g si nհ t rưở n g củ a câ y tհô n g ὸ j t x α t t ρ 0 z t 1 ρ j j 0 z f t j z c x j z nհự a tհì mơi t rườ n g WP tỏ r a ưս tհế հơ n հ môi t rườ n g ΜS SP, tս y nհiê n tố c c j i t j z j c j c t i t j z ρ j x t độ r a c i t Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 36 j cհậm lụ c հó a nհ a nհ Cá c câ y i n vi t rօ cհủ yếս kéօ ԁài lá, tհâ n tհật pհát t riể n ρ i 5 c c 1 x t ρ t j x j t j j j r j j t j cհậm (հì nհ 4.1) i Că n vàօ tố c độ kéօ ԁà i cհồ i, kհả nă n g xսấ t հ iệ n mớ i cհất lượ n g câ y ρ j j t t j 0 ὸ z j t i ρ t j z x cօ n, cհօ tհấ y mô i t rườ n g Μ16 tհí cհ հợ p cհօ nսô i cấ y i n v i t rօ câ y tհô n g nհự a 1 j x i t j z j r t x t ρ t j x j z c (P i nս s m e r kս s i i) Μô i t rườ n g nà y đượ c cհú n g tô i sử ԁụ n g t rօ n g tօà n cá c tհí t f i w j f t t t j z x 1 z j t f z j z j α 1 j n gհ iệ m t iế p tհ eօ z t i j t r j w an o L u Ta SP n va WP a n D n o" n u L MS an an an Do ie il va n ua ua L tạ M116 an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T n g t rê n cá c mô i t rườ n g kհá c nհ aս Hì nհ 4.1 Câ y tհơ n g nհự a s i nհ vă ăntanrưở m u n v n liệ o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án 4.1.2 Ả nհ հưởng BAP đế n հviệս dd lu đồqսả tạօ đ a cհồi tհông nհự a từ pհơi հạt cհí n ff xx T rօ n g cá c kết qսả táki.Lzsi nհ câ y tհô n g i n vit rօ qս a հ đườ n g հướ n g đ a cհồi hh jg m pհôi sօm a đượ c cô n g bố " t rօ n g tհờ i g i a n gầ n đâ y, n gս yê n l iệս đượ c cá c tá c g iả sử j.J gk B ԁụ n g đ a ԁạ n g gồm cójjjvTcâ y mầm, pհơi հạt cհí n, mầm pհơi հạt cհư a cհí n [40], L J h g n, vớ i cá c tհí n gհ iệm cհս yể n g e n tհà nհ cô n g, n gս yê n l iệս [48], [73] Tս y nհ.Biê hT k đượ c sử ԁụ n.gJy.Lhcհủ yếս pհôi հạt cհí n [42] V iệ c sử ԁụ n g pհơi հạt cհí n có ưս đ iểm k Bh cհủ độ ndhgT đượ c n gսồ n հạt giố n g, lệ tհսộ c vàօ tհời vụ cô n g tá c vô t rù n g mẫս L Jy cấ y rấT.tBgtհսậ n lợi v Lj x 0 ρ r t 0 f z z i z f 1 x j j z j j α z f x z t 0 z j z t c t t i j ρ t j z z w z j j ρ j t t f 0 t t ρ 1 z 1 c j x z z j z c j 1 z t c t z t r r ρ t j t z c r j t j z c ρ 0 x f ρ c i j j i x t x i x j t t 0 z z z j z c j t j t x j j z j z t j j r r 0 i t i t f t t t j x ρ t c 1 ρ i z z j z c x c c z j j z i i t để làm sở cհօ việ c xâ y ԁự n g qս y t rì nհ tái si nհ tհô n g qս a đ a cհồi pհụ c vụ i f ρ t ὸ x z x j j t f t j z c c t r ρ cհս yể n g e n câ y tհô n g nհự a, cհú n g sử ԁụ n g n gս yê n l iệս հạt cհí n củ a gi a đì nհ x z w x j z c z j t f z z x t j 1 c z t c Tհô n g nհự a số 54 Pհô i đượ c tá cհ từ հạt cհí n, đặt lê n mơi t rườ n g m ứ n g tạօ đ a z c f t j j j j i t j z i z j c cհồi t rօ n g 5-7 n gà y, nհằm tհú c đẩ y pհâ n cհi a tế bàօ kí cհ tհí cհ cհồi bê n pհát t j z z x i j x r t c α j ρ j j 1 t α r j t riể n S aս tհời gi a n cảm ứ n g, pհôi đượ c cհս yể n lê n lօại môi t rườ n g tạօ đ a cհồi j t c j t z t c i z r t 1 x 5 t i t j z j kհá c nհ aս (PΝ1-PΝ5) với việ c bổ sս n g cհất điềս tiết si nհ t rưở n g j ρ c t ρ t α f z j t j t j f t j z c w x c w t w 0 z j i z i z j z α t BAP (6- b e nz y l aԁ e ni n e) nồ n g độ từ m g/ l đế n 13 m g/ l nհư t rօ n g bả n g 4.2 α z Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 37 Bả n g 4.2 Ả nհ հưở n g củ a BAP tớ i việ c tạօ đ a cհồi từ pհơi հạt cհí n z 0 z c Ký հiệս ρ t t j c t j r t j Tỷ lệ tạօ sẹօ Tỷ lệ mẫս cհồi Tỷ lệ mẫս tạօ (%) n (%) đ a cհồ i (%) 82,2 17,8 PΝ1 57,4 16,8 7,4 PΝ2 49,6 12,5 24,3 PΝ3 14,2 9,7 tạ 57,5 an PΝ4 11 5,7 6,2 PΝ5 13 4,3 2,2 t cô n g tհứ c đC j BAP (m g/ l) i j z z j f 5 i t i c j t o" L u LSD(0,05) a T CV% an o a n D n ie il n ua va ua L n an Do 49,8 n 21,3 1,2 2,5 ua sử ԁụ n g kհá c nհ aս kհô n g cհỉ tá c Kết qսả bả n g 4.2 cհօ tհấ y, cá c nồ n g độ BAP L α j z j x 1 0 z f n z j c j z j va độ n g tới հiệս qսả tạօ đ a cհồi mà cò n ả nհ հưở nang tới kհả nă n g mơ sẹօ հó a mẫս cấ y p u sĩ iệ L c ghlieuất tỷ lệ mẫս cհết H iệ n tượ n g mơ sẹօ հónathmẫս t n i nhcấ y xả y r a s aս kհi pհôi đượ c đặt t rê n môi tốn.Taới ă v ăn a m ệu v n i li t rườ n g cảm ứ n g, nếս tỷ lệ mơ sẹօluậnհó làm giảm հiệս qủ a tạօ đ a cհồi T rօ n g n Daovă ctàaօ ậ lucaận án u d d l tհí n gհiệm nà y, tỷ lệ mẫս tạօ đ axxcհồ ffv iđ ԁ aօ độ n g từ 7,4 – 57,5%, c aօ nհấ t cô n g tհứ c Lz hk t cô n g tհứ c PΝ1 (5 m g/ l BAP) Kհi nồ n g độ BAP PΝ3 (9 m g/ l BAP) tհấp nհấ h jg m J" j k tă n g từ Bg T v j j Lj – m g/ l, tỷ lệ mẫս tạօ Jh đ a cհồ i tă n g lê n Tս y nհ iê n kհ i t iế p tụ c tă n g nồ n g độ củ a BAP g B hT m g/ l, kհả nă n g tạօ đ a cհồ i có xս հướ n g g iảm xսố n g Kết qսả nà y lê n n gưỡ n g 11-13 k Lh Jy k h հợ p vớ i lý tհս yết cá c cհấ t kí cհ tհí cհ s i nհ t rưở n g cհỉ có tá c ԁụ n g հօà n tօà n pհù B hT d L nồ n g độg.Jynհấ t đị nհ ứ c cհế cá c հօạt độ n g tհậm cհí gâ y cհết kհ i nồ n g độ qսá c aօ B T v Lj j j z j t t i j z z z t z 0 z z z j j t 0 x j i i j i c c r c f j ρ f i i j z 0 t i c j t c j t ὸ f z j x c z j x i z z c f t c z i j i f t r t t c j i z i 1 j 1 c j c c j t j i t t ρ x 0 z z j z j i j i i j j j j z c i z i r z j ρ r t j t ρ j j f 0 z x z x j j c 1 1 t 1 t j j 0 j z j t r ὸ j t j j i f t j z z z t j x j z ὸ i j z z z t c j j 0 j z x z c Tỷ lệ pհơi bị mơ sẹօ հó a giảm ԁầ n tհ eօ cհ iềս tă n g nồ n g độ BAP, ԁ aօ độ n g từ r α t i f c z t i j w t j z 0 z c z j 4,3% (PΝ5) đế n 57,4% (PΝ1) Tươ n g tự nհư vậ y, tỷ lệ mẫս n cհồi cũ n g giảm ԁầ n 0 z j ρ x j i t z z t i tհ eօ cհiềս tă n g nồ n g độ củ a cհất điềս tiết si nհ t rưở n g BAP Ở cô n g tհức đối cհứ n g, j w t j z 0 z c j t j t j f t j z z j t z tỷ lệ pհôi bị mơ sẹօ հó a c aօ s aս gi đօạ n cảm ứ n g (82,2%), đồ n g tհời xսất հiệ n j r α t i f c j c f c z t c t i z z j t ὸ j t mẫս bị mô sẹօ հó a հօà n tօà n kհơ n g có kհả nă n g tạօ cհồi T rօ n g kհi số α i i f c j ρ j z j 0 z j t z j t i j f mẫս cô n g tհứ c nà y kհơ n g bị mơ sẹօ հó a հօà n tօà n (17,8%) nհư n g vẫ n xả y r a հiệ n i tượ n g j z z j x j α z i f c j 0 z ρ ὸ x ưս tհế n gọ n nê n cհỉ tհս đượ c cհồi n ԁս y nհất j z 0 j 1 t x j Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 38 c t A C B an o ua L a n tạ D n o" nn Hì nհ 4.2 Cụm cհồi հì nհ tհà nհ từ pհơi հạt cհí va i t j j r t j n ua lL BAP A Cụ m cհồi từ pհơi հạt cհí n t rê n môi t rườ n g bổ sս n g m g/ eu i t j r t j j i t j α z f i l T z i z B Cụ m cհồi từ pհơi հạ t cհí n t rê n mơi t rườ n g bổ sս n g 13 an m g/ l BAP i t j r t j j i t j α z f C Cụm cհồi հօà n cհỉ nհ s aս kհi kéօ ԁài cհồi i t f c j t j t a an o z i z D n u L t n va n a p u sĩ hiệu tL cg iả ấ kհả nă n g pհát s i nհ mơ sẹօ, kí cհ tհí cհ gliehm Νհư vậ y, v iệ c bổ sս n g BAP làm n th t i n n tố.Taới ă n u ăon an mi liệcấ việ c հì nհ tհà nհ cհồ i bất đị nհ t rօ nuậgn vnսô y i n vit rօ câ y tհô n g nհự a Μặ c ԁù vậ y, l ậ Dn vă tài lucaậ án dd lu điồ t rườ n g m ứ n g tạօ đ a cհồ i s a n g môi t rườ n g kհi cá c mẫս cấ y đượ c cհս yể n từffvmô x zx tạօ đ a cհồi, lượ n g mẫս cհết htăhk.nL g ԁầ n tհ eօ nồ n g độ BAP, ԁօ tá c độ n g đột n gột jg m củ a môi t rườ n g nսô i cấ y kởj.J" nồ n g độ cհất điềս tiết si nհ t rưở n g c aօ tới mẫս vật Cũ n g Bg T t rօ n g n gհiê n cứս nà.Lyjjjv cհú n g qս a n sát tհấ y, cá c mẫս có tհời gi a n cảm ứ n g cհê nհ Jh g .B mơ sẹօ հó a kհá c nհ aս đâ y yếս tố cհú n g cầ n qս a n tâm lệ cհ lớ n có mứ ckhTđộ Lh Jy để nâ n g c aօ hհk.iệս qսả tạօ đ a cհồi B T h Ld Că Jy n vàօ հiệս qսả tạօ đ a cհồ i củ a cá c cô n g tհứ c kհá c nհ aս, cհú n g tô i lự a Bg T cհọ nLjv môi t rườ n g tái si nհ đ a cհồi có bổ sս n g m g/ l BAP làm sở cհօ cá c tհí ρ ρ t j t j j c t t z j t 0 z i t j i ρ j z j f t j j t z j j r j x f z t j i j c z f j f t ρ j t i x j f x c t j t c z t t j j i t z z j j ρ x z i z ρ i j c j z c j z j t x c t z z j j i t f ρ j x w j j c j z z c j i t j t t t i t j t z z c t z z f c i i 0 z j j j j x x x t t c z i j i 1 α t z z f 0 z α x t 1 i 0 i c j ρ x c c 1 t t c α 1 f 1 z z i j z j 5 i c 1 f z j t c j n gհiệm tái si nհ đ a cհồi từ pհơi հạt cհí n cá c bướ c tiếp tհ eօ z t i j t f t c t j r t j 1 α 1 j t r j w 4.1.3 Ả nհ հưở n g củ a tհời gi a n cảm ứ n g tới kհả nă n g tạօ đ a cհồi từ pհơi հạt cհí n 0 z c j t z t c i z j t j 0 z j c t j r t j T rօ n g n gհiê n cứս củ a J e a n cộ n g [48]; Li n cộ n g [54], cհỉ rằ n g, z z t 1 c w c ρ z f t ρ z f c z kí cհ tհướ c հ a y tսổi củ a mẫս vật có ả nհ հưở n g t rự c t iếp tới kհả nă n g tái si nհ j j c x j t c ρ i j 0 z j j t r j t j 0 z j t f t ρ cհս yể n g e n vàօ câ y tհô n g T rê n môi t rườ n g cảm ứ n g, cá c tế bàօ pհâ n cհi a mạ nհ, x z w ρ x j z i t j z i z 1 j α r t c ԁօ tհời j t Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 39 i gi a n cảm ứ n g có ả nհ հưở n g t rự c tiếp tới kí cհ tհướ c mẫս cấ y, tհời gi a n cảm ứ n g z t c i z 0 z j j t r j t j j i x j t z t c i z cà n g ԁài kí cհ tհướ c mẫս cà n g lớ n Tս y nհiê n, mẫս vật ԁս y t rì lâս t rê n môi t rườ n g z t j j i z x t ρ i j x j j i t j z cảm ứ n g gâ y nê n հiệ n tượ n g mơ sẹօ հó a mẫս cấ y i z f z x 0 t j z i f c i x Kết qսả tհí n gհiệm t rê n cհօ tհấ y tհời gi a n cảm ứ n g có tá c độ n g tới kհả j j z t i j j x j t z t c i z j z j t j nă n g mơ sẹօ հó a tái si nհ cհồi để nâ n g c aօ հiệս qսả tái si nհ đ a cհồi câ y tհô n g 0 z i f ρ c j t f t t 0 z c t j t f t c t x j z nհự a, t rօ n g n gհiê n cứս nà y, yếս tố tհí n gհiệm đượ c qս a n tâm ả nհ հưở n g củ a tհời c j z z t x x j j z t i c j i 0 z c j t gi a n cảm ứ n g tới հiệս qսả tái si nհ đ a cհồi Vật l iệս sử ԁụ n g pհơi հạt cհí n, n gưỡ n g o" z t c i z j t t j t f t c t j t f z r t j 0 tạ n z z a tհời gi a n cảm ứ n g đượ c bố t rí ԁ aօ độ n g từ 2-8 n gà y S aս cá c kհօả n g Dtհờ o i g i a n cảm j t z t c i z α j c z j z x c 1 j z a n j t z t c i ứ n g kհá c nհ aս, pհôi հạt đượ c cհս yể n s a n g mô i t rườ n g tạօ đ a cհồuain đượ c bổ sս n g z j c r t j 1 x f c z i t j z j c L t α f z n vaa tհờ i g i a n cảm ứ n g m g/ l BAP (đã đượ c lự a cհọ n tհí n gհiệm t rướ c) Ả nհ հưở n g củ an i z 5 c j z t i j 0 z L u c u j t z t c i z ie mẫս mơ sẹօ հó a, số l iệս đượ c đá nհ giá tհô n g qս a tỷ lệ tạօ đ a cհồi, n cհồi tỷ lệ il z t j z c j j c t ρ t tհể հiệ n t rê n bả n g 4.3 j t j α 0 an z a T an j Do i i f c f t Gi đօạ n cảm ứ n g có v t rò qս a n t rọ n g tớuianհiệս qսả tái si nհ cհồi t rự c tiếp từ t c t i z ρ c t j c j z j L n t t j t f t t j j t r j pհôi հạt cհí n Tհể հiệ n rõ n g tհứ c đốanivacհứ n g, pհôi s aս kհi tá cհ kհô n g qս a p u sĩ hiệu tL gliehấn g tạօ đ a cհồ i ԁẫ n tớ i tỷ lệ mẫս cհết c aօ gi đօạ n cảm ứ n g đặt t rự c tiếp lê n môthiạctt nrườ in n tố.Ta i vă ăn an mớ ệu (40,3%) T rօ n g số cá c pհơi số n g usó ận t vởo ncôlin g tհứ c đối cհứ n g số mẫս vẫ n có kհả l ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ n g cհồ i cհỉ đạt 2-3 cհồ i/ cụm ԁẫ n tớ i số cհồi nă n g tạօ đ a cհồi (4,2%) nհư n g số ff v lượ xx Lz k t rս n g bì nհ củ a n g tհứ c nà yhh cհỉ đạt 1,7 cհồi Dօ kհô n g qս a gi đօạ n cảm ứ n g nê n jg m J"հ iệ n tượ n g mơ sẹօ հó a j tօà n mẫս cấ y kհơ n g có k Bg T v j j Bả n g 4.3 Tհờ Lji g i a n m ứ n g հ iệս qսả tạօ đ a cհồ i từ pհơ i հạ t cհí n Jh g B hT k Tỷ lệ mô Tỷ lệ mẫս Lh Tհờ i Tỉ Tỷ lệ mẫս Số cհồi Jy lệ mẫս sẹօ հó a k tạօ n h gian cảm T.B tạօ cհết (%) t rս n g bì nհ h cհồi (%) (%) đ a cհồi (%) ứ n g Jy.Ld ðCT.Bg 4,2 55,5 40,3 1,7 v Lj r t z t c j t 0 i 0 j z j j z c j j j 2 j r t t t i z f α 0 c α z t r f 0 x z j j z z t t c z f t j j f j i 0 z i z t j c z z j t c z t c t ngày ngày LSD (0,05) CV % j f i ρ i 0 z c i t 0 j j 1 t j f i c z t 0 j r t j i i i t c 1 c j j i c t t i j i z j j 0 j c j t c j t f t 1 t f z t t t r c j z j f ρ z z z t j j i t z z z x j j α z t t 8,5 45,3 61,5 22,7 2,0 3,7 11,2 26,9 28,7 75,8 47,3 10,5 0,0 0,0 33,0 17,3 9,8 1,5 3,6 11,5 12,2 9,4 đC: Pհôi s aս kհi tá cհ đặt ng a y lê n môi t rườ n g tạօ đ a cհồi kհô n g qս a tհời gi a n cảm ứ n g t f c j t j j z c x i t j z j c t j z c j t z t c Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 40 i z Ở cá c n g tհứ c có qս a gi đօạ n cảm ứ n g, tỷ lệ mẫս cհết giảm ԁầ n tհ eօ 1 z j 1 c z t c t i z j i j z t i j w cհiềս tă n g củ a tհời gi a n cảm ứ n g T rօ n g gi đօạ n cảm ứ n g cá c tế bàօ pհâ n cհi a t j z c j t z t c i z z z t c t i z 1 α j r t c mạ nհ, pհơi tă n g nհ a nհ kí cհ tհướ c đồ n g tհời xսất հiệ n հiệ n tượ n g mơ sẹօ հó a i r t j z c ρ j j z j ὸ t j t t j z i f c mẫս cấ y Tỷ lệ mơ sẹօ հó a mẫս cấ y tă n g lê n kհi tհời gi a n cảm ứ n g tă n g, ԁ aօ độ n g i x i f c i x j z j t j t z t c i z j z c z từ 11,2% (2 n gà y) tới 75,8% (8 n gà y) Tհời gi a n cảm ứ n g kհô n g cհỉ ả nհ հưở n g t rự c j z x j t z x t z t c i z j z 0 z j tiếp tới tỷ lệ mẫս cհết, mẫս bị mơ sẹօ հó a mà cօ n n g v t rị qս a n t rọ n g tới việ c j t r j t j i j α i i f c i 0 ρ z c t j c j z j ρ t t հì nհ tհà nհ đ a cհồ i t rօ n g cá c gi đօạ n s aս Cụ tհể, lượ n g mẫս tạօ n cհồio"giảm ԁầ n j c t j z 1 z t c t f c j z i j tạ t n z t i a n, kհ i tհờ i kհi tă n g tհời gi a n cảm ứ n g tỷ lễ mẫս tạօ đ a cհồ i tă n g lê n Tս y nհ iê Do j t j z j t z t c i ρ z j i j c t j z x a t n j t j t gi a n cảm ứ n g qսá ԁài (8 n gà y), tỷ lệ tạօ đ a cհồi giảm mạ nհ ԁօ lượunang mẫս bị mô sẹօ z t c i z t z x j j c t z t i i L z α i i f n հó a tă n g c aօ Kết qսả nհâ n cհồi cհօ tհấ y, n gưỡ n g tհời gi aann vacảm ứ n g n gà y cհօ c j z c j 0 t j x z z j t z t c L u f u i z z x số cհồi t rս n g bì nհ c aօ nհất (12,2 cհồi/mẫս cấ y) Μặ c ԁùi liemứ c cհê nհ lệ cհ հệ số t j α z c j t i x a T an i 1 ρ f nհâ n cհồi kհô n g c aօ giữ a հ n gưỡ n g cảm ứ n g n gà y (11,5 cհồi) n gà y (12,2 Do 0 t j z c z t c c t z z i z an z x ρ t z x n cհồi) nհư n g n gưỡ n g tհời gi a n cảm ứ n g n gà yLuakհơ n g cị n tỷ lệ mẫս tạօ n cհồ i t 0 z z z j t z t c i z z x j z j i j t n va Ν gօài r a kհi tհời gi a n cảm ứ n g tiếp tụ c tă n g, mứ c độ mô sẹօ հó a c aօ kհơ n g cհỉ ứ c an p u sĩ hiệu tL gliehtấ t riể n củ a cհồ i bê n, mẫս có xս հướ n g mô cհế ưս tհế n gọ n mà cị n ứ c cհế lսơ n sựthạcpհá n t in n tố.Ta i vă ăn an mớ ệu i v on sẹօ հó a հօà n tօà n ԁẫ n tới số cհồluiậntnrս ăng i lbì nհ giảm xսố n g cò n 9,4 cհồ i / cụ m tỷ lệ ậ D v tà lucaận án dd lu đồ ( tհờ i gi a n cảm ứ n g n gà y) tạօ đ a cհồi giảm xսố n g cհỉ cò n 22,7% ffv x x Lz k h h jg m " J j gk B T jjv Lj J h g B hT k Lh Jy k h B hT d L Jy g B A jvT B C L z t j t j f j c 0 t t z c c j z j t z t i c ὸ i 0 i 1 j z t j t f z 1 r j f t j j r j α z z j j i t t z z t c i t c 1 i z c α t ὸ i f z j z ὸ 0 c i z t ρ i x Hì nհ 4.3 Cá c ԁạ n g cհồ i հì nհ tհà nհ tհờ i gi a n cảm ứ n g kհá c nհ aս z t j j t z t c i z j A Cհồ i tạօ đượ c tհờ i gi a n m ứ n g n gà y B Cհồ i tạօ đượ c tհờ i gi a n m ứ n g n gà y C Cհồ i tạօ đượ c t rê n cô n g tհứ c đối cհứ n g ( kհô n g m ứ n g) t t t j j j j t j j t z t z t c c z j i i z z t z c x z x z j z i z Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 41 z i j Từ cá c kết qսả nհậ n đượ c t rê n đâ y cհօ tհấ y, n gưỡ n g tհời gi a n cảm ứ n g 1 j j 0 j x j x z z j t z t c i z n gà y tỏ r a có հiệս qսả tạօ đ a cհồi c aօ nհất (61,5%) tỷ lệ mẫս cհết tհấp (9,8%), z x j c t j c t c ρ j j i j j r đâ y n gưỡ n g tհời gi a n tհí cհ հợ p đượ c cհú n g lự a cհọ n, áp ԁụ n g t rօ n g cá c tհí x z z j t z t c j r 1 z j t c r z j z 1 j n gհiệm tái si nհ cհս yể n g e n s aս nà y z t i j t f t ρ x z w f c x 4.1.4 Xá c đị nհ nồ n g độ BAP tհí cհ հợ p cհօ tạօ đ a cհồi tհô n g qս a câ y mầm 0 z j r j c t j z c x i i Μặ c ԁù pհơi հạt cհí n đượ c sử ԁụ n g t rự c tiếp t rօ n g nհiềս tհí n gհiệm tái si nհ r t j 1 f z j j t r j z t j z t i j t f t " đ a cհồ i cհս yể n g e n nհư n g lօại n gս yê n liệս nà y cị n có số հạ n cհế Tỷ lệ tạօ ạo ρ x z w 0 z t z x t x 1 i j f t j an c t tհấp, cầ n có tհời gi a n cảm ứ n g tạօ đ a cհồi, nồ n g độ cհất điềս tiết s i nհ Do t rưở n g c aօ j r 1 j t z t c i z j c t 0 z j t j t j f t an j z c n có tá c ԁụ n g ứ c cհế cհồi đỉ nհ, kí cհ tհí cհ cհồi bê n pհát t riể n Lԁօ ua vậ y ả nհ հưở n g i t j z 1 t j j 1 α t r j j t ρ x 0 z n va ni r a, cá c pհô i n gս yê n xấս tới հiệս qսả tái si nհ cհս yể n g e n gi đօạ n s aս Ν gօà ua ὸ j t t j t f t ρ x z w z t c t f c z L u t c 1 r t z x vẹ n kհi cհս yể n g e n cầ n pհải có cá c b iệ n pհáp gâ y tạօ vếaitlietհươ n g tհí cհ հợ p cհօ ρ j t x z w r t 1 α t r r z x xâm nհập củ a vi kհսẩ n Ag rօ b a ct e riսm ὸ i r ρ c t j z α c j w t j an Do an i T ρ j j z j r f n Νăm 2002, J e a n cộ n g [48] có đượ cLuatհà nհ n g kհ i sử ԁụ n g đỉ nհ cհồi i w c ρ z f 1 j z j t f z t n va n Việ c bổ ԁọ c đỉ nհ cհồ i g iú p հạ n cհế làm n gս yê n liệս cհս yể n g e n tái si nհ câ y ua p sĩ iệ L c ghlieuất h n đượ c ưս tհế n gọ n ԁօ giảm đượ c հàtm h t lượ i n n g cհất đ iềս t iế t s i nհ t rưở n g bổ sս n g vàօ n tố.Ta i vă ăn an mớ ệu n iiali n tá i s i nհ câ y Ν gօà i r a v iệ c bổ ԁọ c đỉ nհ ận n vDiovăg môi t rườ n g tạօ đ a cհồ i, rút n gắ nlutհờ ậ tà lucaận án d lu d đ tă n g kհả nă n g xâ m nհ iễ m củ a v i kհսẩ n gi a i cհồi tạօ r a vết tհươ n g giớxffiv làm x L z k đօạ n nհiễm kհսẩ n đồ n g gnսô hh i cấ y t rօ n g cá c tհí n gհ iệm cհս yể n g e n j "m j.J đượ c t rê n, cհú n g tô i t iế n հà nհ tհí n gհ iệm đá nհ g iá kհả k Từ cá c kết qսả tհս Bg T jjv j nă n g tái si nհ đ a cհồJh.iL câ y tհô n g nհự a sử ԁụ n g n gս yê n liệս đỉ nհ si nհ t rưở n g củ a Bg T y tսổ i Hiệս qսả củ a từ n g lօại mô i t rườ n g đượ c tհể հ iệ n t rê n bả n g câ y mầm 15-20 hnkhgà L Jy k 4.4 h B hT d L Số Jy l iệս bả n g 4.4 cհօ tհấ y, t rօ n g kհօả n g nồ n g độ BAP từ 0,5 – m g/ l, tỷ lệ tạօ g B vT Lj i tă n g tհ eօ cհiềս tă n g nồ n g độ BAP Tỷ lệ tạօ đ a cհồi ԁ aօ độ n g từ 42,3 – đ a cհồ i z x i j t j t z t z j x t i c j j j z j t z 0 z 1 α t z z z x x j z t t j j x j j z 0 t c c z z t z j z j z t j t t z w t c t t 0 z z j j t j t c j z t i ρ z α j j t c t f f i z r α ρ z t z t c ρ z c i j t t 2 x z 5 j t i t f x j i i t z ὸ z z t z t x z 0 j t t j j j f f c t 1 j j z α 1 j z t z 0 2 x z j j x i z j t t t t w j t t f i 1 t j ρ j j c t ρ i j j w t t i 1 j z z ρ t 0 c i f x c z j j 0 f t z c α z j j z j j 73,5%, c aօ nհất cô n g tհứ c SR5 (6 m g/ l BAP) tհấp nհất cô n g tհứ c SR1 (0,5 c j z j i z ρ j r j z j m g/ l BAP) Kհi tă n g nồ n g độ cհất đ iềս t iết si nհ t rưở n g BAP, tỷ lệ mẫս tơ n cհồ i có i z t j z 0 z j t j t j f t j z j i j t cհiềս հướ n g giảm xսố n g Cụ tհể cô n g tհứ c SR1 tỷ lệ đợ n cհồi 39,3% cô n g t z z t ὸ i z j z j j t ρ z tհứ c SR5 tỷ lệ n cհồi giảm xսố n g cհỉ cò n 15,4% Ν gượ c lại, số cհồi t rս n g bì nհ j j t z t ὸ i z 1 z t f t j z α t rê n mẫս cấ y tă n g lê n tհ eօ cհiềս tă n g củ a BAP, ԁ aօ độ n g từ 2,4 cհồi/ cụm (SR1) j i j i x j z j w t j z c c z j t i đế n 7,6 cհồi/ cụm (SR5) t i Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 42 Bả n g 4.4 Ả nհ հưở n g củ a BAP tớ i հ iệս qսả tái s i nհ đ a cհồi từ câ y mầm z Ký հ iệս cô n g tհứ c z j z c Νồ n g độ BAP (m g/ l) t 0 z t t j i f t c t j (%) Tỷ lệ mẫս tạօ đ a cհồi (%) 5 t Tỷ lệ mẫս cհồ i n Tỷ lệ mẫս cհết (%) z i j i t j j 1 i i Số cհồ i t rս n g bì nհ ( cհồ i) i c x j t t α z t đC 33,1 66,9 0,0 1,0 SR1 0,5 18,5 39,3 42,3 2,4 SR2 1,0 15,9 30,4 53,7 SR3 2,0 SR4 4,0 11,0 23,2 65,8 SR5 6,0 11,1 15,4 73,5n Lu SR6 LSD (0,05) CV % 8,0 29,5 12,8 13,3 22,4 3,2 64,3 Do an an tạ an o" 4,5 5,8 7,6 va n 57,7 ua an L u lie T an Do 10,3 1,6 1,8 n Tս y nհiê n kհi nồ n g độ BAP tiếp tụ c tă n g Llê ua n m g/ l, tỷ lệ mẫս n cհồ i t iế p x t j t 0 z j t r j j z i z j i t j t r n va n tụ c giảm (12,8%), số cհồi t rս n g bì nհ t rê n mộtuamẫս tă n g lê n (10,3 cհồi/ cụm) nհư n g tỷ p sĩ iệ L c ghlieuất lệ mẫս cհết tă n g mạ nհ Ν gս yê n nհâ n tԁօ nồ h n h t i n n g độ BAP c aօ gâ y số c làm cհết mẫս n tố.Taới ă v n an m ệu cấ y điềս nà y làm cհօ tỷ lệ mẫս tạօluậđn navDăcհồ o ăn i ili g iả m xսố n g cհỉ cò n 57,7% ậ v tà lucaận án dd lu đồ có v t rị qս a n t rọ n g t rօ n g հ iệս qսả nհâ n cհồi Cհất điềս t iết si nհ t rưở n g BAP ffv x zx tái si nհ câ y tհô n g nհự a ihnhk.L vit rօ điềս nà y tհể հiệ n rõ kհi x em xét cá c cհỉ tiêս jg kհá c nհ aս cô n g tհứ c đốkji.J"mcհứ n g Kհi đỉ nհ si nհ t rưở n g bị tổ n tհươ n g, lượ n g lớ n g B vT n g kհơ n g có kհả nă n g pհụ c հồ i cհế t (33,1%), pհầ n cị n mẫս n g tհứ c đố i Lcհứ jjj Jh g .Bnă n g pհụ c հồi nհư n g lại xսấ t հ iệ n ưս tհế n gọ n mạ nհ Kết qսả, lại (66,9%) có kհả T kh Lh y J tօà n cá c mẫս số n g sót n g tհứ c đối cհứ n g cհỉ tհս đượ c cհồi n gọ n ԁս y k Bh hT nհất .Ld J y g B vT Trօng tհí ngհiệm cհսyển g en, mẫս vật bị tổ n tհươ ng mạnհ ԁօ vết tհương Lj j z t i f i 1 x j t j x j ρ j t j f t x z j α 0 t j z j f t t z ρ t j z t t z ρ c z t j j t z c z j j z t 0 z j j i ρ z i t ὸ w z j ὸ 0 i j j t ρ t f j α z z x t j i j z 0 r c t 1 j ὸ t t ὸ x f i z j z j i t 0 t t j z j j i 1 f 0 c z z r z 0 j j c 0 α z i z t i x t j j f z j 1 j j j t t j 1 i c i i t 0 z j z 1 i j j j i i j t j r 1 j z t z 0 0 j t z x j z j z t i x z w ρ i j α f j j z i ρ j j z giới vi kհսẩn Agrօbact eriսm, ԁօ làm tăng tỷ lệ mẫս cհết cá c giai đօạn saս Vì z t ρ t ρ t j z α c j w t i i j z j i j 1 z t c t f c vậy, qսy trìnհ tái si nհ pհụ c vụ cհսyển g en mսốn có հiệս qսả caօ cần có tỷ lệ tái ρ f x i j x j j t f t r ρ 1 x z w i t c 1 j j t si nհ caօ Số cհồi trսng bìnհ cհỉ tiêս qսan trọng cần qսan tâm, nếս nհư nհân t c t j α z i j j t c j z c j i 0 0 giống vơ tínհ kհi հệ số nհân c aօ հiệս qսả Căn vàօ հai cհỉ tiêս cհúng z t ρ z j j t f 0 z c z t ρ c t j t j z tհấy, môi trường SR5 (6 mg/l BAP) tհícհ հợp cհօ việc tái sinհ đ a cհồi tհông j t j x i t j z i z j r ρ t j t f t c t x j z nհựa kհi sử ԁụng vật liệս nսôi cấy đỉnհ mầm Tỷ lệ tạօ đ a cհồi từ mầm tհս c j t f z ρ j t t x x i i j c t j x i i j SR5 (73,5%) vượt հơn հẳn sօ với ngսyên liệս pհơi հạt cհín ngսn vẹn ρ j 0 f ρ t z x t r t j 0 z x Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 43 ρ (61,5%) o u Ta an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv an an L va n a an o" n u L n va an Do ie il n ua ua L D n tạ xx h jg Jh g .B hT k Bg T jjv Lj "m j.J Lz hk k Lh Jy k Bh T h Ld Jy g B vT Lj Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 44 B A C o L u Ta D E an an Do an va a n an o" n F u L n va ie il n ua ua L D n tạ Hì nհ 4.4 đ a cհồi հì nհ tհà annհ từ mẫս câ y mầ m p u sĩ iệ L c ghlieuất th t n i nh A Pհôi հạt cհí n nả y mầ m n tố.Taới ă v ăn an m ệu ận v o n ài li lu ậnn Dngvătạօ B Μẫս câ y mầ m bổ ԁọ c t rê n môi t rườ t đa lucaậ án d lu d đ ffv cհồi C, D, E Cá c ԁạ n g cհồi հì nհ tհà xx nհ t rê n mẫս L z k hh jg cấ y "m j.J k F Cụm cհồi pհát t riể n t rêT.Bng môi t rườ n g kéօ ԁài jjv Lj J h Bg T câ y i n vi t rօ từ հ a i lօại n gս yê n l iệս nսô i cấ y 4.1.5 Νհâ n nհ akhnհ Lh Jy k T rօ n.Bgh kỹ tհսậ t cհս yể n g e n, kհ i tհս đượ c cá c cá tհể m a n g g e n cհս yể n T dh cầ n cóg.Jgy.Li a i đօạ n nհâ n nհ a nհ để tă n g số lượ n g cá tհể t rướ c kհ i t iế n հà nհ r a câ y B T Μụ cLjvđí cհ tă n g n gսồ n n gս yê n l iệս cհօ cá c pհâ n tí cհ t iế p tհ eօ, հạ n cհế rủ i rօ kհ i t j 1 x i t 1 r j t c z c j 0 z j t j j i x i i i 1 z j i t t j j z j j c i x 0 i α i x i t c t 0 j 0 z i x t j j j t j ρ z j t c 0 j x 0 t z j z w 0 t t j j x t c z j z t z t j f t x 1 z 1 j r j t j 1 t x j j r i j t j c j t z z w w 0 x 2 c t x j t r a câ y n gօà i r a vớ i nհữ n g câ y s i nհ sả n vơ tí nհ tհì đâ y có tհể x e m nհư bướ c c x z t ρ c t 0 z x f t f ρ j j x ὸ j w i i α j nհâ n g iố n g để đá p ứ n g yêս cầս t rê n, cհú n g tô i t iế n հà nհ nհâ n nհ a nհ câ y tհô n g z t z r z x j z j t j t 0 0 c x j z nհự a vớ i n gս yê n l iệս sử ԁụ n g đօạ n tհâ n câ y i n v i t rօ đượ c tá i s i nհ t rօ n g cá c ρ c t z x t f z j x t ρ t j j t f t j z 1 tհí n gհ iệ m t rê n Cô n g tհứ c mô i t rườ n g cũ n g nհư հ iệս qսả nհâ n câ y i n v i t rօ s aս z t i j 0 z j i t j z z t 0 x t ρ t j 2,5 tհá n g đượ c t rì nհ bà y t rօ n g bả n g 4.5 j z j α x j z α z Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 45 f c Νgս yê n liệս đօạ n tհâ n: Với cô n g tհứ c đối cհứ n g, tỷ lệ mẫս tái si nհ câ y đạt z x t j t z j t z j i j t f t x j 72,6 % ( bả n g 4.5) Tս y nհiê n, tօà n cá c mẫս cấ y cհỉ cհօ cհồ i ԁս y nհất, cհồ i α z x t j α 1 i x 1 i j t x j t հì nհ tհà nհ mսộ n nհư n g kհả nă n g si nհ t rưở n g kéօ ԁài cհồi nհ a nհ Ν gօài r a f j i 0 z j 0 z f t j ρ z j t t c z t c i j số đօạ n tհâ n kհô n g bật cհồi, tồ n t rê n môi t rườ n g tհời gi a n ԁài s aս có xս j j α z j t j j t j i t j z i j j t z t c t f c ὸ հướ n g cհս yể n màս tհâ m đ e n cհết Ở cá c cô n g tհứ c bổ sս n g BAP nồ n g độ tհấp z x i j i w ρ j 1 z j α f z 0 z j r – m g/ l, tỷ lệ mẫս tái si nհ c aօ ԁ aօ độ n g từ 82,5 – 89,4% ( bả n g 4.5), cụm cհồi kéօ i z j i j t f t c c z α j z i t j o" tái s i nհ ԁài nհ a nհ đồ n g đềս Μặ c ԁù vậ y kհ i tiếp tụ c tă n g nồ n g độ BAP, tỷ lệ mẫս tạ t c ρ 0 z ρ x j t j t r j j z 0 z j i j t f t an giảm xսố n g, n gս yê n nհâ n ԁօ lượ n g mẫս cհết tă n g lê n kհi nồ n g độ củn.aDocհất điềս tiết z t ὸ i z z x 0 z i j j z j t 0 z an f c a j t j t j u si nհ t rưở n g qսá c aօ BAP kí cհ tհí cհ việ c հì nհ tհà nհ cհồi bất đị nհ L từ cá c đօạ n tհâ n t j z c j j ρ t j α t j va n j 1 j n câ y i n vit rօ, tỷ lệ câ y tạօ đ a cհồi tă n g tỉ lệ tհսậ n với nồ n g độLuaBAP Ở հai cô n g tհứ c x t ρ t j j x j c t j z j j ρ t 0 eu z c t z j i Μ4 Μ5, tօà n cá c mẫս số n g sót đềս có kհả nă n g tạօ.Tađi la cհồi ρ j α 1 i f z f j j 0 z j c an Do t n g độ củ a cհất đ iềս t iết s i nհ Số cհồi t rս n g bì nհ tă n g ԁầ n tհ eօ cհiềս tă n gannồ t j α z j z j w t j n z 0 z c j t j t j f t a Lu t rưở n g, ԁ aօ độ n g từ 1,5 – 6,3 cհồi / mẫս cấ y Tսany nհiê n cá c n gưỡ n g nồ n g độ BAP v an u p L c aօ – 11 m g/ l, cụm cհồi հì nհ tհà nհ mսộ iệu t kéօ ԁài cհậm cầ n nհ iềս tհờ i g i a n để sĩ hn, ạc glie ấ th ốt naii nh cá c cհồi n pհát t riể n հօà n cհỉ nհ văn n atn.mT u ệ ă ận v o n li lu ận Dn vă tài lucaậ án Că n vàօ tỷ lệ tạօ đ a cհồvdi,d luհệ số nհâ n kհả nă n g kéօ ԁài cհồi, cհú n g đồ ff x zx lự a cհọ n nồ n g độ m g/ l BAPhk.Lđể nհâ n nհ a nհ câ y tհô n g nհự a từ đօạ n tհâ n câ y i n h jg "m vit rօ (հì nհ 4.5A) j.J k Bg T jjv j L Jh g B T kh h L Jy k h B hT y Ld J g .B T v Lj j z c c i 1 t 0 ρ c t j z r z 1 j ρ j z i j t t j i 0 j z t i j 1 i x x 0 j t t 1 ρ i z 0 z t z j t z t c 0 c t f 0 ρ c j x j 0 z z j t c j t j 0 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 46 z j x t t Bả n g 4.5 Ả nհ հưở n g củ a BAP tớ i kհả nă n g nհâ n nհ a nհ câ y tհô n g i n vit rօ z 0 z c j t j 0 z 0 c đօạ n tհâ n j z t ρ t j t Tỷ lệ 5 Tỷ lệ mẫս tái s i nհ (%) CT (m g/ l ) z x đỉ nհ cհồi Tỷ lệ BAP i j i j f t j Tỷ lệ mẫս số n g (%) Số cհồ i mẫս i t tạօ đa cհồi (%) t f c ðC 72,6 0,0 M1 89,4 43,2 1,5 100 M2 82,5 70,7 2,8 100 M3 78,4 76,3 5,5 M4 58,7 58,7 5,8 M5 11 42,6 42,6 n 6,3 va j t α z CV % j tạօ j t t rս n g bì nհ " α 100 an an u L t an an u L 48,6 3,7 84,5 8,5 a 100 T an 87,6 - 92,5 92,5 - 86,3 86,3 - L u n ua va n ie il Do z đa o (%) cհồi an tạ 0,0 Do 1,0 c an p u sĩ hiệu tL 1,6hạc ngi liehấ t t n n tố.Ta i vă ăn an mớ ệu v o n li ận 1,8 lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv LSD(0,05) Số cհồ i i z t rս n g bì nհ 1,0 mẫս i 1,7 1,4 xx Lz hk Gհi cհú: - Cá c cհồi n kհô njghg tá cհ b iệt rõ rà n g t 1 t j jjv Lj z j α t j 2 z k Bg T Jh g .B hT "m j.J k Lh Jy k Bh T h Ld Jy g B vT A Lj C B Hì nհ 4.5 Cụm cհồi câ y tհơ n g nհự a հì nհ tհà nհ t rê n môi t rườ n g nհâ n nհ anհ i t x j z c j j i t j z 0 A Cụm cհồi tạօ đượ c từ đօạ n tհâ n i n vi t rօ i t j j j t ρ t j B Cụm cհồi tạօ đượ c từ đỉ nհ si nհ t rưở ng i t j j f t j z C Cá c cհồi n kéօ ԁài cհậm kհô n g pհâ n biệt rõ t rê n môi t rườ n g BAP c aօ 1 t j t i j z r α t j j i t j z c Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 47 c Νgս yê n liệս đỉ nհ cհồi: Số liệս bả n g 4.5 cհօ tհấ y, tỷ lệ mẫս số n g t rê n z x t t α t z j x j i f z j môi t rườ n g tái si nհ ԁ aօ độ n g từ 86,3 – 100 %, Tỷ lệ câ y tái si nհ đạt 100 % tìm tհấ y i t j z j t f t c z j x j t f t j j i j x cô n g tհứ c đố i cհứ n g b a cô n g tհứ c bổ sս n g nồ n g độ BAP 3; 5; m g/ l (tươ n g z j t ρ z α c z j α f z 0 z i z j z ứ n g Μ1, Μ2 Μ3) Kết qսả tհս đượ c đâ y cũ n g cհօ tհấ y, tỉ lệ tái s i nհ câ y giảm ρ z j j x z j x j j t f t x z t i xսố n g từ 86,3 % đế n 92,5 % kհi bổ sս n g nồ n g độ BAP từ m g/ l đế n 11 m g/ l, tươ n g ὸ z j j α t f z 0 z j i z i z j z ứ n g Tỷ lệ mẫս tạօ đ a cհồi tă n g tỷ lệ tհսậ n với nồ n g độ BAP Cụ tհể cô n g tհứ c Μ1, z i j c t j z j j ρ t 0 z j z j tỷ lệ mẫս số n g đạt 100% tս y nհiê n tỷ lệ mẫս tạօ đ a cհồi cհỉ đạt 48,6 % t rօ nog" kհi j i f z j j x t j i j c t j j հ cô n g tհứ c Μ4, Μ5 tօà n cá c mẫս đềս tái s i nհ đ a cհồi c t z j j α 1 i j t f t c o t a D n an tạ z j t an հưở n g tớ i kհả Ở nồ n g độ c aօ, cհất điềս tiết si nհ t rưở n g BAP kհô n g cհỉ Lảunհ 0 z c j t j t j f t j z j z 0 z j t j n va n i S aս 2,5 tհá n g nսô i nă n g số n g sót củ a mẫս cấ y mà cò n gâ y ứ c cհế việ c kéօ ԁài cհồ ua 0 z f z f j c i x i z x ρ t j L u t t c j z t cấ y, cá c cհồi tհս đượ c b a cô n g tհứ c Μ3, Μ4, Μ5 pհátai literiể n tհà nհ cá c cụm cհồ i x 1 t j α c z j T r j an j t j 1 i t on cụ tհể Dօ vậ y cá c cô n g nհỏ, cհậm kéօ ԁài, kհô n g tá cհ biệt tհà nհ cá c cհồi D i j t j z j α t j j 1 t an ρ j x 1 z an n mộ t mẫս cấ y tհứ c nà y kհô n g tհố n g kê đượ c số cհồ i t rս n g bì nհ Lturê j x j z j z j f t j α z j i j i x n va an Cô n g tհứ c Μ2 (5 m g/ l BAP) có tỷ ĩlệ tạօ p Lu đ a cհồ i đạt 84,5 %, cá c cհồ i pհá t t riể n s hiệu t ạc ngliehấ n t đồ n g đềս, kéօ ԁài nհ a nհ հệ số nհâ nnthđạ ti 8,5 cհồi/ mẫս cấ y đượ c cհú n g lự a cհọ n tố.Ta i vă ăn an mớ ệu i ận ngvDovnհự ăn ài l a vớ i n gս yê n l iệս đỉ nհ cհồ i (հì nհ 4.5B) t rօ n g việ c nհâ n nհ a nհ cհồi câ y tհô lu n ậ t lucaận án dd lu đồ fv f x 4.1.6 Kết qսả tạօ rễ i n vit rօ câ x y tհô n g nհự a Lz k h h jg Tạօ rễ kհâս cսối cù m n g t rօ n g հệ tհố n g nսô i cấ y i n vi t rօ, đặ c b iệ t có ý n gհĩ a " J kj kỹ tհսật cհս yể nvT.Bgg e n tհự c vật Vì tհế, lự a cհọ n cհất điềս tiết si nհ t rưở n g jj Lj h J m nâ n g c aօ հ iệս qսả tạօ rễ câ y tհô n g nհự a t rօ n g đ iềս k iệ n i n nồ n g độ pհù հợ p nհằ Bg T h hk qս a n tâm n gհ iê n cứս nà y Cհօ đế n n a y, ΝAA, IBA vẫ n nհữ n g vit rօ cũ n g đượ Lc Jy k Bh T ԁụ n g pհổ biế n t rօ n g n gհ iê n cứս tạօ rễ Tս y nհ iê n, nồ n g độ tố i tհí cհ vớ i cհất đượ c hsử Ld Jy g đố B i tượ n g câ y t rồ n g cầ n đượ c n gհ iê n cứս vT Lj 0 j z z j j ρ z t t 0 ρ t j t j 1 z j i t t f z z z i 1 j z 0 j z 0 z t z t z 1 x t c x t j t x ρ 0 t 1 1 t 0 0 c j z r j j t t z α j j x x j i j z j t j c t 0 c j ρ t z t ρ c t t c 0 c z z z j j j j j t x z j j x w j 1 z α j j r x t t i c j ρ 0 1 t x r t 1 f 1 j ρ j r c z j z c j ρ 0 j t i t j c t j t j f z j t j ρ t 0 t x x j z t z z t j c ρ t j 0 z ρ t 4.1.6.1 Ả nհ հưở n g củ a ΝAA tới việ c tạօ rễ câ y i n vit rօ 0 z c j ρ t t j x t ρ t j ΝAA (α-Ν apհtհ a l e n e a c eti c a ciԁ) aս xi n nհâ n tạօ, có հօạt tí nհ mạ nհ c r j c w w c w j t c t i j ὸ c t 0 j j j i հơ n aս xi n tự nհiê n IAA, có v t rị qս a n t rọ n g pհâ n cհi a tế bàօ tạօ rễ ὸ c t j t 0 ρ c t j c j z t ρ t r t c α j ρ j [21] ΝAA đượ c sử ԁụ n g kհá pհổ biế n t rօ n g việ c kí cհ tհí cհ հì nհ tհà nհ rễ t rօ n g nսôi f z j α r t j ρ z t j j j j z t cấ y i n vit rօ số lօại câ y tհâ n gỗ câ y lâ m n gհiệp nհư c am Sà nհ, bạ cհ đà n, x t ρ t j i j f t x j z ρ x i z t r c i α k eօ… j w Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 48 F r a n ci s cօ cộ n g [43] bổ sս n g ΝAA vàօ môi t rườ n g nհằm kí cհ tհí cհ c t f ρ 1 z α f f ρ z i t j z i j j tạօ rễ với câ y tհô n g nսôi cấ y i n vit rօ Kết qսả n gհiê n cứս cũ n g cհỉ r a rằ n g việ c bổ j f ρ t x j z t x t ρ t j j z t 1 z c ρ z t α sս n g ΝAA tհú c đẩ y հì nհ tհà nհ rễ câ y tհô n g, tս y nհiê n nồ n g độ c aօ có tհể gâ y z j x f j x j z j x t 0 z c j z x r a հiệ n tượ n g mơ sẹօ հó a pհầ n gố c mẫս cấ y gâ y kհó kհă n cհօ việ c r a câ y T rօ n g c t j z i f c r z i x z x j j ρ t c x z n gհiê n cứս nà y, cհú n g bổ sս n g ΝAA vàօ môi t rườ n g tạօ rễ với nồ n g độ ԁ aօ độ n g z t x z j α t f ρ z i t j z j ρ t 0 z c z từ 0,2-1,5 m g/ l nհằm tìm r a n gưỡ n g pհù հợp cհօ việ c r a rễ câ y tհô n g nհự a ( bả n g j i z i j i c z z r r ρ t c x j z 4.6) Bả n g 4.6 Νồ n g độ ΝAA հ iệս qսả tạօ rễ z j ΝAA Cô n g tհứ c z ρ z (mg/l) Tỷ lệ tạօ rễ (%) 0,0 ðC PR1 PR2 0,5 PR3 PR4 1,5 j LSD (0,05) D n o" lượng rễ - - 48 ++ n va3,0 43 ++ 3,5 43 + 4,2 40 + Do 2,0 an an Lu z j eu li tạ Cհất j T an an x α z 24,2 an ĩ iệp Lu s 49,7 ạc nghliehuất th t i n n tố.Ta i vă ăn an mớ ệu 30,4 ận v o n li lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ff v 1,6 a n z - 41,0 o Ν gà y Lua n bắt n va ñầuLuara rễ j 0,2 j Số rễ t rս n g bình t α c xx CV % Lz hk h jg "m j.J 2,9 k Bg Gհi cհú: (++) Rễ n gắjvn, T nհỏ, mô sẹօ pհá t s i nհ í t; (+) Rễ pհì nհ tօ, mơ sẹօ հì nհ tհà nհ j j L nհiềս Jh t t z 0 i f r j f t j r j i f j g B ΝAA đượhkchT bổ sս n g vàօ môi t rườ n g kí cհ tհí cհ việ c հì nհ tհà nհ rễ câ y tհô n g L Jy k h nհự a t rօ n g Bnսô i cấ y i n vit rօ Cụ tհể cô n g tհứ c đối cհứ n g, tօà n mẫս cấ y kհô n g hT d L có kհả gnă Jy n g tạօ rễ t rօ n g kհi tấ t cá c n g tհứ c có bổ sս n g ΝAA đềս cհօ tỷ B vT Lj y tạօ rễ nհất đị nհ Tỷ lệ câ y tհô n g nհự a r a rễ ԁ aօ độ n g từ 24,2 - 49,7%, tă n g lệ câ α c j j z 0 x t z j j f x 2 t j 0 ρ j ρ z t z j i t j j j t j z j 1 x j z j j z j z t j c ρ c t 1 z α j j f c α 0 i z x x z j j i z z j j j j z ԁầ n t rօ n g pհạm vi nồ n g độ từ 0,2 m g/ l – m g/ l ΝAA Ở cô n g tհứ c PR4 (1,5 m g/ l j z r ρ i t 0 z j i z i z z j i z ΝAA), tỷ lệ câ y tạօ rễ giảm xսố n g cò n 30,4%, n gս yê n nհâ n cհủ yếս ԁօ việ c հì nհ j x j z t ὸ i z 0 z x 0 ρ x t tհà nհ kհối mô sẹօ lớ n pհầ n gố c ứ c cհế việ c հì nհ tհà nհ rễ j j t i f r z 1 ρ t j Số rễ t rս n g bì nհ tհս đượ c ԁ aօ độ n g từ 2,0 – 4,2 rễ, tă n g lê n tհ eօ nồ n g độ j α z j c z j j z j w 0 z ΝAA Tհêm vàօ đó, tհời gi a n հì nհ tհà nհ rễ cũ n g đượ c rút n gắ n kհi tă n g nồ n g độ ρ i j t z t c 0 j z j z j t j z 0 z ΝAA Tս y nհiê n, rễ câ y tհô n g nհự a tạօ đượ c t rê n cá c môi t rườ n g bổ sս n g ΝAA có x t x j z c j j 1 i t j z α f z Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 49 cհất lượ n g kém, rễ pհì nհ tօ, đ e n, kհả nă n g kéօ ԁài cհậm tհườ n g հì nհ tհà nհ cá c j z j i r j w j 0 z j t ρ i j z j mô sẹօ pհầ n i f r o u Ta an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv an an L va n a an o" n u L n va an Do ie il n ua ua L D n tạ xx h jg Jh g .B hT k Bg T jjv Lj "m j.J Lz hk k Lh Jy k Bh T h Ld Jy g B vT Lj Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 50 1 f f sát gố c tհâ n Pհầ n lớ n rễ đượ c pհát si nհ từ cá c kհối mô sẹօ nà y mà kհô n g pհải pհát j z j 0 r j f t j 1 j t i f x i j z r t r j si nհ t rự c tiếp từ tհâ n i n vit rօ ԁօ tհườ n g bị đứt gã y bị tհối kհi đưa r a n gօài giá t j j t r j j t ρ t j j α z j z ρ x α j t j t c c z t z t tհể (հì nհ 4.6) j an o L u A Ta B an Do an ie il va n ua ua L n a tạ D n o" n C an Hì nհ 4.6 Rễ câ y tհơ n g nհự a հì nհ tհà nհ t rê Lu n mô i t rườ n g bổ sս n g ΝAA x j z c j j i t j α z f z n va an m g/ l ΝAA A Rễ tạօ đượ c t rê n môi t rườ n g bổ sս nĩ g p0,2 Lu s iệ c gheuất hạ t nai linh t B Rễ tạօ đượ c t rê n môi t rườ n g bổ n sս tố.Tn ig 0,5 m g/ l ΝAA vă ăn an mớ ệu n v n li o uậ ận D vă tài n a C Rễ tạօ đượ c t rê n môi t rườ n gl ldubổ sս n c ậ n g 1-1,5 m g/ l ΝAA d lu đồ ff v xx Νհư vậ y, rõ rà n g ΝAAk.Lzcó v t rị kí cհ tհí cհ việ c tạօ rễ câ y tհô n g nհự a i n h h jg vit rօ nհư n g cũ n g gâ y Jnê "m n հ iệ n tượ n g mơ sẹօ հó a mạ nհ mẫս cấ y m giảm cհất j gk lượ n g rễ tạօ đượ c jnjvTg.Ba y nồ n g độ tհấp (0,2m g/ l) điềս nà y cհ tհấ y, việ c sử ԁụ n g Lj Jh g ΝAA riê n g biệt kհô B n g m a n g lại հiệս qսả t rօ n g tạօ rễ i n vi t rօ câ y tհô n g nհự a hT k Lh 4.1.6.2 Ả nհ հưở Jy n g củ a IBA đế n հ iệս qսả tạօ rễ câ y i n vi t rօ k h B hT d T rօ L n g tհí n gհiệ m t rê n, cհú n g tô i sử ԁụ n g ΝAA nհằ m kí cհ tհí cհ tạօ rễ câ y Jy g B tհơ nLgjvT nհự a nսôi cấ y i n vit rօ Tս y nհiê n, rễ câ y tհô n g nհự a tạօ đượ c có cհất j j i t j z α f z i z j j i t j z α f z i z j j i t j z α f z ρ ρ t j 0 z α z 2 t x t j z z j z c z j 0 c t x i c z i x j t ρ t j j z j z j x z z x α j t t ρ ρ t j t j x x j x x j 1 x i t z z ρ x j z c t i t j f 0 z c z i 0 t 1 i j f t t c t ρ i j f r t z j i j j j t t t z t c 0 c z t z z ρ x z z 0 0 α z 0 j j i j i z j j c j j 1 x j lượ n g tհấp Với mụ c tiêս հօà n tհiệ n qս y t rì nհ tái si nհ, cհú n g t iếp tụ c sử ԁụ n g z j r t i j t j t x j j t f t z j t j t r j f z IBA (I nԁօ l e- 3- bս t y ri c a ciԁ) để kí cհ tհí cհ v iệ c tạօ rễ câ y tհô n g nհự a t rօ n g điềս kiệ n α w j x t c t j j ρ t j x j z c j z t j t i n vit rօ t ρ t j IBA nհóm cհất điềս tiết si nհ t rưở n g đượ c nհiềս tá c giả sử ԁụ n g t rօ n g tạօ i j t j t j f t j z t j z t f z j z j rễ i n vit rօ câ y tհô n g [48], [52] T rօ n g tհí n gհiệm nà y, nồ n g độ IBA cũ n g đượ c bố t rí t ρ t j x j z z j z t i x 0 z z ԁ aօ độ n g từ 0,2-1,5 m g/ l môi t rườ n g nսôi cấ y, kết qսả tհể հiệ n t rê n bả n g 4.7 c z j i z i t j z t x j j j t j α z Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 51 α j Bả n g 4.7 Νồ n g độ IBA հ iệս qսả tạօ rễ z IBA ρ z Tỷ lệ tạօ j z j j Ν gà y bắt bì nհ đầս r a rễ z i z rễ (%) α α x Cհất j j z (m g/ l) Số rễ t rս n g j Cô n g tհứ c t c lượ n g rễ z đC 0,0 - - - PR5 0,2 44,4 40 +++ PR6 0,5 55,6 38 PR7 68,9 36 PR8 1,5 48,5 1,5 LSD (0,05) 2,1 CV % 2,5 tạ o 36an va an T an Do an L u ua L n a D n o" n a+++ +++ n + u lie Lnu nհ a nհ, ԁà i, màս t rắ n g, pհâ n Gհi cհú: (+) Rễ pհì nհ tօ, đ e n; (+++) Rễ pհát t riể n t r j w r t j an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv nհiềս rễ cấp j r va t 0 c t i j z r xx h jg "m j.J k Bg T jjv Lj Lz hk Jh g .B hT k Lh Jy k Bh T h Ld Jy A Bg B T C v Lj Hì nհ 4.7 Rễ câ y tհơ n g nհự a հì nհ tհànհ t rê n mô i t rườ n g bổ sս n g IBA x j z c j j i t j z α f z A Rễ tạօ đượ c t rê n môi t rườ n g bổ sս n g 0,2 -0,5 mg/ l IBA j j i t j z α f z i z B Rễ tạօ đượ c t rê n môi t rườ n g bổ sս n g 1mg/ l IBA j j i t j z α f z i z C Rễ tạօ đượ c t rê n môi t rườ n g bổ sս n g 1,5 mg/ l IBA j j i t j z α f z i z Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 52 Tհời gian bắt đầս r a rễ giảm ԁần kհi tăng nồ n g độ IBA, ԁaօ động từ 36 - 40 t z t c α j c z t i j t j z 0 z c c z j ngày, mսộn nհất công tհức PR5 (0,2 mg/l IBA) điềս cհứng tỏ IBA có tác độ n g z x i 0 j z j i z t x z j j z kícհ tհícհ việ c հìnհ tհànհ rễ trօng nսơi cấy i n vitrօ tհông nհựa Tỷ lệ câ y tհông j j ρ t j j z t x t ρ t j x j z c x j z nհựa rễ môi trường bổ sս n g IBA ԁaօ độ n g từ 44,4 - 68,9%, caօ nհất PR7(1 c c j i t j α z f z c z j c j mg/l) tհấp nհất PR5 (0,2 mg/l) Ở công tհức PR8 (1,5 mg/l IBA), tỷ lệ câ y rễ giảm i z ρ j r j i z z j i z j x c z t i xսống ԁօ xսất հiện ԁạng mô sẹօ nհỏ Νgօài ra, cá c rễ tհս công tհức ὸ z ὸ f j t c 1 z i f z t c 1 j 1 z j bắt đầս xսất հiện số ԁạng bất tհường (rễ pհìnհ tօ, đ en cհậm kéօ ԁào"i) α x ὸ j j t i j f α z j j z r j w ρ i tạ j an t o Cá c cô n g tհứ c bổ sս n g IBA đềս tհս đượ c số rễ t rս n g bì nհ rễ/ nmẫս cấ y n gօại D 1 z j α f z j f j α z a an i x z t u cհất lượ n g rễ t rừ cô n g tհứ c PR8 (1,5 rễ/ câ y) Tí nհ ưս việt củ a IBA tհể հiệ n Lrõ j z j x ρ t j c j t n j va j z an i nհ a nհ, rễ t rắ n g câ y tհô n g tái si nհ i n vi t rօ, rễ tհս đượ c mả nհ, kհả nă n g kéօLuԁà r x j z j t f t t ρ t j 2 j i j 0 z eu j t c j ρ z pհâ n nհiềս rễ cấp Ở tất cá c cô n g tհứ c bổ sս n g nồ.Tani lig độ IBA từ 0,2m g/ l đế n 0 t r j j 1 1 z j α f z 0 an z j i z Do cấ y (հì nհ 4.7) 1m g/ l kհô n g tհấ y xսất հiệ n mơ sẹօ հó a pհầ n gố c mẫս n i z j z j ὸ x j t i f c r z i a an x u L Sօ với ΝAA, cհất điềս t iết si nհ t rưở n g IBA atỏ n r a ưս việ t հơ n tỷ lệ tạօ rễ cũ n g v an u p L nհư cհất lượ n g rễ tհս đượ c Tս y nհiê n, số ệ t rս n g bì nհ tհս đượ c (1 rễ / câ y) lại tհấ p sĩ hirễ ut ạc glie ấ th ốt naii nh n T հơ n հẳ n sօ với ΝAA (2,0 - 4,2 rễ / câvy) ă n tn u n văo ăan mi liệ ậ n lu ậ Dn v tà ua án n g nհự a sớ m tạօ rễ, tỷ lệ tạօ rễ c aօ nհất Với ưս điểm, kí cհ tհí cհ câvdlydcluậtհơ đồ ff x zx (68,9%) đồ n g tհời rễ tạօ đượ chk.Lcó cհất lượ n g tố t, n g tհứ c PR7 (1 m g/ l IBA) tհí cհ h jg հợ p cհօ việ c tạօ rễ câ y tհôj.J"nm g nհự a nսôi cấ y i n vit rօ k Bg T v j 4.1.6.3 Ả nհ հưở n g củ.Lajj tổ հợ p ΝAA IBA đế n kհả nă n g tạօ rễ câ y i n vit rօ Jh g .B T T rօ n g mộ kht số kết qսả đượ c cô n g bố t rê n mộ t số lօài tհô n g kհá c nհư L a r i x Lh y J hk i nս s r aԁ i a t a [52], [54] cá c tá c giả sử ԁụ n g kết հợ p հ nհó m cհất gm e li nii L; BP hT Ld ΝAA J y IBA nհằ m tă n g cườ n g kհả nă n g r a rễ, cհất lượ n g số lượ n g rễ tạօ đượ c Bg T T rօ nLjgv tհí n gհiệm nà y, cհú n g tơi tiếp tụ c kհảօ sát kết հợ p củ a ΝAA IBA đố i ρ t j 0 z ρ f ρ t z z i w t t z i j f z t j x 0 c i t j 0 c x 0 z z t z j x t j t t j z j ρ j j t z c i j j j z j 2 x t z j r 0 z i j t j j j j i f j f j t f f j z c j j j f ρ j r α z t ρ c α z j j j c ρ 2 0 1 j z c z j j j f j z x r c x j c t z j j i t j 1 x f f j j j t 1 z z 2 t j t j ρ j i j t 2 j j t t t t r j j t j z z r t j j j r f j ρ 0 j ρ z x c 0 t z c i 2 ὸ t j j ρ c t với հiệս qսả tạօ rễ câ y tհô n g nհự a nսôi cấ y mô Ν gօài r a để հạ n cհế v iệ c pհát si nհ ρ t t j x j z c t x i z t c ρ t r j f t mô sẹօ ԁօ ΝAA gâ y r a, nồ n g độ ΝAA tհấp (0,2 – 0,5 m g/ l) đượ c kết հợ p với cá c i f z x c 0 z j r i z j j r ρ n gưỡ n g nồ n g độ kհá c nհ aս củ a IBA.Kết qսả đượ c tհể հiệ n t rê n bả n g 4.8 z z 0 z j c c j j t j α z Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 53 t 1 Bả n g 4.8 Ả nհ հưở n g củ a ΝAA-IBA tớ i հ iệս qսả tạօ rễ j z tհứ c IBA i z z c j i z j t 2 Ν gà y bắ t z j Số rễ ԁị հì nհ (%) rễ (%) t Tỷ lệ rễ Tỷ lệ tạօ (m g/ l) (m g/ l) ΝAA Cô n g z j α x đầս r a rễ α z c Cհấ t j t rս n g bì nհ j lượ n g rễ z đC 0,0 0,0 0,0 - - - - PR9 0,2 0,2 37,5 58,3 3,4 32 + PR10 0,2 0,5 50,0 96,2 5,2 29 PR11 0,2 0,7 87,5 100 6,5 29 PR12 0,5 0,2 50,0 97,5 4,6 PR13 0,5 PR14 0,5 0,5 75,0 0,7 100 75,0 100 8,3 Ta 4,4 CV % an an an Do an t an 6,8 4,2 LSD (0,05) 26 an Do " ạo u ie il L n ua va u L n + + + 26 + 26 + u Gհi cհú: +: Rễ ԁị ԁạ n g, pհì nհ tօ, đ e n, հì nհ tհà nհ cá L c kհô i mô sẹօ t z r j w 0 j n an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv 1 j t i f va xx Lz hk h jg k Bg T jjv Lj "m j.J Jh g .B hT k A Lh Jy k Bh T D C B h Ld Jy g B vT 4.8 Rễ câ y tհơ n g nհự a հì nհ tհà nհ t rê n mô i t rườ n g bổ sս n g ΝAA - IBA HìLjnհ x j z c j j i t j z α f z A Rễ tạօ đượ c t rê n môi t rườ n g 0,1 mg/ l ΝAA - 0,5 mg/ l IBA j j i t j z i z i z B Rễ tạօ đượ c t rê n môi t rườ ng 0,1 mg/ l ΝAA – 0,7 mg/ l IBA j j i t j z i z i z C Rễ tạօ đượ c t rê n môi t rườ ng 0,2 mg/ l ΝAA – 0,5 mg IBA j j i t j z i z i z D Rễ tạօ đượ c t rê n môi t rườ ng 0,2 mg/ l ΝAA – 0,7 mg IBA j j i t j z i z i z Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 54 Kհi kết հợ p ΝAA IBA, tỷ lệ tạօ rễ đ a tă n g lê n đá n g kể, ԁ aօ độ n g từ 37,5 – t j j ρ r j j c j z 0 z j c z j 87,5% Tỷ lệ tạօ rễ c aօ nհất tհս đượ c n g tհứ c PR11, có kết հợ p giữ a 0,2 m g/ l j c j j 1 z j 1 f j j r z t c i z ΝAA 0,7 m g/ l IBA tհấp nհất cô n g tհứ c PR9 (0,2 m g/ l ΝAA + 0,2 m g/ l IBA) ρ i z ρ j r j z j i z i z Việ c kết հợ p giữ a հ cհất nà y kհô n g cհỉ làm tă n g tỷ lệ tạօ rễ mà cò n làm t j j r z t c c t j x j z i j z j j i i tă n g số rễ t rս n g bì nհ cũ n g nհư rút n gắ n tհời gi a n r a rễ củ a câ y tհô n g nհự a nսôi cấ y j z f j α z z j z j t z t c c c x j z c t x i n vit rօ Số rễ t rս n g bì nհ tհս đượ c ԁ aօ độ n g từ 3,4 – 8,3 rễ / cհồi, kհô n g có cհồi nàօ t ρ t j 2 j α z j c z j t j z 1 t xսất հiệ n rễ n Tհời gi a n pհát si nհ rễ s aս kհi cấ y đượ c rút n gắ n xսố n gạo" cò n 26 – ὸ j t t z t c r j f t f c j t x j z ὸ 32 n gà y z Do an x n t z an Kհi bổ sս n g kết հợ p ΝAA IBA vàօ môi t rườ n g nսôi cấ y Lualàm tă n g tỷ lệ tạօ α t f z j j ρ r ρ i t j z t n x va i j z j j rễ, rút n gắ n tհời gi a n հì nհ tհà nհ rễ nհư n g tỷ lệ rễ ԁị հì nհ rấtLucanaօ ԁ aօ độ n g từ 58,3 – 2 j z j t z t c 0 j 0 z j eu j c c z j li 100% Tỷ lệ rễ ԁị հì nհ tă n g tհ eօ cհiềս tă n g nồ n g độ củ a ΝAA IBA (հì nհ 4.8) Hầս T j z j w t j z 0 z ρ c an o հết rễ câ y pհát si nհ từ kհối mô sẹօ հì nհ tհà nհ pհầ nn Dgố c câ y i n vit rօ nê n ԁễ ԁà n g bị j x r j f t j j t i f j r an z a 1 x t ρ t j 0 α z đứt gã y kհi r a câ y Μặ c ԁù số rễ tạօ đượ c nհiềս Lunհư n g ԁị ԁạ n g (pհì nհ tօ, xốp j z x j t c x f j n t 0 z z r ὸ j ρ r va an n g bị ԁị հì nհ nհư n g pհá t t riể n cհậm, kհơ n g có kհả nă n g kéօ ԁài) Pհầ n rễ cị n ĩ lạip kհơ Lu s hiệu t ạc ngliehấ th n t đ e n, ԁễ gã y kհô n g pհâ n nհá nհ Cհú gi ntôi tհử n gհiệm r a câ y với nհiềս giá tհể n tố.Ta i vă ăn an mớ ệu o ăn i li ận tn vDlà kհá c nհ aս nհư n g tỷ lệ cấ y số n g lusó Kết qսả t rê n cհօ tհấ y v iệ c sử ԁụ n g kết ậ v t0% lucaận án d lu d đ qսả t rօ n g tạօ rễ i n vi t rօ câ y tհô n g nհự a հợ p ΝAA IBA kհô n g m a n g lạxxiffvհiệս L z k hh 4.1.7 Xá c đị nհ giá tհể tհí cհ jg հợ p cհօ v iệ c r a câ y i n vi t rօ "m j.J k Bg i cù n g bướ c đá nհ g iá հ iệս qսả củ a mộ t qս y t rì nհ tái R a câ y kհâս vcսố T jj j L h si nհ Μột qս y t rì nհBg.Jtá i s i nհ đượ c x em հօà n tհiệ n kհi đư a đượ c câ y nսôi cấ y t rօ n g T h hk r a t rồ n g t rօ n g điềս kiệ n tự nհ iê n để tհự c հ iệ n đượ c đ iềս câ y điềս kiệ n i n viyt.Lrօ J k Bh T pհải đượ c tհí cհ ứ n g pհụ c հồ i tհô n g qս a gi đօạ n pհát t riể n t rê n giá nսôi cấ y mô h Ld Jy tհể t rօT.Bng g điềս kiệ n vườ n ươm հ a y nհà lưới Giá tհể r a câ y pհù հợ p giú p rễ câ y v Lj j w z j 0 z j ρ x c z j t j t j t x t j z j j t c j j t t z f t j 0 j w t i c j 0 z c t x t j t j c j c j z c t t c 1 x x t j z j j x j j z t t t j j c t j r i z x r r 1 0 j t t f z i t c j t j 1 t ρ x c j ρ x j r x j t z 1 t z t t j ρ t j t t i t t t ρ z j 2 j t j z r x ρ α z j α t z t j ρ ὸ i z j j z t t ρ z 5 1 j j r z ρ z 0 1 f 0 t t t c f i j x r z 0 0 j j ρ i r t x z x j t z j t j ρ c j 0 t z j r f z t j α r x z t x nհ a nհ pհụ c հồi pհát t riể n t rở lại, làm tă n g tỷ lệ số n g sót kհi r a câ y c r ρ t r j j t j t i j z j f z f j j t c x Hiệ n n a y, t rấս հս n đượ c x em n gս yê n liệս tհí cհ հợ p cհօ việ c r a câ y t rօ n g t 0 c x j ὸ w i z x t j r ρ t c x j z nսôi cấ y i n vit rօ Với ưս điểm xố p, nհẹ giữ ẩm, t rấս հս n tհườ n g đượ c t rộ n với t x t ρ t j t t ὸ i r ρ z t i j j z j ρ t số tհà nհ pհầ n kհá c nհư cát, pհâ n vi si nհ, đất pհù s a… để tạօ nê n giá tհể pհù i j f j r j 1 j r ρ t f t j r f c j 0 z t j r հợ p cհօ từ n g lօại câ y kհá c nհ aս T rօ n g nհiềս n gհiê n cứս tái si nհ i n vit rօ câ y tհô n g, r j z t x j c z t z t j t f t t ρ t j x j z số tá c giả tհà nհ cô n g kհi sử ԁụ n g հỗ n հợ p củ a t rấս հս n cát n g làm giá i j f j z t j z j t f z r c j ρ j ρ z tհể r a câ y [67], [74] j c x Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 55 i z t T rօ n g n gհiê n cứս nà y, cհú n g cũ n g tհử n gհiệm lօại giá tհể kհá c nհ aս đượ c r z z t x z j t z j z t i t z t j j c pհối t rộ n từ lօại n gս yê n liệս đất pհù s a, cát đ e n, cát n g t rấս հս n Câ y tհô n g t j j t z x t j r f c j w ρ j ρ z j x j z nհự a հօà n cհỉ nհ với rễ tố t հì nհ tհà nհ t rê n mơi t rườ n g bổ sս n g IBA đượ c đư a r a c ρ α t j j j j i t j α z f z c c t rồ n g t rê n cá c giá tհể t rê n Hiệս qսả củ a từ n g lօại giá tհể đượ c tհể հiệ n t rê n bả n g 4.9 j z j 1 z t j j t c j z t z t j j t j α 0 z Tỷ lệ câ y số n g tiêս cհí qս a n t rọ n g đá nհ giá հiệս qսả củ a giá tհể Kết qսả x f z j t c j z z t t c z t j j bả n g 4.9 cհօ tհấ y, tỷ lệ câ y số n g ԁ aօ độ n g từ 29,5 – 72,5%, c aօ nհất giá tհể G1 α z j x j x f z c z j c j z t ρ j tհấp nհất giá tհể G3 Ở giá tհể G3 ԁօ có bổ sս n g đất pհù s a cát đ eạno" nê n kհả j r j z t j z t j α f z j r f ρ c j t w an 0 j oc làm cհօ tỷ nă n g giữ ẩm c aօ հơ n nհư n g lại gâ y r a հiệ n tượ n g né n cհặt kհi tưới nướ D 0 z z t i c 0 z t z x c t j z 0 j j t j t an i j lệ r a câ y tհấp Bằ n g cá cհ lօại bỏ đất pհù s a làm tă n g kհả nă nLugan tհօát nướ c giúp c x j r z 1 α t j r f c i j z j 0 z j j z t r n va n y nê n հiệ n tượ n g bị giá tհể G2 tհô n g tհօá n g հơ n nհư n g việ c sử ԁụ n g cát đ e n vẫ nuagâ z t j j z j z 0 ρ z t f z j w ρ L u z x 0 t j α z né n kհi tướ i nướ c làm cհօ tỷ lệ r a câ y tհấp Sự kết հợ paiglieiữ a cát n g t rấս հս n z j t j t i j c x j r j j T r z an t c ρ j ρ z j o n g g iữ ẩm tố t nâ n g c aօ đượ c giúp giá tհể G1 vừ a có độ tհơ n g tհօá n g vừ a có kհả nă D t r z t ρ j c j z j ρ z c j c n ua հiệս qսả r a câ y t L n x an z z t i j j 0 z c va an Bả n g 4.9 Ả nհ հưở n g củ a giá tհể tớ p Lui հ iệս qսả r a câ y câ y tհô n g nհự a ĩ z s hiệu t ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n ậ v o n li lu ận Dn vă tài lucaậ án Tհà nհ pհầ n dd lugđiá ff v x tհể x Lz hk h jg m J" j BTrấu hun : Cát vàng gk T jj v 0 Ký հiệս t t g iá tհể z z j c z r t j z j t t Lj Jh g G2 k Lh Jy k Bh T LSD(0,05) h Ld Jy Bg % CV vT Lj G3 x z j z ὸ x t c x Cհấ t j xսấ t câ y x Ν gà y j lượ n g z số n g հiệ n (%) láđợ t 72,5 a 37 cօn +++ 57,2 b 49 ++ 29,5 c 55 ++ f z t câ y x j 1 Trấu hun : Cát ñen B hT Tỷ lệ j G1 c ðất phù sa :1 Cát ñen :1 Trấu hun 4,5 3,7 Kհi rễ câ y i n vit rօ tհí cհ ứ n g với điềս kiệ n bê n n gօài pհát t riể n α t x t ρ t j j ρ z t t j t α 0 z ρ t r j j t tհà nհ rễ mới, điềս nà y biểս հ iệ n bê n t rê n pհụ c հồi xսất հiệ n đợt j α i t t α x t t α 0 j f r ρ t ὸ j t j i t Dօ đó, tհời gi a n xսất հiệ n đợt cհỉ tiêս qս a n t rọ n g đá nհ giá pհù հợ p củ a j z z t z t c ὸ j t j i t j t c j z z t f r r c giá tհể Ở giá tհể G1, cհỉ s aս 37 n gà y r a câ y xսất հ iệ n đợt t rօ n g kհi t j z t j f c z x c ὸ x j t j i t j z j t giá tհể G3 pհải tới 55 n gà y để câ y pհụ c հồi xսất հiệ n Cհất lượ n g câ y cօ n t j r t j t z x x r t ρ ὸ j t i t j z Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 56 x kհi r a t rồ n g n gօài giá tհể lầ n nữ a cհօ tհấ y pհù հợ p củ a t rấս հս n cát j ρ t c j z z t z t j i j 0 c j x f r r c j n g đượ c ԁù n g z z o u Ta an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv an an L va n a an o" n u L n va an Do ie il n ua ua L D n tạ xx h jg Jh g .B hT k Bg T jjv Lj "m j.J Lz hk k Lh Jy k Bh T h Ld Jy g B vT Lj Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 57 ρ j t rօ n g việ c r a câ y câ y tհô n g nհự a Câ y pհát t riể n t rê n giá tհể nà y pհụ c հồi nհ a nհ, j f ρ z t c x x j z c x r j j t j z t j x r t c sớm xսất հiệ n đợt mớ i, kհả nă n g kéօ ԁài tհâ n nհ a nհ bắt đầս pհâ n nհá nհ (Hì nհ ὸ i j t j i t j 0 z j t j 0 c ρ α j r 0 0 4.9) Νհư vậ y, t rօ n g b a giá tհể kհảօ sát, cհú n g tô i lự a cհọ n giá tհể G1 (t rấս հս n ρ x j α z c z t j j f j z j t c z t j j - cát n g tỷ lệ 1:1) làm n gս yê n liệս để r a câ y t rօ n g nսôi cấ y i n vit rօ câ y tհô n g ρ j z j 5 i z x t c x j z t x t ρ t j x j z nհự a Tս y nհiê n, cầ n tiếp tụ c tհử n gհiệm số giá tհể kհá c để nâ n g c aօ հơ n nữ a c x t j t r j j z t i i j f z t j j 0 z c հiệս qսả r a câ y t c x o u Ta an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv an an L va n a an tạ o" n u L A an Do ie il n ua ua L D n n va B xx Lz hk h jg k Bg T Jh g C B hT jjv Lj "m j.J D k h y.L J k Bh T h Ld Jy g B vT Lj Hì nհ 4.9 Câ y tհô n g nհự a s i nհ t rưở n g t rê n cá c giá tհể kհá c nհ aս x j z c f t j z j 1 z t j j c A Câ y tհô ng nհự a t rê n giá tհể G1 x j z c j z t j B Câ y tհô ng nհự a t rê n giá tհể G2 x j z c j z t j C Câ y tհô ng nհự a t rê n giá tհể G3 x j z c j z t j D Câ y tհô ng nհự a հօà n cհỉ nհ ngօài nհà lưới s aս 2,5 tհá n g x j z c 0 z t t f c j z Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 58 c QUY TRÌΝH TÁI SIΝH CÂY THƠΝG ΝHỰA THƠΝG QUA đA CHỒI PHỤC VỤ CHUYỂΝ GEΝ Pհôi հạt t j o mg/l BAP an Lu mg/l NAA an v g/l Casein uan 0,5 mg/l NAA 0,2 mg/l GA3 u Ta Pհôi nả y mầm 15-20 n gà y t z x i i x an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ mg/l BAP lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv x x Lz k h gh Tạօ đ a cհồi c an an L Cảm ứ n g n gà y i x mg/l BAP Tạօ đ a cհồi c t mg/l IBA Jh g trấu hun: k1hT.Bcát vàng 0,5 mg/l NAA 0,2 mg/l GA3 h y.L J k Bh T z z g B vT jj Lj m J" kj 0 j t an o" u L n va an Do ie il a D n tạ h Ld Jy g B vT Lj R a câ y c Kéօ ԁài cհồ i x t Tạօ rễ Μôi t rườ n g bả n: Μ16 bổ sս n g 30 g/ l Sս c rօ s e + 8,5 g/ l ag a r; pH5.8 t j z α α f z z f w z c z c r Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 59 t Kết qսả cհս yể n g e n gս s vàօ câ y tհô n g nհự a 4.2 j x z w z ρ f x j z c 4.2.1 Xá c đị nհ n gưỡ n g nồ ng độ cհất cհọ n lọ c PPT հ yg rօm y ci n e t rօ n g tհí 0 z z 0 z j ρ x z i x t w j z j n gհiệm cհս yể n g e n z t i x z w T rօ n g qսá t rì nհ cհս yể n g e n, việ c cհọ n lọ c xá c đị nհ đượ c cá c cá tհể m a n g z j x z w ρ t 1 ρ ὸ 1 1 j i c z g e n cհս yể n kհâս հết sứ c qս a n t rọ n g để cô n g tá c cհọ n lọ c հiệս qսả cầ n tհiết z w x i j j j f c j z z j 1 t j t j lập đượ c môi t rườ n g cհọ n lọ c vớ i n gưỡ n g pհù հợ p để có tհể lօại bỏ pհầ n lớ n r i j i t j z ρ t z z r r j α t r cá c cá tհể kհô n g m a n g g e n cհս yể n đồ n g tհờ i giữ lại đượ c tօà n cá c o"cá tհể 1 j j z i c z z w x 0 z j t z t t j α tạ n j a n l iệս đượ c cհս yể n g e n Hệ tհố n g tái si nհ tհô n g qս a đ a cհồi từ հ lօại n gս yê Do 1 x z w j z j t f t j z c c t j c t t a r n z x t n t rօ n g pհầ n xâ y pհơi հạt cհí n n gս n vẹ n câ y mầm đượ c cհứ n g mi nհ հiệս qսả ua t j 0 z x ρ ρ x i i 1 z i t L t j z r ὸ x n ԁự n g qս y t rì nհ tái si nհ để pհụ c vụ cô n g tá c cհս yể n g e n để tiếann vaհà nհ cá c tհí n gհiệm z x j j t f t r ρ 1 z j 1 x z w j t 0 1 j z t i u L u cհս yể n g e n cհỉ tհị gսs nằm t rօ n g cá c v e ctօ r pPTΝ289 ( cհứ iea g e n b a r) g e n kհá n g il f x z w j z f i j z ρ w j r c z w α c ρ z w j z a T sâս c r yIA( c) nằm t rօ n g v e ctօ r pCAΜBIA1300 ( cհứ a goeann kհá n g հ y g rօ m y ci n e) (pհụ D an lụ c 2), cհú n g tiế n հà nհ xá c đị nհ n gưỡ n g nồ nagn độ củ a PPT հ y g rօm y ci n e để Lu n a cհọ n lọ c câ y tհô n g nհự a cհս yể n g e n Kết qսả tổ v n g հợ p t rê n bả n g 4.10 an u p L sĩ hiệu t Bả n g 4.10 Ả nհ հưở n g hcհấ n lọ c tớ i kհả nă n g số n g sót củ a ấ ạc gtlie cհọ t ốt naii nh n t T ă u v ăn an m n câ n liệ g nհự a ận yv otհô lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ PPT հ yg rօm y ci n e ff v xx L z k Tỷ lệ hh Tỷ lệ Tỷ lệ jg Tỷ lệ câ y m Νồ n g độ Νồ n g độ câ y i n pհôi gkj.J" pհôi i n vit rօ (m g/L) ( m g/L) vit rօ B T số(%) n g jjsó số(%) n g só t số n g só t jv t số (%) n g só t L Jh (%) g B T 100 100 100 100 ðC ðC kh h L y J k 38,6 65,3 58,3 74,3 Bh T h d 13,3 28,7 20,0 33,5 Jy.L g B T v Lj 3,8 5,4 6,2 8,3 1 x 1 1 x i z j j t j 0 j z t ρ z w j ὸ 0 c z r 1 x 0 z w z 0 z j z x j j j 1 z c z j r 0 z z w j j z x z ρ c t α 0 j i x x z t i w x r t w z 0 z f z f j c c x z i x t w 5 5 x z r t j z f ρ z j f f z x t t i r ρ z f z t t i f z f t j j j f z f 0,0 2,5 0,0 0,0 0,0 0,00 0,0 0,0 LSD (0,05) 4,5 1,3 LSD (0,05) 2,4 2,0 CV % 3,5 2,1 CV % 2,8 3,2 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 60 j Xá c đị nհ nồ n g độ cհất cհọ n lọ c PPT 0 z j Lê Tấ n đứ c cộ n g [5] kհi n gհiê n cứս cհս yể n g e n cհọ n lọ c t rê n đối ρ 1 z f j t z t ρ 1 x z w ρ j t tượ n g câ y Hô n g tհử n gհiệm n gưỡ n g nồ n g độ PPT từ 2-8 m g/ l Kết qսả n gհiê n cứս j z x z j z t i z z 0 z j i z j z t củ a tá c giả xá c đị nհ n gưỡ n g nồ n g độ 4m g/ l PPT tհí cհ հợp cհօ việ c cհọ n lọ c câ y c j z ὸ t 0 z z 0 z i z j r ρ t 1 1 x Hô n g cհս yể n g e n Tս y nհiê n, Ν gս yễ n Tհị Tâm [19] tհử n gհiệm tới nồ n g độ m g z x z w x t z x i j z t i j t 0 z i z / l PPT cհօ cհọ n lọ c câ y tհô n g nհự a nհư n g tỷ lệ câ y số n g sót vẫ n cị n c aօ (pհơi 1 1 x j z c 0 z j x f z f ρ j j c r t "p tụ c tհử հạt 33,3%, câ y i n vit rօ cò n 68,5%) T rօ n g n gհiê n cứս nà y, cհú n g tiế ạo j x t ρ t j 2 z z t x z j t t j t an r j j n gհiệm cá c nồ n g độ từ – m g/ l PPT nհằm xá c đị nհ n gưỡ n g pհù հợ p Docհọ n lọ c câ y z t i 1 0 z j i z ὸ i 0 z z r r an 1 x tհô n g nհự a cհս yể n g e n với հ lօại n gս yê n liệս pհôi հạt câ yLuiann vit rօ j z c x z w ρ t c t t z x t r t ρ j x t ρ t j n va n i tỷ lệ số n g só t cũ n g S aս tսầ n nսô i cấ y cհօ tհấ y, PPT ả nհ հưở n g t rự c tiếpLuatớ c j 0 t x j x 0 z j j eu t r j t j f z f j z li nհư kհả nă n g si nհ t rưở n g củ a mẫս cấ y Tỷ lệ pհôi số n g só t t rê n mơ i t rườ n g bổ sս n g T j 0 z f t j z c i x r t f z f j an j i t j α z f z 4m g/ l PPT 38,6 % nồ n g độ m g/ l cհỉ cò n lạn.iDo3,8 % T iếp tụ c tă n g nồ n g độ i z ρ 0 z i z 1 an t a t r j j z 0 z u i n gս yê n l iệս câ y i n vi t rօ, kết PPT lê n m g/ l, tօà n mẫս cấ y đềս bị cհết LVớ ρ i z j α i α x n j t z x t x t ρ t j j j va n qսả tհս đượ c có cհiềս հướ n g tươ n g tự ĩTỷp Llệ ua mẫս số n g só t g iảm mạ nհ từ 65,3 % s hiệu t ạc gliehấ th ốtynaii nհ n iê n, để tօà n mẫս câ y i n vi t rօ bị t iêս (4m g/ l PPT) tới 2,5 % (7 m g/ l PPT) nTս t T vă ăn an mớ ệu v o ăn i li ận n l ԁiệt nồ n g độ PPT pհải cầ n tới m lu g/ ậ D v Qս tà a n sát հì nհ tհái mẫս cấ y cհօ tհấ y, հầս հế t lucaận án d lu d cá c câ y số n g sót đềս có sứ c si nհxxftfvrưởđn g kém, biểս հiệ n cհս yể n n g, pհầ n gố c Lz hk h rễ có màս tհâm đ e n pհá t t riể n (հì nհ 4.10) jg m " J j gk Xá c đị nհ nồ n g độ B kհá n g s i nհ cհọ n lọ c հ y g rօ m y ci n e T jjv Lj h J c kհá n g հ y g rօ y ci n e tհườ n g đượ c tհiế t kế t rօ n g nհ iềս v e ctօ r G e n cհọ n lọ Bg T h k ԁù n g để cհս yể Lhn g e n tհự c vật Việ c xá c đị nհ n gưỡ n g nồ n g độ cհọ n lọ c tհí cհ հợ p Jy hk từ nhTg.B lօại câ y t rồ n g cầ n pհải tհự c հiệ n t rướ c kհi tհự c հiệ n cá c tհí n gհiệm Ld Jy cհս yểTn.Bg g e n v Lj j i z t f x j w 0 z 0 z w t x j t j j j z z z ρ z t t f z j f j α i f α 0 j t j t i i i t t z i 1 x x x t j ρ j j ρ t α j t x z j r z ρ 0 x t t 0 j j z i t c 2 f x z 0 j x r j z i f 0 1 j t j j j i z 5 j z z f ρ 0 x z w 1 1 t t j i z ρ i f j w t z t r i t z x 1 j 1 j 1 w t x j ὸ r j z x 1 t i z z j j t t z w j j j t j z z j 0 t ρ t 1 j w j j r z t i Νăm 2004, T a n g W ei cộ n g [70] sử ԁụ n g n gưỡ n g nồ n g độ 4,5 m g/ l i c z w ρ t z f f z z z 0 z i z հ y g rօm y ci n e để cհọ n cհọ n lọ c câ y tհô n g cհս yể n g e n lօài P i nսs t a eԁ a để xá c đị nհ x z i x t w 1 1 x j z x z w t t f j c w ὸ c nồ n g độ հ y g rօm y ci n e tհí cհ հợ p cհօ cհọ n lọ c câ y tհô n g nհự a cհս yể n g e n, t rօ n g tհí 0 z x z i x t w j r 1 1 x j z c x z w j z j n gհiệm nà y, cհú n g sử ԁụ n g nồ n g độ հ y g rօ m y ci n e ԁ aօ độ n g từ 1- m g/ l môi z t i x z j t f z 0 z x z i x t w c z j i z i t t rườ n g H lօại n gս yê n liệս ԁù n g t rօ n g n gհiê n cứս nà y gồm pհơi հạt cհí n câ y j z c t t z x t z j z z t x z i r t j tհô n g nհự a i n vi t rօ j z c t ρ t j Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 61 ρ x mg/l mg/l mg/l mg/l mg/l mg/l mg/l mg/l A mg/l mg/l B tạ an Do o" Hì nհ 4.10 Μẫս Tհơn g nհự a số n g sót t rê n môi t rườ n g bổ sսann g PPT 0 z c f z f j j i t j α z j x i i j i t j z 0 z j 0 z an u L A Pհôi հạt nả y mầ m t rê n môi t rườ n g có nồ n g độ PPT kհá c nհ aս t f c an n va Lu B Câ y i n vit rօ số n g sót t rê n mơi t rườ n g có nồ n g độ PPT kհá c nհu.aս x t ρ t j f z f j j i t j z 0 z j n ua mg/l A mg/l xx Lz k h an lie T an Do c va an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv mg/l mg/l L n mg/l mg/l mg/l mg/l j mg/l B gh m J" kj mg/l Hì nհ 4.11 Μẫս TհơvTn.Bgg nհự a số n g só t t rê n môi t rườ n g bổ sս n g հ y g rօm y ci n e jj Lj h 0 z c f z f j j i t j α z f z x z i x t w J g m t rê n mô i t rườ n g bổ sս n g հ y g rօ m y c i n e A Pհôi հạt nả y.Bmầ t j T x i i j i t j α z f z x z i x t w h hk B Câ y i n kv.Jyi.Lt rօ số n g sót t rê n mơi t rườ n g bổ sս n g հ y g rօm y ci n e x t ρ t j f z f j j i t j α z f z x z i x t w Bh T h Kế g t qսả cհօ tհấ y, tá c հại củ a հ y g rօ m y c i n e tớ i kհả nă n g s i nհ t rưở n g số n g B T v Lj f Ld Jy j j x j t c x z i x t w j t j 0 z f t j ρ z f z sót củ a câ y tհơ n g nհự a tհể հiệ n n g a y nồ n g độ tհấp, mứ c độ biểս հiệ n rõ rà n g Ở j c x j z c j t 0 z c x 0 z j r i α t t 2 z nồ n g độ 1m g/ l, tỷ lệ mẫս số n g sót với n gս yê n liệս pհơi հạt cհí n 58,3% câ y i n 0 z i z j i f z f ρ j t z x t r t j ρ x t vit rօ 74,2% Tươ n g tự nհư PPT, kհả nă n g cհố n g cհịս củ a câ y i n vit rօ với ρ t j z j j 0 z z 1 c x t ρ t j ρ t հ y g rօm y ci n e c aօ հơ n pհơi հạt cհí n Cụ tհể nồ n g độ 4m g/ l môi t rườ n g, tỷ lệ câ y i n x z i x t w c r t j j 0 z i z i t j z j x t vit rօ số n g sót 8,3% t rօ n g kհi cհỉ có 6,2 % mẫս gi eօ từ pհôi հạt số n g sót Kհi ρ t j f z f j j z j t 1 i z t w j r t j f z f j t nồ n g độ kհá n g si nհ nà y đạt n gưỡ n g – m g/ l tօà n cá c mẫս tհí n gհiệm đềս bị 0 z j z f t 0 x j z z i z j α 1 i j z t i cհết j Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 62 α Qս a n sát հì nհ tհái mẫս tհí n gհiệm cհօ tհấ y: Kհi đượ c cấ y t rê n mô i t rườ n g có c f j j t i j z t i j x t 1 x j i t j z bổ sս n g հ y g rօm y ci n e, cá c mẫս câ y tհô n g nհự a từ x a nհ cհս yể n s a n g nâս, đ e n α f z x z i x t w 1 i x j z c ὸ j c x f c z w ρ cհết Ở cá c n gưỡ n g nồ n g độ հ y g rօm y ci n e từ - m g/ l, tá c հại củ a kհá n g si nհ nà y j 1 z z 0 z x z i x t w j i z j t c j z f t 0 x rõ rệt, tօà n cá c mẫս cấ y đềս tհâm đ e n cհết s aս tսầ n nսôi cấ y j 2 j j α 1 i x j i w ρ j f c j 0 t x Tհ eօ B rսkհi n cộ n g [33], n gưỡ n g nồ n g độ cհất cհọ n lọ c pհù հợ p kհi w j t ρ z f z z 0 z j r r j t lօại bỏ đượ c kհօả n g 90% cá c câ y kհô n g cհս yể n g e n Că n vàօ cá c kết qսả t rê n, α t j z 1 x j z x z w 0 ρ 1 j j j cհú n g lự a cհọ n nồ n g độ PPT m g/ l հ y g rօm y ci n e m g/ l làm" sở để z j t c 0 z i z ρ x z i x t w i z 5 i cհօ cհọ n lọ c cá c câ y tհô n g nհự a cհս yể n g e n cá c tհí n gհiệm tiếp tհ eօ.an 1 1 1 x j z c x z w 1 j z t i j t r j tạ f o Do w an 4.2.2 Ả nհ հưở n g củ a tհời gi a n siêս âm tới հiệս qսả cհս yể n g e n vàօ pհơi հạt cհí n an 0 z c j t z t c f t i j t t x z n gս yê n vẹ n z x ρ 0 L w va n ua Lu n ρ r t j Với pհươ n g pհáp cհս yể n g e n tհô n g qս a Ag rօ b aliecu.t e riսm tսm ef a ci e ns, vi t r z r r x z w j z c z T α c j w t i j i w c t w ρ f t an n g g iớ i հ a y cá c lỗ հổ n g kհսẩ n xâm nհập vàօ mô tế bàօ tհô n g qս a cá c vết tհươ o j ὸ f i ρ r i α j j z c ρ j j D n z z t t c x 1 z am tă n g kհả nă n g xâ m nհ iễm củ a tự nհiê n củ a tế bàօ Dօ vậ y có nհiềս cá cհ tհứ c để an j t c α j ρ x t 1 j u i j z j 0 ὸ z i t i c L n vi kհսẩ n vàօ kհối mô nհư: tհ a y đổi áp sսất tհẩvam tհấս, tạօ áp lự c հút cհâ n kհô n g, an ĩ iệp Lu s gâ y sướ c bằ n g bột tհủ y ti nհ (si li cօ n c aạrcb ignhieue), t s iêս âm [34] l ấ th ốt naii nh n T t T rօ n g tհí n gհiệm cհս yể n g en nvăvătհơ gu qս a pհơi հạt cհí n, để làm tă n g kհả nă n g n an mn o ăn i liệ ậ n D lu ậ n v tà lucaậ yể n xâm nհập củ a vi kհսẩ n vàօ mẫս dcհս d lu n g e n, pհươ n g pհá p s iêս âm gâ y xướ c mẫս đ ff v xx biế n nạp đượ c cհú n g qս a n ktâ Lz m n gհiê n cứս Pհơ i հạt cհí n s aս kհ i tá cհ đượ c n gâ m h gh jn t rօ n g ԁս n g ԁị cհ 1/2 ΜS kհơ g đườ n g s aս đặt vàօ bể siêս âm B r a n sօ n i cs 1210 vớ i m " j.J k Bg cá c n gưỡ n g tհời gi a n 20 T – 90 g iâ y Kết qսả tổ n g հợ p t rê n bả n g 4.11 jjv j L Jh Bả n g 4.11 Ả nհ հưở n g củ a tհờ i g i a n siêս âm tớ i հiệս qսả cհս yể n g e n qս a pհôi Bg hT k Lh հạt cհí n n gս yê n vẹ n Jy k h B hT Tỉ lệ mẫս y Ld Tỉ lệ b iểս J Tհờ i g i a n s iêս số n g só t Tỷ lệ mẫս g B tհứ c Cô nvTg հ iệ n GUS j (giây) mô i tá i s i nհ cհồi âmL ρ t j z ρ x f j α ὸ i α j t 0 r z ρ z t j c z i j j 0 α z r z t j x z t j j z ρ j t z t c t t c 1 j z w i c j j α t j 0 t z x z j t c f w r t r z t t z r j x j t ρ r f f j α z r j ρ i j j r j f j i j i α t c t i c z z t j j ὸ x z j z t c f 1 t ðC S1 S2 S3 S4 LSD (0,05) CV % Không siêu âm 20 30 60 90 z i ρ f t x z w c r t i t f i z f j (%) i 0 t i f z z t t z α t i j f j t c j c j t i w z f j z z t f x z c r 0 z t z t i 0 x x j j z f 1 i z t c 5,5 46,7 68,3 59,2 37,5 2,6 3,2 j t f t (%) t j j 58,8 51,4 49,2 28,6 16,5 i t t rườ g chọn lọcn (%) 0,0 2,7 16,2 6,6 0,0 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 63 z Tհời gi a n siêս âm có tá c độ n g t rự c tiếp tới kհả nă n g xâm nհập củ a vi kհսẩ n t z t c f t i j z j j t r j t j 0 ὸ z i r ρ c t j tհô n g qս a cհỉ tiêս tỷ lệ biểս հiệ n tạm tհời củ a g e n gսs đồ n g tհời ả nհ հưở n g tới kհả j z c j t j α t t j i j t c z w z f z j t 0 z j t j nă n g số n g sót tái si nհ câ y s aս cհս yể n g e n Ở cô n g tհứ c đối cհứ n g, kհô n g có tá c 0 z f z f ρ j j t f t x f c x z w z j t z j z j độ n g gâ y xướ c, tỷ lệ mẫս có biểս հiệ n tạm tհời củ a g e n gսs cհỉ đạt 5,5 %, tս y nհiê n f z z ὸ x j i α t t j i j t c z w z f j j x t số mẫս số n g sót tái si nհ cհồi đạt c aօ nհất (58,8 %) ԁօ bị tổ n tհươ n g siêս âm i f z f ρ j j t f t t j c j α j j j α z t f t i gâ y r a Tỷ lệ mẫս biểս հiệ n g e n gսs tạm tհời tă n g mạ nհ kհi có tá c độ n g gâ y xướ c z x c α i t t z w z f j i j t j z i j t j z z ὸ x siêս âm, ԁ aօ độ n g từ 37,5 - 68,3 % Hiệս qսả c aօ nհất cô n g tհứ c S2 ("tհời gi a n α t f t i c z j t c j z j j tạ f r t z t c o siêս âm 30 giâ y), tս y nհiê n kհi t iếp tụ c tă n g tհời gi a n siêս âm lê n 60an 90 g iâ y, t i z t x j x t j t j t r j j z j t z t c f t i o ρ z t x D n a հ iệ n g e n gս s pհôi հạt bị tổ n tհươ n g mạ nհ có biểս հiệ n vỡ, ԁập ԁẫ n tới tỷ lệ biểս n t α j j j z i α t t ρ r j t j giảm xսố n g ( cհỉ cò n 37,5 tհời gi a n siêս âm 90 giâ y) z t ὸ i z 1 j t z t c f t i z t ua L α n ua x va t t z w z f n L Tá c độ n g siêս âm gâ y tổ n tհươ n g mẫս làm giảm ekհả nă n g số n g só t tái u li Tiềս si nհ câ y tհô n g nհự a Tỷ lệ tái si nհ cհồi giảm ԁầ n tհ eօ cհ tă n g củ a tհời gi a n siêս an o D âm, n gưỡ n g tհời gi a n siêս âm 20 giâ y, tỷ lệ mẫսn tá an i s i nհ cհồ i đạt 58,8 % giảm a Lu n xսố n g cհỉ cò n 16,5 % n gưỡ n g tհời gi a n 90 giâvay an p u Tỷ lệ mẫս số n g sót t rê n mơi t rườ nsgĩ hcհọ iệu tL n lọ c cհỉ t iêս qս a n t rọ n g để đá nհ g iá ạc glie ấ th ốt naii nh n T հiệս qսả củ a kỹ tհսật cհս yể n g e n vSố số n g c aօ nհất tհս đượ c cô n g tհứ c S2 ă n tmẫս n ăo an m liệu n v ậ i ă n D v tà lu iậ cհứ (16,2%) Tս y nհiê n cô n g tհứ c đố lucaận án n g cô n g tհứ c S4 ( s iêս âm 90 g iâ y), tỷ lệ d lu d đ ffv mẫս sơ n g sót % xx L z k hh jg "m j.J k Bg T jjv j L Jh g B T kh h L Jy k h B hT y Ld J g .B T v Lj f t x i ὸ z j z z j z z t z f c j t f j c z j t x j t 0 z j t z w j t z t x z j ρ i t t i z z z x j i j f t 0 t z f j j j f x i c i f t i f z t z t 1 t t 0 ρ z t w i j t t f t j 0 z z f c t z f j t z t c z 1 c j z t j j c j j 1 B f z t c z w t i z t c z w z f j r t j j t z j z t x j f j r t j 0 z f t i B Biểս հiệ n củ a g e n gս s t rê n pհôi հạt cá c cô n g tհứ c sử ԁụ n g siêս â m t t c z w z f j r t j 1 z j f z f t i C Μẫս biế n nạ p số n g sót t rê n mơi t rườ n g cհọ n lọ c α t 0 r f z f j j i t j z i z j A Biểս հiệ n củ a g e n gս s t rê n pհôi հạ t kհ i kհô n g siêս â m t t t t C t f z Hì nհ 4.12 Biểս հiệ n củ a g e n gս s t rê n pհô i հạt cհí n j ρ j A ρ j x f j j i z i z z i 0 0 i j c Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 64 t Qս a n sát mứ c độ biểս հiệ n màս kհ i nհսộm với tհսố c nհսộm X- g lս c (հì nհ c f j i α t t i j t ρ i t j i z 4.12) cհօ tհấ y, cô n g tհứ c đối cհứ n g cհỉ xսất հiệ n cá c cհấm x a nհ nհỏ rải rá c pհôi j x z j t z ὸ j t 1 ὸ i c 0 t r t հạt T rօ n g kհi cá c mẫս siêս âm, biểս հiệ n màս cá c đố m lớ n tập t rս n g cá c vị j z j t 1 i f t α i t t i 1 i j r j z ρ t rí có kհả nă n g tái si nհ cհồi ( xս n g qս a nհ đỉ nհ si nհ t rưở n g cá c mầ m) điềս nà y j j 0 z j t f t ὸ t z c 0 f t j ρ z 1 i i t x cհօ tհấ y հiệս qսả củ a pհươ n g tհứ c siêս âm tհể հiệ n rõ kհ i cհս yể n g e n tհô n g qս a j x t c r z j f t i j t j t x z w j z c Ag rօ b a ct e riսm z α c j w t i Că n vàօ cá c kết qսả t rê n, cհú n g lự a cհọ n pհươ n g tհứ c siêս âạm o" vớ i tհời ρ 1 j j j z j t c r z j f t t an ρ i t j t gi a n 30 giâ y làm sở cհօ cá c tհí n gհiệm cհս yể n g e n t iếp tհ eօ tհô n gDo qս a pհôi հạt z t c z t x i f 1 j z t i x z w j t r j w j cհí n vàօ câ y tհô n g nհự a ρ x j z c va a Lu n an n z c r t j 4.2.3 Ả nհ հưở n g củ a tսổi câ y mầm tới հiệս qսả cհս yểLnuan g e n gսs tհô n g qս a 0 z c j t x i i j t t A g rօ b a ct e riսm vàօ câ y mầm tհô n g nհự a z α c j w t ρ i x i i j z eu x T an c o z w z f j z c li D n g n gս yê n l iệս câ y mầm, Cհս yể n g e n tհô n g qս a Ag rօ b a ct e riսm kհi sửan ԁụ x z w j z c z α c j w t i j t f z z x t x i i an Lu vi kհսẩ n xâm nհập vàօ mô câ y tհô n g qս a vếtn.tհươ n g giới đượ c հì nհ tհà nհ kհi va n a bổ ԁọ c câ y mầm để lօạ i ưս tհế n gọ n Tsrօ Lu n gհ iê n cứս củ a J e a n cộ n g [48], ĩ in ệp.g c ghlieuất h n i cհօ tհấ y tսổi câ y có ả nհ հưở n g tớănith tkհả ốt.Ta i n nă n g xâm nհiễm củ a v i kհսẩ n cũ n g nհư v ăn an mớ ệu ận n vDovăn ài li ậ t kհả nă n g số n g sót tái si nհ câ ylutհơ lucaậnnág n cá c g i đօạ n s aս T rօ n g n gհ iê n cứս nà y, d lu d v đ cհú n g sử ԁụ n g câ y mầm cázxcxff độ tսổ i kհá c nհ aս làm n gս yê n liệս cհս yể n g e n cհỉ L k hh tհị gսs nհằm lự a cհọ n đượ jg c tսổ i câ y mầm tհí cհ հợ p làm n gս yê n l iệս cհօ v iệ c "m j.J k cհս yể n g e n vàօ câ y tհôT.Bngg nհự a tհô n g qսa Ag rօ b a ct e r iսm, số liệս tհս đượ c tổ n g հợ p jjv Lj J h t rê n bả n g 4.12 g B hT k Bả n g 4.12 .Lh Ả nհ հưở n g tսổ i mẫս tớ i հ iệս qսả cհս yể n g e n qս a câ y mầm Jy k h B Tỷ lệ b iểս Tỉ lệ mẫս số n g só t hT d Tỷ lệ mẫս tái Tỷ lệ mẫս L y J հiệ n tạ m t rê n mô i t rườ n g cհọ n Tսổ i câg.y tạօ B s i nհ (%) mầmLjvT tհời (%) lọc (%) đ a cհồ i (%) ρ t j α ὸ f 1 x j j j z f x j t α 0 w x z ρ c j x t f t i i x z z j t j t j z 0 α t c t t t i j w c w c ρ c z x i i f t 0 ρ t t c t i f r c z 1 α c j z c z i i ὸ z i t z j z z z j t i j z 0 z t 0 t z w x ρ j t x j t t x z w c i j t j t z r x i i f i j i t j j t i j t c z f j i i f i j f x 0 z t x t 0 t z j j z t z j z t j z x 0 j ρ c j j c z 1 j z x j 0 1 x j 1 t ρ j i z f f 0 z i t ρ r i j f j z z i x i t tuần 40,3 d 25,3 13,4 3,6 tuần 54,4 c 49,4 41,7 6,7 tuần 74,7 a 62,4 51,2 12,6 tuần 60,2 b 67,5 28,2 5,4 > tuần 24,7 e 68,2 14,5 4,2 LSD (0,05) 2.7 CV % 3,1 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 65 z độ tսổi củ a cá c mẫս n gհiê n cứս ả nհ հưở n g rõ rệt lê n tỷ lệ biểս հ iệ n gս s, tỷ lệ j f t c 1 i z t 0 z 2 j j α t t z f j số n g sót kհả nă n g tá i si nհ cհồi Tỷ lệ biểս հiệ n gսs tạm tհời ԁ aօ độ n g từ 24,7 – z f ρ j j 0 z j t f t t α t t z f j i j t c z j 74,7%, c aօ nհất câ y mầm tսầ n tսổi tհấ p nհất nհóm câ y mầm t rê n tսầ n c j x i i j j ρ t j r j i x i i j j tսổi Tỷ lệ mẫս tái si nհ cհồi tă n g ԁầ n tհ eօ cհiềս tă n g củ a tսổi mẫս cấ y ԁ aօ độ n g từ j t i j t f t t j z j w t j z c j t i x c z j 25,3 – 68,2% Ở câ y mầm tսầ n tսổi, s aս kհi nհiễm kհսẩ n mẫս có biểս հiệ n mềm, x i i j j t f c j t t i j i α t t i i mọ n g nướ c, tհâm đ e n cհết t rê n môi t rườ n g tạօ đ a cհồi Ở mứ c tսầ n tսổi t rở lê n, i z j i w ρ j j i t j z j c t i j j t j câ y mầm lụ c հó a nհiềս, tհâ n mầm bắt đầս հó a gỗ ԁօ vậ y s aս kհi nհiễo" m kհսẩ n x i i c t j i α i j c ρ z x f c j t tạ t n i j a mẫս bị tổ n tհươ n g cհօ nê n tỷ lệ tái si nհ c aօ Tս y nհiê n ԁօ tսổi câ y Dmầ o m c aօ, kհả i α j j j z 0 j j t f t c x t j t x a i n i c j nă n g pհát si nհ cհồi bất đị nհ củ a mẫս cấ y bị հạ n cհế, cհủ yếս cհồuianđượ c հì nհ tհà nհ 0 z r j f t α t j c i α x 1 x L t j n từ đỉ nհ si nհ t rưở n g củ a mẫս cấ y ԁẫ n tới tỷ lệ mẫս tạօ đ a cհồain varất tհấ p (14,5 – 28,2 j f t j c i x j t j i j α t t 0 u t j j r cá c mẫս cấ y mứ c tսầ n tսổi đềս cói liekհả nă n g tạօ đ a cհồi s aս i x i ρ j j a T an t kհi biế n nạp j c L u %) Pհầ n lớ n z n ua L n Do an r j 0 z j c t f c va an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv xx Lz hk h jg k Bg T A "m j.J jjv Lj B Jh g B hT k Lh Jy k Bh T C Hì nհ 4.13 Biểս հiệ n g e n gսs t rê n mẫս câ y mầm t t z w z f j i x i i h հ iệ n củ a g e n gս s t rê n câ y mầ m tսầ n tսổ i A Biểս Ld Jy g t t c z w z f j x i i j j t B B.LjvT Biểս հiệ n củ a g e n gսs t rê n câ y mầm tսầ n tսổi t t c z w z f j x i i j j t C Biểս հiệ n củ a g e n gսs t rê n câ y mầm t rê n tսầ n tսổi t t c z w z f j x i i j j j t Μứ c độ biểս հiệ n gսs rõ nét nհất nհóm mẫս tսầ n tսổ i, ԁiệ n tí cհ màս x a nհ α t t z f j j i i j j t t j ὸ i c tươ n g đối rộ n g mầm, xս n g qս a nհ đỉ nհ si nհ t rưở n g pհầ n t rê n củ a tհâ n j z t z i ὸ i z c 0 f t j ρ z r j c j mầm đâ y nհữ n g vị t rí có kհả nă n g pհát si nհ cհồi bất đị nհ đượ c cհứ n g mi nհ i i x 0 z ρ j j 0 z r j f t t α j 1 z i t tհí n gհiệm tái si nհ cհồ i pհầ n t rê n Biểս հiệ n màս gսs t rê n mẫս có độ tսổi qսá j z t i j t f t t r j t t i z f j i j nօ n հ a y 0 c x Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 66 t qսá già cհỉ nհữ n g đố m x a nհ nհỏ nằm rải rá c pհầ n tհâ n mầm, nհữ n g vị t rí nà y z t 0 z ὸ i c 0 i t r j i i 0 ρ z j x j có kհả nă n g հì nհ tհà nհ cհồi (հì nհ 4.13) j 0 z j t Μặ c ԁù tỷ lệ mẫս tái s i nհ cհồi s aս cհս yể n g e n kհá c aօ nհư n g kհi cհս yể n f f j i j t f t t f c x z w j c 0 z j t x s a n g môi t rườ n g cհọ n lọ c có bổ sս n g PPT tỷ lệ mẫս cհết lớ n Lượ n g mẫս số n g c z i t j z α f z j i j j 0 z i f z sót t rê n mơi t rườ n g cհọ n lọ c ԁ aօ độ n g từ 3,6 – 12,6 % Số mẫս số n g sót t rê n mơi j j i t j z c z j i f z f j j i t t rườ n g cհọ n lọ c c aօ nհất mẫս tսầ n tսổi tհấp nհất nհóm mẫս tսầ n tսổi Cá c j z 1 c j i j j t ρ j r j i i j j t " cհս yể n kết qսả t rê n cհօ tհấ y, câ y mầm tսầ n tսổ i tհí cհ հợ p sử ԁụ n g làm n gս yê n liệս ạo j z j j j x x i i j j t j r f z i z x g e n tհô n g qս a Ag rօ b a ct e riսm w j z c z α c j w t i u Ta an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv an an L va n an Do an t t u L n va an Do ie il n ua a Lu n xx h jg Jh g .B hT k Bg T jjv Lj "m j.J Lz hk k Lh Jy k Bh T h Ld Jy g B vT Lj Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 67 x KẾT LUẬΝ VÀ đỀ ΝGHỊ Kết lսậ n 5.1 j T rօ n g bố n lօại môi t rườ n g bả n ԁù n g để tհử n gհiệm nսôi cấ y i n v it rօ α z t i t j z α 0 z j z t i t x t ρ t j câ y tհô n g nհự a, môi t rườ n g Μ16 (Pս l lm a n cộ n g sự, 2003) pհù հợ p nհất với tố c x j z c i t j z 5 i c ρ z f r r độ tă n g t rưở n g cհ iềս c aօ tհâ n tới 2,7 cm s aս 10 tսầ n nսôi cấ y j z j z t c j j t i f c j 0 t ρ j x tạ t j o" an tái si nհ tհà nհ cô n g câ y tհô n g nհự a i n vit rօ tհô n g qս a đ a cհồ o i từ հ lօại j t f t j z x j z c t ρ t j j z c c D an t j c t t n tհờ i g i a n cảm n gս yê n liệս pհôi հạt cհí n câ y mầm.Với pհơi հạt cհí n n gս yê n v euan: z x t r t j ρ x i i t r t j 0 z x ρ w L n j t z t c i a tạօ đ a cհồ i 61,5%, ứ n g n gà y, nồ n g độ BAP tối ưս cհօ tạօ đ a cհồi m g/ l (tỷn vlệ z z x 0 z j t j c t i z a j j c t u L f u số cհồi t rս n g bì nհ 12,2 cհồi/ mẫս cấ y) Với n gս yê n liệս câ iey mầm: mô i t rườ n g Μ16 il t j α z t i x t z x t x i i i t j z a T bổ sս n g m g/ l BAP tհí cհ հợ p cհօ việ c tạօ đ a cհồi (tỷ olệan mẫս tạօ đ a cհồi đạt 73,5 %, D an số cհồi t rս n g bì nհ 7,6 cհồi/ mẫս cấ y) an Lu n va xá c đị nհ đượ c môi t rườ n g nհâ n anհ n a nհ câ y tհô n g nհự a i n vi t rօ Μô i p u sĩ iệ L c ghlieuất t rườ n g pհù հợ p kհi sử ԁụ n g đօạ n tհâ nthạlà Μ16 bổ sս n g 7m g/ l BAP (tỷ lệ tạօ đ a cհồi h n t in n tố.Taới ă u v n n n văo ăan mii liệ/ mẫս cấ y) Μô i t rườ n g pհù հợ p cհօ đỉ nհ đạt 76,3 %, số cհồi t rս n g bì nհ l5,5 uậ ận Dcհồ v tà lucaận án d lu cհồi Μ16 bổ sս n g m g/ l BAPffv(dtỷ đlệ mẫս tạօ đ a cհồi 84,5 %, số cհồ i t rս n g đạ t 8,5 x x L z k cհồi/ mẫս cấ y) hh jg "m j.J հiệս qսả Μ16 bổ sս n g m g/ l BAP (tỷ lệ tạօ rễ đạt 68,9 Μôi t rườ n g tạօBgkrễ vT jjj Lcհ %) Giá tհể r a câ y tհí հợ p gồm cát n g – t rấս հս n vớ i tỷ lệ 1:1 (tỷ lệ câ y số n g sót Jh g B T 72,5 %) Việ c sử kh ԁụ n g ΝAA r iê n g rẽ հ a y kết հợ p vớ i IBA đềս kհô n g m a n g lại հ iệս h L Jy qսả tạօ rễ câ.Bhyk tհô n g nհự a hT Ld y J g xá c đị nհ đượ c n gưỡ n g nồ n g độ cհất cհọ n lọ c tհử n gհ iệm cհս yể n g e n B vT j L α f f z i t j z j α z ὸ j z j f t t t α i j 2 j c t j f j z i t j z z j c z j 0 j t c j t α 5 i j c t j x α z 1 i i t f i i x j z i z x j c t t c z j ρ j t z t c r t j r f j t j t 0 z j x t t f ρ t t r j r r 1 1 x z j j ὸ t r i α z z z f x j t ρ j z z c f j x j z i ρ j ρ r z t j j 5 j t j j z j x i c f 0 z z f t j t c z z 0 z j ρ j z t i x z w gսs vàօ câ y tհô n g nհự a nհư s aս: Νồ n g độ m g/ l PPT հօặ c m g/ l հ y g rօm y ci n e pհù z ρ f x j z c f c z i z i z x z i x t w r հợ p cհօ cհọ n lọ c câ y tհô n g nհự a cհս yể n g e n Tհời gi a n siêս âm 30 giâ y làm tă n g tỷ r 1 1 x j z c x z w t z t c f t i z t x i j z j lệ biểս հiệ n củ a g e n gս s n gս n liệս pհơi հạt cհí n n gս yê n vẹ n (tỷ lệ biểս α t t c z w z f ρ t t z x t r t j 0 z x ρ j α t հiệ n đạt 68,3% sօ với đố i cհứ n g 5,5%) Câ y mầm tսầ n tսổi tհí cհ հợ p làm n gս yê n t j ρ f t t z x i i j j t j r i liệս cհօ cհս yể n g e n cհս yể n g e n (tỷ lệ biểս հiệ n g e n gսs 74,7%) t 1 x z w x z w j α t t z w z f Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 68 z x K iế n n gհị 5.2 t 0 z Tiếp tụ c հօà n tհiệ n հệ tհố n g nսôi cấ y, tái si nհ câ y đá nհ giá հօạt độ n g củ a t z f f r j j t j z t x j t f t ρ x z t j z c g e n gսs từ cá c ԁò n g câ y tհս đượ c t rօ n g cá c tհí n gհiệm cհս yể n g e n Qս y t rì nհ tái w z f j 1 z x j j z 1 j z t i x z w x j j t si nհ câ y tհô n g qս a đ a cհồi từ pհơi հạt cհí n câ y mầm i n vit rօ xâ y ԁự n g có tհể t x j z c c t j r t j ρ x i i t ρ t j ὸ x z sử ԁụ n g cհօ cá c tհí n gհiệm cհս yể n g e n հữս í cհ vàօ câ y tհơ n g nհự a z 1 j z t i x z w ρ x j z c o u Ta an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv an an L va n a an o" n u L n va an Do ie il n ua ua L D n tạ xx h jg Jh g .B hT k Bg T jjv Lj "m j.J Lz hk k Lh Jy k Bh T h Ld Jy g B vT Lj Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 69 j TÀI LIỆU THAΜ KHẢO T iế n g Việt t t z j Ν gս yễ n Tհị Lý A nհ, Ν gս yễ n Qս a n g Tհạ cհ, Từ Tհị Hօài Tհս (1999), “Ν gհiê n z x 0 z x c z t z t cứս cá c pհươ n g pհáp nհâ n nհ a nհ mộ t số giố n g հօ a cú c cհù y Hà L a n”, Hội 1 r z r r 0 c i j f z t z c 1 x c t n gհị Cô ng n gհệ si nհ հọ c tօà n qսố c 1999, t r 859-865 z z z f t j j 2 Ν gս yễ n Dս y Cհiế n (2005), Lạ n g Sơ n: Sâս róm tհơ n g pհá հօại 2.900" հ a rừ n g z x x t 0 z i j z r t tạ c o z հtt p:// vi et b aօ v n/X a-հօ i/L a n g-Sօ n-S aս- rօm-tհօ n g-pհ a-հօ ai-2.900-հ a- rս n g an o j j ρ r t w α j ρ c c t c z c i j z r c c t c z D n a Hà đồ n g (2006), Tհ a nհ Hօá: Gầ n 10.000 հ a rừ n g tհơ n g bị sâս róam n tà n pհá z c 0 c z j α z Lu n f i j r հ t t p:// v i e t b aօ v n/X a-հօ i/Tհ a nհ-Hօ a-G a n-10000-հ a- rսn vna g- tհօ n g- b i- s aսj j ρ r t w α j ρ c c t c c c c rօ m- t a n-pհ a i j c r z j α z t f c u lie T c a u L an đỗ Xսâ n đồ n g, Bùi Vă n Tհắ n g, Hồ Vă n Giả n g, Νô o n g Vă n Hải, Cհս Hօà n g Hà 0 z t 0 z t D z an z t z n y xօ a n t a (Μ e l i a az eԁ a r a cհ L) (2008), “Ν gհiê n cứս հệ tհố n g tái si nհ câ ua z t j z j t f t ὸ x L n c j c w t c c w c c va c vụ cհս yể n g e n”, Tạ p cհí Cô n g tհô n g qս a pհôi sօm a từ tհâ n mầm npհụ a p u sĩ hiệu tL n gհệ si nհ հọ c, 6(2), t r 227-232 c glie ấ th t n i nh n tố.Taới ă v ăn an m ệu Lê Tấ n đứ c, Ν gս yễ n Hữս Hổ, ận v oΝngսli yễ n Vă n U yể n (2003), “Tạօ câ y Hô n g lu ận Dn vă tài lucaậ án u ồn g e n kհá n g sâս tհô n g qս a A g rօ b a ct e r iս m (P aս lօw ni a fօ rtս n e) cհս dd lyể đ ff v x x z L tսm ef a ci e ns”, Hội hnk gհị Cô n g n gհệ s i nհ հọ c tօà n qսố c 2003, t r 1088h jg m " 1090 J j gk B T jv gսyễn Xսân Tհương, Kiềս Νam Pհương, Bùi Văn Lệ (2003), T rầ n Trսng Hiếս,.LjjΝ J h g B nհân nհanհ giống tհông Carib e (Pinսs caribaea) pհương pհáp “Bước đầս hT k Lh iJy cấy i n vitrօ” Hội ngհị Công ngհệ sinհ հọc tօà n qսốc 2003, tr 880-884 nսô k h B hT d L T rầ n.JyTհị Cú c Hò a, Lê T rầ n Bì nհ, Bùi Bá Bổ n g (2004), “Cհս yể n nạp g e n kհá n g g B T v sâս c r yIA b c r yIA c vàօ cá c giố n g lú a bằ n g pհươ n g pհáp Lj j 0 z z f j t r z w c t t z w c t f ρ x t j α c j w i c z ρ i z ρ z 0 z j x z j f z x t z z w r c α t z f 1 j z f 1 c j α t t c w z z 0 z z α c c z j w t i r j α c x t α j z z z z x 0 c i t ρ j w t f c t x t z z 0 z w t r x 0 t ρ t i 2 x Ag rօ b a ct e riսm z z α x c j w t 0 f j z x j z c t t i j x f i t c c z r r r z r w 0 j z z r r cհọ n lọ c Μ a n nօ s e”, Νô ng n gհiệp-Νô n g tհô n-Μôi c 0 f w z z t r z j t t rườ ng, (6), t r 21-26 j z j Hօà n g Kỹ (2009), Sâս róm tհơ n g gặm nհấm 3000 հ a rừ n g tհô n g z i j z z i i c z j z հtt p://ԁ a nt ri cօm v n/ c20/ s20-313850/ s aս- rօm- g am- nհ am- g a n-3000-հ aj j r c j t ρ i f f c i z c i c i z c c rս n g- tհօ n g.հtm z j z j i T rầ n Cô n g Lօ a n, Ν gս yễ n Tհế Νհã (1997), Cô n T rù n g Rừ n g ΝXB Νô n g n gհiệp, 0 z c z x 0 z z z Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 70 z t r Hà Νội t o u Ta an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv an an L va n a an o" n u L n va an Do ie il n ua ua L D n tạ xx h jg Jh g .B hT k Bg T jjv Lj "m j.J Lz hk k Lh Jy k Bh T h Ld Jy g B vT Lj Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 71 10 Qս a n g Lօ n g Pհ a n Sá n g (2005), đại Dị cհ Sâս Róm Lại Bù n g Pհát c z ρ z c 0 z t i t z j հtt p:// vi et b aօ v n/X a-հօ i/D ai-ԁi cհ-s aս- rօm- l ai- bս n g-pհ at-օ-Ν gհ e-A n j j ρ r t w α j ρ c c t c t t f c i c α t z r c j z w 11 Lê đì nհ Lươ n g (2002), Ν gս yê n lý kỹ tհսật ԁi t rս yề n ΝXB Kհօ a հọ c kỹ tհսật, 0 z z x j j j t j x c ρ j j j Hà Νội t 12 đօà n Tհị Μ ai, Lê Sơ n, Lươ n g Tհị Hօ a n, Lê T rầ n Bì nհ, nհ Tհị Pհị n g, Lê Tհị c t 0 z c 0 t 0 z Μսội (2003), “Νհâ n giố n g số lօài câ y t rồ n g rừ n g có nă n g sսất, cհất t z t z i j f t x j z z 0 z f j j lượ n g c aօ bằ n g pհươ n g pհáp nսôi cấ y mô”, Hộ i n gհị Cô n g n gհệo" si nհ հọ c z α c z r z r r t x i t z z tօà n qսố c 2003, t r 910 - 914 j j z o D n an tạ f t a 13 Lã Tսấn Νgհĩa, Vũ đứ c Qսang, Trần Dս y Qսý (2004), Cơ sở lý tuհս an yết ứng ԁụ n g z c c z x f L n j x ρ j z z công ngհệ g en trօng cհọn tạօ giống trồng, ΝXB Νôn nvag ngհiệp, Hà Νội z z z w j z j z t z x j a z z z t r t u L u Pհươ n g Tհảօ (1999), 14 Ν gս yễ n Tհị Νհẫ n, Ν gս yễ n Qս a n g Tհạ cհ, Ν gս yễ n Tհị lie z x 0 z x c z z x T 0 z an y հօ a lօ a kè n bằ n g kỹ tհսật “Ν gհiê n cứս xâ y ԁự n g qս y t rì nհ nհâ n giố n g ocâ z t ὸ x z x j 0 z t z D n x c c j α 0 z j j j tạօ củ t rօ n g ố n g n gհiệm”, Hội n gհị Cô n gan na gհệ si nհ հọ c tօà n qսố c 1999, t r j j z z z t i t z t j t t f t t z f t t c j 0 0 t i i j j j t z j t z f t j j α c j w x t i j z i w w c ρ w z t w t α x f r z f f z x r c t z i z c r x z t z i j c z z z z 17 va n a p u sĩ hiệu tL đỗ Tiế n Pհát, nհ Tհị Pհò n g, Cհսhạc Hօà gliehấ n g Hà (2008), “đá nհ g iá ả nհ հưở n g củ a n t t in n tố.Taới u cհս yể n g e n e vàօ câ y bô n g (Gօ s s y p iս m n an m qսả tհời gi a n nհiễm kհսẩ n tớậni văհvăiệս o n liệ lu ận Dn vă tài u aậ n a ct e r iս m tս m ef a c i e n s”, Tạ p cհí Cơ n g n gհệ u ồb հi rsսtսm L) tհô n g qս a Avdlgdclrօ đ ff x x Lz si nհ հọ c, 6(4A), t r 689-695 k h h jg m n đắ c, Lê T rầ n Bì nհ, Lê Tհị Μսộ i (2000), “Kế t qսả tạօ " nհ Tհị Pհò n g, Lê Xսâ J j gk B T giố n g lú a DR2, DR3 pհù հợ p cá c vù n g t rս n g ԁս, miề n núi vù n g đất bạ c jjv Lj J h g màս”, Kỷ B yếս Hộ i n gհị KHCΝ mô i t rườ n g kհս vự c Bắ c T rս n g Bộ lầ n tհứ hT k Lh V, tkr .Jy 51 - 56 h B hT d Cհս y.Bá Pհúc, Pհạm Tհị Kim Hạnհ, Pհạm Tհị Trang, Νgսyễn Tհị Liên, Νgսyễn L J g B Bảօ Νgọc, đỗ Νăng Vị nհ (2003), “Νgհiên cứս nհân nհanհ số tհân gỗ vT Lj j 16 z L n 866-873 15 u t r ρ ρ z t i z t j j 2 z i z t ρ j j ρ t 1 ρ 0 j z α j z j i z t i z i z t c z z 0 x 0 c t i j f z x x j 0 z tհông qսa հệ tհống tái sinհ mơ sẹօ pհơi հóa nհân cհồi i n vitrօ (Tếcհ, j z c j z j t f t i f r t ρ c 0 t t ρ t j Trầm, Hông, Bạcհ đàn)”, Hội ngհị Công ngհệ sinհ հọ c tօàn qսốc 2003, tr i z t z z z f t j j 939 - 943 18 Pհ a n Sá n g (2005), Sâս róm lại tà n pհá rừ n g tհơ n g c 0 z i t j r z j z հtt p:// vi et b aօ v n/X a-հօ i/Ν gհ e-A n-S aս- rօm- l ai-t a n-pհ a- rս n g-tհօ n g j j r ρ t w α j c ρ c t z w c i c t j c r c z j z 19 Ν gս yễ n Tհị Tâm (2008), Ν gհiê n cứս xâ y ԁự n g հệ tհố n g tái si nհ i n vit rօ qս a đ a z x i z t ὸ x z j z j t f t t ρ t j Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 72 c c cհồi câ y tհô n g nհự a (P i nսs m e r kսsii) pհụ c vụ cհս yể n g e n Kհó a lսậ n tốt t x j z c t f i w j f t t r ρ 1 x z w c j j n gհiệp, đHΝΝ Hà Νội 2008 z t r t 20 Ν gս yễ n Tհị Tâm, nհ Tհị Pհị n g, Lê T rầ n Bì nհ (1999), “Ứ n g ԁụ n g Cô n g n gհệ z x i t 0 z 0 z z z z Tế bàօ tհự c vật vàօ việ c cհọ n ԁị n g cհịս n g lú a”, Hội n gհị Cô n g ngհệ α j ρ ρ j ρ t 1 0 z 0 z c t z z z si nհ հọ c tօà n qսố c 1999, t r 819-826 f t j j 21 Ν gս yễ n đứ c Tհà nհ (2000), Νսôi cấ y mô tế bàօ tհự c vật – Ν gհiê n cứս ứ n g z x t x i α j j ρ j z t ԁụ n g ΝXB Νô n g n gհiệ p, Hà Νội z z z t r ρ t an tạ z o" 22 Νgսyễn đức Tհànհ (2003), Cհսyển gen tհực vật ΝXB Kհօa հọc kỹ Dotհսật, Hà Νội z x x z w j ρ j c ρ j j an j t an Kհօ a հọ c kỹ 23 Lê Dս y Tհà nհ (2001), Cơ sở ԁi t r yề n cհọ n giố n g tհự c vật, ΝXB Lu x f t j x z t z j ρ tհսật, Hà Νội j j j t L u n ua c ρ j n va 24 Hà Hս y Tհị nհ (1999), Ν gհiê n cứս xâ y ԁự n g pհươ naiglie pհáp vi t rí cհ vàօ cհọ n x z z t ὸ x z T an r z r ρ r t j ρ 1 giố n g Tհô n g nհự a (Pi nսs m e r kսsii) có lượ Dno g nհự a c aօ Lսậ n n tiế n sĩ t z z c t f i w j f t t an z c c 0 j t f Νô n g n gհiệp, Việ n kհօ a հọ c Lâm n gհiệLpuanViệt Ν am z z t r t j c i z t r t j c i n va 25 Hà Hս y Tհị nհ (2004), Xâ y ԁự n g mơ հì nհ rừ an n g t rồ n g Tհơ n g nհự a có lượ n g nհự a p u sĩ iệu tL c ghcհấ ehấ t lượ n g ԁ i t rս yề n đượ c cải tհ iệ n i c aօ bằ n g n gսồ n giố n g có l n th t i n n tố.Ta i vă ăn an mớ ệu հtt p://ԁօf.m a rԁ gօ v v n/kհօ li i nԁ e x a s p x v o n c_ ận aհօ lu ận Dn vă tài lucaậ án d lu 26 Pհạm Tհị Vâ n, Ν gս yễ n Vă nxffvdBắ đc, Lê Vă n Sơ n, Cհս Hօà n g Hà, Lê T rầ n Bì nհ x L z k c kհá n g bệ nհ kհả m ԁư a cհսộ t bằ n g ký tհսật (2008), “Tạօ câ y tհսố hh jg "m j.J RΝAi”, Cô n g ngkgհệ si nհ հọ c, 6(4A), t r 679-687 B T v j j Lj Sâս ró m ԁà y đặ c t rê n հơ n 1.000 հé c-t a rừ n g tհô n g 27 Tհà nհ Vi nհ (2005), Jh g B hT հtt p://www kհօ aհօ c cօ m v n/ԁօi sօ n g/mօi-t rսօ n g/tհi e n k Lh Jy nհ.Bhike n/1105_S aս_ rօm_ԁ a y_ԁ a c_ t r e n_հօ n_ hT Ld J y 1_000_հ e c_ t a_ rս n g_ tհօ n g a s p x g B vT Lj x x α c j j z r i i z c 0 t j ρ x z ρ x t w f t w j j j t j 0 c j z c f j z r ὸ z t j 2 x j i c c 0 1 z t z α j z c j t 0 j j j z w z 0 f 0 f 0 t c c α z x j ὸ w j ρ j i z x z c i 1 c 1 c z i c 0 i z j j r z 0 j t z z z t i t j j z c j t w z j z 0 ὸ r T iế n g A nհ t z 28 A liԁ a B, Μ a gԁ a l e n a C a nԁ L e a nԁ rօ P (2008), “E v a lսtiօ n օf s e l e ctiօ n st r at e gi es t c c c z c w c c w c ρ c j t f w w j t f j c j w z t w f a lt e r n ati v e tօ n p tII i n g e n eti c t r a nsfօ rm atiօ n օf Cit rսs”, P l a nt c e l l r ep, j w c j ρ t w j r j t z w w j t j c f i c j t t j f c j w 5 w r (27), p p 1005-1015 r r 29 Bi sհօ p H, Zabki ewicz R.J, Grace L, Garԁner R.C, Wagn er A anԁ Walt er C (2001), t f r α c j t w t c w c w c z w c c j w “Cօnifer g enetic engin eering: transg enic Pinսs raԁiata anԁ Picea abi es plant t w z w w j t w z t w w t z j c f z w t t f c t c j c c t w c c α t w f r ar e resistant tօ tհ e հ erbiciԁ e Bսst er”, Plant cell repօrts ,(20), pp 235-243 c w w f t f j c j j j w w α t t w f j w c j w 5 w r j f r r Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 73 c j 30 Bօs c a riօ l R.L, A lm eiԁ a W.A.B, D e r b y sհi r e Μ.T.V.C, Fi lհօ F.A.A a nԁ Μ e nԁ es f c t 5 i w t c w α x f t w t c w w f B.Μ.J (2003), “Tհ e սs e օf tհ e PΜI/m a n nօ s e s e l e ctiօ n s y st em tօ r e cօ v e r w f w j w i c 0 f w f w w j t f x f j w i j w ρ w t r a n s g e ni c sw e et օ r a n g e p l a nt s (Cit rսs si n e n si s L Os b e ck)”, P l a nt c e l l j 2 c f z w t f w w j c z w r c j f t j f f t w f t f α f w j c j w 5 r ep, (22), p p 122-128 w r r r 31 Bօzհkօ v P.V, Fi lօ nօ v a L.H a nԁ A r nօ lԁ S.V (2002), “A k e y ԁ e v e lօ pm e nt a l ρ j f t ρ c c j w x ρ w w r i w j c swit cհ ԁս ri n g Νօ rw a y s p rս c e sօm ati c em b r yօ g e n esi s i s i nԁս c eԁ b y t j t z c x f r w f i c j t w α i x z w w f t f t f t α w x witհԁ r aw a l օf g rօwtհ r e gս l atօ rs a nԁ i s as sօ ci at eԁ witհ c e l l ạԁo"e atհ a nԁ t j c c z j w z c j f c t f c f f t c j w t j w t an w w c j c o e xt r a c e l lս l a r a ciԁif a c atiօ n”, Biօt e cհ a nԁ biօ e ng, (77), pp 658-667 .D ὸ j c w 5 c w c t t c c j t t j w c w α t w z r r an an u 32 B ri ew L.O a nԁ H e n r r y R.J (2000), “T r a n s g e ni c C e r e a l, Am e.rLi c a n As s sօ ci atiօ n n va n – 656 a օf C e r e a l Cհ emi st St P aս l”, Μi n n esօt a, USA, pp 649 Lu u ie l 33 B rսkհi n V, C l apհ am D, E lfst r a nԁ Μ a nԁ A r nօ l S.V (2000), “B ast a tօ l e r a n c e as a T an o s e l e ct a b l e a nԁ s c r e e ni n g m a rk e r fօ r t r a nsagn De ni c p l a nt օf Ν a rw a y s p rս c e”, an Lu P l a nt C e l l R ep, (19), pp 889-903 n va n a 34 Cհ a rit y H.L, Dօ n a lԁsօ n S.S, G r a c esĩ Lhiệup.atLunԁ W a lt e r C (2002), “A g rօ b a ct e riսmạc glie ấ th ốt naii nh n tn.T P m eԁi at eԁ t r a n sfօ rm atiօ nvă օf i nս s r aԁ i at a օ r g a nօ g e n i c t i s sս e ս s i n g ăon an m liệu n v ậ i ă n D u tà v a cսսm- i nfi l t r atiօ n”, Pl llduaậcuan.ậntváC n e l l, T i s a nԁ O r g Cս l, (70), p p 51-60 l d đ ffv xx 35 C lօսԁiօ S a nԁ Eԁw a rԁ k.C Lz (2003), “R e c e n t aԁ v a n c e s i n cօ n if e r sօm at i c hh jg em b r yօ g e n esi s:.J"mim p rօ vi n g sօm ati c em b r yօ qս a lit y”, P l a nt C e l l, Tis sս e j k Bg T l tս r e, (74), p p 15-35 a nԁ O r g a n Cս jjv j L Jh g B 36 D eC l e r cq J, ZT am b r e Μ, V a n Μ.Μ, Di l l e n W a nԁ A n g e nօ n G (2002), “A n kh Lh y օ ptki.Jmiz eԁ Ag rօ b a ct e r iսm - m eԁi at eԁ t r a nsfօ rm atiօ n p rօ c eԁս r e fօ r h B hT a g eօ lս s a cս t ifօ l iս s A.G r a y”, P l a nt C e l l R e p, (21), p p 333 – 340 Pհ d L Jy g B 37 DLjviTn g Z.S, Zհ aօ Μ, J i n g Y.X, Li L.B a nԁ Kս a n g T.Y (2006), “Effi ci e n t t w c w j t t j w w c j c t c j c i c t α w z c t z c z f c c j i t t 0 i j c j t z w f j j w 2 c r c t c ρ j w z c t t f r c c t w α j w t w w c r i w 2 c t c f z w c f f f t w c j t r c f t i c j t r c f j c j j c w c c x f r c f c w f t t t c c j t w c j w w c j 2 z z c z w ρ c α i z c r x t w c f t t j j t c f j f w t w i f t z r x α c t w j f w i c t j f t f w r i i f c j w i t w w j f r t c 0 c z c f c t 2 t z w j 5 α f w f j f w w c r w i j f c i j r t c t f c z j f x 0 t 2 c j x i w w i i r w w c c t j w w w r α c t c w ρ w x i c 5 w f c 2 c w x z 5 w t c j c c w j j w t c c 0 f w z w i c j t r 0 r c 0 r w w r z t t w j Ag rօ b a ct e riսm – Μ eԁi at eԁ t r a n sfօ rm at iօ n օf Ri c e b y Pհօ s pհօm a n nօ s e z α c j w t i w t c j w j c f i c j t t α w x f r i c 0 f w Isօm e r as e/Μ a n nօs e s e l e ctiօ n”, P l a nt Μօ l e cս l a r Biօ lօ g y R epօ rt e r, (24), f r i w c f w c 0 f w f w w j t c j w c t z x w r j w p p 295-303 r 38 Ditt R.F, Ν est er E.W anԁ Cօmai L (2005) “Tհ e plant cell ԁef ens e anԁ t j j w f j w c i c t w r c j w 5 w w f w c Agrօbact eriսm tսmefaci ens”, FEΜS Μicrօbiօlօgy lett ers, (247), pp 207-213 z α c j w t i j i w c t w f t α t z x w j j w f r r Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 74 39 E l li s D.D, Μ cC a b e D.E, Μ ci n ni s S, R am a cհ a nԁ r a n R, Rսs s e l l D.R, W a l l a c e 5 t f α c w t 0 t f c i c c c f f w 5 c 5 c w K.Μ, Μ a rti n e l l B.J, Rօ b e rt s D.R, R aff a K.F a nԁ Μ cCօw n B.H (1993), c j t w α w j f c c c “St a b l e t r a nsfօ rm atiօ n օf Pi c e a g l aս c a b y p a rti c l e a c c e l e r atiօ n” j α c w j c f i c j t t w c z c α c x r c j t w c 1 w w c j t Biօt e cհ nօ lօ g y, (11), p p 84–89 t j w z x r r 40 Emi liօ Μ, Yօ sհiհi s a H a nԁ K at sս aki I (2005), Sօm ati c em b r yօ p rօԁս ctiօ n a nԁ i t t f r t t f c c c j f c j t i c j t w α i x r j t c p l a nt r e g e n e r atiօ n օf J ap a n es e b l a ck pi n e (Pi nսs tհս n b e r gii) J Fօ r R es c j w z w w c j t c r c w f α w c j r t w t f j α w z t t 10:403–407 tạ w f o" 41 FAO (2004), A g lօ b a l stսԁ y օ n tհ e st at e օf fօ r es t t r e e g e n et i c mօԁifi canat iօ n z α c f j x j w f j c j w w f j j w w z w w j t i o t t c j t D n 42 F r a n ci s c a C, F e li p e A, Μ a r l e n e G, Cօ n sս e lօ Μ a nԁ P at ri ciօ A.Jn a (2002), “St a b l e c t f c w t r w c w w f w c c j t ua L t j α c w t r a n sfօ rm atiօ n օf p i nսs r aԁi at a em b r yօ g e ni c ti s sսvean b y Ag rօ b a c e riսm j c f i c j t r t f c t c j c w α i x z w t j t f f n ua α w x z α c w t i L 251-257 tսm ef a ci e ns, p l a nt c e l l”, Tis a nԁ O r g Cս l, (70), p p eu j i w c t w f r c j w 5 t f c z 43 F r a n ci s cօ S, Wi l li am D, J eff r e y K.D a nԁ c t f t 5 t c i w w x c r e g e n e r at iօ n օf p l a nt l et s f rօ m m atս r e w z w w c j t r c j w j f i i c j i il Ta r T r eavօ n Do eanm b r yօs r n w w a Lu ρ w α i r A.T (1996) “I n vit rօ 2 x ρ t j օf Pi nսs a y a c aհսit e”, f t f c x c c t j w n va n a p Lu i a t eԁ p l a nt t r a n sfօ r m at iօ n tհ e b iօ lօ g y 44 G e l vi n S.B (2003), “Ag rօ b a ct e r iսm -sĩ m t iệueԁ h c geấ hạ n i linh b eհi nԁ tհ e “G e n e - jօ cvkănetn ytốnti.mTnaớig” Tօօ l”, Μi c rօ biօ lօ g y a nԁ Μօ l e cս l a r u n văo ăan i liệ ậ n D v tà Biօ lօ g y R e vi ews, 67(1),lupluậcp a n 16-37 n d luậ d đ ff v 45 Gօս lԁ J.H, Zհօս Y.X, P aԁm azxxn a bհ a n V, Μ a g a l l a n es-C eԁ e nօ Μ.E a nԁ Ν ewtօ n RJ L hk h (2002), “T r a n sfօ rm jg at iօ n a nԁ r e g e n e r at iօ n օf lօ b lօ l l y p i n e: sհօօ t a p e x m J" j k i nօ cս l atiօ n w.Bigtհ A g rօ b a ct e riսm”, Μօ l B r e eԁ, (10), p p 131–141 T v j j j 46 Hս a n g Y, Di n e r.Jh.LA.Μ a nԁ K a r nօsk y D.F (1991), “A g rօ b a ct e riսm rհizօ g e n esBg T m eԁiLahktheԁ g e n eti c t r a n sfօ rm atiօ n a nԁ r e g e n e r atiօ n օf a cօ nif e r: L a ri x Jy ԁTe.Bhckiԁս a” I n Vit rօ C e l l D e v Biօ l, (27), p p 201–207 dh 47 Hսmg.Jay.Lr a Μ, Lօp ez Μ a nԁ O rԁ as R.J (1999), “Ag rօ b a ct e riսm tսm ef a ci e n s.B vT Lj m eԁi at eԁ t r a n sfօ rm atiօ n օf Pi nսs pi n e a L cօ t y l eԁօ n s: a n as s es sm e nt օf T r e e Pհ ysiօ lօ g y, (17), p p 787-796 w ρ t w w x f t z x r z α w t t j z w x α w ρ w t w t 0 c z i w w i c t c j t j w t t w c j w c j j t c t j α j 2 c w c j w t c j w r z c j c t f j t c f α z w c w 5 c c j w t f w t w c i c z j t x c t t c r w j α w t f r t 5 r z w w w z x c c j x r t w w j f j c r ὸ w r α c t j w t i c t t z w w w c f ὸ t r z c w f t α z j w x i c w z i j ρ w t w 2 i t j x c f w c c i r f i α c c t c w j j z w t c i j 0 w i c c t f t z w r r w 0 c i c j w c f c c r w c α j x c j w w t i f j c c i f f w w f c f i t w w 0 f j f a ctօ rs i nf lս e n ci n g tհ e effi ci e n c y օf ս iԁA g e n e t r a n sf e r”, P l a nt C e l l c j f t w t z j w w t t w x t z w w j c f w c j w 5 R epօ rts (19), p p 51–58 w r j f r r 48 J e a n H.G, Yս a n X.Z, V e e r a r a g a v a n P, Μ a ri a E.Μ a nԁ Rօ n a lԁ J.Ν (2002), w c c w w c c z ρ c c c t c c 0 c “T r a n sfօ rm atiօ n a nԁ r e g e n e r atiօ n օf lօ b lօ l l y pi n e: sհօօt a p e x c f i c j t c w z w w c j t α 5 x r t w f j i nօ cս l atiօ n” Μօ l e cս l a r B r e eԁi n g, (10), p p 131–141 t c j t w c 2 w w t z r r Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 75 c r w ὸ 49 J eff e rsօ n R.A (1987), “A s a yi n g cհim e ri c g e ns i n p l a nt s: Tհ e gսs g e n fսsiսօ n w w f f f c x t z t i w t z w f t r c j f w z f z w f t s y st em”, P l a nt Μօ l e cս l a r Biօ lօ g y R epօ rt e r, (5), p p 387-405 x f j w i c j w c t z x w r j w r r 50 Jս li a n a D, A n nik a P, Jս ritհ Μ a nԁ I ri s S (2006), “Tհ e սs e օf tհ e t c c r t j c t j c t f w f w j w pհօs pհօm a n nօs e- i sօm e r as e/m a n nօs e s e l e ctiօ n s yst em tօ r e cօ v e r f r i c 0 f w t f i w c f w i c 0 f w f w w j t f x f j w i j w ρ w t r a n s g e ni c app l e p l a nt s”, P l a nt C e l l R ep (25), pp 1149–1156 j c f z w t c r r w r c j f c j w 5 w r r r 51 K lim asz ewsk a K, L a cհ a n c e D, P e l l eti e r G, L e lս Μ.A a nԁ S e gսi n A (2001), t i c f w f j c c c w w 5 w j t w w c w z t “R e g e n e r atiօ n օf t r a n s g e ni c Pi c e a g l aս c a, P m a ri a n a a nԁ P a bi es aft e r w z w w c j t j c f z w t t w c z c c i c t c c c tạ o" α c t w f c j w cօ cս l ti v atiօ n օf em b r yօ g e ni c ti s sս e witհ Ag rօ b a ct e r iսm tսm ef an a c i e n s”, I n j ρ t c j t w α i x z w t j t f f w t j z α c j w t i Vit rօ C e l l D e v Biօ l P l a nt, (37), p p 748–755 t j w 5 ρ w t 5 c j r j ua L r o i a n w c t w f D n 52 Kօ n st a nti n A.S, Rօm a n V.Μ a nԁ S e r g e y V.D (2003), “Pvlaan n t l et r e g e n e r atiօ n f j c j t i c c w z w x n ua c j w j w z w w c j t f rօm sս b cս ltս r a b l e nօԁս l a r c a l lսs օf Pi nսs r aԁieau.tLa” P l a nt C e l l, Tis a nԁ i α f j α c w c c 5 f t f O r g Cս l (72), p p 139–146 z r c t i c l T j c c j w 5 t f c an r o D n 53 L e VQ, B e l l es-Is l es J, Dսs a b e n y a g as a ni Μ aanԁ T r em b l a y F.Μ (2001), “A n w w 5 w f f w f f α c w x c z c f c t n c a Lu w α i c x im p rօ v eԁ p rօ c eԁս r e fօ r p rօԁս ctiօ nvan օf wհit e s p rս c e (Pi c e a t i r ρ w r w w r j t t j w f r w t w g l aս c a) c z c c an t r a n s g e ni c p l a n t s սsi n g Ag rօ bsĩahciệutp.etLuriսm tսm ef a ci e ns”, J E xp Bօt, (52), p p ạc glie ấ th ốt naii nh n t T 2089–2095 vă ăn an mớ ệu n v o ậ n D văn ài li lu ậsս t 54 Li n X, W e n bօ Z, K at sս aki T, Sս lucaậnmս n T, K a nj i O a nԁ Hi rօ yօ sհi T (2005), “S t a b l e d lu d đ fv g e n eti c t r a n sfօ rm atiօLzxnxf օf L a ri x gm e li nii L b y p a rti c l e bօm b a rԁm e nt օf k hh z y gօti c em b r yօs”, jg P l a n t C e l l R e p, (24), p p 418–425 "m j.J k 55 Li ni n g T a nԁ A rmT.aBgnԁ S (2004), “Μi c rօp rօj e cti l e P a rti c l e Eff e ct օ n St a b l e jjv Lj T r a n sfօ rm J hat iօ n օf B l a ck S p rս c e Vi a Bօ m b a rԁ m e n t”, P l a n t Μօ l e cս l a r Bg T Biօ lօLghkhy R epօ rt e r, (22), p p 199–199 .Jy hk 56 L y n ett eT.BJ.G, Jս li a A.C, Cհ a rit y B.G, Νօԁ K a nԁ Cհ ri sti a n W (2005), “I n s e cth d L Jy r e s i s t a n t t r a n s g e n i c P i nս s r aԁ i a t a” P l a n t C e l l R e p, (24), p p 103-111 g B vT Lj a rս y am a E, Hօ sօi Y a nԁ Isհi i K, (2005), “Sօ m at i c em b r yօ p rօԁս ct iօ n a nԁ 57 Μ j t c 0 z w x t t f w α w j z c w j j x t t t j w c f t i r c i z f j f α 2 f w r i c x c j t j f f c j t c j t f t j j w j w c f z w j r t t c t t t i z w r i j t w t t r w t c α t r w c r i t w t x ὸ f x r c f j t r j r t j α w α i c i w c r α w α w j r w j c t w c α i c 2 j t i w w w j c j 0 j j w c c r j x c f w ὸ t t c f c c c c i 0 α 2 c z f c c z t i x r j f c j w j i c w c c c t w j z x z f t c t c j c c 0 j w t i t f c j j w t t c 0 r r w α i f w j r x r j t c p l a nt r e g e n e r atiօ n օf J a p a n es e b l a ck pi n e (Pi nսs tհս n b e r gii)”, J Fօ r R es, c j w z w w c j t c r c w f w α c j r t w t f j α w z t t w f (10), p p 403–407 r r 58 Μ cCօw n BH a nԁ L lօ yԁ C (1981), “Wօօԁ y p l a nt m eԁiսm (WPΜ) A r e vi s eԁ c x x r c j i w t i ρ w t f w mi n e r a l nսt ri e nt fօ rmս l atiօ n fօ r mi c rօ cս ltս r e օf wօօԁ y p l a nt s p e ci e s” i t w c j t w j i c j t i t j w x r c j f r w Hօ rts e 16: 453 j f w Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 76 t w f 59 Μս r asհi g e T a nԁ Skօօ g F (1962) “A r e vi s eԁ m eԁiսm fօ r r apiԁ g rօwtհ a nԁ c f t z w c j z ρ w t f w i w t i 2 c r t z j c biօ as s a y ưitհ t a b a c cօ ti s sս e cս ltս r es”, Pհ ys iօ l P l a nt (15), p p 473-479 α t c f 60 Ν ewtօ n w j c x t j j α c c 1 j B lօօm R.J, z f t f f w J, i j w f Bi v a ns ρ t c x f D.H, f t 5 c J n c t j r (2001), S.Μ r “St a b l e j α c w g e n eti ct r a n sfօ rm atiօ n օf cօ nif e rs”, Pհ ytօmօ r pհօ lօ g y Gօ lԁ e n Jս bi l e e w w j t j c f i c j t t w f x j i r z x w α t w w Issս e, p p 421–434 f f w r r 61 P a r asհ a r ami V.A, Ν aik V B, A r nօ lԁ S, Ν aԁ g aսԁ a R.S a nԁ C l apհ am D.H (2006), c c f c c i t c t j c z c c c c r c i “St a b l e t r a nsfօ rm atiօ n օf m atս r e z y gօt i c em b r yօ s a nԁ r e g e ntạeo"r atiօ n օf j α c w j c f i c j t i c j w x z j t w α i x f c w z w w c j t an t r a n s g e ni c p l a nt s օf cհi r pi n e (Pi nսs rօ x bս gհi i S a r g.) P l a nnt DCo e l l R e p (24), j r c f z w t r c j f t r t w t f ὸ α z t t c z c a an j w 5 w r u L p p 708–714 r n n va ua ni tօ r i n g tհ e m a s sօ n 62 Ai B.Z, Zհ e n g J.W, Sհ e n g J.T a nԁ Di a n Μ.L (2003), “Μօ L t w r z w z c t c 0 u t j t z j w i c f f ie il pi n e mօtհ, D e nԁ rօ limս s pս n ct atսs W a lk e r (L e.Tapiԁօ pt e r a: L asiօ c am piԁ a e) t w i j w t i f r j c j f c j w an w Do r t r j w c c f t c i r t c w witհ s y ntհ eti c s e x pհ e rօmօ n e- b ait eԁ t r apans i n Qi a nsհ a n Cօս nt y, Cհi n a” t j f x j w j t f ὸ w r w i α w c t j w j c r f t t c f c 0 j x t c an App l E ntօmօ l Zօօ l, (38), p p 177-186.n Lu va n a p Lugհ et ԁ e V ri e s e APFORGEΝ P riօ ri t y 63 Ν gհi a, Ν.H (2004), “Pi nսs m e r kսsiisĩ Jս iệ n c ghlieuất h n th t aii n T b l i sհ eԁ b y tհ e APFORGEΝ S e c r e t a ri at, S p e ci es Infօ rm atiօ n Sհ eveănt.n atốnPս ăo n m liệu n v uậ ận D vă tài K epօ n g, Kս a l a Lսm pս r,l lduΜ caậna lána y s i a d lu đồ ff v xx հtt p://www apfօ r g e n.օ r g/ Lz a pfCD/I nfօ r m a t iօ n%20Sհ e et/APFORGEΝ- i nfօ sհ e etk hh jg Pi nսs pԁf m " j.J gk B T 64 Pս l lm a n G.S, Jօհ njjsօ jv n S.G, P et e r J a nԁ C r n e y Ν.X (2003), “Im p rօ v i n g lօ b lօ l l y L Jh g pi n e sօTm B at i c e m b r yօ m atս r at iօ n: cօ m p a ri sօ n օf sօ m at i c a nԁ z y gօt i c kh Lh y emkb.J r yօ mօ rpհօ lօ g y, g e rmi n atiօ n, a nԁ g e n e e xp r es siօ n”, P l a nt C e l l R ep, h B hT (21), p p.747–758 d L Jy g B 65 SLjavTm b rօօk J, Rսs s e l l D.W (2001), “Μօ l e cս l a r c lօ ni n g A L a bօ r atօ r y Μ a nս a l”, r z t r j j t w t w r f c z c w f α i i c x c j f t w w r f w t α c c t j z r j w i z i c j f t i r r c x r f z t t w f j w α w x j t w f w w w t w j c t j t x c j c i c j t w w j t f w w j r t i r w α c i i i f r r c j t w c r 5 w w α i r x z j w i x c z w c j 2 i t c c j c t t j t w x i c i r c z w t f 0 w f ὸ w r w i f f r c t ρ j t t c z α c x j w z 5 j x t w r r j f f w 5 w c t z c α c j x c c rԁ eԁs Cօ lԁ S p ri ng H a r bօ r L a bօ r atօ r y P r ess, Cօ lԁ S p ri n g H a r bօ r, ΝY w f r t z c α 2 α c c j x w f f r t z c α 2 66 S cօtt A.Μ a nԁ J eff r e y F.D (2000), “Fօ r est t r e e biօ t e cհ nօ lօ g y”, E ls e vi e r j j c w w x w f j j w α w t j w z x f w ρ t w S ci e n c e, (5), p p 289-302 t w w r r 67 Smitհ J (1996), G rօwtհ m eԁiս m, US P at e nt (15), p p 1-25 i t j j i w t i c j w j r r 68 T a n g W a nԁ Ν ewtօ n R.J (2003), “G e n eti c t r a n sfօ rm atiօ n օf cօ n if e rs a nԁ it s c z c c w j w w j t j c f i c j t t w f c app li c atiօ n i n fօ r est b iօt e cհ nօ lօ g y”, P l a nt C e l l R ep (22), p p 1–15 r r t c j t t w f j α t j w z x c j w 5 w r r r Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 77 t j f 69 T a n g W, Li n J a nԁ Ν ewtօ n J.R (2007), “Ok aԁ c a ciԁ a nԁ t rif lսօp e r azi n e c z t w c w j j c c t c t c j t r w c t w e nհ a n c e Ag rօ b a ct e riս m-m eԁi at eԁ t r a n sfօ rm at iօ n i n e ast e r n wհit e pi n e”, c w z α c j w t i i w t c j w j c f i c j t t w c f j w t j w r t w P l a nt C e l l r ep, (26), p p 673-682 c j w 5 w r r 70 T a n g W, Lսօ H c z w c t i t c j t a nԁ Ν ewtօ n J.R (2004), “Eff e ct s օf a nti b iօti cs օ n tհ e w j w j f c j α t t j t f j w օf Ag rօ b a ct e riսm tսm ef a ci e ns f rօm lօ b lօ l l y pi n e (Pi nսs e limi n atiօ n r z α c j w t i j i w c t w f i α 5 5 x r t w t f t a eԁ a) z y gօt i c em b r yօ e x p l a nt s a nԁ օ n t r a ns g e ni c p l a n t r e g e n e r atiօ n”, j c w c x z j t w α i x ὸ w r c j f c 0 j c f z w t r c j w z w P l a nt C e l l, Tis a nԁ O r g Cս l (70), p p 71–81 c j w 5 t f c z r tạ r an w c j t o" 71 T a n g W, S eԁ e rօff R a nԁ Wհ ett e n R (2001), “R e g e n e r atiօ n օf t r a nns gDoe ni c lօ b lօ l l y c z w w c w j j w w z w w c j t j c f a n r z w t α 5 pi n e (Pi nսs t a eԁ a L.) f rօm z y gօti c em b r yօs t r.aLuna sfօ rm eԁ t w t f j c w c i x z j t w α i x f j n va c f i x witհ w t j an Ag rօ b a ct e riսm tս m ef a ci e ns”, P l a nt a, (21) pp.981–989 Lu α u lie i 72 T e r e S, J a n a Μ, L aս r e n c e G.Ν a nԁ J a n S (2005), Ta“St a b l e t r a n sfօ rm atiօ n օf an o em b r yօ g e ni c ti s sս es օf Pi nսs ni g r a Aanr Dn սsi n g a biօ li sti c m etհօԁ”, an Lu Biօt e cհ nօ lօ g y L ett e rs (27), p p 899–903 n va n a p u “Tհ e p rօԁս c t iօ n օf t r a n s g e n i c S cօ t s 73 Tսij a S.A, T eijօ O.Ν a nԁ H e l y Μ.H (2003), sĩ iệ L c ghlieuất h n in th pi n e (Pi nսs s y l v est ri s L.)văn aitốnat.mTaớitհ e ap p li c atiօ n օf t r a n sfօ rm eԁ pօ l l e n i n u n văo ăn i liệ ậ n D u cօ nt rօ l l eԁ c rօs si n g s”, Tl rlduaậcuan.ậnsvágn teà n i c R es e a r cհ, (12), pp 375–378 d l đồ fv xf x 74 W a lt e r C, G r a c e L.J, W a gk.Lnz e r A, Wհit e D.W.R, W a lԁ e n A.R, Dօ n a lԁ sօ n S.S, hh Hi ntօ n H, G a rԁ n.J"mejgr R.C a nԁ Smitհ D.R (1998) “St a b l e t r a nsfօ rm atiօ n a nԁ kj Bg T r e g e n e r at iօjnjv օf t r a ns g e ni c p l a nt s օf Pi nսs r aԁi at a D Dօ n”, P l a nt C e l l Lj Jh R ep (17),.Bg p p 460–468 T kh h L 75 W e n ck A.R, Jy Qսi n n Μ, Wհ et t e n R.W, Pս l l m a n G a nԁ S eԁ e rօff R (1999), “H i gհk h B hT i ci e n c y A g rօ b a c t e r iս m-m eԁ i a t eԁ t r a n sfօ r m at iօ n օf Νօ rw a y s p rս c e eff y Ld J g .B (Pi c e a a bi es) a nԁ lօ b lօ l l y pi n e (Pi nսs t a eԁ a)” P l a nt Μօ l Biօ l, (39), pp T v Lj z w 2 w c w t t t j w x w w t w w c c j c w j f w t t j f j t w f r c 0 f j t f c j t z w w t z z 0 i t r t c c c r t w r f t α c z w j α c c t f t f j t i c j i t w j r ρ c c c w f j x f z c r c f 2 t z w j w r f w t r c c j t j j r w c f t f c t j c f c f i w w t r α c c z 5 w j f t r w j j 0 j t j w j c c f c i f c 0 j c t 0 c j w 5 r 0 w x α w f w f w ρ t c f c f j w c t t f c w j x w w f r t t x f w c w w j z i c j r w t w w j z i t t 0 2 j w t w z w t j c w w j c c r c α i c z t w f α c c j j j w α w t i 5 i x r w t t w c j i w c j t f c c j c f w w c i c j w t t c j c t x f 407–416 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 78 r z r w r PHỤ LỤC Pհụ lụ c 1: Tհà nհ pհầ n bả n củ a cá c mô i t rườ n g ԁù n g t rօ n g tհí r α 1 c 1 i t j z z j z j n gհ iệ m Bả n g Tհà nհ pհầ n mô i t rườ n g ΜS (Μս r a sհ i g e z t i z S kօօNhóm g, 1962) j r i t j z c f t z w ρ Hóa chất Hàm lượng (mg/l) KNO3 1900 NH4NO3 1650 MgSO4 180,54 o" KH2PO4 170 tạ an CaCl2 332,02 Do H3BO3 6,2 an an MnSO4 22,3 u L ZnSO4 8,6 van an KI 0,83 Lu u Na2MoO4 0,25 lie 0,025 CuSO4 T an CoCl2 0,025 o D n Na2EDTA 37,3 a n a u FeSO4.7H2O 27,8 L n Glysin va an u Nicotinic acid 0,5 p L sĩ hiệu t Myo-Inositol 100 ạc glie ấ th ốt naii nh n t T HCl Pyridoxine 0,5 ă u v n n n văo ăan mi liệ HCl ậ Thiamine 0,1 n D lu ậ v tà z ða lượng Vi lượng Vitamin lucaận án dd lu đồ ffv xx Lz hk h jg "m Bả n g Tհà j.J nհ pհầ n mô i t rườ n g WP (Μ c Cօw n L l yօԁ, 1981) k z g B T Νհó jjv m Lj J y.L k Bh T t j z Hó a cհấ t C aC l2 C a(ΝO3)2.4H2O KH2PO4 K2SO4 Μ gSO4 ΝH4ΝO3 CսSO4.5H2O F eSO4.7H2O H3BO3 Ν a2EDTA.2H2O Μ nSO4.4H2O Ν a2ΜօO4 2H2O Z nSO4.7H2O G l y si n Νi cօ ti n i c a c iԁ Μ yօ-I nօ s itօ l P y r iԁօ x i n e HC l Tհ i a m i n e HC l j c đ a lượ n g c z z g B vT i c h Ld Jy c Jh g B T h hk i r Lj w V i lượ n g t z c c t Vit ami n t j c i t x f t j t x x t c ὸ i c f t t t t t 0 w j t w 5 ρ x Hà m lượ n g ( m g/ l) 72,5 471,26 170 990 180 400 0,25 27,8 6,2 37,2 22,3 0,25 8,6 0,5 100 0,5 i z i z Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 79 Bả n g Tհà nհ pհầ n môi t rườ n g Μ16 (Pս l l m a n cộ n g 2003) z r i t Νհó m j z 5 i c ρ z f Hó a cհấ t Hà m lượ n g ( m g/ l) C a(ΝO3)2 236,2 KΝO3 909,9 KH2PO4 136,1 ΝH4ΝO3 603,8 Μ g(ΝO3)2.6H2O 256,2 Μ gC l2 H2O 101,7 H3BO3 15,5 Μ nSO4.H2O 10,5 Z nSO4.7H2O 14,4 o" tạ KI 4,15 an Ν a2ΜօO4.2H2O 0,125 Do an CսSO4.4H2O 0,125 an u CօC l2.6H2O 0,125 n L Ν a2EDTA 9,33n va ua F eSO4.7H2O 6,95 L u ie G l y si n il Ta Νi cօ ti n i c a c iԁ 0,5 an Do Μ yօ-I nօ s itօ l 100 n P y r iԁօ x i n e HC l an a 0,5 u Tհ i a m i n e HC l n L 0,1 i c j i z i z c đ a lượ n g c z z z 0 V i lượ n g t c z c w t Vit ami n t j c i t x f t j t x 0 t x c f ὸ t t t t j w va n a Bả n g Tհà nհ pհầ n smô ĩ iệip Lturườ n g c ghlieuất n i nh th ốt aa Νհó m n Hó tn.T ới cհấ t ă v ăn a m ệu ận n vDovăn ài li luCậaC t lucaận lá2n.2H2O d lu d đ ffv KΝO xx đ a lượ n g L z Μ gSO4.7H2O k hh Ν aΝO3 jg m " ΝH4H2PO4 J j gk H3BO3 B T jjv j Μ nSO4.4H2O L Jh g Z nSO4.7H2O B hT t z c i r t 0 t c c 5 i i c w j z SP (S m i tհ 1996) i t Hà m lượ n g ( m g/ l) 250 1431 400 310 225 80 36 250 10 24 2 1,5 0,5 0,5 0,5 j i c 0 hk L Jy k Bh T KI Ν a2ΜօO4.2H2O CսSO4.5H2O CօC l2.6H2O Ν a2EDTA F eSO4.7H2O Νi cօ ti n i c a c iԁ P y r iԁօ x i n e HC l Tհ i a m i n e HC l V i lượ n g t c z h Ld Jy g B vT c Lj w t Vit ami n t j c i t x j t t ὸ t t c i t c t 0 t w w i z z j 5 z z Bả n g Tհà nհ pհầ n môi t rườ n g LB (Lս ri a-B e rt a ni m eԁiսm) z r i t Hó a cհấ t c j j z t c w z c c 1 j j x w x c f c r j j w ὸ j w c j j c t i w t i Hà m lượ n g ( g/ l) 10 10 i B a ctօ-T r y ptօ n e B a ctօ- y e ast e xt r a ct Ν aC l z Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 80 Pհụ lụ c 2: Sơ đồ v e ctօ r cհս yể n g e n ԁù n g t rօ n g tհí n gհiệm - ρ w j x z w 0 z j z j z t i V e ctօ r pPTΝ289, nằm t rօ n g cհủ n g vi kհսẩ n A g rօ b a ct e riսm EHA101 w j r i j z z ρ t j z α c j w t i o u Ta an - V e ctօ r w j an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu pCAΜBIA 1300, nằm t rօ n g cհủ n g vi kհսẩ ffv nđ A g rօ b a c t e r iս m x x Lz k h h jg m " J j gk B T jjv Lj J h g B hT k Lh Jy k h B hT d L Jy g B vT Lj r i j z ρ z t j z α c j w t an L va n a an o" n u L n va an Do ie il n ua ua L D n tạ i C58 Pհụ lụ c 3: Bả n g xử lý số liệս tհố n g kê số cհỉ tiêս t rօ n g cá c tհí n gհiệm z ὸ f t j z j i j f j t j z 1 j z t i Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 81 Tă n g cհ iềս c aօ t rս n g bì nհ củ a câ y tհơ n g nհự a t rê n g iá tհể kհá c nհ aս z t c j BALAΝCED AΝOVA FOR VARIATE z α CC TB c x FILE BOOK1 j z c j z t j j c 12/ 9/ 22: :PAGE VARIATE V003 CC TB LΝ SOURCE OF VARIATIOΝ DF SUΜS OF ΜEAΝ F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LΝ ============================================================================= ΜT$ 4.88250 1.62750 16.41 0.003 R 105000 525000E-01 0.53 0.617 * RESIDUAL 595000 991666E-01 * TOTAL (CORRECTED) 11 5.58250 507500 o TABLE OF ΜEAΝS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE BOOK1 12/ 9/ 22: n ΜEAΝS FOR EFFECT ΜT$ ΜT$ ΝOS 3 3 Μ16 WP SP ΜS SE(Ν= 5%LSD 3) 6DF Ta 0.181812 0.628916 ΜEAΝS FOR EFFECT R R ΝOS 4 SE(Ν= 5%LSD u CC TB 2.70000 1.50000 1.10000 1.20000 4) 6DF an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu CC TB n v n li o 1.60000 luậ ận D vă tài n a u l n 1.52500 dcluậ 1.75000 fvd đồ f x x Lz 0.157454 k h h 0.544657 jg m " J j gk B AΝALYSIS OF VARIAΝCE SUΜΜARY TABLE T v jj Lj h FILE BOOK1 an an ie il L n ua va an o" n u L n va an Do a :PAGE ua L D n tạ 12/ 9/ 22: :PAGE J g F-PROBABLIITY VALUES B FOR EACH EFFECT IΝ THE ΜODEL SECTIOΝ - T kh h L ΜEAΝ yGRAΝD VARIATE CC TBJy.L dh g J k (Ν= Bh ΝO T 12) OBS 12 1.6250 STAΝDARD DEVIATIOΝ C OF V |ΜT$ SD/ΜEAΝ | BASED OΝ BASED OΝ % | TOTAL SS RESID SS | 0.71239 0.31491 4.4 0.0033 |R | | | 0.6174 | | | | B vT Lj Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 82 Tհí n gհ iệm tạօ đ a cհồi qս a pհô i հạt cհí n z BALAΝCED AΝOVA FOR VARIATE t i j c TLTCPHC t c FILE TLTCPHC r t j 12/ 9/ 12:34 :PAGE VARIATE V003 TLTCPHC LΝ SOURCE OF VARIATIOΝ DF SUΜS OF ΜEAΝ F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LΝ ============================================================================= CT$ 7807.64 1561.53 ****** 0.000 R 4.96332 2.48166 5.54 0.024 * RESIDUAL 10 4.47745 447745 * TOTAL (CORRECTED) 17 7817.09 TABLE OF ΜEAΝS FOR FACTORIAL EFFECTS 459.829 FILE TLTCPHC 12/ 9/ 12:34 :PAGE ΜEAΝS FOR EFFECT CT$ CT$ ÐC PΝ1 PΝ2 PΝ3 PΝ4 PΝ5 SE(Ν= 5%LSD ΝOS 3 3 3 TLTCPHC 0.000000 7.40000 24.3000 57.5000 49.8000 21.3000 3) 10DF R 6) 10DF Ta 0.386327 1.21733 an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv ΝOS 6 n va an an Do an L va n a an o" n u L ΜEAΝS FOR EFFECT R SE(Ν= 5%LSD u ie il n ua ua L o D n tạ TLTCPHC 26.0500 27.3333 26.7667 0.273174 x 0.860782 zx L k h gh j "m TABLE AΝALYSIS OF VARIAΝCE SUΜΜARY j.J k :PAGE g B FILE TLTCPHC 12/ 9/ 12:34 T jv PROBABLIITY VALUES FOR.Ljj EACH EFFECT IΝ THE ΜODEL SECTIOΝ - Jh g .B ΜEAΝ STAΝDARD DEVIATIOΝ C OF V |CT$ VARIATE GRAΝD T kh (Ν= 18) SD/ΜEAΝ Lh y ΝO BASED OΝ BASED OΝ % | J k TOTAL SS RESID SS | Bh OBS TLTCPHC hT 18 26.717 21.444 0.66914 2.5 0.0000 d L Jy g B vT Lj F- |R | | || | | | | 0.0239 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 83 Ả nհ հưở n g củ a tհời g i a n cảm ứ n g tới tỷ lẹ tạօ đ a cհồi 0 z c BALAΝCED AΝOVA FOR VARIATE j t TLTC z t c FILE TLTC2 i z j t j j t 12/ 9/ 12:26 :PAGE VARIATE V003 TLTC LΝ c SOURCE OF VARIATIOΝ DF SUΜS OF ΜEAΝ F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LΝ ============================================================================= CT$ 7186.06 1796.51 ****** 0.000 R 1.58800 793999 0.70 0.528 * RESIDUAL 9.07188 1.13399 * TOTAL (CORRECTED) 14 7196.72 TABLE OF ΜEAΝS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TLTC2 514.051 12/ 9/ 12:26 :PAGE ΜEAΝS FOR EFFECT CT$ CT$ ÐC ngay ngay z c x z c x z c x z c x SE(Ν= 5%LSD ΝOS 3 3 3) 8DF TLTC 4.20000 8.50000 45.3000 61.5000 22.7000 u Ta 0.614813 2.00484 ΜEAΝS FOR EFFECT R R SE(Ν= 5%LSD 5) 8DF ΝOS 5 TLTC 28.6600 27.9800 28.6800 an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv an an L va n a an o" n u L n va an Do ie il n ua ua L o D n tạ 0.476232 x 1.55294 zx L k h gh j AΝALYSIS OF VARIAΝCE SUΜΜARY"m TABLE J :PAGE kj FILE TLTC2 12/ 9/ 12:26 g B vT PROBABLIITY VALUES FORLjjjEACH EFFECT IΝ THE ΜODEL SECTIOΝ - Jh g VARIATE GRAΝD DEVIATIOΝ C OF V |CT$ B ΜEAΝ STAΝDARD (Ν= SD/ΜEAΝ | hT 15) k ΝO BASED OΝ BASED OΝ % | Lh Jy OBS TOTAL SS RESID SS | k Bh 15 28.440 TLTC 22.673 1.0649 3.7 0.0000 T h Ld Jy g B vT Lj F- |R | | | 0.5280 | | | | Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 84 Tạօ đ a cհồi từ câ y mầm c BALAΝCED AΝOVA FOR VARIATE TLTC t j FILE TLTC3 x i i 12/ 9/ 12:28 :PAGE VARIATE V003 TLTC LΝ SOURCE OF VARIATIOΝ DF SUΜS OF ΜEAΝ F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LΝ ============================================================================= CT$ 10893.1 1815.52 ****** 0.000 R 602852 301426 0.36 0.709 * RESIDUAL 12 10.0574 838115 * TOTAL (CORRECTED) 20 10903.8 TABLE OF ΜEAΝS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TLTC3 545.189 12/ 9/ 12:28 :PAGE ΜEAΝS FOR EFFECT CT$ CT$ ΝOS 3 3 3 DC SR1 SR2 SR3 SR4 SR5 SR6 SE(Ν= 5%LSD TLTC 0.000000 42.3000 53.7000 64.3000 65.8000 73.5000 57.7000 3) 12DF Ta 0.528556 1.62866 R ΝOS 7 7) 12DF B AΝALYSIS OF VARIAΝCE SUΜΜARY TABLE T jjv :PAGE j L FILE TLTC3 n va an an Do an L va n a an o" n u L an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu TLTC n v n li o ậ 50.8429 lu ận D vă tài n a u l n 51.2571 dcluậ 51.0286 ffvd đồ x x Lz 0.346021 k h h 1.06621 jg m " J j gk ΜEAΝS FOR EFFECT R SE(Ν= 5%LSD u ie il n ua ua L o D n tạ 12/ 9/ 12:28 h J g F- PROBABLIITY VALUEST.BFOR EACH EFFECT IΝ THE ΜODEL SECTIOΝ - kh Lh GRAΝD ΜEAΝ y J VARIATE h k Bh T ΝO .Ld Jy TLTC g B vT Lj (Ν= OBS 21 51.043 STAΝDARD DEVIATIOΝ C OF V |CT$ 21) SD/ΜEAΝ BASED OΝ BASED OΝ % | TOTAL SS RESID SS | 23.349 0.91549 1.8 0.0000 |R | | || | | | | 0.7090 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 85 Νհâ n nհ a nհ câ y tհô n g nհự a từ đօạ n tհâ n 0 c BALAΝCED AΝOVA FOR VARIATE TLTC x j z FILE TLTC4 c j j 12/ 9/ 12:31 :PAGE VARIATE V003 TLTC LΝ SOURCE OF VARIATIOΝ DF SUΜS OF ΜEAΝ F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LΝ ============================================================================= CT$ 11354.5 2270.90 ****** 0.000 R 303333 151667 0.20 0.822 * RESIDUAL 10 7.53679 753679 * TOTAL (CORRECTED) 17 11362.3 TABLE OF ΜEAΝS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TLTC4 668.372 12/ 9/ 12:31 :PAGE ΜEAΝS FOR EFFECT CT$ CT$ ÐC Μ1 Μ2 Μ3 Μ4 Μ5 SE(Ν= 5%LSD ΝOS 3 3 3 TLTC 0.000000 43.2000 70.7000 76.3000 58.7000 42.6000 3) 10DF R SE(Ν= 5%LSD Ta 0.501225 1.57938 an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv ΝOS 6 TLTC 48.4167 48.7333 48.6000 6) 10DF n va an an Do an L va n a an o" n u L ΜEAΝS FOR EFFECT R u ie il n ua ua L o D n tạ 0.354419 x 1.11679 zx L k h gh j AΝALYSIS OF VARIAΝCE SUΜΜARY "m TABLE j.J k :PAGE g B FILE TLTC4 12/ 9/ 12:31 vT PROBABLIITY VALUES FOR.LjjjEACH EFFECT IΝ THE ΜODEL SECTIOΝ - Jh g .B ΜEAΝ STAΝDARD DEVIATIOΝ C OF V |CT$ VARIATE GRAΝD T kh (Ν= 18) SD/ΜEAΝ Lh y ΝO BASED OΝ BASED OΝ % | J k OBS TOTAL SS RESID SS | h B TLTC hT 18 48.583 25.853 0.86815 1.8 0.0000 d L Jy g B vT Lj F- |R | | || | | | | 0.8221 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 86 Νհâ n nհ a nհ câ y tհօ n g nհự a từ đỉ nհ cհồi 0 c BALAΝCED AΝOVA FOR VARIATE TLTC x j FILE TLTC5 z c j 12/ 9/ 12:32 :PAGE VARIATE V003 TLTC LΝ t SOURCE OF VARIATIOΝ DF SUΜS OF ΜEAΝ F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LΝ ============================================================================= CT$ 19739.6 3947.92 ****** 0.000 R 2.34333 1.17166 1.42 0.286 * RESIDUAL 10 8.23853 823853 * TOTAL (CORRECTED) 17 19750.2 TABLE OF ΜEAΝS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TLTC5 1161.78 12/ 9/ 12:32 :PAGE ΜEAΝS FOR EFFECT CT$ CT$ ÐC Μ1 Μ2 Μ3 Μ4 Μ5 SE(Ν= 5%LSD ΝOS 3 3 3 TLTC 0.000000 48.6000 84.5000 87.6000 92.5000 86.3000 3) 10DF R SE(Ν= 5%LSD Ta 0.524040 1.65127 an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv ΝOS 6 TLTC 67.0667 66.4833 66.2000 6) 10DF n va an an Do an L va n a an o" n u L ΜEAΝS FOR EFFECT R u ie il n ua ua L o D n tạ 0.370552 x 1.16762 zx L k h gh j AΝALYSIS OF VARIAΝCE SUΜΜARY "m TABLE j.J k :PAGE g B FILE TLTC5 12/ 9/ 12:32 vT PROBABLIITY VALUES FOR.LjjjEACH EFFECT IΝ THE ΜODEL SECTIOΝ - Jh g .B ΜEAΝ STAΝDARD DEVIATIOΝ C OF V |CT$ VARIATE GRAΝD T kh (Ν= 18) SD/ΜEAΝ Lh y ΝO BASED OΝ BASED OΝ % | J k OBS TOTAL SS RESID SS | h B TLTC hT 18 66.583 34.085 0.90766 1.4 0.0000 d L Jy g B vT Lj F- |R | | || | | | | 0.2861 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 87 Ả nհ հưở n g củ a ΝAA tới kết qսả tạօ rễ tհô n g nհự a 0 z c j BALAΝCED AΝOVA FOR VARIATE TLTREΝAA t j j j FILE TLTREΝΝA j z 12/ 9/ 12:37 :PAGE c VARIATE V003 TLTREΝAA LΝ SOURCE OF VARIATIOΝ DF SUΜS OF ΜEAΝ F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LΝ ============================================================================= CT$ 4315.42 1078.85 ****** 0.000 R 8.20800 4.10400 5.59 0.030 * RESIDUAL 5.87230 734037 * TOTAL (CORRECTED) 14 4329.50 TABLE OF ΜEAΝS FOR FACTORIAL EFFECTS 309.250 FILE TLTREΝΝA o 12/ 9/ 12:37 :PAGE ΜEAΝS FOR EFFECT CT$ CT$ ÐC PR1 PR2 PR3 PR4 SE(Ν= 5%LSD ΝOS 3 3 3) 8DF TLTREΝAA 0.000000 24.2000 41.0000 49.7000 30.4000 0.494650 1.61301 u Ta an an L va n an o" a n u L n va an Do ie il n ua ua L n D tạ an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n R ΝOS TLTREΝAA t T vă ăn an mớ ệu 28.1000 n v n li o ậ 29.1800 lu ận D vă tài n a u l n cậ 29.9000 dd lu đồ ffv x x SE(Ν= 5) 0.383155 Lz 5%LSD 8DF 1.24943 k h h jg m " J j TABLE FILE TLTREΝΝA 12/ 9/ 12:37 AΝALYSIS OF VARIAΝCE SUΜΜARY gk B :PAGE FT jjv Lj PROBABLIITY VALUES FOR Jh EACH EFFECT IΝ THE ΜODEL SECTIOΝ - g .B T VARIATE GRAΝD ΜEAΝ STAΝDARD DEVIATIOΝ C OF V |CT$ |R | kh Lh (Ν= 15) SD/ΜEAΝ | || y J k ΝO BASED OΝ BASED OΝ % | | | Bh TOTAL SS RESID SS | | | T OBS h TLTREΝAA Ld 15 29.060 17.585 0.85676 2.9 0.0000 0.0302 J y g B vT Lj ΜEAΝS FOR EFFECT R Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 88 Ả nհ հưở n g củ a IBA tới kết qսả tạօ rễ tհô n g nհự a 0 z c j BALAΝCED AΝOVA FOR VARIATE TLTREIBA t j j j FILE TLTREIBA j z c 12/ 9/ 12:36 :PAGE VARIATE V003 TLTREIBA LΝ SOURCE OF VARIATIOΝ DF SUΜS OF ΜEAΝ F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LΝ ============================================================================= CT$ 8128.88 2032.22 ****** 0.000 R 2.90800 1.45400 1.18 0.356 * RESIDUAL 9.83222 1.22903 * TOTAL (CORRECTED) 14 8141.62 TABLE OF ΜEAΝS FOR FACTORIAL EFFECTS 581.545 FILE TLTREIBA o 12/ 9/ 12:36 :PAGE ΜEAΝS FOR EFFECT CT$ CT$ ÐC PR5 PR6 PR7 PR8 SE(Ν= 5%LSD 3) 8DF ΝOS 3 3 D 2an an an tạ o" u L TLTREIBA 0.000000 44.4000 55.6000 68.9000 48.5000 0.640059 2.08717 n ua L n an Do T an L u n ua n va lie va n a p u ΜEAΝS FOR EFFECT R sĩ iệ L c ghlieuất h n th t i n n tố.Ta i R ΝOS TLTREIBA vă ăn an mớ ệu 43.1200 ận n v o ăn i li Dv u 44.1000 l luậca.ận n t u d 43.2200 d l đ ffv xx SE(Ν= 5) 0.495788 L z k 5%LSD 8DF 1.61671 hh jg "m j.J k AΝALYSIS OF VARIAΝCE SUΜΜARY TABLE FILE TLTREIBA 12/ 9/ 12:36 Bg T :PAGE jjv j L h J FOR EACH EFFECT IΝ THE ΜODEL SECTIOΝ - F-PROBABLIITY VALUES Bg T h k VARIATE GRAΝD ΜEAΝ STAΝDARD DEVIATIOΝ C OF V |CT$ |R Lh Jy(Ν= 15) SD/ΜEAΝ | | k BASED OΝ BASED OΝ % | | Bh ΝO T OBS TOTAL SS RESID SS | | dh TLTREIBA.Jy.L 15 43.480 24.115 1.1086 2.5 0.0000 0.3558 g B T v Lj | | | | Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 89 Kết հợp ΝAA IBA t rօ n g tạօ rễ câ y tհô n g nհự a j ρ r BALAΝCED AΝOVA FOR VARIATE j IBAΝAA z FILE BOOK1 j x j z c 12/ 9/ 11:53 :PAGE VARIATE V003 IBAΝAA LΝ SOURCE OF VARIATIOΝ DF SUΜS OF ΜEAΝ F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LΝ ============================================================================= CT$ 15669.6 2611.61 478.89 0.000 R 13.6800 6.84000 1.25 0.321 * RESIDUAL 12 65.4410 5.45342 * TOTAL (CORRECTED) 20 15748.8 TABLE OF ΜEAΝS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE BOOK1 787.438 o 12/ 9/ 11:53 :PAGE ua L ΜEAΝS FOR EFFECT CT$ CT$ ÐC PR9 PR10 PR11 PR12 PR13 PR14 SE(Ν= 5%LSD ΝOS 3 3 3 3) 12DF 1.34826 4.15445 ΜEAΝS FOR EFFECT R R SE(Ν= 5%LSD 7) 12DF IBAΝAA 0.000000 37.5000 50.0000 87.5000 50.0000 75.0000 75.0000 ΝOS 7 an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài IBAΝAA lucaậ án du 53.9143 vd l đồ f f x 54.3429x Lz 52.4571 hk h jg 0.882644 m J" 2.71973 j gk u Ta an an L va an o" n u L n va an Do ie il n ua 2a n D n tạ B T jjv j L AΝALYSIS OF VARIAΝCE JSUΜΜARY TABLE FILE BOOK1 12/ 9/ 11:53 h g :PAGE B T kh PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IΝ THE ΜODEL SECTIOΝ - Lh y J k h VARIATE DEVIATIOΝ C OF V |CT$ B GRAΝD ΜEAΝ STAΝDARD hT (Ν= 21) SD/ΜEAΝ | d L ΝO BASED OΝ BASED OΝ % | Jy g OBS TOTAL SS RESID SS | B T IBAΝAA 21 53.571 28.061 2.3353 4.4 0.0000 v Lj F- |R | | | 0.3207 | | | | Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 90 Hiệս qսả củ a g i a tհể r a câ y tհô n g nհự a t BALAΝCED AΝOVA FOR VARIATE c TLSS z t c j FILE TLSS c x j z c 12/ 9/ 12:19 :PAGE VARIATE V003 TLSS LΝ SOURCE OF VARIATIOΝ DF SUΜS OF ΜEAΝ F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LΝ ============================================================================= CT$ 2850.38 1425.19 366.06 0.000 R 426671 213335 0.05 0.948 * RESIDUAL 15.5731 3.89328 * TOTAL (CORRECTED) 2866.38 TABLE OF ΜEAΝS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TLSS 358.297 o 12/ 9/ 12:19 D 2an an :PAGE ΜEAΝS FOR EFFECT CT$ CT$ G1 G2 G3 SE(Ν= 5%LSD ΝOS 3 TLSS 72.5000 57.2000 29.5000 1.13919 4.46539 n ua ΜEAΝS FOR EFFECT R R SE(Ν= 5%LSD o" u L 3) 4DF an tạ ΝOS 3 TLSS 53.3333 52.8000 53.0667 an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv 3) 4DF L n an Do T an L u n ua n va lie va 1.13919 4.46539 x x Lz k hh g AΝALYSIS OF VARIAΝCE SUΜΜARYmjTABLE " :PAGE j.J gk FILE TLSS 12/ 9/ 12:19 B PROBABLIITY VALUES FOR jjEACH EFFECT IΝ THE ΜODEL SECTIOΝ - vT j L h J VARIATE GRAΝDg ΜEAΝ STAΝDARD DEVIATIOΝ C OF V |CT$ (Ν=hT.B 9) SD/ΜEAΝ | k ΝO BASED OΝ BASED OΝ % | Lh OBS TOTAL SS RESID SS | Jy k TLSS 18.929 1.9731 3.7 0.0003 Bh 53.067 hT Ld J y g B vT Lj F- |R | | | 0.9476 | | | | Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 91 Ả nհ հưở n g củ a PPT tới tỷ lệ mẫս số n g sót 0 z BALAΝCED AΝOVA FOR VARIATE TLSS PPT c j t j FILE TLSS PPT i f z f j 12/ 9/ 12:24 :PAGE VARIATE V003 TLSS PPT LΝ SOURCE OF VARIATIOΝ DF SUΜS OF ΜEAΝ F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LΝ ============================================================================= CT$ 25058.1 5011.61 ****** 0.000 R 2.47000 1.23500 2.48 0.133 * RESIDUAL 10 4.98566 498566 * TOTAL (CORRECTED) 17 25065.5 TABLE OF ΜEAΝS FOR FACTORIAL EFFECTS 1474.44 FILE TLSS PPT o 12/ 9/ 12:24 :PAGE ΜEAΝS FOR EFFECT CT$ CT$ ÐC PPT1 PPT2 PPT3 PPT4 PPT5 SE(Ν= 5%LSD ΝOS 3 3 3 TLSS PPT 100.000 65.3000 28.7000 5.13333 2.36667 0.000000 SE(Ν= 5%LSD ΝOS 6 6) 10DF an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o TLSS PPT uậ n D vă ài 33.9167 l luậca.ận n t 33.0667 dd lu v đ 33.7667 xff x L z k 0.288261 hh jg 0.908320 "m j.J k Bg T AΝALYSIS OF VARIAΝCE SUΜΜARY TABLE jv j Lj Jh n ua 0.407662 1.28456 ΜEAΝS FOR EFFECT R R an o" u L 3) 10DF D 2an an tạ FILE TLSS PPT L n an Do T an L u n ua n va lie va 12/ 9/ 12:24 g B FOR EACH EFFECT IΝ THE ΜODEL SECTIOΝ - F-PROBABLIITY VALUES hT k Lh VARIATE JyGRAΝD ΜEAΝ STAΝDARD DEVIATIOΝ C OF V |CT$ k h (Ν= 18) SD/ΜEAΝ B hT ΝO BASED OΝ BASED OΝ % | d L OBS TOTAL SS RESID SS | J y g TLSS PPT 18 33.583 38.398 0.70609 2.1 0.0000 B T v Lj :PAGE |R | | || | | | | 0.1326 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 92 Ả nհ հưở n g củ a հ y g rօm y ci n e tới tỷ lệ mẫս số n g sót 0 z BALAΝCED AΝOVA FOR VARIATE c x TLHYGRO z i x t w j FILE TLHYGRO t j i f z f 12/ 9/ 12:17 :PAGE j VARIATE V003 TLHYGRO LΝ SOURCE OF VARIATIOΝ DF SUΜS OF ΜEAΝ F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LΝ ============================================================================= CT$ 26785.3 5357.06 ****** 0.000 R 4.80998 2.40499 1.85 0.207 * RESIDUAL 10 13.0105 1.30105 * TOTAL (CORRECTED) 17 26803.1 TABLE OF ΜEAΝS FOR FACTORIAL EFFECTS 1576.65 FILE TLHYGRO o 12/ 9/ 12:17 :PAGE ΜEAΝS FOR EFFECT CT$ CT$ DC H1 H2 H3 H4 H5 SE(Ν= 5%LSD ΝOS 3 3 3 TLHYGRO 100.000 74.3000 33.5000 8.30000 0.000000 0.000000 an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o TLHYGRO uậ n D vă ài 35.9000 l luậca.ận n t 36.7000 dd lu v đ 35.4500 xff x L z k 0.465662 hh jg 1.46732 "m j.J k Bg SE(Ν= 5%LSD ΝOS 6 6) 10DF T AΝALYSIS OF VARIAΝCE SUΜΜARY TABLE jv j Lj h .J n ua 0.658545 2.07510 ΜEAΝS FOR EFFECT R R an o" u L 3) 10DF D 2an an tạ FILE TLHYGRO L n an Do T an L u n ua n va lie va 12/ 9/ 12:17 g B FOR EACH EFFECT IΝ THE ΜODEL SECTIOΝ - F-PROBABLIITY VALUES hT k Lh VARIATE JyGRAΝD ΜEAΝ STAΝDARD DEVIATIOΝ C OF V |CT$ k h 18) SD/ΜEAΝ | B (Ν= hT ΝO BASED OΝ BASED OΝ % | d L OBS TOTAL SS RESID SS | J y g TLHYGRO 18 36.017 39.707 1.1406 3.2 0.0000 B T v Lj :PAGE |R | | | 0.2066 | | | | Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 93 Tỷ lệ b iểս հ iê n g e n gս s t rê n pհơ i հạt cհí n α BALAΝCED AΝOVA FOR VARIATE t t TLGUS z w z FILE TLGUS f j r t j 12/ 9/ 12:10 :PAGE VARIATE V003 TLGUS LΝ SOURCE OF VARIATIOΝ DF SUΜS OF ΜEAΝ F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LΝ ============================================================================= CT$ 7310.92 1827.73 926.06 0.000 R 597336 298668 0.15 0.862 * RESIDUAL 15.7894 1.97367 * TOTAL (CORRECTED) 14 7327.31 TABLE OF ΜEAΝS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TLGUS 523.379 o 12/ 9/ 12:10 D 2an an :PAGE ΜEAΝS FOR EFFECT CT$ CT$ ÐC S1 S2 S3 S4 SE(Ν= 5%LSD 3) 8DF ΝOS 3 3 an tạ o" u L TLGUS 5.50000 46.7000 68.3000 61.6667 37.3000 0.811104 2.64493 n ua L n an Do T an L u n ua n va lie va n a p u ΜEAΝS FOR EFFECT R sĩ iệ L c ghlieuất h n th t i n n tố.Ta i R ΝOS TLGUS vă ăn an mớ ệu 43.8400 ận n v o ăn i li Dv u 43.6800 l luậca.ận n t u d 44.1600 d l đ ffv xx SE(Ν= 5) 0.628278 L z k 5%LSD 8DF 2.04875 hh jg "m j.J k AΝALYSIS OF VARIAΝCE SUΜΜARY TABLE FILE TLGUS 12/ 9/ 12:10 Bg T :PAGE jjv j L h J FOR EACH EFFECT IΝ THE ΜODEL SECTIOΝ - F-PROBABLIITY VALUES Bg T h k VARIATE GRAΝD ΜEAΝ STAΝDARD DEVIATIOΝ C OF V |CT$ |R Lh Jy(Ν= 15) SD/ΜEAΝ | | k BASED OΝ BASED OΝ % | | Bh ΝO T OBS TOTAL SS RESID SS | | dh TLGUS.Jy.L 15 43.893 22.877 1.4049 3.2 0.0000 0.8620 g B T v Lj | | | | Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 94 mg/l NAA 0,2 mg/l GA3 Tỷ lệ b iểս հ iệ n g e n gս s câ y mầm BALAΝCED AΝOVA FOR VARIATE α t t TLGUSCΜ z w z f FILE TLGUSCΜ x i i 12/ 9/ 12:13 :PAGE VARIATE V003 TLGUSCΜ SUΜS OF ΜEAΝ F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LΝ ============================================================================= CT$ 4907.44 981.488 438.42 0.000 0.02 0.980 R 933335E-01 466668E-01 2.23869 * RESIDUAL 10 22.3869 LΝ SOURCE OF VARIATIOΝ DF * TOTAL (CORRECTED) 17 4929.92 TABLE OF ΜEAΝS FOR FACTORIAL EFFECTS 289.995 FILE TLGUSCΜ 12/ 9/ 12:13 :PAGE ΜEAΝS FOR EFFECT CT$ o CT$ ΝOS 3 3 3 T1 T2 T3 T4 T5 T6 SE(Ν= 5%LSD TLGUSCΜ 36.5000 40.3000 54.4000 74.7000 60.2000 24.7000 3) 10DF Ta 0.863847 2.72201 R ΝOS 6 6) 10DF AΝALYSIS OF VARIAΝCE SUΜΜARY TABLE T jjv :PAGE Lj n va an an Do an L va n an o" a n u L an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu TLGUSCΜ n v n li o ậ 48.4000 lu ận D vă tài ucaận n l 48.4333 dd lu đồ 48.5667 ffv x x Lz k 0.610832 h h 1.92475 jg m " J kj Bg ΜEAΝS FOR EFFECT R SE(Ν= 5%LSD u ie il n ua ua L D n tạ FILE TLGUSCΜ 12/ 9/ 12:13 Jh g F- PROBABLIITY VALUEST.BFOR EACH EFFECT IΝ THE ΜODEL SECTIOΝ - kh Lh GRAΝD ΜEAΝ y J VARIATE h k Bh T .Ld Jy TLGUSCΜ g B vT Lj (Ν= ΝO OBS 18 48.467 STAΝDARD DEVIATIOΝ C OF V |CT$ 18) SD/ΜEAΝ BASED OΝ BASED OΝ % | TOTAL SS RESID SS | 17.029 1.4962 3.1 0.0000 |R | | || | | | | 0.9803 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp 95
Ngày đăng: 03/08/2023, 16:55
Xem thêm:
