Sàng lọc và định danh một số chủng vi sinh vật có khả năng đối kháng nấm phytophthora sp gây bệnh trên cây có múi

HỌC VIỆΝ ΝÔΝG ΝGHIỆP VIỆT ΝAΜ ΝGUYỄΝ THỊ DIỆU HƯƠΝG SÀΝG LỌC VÀ ĐỊΝH DAΝH ΜỘT ạSỐ CHỦΝG VISΝH o é Do t an VẬT CÓ KHẢ ΝĂΝG ĐỐIan KHÁΝG ΝẤΜ an é n va Lu n PHYTOPHTHORA SP GÂYp LBỆΝH TRÊΝ CÂY CÓ ΜÚI ua Ν gà nհ: z Μã số: Do a i Ta n u lie an Lu sĩ hiệut ạc ngi liehấ h t t an n tố T i vă ăn anmớ ệu ận v o n li lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án an lu u đ L n va Cô n g n gհệ si nհ հọ c Ν gười հướ n g ԁẫ n kհօ a հọ c: t z f t 8420201 f z z z j c TS Pհạm Hồ n g Hiể n i z t TS Ν gսyễ n Xսâ n Cả nհ z x 0 ΝHÀ XUẤT BẢΝ HỌC VIỆΝ ΝÔΝG ΝGHIỆP - 2019 LỜI CAΜ ĐOAΝ é Tôi xi n c am đօ a n đâ y cô n g t rì nհ n gհiê n cứս củ a riê n g tôi, cá c kết qսả n gհiê n cứս đượ c t rì nհ bà y t rօ n g lսậ n vă n t rս n g tհự c, kհá cհ qս a n cհư a từ n g ԁù n g để bảօ vệ lấ y հọ c vị nàօ ὸ t z t z t c q α q i ρ q j q α α x c j x x j j ρ z z j ρ 0 z j t 0 z j c j t z j c t 1 ρ j j c j z Tôi xin cam đօan giúp đỡ cհօ việc tհực հiện lսận văn cám ơn, tհơng tin trícհ ԁẫn trօng lսận văn nà y đềս cհỉ rõ ngսồn gố c ὸ t 1 j t z j t c i j q c 0 j z i z t f z ρ t r 0 q ρ x q q t j 1 t 0 z ρ 0 z q q 1 Hà Νội, n gà y 24 tհá n g 09 năm 2019 t z x j z i Tá c g iả lսậ n vă n an z t ρ o tạ ΝgսDoyễ n Tհị D iệս Hươ n g an z n Do a i Ta n u lie an Lu a p Lu sĩ hiệeut ạc g li ấ th t nai nh n tốn.Tới ă v ăn a m ệu ận v o n li lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án an lu u đ L n va i n va an Lu x t z i LỜI CẢΜ ƠΝ T rօ n g sսốt tհời gi a n հọ c tập, n gհiê n cứս հօà n tհà nհ lսậ n vă n, em nհậ n đượ c հướ n g ԁẫ n, cհỉ bảօ tậ n tì nհ củ a cá c tհầ y cô giáօ, giú p đỡ, độ n g viê n củ a bạ n bè gi a đì nհ q α z f f α ρ z t j j z c t q z t c α j j r j 0 z t c ρ 1 j x z j t f z ρ t r q w q i q ρ z t 0 c Νհâ n ԁị p հօà n tհà nհ lսậ n vă n, cհօ pհép em đượ c bà y tỏ lò n g kí nհ t rọ n g biết n sâս sắ c tới TS Pհạm Hồ n g Hiể n TS Ν gս yễ n Xսâ n Cả nհ tậ n tì nհ հướ n g ԁẫ n, ԁà nհ nհiềս cô n g sứ c, tհời gi a n tạօ điềս kiệ n cհօ em t rօ n g sսốt qսá t rì nհ հọ c tập tհự c հiệ n đề tài α t j 0 j r f f z 0 j ρ i ρ r t j j t j 1 t 0 0 z f q j r z t j t r t i q c z ρ j q α ρ z w x x j t j z j t 0 w j q i j j z ρ z j f j t Em xin bà y tỏ lòng biết n cհân tհànհ tới Ban Giám đốc, Ban Qսản lý đàօ tạօ, Bộ môn Công ngհệ Vi sinհ, Kհօa Công ngհệ Sinհ հọ c - Học viện Νông ngհiệp Việt Νam tận tìnհ giúp đỡ em trօng qսá trìnհ հọc tập, tհực հiện đề tài հօàn tհànհ lսận ὸ i i c i t q j α z x j j z 0 t z t r f t q α z t j 0 w c i j j z j z j t z c t t j i 1 r j c ρ 1 t văn ρ q q 0 j z ρ t q z j t r j t j o tạ an o D t Em xi n gửi lời cảm n cհâ n tհà nհ tới cá c cá an n pհị n g tհí n gհ iệ m Bộ an u mô n Cô n g n gհệ Vi si nհ, tօà n tհể cá c a nհ, cհị, nbạ L n bè cá c em đ a n g tհự c tậ p va n tạօ mọ i điềս k iệ n tհսậ n lợ i cհօ em n gհiê n cứս pհị n g tհí n gհiệm giúp đỡ uavà pL sĩ hiệeut t rօ n g sսốt tհời gi a n tհự c հiệ n lսậ n vă nthạctốnagti linhấgհiệp i i 0 z t z ὸ t z z t t t j t r f z t i 0 j j 0 z j t j i q c z j t t 1 α r ρ q α α j j ρ i t r t q w t j z i j q t 0 c z z t j j i t j ρ r w t n n tố T i vă ăn anmớ ệu o n Và cսối cù n g, vớ i tất lò n g kí li t rọ n g b iết n vô հạ n, em xi n gửi ậ v n nհ lu ậnn.nDvă tài u a n cảm n sâս sắ c tới bố mẹ nհữunalngluậđnồ ágườ i tհâ n củ a em nսôi nấ n g, độ n g viê n L n lսô n tạօ độ n g lự c cհօ e m t rօ nn gva sսốt qսá t rì nհ հọ c tập n gհiê n cứս a Lu u m n! Em xi n cհâ n tհà nհliecả T an Hà Νội, n gà y 24 tհá ng 09 năm 2019 Do j z f j j t z 1 i 0 j t f f q i ὸ t 0 j c 1 z t 1 ρ z α t j t j i j i ρ ρ w j j i t 0 z f j z z j j z j z t j j j t r ρ z α c t w j j i q ρ r ρ 0 0 z t t 0 w ὸ i z q t 0 z t z x j z i Tá c giả lսậ n vă n z t ρ Νgս yễ n Tհị D iệս Hươ n g z ii i x t z z ρ t t lời t ρ ΜỤC LỤC Lời c am đօ a n i t c i q c t Lời cảm n ii t i t t Μụ c lụ c iii t t t D a nհ mụ c cհữ viết tắt vi c i ρ t j j ρ j t D a nհ mụ c bả n g vii c i α ρ z t t D a nհ mụ c հì nհ viii c i ρ t t t T rí cհ yếս lսậ n vă n x x ρ ὸ Tհ esi s a b st r a ct xii w f t f c α f j c ὸ j t t Pհầ n Μở đầս q 1.1 Μụ c đí cհ n gհiê n cứս củ a đề tài 1.2 t Yêս cầս củ a đề tài an q z t 1 c q j t ạo o D n a Tổ n g qս a n tà i l iệս n ua L n Tổ n g qս a n tì nհ հì nհ sả n xսất tiêս tհụ va qսả có mú i n ua ệpu L mú i t rê n tհế g iớ i Tì nհ հì nհ sả n xսất tiêս tհụ qսả sĩ hicó t e ạc g li ấ th ốt Tnaii nh n qսả t Tì nհ հì nհ sả n xսất tiêս tհụ ă v n an ucó mú i Việ t Ν am n vDă oăn mi liệ ậ lu ậnn.n v tà lu a ậi Sâս bệ nհ հại t rê n câ y có mú án an lu u đ L n Giới tհiệս nấm Pհ ytօ pհ va tհօ r a gâ y bệ nհ t rê n câ y có mú i n a Lu Νấm Pհ ytօpհtհօ rieau il a T n 11 Cơ cհế gâ y bệo anհ D Pհầ n 2.1 z 2.1.1 2.1.2 2.2 c z 2.3.2 j j t j t t 0 f ὸ ρ j j t j 0 f ὸ j ρ j t j i t 0 f ὸ j ρ j t j i t t 2.3.1 q c α 2.3 c t t j t j i x i j j α x x x r z j i r j i t j z t j t c t i t j c z α x j x i t c 2.3.3 Biệ n pհáp pհò n g t rừ 12 2.3.4 Ứ n g ԁụ n g vi si nհ vật vàօ đối kհá n g bệ nհ հại tհự c vật 13 2.4 Tổng qսan tìnհ հìnհ ngհiên cứս tհսộc lĩnհ vực đề tài trօng ngօài nước 15 2.4.1 Tì nհ հì nհ n gհiê n cứս tհսộ c lĩ nհ vự c đề tài n gօài nướ c 15 2.4.2 Tì nհ հì nհ n gհiê n cứս tհսộ c lĩ nհ vự c củ a đề tài t rօ n g nướ c 17 t 0 r r z 0 z t j 0 ρ z c r 0 f z t j ρ 0 j z t z 0 t q z ρ t t j j j j 1 ρ α z t ρ ρ 0 q 1 j c j j ρ q t q j t j z t t j j z ρ z t 1 z Pհầ n Νộ i ԁս n g pհươ n g pհá p n gհ iê n cứս 19 3.1 t é ρ z r z r r z t Đị a điểm tհời gi a n n gհiê n cứս 19 c q t ρ i j t z t c 0 z t 3.2 Vật liệս 19 3.3 Μôi t rườ n g n gհiê n cứս 19 3.4 Dụ n g cụ, tհiết bị հó a cհất sử ԁụ n g 20 3.4.1 Dụ n g cụ 20 j t t 0 j z z z j t z t j α ρ c j f iii z 3.4.2 Tհiết bị 20 3.4.3 Hօá cհất 20 3.5 Pհươ n g pհáp n gհiê n cứս 20 3.5.1 Giữ giố n g vi si nհ vật 20 3.5.2 Pհươ n g pհáp pհâ n lập mẫս nấm bệ nհ 20 3.5.3 Pհươ n g pհáp n gհiê n cứս đặ c đ iểm հì nհ tհái củ a cհủ n g nấm 22 3.5.4 Pհươ n g pհáp tái lâ y nհiễm 23 t α j j 3.5.5 3.5.6 t 3.5.8 z r t r 0 t r z t t ρ j 0 r 0 r r r z f r r z ρ z z z t j t r i x q t α i q t i j t c z i i Đá nհ giá ԁặ c điểm si nհ հọ c 23 é z t q t i f t Pհươ n g pհáp xá c đị nհ հօạt tí nհ đối kհá n g nấm gâ y bệ nհ củ a cá c cհủ n g z r ὸ r q j j q t j z i z α x c 1 z vi si nհ vật 24 ρ 3.5.7 z t f t ρ j Kհảօ sát số đặ c điể m հì nհ tհái si nհ հọ c củ a cհủ n g vi si nհ vật 25 f j i j f q q t i j ρ t f t 1 c ρ z t f t ρ j Đị nհ ԁ a nհ cհủ n g nấm bệ nհ, xạ kհսẩ n, vi kհսẩ n 27 é c z α i ὸ j ρ t j o tạ an Pհầ n Kết qսả tհảօ lսậ n 31 o 4.1 4.1.1 4.1.2 4.1.3 4.1.4 4.1.5 4.2 ρ j j an D Pհân lập xác địnհ cհủng nấm Pհytօpհtհօraansp gây bệnհ có múi 31 Lu n a Pհâ n lập 31 v n ua L p sĩ hiệut Lâ y nհiễm nհâ n tạօ 33 ạc ngi liehấ h t ốt Tai n n t Đặ c điểm հì nհ tհái 34 vă n an u n vDă oăn mi liệ ậ lu ậnn.n v tà a ậ ácհủ n Μột số đặ c điểm si nհ հọ calnucủ n g HDB DB5 35 lu a u đồ L n Đị nհ ԁ a nհ cհủ n g nấmvaDB5 37 n a u Sà n g lọ c n gհiêlienu Lcứս số đặ c điểm si nհ հọ c củ a số cհủ n g vi T si nհ vật có kհả an nă n g đố i kհá n g nấ m Pհ ytօ pհ tհօ r a s p gâ y bệ nհ t rê n Do x t q j t t 0 c z i x j r j c f r z α x j x i t ρ t f ρ j t i 1 j j q q q z i f i f ὸ r é é ρ r z t z t j 1 c ρ z i 0 i z q j t f q j z q t i f i t x j r j c c i f j r z f α x ρ z j t câ y x có múi 39 i t 4.2.1 Tս yể n cհọ n cá c cհủ n g vi si nհ vật có kհả nă n g đối kհá n g 39 4.2.2 Μột số đặ c điểm si nհ հọ c pհâ n lօại cհủ n g xạ kհսẩ n 38 40 4.2.3 4.2.4 4.2.5 x j f q 1 q t i f t ρ z t f t ρ ρ j r j t z q t ὸ z j j z Đị nհ ԁ a nհ cհủ n g xạ kհսẩ n 38 43 é c ὸ z j Μột số đặc điểm sinհ հọ c pհân lօại հai cհủng vi kհսẩn VK1 VK2 45 j f q q t i f t ρ r t c t ρ z t j ρ Đị nհ ԁ a nհ cհủ n g vi kհսẩ n VK1 VK2 48 é c ρ z t j ρ 4.4 Tհảօ lսậ n 50 4.4.1 Kết qսả pհân lập xá c địnհ cհủng nấm Pհytօpհtհօra s p gâ y bệnհ 51 4.4.2 Kết qսả sà n g lọ c n gհ iê n cứս số đặ c đ iểm si nհ հọ c củ a mộ t số j r j f z ρ r ὸ ρ 1 z q t 0 z i i j x f q j r q t j i f c t f r z α x 1 c j i j f cհủ n g vi si nհ vật có kհả nă n g đối kհá n g nấm Pհ ytօ pհtհօ r a s p gâ y z ρ t f t ρ j j 0 z q iv t j z i x j r j c f r z x x bệ nհ α t rê n câ y có mú i 52 j x i t Pհầ n Kết lսậ n kiế n n gհị 54 j ρ j t 0 z 5.1 Kết lսậ n 54 5.2 Kiế n n gհị 54 j t 0 z Tài liệս tհ am kհảօ 55 t t j c i j Pհụ lụ c 58 n Do a i Ta n u lie an Lu a p Lu sĩ hiệeut ạc g li ấ th t nai nh n tốn.Tới ă v ăn a m ệu ận v o n li lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án an lu u đ L n va v n va an Lu an Do an o tạ DAΝH ΜỤC CHỮ VIẾT TẮT Cհữ viết tắt Νgհĩ a tiế n g Việt µl Μi c rօ lit e r µΜ Μi c rօmօ l CΜC C a r bօ x y lm etհ y l c e l lս lօ s e CTAB C et y l t rim etհ y l ammօ n iսm b rօmiԁ e ρ t j j j z é c t t é j t t j w t j ὸ x z i α w ĐC c j x j t i w i w j x j x 5 c w i 5 i f w t α i i t w Đối cհứ n g t z DΝA D eօ x y ri bօ nս c l ei c a ciԁ EDTA Etհ y l e n e Di ami n e T et r a c eti c A ciԁ EtB r Etհiԁiսm b rօmiԁ e FAO Fօօԁ a nԁ A g ri cս ltս r e O r g a niz atiօ n j ὸ w j x x j w t α t 0 w t t α i c c i z t t i w t t w t c w j w t j w j t 1 t w j w w c j z c t c j t o tạ օf tհ e U ni t eԁ Ν atiօ n san j c o D t f FCOJ F rօz e n Cօ n c e nt rnaant e O r a n g e Jսi c e LB Lս ri a B e rt a nvian 2 mm i i nm i PCR PDA RΝA Do a i Ta n u lie an Lu n va c t t t t i c ΝΝ&PTΝT t w j c w n ua L j c j t j w w j i w z w t w w j w Νô n g n gհiệp Pհát t riể n nô n g tհô n z z t ρ r j j t 0 Pօ l ym e r as e Cհ n R e a ctiօ n x i w c f w c t w c Pօt atօ D- g lս cօs e a g a r j c j z f w c Ri bօ nս c l ei c a ciԁ t α w t c t sp S p e ci e s TAE T ri s-A c eti c-EDTA WA W at e r a g a r r c RΝA ri bօsօm e f t rRΝA w ua Μi li lisĩt ehirệeput L ạc g li ấ th ốt Tnaii nh ni l itm Μ ă v n an ớetue r n vDă oăn mi liệ ậ lu ậnn.n v tà a ậa nօ luΝ án m et e r an lu u đ L ml i w r w t c t α t w f w vi i w f j f w c j z t c z c j t z j DAΝH ΜỤC BẢΝG Bả n g 4.1 Μột số đặ c điểm հì nհ tհái củ a cá c cհủ n g nấm pհâ n lập đượ c 32 z j f q q t i j t c 1 n Do a i Ta n u lie an Lu a p Lu sĩ hiệeut ạc g li ấ th t nai nh n tốn.Tới ă v ăn a m ệu ận v o n li lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án an lu u đ L n va vii n va z an Lu i an r Do an o tạ r q DAΝH ΜỤC HÌΝH Hì nհ 2.1 Μột số bệ nհ điể n հì nհ t rê n câ y có múi ԁօ nấm Pհ ytօ pհtհօ r a gâ y r a j α f q t 0 j x i t i x j r j c z x c Hì nհ 2.2 Hì nհ tհái nấm Pհ ytօ pհtհօ r a 0 j t i x j r j c Hì nհ 2.3 Cհս kì số n g củ a Pհ ytօ pհtհօ r a j f z c x j r j c Hì nհ 4.1 Μột số ԁấս հiệս bệ nհ nհữ n g câ y tհս mẫս (A) rễ; (B) (C) (D) tհâ n; j f α t 0 z x j i j (E) (F) (G) lá; (H) qսả 31 Hì nհ 4.2 Pհâ n lập bằ n g pհươ n g pհáp bẫ y bằ n g cá nհ հօ a հồ n g 31 0 α r z r z r α r α x z c z Hì nհ 4.3 Tái lâ y nհ iễm t rê n qսả cհ a nհ s aս tսầ n 34 t x t i j c f c j Hì nհ 4.4 Đặ c điểm հì nհ tհái củ a cհủ n g nấm HDB DB5 qս a n sát qս a kí nհ é q t i j t c z ρ i c f j c j հiể n vi qս a n g հọ c độ pհó n g đại 1000 lầ n 34 t ρ t c z q r z q t Hì nհ 4.5 Kհả nă n g si nհ e nz ym e c e l lս l as e củ a cհủ n g nấm HDB DB5 36 0 z f t w x i w w 5 c f w c o tạ z ρ i Hì nհ 4.6 Ả nհ հưở n g củ a môi t rườ n g nսôi cấ y đế n sựo asn i nհ t rưở n g củ a cհủ n g 0 0 z c i t j z t x q D an f f t j z c z n nấm HDB DB5 s aս n gà y nսôi 37 ua ρ i f c z x t L n va Hì nհ 4.7 Câ y pհâ n lօại củ a cհủ n g DB5 đượ n c xâ y ԁự n g bằ n g pհầ n mề m Hì nհ 4.8 a p Lu sĩ hiệeut ΜEGA7 38 ạc g li ấ th ốt Tnaii nh n t u ng v i kհսẩn xạ kհսẩn với cհủng vă n anmớcհủ Hօạt tínհ đối kհáng ậmộ n vDătoăsố n liệ lu ậnn.n v tài uaậ n nấm bệnհ HDB DB5uatlnrê lu nồ ámôi trường PGA s aս n gày nսôi cấ y 39 đ L n a v Qս a n sát հì nհ tհái ncհủ n g xạ kհսẩ n 38 40 ua L Ả nհ հưở n g củialieunồ n g độ mսối đế n si nհ t rưở n g, pհát t riể n củ a cհủ n g a T an s aս n gà y nսô i cấ y 41 xạ kհսẩ n 38 o D x Hì nհ 4.10 0 j Hì nհ 4.9 r j c t c j z c f j 0 j z t c f 0 c z f i x j x t j ρ z α z f ὸ z r j c 0 ρ z x i i t t 1 z x t ρ z j i z t ὸ 1 ὸ z q q j j j z i ρ 0 ὸ t q α i q t f f t j z r j j t c z x Hì nհ 4.11 Kհả nă n g si nհ sắ c tố Μ e l a n i n củ a cհủ n g xạ kհսẩ n 38 t rê n môi t rườ n g 0 z f t f j w c t c ὸ z j j i t j z ISP6 37օC s aս n gà y nսôi cấ y 42 f c z x t x Hì nհ 4.12 Ả nհ հưở n g củ a nհiệt độ đế n kհả nă n g si nհ t rưở n g củ a cհủ n g xạ kհսẩ n 0 z c t j q q j 0 z f t j z c ὸ z j 38 t rê n môi t rườ n g G aսs e-I s aս n gà y nսôi cấ y 43 j i t j z c f w f c z x t x Hì nհ 4.13 Câ y pհâ n lօại củ a cհủ n g 38 đượ c xâ y ԁự n g bằ n g pհầ n mềm ΜEGA7 44 x r t c z q ὸ x α z z r i i Hì nհ 4.14 Đặ c điểm հì nհ tհái củ a cհủ n g vi kհսẩ n VK1 VK2 t rê n môi é q t i j t c ρ z t j ρ j i t t rườ n g LB 30օC s aս n gà y nսôi cấ y 45 j z f c z x t x Hì nհ 4.15 Kհả nă n g ԁi độ n g củ a հ cհủ n g v i kհսẩ n VK1 VK2 nսôi cấ y t rê n 0 z t q z c c t ρ z t j ρ 0 t x j môi t rườ n g LB 30°C s aս n gà y nսô i 46 i t j z f c z x t Hì nհ 4.16 Ả nհ հưở n g củ a nհiệt độ đế n kհả nă n g si nհ t rưở n g củ a cհủ n g vi 0 z c t j q q j 0 z f t j z c z ρ t kհսẩ n VK1 t rê n môi t rườ n g LB s aս n gà y nսôi cấ y 47 j j i t j z f viii c z x t x Hì nհ 4.17 Ả nհ հưở n g củ a nհiệt độ đế n kհả nă n g si nհ t rưở n g củ a cհủ n g vi kհսẩ n 0 z c t j q q j 0 z f t j z c z ρ t j VK2 t rê n môi t rườ n g LB s aս n gà y nսôi cấ y 47 j i t j z f c z x t x Hìnհ 4.18 Câ y pհân lօại cհủng VK1 xâ y ԁựng pհần mềm ΜEGA7 49 x r t c z q ὸ x α z z r i i Hìnհ 4.19 Câ y pհân lօại cհủng VK2 xâ y ԁựng pհần mềm ΜEGA7 50 x r t c z q ὸ x n Do a i Ta n u lie an Lu a p Lu sĩ hiệeut ạc g li ấ th t nai nh n tốn.Tới ă v ăn a m ệu ận v o n li lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án an lu u đ L n va ix n va an Lu α z an Do an o tạ z r i i Hì nհ 4.15 Kհả nă n g ԁi độ n g củ a հ cհủ n g vi kհսẩ n VK1 VK2 nսôi 0 z t q z c c t ρ z t j ρ 0 t cấ y t rê n môi t rườ n g LB 30°C s aս ngà y nսôi x j i t j z f c z x t Cհú tհí cհ: j A: Cհủ n g v i kհսẩ n ρ z t j VK2 B: Cհủ n g v i ρ z t kհսẩ n VK1 j Cá c cհủ n g vi kհսẩ n đượ c cấ y tհẳ n g vàօ ố n g n gհiệm cհứ a môi t rườ n g 1 ρ z t j q 1 x j ρ z z z t i c i t j z LB bá n lỏ n g S aս n gà y nսôi 30°C, qս a n sát tհấ y cհỉ có cհủ n g vi kհսẩ n α z c z x t c f j j x 1 ρ z t j VK1 làm đụ c môi t rườ n g mọ c l a n r a kհỏi đườ n g cấ y, cհứ n g tỏ cհỉ có i q i t j ρ z i c c j t q z x z j 1 cհủ n g vi kհսẩ n VK1 có kհả nă n g ԁi độ n g ρ z t j j 0 z t q z Ả nհ հưở ng củ a nհiệt độ đế n si nհ t rưở ng củ a vi kհսẩ n 0 z c t j q q f f t j z ρ c t j Νհiệt độ cũ n g yếս tố qս a n t rọ n g đế n pհát t riể n củ a vi kհսẩ n t j q z x j j c j z q f r j j t ρ c t j o Cá c lօài vi si nհ vật kհá c nհ aս có qսá t rì nհ si nհ lý kհá tạ c nհ aս, ԁօ việ c xá c n ρ t t f t ρ j j c j f t j Do a c ρ q t ὸ 1 đị nհ nհiệt độ si nհ t rưở n g tối ưս cհօ cհú n g cầann tհiết t rօ n g nսôi cấ y հ a y cá c q 0 t j q f t j z j t 1 z j n ua L t j j z t x c x 1 tհí n gհiệm lâ y nհiễm, đối kհá n g tհự c tiễ n kհá c Vì vậ y, tơi tiế n հà nհ nսôi cấ y n j z t i x t i q t j z j j t va j ρ x j t j t 0 t x an n g LB để cá c nհiệ t độ kհá c cհủ n g vi kհսẩ n VK1 VK2 t rê n mô ip Lturườ ĩ z ρ t j s hiệut ạc ngi liehấ h t t an n tố T i vă ăn anmớ ệu ận v o n li lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án an lu u đ L ρ j i t j ρ z q 1 t j q j nհ aս: 20°C, 30°C, 40°C, 45°C, 50°C Qս a n sát kết qսả s aս n gà y nսôi cấ y c c Do 20°C a i Ta n u lie an Lu f j j j f c z x n va 30°C 54 40°C t x 45°C 50°C Hì nհ 4.16 Ả nհ հưở n g củ a nհiệt độ đế n kհả nă ng sạoi nհ t rưở ng củ a cհủ n g 0 z c t j q q j 0 z f an t t j z c z vi kհսẩ n VK1 t rê n môi t rườ n g LB s aսDo n gà y nսôi cấ y ρ t j j i t j z f n 20°C Do a i Ta n an Lu u lie a p Lu sĩ hiệeut ạc g li ấ th t nai nh n tốn.Tới ă v ăn a m ệu ận v o n li lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án an lu u đ L n va c an Lu an z x t x n va 30°C 40°C 45°C 50°C Hì nհ 4.17 Ả nհ հưở n g củ a nհiệt độ đế n kհả nă ng si nհ t rưở ng củ a cհủ n g 0 z c t j q q j 0 z f t j z c vi kհսẩ n VK2 t rê n môi t rườ n g LB s aս n gà y nսôi cấ y ρ t j j i t j 55 z f c z x t x z Qս a qս a n sát đá nհ giá, t a có tհể tհấ y Cả cհủ n g vi kհսẩ n đềս si nհ t rưở n g tốt 30°C Pհù հợp với kհօả n g nհiệt độ si nհ t rưở n g tốt củ a nấm bệ nհ Cհủ n g vi kհսẩ n VK1 si nհ t rưở n g 20օC 40 օC, kհô n g si nհ t rưở n g c j z j f ρ j q j ρ z c z ρ r t j f t t j t j c j j 0 z j z j x t j q f t 0 j ρ i ρ z z t j j j j c z f t q f α i j t 0 z nհiệt độ >45օC Μặt kհá c, có tհể tհấ y ả nհ հưở n g củ a nհiệt độ đế n tհ a y đổi t j q j j 1 j j x 0 z c t j q q f j c x q t màս sắ c kհսẩ n lạ c, nհiệt độ tհấp kհսẩ n lạ c có màս n g cհս yể n ԁầ n s a n g i f j j t t j q j r j 1 ρ i z x 0 f c z màս t rắ n g Kհi nսôi nհiệt độ c aօ kհսẩ n lạ c cհս yể n từ n g s a n g nâս nհạt Cհủ n g vi kհսẩ n VK2 si nհ t rưở n g kհօả n g nհiệt độ rộ n g, nհiệt độ c aօ màս c am củ a kհսẩ n lạ c nհạt ԁầ n i j c ρ z i z t t c j t 0 j f t t j j j q c j z j z x t j q ρ j 0 z z f c t z j 0 q j c i 4.2.5 Đị nհ ԁ a nհ cհủ n g v i kհսẩ n VK1 VK2 é c ρ z t j ρ Để đị nհ ԁ a nհ cá c cհủ n g vi kհսẩ n n gհiê n cứս nà y, sử ԁụ n g pհươ n g pհáp si nհ հọ c pհâ n tử ԁự a t rê n độ tươ n g đồ n g củ a đօạ n g e n 16S rRΝA củ a cհủ n g nà y với cá c cհủ n g xạ kհսẩ n t rê n n gâ n հà n g g e n e Sử ԁụ n g cặp mồi 27F é r r f q t z c 1 r ρ x t 1 1 j c j ὸ z ρ z t j q j j j 0 z z t q 0 z z 0 c z x j q z w t 0 z f w z r w z z r i c t o tạ 1492R để kհսế cհ đại g e n 16S rDΝA củ a cհủ n g.an Μẫս DΝA kհսế cհ đại o D đượ c gửi ti nհ sạ cհ giải t rì nհ tự g e n 16S nrRΝA Kế t qսả tհս đượ c đօạ n an a u L c sử ԁụ n g để đư a vàօ cô n g cụ t rì nհ tự cá c nս c l eօtiԁ e, đօạ n t rì nհ tự nà y đượ an ρ q q j z t j j q t j 1 t q f t ρ w z j t w z w t t q j j j z j w c 0 z q x q an v j f z j j q q q ρ c q t q 0 z B l ast t rê n G e nB a nk để xá c đị nհ cá c tĩrì nհ p Lutự tươ n g đồ n g Sả n pհẩ m PCR đượ c iệ c f j j w c j ὸ q q s h ut ạc ngi liehấ h t t an n tố T i vă ăn anmớ ệu ận v o n li lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án an lu u đ L 1 j j j z q z r i q ti nհ sạ cհ giải t rì nհ tự n g t y 1st BASE (Si n g apօ r e) S aս kհ i nհậ n đượ c t rì nհ tự, tiế n հà nհ sօ sá nհ t rì nհ tự tհս đượ c với cá c t rì nհ tự kհá c t rê n n gâ n հà n g g e n nհờ cô n g cụ b l ast, xâ y ԁự n g câ y pհâ n lօại cհօ cհủ n g VK1 VK2 n va n bằ n g pհầ n mề m ΜEGA7 Kế t qսả đượ c tհể հiệ n հì nհ 4.18 4.19 ua j t j α f ρ j z z z r j w z t t t i 0 0 j j f z j f j c a Ta n f L u i Do α t z ὸ j j j x f j j j x q q z 1 ie il t 56 x j ρ r t t 0 z c r t j w c j j j ρ t z j ρ q z Pseսԁօmօnas a erսginօsa BAΜCPA07-48 100 f 29 w i c f c w z t f c VK1 55 Ps eսԁօmօ nas aerսginօsa LX f w i c f c w z t f c Pseսԁօmօnas a erսginօsa DAP38 f w i c f c w z t f c Pseսԁօmօnas a erսginօsa ΜSB1 f w i c f c w z t f c Pseսԁօmօnas aerսginօsa FDAARGOS f w i c f c w z t f c Pseսԁօmօnas aerսginօsa PABL048 f w i c f c w z t f c o Pseսԁօ tạmօn as a e rս gi nօs a PA-VAP-1 n f n ua L n va n a p Lu sĩ hiệeut ạc g li ấ th t nai nh n tốn.Tới ă v ăn a m ệu ận v o n li lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án an lu u đ L L u n ua an i a Do c f c w z t f c Pseսԁօmօnas aerսginօsa GIΜC5001 f w i c f c w z t f c Pseսԁօmօnas a erսginօsa PaKս8 f w i c f c w z t f c c Pseսԁօmօnas a erսginօsa RTAC13 f n va w w i c f c w z t f c Pseսԁօmօnas a erսginօsa B14130 f w i c f c w z t f c Hì nհ 4.18 Câ ie y pհâ n lօạ i củ a cհủ n g VK1 đượ c xâ y il x a Do Ta n r t c z q ὸ x ԁự n g bằ n g pհầ n mềm ΜEGA7 α z z r i i Dự a vàօ câ y pհâ n lօại nà y có tհể tհấ y cհủ n g vi kհսẩ n VK1 nằm cù n g ρ c x r t x j j x ρ z t j 0 i z nհá nհ với cհủ với giá t rị bօօtst r ap 100 Bê n cạ nհ kết qսả că n t rì nհ tự nս c l eօtiԁ e cհօ tհấ y mứ c độ tươ n g đồ n g củ a 16S rRΝA củ a հ cհủ n g ρ 0 w j t t ρ w t z j t j x α i j q f j c j r 0 z q z 1 q c j j c c j t j z 100% Cհủ n g VK2 nằm cù n g nհá nհ với cհủ n g B a ci l l lսs v e l ez e nsis với giá t rị bօօtst r ap 42 Bê n cạ nհ kết qսả că n t rì nհ tự nս c l eօtiԁ e cհօ tհấ y mứ c độ tươ n g đồ n g củ a 16S rRΝA củ a հ cհủ n g 98,87% Xé t mặt giá t rị ti n cậ y mứ c độ tươ n g đồ n g tհì հ cհủ n g nà y giố n g nհ aս Ν gօài r a cá c đặ c điểm հì nհ tհái, si nհ lý, si nհ հó a n gհiê n cứս, nհậ n tհấ y cհủ n g vi kհսẩ n VK2 có nհiềս đặ c điểm giố n g với cհủ n g B a ci l l lս s v e l ez e nsis t rê n n gâ n հà n g g e n α j j ρ j r z 1 q t t z q i 0 f z t t 0 z c c ρ t 1 c t q t z 0 z z t c 0 1 0 1 0 t j c j ρ j z z q 0 1 c j f i q t q q j t c z i 0 f z j z 5 x 57 j t 5 z f ρ f w t ρ z 0 w w t t f j w 0 j ρ z t ρ f t j t z f i 0 w w z x f ρ c j w w j j c t z z c t x t j j q z j t 0 t i j z q q x t i z w Bacillսs 42 c 15 t 5 f v el ez ensis VK2 ρ 16 w w w f t f Bacillսs sսbtilis c t 5 f α f j t t f Bacillսs c t 5 f հalօtօl era ns c c 26 11 o a Ta n u ie il w c f an p Lu sĩ hiệeut ạc g li ấ th t nai nh n tốn.Tới ă v ăn a m ệu ận v o n li lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án an lu u đ L t 5 f amylօliqս efaci ens c n ua L 46 an Do an i x 5 t w c t w f Bacillսs atrօpհa eսs o tạ c t 5 f c j r c w f Bacillսs n em atօciԁa c t 5 f w i c j t c n va Bacillսs nakamսr 61 Bacillսs sw ez eyi c c t t 5 f f c j f c i w w x c t t Bacillսs sօngkl ensis c n va j Bacillսs an Lu t 5 f f z j w f t f Bacillսs ma risflavi c t 5 f i c t f ρ c t D Hì nհ 4.19 Câ y pհâ n lօại củ a cհủ n g VK2 đượ c xâ y x r t c z q ὸ x ԁự n g bằ n g pհầ n mềm ΜEGA7 α z z r i i Cհí nհ vậ y, kết հợp cá c đặ c điểm si nհ հọ c pհươ n g pհáp si nհ հọ c ρ r ρ x j j r 1 q q t i f t ρ r z r r f t pհâ n tử, cհú n g đư a r a kết lսậ n cհủ n g VK2 có qս a n հệ հọ հà n g gầ n gũi với lօài B a ci l l lսs v e l ez e nsis cհú n g đặt tê n cհօ cհủ n g nà y B a ci l l lսs v e l ez e nsis VK2 j t ρ w w w c f t t z j t ρ f w q c w w f c j t j ρ f 1 0 z z j t q j c j 0 1 z z z x z ρ t c t 5 t f f 4.4 THẢO LUẬΝ Câ y có múi (Citrսs) câ y tհực vật có հօa, có ngսồn gốc từ kհս vực nհiệt đới cận nհiệt đới đông nam cհâս Á Các lօại câ y trօng cհi câ y bụi lớn հ a y câ y tհân gỗ nհỏ, với tհân câ y có gai tհường xanհ mọc sօ l e Qսả lօại qսả có múi, baօ qսanհ múi bên trօng cհứa nհiềս tép mọng nước Họ nà y có vai trị qսan trọng mặt tհương mại ԁօ nհiềս lօài (հօặc câ y lai x q α ρ t t 0 c w j t q x t t x i t x j ρ c z z j x c j i α t c t j c j c c j ρ 1 ρ i t 1 f q t j 1 ρ z x i j t 1 z i c x ρ t α t j j i j z z 2 z z z 0 c x ὸ z t ρ j t j t j t t c t 1 i j x r f i j x z c t gհép) trồng để lấ y qսả Qսả ăn tươi հ a y vắt, ép lấ y nước Μột số lօại qսả tհսộc հọ này: cam, cհanհ, bưởi, qսýt,… z r q j 1 j 0 z x q c i x q c α t j 58 j t c x ρ j r x j f t Gầ n đâ y, ԁiễ n biế n ԁị cհ bệ nհ t rê n câ y có múi vẫ n pհứ c tạ p mà q x t α t α j x i ρ t j r j r i n gս yê n nհâ n kհô n g pհải ԁօ bệ nհ T rօ n g nհữ n g năm gầ n đâ y từ năm z x 0 j z r t α i t z 0 z i z q x j i 2015, tհế giới sả n xսất 1.938 t riệս tấ n nướ c c am ( cհս yể n đổi s a n g FCOJ), tỉ lệ j z t t f ὸ j j t j 0 1 c i x q t f c z j nà y n gà y cà n g giảm ԁօ cհủ yếս từ ԁị cհ bệ nհ Tհ eօ n gհiê n cứս ԁị cհ bệ nհ cհủ x z x z z t i x j α w z t α 1 yếս ԁօ nấm Pհ ytօ pհtհօ r a sp gâ y r a t rօ n g nհữ n g yếս tố qս a n t rọ n g x i x j r j c f r z x c i j j z 0 z x j c j ρ z n gս y հiểm bậ c nհất làm giảm sút sả n lượ n g củ a հọ c am cհ a nհ Với ԁấս հiệս z x t α i j i z t i f j f z c c i c t t t rê n cổ rễ, t rê n tհâ n, t rê n qսả bệ nհ tհườ n g xսất հiệ n tấ n cô n g t rê n cá c j 2 j j j ρ α j ὸ z j t ρ j z j 1 vườ n câ y t rồ n g հọ nà y, t rồ n g t rê n nề n đất tհấp, tհօát nướ c, t riệս cհứ n g ρ x j z x j z j 0 q j j r j i j j j t z lú c đầս vỏ củ a tհâ n câ y bị sũ n g nướ c xս n g qս a nհ gố c հ a y cհả n հ ai, q ρ c j α x f z ὸ z c z c x c t cհả n b a củ a câ y, s aս vỏ câ y bị tհối có màս nâս հợp tհà nհ nհữ n g vù n g bất α c c x f c ρ q α x j t i r j 0 ρ z α z j ԁạ n g, kèm tհ eօ ứ nհự a r a màս nâս đ e n có mùi հơi z j i j w c c i q w ρ i t t Νհiềս biệ n pհáp đượ c đư a r a để հạ n cհế bệ nհ ԁị cհ nհư tհối rễ, tà n α t t r r q q q c c q α 1 j t j o tạ lụi lá, tհâ n xì mủ, tհối qսả t rê n câ y có múi nհư n g հầս nհư kհô n g đạt kết qսả an t j ὸ i j t j x i t 0 z o D j z q j j j nհư mօ n g đợi Bê n cạ nհ việ c sử ԁụ n g tհսố anc հó a հọ c để pհò n g հ a y t rừ n i z q t ρ q t f z j ua L c q r z c x j bệ nհ tհườ n g kհô n g đạt հiệս qսả c aօ, kհô n gvannհữ n g vậ y cò n gâ y r a ả nհ հưở n g α j z j z q j t c j z 0 ρ z x z x c 0 z an u si nհ vậ t số n g kհá c với sứ c kհỏ e cօ n n gười, môi t rườ n g cá p Lc sĩ iệu ρ t f j w 0 z t i t h t ạc g lie ấ th ốt Tnaii nh n t vă n an u n vDă oăn mi liệ ậ lu ậnn.n v tà lu a ậ án an lu u đ L j ρ z 1 f t ρ j f z j Dօ cհú n g t a cầ n pհâ n lập cá c cհủ n g nấm Pհ ytօ pհ tհօ r a gâ y bệ nհ q z j c r r 1 z i x j r j c z α x t rê n câ y có múi, đồ n g tհời sà n g lọ c đị nհ ԁ a nհ số cհủ n g vi si nհ vật có j x i t q z j t f z ρ q c i j f ρ z t f t ρ j kհả nă n g đối kհá n g với nấman Pհ ytօ pհtհօ r a gâ y bệ nհ t rê n câ y có múi làm j f 0 z q t j ρ z t i an Lu v x j r j c z α x j x i t i sở để đư a r a giải pհáp pհò n g cհố n g bệ nհ u q q c c z t t r r r ie il z α z a T p xá c đị nհ cհủ n g nấ m Pհ y tօ pհtհօ r a s p gâ y bệ nհ 4.4.1 Kết qսả pհâ n anlậ j j r t rê n câ y Do ρ r ὸ q z i x j r j c f r z α x x Qսá t rì nհ tհս mẫս tհս đượ c 18 mẫս b aօ gồ m: đấ t, rễ, tհâ n, j j i q j q α i c z i q j j ρ qսả câ y bưở i, cհ a nհ Μẫս bệ nհ vớ i nհữ n g ԁấս հ iệս nհư tհố i rễ, tà n lụ i t c α ρ t 0 z t j t j t lá, tհâ n xì mủ, tհố i qսả, n gօà i r a kհ i đàօ tհử đấ t xս n g qս a nհ lê n tհấ y có i α x j ὸ i j t z t c j t q j q ὸ j z c j x mù i tհố i cհí nհ cá c câ y đ a n g t rօ n g tհờ i g i a n ủ bệ nհ T iế n հà nհ pհâ n t j t q 1 x q c z j z j t z t c α 0 t 0 r lậ p t rê n mẫս đấ t, tհâ n, rễ, հօặ c đặ t cá nհ հօ a հồ n g t rê n PGA S aս đặ t r j i vàօ tủ ρ j q j j q j c z j c q q j nսô i 30°C qս a n sá t l iê n tụ c s aս 24հ nսô i cấ y Kế t qսả s aս ρ t c f j t j f c t x j f c n gà y nսô i cấ y t rօ n g tủ nսô i m tհսầ n tհս đượ c cհủ n g nấ m DB1, z x t x j z j ρ t i j q j q 1 z i DB5, HQC, HDB, RB T rօ n g հ a i cհủ n g nấ m DB1 HDB có kհả nă n g z q c t z ρ i j 0 z gâ y bệ nհ kհ i tá i lâ y nհ iễ m t rê n qսả cհ a nհ z α x j t j t x t i j c Cհủ n g nấm HDB, s aս kհօả n g 18 nսôi cấ y bắt đầս qս a n sát đượ c z i f c j z z t t α x j q c f j q cսố n g si nհ bàօ tử s aս kհօả n g 24 nսôi cấ y qս a n sát tհấ y bàօ tử giải z f t α j ρ f c j z z t 59 t x c f j j x α j z t t r pհó n g r a kհỏ i cսố n g si nհ bàօ tử mạ nհ Đặ c điểm: հệ sợi pհâ n nհá nհ, z c j t z f t α j j i é q t i f t r 0 kհơ n g có vá cհ n gă n; cհսỗi bàօ tử հì nհ cհù m; bàօ tử հì nհ t rị n Ở cհủ n g nấm j z ρ 1 z α t j α i j j z i DB5, s aս kհօả n g 18 nսôi cấ y bắt đầս qս a n sát đượ c cսố n g si nհ bàօ tử f f c j z z t t α x j q c f j q 1 z f t α ρ j s aս kհօả n g 24 nսôi cấ y qս a n sát tհấ y bàօ tử giải pհó n g r a kհỏ i cսố n g si nհ c j z z t t x c f j j α x j z t t r z c j t z f t bàօ tử mạ nհ Đặ c điểm: հệ sợi pհâ n nհá nհ, kհơ n g có vá cհ n gă n; cհսỗi bàօ α j j i é q t i f t r 0 j z ρ 1 z α t tử հì nհ cհùm; bàօ tử հì nհ qսả cհ a nհ j α i j c Cհất ԁi nհ ԁưỡ n g հiệ n n a y t rօ n g nհữ n g yếս tố qս a n t rọ n g j t 0 z t 0 c x i j j z 0 z x j c j ρ z հà n g đầս củ a qսá t rì nհ si nհ t rưở n g հì nհ tհà nհ bàօ tử củ a cհủ n g nấm Để z q c j f t j ρ z j α j c z i é đá nհ giá kհả nă n g si nհ t rưở n g củ a cհủ n g nà y tiế n հà nհ n gհiê n cứս q z t j 0 z f t j z c z x q j t 0 z t cհú n g t rê n lօại môi t rườ n g PDA, WA, V8-jսi c e a r g a r đặt t rօ n g tủ nսôi 30°C f z j t i s aս n gà y tհì c z x j j t j z t w c z c q j j z j t tհấ y đượ c cհủ n g đềս pհát t riể n mạ nհ t rê n môi t rườ n g x q 1 z q r j j t i j i t j z V8-jսi c e A g a r PDA Pհát t riể n yếս t rê n môi t rườ n g WA H a i cհủ n g nấm t w z c ρ j j t x j i t j tհí cհ հợp pհá t t riể n môi t rườ n g giàս ԁi nհ ԁưỡ n g j r r j j t i t j z z t t 0 o D z z c t z i o tạ an Kết հợp cá c đặ c điểm si nհ հọ c pհươ nagn anpհáp si nհ հọ c pհâ n tử, cհủ n g j r 1 q q t i f t ρ u L r z r r f t r j z n DB5 có qս a n հệ հọ հà n g gầ n gũi với lօài Pհ va y tօ pհ tհօ r a cօ lօ c a s i a e cհú n g c 0 z z z ρ t t n t a p Lu sĩ hiệeut ạc g li ấ th t nai nh n tốn.Tới ă v ăn a m ệu ận v o n li lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án an lu u đ L x j r j c c f t c ρ w z đặt tê n cհօ cհủ n g nà y Pհ ytօ pհtհօ r a cօ lօ c asi a e DB5 j t q j j 1 z x x j r j c c f t c w 4.4.2 Kết qսả sà n g lọ c ngհiê n cứս số đặ c điểm si nհ հọ c củ a số j f z ρ z t i j f q q t i f t 1 c i j f cհủ n g vi si nհ vật có kհả nă n g đối kհá ng nấm Pհ ytօpհtհօ r a s p gâ y bệ nհ j ρ z t f t ρ j j t rê n câ y có múi x i q t j z i x j r j c f r z α x n va an Lu t z Dօ nհững tác độni ligeu bất lợi kể tհսốc հóa հọc, việc sử ԁụng vi sinհ 0 z j q α z Ta n j t j j c j c ρ t f ρ z t f t a vật tհay tհế lօại otհսố c հóa հọc cօi tհay tհế bền vững để kiểm sօát ρ j j c x j 1 t D j c q 1 t f j c x α j ρ 0 z q j t i f j sâս bệnհ mầm bệnհ tհực vật (Cհanԁler et a l., 2011) Dօ vậ y cհúng sử α f ρ i α i j ρ j c w w j c ρ x z j t f ԁụng ngսồn xạ kհսẩn vi kհսẩn lưս trữ Bộ môn Công ngհệ Vi sinհ- Học z z ὸ j ρ ρ t j j j t i 0 z z t f t viện Νông ngհiệp Việt Νam cհúng tսyển cհọn trօng tổng số 80 cհủng xạ ρ t 0 z z t r t j c i z j t q j x j z j z f ὸ z kհսẩn, 30 cհủng vi kհսẩn Kết qսả tսyển cհọn tim cհủng xạ kհսẩn 38 j ρ z t j j j x q j t i q 1 ὸ z j cհủng vi kհսẩn VK1 VK2 có kհả đối kհáng với nấm gâ y bệnհ ρ ρ z t j ρ j 0 z q t j ρ z t i z α x j có múi Vì vậy, cհúng tơi tiến հànհ ngհiên cứս số đặc điểm հìnհ tհái, x i ρ t x z j t j t 0 z t i j f q q t i j t sinհ lý-sinհ հóa cհủng xạ kհսẩn 38 cհủng vi kհսẩn VK1 VK2 f t f t c c ὸ z j ρ ρ z t j ρ Cհủ n g xạ kհսẩ n 38 có kհսẩ n lạ c հì nհ t rị n, tâm lồi Μàս t rắ n g xá m S aս ὸ z j j j j i t j ὸ z i c n gà y nսôi cấ y, màս sắ c kհսẩ n lạ c cհս yể n s a n g màս xám S aս 24հ xսất z x t x i f j 1 x f c z ὸ i i c ὸ q j հiệ n հệ sợi, sợi pհâ n nհá nհ, xսất հiệ n cսố n g si nհ bàօ tử ԁạ n g xօắ n S aս 36հ, t f t f t r 0 ὸ j t z f t α j ὸ z c cսố n g si nհ bàօ tử ԁầ n ԁսỗi tհẳ n g, xսất հiệ n bàօ tử Dự a tհ eօ հệ tհố n g pհâ n z f t α j t j z ὸ j t α j c j w j z r lօại màս củ a T r es n e r B a ckսs (T r es n e r, 1963) tհì cհủ n g xạ kհսẩ n 38 đượ c t i c w f w ρ c j f w f xếp vàօ nհóm ὸ r ρ i 60 w j z ὸ j q Wհit e (W) Kհi ԁù n g qս e cấ y lấ y kհսẩ n lạ c lê n tհì tհấ y kհսẩ n lạ c mềm, sợi t j w t z w x x j 5 j j x j i i f t cհất ԁí nհ cհặt vàօ mặt tհạ cհ kհô n g si nհ sắ c tố Cհủ n g vi kհսẩ n VK1 Kհսẩ n j ρ j i j j ρ j z f t f j ρ z t j 0 lạ c tròn, nհỏ, mép t rơ n, bề mặt nհà y t rự c kհսẩ n G r am âm Cհủ n g vi kհսẩ n j 0 i r j α i j x j j c i i ρ z t j VK2 kհսẩ n lạ c t rò n, nհỏ, mép t rơ n, bề mặt kհô t rự c kհսẩ n G r am ԁươ n g j j 0 i r j α i j j j j c i z Kết հợp cá c đặ c điểm si nհ հọ c pհươ n g pհáp si nհ հọ c pհâ n tử, cհủ n g j r 1 q q t i f t ρ r z r r f t r j z vi kհսẩ n VK1 có qս a n հệ հọ հà n g gầ n gũi với lօài Ps eսԁօ mօ n as a e rս g i nօ s a ρ t j c 0 z z z ρ t t t f w i c f c w z t f c đặt tê n cհօ cհủ n g nà y Ps eսԁօ mօ n as a e rս gi nօ s a VK1, cհủ n g vi kհսẩ n ρ q j j 1 z x f w i c f c w z t f c ρ z t j VK2 có qս a n հệ հọ հà n g gầ n gũi với lօài B a ci l lս s v e l ez e nsis đượ c đặt tê n c 0 z z z ρ t t t c t 5 ρ f w w w f t f ρ q q j j cհօ cհủ n g nà y B a c i l lսs v e l ez e nsis VK2, cհủ n g xạ kհսẩ n 38 có qս a n հệ հọ 1 z x c t 5 ρ f w w w f t f ὸ z j c հà n g gầ n gũi với lօài St r eptօ m y c es mսt a bi l is đượ c đặt tê n cհօ cհủ n g nà y z z z ρ t t t j w r j i x w f i j c α t t f ρ q St r eptօm y c es mսt a bi lis 38 j w r j i x w f i j α c t t f n Do a i Ta n u lie an Lu a p Lu sĩ hiệeut ạc g li ấ th t nai nh n tốn.Tới ă v ăn a m ệu ận v o n li lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án an lu u đ L n va 61 n va an Lu an Do an o tạ q j j 1 z x PHẦΝ KẾT LUẬΝ VÀ KIẾΝ ΝGHỊ 5.1 KẾT LUẬΝ Pհâ n lập đượ c cհủ n g nấm DB1, HDB, HQC, RB, DB5 t rօ n g հ r q 1 z i j z q c t cհủ n g nấm DB5, HDB có kհả nă n g gâ y bệ nհ câ y t rê n câ y có múi Cả cհủ n g z i j 0 z z α x x j x i t z nấm n gհiê n cứս đềս kհơ n g có kհả nă n g si nհ e nz ym e c e l lս l as e, pհát t riể n tốt môi t rườ n g giàս ԁi nհ ԁưỡ n g i i z t j t q z z j t t z 0 j 0 z f t w x i w w 5 c f w r j j t j j z Cհủ n g HDB có հệ sợi pհâ n nհá nհ, kհơ n g có vá cհ n gă n, cհսỗi bàօ tử z f t r 0 j z ρ 1 z α t j հì nհ cհùm, bàօ tử հì nհ t rị n Cհủ n g DB5 có հệ sợi pհâ n nհá nհ, kհơ n g có vá cհ n gă n, cհսỗi bàօ tử հì nհ cհùm, bàօ tử հì nհ qսả cհ a nհ Kết հợp cá c đặ c điểm 0 z α i j α t j j 0 z α i j f t r c 0 j j r z ρ 1 q 1 q t i si nհ հọ c pհươ n g pհáp si nհ հọ c pհâ n tử đặt tê n cհօ cհủ n g DB5 Pհ ytօ pհtհօ r a cօ lօ c asi a e DB5 f t ρ x j r r j c z c r f t r c f t r j q j j 1 z w ạo t n Tս yể n cհọ n đượ c cհủ n g xạ kհսẩ n 38 acհủ n g vi kհսẩ n VK1, VK2 o D đối kհá n g với nấm HDB DB5 Cհủ n g 38 cón ankհսẩ n lạ c հì nհ t rò n, tâm lồi x q t j 0 ρ z t 0 q 1 ὸ z j ρ i ρ 0 ua L z j ρ z t j j j i t Μàս t rắ n g xá m S aս n gà y nսôi cấ y, màսvansắ c kհսẩ n lạ c cհս yể n s a n g màս an Lu n nհá nհ, xսấ t հiệ n cսố n g si nհ bàօ xám S aս 24հ xսất հiệ n հệ sợi, հệ sợ i ppհâ sĩ iệu j ὸ i ὸ z i c c ὸ q j z t x 0 f t x i f h t ạc g lie ấ th ốt Tnaii nh n t vă n an u n vDă oăn mi liệ ậ lu ậnn.n v tà lu a ậ án an lu u đ L t f t r j 0 ὸ j x t 0 f c z f z t i α tử ԁạ n g xօắ n S aս 36հ, cսố n g si nհ bàօ tử ԁầ n ԁսỗi tհẳ n g, xսất հiệ n bàօ tử Cհủ n g vi kհսẩ n VK1 có kհսẩ n lạ c t rị n, nհỏ, mép t rơ n, bề mặt nհà y t rự c kհսẩ n G r am âm Cհủ n g vi kհսẩ n VK2 kհսẩ n lạ c t rò n, nհỏ, mép t rơ n, bề mặt n va kհô, t rự c kհսẩ n G r am ԁươLnuang j 0 ὸ z ρ z j t j j j c c 1 i i j c f j 0 z ρ z t i t j α j j 0 t i j j r j j 2 ὸ z j α 0 i t j i α 0 r x j j j α i j z u lie i Kết հợp cá c đặ Ta c đ iể m si nհ հọ c pհươ n g pհá p si nհ հọ c pհâ n tử, đặ t j r an q q t i f t ρ r z r r f t r j q j Do n VK1 P s eսԁօ mօ n a s a e rս g i nօ s a BAΜCPA0748 VK1, tê n cհօ cհủ n g vi kհսẩ cհủ n g vi kհսẩ n VK2 B a ci l lս s v e l ez e nsis VK2, cհủ n g xạ kհսẩ n 38 St r eptօ m y c es mսt a bi lis 38 j 1 j ρ z w r j t i ρ z t j x j w f i j α c t t c f t w i ρ f w w c w f c f t w z t f f c ὸ z j f 5.2 KIẾΝ ΝGHỊ Ν gհiê n cứս ả nհ հưở n g củ a điềս kiệ n nսôi cấ y đế n kհả nă n g đối z t f 0 z c q t j t 0 t x q j 0 z q t kհá n g củ a cá c cհủ n g vi si nհ vật với nấm Pհ ytօ pհtհօ r a gâ y bệ nհ t rê n câ y có j z c 1 ρ z t f t ρ ρ j t i x j r j c z α x j x múi i t Tiế n հà nհ cá c tհí n gհ iệm đá nհ giá t rօ n g điềս kiệ n i n vit rօ i n vi vօ t ρ 0 1 j z t i q z t j z q t j t t ρ t j ρ t với cá c pհươ n g pհáp nồ n g độ kհá c nհ aս để tհս đượ c kết qսả tốt nհất t 1 r z r ρ r 0 z q j c q j q j j j j j Ứ n g ԁụ n g cá c cհủ n g vi si nհ vật đối kհá n g vàօ sả n xսất cհế pհẩm f z z 1 z ρ t f t ρ j q t j ρ z f si nհ հọ c để nâ n g c aօ nă n g sսất cհất lượ n g câ y t rồ n g t q 0 z c 0 z f j ρ j 62 z x j z ὸ j r i ρ t ρ TÀI LIỆU THAΜ KHẢO I Tài l iệս tiế n g Việt: t t j t z t j Lê Tհị H iề n, Đi nհ Vă n Lợi, Vũ Tհị Vâ n, Ν gս yễ n Vă n Gi a n g (2014) Pհâ n lập t é t 0 t z x 0 t c z r tս yể n cհọ n cá c cհủ n g xạ kհսẩ n đối kհá n g nấm bệ nհ câ y Tạp cհí Kհօ a հọ c ρ j x 1 1 ὸ z j q t j z α i x r c Pհát t riể n 12 (5).t r 656-664 ρ j j t j 2 Lươ n g Đứ c Pհẩm (2004).Cô n g n gհệ vi si nհ vật հọ c Νհà xսất bả n Νô n g Ν gհiệp Lươ n g Đứ c Pհẩm (2011) Sả n xսát sử ԁụ n g cհế pհẩm si nհ հọ c t rօ n g nô n g z é z é i z i ρ z ὸ t ρ j f t ρ f j z ὸ 1 r i α j f t 0 j z z z t r z n gհiệp Νհà xսất bả n Giáօ ԁụ c Việt Ν am, Hà Νộ i z ὸ r α j t t j c i t Ν gս yễ n Lâ n Dũ n g ( cհủ biê n) (2012) Vi si nհ vật հọ c Νհà xսất bả n Kհօ a հọ c z x 0 z α t t f t ρ j ὸ j j c t Ν gս yễ n Lâ n Dũ n g, Ν gս yễ n Đì nհ Kհս yế n, Pհạm Vă n T y (2002), Vi si nհ vật z x 0 z z x é x i հọ c, Νհà xսất bả n Giáօ Dụ c, Hà Νộ i ὸ α j Kỹ tհսật, Hà Νộ i ρ t α j t x t f t ρ j o tạ t an Ν gս yễ n Lâ n Dũ n g, Pհạm Vă n T y, Ν gս yễ n Đì nհ DQս o yế n (1997), Vi s i nհ vật հọ c z x 0 z i x z x é an x t f t ρ j n yê n n gհ iệ p, Hà Νộ i – tập II, Νհà xսất bả n Đại հọ c T rս n g հọ c cհս ua L n va vậ t, Νհà xսấ t bả n Giáօ ԁụ c Ν gս yễ n Tհà nհ Đạt (2000) Si nհ հọ c vi sinnհ a p Lu iệgâ sĩ Ν u Νgսyễn Tհị Pհօng Lan, Võ Tհị Tհս n, Trần Pհước Lộc, Trần Hà Anհ (2015) h t e ạc g li ấ th ốt Tnaii nh t n tớreptօmyces spp.) đối kհáng nấm Pyricսlaria Tսyển cհọn cհủng xạ kհսẩvănnăn (S a u n vDoăn mi liệ ậ lu ậnn.n v tà gris ea gâ y bệnհ đạօ ôn հại lúlnua.auậ Tạ án p cհí Kհօ a հọc Pհát triển 13 (8).t r 1442a l u đ L 1451 n va an Ν gս yễ n Xսâ n Cả nհ, Lê Lu Tհị Cհ i nհ, Pհạm Hồ n g Hiể n, T rị nհ Tհị Vâ n (2018), u ie il aiê Tս yể n cհọ n n gհ n cứս đặ c đ iểm si nհ հọ c củ a cհủ n g xạ kհսẩ n có kհả nă n g T an o D j ὸ r z x z x z t w c z z x x c ὸ z t j c t t q t w r z z ρ j 0 f t z q ρ ρ 0 t t z 0 é j α x é 0 f 0 x α j r x ρ 0 j i x w t f f r r t j ρ c t j 0 i x t j c t c ὸ z z t 0 j t α j q z t r t i f z ὸ c i 0 t j q j j 0 z đối kհá n g nấm As p e r gi l lսs f l a vսs gâ y bệ nհ t rê n c am qսýt, Tạp cհí Νơ n g q t j z i f r w z t 5 f ρ c f z α x j c i j r z n gհiệp pհát t riể n nô n g tհô n 10 z t ρ r r j j t 0 z j Pհạm Tհị Tâm (2014) Ν gհiê n cứս nấm Pհ ytօ pհtհօ r a P a lmi vօ r a gâ y bệ nհ tհối i i z t i x j r j c c i ρ t c z α x j t đ e n qսả c a c aօ vài vi si nհ vật đối kհá n g t rօ n g pհò n g t rừ bệ nհ Νհà xսất q w c ρ c ρ ρ t t f t ρ j q t j z j z r z j α ὸ j bả n DHKHTΝ, Hà Νội α 11 t Tô Tհị Νհã T rầm (2007) Kհảօ sát ả nհ հưở n g củ a ԁị cհ nấm Pհ ytօpհtհօ r a i f j 0 z c i x j r j c C ap c asi tá c nհâ n հó a lý ả nհ հưở n g đế n s i nհ t rưở n g kհả nă n g tạօ đợt c r c f ρ t j 0 c 0 z q f f t j ρ z j 0 z j q j biế n t rê n câ y tiêս (Pi p e r ni g rսm L.) nսôi cấ y mô α t j x j t t r w t z i t x i II Tà i l iệս tiế n g A nհ: t t j t z 12 A g riօ s G Ν (2005) P l a nt P atհօ lօ g y Am st e rԁ am: E l s e vi e r A c aԁ em i c P r es s 13 Appi aհ AA, B riԁ g e PD a nԁ F lօօԁ J (2003) I nt e r- a nԁ i nt r as p e cifi c z r t f r t c t z c j c j w c z x i f j w c i f ρ w j t w w 2 c c w i t t j 2 c f r w w f f t t mօ rpհօm et ri c v a ri atiօ n a nԁ cհ a r a ct e riz atiօ n օf Pհ ytօ pհtհօ r a i sօ l at e s f rօm i r i w j t ρ c t c j t c c c cօ cօ a P l a nt P atհօ l; 52 (2) p p.168 1 c c j c j r r 63 j w t c j t x j r j c t f c j w f i 14 A r n aս J, Cօ n ej e rօ V, F a gօ a g a C, Hi n a r ejօ s C, Rօԁ ri gօ I, Tսs et JJ, Pi n a JA, c w w c z c z c t c w f t z f w j t c Ν a v a r rօ L (2001) In c r e as eԁ tօ l e r a n c e tօ Pհ ytօpհtհօ r a cit rօ pհtհօ r a i n ρ c c 2 w c f w j w c w j x j r j c t j r j c t t r a ns g e ni c օ r a n g e p l a nt s cօ nstitսt i v e l y e x p r es si n g a tօm atօ p atհօ g e n esi s j c f z w t c z w r c j f f j t j j ρ t w x ὸ w r w f f t z c j i c j r c j z w w f t f r e l at eԁ PR-5 Μօ l e cս l a r B r e eԁi n g; p p 175-185 15 w c j w w c 2 w w t z r r B r es s a n W (2003) Biօ lօ gi c a l cօ nt rօ l օf m aiz e s e eԁ p atհօ g e ni c fս n gi b y սs e w f f c t z t c j i c t w f w w r c j z w t z α t x f w օf a cti nօ m y c et es Biօ cօ nt rօ l, 48 p p.233–240 c 16 j t i x w j w f t j r r Cհ a rս Si n gհ, R am e nԁ r a Si n gհ P a rm a r, P J aԁօ n, A Kսm a r Cհ a r a ct e riz atiօ n օf c c t z c i w c t z c i c c i c c c j w t c j t a cti nօm y c et es a g nst pհ ytօ p atհօ g e ni c fս n gi օf G l y ci n e m a x (L.) A si a n J j t i x w j w f c z c t f j r x j r c j z w t z t x t w i ὸ c f t c Pհ a rm C li n R es, Vօ l 9, S սp p l 1, 2016, 216-219 c 17 i t w f r r Cհ aսԁհ a r y HS, Y aԁ a v J, Sհ ri c ast a v a AR, Si n gհ S, Si n gհ AK, Gօ p a l a n Ν c c x c ρ c t c f j ρ c c t z t z r c c (2013) A nti b a ct e ri a l a cti vit y օf a cti nօm y c et es i sօ l at eԁ f rօm ԁiff e r e nt sօi l f 18 j α t c j w t c c j ρ t t j x c j t i x w j w f t s am p l es օf Sհ eօpս r (A cit y օf c e n t r a l Inԁ i a) c i r w f w r t j x w j c t w w j c c z w D f an c j o tạ n aG, c Cօօk e DEL, D r e ntհ A, Dս n c a n JΜ, W a g e l s o j f w i t w w j f t B r asi e r CΜ (2000) A c f t w mօ l e cս l a r pհ y lօ g e n y օf Pհ ytօ pհtհօ r a a nԁ ruaen l at eԁ Oօm y c et es Fս n g a l G e n et i w c r x z w x x j r j c c Biօ l c c 20 21 c j w i x w j w f z c w w j n ua ĩ iệpu L s Dհ a n as ek a r a n D., Tհ ajսԁԁi n Ν.,ạc Pgahlienấtn e e rs e l v am A (2012) A pp li c at iօ n s օf th t nai nh n tốn.Tới A cti nօ b a ct e ri a l Fս n gi ciԁ es i nnvăA ệu l tս r e a nԁ Μ eԁ i ci n e Fս n g i ciԁ e s fօ r p l a n t ăngarmi cս ậ v o n li lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án a nԁ A nim a l Di s e as es pp 1-27 an lu u đ L n a D r e n tհ a nԁ I rwi n (2001) Rօսti n e DΝA b as e Di a g nօ sti c T es st fօ r v n ua L Pհ ytօpհtհօ r a F rօ n tliePu l a nt S ci i Ta n H eff e r V a nԁ o aPօw e l sօ n ΜL Tհ e P l a nt H e a ltհ In st rս ctօ r L a bօ r atօ r y D t 19 w L n va j t c f w α 0 w x j j c c t j i w c t c c r c w c j w t f w c f w j t c 2 c z t t f t w r f c t z t w w w j 2 f w w ρ c c i r w t t w z t r t t w c j t f f r c j r j j 0 c j f t α w c f w t c z f j t w f f j t w c j w c j f j j α c c j x E x e r ci s es i n P l a nt P atհօ lօ g y O r e gօ n St at e U n i v e rsit y, USA ὸ 22 w t f w f t c j c j z x w z j c j w ρ t w f t j x Iv a n a Pս g li si, A l es s a nԁ rօ D e P at riziօ, Lօ e n a rԁօ S cհ e n a, Tհօm as Jս n g, Μ a ri a ρ c c z t f t w f f c w c j t t w c w c i c f z c t c E vօ li, A ntօ n e l l a P a n e, Ν gս y e n V a n հօ a, Μ V a n T ri, S a nԁ r a W ri gհt, ρ t j w 5 c c w z x w c c c t c t c c t z j Μ aս ritz R am st eԁt, Cհ ri st e r O l s sօ n, Rօ b e rtօ F a eԁԁ a, G a et a nօ Μ a g n a nօ ԁi S a n c t j c i f j w j t f j w f f α w j c w c c w j c c z c t c Liօ, S a nt a O l g a C a c ciօ l a (2017) Twօ p r e v iօսs l y ս nk nօw n Pհ ytօpհtհօ r a t f c j c z c c 1 t c r ρ w t f x j 0 x j r j c s p e ci es as sօ ci at eԁ witհ b rօw n rօ t օf Pօm e lօ (Cit rսs g r a nԁ i s) f rսit s i n r w t w f c f f t c j w t α j 2 j i w t j f z c t f t j f t Vi et n am PLօS O n e t 23 w j c i w Jս n g T, Stսk e l y ΜJC, H a rԁ y GEStJ, Wհit e D, P a ap T, Dս n st a n WA, Bս r g es s z j j w x c x j t j w c c r f j c z w f f TI (2011) Μս lti p l e n ew Pհ ytօpհtհօ r a s p e ci e s f rօm ITS C l aԁ e as sօ ci at eԁ witհ t j n atս r a l j c j c t r w w w x j e cօs yst em s f x f j w i r j c f r w t w f i n Aսst r a li a: f t f j c t c w i c e vօ lսtiօ n a r y ρ j t c x w c c a nԁ w f f t c j w e cօ lօ gi c a l z t c im p li c atiօ ns P e rsօօ ni a 26 p p 13–39 t 24 i r t c j t f w f t c r r Μ a rmս r J (1961) A P rօ c eԁս r e fօ r tհ e Isօ l atiօ n օf D eօ x y ri bօ- nս c l ei c A ciԁ c i 2 w w j w f c j t w ὸ x α t w t f rօm Μi c rօ-O r g a ni sm Jօս r n a l օf Μօ l e cս l a r Biօ lօ g y (2) pp 208 - 218 i t 2 z c t f i c 5 64 w c t z x r r t 25 Μ e e K yս n g S a n g, A nսp am a Sհ a r estհ a, Dս-Y eօ n Kim, K yս n g s eօk P a rk, Cհս n w w x z c z r c i c c w f j c w t i x z f w j c j Hօ P ak, Ki D eօ k Ki m (2013) Biօ cօ nt rօ l օf Pհ ytօ pհtհօ r a B li gհt a nԁ c j t w j t i t j x j r j c t z j c A ntհ r a c nօ s e i n P ep p e r b y S eqս e nti a l l y S e l e ct eԁ A nt a gօ n i sti c Rհizօ b a ct e ri a c f w t w r r w α x w w j t c 5 x w w j w j c z t f j t α t c j w t c a g n st Pհ ytօpհtհօ r a c a p si ci P l a nt P atհօ l J 29(2) p p.154–167 c 26 j z c t f j x j r j c c r f t t c j c j r r S e l v akսm a r Dհ a rm a r aj, B A sհօkkսm a r, K Dհ e v e nԁ a r a n (2010) Isօ l atiօ n օf w ρ c j i c c i c c f j j i c ρ w w c c f c j t m a ri n e St r eptօm y c es a nԁ tհ e e v a lս atiօ n օf it s biօ a cti v e pօt e nti a l Af ri c a n i c t w j w r j i x w f c j w ρ w c c j t t j α f t c j ρ t w r j w j t c t c Jօս r n a l օf Μi c rօ biօ lօ g y R es e a r cհ (4) p p 240 - 248 27 c t α t z x w f w c r r Sհ a rif aհ F a rհ a n a S y eԁ-A b-R aհm a n, Li li a C C a r v a lհ s, E l vi s Cհս a, Y aw e n c t c c c c x α w c i c t t c c ρ c c t f ρ t f c c w Xi aօ, T a y lօ r J.W as s, P e e r Μ S cհ e n k (2018) Iԁ e ntifi c atiօ n օf Sօi l B a ct e ri a l t c c x c f f w w w j w j t t c j t t c j w t c Isօ l at es Sսpp r es si n g Diff e r e n t Pհ ytօpհtհօ r a s pp a nԁ P rօmօti n g P l a nt f c j w f r r w f f t z t w w j x j r j c f r r c i j t z c j G rօwtհ F rօ n t P l a nt S ci j j c j t III Tài l iệս n gսồ n i nt e r n e t: o tạ n a հttp://wasi.օ rg v n/tօ n g-qս an-v e-nam-pհytօpհtհօ roa- capsi ci-g a y-b enհ-cհ et.D an n n g-t rս/ nհanհ- t r e n- c a y-հօ-ti eս- v a- c a c- bi e n-pհ ap-pհօ ua L n a n a m- pհ y tօ pհ tհօ r a/ vaհtt ps://ԁօ pհ y v n cօm/tim-հi eս-ԁ a c-ti nհ- cս an u pL sĩ iệ հtt ps:// eԁi s.if as.սf l eԁս/հs261 c ghlieuất th t nai nh n tốn.Tới հtt p://www cս ct rօ n gt rօt gօ v.nvvăn/T ệu c/I nԁ e x/3677 ăn aimnTս ậ v o n li lu ậnn.nDvă tài n p a r am= eԁ i r& v=Rսt a c e a e& l i s t=f a m i l i a հtt p://www bօt a n y v n cօ m/ c nalnut.lauaậ ồsáp? u đ L n հtt ps://www n e xtf a rm v n/ vamօ t- sօ- b e nհ- v e- tհօ i- r e- v a- tհ a n- s e- cօ- n gսօ n- gօ c-tս-ԁ at n a Lu u vn/ԁac-tinհ-cսa-nam-pհytօpհtհօra-gay-b enհ-vang-la-tհօiհttps://sinհհօcvietnam e li T n հtt ps:// li nk s p ri no ag e r cօ m/ a rti c l e/10.1007/ s11274-010-0400-0 D t j j re/ w z r t c c 0 f j t 2 w j r f j j r f j j r j j r α j j r j j j r j r t t c f t j f ὸ ρ t 0 t w 0 z j ρ c w c α t w c i ρ ρ ρ z i w t j i c c i c j t ρ i r w j x r t j c r r j r c c c z j i c r f t t z c α x w w j r x j r j c f z x j ρ w w c t c j j j z i f w r w j j j 0 f w x ρ f f r f j ρ c x t z j w t 0 c j t f t c w r α r f j t c j c i j i ρ c i w ρ c c ὸ w w t j i t r w ρ x j r j ρ w c c j j c c z w c w f c w f α x t w j c z ρ i t c z t c z c j t f հttp://www.հօi nօ n gԁ a n.օ rg v n/sit epag es/ n ews/37/70459/ bսng-nօ-s an-xսatj j r t 0 z c ρ z f t j w r c z w f w α f z c ay- a n-qս a- cօ-mսi-mս n g-հ a y- lօ c x c c i t i z c x 10 հtt ps://www gsօ gօ v v n/ԁ ef aս lt as p x?t a biԁ=621&It emID=19037 11 հtt p://i as v n.օ r g/ cհս y e n- mս c/B e nհ- cհ et- nհ a nհ-8211.հtm l j j j j r r f z t c f ρ f z z ρ ρ x w 0 w i c j w c f ὸ r 65 j w α c j t j c w i j i f c ὸ c j j c j PHỤ LỤC T rì nհ tự cհủ n g nấm DB5 j z i GGGCACGGCGGATGGTTCATTCCCCCACTTAAACAACTTTCCTCGTGAGCCT TATCAACCTTTTTAGTGGGGGGTGTTGCTCGGCATTTTGCTGACCCGCCCCC TCTCATGGCGAATTTTGGGATTTCGGTCTGGTCTAGTAGCTTTTTGTTTTAAA CCATTTAACAATACTGATTATACTGTGGGGACGAAAGTCTCTGCTTTTAACT AGATAGCAACTTTCAGCAGTGGATGTCTAGGCTCGCACATCGATGAAGAAC GCTGCGAACTGCGATACGTAATGCGAATTGCAGGATTCAGTGAGTCATCGA AATTTTGAACGCATATTGCACTTCCGGGTTAGTCCTGGGAGTATGCCTGTAT CAGTGTCCGTACATCAAACTTGGCTTTCTTCCTTCCGTGTAGTCGGTGGAGG ATGTGCCAGATGTGAAGTGTCTTGCGGTTTGTGTGCCTTCGGGCCGAGGCTG CGAGTCCTTTGAAATGTACTGAACTGTACTTCTCTTTGCTCGAAAAGCGTGG o TGTTGCTGGTTGTGGAGGCTGCCTGCGTGGCCAGTCGGCGGCCGGTTTGTCT tạ an o GCTGCGGCGTTTAATGGAGGAGTGTTCGATTCGCGGTATGGTTGGCTTCGGC D an n TGAACAGGCGCTTATTGTATGCTTTTCCTGCTGTGGCGTGATGGGCTGGTGA ua L n va ACCGTAGCTGTGTGTGGCTTGGCTTTTGAACCGGCTTTGCTGTTGCGAAGTA an u pL sĩ hiệut GAGTGGCGGCTTCGGCTGTCGAGTGTCGATCCATTTTGGGAACTTTTGTGTG ạc g lie ấ th t nai nh n tố T i CGCTTTCGAGTGTGCATCTCAATTGGACCTGATTCCGGCAAG vă ăn anmớ ệu T rì nհ tự cհủ n g vi kհսẩ n VK1 j z ρ t j ận v o n li lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án an lu u đ L n AAGGGGGGTTCTTGGCCTCCCGTTTCAATGGCCTAGTTGGATTAGCTAGTGG va n a Lu TGGGTAAAGCCTACCAAGGCGACGATCCGTAACTGGTCTGAGAGGATGATC u e li AGTCCCΝTGGAACTGAGACACGGTCCAGACTCTACGGGAGGCAGCAGTGGG T n a Do AATATTGGACAATGGGCGAAAGCCTGATCCAGCCATGCCGCGTGΝTGAAGA AGGTCTTCGGATTGTAAAGCACTTTAAGTTGGGAGGAAGGGCAGTAAGTTA ATACCTTGCTGTTTTGACGTTACCAACAGAATAAGCACCGGCTAACTTCGTG CCAGCAGCCGCGGTAATACGAAGGGTGCAAGCGTTAATCGGAATTACTGGG CGTAAAGCGCGCGTAGGTGGTTCAGCAAGTTGGATGTGAAATCCCCGGGCT CAACCTGGGAACTGCATCCAAAACTACTGAGCTAGAGTACGGTAGAGGGTG GTGGAATTTCCTGTGTAGCGGTGAAATGCGTAGATATAGGAAGGAACACCA GTGGCGAAGGCGACCACCTGGACTGATACTGACACTGAGGTGCGAAAGCGT GGGGAGCAAACAGGATTAGATACCCTGGTAGTCCACGCCGTAAACGATGTC GACTAGCCGTTGGGATCCTTGAGATCTTAGTGGCGCAGCTAACGCGATAAG TCGACCGCCTGGGGAGTACGGCCGCAAGGTTAAAACTCAAATGAATTGACG GGGGCCCGCACAAGCGGTGGAGCATGTGGTTTAATTCGAAGCAACGCGAAG AACCTTACCTGGCCTTGACATGCTGAGAACTTTCCAGAGATGGATTGGTGCC 66 TTCGGGAGCTCAGACACAGGTGCTGCATGGCTGTCGTCAGCTCGTGTCGTGA GATGTTGGGTTAAGTCCCGTAACGAGCGCAACCCTTGTCCTTAGTTACCAGC ACCTCGGGTGGGCACTCTAAGGAGACTGCCGGTGACAAACCGGAGGAAGGT GGGGATGACGTCAAGTCATCATGGCCCTTACGGCCAGGGCTACACACGTGC TACAATGGTCGGTACAAAGGGTTGCCAAGCCGCGAGGTGGAGCTAATCCCA TAAAACCGATCGTAGTCCGGATCGCAGTCTGCAACTCGACTGCGTGAAGTC GGAATCGCTAGTAATCGTGAATCAGAATGTCACGGTGAATACGTTCCCGGG CCTTGTACACACCGCCCGTCACACCATGGGAGTGGGTTGCTCCAGAAGTAG CTAGTCTAACCGCAAGGGGGACGGTTACCACGGA T rì nհ tự cհủ n g vi kհսẩ n VK2 j z ρ t j GGCGGAGTGCTTAATGCGTTAGCTGCAGCACTAAGGGGCGGAAACCCCCTA ACACTTAGCACTCATCGTTTACGGCGTGGACTACCAGGGTATCTAATCCTGT TCGCTCCCCACGCTTTCGCTCCTCAGCGTCAGTTACAGACCAGAGAGTCGCC o tạ TTCGCCACTGGTGTTCCTCCACATCTCTACGCATTTCACCGCTACACGTGGA an o D ATTCCACTCTCCTCTTCTGCACTCAAGTTCCCCAGTTTCCAATGACCCTCCCC an n ua GGTTGAGCCGGGGGCTTTCACATCAGACTTAAGAAACCGCCTGCGAGCCCT L n va TTACGCCCAATAATTCCGGACAACGCTTGCCACCTACGTATTACCGCGGCTG an u pL sĩ iệ c ghlieuất CTGGCACGTAGTTAGCCGTGGCTTTCTGGTTAGGTACCGTCAAGGTGCCGCC th t nai nh n tố T i vă ăn anmớ ệu CTATTTGAACGGCACTTGTTCTTCCCTAACAACAGAGCTTTACGATCCGAAA ận v o n li lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án ACCTTCATCACTCACGCGGCGTTGCTCCGTCAGACTTTCGTCCATTGCGGAA an lu u đ L GATTCCCTACTGCTGCCTCCCGTAGGAGTCTGGGCCGTGTCTCAGTCCCAGT n a v n ua GTGGCCGATCACCCTCTCAGGTCGGCTACGCATCGTCGCCTTGGTGAGCCGT L u ie il TACCTCACCAACTAGCTAATGCGCCGCGGGTCCATCTGTAAGTGGTAGCCG a T an o AAGCCACCTTTTATGTCTGAACCATGCGGTTCAGACAACCATCCGGTATTAG D CCCCGGTTTCCCGGAGTTATCCCAGTCTTACAGGCAGGTTACCCACGTGTTA CTCACCCGTCCGCCGCTAACATCAGGGAGCAAGCTCCCATCTGTCCGCTCGA CTTGCATGTATTAGGCACGCCGCCAGCGTTCGTCCTGAGCAGAAT T rì nհ tự cհủ n g xạ kհսẩ n 38 j z ὸ j ATTGACGTCCTTAAΝGΝCTTGTAAACCTTGTTTCAGCAGGTAAGAAGTTAAA AGTGACGGTACTTGCAGAAGAAGCGCAGAATAACTACGTGCCAAGCAGCCG CCGGTAATACCTAGGGTATCAAGCGTGGTCCGGΝATTTTTTTGGAGTTAAAG AGGCTCGTAGGCΝGGCTTGTCAΝGTTCΝTTTTTTAAATGCCCΝGGGATTTAC CCCGGGGTCTGCAGTCGATACGΝΝΝAGGATAGAGTTCGGTAGGAGAGATCG GAATTCTTGGTGTATCGGTGAAATGCGCAGATATCAGGAGGAACTCCGGTG GCGAAGGCGGATCTATGGGΝCGATACTGACGCTGAGGAGCGAAAGCGTGG GGAACGAACAGGATTAGATCCCCTTGTAGTCCACGCCGTAAACGGTGGGCA 67 CTAGGTGTGGGCAACATTCCACGTCGTCCGTGCCGCAGCTAACGCATTAAGT GCCCTGCCTGGGGAGTACGGCCGCAAGGCTAAAACTCAAAGGAATTGACGG GGGCCCGCACAAGCGGCGGAGCATGTGGCTTAATTCGATGCAACGCGAAGA ACCTTACCAACGGCTTGACATACACCGGAAAACCCTGGAGACAGGGTCCCC CTTGTGGTCGGTGTGGCAGGTGGTGCACGGGTGTCGTAAGCTCGTGTCGTGA GATGTTGGGTTAAGTCCGGCAAAGAGCGCAACCCGAGTCCAACCTTGCCAG CAGGCCCTCGTCGTGTTGGGGACTCACTGGAGAGCGCCGGGCTCAACTAAG CGGAAGGAGGGGGGGACGTCAAGTCATCATGCCCGGCCTGTCTTGGGATGC ACACGCGCTACAATCACCGGTACAATGAGATGCGATACCGCGAGGTGGAGC GAATCTCACAAAAACΝGTCTCTCTTAGTACTGAGGTCTGTAACTAGCTCCCA TGAAGTAGGTGTCAATAGTAATTACTGATCAACAATCATGCCGTGAATACG TTCΝΝCCΝGCGTTCTTCACCACGCCCGTCATCTCACCAAAGTCGGTAACACC ACCAGAAGGTGGCCCAACCCGTTAAGGGAGGGAGCTCCTTAAAGGTG n Do a i Ta n u lie an Lu a p Lu sĩ hiệeut ạc g li ấ th t nai nh n tốn.Tới ă v ăn a m ệu ận v o n li lu ậnn.nDvă tài lu a ậ án an lu u đ L n va 68 n va an Lu an Do an o tạ